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PARTE I

INTRODUO

Os bonobos so, juntamente


com os chimpanzs comuns,
nossos parentes existentes mais
prximos. Aqui, uma fmea faz
alongamento.

e onde vieram os organismos que habitam a Terra? Por que existem tantos tipos
diferentes? Como vieram a ser aparentemente to bem planejados? Essas so as
indagaes fundamentais da biologia evolutiva. As respostas so encontradas no padro e
no mecanismo da evoluo. O padro a descendncia com modificaes dos ancestrais
comuns. O mecanismo primrio a seleo natural.
Nosso primeiro objetivo na Parte I (Captulos 1-4) apresentar o padro e o processo
da evoluo. No Captulo 1, exploramos um exemplo, a evoluo do HIV. No Captulo 2,
examinamos o padro da evoluo e a evidncia de ancestralidade comum. No Captulo
3, focalizamos o mecanismo da evoluo. A seleo natural o princpio organizador da
biologia evolutiva; sua simplicidade insere-se entre os encantos do assunto. No entanto, a
seleo natural amplamente mal interpretada. Sua compreenso exige que nos afastemos
de expresses como sobrevivncia do mais apto. No Captulo 4, abrangemos os mtodos
para reconstruo da histria evolutiva.
Nosso segundo objetivo expor os mtodos experimentais e analticos usados pelos
bilogos que estudam a evoluo. Esses mtodos constituem um tema destacado do princpio ao fim do texto. So enfatizados para ajudar os leitores a fazer perguntas, planejar
experimentos, analisar dados e revisar criticamente os artigos cientficos. Os exemplos detalhados que apresentamos esclarecem os conceitos gerais da biologia evolutiva e tambm
fornecem insight do modo como entendemos o que conhecemos.

1
Um caso para o pensamento
evolucionista: a compreenso do HIV

P
Prostitutas na zona do meretrcio
de Songachi, em Calcut, ndia,
aprendem com uma profissional
da rea da sade os benefcios de
usar preservativos. Em Songachi,
uma campanha agressiva para
educar as profissionais do sexo,
cafetinas e proxenetas a distribuir
preservativos e estimular seu
uso manteve a prevalncia de
HIV, entre as prostitutas, abaixo
de 12%. Em outras regies de
meretrcio, a prevalncia do HIV
elevou-se a mais de 50%
(Cohen, 2004).

or que estudar evoluo? Apesar de quase no o mencionar em sua obra Sobre a Origem das Espcies (1859), um dos motivos de Charles Darwin era que a compreenso
da evoluo pode ajudar nosso autoconhecimento. Darwin escreveu: A luz ser lanada
sobre a origem do homem e sua histria. Para Theodosius Dobzhansky (1973), um arquiteto da viso moderna da evoluo que apresentamos neste texto, a recompensa era
que a biologia evolutiva a base conceitual que sustenta todas as cincias biolgicas. Na
biologia, nada faz sentido, declarava ele, exceto luz da evoluo. Para alguns leitores,
no entanto, talvez o incentivo seja o de que uma disciplina de evoluo requisito para a
integralizao do seu curso.
Neste ponto, sugerimos ainda outra razo para estudar evoluo: os instrumentos e as
tcnicas de biologia evolutiva oferecem compreenso crucial das questes de vida e morte.
Para justificar essa afirmativa, analisamos a evoluo do vrus da imunodeficincia humana
(HIV), que causa a sndrome da imunodeficincia humana adquirida (AIDS).
Um olhar minucioso sobre esse importante problema contemporneo apresentar o
objetivo da anlise evolutiva. Ir exemplificar os tipos de indagaes que os bilogos da
evoluo fazem, mostrar como uma perspectiva evolucionista pode informar as pesquisas
de todas as cincias biolgicas e introduzir conceitos que exploraremos detalhadamente
em outra parte deste livro.

Scott Freeman & Jon C. Herron

O HIV constitui um estudo de caso obrigatrio, porque origina questes capazes de


influenciar a vida pessoal e profissional de todos os leitores. Esse vrus exemplifica aspectos
urgentes de sade pblica: um vrus emergente, que rapidamente desenvolve resistncia
a drogas e mortal. A AIDS j se qualifica como uma das epidemias mais devastadoras que
a nossa espcie sofreu.
As questes com que nos defrontamos so as seguintes:
Por que o tratamento precoce da AIDS, como o que utiliza a droga azidotimidina
(AZT), parece promissor quando usado pela primeira vez, mas se mostra ineficaz
com o decorrer do tempo?
Por que o HIV mata as pessoas?
Por que algumas pessoas so resistentes infeco, ou, to logo infectadas, progridem
para a doena?
De onde se origina o HIV?
Como um estudo de caso, o HIV
demonstrar como os bilogos
evolucionistas estudam a
adaptao e a diversidade.

Algumas dessas perguntas aparentemente no teriam relao com a biologia evolutiva.


No entanto, essa a cincia dedicada a compreender dois aspectos: (1) como as populaes
mudam, ao longo do tempo, segundo as modificaes do seu ambiente, e (2) como as novas
espcies vm a existir. Mais formalmente, os bilogos evolucionistas estudam a adaptao
e a diversidade. So esses, exatamente, os assuntos focalizados pelas nossas perguntas sobre
o HIV e a AIDS. Antes de consider-las, entretanto, precisamos aprofundar um pouco os
conhecimentos de biologia bsica.

1.1 A histria natural da epidemia de HIV/AIDS

A AIDS est entre as piores


epidemias da histria humana.

A pior epidemia da histria humana, a julgar pelo nmero de mortes, foi, provavelmente,
a de influenza, em 1918, que assolou o mundo em questo de meses, matando 50 a 100
milhes de pessoas (Johnson e Mueller, 2002). A segunda pior foi, provavelmente, a Peste
Negra, causada por um patgeno extremamente virulento, cuja identidade permanece
controversa (ver Raoult et al., 2000; Gilbert et al., 2004; Christakos e Olea, 2005; Duncan
e Scott, 2005). Devastou a Europa de 1347 a 1352, eliminando 30 a 50% da populao
aproximadamente 25 milhes de vidas (Derr, 2001). Surtos mais localizados, ao longo dos
300 anos seguintes, mataram mais alguns milhes. Tambm merece meno a epidemia de
varola do Novo Mundo, desencadeada em torno de 1520 pelos conquistadores europeus.
Sua mortalidade mais difcil de calcular, mas durante as dcadas subseqentes dizimou as
populaes americanas nativas ao longo dos dois continentes (Roberts, 1989; Snow, 1995;
Patterson e Runge, 2002).
A epidemia de AIDS, reconhecida em primeiro lugar pelos mdicos em 1981, ganhou
rapidamente um lugar entre essa companhia implacvel (UNAIDS, 2005). At o momento,
o HIV infectou mais de 65 milhes de pessoas. Dessas, 25 milhes j morreram das infeces oportunistas que caracterizam a AIDS. Entre as restantes, muitas esto gravemente
doentes, e numerosas, ainda, esto disseminando a doena. O Programa Conjunto das Naes Unidas sobre HIV/AIDS estimou que, em 2020, a epidemia da AIDS ter dizimado
um total de aproximadamente 90 milhes de vidas (UNAIDS, 2002a).
A Figura 1.1 apresenta um resumo do padro mundial da epidemia da AIDS. No mapa
da Figura 1.1a, as regies so coloridas diferentemente para mostrar a prevalncia da infeco do HIV entre os adultos, indicando-se tambm o nmero total de adultos e crianas
infectados pelo HIV e a proporo sexual entre os adultos infectados. Os histogramas da
Figura 1.1b documentam o crescimento da epidemia ao longo do tempo, em diferentes
partes do mundo.
Diariamente, cerca de 13.400 pessoas so infectadas, pela primeira vez, pelo HIV,
e 8.500 morrem de AIDS (UNAIDS, 2005). De acordo com a Organizao Mundial

Anlise Evolutiva

(a)
1,6 milho

28% F; 72% M

1,2 milho

870.000

27% F; 73% M

25% F; 75% M

510,000

47% F; 53% M

300.000

25,8 milhes
57% F; 43% M

32% F; 68% M

1,6 %
0,76 a 1%
0,51 a 0,75%
0,26 a 0,50%
0 a 0,25%

Nmero de adultos
infectados (em milhes)

26% F; 74% M

1,8 milho

7,2 %

(b)

7,4 milhes

50% F; 50% M

Prevalncia
em adultos
(% de infectados)

18% F; 82% M

74.000

Nmero de adultos
e crianas existentes
com HIV
Porcentagens de
mulheres e homens
adultos infectados

Amricas

Europa

frica

sia (Sul e Sudeste)

30
20
10
0
1982 1986 1990 1994 1998 2002

1982 1986 1990 1994 1998 2002

1982 1986 1990 1994 1998 2002

1982 1986 1990 1994 1998 2002

da Sade, a AIDS agora responsvel por cerca de 4,9% de todas as mortes mundiais
(WHO, 2004). A AIDS causa uma frao menor de mortes do que o cncer (12,5%),
infartos do miocrdio (12,6%), derrames (9,7%) e infeces das vias respiratrias inferiores (6,8%) causas comuns de bito entre os idosos, mas provoca mais mortes do
que a tuberculose (2,7%), malria (2,2%), acidentes automobilsticos (2,1%), homicdios
(1%) e guerras (0,3%).
Essa epidemia causou sua maior devastao, sem dvida, na regio Subsaariana da frica
(ver Piot et al., 2001), onde a prevalncia mdia do HIV entre adultos de 7,2% (UNAIDS, 2005). O foco pior a Suazilndia, com uma prevalncia de 38,8% em adultos, seguindo-se Botsuana (37,3%), Lesoto (28,9%) e Zimbbue (24,6%) (UNAIDS, 2004). No
Lesoto, um indivduo que completou 15 anos em 2000 tem a probabilidade de 74% de
contrair HIV aos 50 anos (UNAIDS, 2002a). Na Botsuana, a epidemia da AIDS diminuiu
a expectativa mdia de vida dos 65 anos para os 40, sendo esperado que se reduza ainda
mais (Figura 1.2).
Nos pases industrializados da Amrica do Norte e da Europa Ocidental, as estimativas
totais de infeco so muito inferiores s da frica Subsaariana (UNAIDS, 2004, 2005).
Na Europa Ocidental, a prevalncia da infeco por HIV em adultos de apenas 0,3%. No
Canad, a prevalncia em adultos tambm de 0,3%, sendo de 0,6% nos Estados Unidos.
Para certos grupos de risco, no entanto, as taxas de infeco rivalizam com as das regies
africanas mais devastadas. Entre os homens homossexuais, a taxa de infeco de 18% na
cidade de Nova York, 19% em Los Angeles, 24% em San Francisco e 40% em Baltimore
(CDC, 2005). Entre os usurios de drogas injetveis, a taxa de infeco de 18% em Chicago e em torno de 25% na cidade de Nova York (Piot et al., 2001).
O HIV estabelece uma nova infeco quando um lquido corporal abrigando o vrus,
geralmente sangue ou smen, transporta-o de uma pessoa infectada diretamente para uma
membrana mucosa ou para a corrente sangnea de uma pessoa no-infectada. O vrus
pode ser transmitido durante a relao heterossexual, homossexual ou oral, bem como por
agulhas contaminadas, transfuso com produtos sangneos contaminados, parto e lactao. O vrus dissemina-se por diferentes rotas em diversas regies. Na frica Subsaariana

Figura 1.1 A pandemia de


HIV/AIDS. (a) Esse mapa mostra a distribuio geogrfica das
infeces do HIV. Cada regio
colorida diferentemente, indicando
a prevalncia da infeco entre os
adultos. Alm disso, as regies esto
assinaladas pelo nmero total de
indivduos existentes com o HIV e a
proporo sexual entre os adultos
infectados. Mais de trs quintos
da populao infectada pelo HIV
vivem na frica Subsaariana; outro
quinto vive no sul e no sudeste da
sia. Dados de UNAIDS (2005).
(b) Esses histogramas ilustram o
crescimento no nmero de adultos
existentes com HIV, desde que a
pandemia comeou, no incio da
dcada de 1980. Redesenhado de
WHO (2004). F = sexo feminino; M
= sexo masculino.

70
60

Anos

720.000

50
40
30
1980- 1985- 1990- 1995- 2000- 20051985 1990 1995 2000 2005 2010

Perodo
Figura 1.2 Expectativa de vida
na Botsuana. Esse grfico mostra
a expectativa de vida estimada ao
nascimento, para indivduos nascidos entre 1980 e 2000, e a expectativa de vida projetada para indivduos nascidos entre 2000 e 2010.
O declnio aps 1990 devido
epidemia da AIDS. Redesenhado da
Figura 12, em UNAIDS (2004).

