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PRCTICA N05:
METODOLOGA
Pruebas bioqumicas para Staphylococcus y Streptococcus
1. Observar el tipo de hemolsis que se forma en las placas de agar sangre
2. Realiza la prueba de catalasa con una colonia de la placa de agar sangre (AS) y con
una del manitol salado (MS).
3. Para la prueba de coagulasa, en dos tubos con un mL de plasma cada uno, depositar
en uno 0,5 mL del cultivo de Staphylococcus aureus y en otro un mL de S.epidermidis.
Incubar 30 minutos a 37 C.
4. Prepara frotis de las colonias que han desarrollado en AS y en MS.
Fermentacin del manitol
Prueba de catalasa
RESULTADOS
Pruebas bioqumicas para Staphylococcus y Streptococcus:
Fermentacin de manitol
Hemlisis en agar sangre
Prueba de catalasa
Coagulacin del plasma
FERMENTACIN DE MANITOL
Imagen N01: medio de cultivo manitol salado, color rosado (manitol no fermentado)
Imagen N02: medio de cultivo manitol salado, color amarillo (manitol fermentado)
PRUEBA DE CATALASA
PRUEBA COAGULASA
Imagen N07: coagulasa negativa
DISCUSIONES:
AGAR MANITOL SALADO
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracin salina, en esta
prctica nosotros lo usamos para la diferenciacin entre estafilococos y estreptococos por
el cambio de color en el indicador de PH (rojo de fenol). Las bacterias que crecen en un
medio con alta concentracin de sal y fermentan el manitol, producen cidos, con lo que
se modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo. Los
estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no fermentar el manitol.
Los Staphylococus aureus hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante.
Los estafilococos coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja o
rosada.
PRUEBA HEMOLISIS DE SANGRE
Las colonias de S.aureus son grandes, lisas, enteras, presentan consistencia cremosa.
El gnero Streptococcus es exigente y por lo tanto debe ser cultivado en medios ricos que
le aporten los nutrientes necesarios, por ejemplo, agar sangre ovina. El efecto que tiene
los estreptococos sobre el agar sangre (hemlisis). Nos sirve para poder clasificar este
grupo de grmenes en:
hemolticos: son aquellos que producen una hemlisis total de los glbulos rojos,
observndose como un halo transparente alrededor de las colonias.
hemolticos: son aquellos que producen hemlisis parcial, la cual se observa como un
halo con tonalidad verdosa alrededor de las colonias.
Gamma hemolticos: son aquellos que no producen hemlisis sobre agar sangre
PRUEBA DE CATALASA
La enzima catalasa, desdobla el perxido de hidrogeno en agua y oxgeno. La reaccin se
manifiesta como desprendimiento de burbujas
Catalasa positivo
Catalasa negativo
Staphylococcus
Streptococcus
Micrococcus
Enterococcus
Planococcus
Aerococcus
Stomacoccus
Planococcus
PRUEBA DE COAGULASA
Permite separar S.aureus , que posee coagulasa, de las otras especies de estafilococos
que genricamente se denominan coagulasa negativos.El Sthaphylococcus aureus
produce una protena llamada coagulasa, capaz de aglutinar el plasma. El factor srico
reacciona con la coagulasa, activando el fibringeno y produciendo el coagulo.
S. aureus
Positiva
S. epidermidis
Negativa
CONCLUSIONES:
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BIBLIOGRAFA:
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