Scott Freeman & Jon C. Herron

100
90
80
70
60

91 92 93 94 95 96 97 98
Ano

15
12
9
6
3
0

80

90

60

70

40

50

20

92 93 94 95 96 97 98
Ano

HIV-positivo (%)

Figura 1.4 Taxas de novo diagnstico de HIV e outras doenas


sexualmente transmissveis, entre
homens que tm relaes sexuais
com outros homens, em Londres.
Este grfico documenta os recentes
aumentos na incidncia de gonorria e sfilis, bem como um aumento
na taxa de novos diagnsticos de
HIV, entre homens que tm relaes sexuais com outros homens,
em Londres. Fonte: Macdonald et
al. (2004).

(b) Prostitutas da Costa do Marfim

(a) Recrutas da Tailndia


HIV-positivo (%)

Figura 1.3 Preveno de HIV/


AIDS bem-sucedida. Estes grficos registram o sucesso dos programas de preveno do HIV na (a)
Tailndia e (b) Costa do Marfim.
medida que o uso de preservativos
aumentou, a incidncia da infeco
do HIV diminuiu. Desenhado a partir de dados de Nelson et al. (2002)
e Ghys et al. (2002).

e na ndia, a relao heterossexual foi o primeiro modo de transmisso (Piot et al., 2001;
Schmid et al., 2004; Lopman et al., 2005 mas veja tambm Gisselquist et al., 2002, 2004;
Brody e Potterat, 2005). Na China, o vrus disseminou-se inicialmente entre os usurios de
drogas injetveis, depois entre os doadores de sangue cujo plasma era coletado de maneira
insegura e finalmente entre os parceiros de sexo heterossexual (Kaufman e Jing, 2002).
Nos Estados Unidos e na Europa Ocidental, a relao homossexual e a contaminao de
agulhas entre os usurios de drogas injetveis foram as vias de transmisso mais comuns,
embora a relao heterossexual venha desempenhando um papel crescente nessa transmisso (UNAIDS, 2005).
Os programas para deter a disseminao do HIV alcanaram sucesso (Figura 1.3). Depois que a epidemia de AIDS chegou Tailndia, no fim da dcada de 1980, e comeou
a acelerar no incio da dcada seguinte, o Ministrio da Sade lanou uma campanha
para incentivar os jovens a reduzir as prticas sexuais de risco e usar preservativos (Nelson
et al., 2002). Em menos de 10 anos, a incidncia da infeco do HIV entre os recrutas
militares caiu de mais de 11% a menos de 3%, concomitantemente com um aumento
no uso de preservativos durante as visitas s prostitutas (e uma diminuio na freqncia
dessas visitas). Um programa de educao para o sexo saudvel, especfico para as prostitutas, na Costa do Marfim, contribuiu para uma queda dramtica semelhante nas taxas
de infeco do HIV, mais uma vez coincidente com o aumento no uso de preservativos
(Ghys et al., 2002).

Uso de preservativos (%)

Uma infeco do HIV pode ser


adquirida somente de algum que
j a tenha.

Uso de preservativos (%)

30

No entanto, no h espao para a complacncia. O grfico da Figura 1.4 mostra que,


em torno do ano 2000, a taxa de novas infeces do HIV comeou a aumentar, paralelamente s taxas de infeco de outras doenas transmissveis sexualmente, entre os homens
que mantinham relaes sexuais com outros homens, em Londres. O mesmo fato est
acontecendo em San Francisco e outros locais (Kellogg, McFarland e Katz, 1999; Hamers e
Downs, 2004; Giuliani et al., 2005). Parece que a introduo de terapias com drogas de eficcia de longo prazo, que para alguns indivduos transformou o HIV em uma doena crnica manejvel, pelo menos temporariamente, tambm pode ter estimulado um aumento
do comportamento sexual de risco (Kats et al., 2002; Chen et al., 2002; Crepaz, Hart e
Marks, 2004). Uma causa adicional para preocupao o abuso cada vez mais disseminado
de metanfetamina, que est associado ao comportamento de risco e maior probabilidade
de contrair o HIV (Buchacz et al., 2005).
2.500
2.000
Taxa por 100.000 homens que
tm relaes sexuais com homens

Gonorria

1.500
Novo diagnstico de HIV

1.000
500

Sfilis

0
1997 1998 1999 2000 2001 2002

Ano

Anlise Evolutiva

O que o HIV?
Como todos os vrus, o HIV um parasita intracelular que no consegue se reproduzir por
sua prpria conta. O HIV invade tipos especficos de clulas do sistema imune humano e
utiliza a energia e o maquinrio enzimtico dessas clulas para se autoduplicar, matando,
nesse processo, as clulas hospedeiras.
A Figura 1.5 resume, com algum detalhe, o ciclo vital do HIV, que compreende uma
fase extracelular e uma intracelular. Durante a fase extracelular, ou infecciosa, o vrus passa
de uma clula hospedeira para outra, podendo ser transmitido de um organismo hospedeiro para outro. A forma extracelular de um vrus chamada vrion ou partcula viral.
Durante a fase intracelular, ou parastica, o vrus se duplica.
O HIV inicia sua fase de duplicao prendendo-se a duas protenas da superfcie de uma
clula hospedeira. Aps aderir primeiramente CD4, encontrada na superfcie de certas
clulas do sistema imune, o HIV fixa-se segunda protena, denominada co-receptora, que
fusiona o envelope do vrion com a membrana celular da hospedeira e extravasa o contedo do vrion no interior da clula. Esse contedo inclui o genoma viral diplide (duas
cpias de uma molcula de RNA de fita simples) e trs protenas: transcriptase reversa, que
transcreve o genoma de RNA do vrus em DNA; a integrase, que encadeia o genoma de
DNA no genoma da clula hospedeira, e a protease, que desempenha um papel na produo de novas protenas virais.
Vrion do HIV
Transcriptase
reversa

O HIV um parasita que devasta


as clulas do sistema imune
humano.

Os vrions do HIV penetram nas


clulas hospedeiras por meio
de ligao s protenas de sua
superfcie e, a seguir, usam o
prprio maquinrio dessas clulas
para produzir novos vrions.

Genoma de RNA (duas cpias)


gp120 (protena de superfcie)
gp 41 (protena de ancoragem para gp120)

Integrase
1) Forma extracelular do HIV, conhecida como
vrion, encontra uma clula hospedeira

1
Protease

2) Protena gp120 do HIV liga-se CD4 e


co-receptora da clula hospedeira

2
3

Co-receptora
CD4

RNA do HIV

Protena do HIV

3) Genoma de RNA do HIV, transcriptase


reversa, integrase e protease entram na
clula hospedeira
4) Transcriptase reversa sintetiza o DNA do
HIV, a partir do molde de RNA do HIV

DNA do HIV
5

DNA da clula
hospedeira

DNA do HIV
6

mRNA do HIV
7

Ncleo da clula
hospedeira

8
9

Clula hospedeira

10

5) Integrase encadeia o DNA do HIV com o


genoma do hospedeiro
6) DNA do HIV transcrito em mRNA
(RNA mensageiro) do HIV, pela
RNA-polimerase da clula hospedeira
7) mRNA do HIV traduzido em protenas
precursoras do HIV, pelos ribossomos da
clula hospedeira
8) Protease cliva as precursoras em protenas
virais maduras
9) Nova gerao de vrions se agrupa no
interior da clula hospedeira
10) Novos vrions brotam da membrana da
clula hospedeira

Figura 1.5 O ciclo vital do HIV. Um vrion de HIV (1) invade uma clula hospedeira mediante ligao a duas protenas da superfcie celular
(2), possibilitando que o vrion extravase seu contedo no interior da clula (3). No interior da clula hospedeira, a transcriptase reversa do HIV
faz uma cpia de DNA do genoma viral (4). A integrase do HIV insere essa cpia de DNA no genoma da clula hospedeira (5). A RNA-polimerase da clula hospedeira transcreve o genoma viral em mRNA (6), e os ribossomos da clula hospedeira traduzem o mRNA viral em protenas
precursoras (7). A protease do HIV cliva as precursoras, produzindo protenas virais maduras (8). Novos vrions agrupam-se no citoplasma da
clula hospedeira (9) e depois brotam da membrana da clula hospedeira (10).

Scott Freeman & Jon C. Herron

Observe que no HIV, assim como em outros retrovrus, o fluxo da informao gentica diferente do que ocorre em clulas e vrus com genomas de DNA. Nos retrovrus,
a informao gentica no segue a direo conhecida do DNA para o mRNA e desse
para as protenas. Ao contrrio, a informao origina-se do RNA para o DNA, depois
para o mRNA e desse para as protenas. Foi essa primeira etapa, caracterizando um fluxo
invertido da informao, que inspirou o prefixo retro, no retrovrus, e o termo reversa, na
transcriptase reversa.
Depois que o genoma do HIV foi inserido nos cromossomos da clula hospedeira, a
RNA-polimerase dessa clula transcreve o genoma viral em mRNA, e os seus ribossomos sintetizam as protenas virais. Os novos vrions agrupam-se no citoplasma da clula
hospedeira, brotam da membrana celular e ingressam na corrente sangnea, onde podem
encontrar outra clula do mesmo hospedeiro para infectar ou ser transmitidos a um novo
hospedeiro.
Um aspecto notvel do ciclo vital do HIV que o vrus usa o maquinrio enzimtico
da clula hospedeira as polimerases, os ribossomos e os RNAs transportadores (tRNAs)
em quase todas as etapas. Por isso, o HIV e as doenas virais em geral so to difceis de
tratar. praticamente certo que as drogas que interrompem o ciclo vital do vrus tambm
interferem nas funes enzimticas da clula hospedeira, causando, portanto, efeitos colaterais debilitantes.

Como o HIV causa a AIDS?


Apesar de um quarto de sculo de pesquisas intensas, o mecanismo pelo qual a infeco do HIV conduz deficincia imune ainda no est completamente compreendido
(Brenchley et al., 2006; Grossman et al., 2006). A verso resumida esta: o HIV parasita as
clulas do sistema imune, especificamente as clulas T auxiliares. Aps uma longa batalha
contra o vrus, o suprimento de clulas T auxiliares do sistema imune fortemente reduzido. Uma vez que as clulas T auxiliares desempenham um papel crtico na resposta aos
patgenos invasores (Figura 1.6), o hospedeiro torna-se vulnervel a diferentes infeces
secundrias.
Figura 1.6 Como o sistema imune luta contra uma infeco viral. As clulas dendrticas (em preto) captam o vrus e
apresentam fragmentos de suas protenas s clulas T auxiliares
virgens*. To logo ativada por um fragmento da protena viral
que se adapta ao seu receptor de clula T, essa clula T auxiliar
divide-se, produzindo clulas de memria (em laranja) e clulas
efetoras (em branco). As clulas T auxiliares de memria no
participam da presente batalha, mas permanecem prontas a
desencadear uma reao rpida quando o mesmo vrus invadir
novamente o organismo. As clulas T auxiliares efetoras juntamse luta presente. Em parte, pela liberao de molculas de
sinalizao denominadas quimocinas, estimulam as clulas B a
amadurecerem em plasmcitos, que produzem os anticorpos
que se ligam ao vrus. De outra parte, tambm estimulam os macrfagos a ingerir as clulas infectadas e ajudar a ativar as clulas
T citotxicas virgens. Essas clulas, quando ativadas, dividem-se e
produzem clulas de memria e clulas efetoras. As clulas T citotxicas efetoras identificam e matam as clulas infectadas pelo
vrus invasor. A resposta imune mantida sob o controle de clulas T reguladoras. Os dsticos em laranja identificam protenas
de superfcie celular, das quais algumas so utilizadas pelo HIV
para ingressar nas clulas. Modificado de NIAID (2003).
*

Clulas T auxiliares
de memria
Clula dendrtica
Vrus

Clula T
auxiliar virgem

CD4
CCR5

Anticorpos

Plasmcitos

CD4
CCR5

CD4
CXCR4

Clula B
(+)

(-)
Clula T
reguladora

Receptor de clula T

Clulas T
CD4 auxiliares
CCR5 efetoras

CD4
CCR5

Macrfago

(+)

Linfocinas

(+)

CD4
CCR5
CD8

CD4
CCR5

Clula T
(-) citotxica
virgem
Clulas T
CD4
CCR5
citotxicas
efetoras

Clula
infectada
CD8

Clulas T
citotxicas
de memria
CD8

N. de T. As clulas T auxiliares virgens so clulas T auxiliares maduras que saram do timo, mas ainda no encontraram seu antgeno especfico (em ingls, naive helper T cells). Fonte: Parham, P. O sistema imune. Porto Alegre:
Artmed, 2001, p. G:4.

Anlise Evolutiva

As evidncias da complexidade secreta que se oculta atrs dessa verso resumida provm
de um estudo de Guido Silvestri e colaboradores (2005). Esses pesquisadores usaram o
SIVsm como um modelo para o HIV. O SIVsm (de simian immunodeficiency virus in sooty
mangabey) um vrus da imunodeficincia simiana, relacionado ao HIV, mas infecta maca*
cos. O hospedeiro natural do SIVsm, o mangabei fuliginoso , tolera a infeco do SIVsm
**
sem ficar doente. Os macacos resos infectados com SIVsm, entretanto, desenvolvem tipicamente a AIDS. Silvestri e colaboradores infectaram trs mangabeis fuliginosos e trs
macacos resos com SIVsm de mesma origem e depois monitoraram a luta entre o vrus e
os sistemas imunes dos hospedeiros.
O vrus experimentou altos nveis de replicao nos seis hospedeiros. Dois macacos resos mostraram ativao imune cronicamente alta, evidenciada pela proliferao abundante
de clulas T, mas nenhum dos mangabeis fuliginosos apresentou tal ativao. Paradoxalmente, foram esses macacos resos os nicos cujos sistemas imunes responderam mais
agressivamente infeco que desenvolveram AIDS. Parece que a prpria resposta imune
do hospedeiro contribui para o desenvolvimento da imunodeficincia.
Em harmonia com essa concluso, Paolo Rizzardi e colaboradores (2002) descobriram,
em um pequeno acompanhamento clnico, que pacientes humanos com HIV, tratados com
drogas anti-retrovirais e ciclosporina imunossupressora, mantinham contagens de clulas T
auxiliares superiores s de pacientes-controle tratados apenas com drogas anti-retrovirais.
A fim de decifrar esses resultados, precisamos examinar o ciclo vital das clulas T. Essas
clulas originam-se de clulas-tronco da medula ssea (Figura 1.7a), que geram precursoras que maturam em clulas T virgens, no timo. As clulas T virgens so ativadas nos linfonodos. Uma clula T ativada sofre um surto proliferativo, produzindo clulas T efetoras
e de memria, que circulam no sangue e penetram nos tecidos. Grande parte das clulas
de memria do organismo reside no tecido linfide associado s membranas mucosas que
revestem o nariz, a boca, os pulmes e especialmente o intestino.
As clulas T virgens e as clulas T de memria tm vida longa (Figura 1.7b), enquanto as
clulas T efetoras, que participam ativamente da luta contra os invasores, so de vida curta
(Moulton e Farber, 2006). Alm disso, qualquer linhagem dada de clulas T tem uma capacidade finita de replicao capacidade que reduzida a cada diviso celular. Isso significa
que cada surto de replicao dentro de uma linhagem de clulas T aproxima-a da exaus(a)
As clulas-tronco
hematopoiticas da medula
ssea geram precursoras...

... que se deslocam para o


timo, onde so maturadas
em clulas T virgens

(b)
Resposta imune
primria

As clulas T
virgens so ativadas
nos linfonodos.

As clulas T efetoras e de
memria circulam no
sangue e em vrios tecidos
corporais, especialmente
nos tecidos linfides
associados ao intestino
e outras mucosas.

Resposta imune
secundria

Clulas T
efetoras

Clulas T de
memria

Clulas T
virgens

Timo

Figura 1.7 O ciclo vital das clulas T. (a) As clulas T origiAs clulas T de memria podem nam-se de clulas-tronco da medula ssea, maturam no timo e so
ativadas nos linfonodos. (b) As clulas T virgens e de memria tm
ser ativadas em qualquer local
onde encontrem seus antgenos. vida longa; as clulas T efetoras, vida curta. Uma dada linhagem de
clulas T tem capacidade finita de replicao. Modificada de Grossman et al. (2002).
*
**

N. de T. Tambm denominado mangabey fuliginoso.


N. de T. Tambm denominados macacos rhesus.

10

Scott Freeman & Jon C. Herron

Contagem de clulas T CD4


(porcentagem do valor pr-infeco)

Produo viral
(cpias de RNA do HIV por ml de plasma)

Fase:
106

Aguda
+++
++++

Crnica
++++ +++

++

AIDS
+

Seletividade celular marcante

105
104
103
102
100
80
60

Circulantes no sangue
Limiar para o
incio da AIDS
~ 200 clulas
por mm3

40
20
0

Em tecidos linfides do
intestino e de outras mucosas

Ativao imune
(porcentagem do valor mximo)

100
80
60
40
20
+++
0 ++++
0
6
12
Semanas

Capacidade regenerativa do sistema imune


+++
+++
++
+
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Anos
Tempo desde a infeco

Figura 1.8 Padro geral da progresso de uma infeco de HIV


no-tratada. Uma infeco de HIV no-tratada tem, tipicamente,
trs fases: uma fase aguda, em que o hospedeiro mostra os sintomas
gerais de uma infeco viral; uma fase crnica, em que o hospedeiro
amplamente assintomtico, e uma fase de AIDS, em que o sistema
imune do hospedeiro entra em colapso, deixando-o vulnervel a
infeces oportunistas. A produo viral (grfico superior) projetase durante a fase aguda, depois cai, quando o hospedeiro mobiliza
uma resposta imune. No entanto, essa resposta no consegue deter
a replicao viral e, durante o fim da fase crnica e na fase de AIDS,
a produo viral eleva-se novamente. Na fase adiantada da infeco,
freqentemente a populao viral desenvolve a capacidade de infectar uma maior variedade de clulas hospedeiras. As contagens de
clulas T CD4 do paciente (grfico central) diminuem durante a fase
aguda, recuperando-se um pouco, posteriormente. Durante as fases
crnica e de AIDS, essas contagens caem de novo. O sistema imune
do hospedeiro permanece extremamente ativo (grfico inferior) do
princpio ao fim. Isso ajuda a combater o vrus, mas tambm fornece
clulas em que o vrus se reproduz e, ao final, exaure a capacidade
do sistema imune para se regenerar. Segundo Bartlett e Moore
(1998), Brenchley et al. (2006), Grossman et al. (2006).

to. Como veremos em breve, esses padres ajudam a explicar


como a manuteno da ativao imune durante a infeco do
HIV pode, em ltima anlise, diminuir o suprimento de clulas
T auxiliares do organismo e acarretar o colapso das defesas do
hospedeiro.
Uma infeco de HIV no-tratada mostra vrias fases, nas
quais a perda das clulas T auxiliares acontece em diferentes
velocidades e parece ser dirigida por mecanismos diversos
(Douek et al., 2003; Derdeyn e Silvestri, 2005; Brenchley et
al., 2006; Grossman et al., 2006). Os grficos da Figura 1.8 rastreiam a produo viral (superior), as contagens de clulas T
auxiliares (ao centro) e o nvel de ativao imune (inferior)
em um hospedeiro tpico, enquanto sua infeco progride ao
longo das fases aguda, crnica e de AIDS terminal.
Na fase aguda ou inicial, os vrions de HIV penetram no
organismo do hospedeiro e comeam a se replicar. Como foi
mostrado na Figura 1.5 (pgina 7), o HIV ganha acesso a uma
clula hospedeira primeiramente prendendo-se protena de
superfcie celular CD4, depois ligando-se a uma co-receptora.
Voltando Figura 1.6, observe que a presena de CD4 e outras protenas de superfcie celular, em vrias clulas do sistema
imune, est indicada em cor laranja. A co-receptora usada pela
maioria das linhagens de HIV responsveis por novas infeces a CCR5. Assim, essas linhagens virais infectam clulas
dendrticas, macrfagos, clulas T reguladoras e, especialmente,
clulas T auxiliares efetoras e de memria.
O HIV reproduz-se explosivamente, levando a concentrao sangnea de vrions a se elevar abruptamente. Ao mesmo
tempo, as concentraes de clulas T CD4 caem rapidamente,
em grande parte porque o HIV as mata, enquanto se replica.
O golpe mais implacvel incide sobre as clulas T auxiliares
de memria, nos tecidos linfides do intestino (Guadalupe et
al., 2003; Brenchley et al., 2004; Mehandru et al., 2004). Uma
vez que o intestino extenso e vulnervel penetrao de
patgenos, a perda dessas clulas T um grave golpe s defesas
corporais.
A fase aguda termina quando a replicao viral se torna mais
lenta e a concentrao sangnea de vrions diminui. Uma razo para isso talvez seja a de que o vrus simplesmente esgota
a totalidade das clulas do hospedeiro que ele pode invadir
facilmente. Entretanto, alm disso, o sistema imune mobilizase contra a infeco, e as clulas T citotxicas comeam a se
direcionar para as clulas do hospedeiro infectadas pelo HIV.
Assim, as contagens de clulas T CD4 do hospedeiro recuperam-se um pouco.
O HIV foi desacelerado, mas no suprimido. Quando comea a fase crnica, o sistema imune esfora-se para recuperarse de suas perdas iniciais, ao mesmo tempo em que continua
a lutar contra o vrus. Do princpio ao fim da fase crnica,
o sistema imune permanece muito ativo, por razes que ainda no so totalmente compreendidas. Em parte, essa ativao
crnica devida ao esforo contnuo para controlar a infeco
do HIV. As causas adicionais podem incluir a estimulao pelas

Anlise Evolutiva

protenas codificadas pelo vrus, a destruio de clulas T reguladoras pelo vrus (OswaldRichter et al., 2004) e a necessidade de combater outros patgenos que se introduzem
furtivamente, aps o enfraquecimento das defesas do intestino.
O estado cronicamente ativado do sistema imune refora alguns aspectos da resposta do
hospedeiro ao HIV. Todavia, produz tambm um suprimento constante de clulas T CD4
ativadas em que o vrus pode se reproduzir, bem como consome o suprimento de clulas
T auxiliares virgens e de memria do hospedeiro, mediante estimulao para sua diviso e
diferenciao em clulas efetoras de vida curta (Deeks e Walker, 2004; Garber et al., 2004).
A substituio de clulas T auxiliares perdidas depende, em ltima anlise, da produo de
novas clulas T virgens pelo timo. No entanto, a produo tmica diminui com a idade e
prejudicada pela infeco do HIV, que, alis, tambm danifica a medula ssea e os linfonodos. medida que a luta antiviral avana, a capacidade do sistema imune para se regenerar
constantemente se desgasta. A produo viral aumenta novamente, e as contagens de clulas T CD4 caem. A fase crnica termina quando a concentrao de clulas T auxiliares no
sangue reduz-se a cerca de 200 clulas por milmetro cbico.
Com to poucas clulas T auxiliares, o sistema imune no consegue mais funcionar. O
paciente desenvolve a AIDS, sndrome caracterizada por infeces oportunistas de bactrias e fungos que raramente causam problemas s pessoas com sistemas imunes fortes. Na
ausncia de drogas teraputicas anti-HIV eficazes, espera-se normalmente que um indivduo infectado pelo HIV que comeou a mostrar sintomas de AIDS possa viver mais dois
ou trs anos.
Tendo abrangido a biologia bsica viral, estamos aptos a examinar as questes relativas
evoluo do HIV. A primeira questo frustrou, por muito tempo, todos os que se envolveram na luta contra a epidemia: por que era to difcil produzir drogas capazes de combater
o HIV? Certamente no era por falta de tentativas; as empresas governamentais e privadas
investiram centenas de milhes de dlares nas pesquisas da AIDS e no desenvolvimento de
drogas. A trajetria da AZT, uma das primeiras drogas anti-AIDS, veio a se tornar caracterstica. No incio, a AZT pareceu promissora, mas finalmente mostrou-se decepcionante.
Para explicar a razo disso, precisamos apresentar a evoluo por seleo natural.

11

A AIDS comea quando a infeco


do HIV progrediu a tal ponto que
o sistema imune do hospedeiro
no funciona adequadamente.

1.2 Por que a AZT funciona em curto prazo,


mas falha em longo prazo?
A fim de combater as infeces virais, os pesquisadores procuram drogas capazes de inibir
as enzimas essenciais aos vrus. Por exemplo, uma droga que bloqueia a transcrio reversa
deve matar os retrovrus, com efeitos colaterais mnimos. Essa a base racional da azidotimidina, ou AZT.
A Figura 1.9 mostra como funciona a transcrio reversa. A transcriptase reversa do
HIV usa o RNA viral como molde para construir uma fita de DNA complementar. A

RNA

DNA

U
A

A
T

U
A

OH

Transcriptase
Reversa

G
A

Nucleotdeos

OH
OH

OH
OH

OH

Trifosfato de AZT
OH
OH

N3

Figura 1.9 Como a AZT bloqueia a transcriptase reversa.


A enzima transcriptase reversa do
HIV usa os nucleotdeos da clula
hospedeira para construir uma fita
de DNA complementar fita de
RNA do vrus. A AZT mimetiza suficientemente bem um nucleotdeo
normal para iludir a transcriptase reversa, mas carece do stio de ligao
para o prximo nucleotdeo da fita.

12

Scott Freeman & Jon C. Herron

Timidina
OH

Trifosfato de AZT
N3

Resistncia dos vrions (% de viabilidade relativa em presena de AZT)

Figura 1.10 Timidina versus AZT.

Paciente 1
Meses de
100
tratamento

20

11
2
50

Paciente 2
Meses de
100
tratamento
16
1

11

50

0
0,001 0,01 0,1

10

Concentrao
de AZT (MM)
Figura 1.11 As populaes de
HIV desenvolvem resistncia
AZT nos pacientes individuais.
medida que o tratamento continuava, nesses dois pacientes, eram
necessrias concentrao mais altas
de AZT para restringir a replicao
dos vrus amostrados a partir do
sangue dos pacientes. Redesenhado
de Larder et al. (1989).

transcriptase reversa produz o DNA mediante uso de elementos construtores os nucleotdeos roubados da clula hospedeira.
A mesma figura tambm mostra como a AZT faz cessar a transcrio reversa. Observe
a timidina no nome da AZT (azidotimidina): em sua estrutura qumica, a AZT similar ao
nucleotdeo normal timidina to semelhante que ilude a transcriptase reversa, sendo por
essa captada e incorporada na crescente fita de DNA. No entanto, note tambm que existe
uma diferena crucial entre a timidina normal e a AZT (Figura 1.10). No local em que
a timidina tem um grupo hidroxila (OH), a AZT tem um grupo azida (N3). O grupo
hidroxila que falta na AZT precisamente onde a transcriptase reversa deveria ligar o prximo nucleotdeo molcula de DNA em formao. Desse modo, a transcriptase reversa
est agora impedida de prosseguir. Incapaz de adicionar mais nucleotdeos, no consegue
terminar sua tarefa. A AZT interrompe dessa maneira a trajetria de novas protenas virais
e novos vrions.
Nos testes iniciais, a AZT funcionou. Efetivamente, sustou a perda de macrfagos
e de clulas T em pacientes aidticos. Por outro lado, causou graves efeitos colaterais,
porque s vezes enganava a DNA-polimerase e interrompia a sntese de DNA nas clulas hospedeiras. Entretanto, prometia inibir, ou no mnimo desacelerar, a progresso da
doena. Em torno de 1989, no entanto, aps somente alguns anos de uso, os pacientes
pararam de responder ao tratamento. Suas contagens de clulas CD4 novamente comearam a declinar. Por qu?
Teoricamente, a AZT poderia perder sua eficcia de duas maneiras. Uma delas que a
prpria fisiologia celular do paciente poderia mudar. Depois de entrar na clula, a AZT
deve ser fosforilada pela enzima timidinaquinase da prpria clula, para se tornar biologicamente ativa. Talvez a exposio de longa durao AZT leve a clula a produzir menos
timidinaquinase. Se acontecesse isso, a AZT se tornaria menos eficaz ao longo do tempo.
Patrick Hoggard e colaboradores (2001) testaram essa hiptese verificando periodicamente
as concentraes intracelulares de AZT fosforilada, em um grupo de pacientes que ingeriram a mesma dosagem de AZT durante um ano. Os dados refutam essa hiptese, pois as
concentraes de AZT fosforilada no se modificaram ao longo do tempo.
A outra maneira em que a AZT poderia perder sua eficcia que a populao de
vrions existente no interior do paciente poderia mudar, de modo que os prprios vrions seriam resistentes destruio pela AZT. Para descobrir se as populaes de vrions
se tornam resistentes AZT, com o passar do tempo, Brendan Larder e colaboradores
(1989) obtiveram amostras do HIV de pacientes e fizeram os vrus crescerem em clulas
cultivadas em placas de Petri. A Figura 1.11 apresenta os dados de dois pacientes que os
pesquisadores monitoraram durante muitos meses. No grfico, cada curva declina, mostrando como a capacidade de replicao do HIV rapidamente reprimida pelo aumento
das concentraes de AZT. Examinemos as trs curvas relativas ao Paciente 1. As amostras
de vrions desse paciente, aps estar usando AZT por dois meses, ainda eram suscetveis
a essa droga. Nesse perodo, os vrions perderam quase completamente sua capacidade
de replicao, em concentraes moderadas de AZT. As amostras de vrions do mesmo
paciente, aps 11 meses com AZT, j eram parcialmente resistentes; os vrions podiam
ser detidos, mas com doses 10 vezes mais altas de AZT. Os vrions obtidos depois de
20 meses de tratamento com AZT eram extremamente resistentes. Eram inteiramente
resistentes s concentraes de AZT que sustaram a primeira amostra e ainda podiam
replicar-se razoavelmente bem nas concentraes que sustaram a segunda amostra. Os
dados relativos ao Paciente 2 contam a mesma histria. As populaes de vrions no interior de cada paciente mudam, tornando-se resistentes AZT. Em outras palavras, essas
populaes evoluem. Na maioria dos pacientes, a evoluo do HIV resistente AZT
ocorre em apenas seis meses (Figura 1.12).
Qual a diferena entre um vrion resistente e um suscetvel? Para responder a essa pergunta, faamos um exerccio de reflexo. Se quisssemos construir, por meio de engenharia
gentica, um vrion de HIV capaz de se replicar em presena de AZT, o que faramos? A

resposta mais simples poderia ser mudar o stio ativo da enzima transcriptase reversa, diminuindo sua probabilidade de confundir a AZT com o nucleotdeo normal. O desenho da
Figura 1.13a representa como isso poderia funcionar, em princpio.
Na prtica, poderamos usar uma substncia qumica mutagnica ou uma radiao
ionizante para produzir linhagens de HIV com seqncias nucleotdicas alteradas em
seus genomas e, conseqentemente, seqncias alteradas de aminocidos em suas protenas. Se fossem gerados muitos mutantes, no mnimo alguns conteriam mutaes na
parte da molcula de transcriptase reversa que reconhece e se liga timidina normal. Na
Figura 1.13b, apresentado um modelo da estrutura verdadeira do stio de ligao da
transcriptase reversa. Caso uma das transcriptases reversas com stio de ligao alterado
fosse menos provvel de confundir a AZT com o nucleotdeo normal, ento a variante mutante de HIV seria capaz de continuar a se replicar, em presena da droga. Nas
populaes de vrions de HIV tratados com AZT, as linhagens incapazes de se replicar
em presena de AZT diminuiriam numericamente, e a nova forma viria a dominar as
populaes de HIV.
As etapas envolvidas nesse exerccio de reflexo correspondem justamente ao que
acontece no interior dos pacientes com HIV, como os que foram acompanhados por
Larder e colaboradores. Como sabemos disso? Em estudos similares a esse, os pesquisadores obtiveram amostras repetidas de vrions de HIV de pacientes que recebiam AZT.
Em cada amostra, os pesquisadores seqenciaram o gene da transcriptase reversa, descobrindo que as linhagens virais presentes tardiamente no tratamento eram geneticamente
diferentes das linhas virais que estavam presentes antes do tratamento, nos mesmos indivduos hospedeiros. As mutaes associadas resistncia AZT eram freqentemente as
mesmas, de um paciente para outro (St.Clair et al., 1991; Mohri et al., 1993; Shirazaka et
al., 1993), e localizavam-se no stio ativo da transcriptase reversa (Figura 1.13c). Esses pesquisadores observaram diretamente a evoluo da resistncia AZT em muitos pacientes
com AIDS. Em cada indivduo, as mutaes no genoma do HIV causaram substituies
especficas de aminocidos no stio ativo da transcriptase reversa.Tais mudanas genticas
permitiram que as linhagens mutantes do vrus se replicassem em presena de AZT. Ao
contrrio da situao de nosso exerccio de reflexo, no entanto, no ocorreu qualquer
manipulao consciente. Ento, como ocorreu a mudana nas linhagens virais?
A resposta que a transcriptase reversa propensa a erro, e o genoma do HIV no tem
instrues para produzir enzimas de correo de erros. Conseqentemente, mais de 50%
dos transcritos de DNA produzidos pela transcriptase reversa contm pelo menos um erro
em sua seqncia nucleotdica, tambm conhecido como uma mutao (Hbner et al.,
(a)

Resistncia AZT (95% da dose inibidora [mM])

Anlise Evolutiva

13

>10
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0,1
0
0

10 15 20 25

Meses de tratamento
Figura 1.12 Na maioria dos
pacientes, a resistncia AZT
desenvolve-se em seis meses.
Nesse grfico est plotada a resistncia em 39 pacientes examinados
em diferentes pocas. Redesenhado
de Larder et al. (1989).
Algumas mutaes no stio ativo
da transcriptase reversa reduzem
sua probabilidade de adicionar
AZT, em vez de timidina.

(b)

Transcriptase
Reversa
T

Suscetvel

N3

(c)

Transcriptase
Reversa
T

Resistente

N3

Figura 1.13 Diferena entre as


transcriptases reversas sensveis
AZT e as resistentes AZT.
(a) Esse desenho mostra como uma
mudana no stio ativo da transcriptase reversa poderia capacitar essa
enzima a reconhecer a AZT como
uma impostora. (b) Essa reproduo mostra o grande sulco na enzima transcriptase reversa, em que o
substrato (RNA) se liga. (c) Nessa
reproduo, as esferas laranjas indicam os locais das substituies de
aminocidos correlacionadas com a
resistncia AZT. Observe que essas substituies situam-se no sulco,
ou stio ativo, da enzima. Segundo
Cohen (1993).

14

Scott Freeman & Jon C. Herron

1992; Wain-Hobson, 1993). De fato, o HIV tem a taxa de mutao mais alta de todos os
vrus ou organismos observados at o presente. Devido s milhares de replicaes de HIV
que ocorrem em cada paciente durante o curso de uma infeco, uma nica linhagem de
HIV produz centenas de diferentes variantes de transcriptase reversa ao longo do tempo.
Simplesmente em virtude de sua quantidade, praticamente certo que uma ou mais
dessas variantes contenham uma substituio de aminocido que reduzem a afinidade da
transcriptase reversa pela AZT. Se o paciente tomar essa droga, a replicao de variantes
inalteradas de HIV ser suprimida, mas os mutantes resistentes ainda sero capazes de
sintetizar algum DNA e produzir novos vrions. medida que os vrions resistentes se
reproduzem e os suscetveis no se propagam, com o passar do tempo, a frao de vrions

AZT
Vrion suscetvel AZT
Vrion parcialmente resistente AZT
Vrion muito resistente AZT

Mutao

Os erros na transcrio
reversa produzem uma
populao varivel.
Algumas variantes diferem
na resistncia AZT.
A resistncia (ou
suscetibilidade)
transmitida dos
genitores prole.

Durante o
tratamento com
AZT, muitos vrions
no conseguem se
reproduzir.

As variantes
que persistem so as
que conseguem se
reproduzir na presena
de AZT.

Tempo
Resultado: a composio da
populao mudou ao longo do tempo.
Figura 1.14 Como as populaes de HIV desenvolvem resistncia AZT. As variaes causadas por mutaes, hereditariedade e diferenas de sobrevivncia devidas AZT resultam em uma mudana na composio da populao, ao longo do tempo.

Anlise Evolutiva

resistentes AZT no organismo do paciente aumentar. Alm disso, provvel que cada
nova gerao, na populao viral, contenha vrions com novas mutaes. Algumas dessas
mutaes adicionais podem, subseqentemente, reforar a capacidade da transcriptase reversa para funcionar em presena de AZT. Uma vez que se reproduzem com maior rapidez, os vrions que contm essas novas mutaes tambm aumentaro sua freqncia,
custa de seus contemporneos menos resistentes.
Esse processo de mudana da composio da populao viral ao longo do tempo denominado evoluo por seleo natural. Ocorreu com tanta freqncia nos pacientes que
tomavam AZT que o uso isolado dessa droga como tratamento da AIDS foi abandonado.
(Discutimos terapias mais avanadas no Quadro 1.1.)
Agora vamos considerar uma questo um pouco diferente. J acompanhamos o que
acontece aos vrions que contm diferentes verses do gene da transcriptase reversa, quando a AZT est presente. O que ocorre quando a AZT est ausente? As linhagens mutantes
de HIV tambm so mais eficientes reprodutivamente, quando as clulas hospedeiras no
contm AZT? No. Quando o tratamento com AZT foi sustado, a proporo de vrions
resistentes AZT, na populao viral, retornou existente antes de o tratamento com AZT
iniciar. As mutaes reversas, que restabeleciam a configurao original da seqncia de
aminocidos da transcriptase reversa, tornaram-se comuns, porque os vrions que as continham no reproduziam formas resistentes AZT (St. Clair et al., 1991). A linhagem viral
que aumenta em freqncia a que se replica mais rapidamente no ambiente atual. Sem a
presena de AZT, a seleo natural favorece os vrions no-mutantes; com a presena de
AZT, favorece os vrions mutantes. A evoluo por seleo natural unidirecional e irreversvel? No.
Note-se que o processo que descrevemos envolve quatro etapas (Figura 1.14):
1. Os erros de transcrio produzem mutaes no gene da transcriptase reversa. Os
vrions que contm os genes mutantes produzem verses da enzima transcriptase
reversa que variam em sua resistncia AZT.
2. Os vrions mutantes transmitem prole seus genes da transcriptase reversa e, desse
modo, sua resistncia ou suscetibilidade AZT. Em outras palavras, a resistncia
AZT hereditria.
3. Durante o tratamento com AZT, alguns vrions tm maior capacidade de sobrevivncia e reproduo do que outros.
4. Os vrions que sobrevivem em presena de AZT so os que tm mutaes em seus
genes da transcriptase reversa, mutaes essas que lhes conferem resistncia.
O resultado disso que a composio da populao viral, no interior do hospedeiro,
muda com o passar do tempo. Os vrions resistentes AZT abrangem uma frao cada
vez maior da populao; os vrions suscetveis AZT tornam-se raros. No h nada de
misterioso ou intencional quanto evoluo por seleo natural; a evoluo simplesmente
acontece. uma conseqncia automtica de simples e fria aritmtica.
Sendo uma conseqncia automtica de fria aritmtica, a evoluo por seleo natural
pode acontecer em qualquer populao que apresente essas quatro etapas. Isto , pode
ocorrer em qualquer populao em que existam variaes hereditrias no sucesso reprodutivo.Veremos muitos exemplos nos prximos captulos.
Uma medida de nossa compreenso verdadeira sobre um processo a nossa capacidade
de control-lo. Se entendemos realmente o mecanismo da evoluo por seleo natural,
como age no organismo dos pacientes com HIV, devemos encontrar um meio de faz-lo
cessar ou, pelo menos, reduzi-lo. Para uma discusso de como os pesquisadores usaram
sua compreenso do mecanismo de evoluo da resistncia, para planejar terapias mais
eficazes, ver o Quadro 1.1.

15

No decorrer do tempo, as
mudanas na composio gentica
das populaes de HIV levaramnas a uma resistncia aumentada
droga. Esse um exemplo de
evoluo por seleo natural.

As caractersticas hereditrias
que conduzem sobrevivncia
e exuberncia reprodutiva
propagam-se nas populaes;
as que levam deficincia
reprodutiva desaparecem. Essa
a evoluo por seleo natural.

16

Scott Freeman & Jon C. Herron

Quadro 1.1

A compreenso de como a resistncia evolui pode ajudar os


pesquisadores a planejarem melhores tratamentos?

Os pesquisadores desenvolveram diversas drogas antiretrovirais que, como a AZT, direcionam os processos
exclusivamente para as enzimas e protenas virais (ver Figura 1.5, pgina 7; Pomerantz e Horn, 2003; Pommier et
al., 2005). As drogas j em uso ou em desenvolvimento
incluem:
Inibidoras da transcriptase reversa. Algumas,
como a AZT, inibem a transcriptase reversa mimetizando os elementos construtores do DNA. Outras a inibem bloqueando diretamente o stio ativo
da enzima.
Inibidoras da protease. Essas drogas impedem a
protease do HIV de clivar as protenas precursoras
virais para produzir os componentes maduros dos
novos vrions.
Inibidoras de fuso. Essas drogas barram a entrada
do HIV nas clulas hospedeiras, inicialmente interferindo nas protenas gp120 ou gp41 desse vrus ou
bloqueando as protenas localizadas na superfcie da
clula hospedeira, s quais o HIV se prende.
Inibidoras da integrase. Essas drogas bloqueiam
a integrase do HIV, impedindo-a de inserir o DNA
do HIV no genoma do hospedeiro e, desse modo,
evitando a transcrio de novos RNAs virais.
At o momento, a experincia indica que, quando
qualquer droga anti-retroviral usada isoladamente, o resultado ser semelhante ao que vimos com a AZT. A populao viral desenvolve resistncia rapidamente no hospedeiro (ver, por exemplo, St. Clair et al., 1991; Condra et
al., 1996; Ala et al., 1997; Deeks et al., 1997; Doukhan e
Delwart, 2001).
Com qualquer droga nica, conforme vimos em relao AZT, apenas uma ou poucas mutaes no gene para
a protena visada j podem tornar o vrus resistente. Com
sua alta taxa de mutao, tempo curto de geraes e grande tamanho populacional, o HIV gera tantos genomas
mutantes, que provvel surgir um genoma com a combinao crtica de mutaes, em um tempo razoavelmente
curto. Quando existe variao gentica para a replicao

em presena da droga, e essa est presente, ento inevitvel que a populao viral evolua.
necessrio, ento, um modo de aumentar o nmero
de mutaes que devem estar presentes no genoma de
um vrion para torn-lo resistente. Quanto mais mutaes forem necessrias para a resistncia, menor ser a
probabilidade de que essas mutaes ocorram conjuntamente em um nico vrion. Em outras palavras, necessria uma estratgia para reduzir a variao gentica
da resistncia a zero. Sem essa variao, a populao viral
no evolui.
O meio mais simples de aumentar o nmero de mutaes necessrias para desenvolver a resistncia usando
duas ou mais drogas simultaneamente. A resistncia a drogas deve ser atribuda por diferentes mutaes. Teoricamente, as mutaes que tornam o HIV resistente a uma
das drogas tambm iro torn-lo suscetvel a alguma das
outras drogas (ver St. Clair et al., 1991).
H boas notcias de que os coquetis de tratamento
que usam combinaes de drogas tm-se revelado eficazes. Por exemplo, Roy Gulick e colaboradores (1997)
descobriram que, em muitos pacientes, um coquetel de
duas inibidoras da transcriptase reversa (AZT e didesxi3-tiacitidina, ou 3TC), alm de uma inibidora da protease (indinavir), pode reduzir o nmero de vrions de
HIV no plasma sangneo a nveis imperceptveis, durante um ano, no mnimo. Resultados como esses renderam
aos tratamentos com mltiplas drogas a denominao
coletiva de Terapia Anti-Retroviral Altamente Ativa, ou
HAART (de Highly Active Anti-Retroviral Therapy; Cohen,
2002a; para mais combinaes de frmacos usadas na
HAART, ver Kalkut, 2005).
Frank Palella e colaboradores (2002) acompanharam
aproximadamente 1.800 pacientes submetidos a vrios regimes de prescries de HAART durante seis anos. Com
o advento da HAART, em 1996, as taxas de mortalidade entre os pacientes caram extraordinariamente (Figura
1.15a), assim como a incidncia de infeces oportunistas
tpicas da AIDS (Figura 1.15b). O conhecimento de como
a resistncia evolui ajudou os pesquisadores a salvar vidas.

1.3 Por que o HIV fatal?


Um dos aspectos fundamentais para se tornar bilogo evolucionista aprender o pensamento selecionista. A idia a de que a evoluo por seleo natural, como est esboada
na Seo 1.2, um processo automtico que simplesmente acontece sempre que uma
populao mostra a necessria variao hereditria em sobrevivncia e sucesso reprodutivo.

Anlise Evolutiva

40

100
80

30

60
20
40
10

20
0
1995

1996

1997

1998

1999

2000

Mortes por 100 pessoas por ano

Porcentagem de dias em regime


de HAART dos pacientes

(a)

0
2001

(b)
Nmero de infeces
oportunistas por 100
pessoas por ano

16

Doena do citomegalovrus
Pneumonia por Pneumocystis carinii
Complexo de Mycobacterium avium

12
8
4
0
1995

1996

1997

1998

1999

2000

2001

Figura 1.15 Sucessos da terapia anti-retroviral altamente


ativa. Em uma amostra de 1.800 pacientes, a introduo de
coquetis de mltiplas drogas levou a uma reduo extraordinria
(a) nas taxas de mortalidade pela AIDS e (b) na incidncia de
infeces secundrias caractersticas da AIDS. Segundo Palella et
al. (2002).

Entretanto, tambm h ms notcias: os coquetis de


mltiplas drogas no curam a infeco do HIV. Permanece
no corpo do paciente um estoque de genomas viveis de
HIV, oculto nos cromossomos dos linfcitos em repouso e, possivelmente, em outros tecidos (Chun et al., 1997;
Finzi et al., 1997; Wong et al., 1997b). Em conseqncia,
quando os pacientes saem da HAART, suas cargas virais
elevam-se rapidamente (Chun et al., 1999; Davey et al.,
1999; Oxenius et al., 2002; Kaufmann et al., 2004). O estoque oculto de HIV pode persistir durante dcadas (Finzi
et al., 1999). Os pesquisadores esto experimentando terapias que possam diminu-lo, mas no est claro se algum dia ser possvel esgotar completamente esse estoque
(Lehrman et al., 2005; Smith, 2005).

17

Uma questo crucial se, no estoque oculto, os vrions


esto latentes (ou inativos) ou em replicao. Aparentemente, em alguns pacientes, a HAART suprime toda a
replicao, persistindo apenas os vrions latentes (ver, por
exemplo, Finzi et al., 1997; Wong et al., 1997b; Zhang et
al., 1999). Enquanto todos os vrions estiverem latentes, a
populao viral no evoluir.
No entanto, em outros pacientes, alguns vrions continuam a se replicar (ver, por exemplo, Gnthard et al.,
2000; Ramratnam et al., 2000; Sharkey et al., 2000; Frost
et al., 2001). A replicao contnua sugere que a populao viral abrigou pelo menos alguma variao em sua
resistncia, antes que a terapia se iniciasse. Uma vez que
os vrions parcialmente resistentes esto continuando a se
reproduzir, existe uma oportunidade para o surgimento
de mutaes que concedam resistncia adicional e, sob
a seleo imposta pelas drogas, se acumulem nas linhagens virais (Kristiansen et al., 2005). Diversas equipes de
pesquisadores documentaram a evoluo de linhagens de
HIV que eram simultaneamente resistentes a mltiplas
drogas, incluindo tanto os inibidores da transcriptase reversa quanto os inibidores da protease (Wong et al., 1997a;
Gallago et al., 2001; Grant et al., 2002; Evans et al., 2005;
Markowitz et al., 2005).
Um desapontamento a mais que muitos pacientes
que tomam coquetis de mltiplas drogas sofrem efeitos colaterais difceis ou impossveis de tolerar (Cohen,
2002a). Nuseas, anemia e uma variedade de transtornos
metablicos dificultam sua adeso ao tratamento prescrito
(Sabundayo et al., 2006). Esses pacientes mantm concentraes mais baixas das drogas anti-retrovirais, aumentando
a probabilidade de que os vrions parcialmente resistentes
sejam capazes de se reproduzir e, por conseguinte, essas
populaes virais evoluam.
O mais importante que a alta atividade da HAART
tem um prazo de trmino para a maioria dos pacientes
(Chen et al., 2003; Mocroft et al., 2004). No estudo de Palella e colaboradores que produziu os dados dramticos
apresentados na Figura 1.15 poucos regimes de HAART permaneceram eficazes por mais de trs anos.
Os tratamentos anti-HIV que sejam facilmente tolerados e suprimam permanentemente a replicao e a evoluo virais continuam alvo de pesquisas contnuas.

Traos que levam sobrevivncia e reproduo disseminam-se por toda a populao;


traos que levam morte sem sada desaparecem. Se quisermos compreender por que uma
caracterstica particular comum em uma determinada populao, um bom incio tentarmos entender como ela poderia influir na sobrevivncia e no sucesso reprodutivo dos
indivduos. Nesta seo, aplicamos o pensamento selecionista a um aspecto desconcertante
das infeces de HIV: se no-tratadas, so quase sempre fatais.

18

Scott Freeman & Jon C. Herron

(a)
Hospedeiro com o alelo HLA-B5801

Resposta imune

1.600

Epitopo:
TSTLQEQIAW
TSNLQEQIAW

1.200
800
400
0

10 -9

10 -7

10 -5

Concentrao
do epitopo (M)
(b)
Hospedeiro com B57 ou B5801
Eliminao pelas
clulas T citotxicas

Mutao

Tempo
Transmisso

Transmisso
Eliminao pelas clulas T
citotxicas

Mutao

Tempo

Hospedeiro sem B57 e B5801


Figura 1.16 Uma mutao de
escape do HIV. (a) Esse grfico
mostra a fora da resposta imune
dos linfcitos de um paciente com
HIV como uma funo da concentrao dos fragmentos proticos
(eptopos) em teste. Os dois
fragmentos so variantes de uma
pequena poro da protena p24.
Cada letra representa um aminocido: T = treonina, S = serina, N
= asparagina, etc. As unidades da
resposta imune correspondem ao
nmero de clulas, por milho, produzindo interleucina gama. Segundo
Leslie e colaboradores (2004). (b)
Em hospedeiros que possuem o
alelo HLA-B57 ou o HLA-B5801, a
populao de HIV evolui na direo
de altas freqncias da variante N;
em hospedeiros com outros gentipos, evolui na direo de altas
freqncias da variante T.

Evoluo mope*
evidente que morrer de AIDS ruim para o hospedeiro. Se houver variao hereditria na resistncia ao HIV e AIDS entre os humanos, ento podemos esperar que a
resistncia ir propagar-se para todas as populaes humanas medida que passarem as
geraes. Examinaremos esse aspecto na Seo 1.4. O organismo que queremos focalizar
aqui, entretanto, no o hospedeiro; o vrus. Matar o hospedeiro no ruim tambm
para o vrus? Afinal, quando o hospedeiro morre, os vrions que vivem no seu interior
tambm morrem.
A fim de aplicar o pensamento selecionista ao problema da letalidade do HIV, imaginemos que um ou poucos vrions invadiram um novo hospedeiro e estabeleceram uma
infeco. Nesse nova populao, os vrions esto se replicando rapidamente (ver parte superior da Figura 1.8 na pgina 10). Quando usam a transcriptase reversa para copiar seus
genomas, geram muitas mutaes. Assim, a populao crescente est desenvolvendo variao gentica.
Agora, o corpo do hospedeiro mobiliza sua resposta imune. O sistema imune ataca os
vrions de HIV com anticorpos e clulas T citotxicas (ver Figura 1.6 na pgina 8). Essas
clulas eliminam grande parte dos vrions da populao de HIV, mas nem todos. O motivo
que a populao de HIV geneticamente varivel, e algumas de suas variantes so menos
suscetveis ao ataque do sistema imune.
Os anticorpos e as clulas T citotxicas reconhecem o HIV e as clulas por ele infectadas ligando-se aos eptopos pequenos fragmentos da protena viral dispostos na superfcie do vrion ou da clula infectada. Os eptopos (tambm denominados determinantes
antignicos) so codificados pelos genes do HIV, portanto mutaes nesses genes podem
alter-los e capacitar o vrion mutante a escapar deteco pelo arsenal de anticorpos e
clulas T citotxicas existente no hospedeiro. Quando a infeco progride da fase aguda
para a crnica, a populao de HIV j evoluiu. As variantes facilmente reconhecidas pela
primeira onda do ataque imune desapareceram, persistindo as que so de difcil reconhecimento (Price et al., 1997; Allen et al., 2000).
A Figura 1.16 fornece um exemplo de uma mutao que ajuda os vrions de HIV a
escapar da resposta imune de alguns pacientes. Tal mutao afeta o eptopo da protena
p24, que um componente da cpsula que envolve o centro (core) do vrion de HIV. As
clulas hospedeiras infectadas exibem esse eptopo em sua superfcie juntamente com uma
protena do hospedeiro, denominada antgeno leucocitrio humano, ou HLA (de human
leucocyte antigen). Quando uma clula T citotxica reconhece o eptopo estranho ao lado da
prpria protena HLA, destri a clula infectada.
Em um estudo de vrions de mais de 300 pacientes, A. J. Leslie e colaboradores (2004)
descobriram que, na maioria das linhagens de HIV, o terceiro aminocido do epitopo a
treonina. No entanto, na maioria das linhagens de HIV de pacientes que contm qualquer
um de dois alelos especficos do loco HLA-B B5801 ou B57 , o terceiro aminocido
a asparagina.
Experimentos realizados em tubos de ensaio mostraram a causa disso. Leslie e colaboradores coletaram linfcitos de um paciente possuidor do alelo B5801 e os expuseram a
diferentes verses do eptopo da p24 (Figura 1.16a). As clulas do paciente reagiram muito
mais fortemente com a verso que possua treonina do que com a que tinha asparagina. Os
linfcitos de pacientes que continham o alelo B57 mostraram um padro semelhante.
Leslie e colaboradores descobriram vrios casos em que um indivduo com o alelo
B5801 ou com o B57 foi infectado pelo HIV de um hospedeiro que no possua ambos os alelos. Mediante amostragem peridica da populao viral no novo hospedeiro,
foi possvel a esses pesquisadores documentar a evoluo dessa populao viral. No
incio da infeco, todos os vrions tinham treonina na terceira posio do eptopo da
*

N. de R.T. No original, short-sighted evolution, no sentido de que a evoluo por seleo natural, tal como no exemplo aqui discutido, no antev resultados futuros, mas apenas ajusta a populao para as condies presentes.

Anlise Evolutiva

(a) Divergncia da populao fundadora

Distncia gentica

0,100

0,075

0,050

0,025

0,000

Log do RNA viral por ml

(b) Carga viral


6
5
4
3
2
(c) Contagens de clulas T
1.200
Clulas T CD4+ por mm3

p24 (Figura 1.16b). Logo, contudo, os vrions mutantes apareceram com asparagina nessa posio. Finalmente, os vrions
com treonina foram extintos, permanecendo apenas os vrions com asparagina. Os pesquisadores tambm encontraram
casos em que os indivduos que no tinham os alelos B5801
e B57 se tornaram infectados pelo HIV de um hospedeiro
com um desses alelos. A amostragem peridica desses pacientes mostrou que suas populaes virais evoluram em direo
oposta.
Uma vez que o sistema imune jamais reduz completamente
a replicao do HIV, a populao desse vrus, no interior de um
hospedeiro, desenvolve-se durante toda a fase crnica da infeco. A populao de HIV produz de 10 a 100 milhes de novos
vrions por dia (Ho et al., 1995; Wei et al., 1995). Quando se replicam, esses vrions geram acidentalmente mutaes que modificam seus eptopos. Alguns dos vrions mutantes se reproduzem
livremente, at que o sistema imune produza anticorpos e clulas
T citotxicas que reconheam suas protenas alteradas. Posteriormente, esses mutantes desaparecem, e uma nova gerao de vrions, com novos eptopos, ocupa automaticamente o seu lugar.
Raj Shankarappa e colaboradores (1999), trabalhando no
laboratrio de James Mullins, registraram a evoluo contnua
da populao de HIV durante a fase crnica da infeco em
vrios pacientes. Os dados de um desses pacientes aparecem
na Figura 1.17. Inicialmente, olhe para a Figura 1.17a. Os referidos cientistas coletavam periodicamente os vrions de HIV
do sangue do paciente e liam a seqncia de nucleotdeos de
um segmento do gene da gp120. Essa protena localiza-se no
envelope externo do HIV, onde se inicia a fuso com as clulas hospedeiras, mediante ligao CD4 e co-receptora (ver
Figura 1.5 na pgina 7). O segmento gnico que os pesquisadores estudaram determina a co-receptora que o vrion usa e
contm um eptopo marcado pelo sistema imune do hospedeiro. A equipe anotou a seqncia nucleotdica da primeira
amostra que obteve do paciente e comparou todas as amostras
subseqentes com essa. Durante os primeiros sete anos em que
os pesquisadores acompanharam esse paciente, as seqncias
foram de quase idnticas seqncia de referncia a diferentes
em cerca de 8% de seus nucleotdeos.
Agora, observe o que aconteceu entre o sexto e o oitavo ano.
A diagonal parou de subir e se horizontalizou, ou seja, a taxa de
evoluo tornou-se extraordinariamente lenta. Por qu? A populao viral parou de produzir a variao gentica que abastece a evoluo por seleo natural? Provavelmente, no. A Figura
1.17b mostra que a concentrao de vrions era alta nessa poca.
Com tantos vrions replicando-se, a populao certamente continuava a produzir genomas mutantes em uma taxa exacerbada.
Ento, mudou a maneira em que o gentipo viral influencia a
sobrevivncia e a reproduo? Provavelmente, sim. At o stimo ano, era mais provvel que os vrions cujos gentipos lhes
proporcionavam novos eptopos sobrevivessem e proliferassem
(ver Ross e Rodrigo, 2002); aps o stimo ano, essa vantagem
aparentemente desapareceu.

19

Perodo de tempo
durante o qual o
paciente tomou
drogas anti-retrovirais

800

3TC
d4T
AZT

400

0
0

10

12

Anos decorridos desde que o paciente


se tornou HIV-positivo
Figura 1.17 Evoluo da populao de HIV no interior de um
paciente. (a) Cada barra laranja representa um vrion amostrado
do paciente durante o curso infeccioso; sua posio horizontal
indica o momento da amostragem, e sua posio vertical, o quanto diferente geneticamente da primeira amostra. A linha preta
mostra a tendncia: os vrions amostrados posteriormente divergiram mais. (b) A carga viral do paciente aumentou no decorrer do
tempo. (c) A contagem de clulas T CD4 do paciente continuou
razoavelmente alta durante vrios anos, depois caiu rapidamente.
Segundo Shankarappa et al. (1999).

20

Scott Freeman & Jon C. Herron

Adaptabilidade competitiva
dos vrions do paciente

As populaes patognicas
evoluem no interior de hospedeiros
individuais em resposta seleo
imposta pelo sistema imune
desses hospedeiros.

6
4
2
0
0

40

80

120

Nmero de meses a partir


do primeiro teste HIV-positivo

Figura 1.18 Na maioria dos


hospedeiros, as populaes de
HIV evoluem em direo replicao mais agressiva. Cada cor
representa os vrions amostrados
em srie de um determinado
hospedeiro. A aptido competitiva
reflete a capacidade de replicao
dos vrions nos linfcitos de um
doador no-infectado em presena
de linhagens-controle. Dos oito
pacientes, em sete a capacidade
das populaes de HIV para continuarem competindo aumentou ao
longo do tempo. Reproduzido de
Troyer et al. (2005).

A rpida evoluo da populao


de HIV no interior de um
hospedeiro acelera o colapso
do seu sistema imune. Essa
evoluo mope, porque tambm
apressa a extino da populao
de HIV.

A Figura 1.17c mostra que, aproximadamente na poca em que a taxa de evoluo


viral se tornou mais lenta, a contagem de clulas T CD4 do paciente diminuiu enormemente. No sexto ano, essa contagem era de 1.200 clulas por milmetro cbico; em torno
do oitavo ano, era menor do que 200. O sistema imune do paciente estava em colapso,
significando que o corpo do paciente no mais produzia novos tipos de anticorpos e de
clulas T citotxicas. Isso libertava a populao de HIV do agente seletivo que a forava
a evoluir. No existia mais qualquer benefcio em possuir novos eptopos. Em lugar disso,
as linhagens mais capazes de replicao rpida simplesmente se propagavam, e as menos
capazes tornavam-se raras (ver Williamson et al., 2005).
A evoluo da populao de HIV parece contribuir para o colapso do sistema imune, no
mnimo, de trs modos. Primeiro, a evoluo contnua em direo a novos eptopos que
possibilita populao viral manter-se bastante frente da resposta imune, para continuar
replicando-se em grande quantidade. Finalmente, conforme est descrito na Seo 1.1, a
replicao contnua da populao viral consome o suprimento de clulas T virgens e de
memria, bem como destri a capacidade do organismo para substitu-las.
Segundo, a populao viral, no interior da maioria dos hospedeiros, evolui em direo
replicao cada vez mais agressiva. Ryan Troyer e colaboradores (2005) obtiveram amostras
seqenciais de HIV de diversos pacientes no-tratados. Esses pesquisadores colocaram os
vrions de cada amostra a crescer em linfcitos de um doador no-infectado. Adicionaram
a cada placa de cultura uma das quatro linhagens-controle de HIV, contra a qual os vrions
coletados do paciente teriam de competir. Nas placas, a linhagem viral que conseguiu replicar-se com maior eficincia tornou-se numericamente predominante. Os mencionados
pesquisadores avaliaram a aptido competitiva dos vrions das amostras dos pacientes com
base em seu desempenho total contra as quatro linhagens-controle, mostrando os resultados
na Figura 1.18. Cada cor representa as amostras seqenciais de um determinado paciente.
Dos oito casos, em sete a aptido competitiva dos vrions do paciente aumentou constantemente ao longo do tempo. Em relao a dois de seus pacientes,Troyer e colaboradores tambm testaram a competio de linhagens de amostras iniciais contra linhagens de amostras
tardias. Essas ltimas linhagens venceram sempre. Quanto mais tempo um paciente abrigar
uma populao de HIV, mais prejudiciais se tornam os vrions dessa populao.
Terceiro, em pelo menos 50% de todos os hospedeiros e possivelmente muitos mais
evoluem linhagens de HIV que podem infectar clulas T virgens (Shankarappa et al.,
1999; Moore et al., 2004). A capacidade de um vrion de HIV infectar um dado tipo de
clula determinada pela co-receptora que o vrion usa. Essa co-receptora, mostrada na
Figura 1.5 na pgina 7, a segunda das duas protenas s quais o HIV se prende para se
infiltrar em uma clula hospedeira. No incio da maioria das infeces de HIV, a maior
parte dos vrions da populao de HIV usa como sua co-receptora a protena CCR5, que
encontrada em clulas dendrticas, macrfagos e em clulas T citotxicas, em repouso e
reguladoras (ver Figura 1.6 na pgina 8). medida que a infeco progride e a populao
de HIV evolui, freqentemente surgem vrions que exploram uma co-receptora diferente, a protena CXCR4, encontrada em clulas T virgens. Esses vrions, denominados X4,
podem tornar-se mesmo numericamente predominantes. o que aconteceu no paciente
cuja infeco detalhada na Figura 1.17. Os vrions X4 no existiam no incio da infeco,
tornaram-se fortemente predominantes entre o quinto e o oitavo ano e depois voltaram a
rarear em torno do 11 ano.
Uma vez que as clulas T virgens so as progenitoras das clulas T citotxicas e de memria, o surgimento de vrions que possam infectar e matar as clulas T virgens uma m notcia
para o hospedeiro. Hetty Blaak e colaboradores (2000) amostraram as populaes virais de
16 pacientes com HIV para determinar se tais populaes continham vrions X4. A seguir,
durante o perodo decorrido entre um ano antes e um ano depois da data de amostragem,
os pesquisadores calcularam a contagem mdia de clulas T auxiliares no sangue de pacientes
com vrions X4, comparando-a com a dos pacientes sem esses vrions. Os respectivos resultados so mostrados na Figura 1.19.

21

As contagens mdias de clulas T nos pacientes sem linhagens virais X4 permaneceram


razoavelmente constantes ao longo do tempo, ao passo que nos pacientes com linhagens
X4 essas contagens diminuram. Quando surgem vrions que debilitam gradualmente a
capacidade do sistema imune para reabastecer seu estoque de clulas T, aparentemente esses
vrions aceleram a falncia do sistema imune.
A evoluo da populao de HIV em um hospedeiro mope (Levin e Bull, 1994; Levin, 1996). Os vrions no visam ao futuro, nem prevem que, medida que sua populao
evoluir, acabaro basicamente matando seu hospedeiro e desse modo causaro a prpria
extino. Os vrions no podem visar ao futuro, pois so apenas diminutas mquinas moleculares imprevidentes. A evoluo por seleo natural tambm no pode mirar o futuro,
pois somente um processo matemtico que ocorre automaticamente. Em conseqncia,
a populao de HIV, em qualquer hospedeiro, evolui, em ltima anlise, na direo de sua
auto-extino.
A natureza efmera da evoluo do HIV especialmente clara no caso dos vrions
X4. As comparaes dos vrions presentes nos hospedeiros infectados consecutivamente
mostram que as linhagens de HIV que usam a co-receptora CXCR4 no so transmitidas
a novos hospedeiros (Zhu et al., 1993; Clevestig et al., 2005). Os patgenos que no conseguem contagiar novos hospedeiros no sobrevivem por muito tempo. Mesmo que no
tomassem parte na destruio dos sistemas imunes de seus hospedeiros, as linhagens X4
estariam destinadas com certeza extino.
Resumindo, o pensamento selecionista leva-nos concluso de que a infeco do HIV
fatal, pelo menos parcialmente, devido evoluo de curto prazo da populao viral no
interior do hospedeiro. As linhagens letais de HIV tornam-se a predominantes, porque
gozam de uma vantagem efmera em sobrevivncia e reproduo.

Contagem de clulas T CD4+

Anlise Evolutiva

Hospedeiros
sem vrions X4

600
400
Hospedeiros
com vrus X4

200
0

12

18

24

Tempo (meses)

Figura 1.19 Linhagens de HIV


que usam a co-receptora CXCR4
aceleram o colapso dos sistemas
imunes de seus hospedeiros.
As contagens de clulas T auxiliares
diminuem mais rapidamente em
pacientes que abrigam linhagens X4,
aparentemente porque essas linhagens infectam e matam as clulas
T virgens e, desse modo, debilitam
gradualmente a capacidade de seus
hospedeiros para produzir novas
clulas T citotxicas e de memria.
Reproduzido de Blaak et al. (2000).

Uma correlao entre letalidade e transmisso?


A evoluo de curto prazo talvez no seja a nica razo da fatalidade das infeces do HIV.
A evidncia para essa afirmativa a existncia de linhagens raras de HIV que matam seus
hospedeiros mais lentamente do que as linhagens comuns, se que os matam (Geffin et
al., 2000; Rhodes et al., 2000; Tobiume et al., 2002). A linhagem atenuada mais conhecida de HIV disseminou-se de um doador de sangue para oito receptores de transfuso na
Austrlia, no incio da dcada de 1980 (Deacon et al., 1995; Learmont et al., 1999; Birch et
al., 2001; Churchill et al., 2006). Esse grupo de pacientes conhecido como a Coorte do
Banco de Sangue de Sydney. O doador e quatro receptores foram acompanhados durante
25 anos, desde que se tornaram infectados. Alcanaram idade suficiente para que dois deles
tenham falecido em decorrncia de condies associadas idade, no ao HIV. Finalmente,
dois membros da coorte desenvolveram AIDS, respectivamente 17 e 18 anos aps a infeco, mas ambos responderam bem ao tratamento anti-retroviral. Outro membro apresentou nveis detectveis de HIV em seu sangue, mas continuou assintomtico. Os dois restantes mostraram contagens normais de clulas T e cargas virais praticamente no-detectveis.
No conjunto, a coorte progrediu muito melhor do que um grupo comparativo, infectado
por linhagens normais de HIV.
O que explica a progresso mais lenta da AIDS na Coorte do Banco de Sangue de
Sydney? N. J. Deacon e colaboradores (1995) examinaram o genoma da linhagem de HIV
que infectou a coorte, descobrindo que nessa linhagem est faltando parte do gene que
codifica uma protena viral chamada Nef. Os mecanismos de funcionamento dessa protena ainda no so inteiramente conhecidos (Fackler e Baur, 2002), mas alguns pesquisadores mostraram que a Nef auxilia os vrions de HIV a penetrarem nas clulas hospedeiras
(Schaeffer et al., 2001; Papkalla et al., 2002), impulsiona a replicao viral (Aiken e Trono,
1995; Linnemann et al., 2002) e ajuda as clulas infectadas pelo HIV a escapar do sistema
imune do hospedeiro (Swann et al., 2001). A perda ou a reduo dessas funes limita
aparentemente o dano que o HIV causa ao sistema imune do hospedeiro, talvez em parte
porque resultam em cargas virais menores.

Sabe-se que existem linhagens


relativamente benignas de HIV.

22

Scott Freeman & Jon C. Herron

Linhagens relativamente benignas


de HIV podem ser transmitidas
de hospedeiro para hospedeiro,
em baixas taxas.

Um segundo motivo da letalidade


das infeces de HIV que as
caractersticas que predispem
o HIV a matar tambm
fortalecem sua capacidade de
infectar novos hospedeiros.

O ponto importante que as alteraes do genoma do HIV podem tornar o vrus


menos lesivo ao hospedeiro, mas ainda capaz de sobreviver no seu organismo. Caso o hospedeiro viva mais tempo, a populao de HIV tambm perdurar mais. Isso aparentemente
bom para o vrus. Ento, por que so to raras as linhagens de HIV que contm tais
alteraes genticas?
Se reconhecermos que mesmo para um patgeno completamente benigno todos os
seus hospedeiros finalmente morrero, o pensamento selecionista sugerir uma resposta.
Para persistir alm do tempo de vida do hospedeiro, uma populao viral deve, em algum momento, colonizar novos hospedeiros. Isso significa que h um segundo nvel de
seleo natural agindo sobre o HIV. O primeiro nvel o que j examinamos: existem
diferenas entre os vrions em sua capacidade de sobreviver e se reproduzir no interior
de um determinado hospedeiro. O segundo nvel de seleo ocorre quando existem
diferenas entre as linhagens virais em sua capacidade de se deslocar de um hospedeiro
para outro. Ao longo do tempo, as linhagens que so facilmente transmitidas para novos
hospedeiros iro tornar-se mais comuns, ao contrrio das de difcil transmisso, que terminam desaparecendo.
Uma hiptese razovel a de que as linhagens de HIV com genes mutantes nef so raras porque dificilmente so transmitidas de um hospedeiro para outro. A fraca transmisso
poderia ser devida capacidade reduzida dos vrions sem a protena Nef para invadir novas
clulas, mas tambm seria explicada parcialmente pelas cargas virais mais baixas mantidas
pelas populaes virais sem Nef nos hospedeiros. Com menos vrions presentes nos lquidos corporais, reduzida a probabilidade de uma transferncia bem-sucedida durante um
dado surto de relaes sexuais ou compartilhamento de agulha.
Um cenrio similar explica por que o HIV-2 menos comum mundialmente do que
o HIV-1, que discutimos at o momento. O HIV-2 um vrus aparentado, que os humanos adquiriram de uma espcie diferente de primata (ver Seo 1.5, adiante), sendo
menos prejudicial aos seus hospedeiros do que o HIV-1. Os indivduos infectados pelo
HIV-2 progridem para a AIDS, mas muito mais lentamente do que os infectados pelo
HIV-1 (Marlink et al., 1994). O curso mais lento dessa infeco parece relacionar-se ao
fato de que as cargas virais de HIV-2 so inferiores s de HIV-1, nos respectivos hospedeiros (Popper et al., 1999). Entre os motivos para essas cargas virais mais baixas, pode estar o
fato de que a protena Nef do HIV-2 tem uma funo que foi perdida nos ancestrais de
HIV-1, antes de comearem a infectar os humanos: a de impedir a ativao imune crnica
(Schindler et al., 2006). No entanto, alm de ser menos prejudicial aos seus hospedeiros,
o HIV-2 tambm transmitido em taxas inferiores s da transmisso do HIV-1 (Kanki
et al., 1994). Essas diferenas nas taxas de transmisso podem explicar por que o HIV-2
permaneceu confinado frica Ocidental (Bock e Markovitz, 2001), enquanto o HIV-1
espalhou-se por todo o globo terrestre.
Em sntese, um segundo motivo da letalidade da infeco do HIV que as caractersticas que predispem as populaes de HIV a, finalmente, matarem seus hospedeiros como
a capacidade de replicao rpida, o escape do sistema imune e a manuteno de grandes
populaes tambm fortalecem sua capacidade de colonizar novos hospedeiros. A seleo
no nvel de transmisso de hospedeiro para hospedeiro favorece tais caractersticas, mesmo
custa de matar os hospedeiros mais rapidamente.
Na prxima seo, continuaremos a praticar o pensamento selecionista, mas desviaremos nosso foco do vrus para o hospedeiro. Ao fazermos isso, ser sugerido um terceiro
motivo para que a infeco do HIV seja fatal: talvez a populao humana no tenha tido
tempo para desenvolver uma defesa adequada.

1.4 Por que algumas pessoas so resistentes ao HIV?


J mencionamos, na Seo 1.1, que o HIV tem parentes, denominados vrus da imunodeficincia simiana (SIVs), que infectam vrias espcies de primatas. Os hospedeiros na-

Anlise Evolutiva

turais desses SIVs toleram normalmente a infeco sem ficarem doentes. Em populaes
selvagens de macacos verdes africanos*, por exemplo, mais da metade de todos os adultos
esto infectados pelo SIVagm**, mas no h evidncia de que sofram a conseqente doena
(Kuhmann et al., 2001). No entanto, quando os macacos resos so infectados com o SIVagm, muitas vezes desenvolvem a AIDS. Esses resultados sugerem que os hospedeiros
naturais dos SIVs desenvolveram defesas eficazes que faltam aos novos hospedeiros.
Poderiam os humanos evoluir defesas similares contra o HIV? Sendo assim, por que no
as possumos? Lembremos que, para uma populao evoluir, os indivduos devem variar, e
essa variao tem de ser transmitida geneticamente dos genitores prole. Existe variao
hereditria na suscetibilidade ao HIV entre os humanos?
No incio da dcada de 1990, pesquisas de diversos laboratrios demonstraram que algumas pessoas permanecem sem infeco, mesmo aps exposio repetida ao HIV, e que
outras que so infectadas com o vrus sobrevivem muitos anos alm do esperado (ver Cao
et al., 1995). Em meados dos anos 1990, uma equipe liderada por Edward Berger identificou as molculas co-receptoras que permitem a entrada do HIV nas clulas hospedeiras
(ver Feng et al., 1996; Alkhatib et al., 1996). Pouco depois, Rong Liu e colaboradores
(1996) e Michel Samson e colaboradores (1998) sugeriram que os indivduos resistentes
poderiam ter formas incomuns das molculas co-receptoras, e essas protenas mutantes
poderiam frustrar a entrada do HIV nas clulas hospedeiras.
A fim de testar essa hiptese, Samson e colaboradores seqenciaram o gene que codifica
a co-receptora CCR5 de trs indivduos infectados pelo HIV que eram sobreviventes de
longo prazo. Como era esperado, um dos indivduos tinha um alelo mutante do gene. Uma
vez que esse alelo distinguido por uma deleo de 32 pares de bases da seqncia normal
do DNA, Samson e colaboradores o denominaram alelo 32 ( a letra grega delta). Posteriormente, mostraram que o HIV no consegue entrar nas clulas que contm a forma
32 do gene CCR5. Esse experimento confirmou que o alelo 32 protege os indivduos
contra a infeco.
Modificaes na expresso ou na estrutura do gene CCR5 constituem uma defesa comum entre os hospedeiros dos SIVs tambm (Chen et al., 1998; Palcios et al., 1998;
Kuhmann et al., 2001;Veazey et al., 2003). Muitos macacos verdes africanos, por exemplo,
contm um gene CCR5 codificando uma substituio de aminocido que dificulta mais
a entrada do SIV em suas clulas. A maioria dos mangabeis de barrete vermelho contm
um gene CCR5 com uma deleo de 24 pares de bases, cujo efeito o mesmo. Alguns
mangabeis fuliginosos possuem um gene CCR5 com uma deleo diferente, que produz
uma protena no-funcional.
Podemos concluir que, de fato, as populaes humanas apresentam variao gentica
para resistncia infeco pelo HIV e progresso da doena. Alm disso, esse material
bruto para a evoluo envolve mecanismos fisiolgicos semelhantes aos que atribuem resistncia nos macacos. A variao gentica encontrada entre os humanos foi moldada pela
seleo natural imposta pela pandemia da AIDS?
Para descobrirem se o alelo 32 comum em vrias populaes humanas, Samson e colaboradores (1998) coletaram amostras de DNA de um grande nmero de indivduos de origem norte-europia, japonesa e africana, examinaram o gene para a protena CCR5 em cada
indivduo e calcularam a freqncia dos alelos normal e 32 em cada populao. Surgiu um
forte padro: o alelo mutante estava presente em uma freqncia relativamente alta de 9% nos
europeus, mas completamente ausente em indivduos de descendncia asitica ou africana, resultado confirmado por pesquisa posterior. O alelo CCR5-32 comum no norte da Europa
e diminui notavelmente sua freqncia tanto ao sul como ao leste (Figura 1.20).
A comparao do mapa de freqncia do alelo 32, na Figura 1.20, com o mapa de
prevalncia do HIV, na Figura 1.1, na pgina 5, revela uma surpreendente dissociao.
*

**

N. de R.T. No original, African green monkeys. Correspondem a um conjunto de espcies de macacos africanos do
gnero Chlorocebus, cujos pelos dorsais podem ser de colorao esverdeada.
N. de T. SIVagm corresponde, em ingls, ao vrus de imunodeficincia simiano dos macacos verdes africanos.

23

Para uma populao evoluir, deve


abrigar diferenas genticas
entre os indivduos.

Nas populaes humanas, alguns


indivduos contm alelos que os
tornam resistentes infeco
pelo HIV.

24

Scott Freeman & Jon C. Herron

80o

W.L.0o E.L.

60o

90o

120o

150o

180o

60o

Freqncia do alelo CCR5-&32


40o
r 0,141
0,115 a 0,140
0,089 a 0,114
20o

0,064 a 0,088
0,037 a 0,063
0,011 a 0,036

0o

b 0,010

Figura 1.20 Freqncia do alelo CCR5-32 no Velho Mundo. O alelo 32 tem sua freqncia mais alta no norte da Europa, diminuindo-a
para o sul e para o leste. Segundo Limborskaa et al. (2002).

Curiosamente, a freqncia do
alelo protetor mais conhecido
mais elevada em regies com
baixas taxas de infeco de HIV.

Aparentemente, a infeco
de HIV uma doena humana
recente demais para ter
desencadeado uma modificao
evolutiva substancial nas
populaes humanas. O padro
do mapa acima apresentado
continua sem explicao.

O alelo 32 comum em uma regio do mundo em que a infeco do HIV relativamente rara, enquanto essa infeco abundante em regies onde o alelo 32 raro ou
ausente.Talvez no devssemos esperar que a distribuio geogrfica do alelo 32 refletisse a distribuio do HIV. Como veremos na seo seguinte, no apenas a pandemia
de HIV que recente, mas o prprio HIV um causador novo de doena humana. So
necessrias algumas geraes para que uma populao se modifique em conseqncia
seleo natural, e no houve tempo suficiente para que o HIV altere as populaes
humanas ainda.
Ao comparar indivduos expostos ao HIV no-infectados e sobreviventes de longo
prazo com indivduos que desenvolvem a AIDS, os pesquisadores descobriram, recentemente, muitos outros genes cujos diversos alelos atribuem diferente suscetibilidade
ou resistncia ao HIV (ver OBrien e Nelson, 2004; Gao et al., 2005; Gonzles et al.,
2005; Modi et al., 2006). Bilogos evolucionistas esto avaliando as freqncias desses
alelos protetores em vrias populaes e predizendo como tais freqncias podem mudar medida que a epidemia continua (Schliekelman et al., 2001; Sullivan et al., 2001;
Ramaley et al., 2002). Iremos considerar detalhadamente algumas dessas predies no
Captulo 6.
Se a pandemia de AIDS no explica o padro geogrfico exibido na Figura 1.20, o
que o explica, ento? Samson e colaboradores ofereceram duas explicaes: (1) o alelo
CCR5-32 talvez tenha sido favorecido recentemente pela seleo natural nas populaes europias, ou (2) esse alelo poderia ter alcanado sua alta freqncia por acaso em
um processo denominado deriva gentica. Em concordncia com a hiptese da seleo
natural, os pesquisadores sugeriram que o alelo 32 confere proteo contra outro patgeno diferente do HIV, tal como o da peste bubnica (Stephens et al., 1998) ou o da
varola (Lalani et al., 1999). Nesses cenrios, o alelo 32 teria aumentado sua freqncia
devido vantagem de sobrevivncia que propiciou durante a epidemia devastadora que
assolou a Europa durante o milnio passado. Em um esquema relacionado com a hiptese
da deriva gentica, outro bilogo props que o alelo 32 surgiu inicialmente entre os
viquingues, alcanando freqncia alta, e depois se disseminou por toda a Europa durante

Anlise Evolutiva

25

as invases dessa populao escandinava nos sculos VIII, IX e X (Lucotte, 2001). Alguns
pesquisadores recentemente tambm comearam a descobrir os custos associados ao alelo
32. Por exemplo, os homozigotos so mais suscetveis ao vrus do Nilo Ocidental (West
Nile virus; Glass et al., 2006), sugerindo que a seleo natural contra esse alelo tambm deve
ser considerada. Reexaminaremos o enigma da distribuio histrico-geogrfica do alelo
CCR5-32 nos Captulos 4, 6 e 8.

1.5 De onde se originou o HIV?


Na Seo 1.1, assinalamos que a AIDS foi detectada, pela primeira vez, em 1981. Essa
doena recente para os humanos. Sua causa, o HIV, um patgeno novo. Os vrus, como
outros organismos, surgem apenas por reproduo de sua espcie. De onde vieram os primeiros vrions do HIV?
O primeiro indcio que, como j mencionamos, o genoma e o ciclo vital do HIV so
semelhantes aos dos SIVs, uma famlia de vrus que infectam diferentes primatas. Da mesma forma que o HIV, os vrus da imunodeficincia simiana infectam os sistemas imunes de
seus hospedeiros. Contudo, ao contrrio do HIV, parecem no causar doena grave.
Uma hiptese lgica a de que o HIV se originou de um dos SIVs e que a epidemia
global de AIDS comeou quando esse SIV passou de seus hospedeiros primatas para os
humanos. Qual o SIV ancestral do HIV? A fim de descobri-lo, os bilogos evolucionistas
reconstruram a histria evolutiva dos vrus da famlia SIV/HIV.

Como os pesquisadores reconstroem a histria evolutiva?


Assim como as relaes histricas (ou passadas) entre os indivduos so descritas por sua
genealogia, as relaes passadas entre as populaes ou as espcies so descritas por sua
filogenia. A representao dessas relaes evolutivas mostra a rvore genealgica de um
grupo de espcies ou populaes, sendo denominada cladograma ou rvore filogentica. A metodologia para reconstruir as filogenias complexa em seus detalhes (todo o
Captulo 4 dedicado a esse tpico), mas sua base lgica simples. Em geral, as espcies
com parentesco mais prximo devem ser mais semelhantes do que as formas com parentesco mais distante. No caso do HIV, os pesquisadores inferem as relaes passadas entre
as linhagens, comparando as seqncias nucleotdicas de seus genes. A premissa que as
linhagens com seqncias nucleotdicas similares compartilharam um ancestral comum
mais recentemente do que as linhagens com seqncias diferentes.

A origem do HIV
Beatrice Hahn e colaboradores seqenciaram o gene que codifica a transcriptase reversa
em vrios SIVs e compararam suas seqncias com as encontradas em diversas linhagens
de HIV (Gao et al., 1999; Hahn et al., 2000). Usando seus dados para estimar as relaes
entre esses vrus, os pesquisadores produziram a filogenia mostrada na Figura 1.21a. Nessa
rvore, os comprimentos das linhas horizontais indicam a porcentagem de nucleotdeos
diferentes entre os genes das linhagens virais. Ramos curtos entre as espcies significam
que suas seqncias so semelhantes; ramos mais longos significam que suas seqncias so
mais divergentes. Como a divergncia das seqncias resultante do acmulo de mutaes
ao longo dos anos, nessa rvore a extenso dos ramos horizontais correlaciona-se aproximadamente com o tempo. (Em compensao, os comprimentos das linhas verticais so
arbitrrios, ajustados simplesmente para tornar a rvore mais compreensvel.)
Para interpretar essa rvore e entender suas implicaes quanto histria do HIV,
inicie na seta de cor laranja, na margem inferior esquerda. O ponto de ramificao, ou
n, nessa seta representa o ancestral comum de todos os vrus inclusos na rvore. Observe que cada um dos diferentes grupos, ou linhagens, que se ramificam da populao

A rvore filogentica mostra


as relaes passadas entre um
grupo de vrus ou organismos.

26

Scott Freeman & Jon C. Herron

(a)

(b)

HIV-1/U455: Humano
HIV-1/LAI: Humano
HIV-1/ELI: Humano

HIV-1, diversas linhagens


do grupo M

HIV-1/YBF30: Humano
SIVcpzUS: Chimpanz
SIVcpzCAM3: Chimpanz
SIVcpzGAB1: Chimpanz
HIV-1/MVP5180: Humano

SIVcpz US
YBF30
SIVcpz CAM5
SIVcpz CAM4
SIVcpz CAM3
SIVcpz GAB1
276Ha

HIV-1/ANT70: Humano
SIVcpzANT: Chimpanz

SIVlhoest : Macaco de l'Hoest


SIVsun : Macaco da cauda dourada
SIVmnd : Mandril

*
SIVagm VerTYO: Macaco verde africano

ANT70
VAU
MVP5180
SIVcpz ANT

Chimpanz
HIV-1 grupo N
Chimpanz

HIV-1 grupo O

Chimpanz

SIVagm Ver3: Macaco verde africano


SIVagm Ver155: Macaco verde africano
SIVagm Gri677: Macaco verde africano
SIVagm Tan1: Macaco verde africano
HIV-2/ROD: Humano

HIV-1 e parentes
Principais linhagens de SIV
HIV-2 e parentes

HIV-2/D205: Humano
SIVsm H4: Mangabei fuliginoso
HIV-2/FO784: Humano
SIVstm : Macaco-urso
SIVsyk : Macaco
de Sykes

Tempo
Figura 1.21 A rvore filogentica do HIV e vrus aparentados. (a) Esta rvore mostra as relaes evolutivas entre as duas formas principais de HIV, denominadas HIV-1 e HIV-2, bem como os vrus de imunodeficincia que infectam primatas no-humanos. Observe que os vrus
que se ramificam prximo seta laranja, na base da rvore, parasitam os macacos. Com base nessa observao, os pesquisadores concluem que
as linhagens passaram dos macacos para os humanos. (b) Esta rvore mostra uma anlise mais detalhada, realizada por Hahn et al. (2000). (O
asterisco marca o mesmo ponto de ramificao em ambas as rvores.) As setas indicam os locais, na rvore, em que os vrus de imunodeficincia
foram transmitidos dos chimpanzs para os humanos. De acordo com essa rvore, cada linhagem principal do HIV-1 se originou em eventos diferentes de transmisso de um chimpanz hospedeiro, representados pelas setas de cor cinza. Redesenhado de Hahn et al. (2000).

ancestral conduzem a vrus que infectam macacos ou chimpanzs. Os ramos cinzas


diversificaram-se em vrus que infectam muitos primatas no-humanos, ao passo que
os laranjas e pretos originaram vrus que parasitam hospedeiros tanto humanos quanto
no-humanos.
De onde se originam os vrus da imunodeficincia humana? Descubra os vrus denominados HIV-2, prximos ao ramo inferior da rvore, e observe que compartilham um
ramo da rvore com um vrus que infecta uma espcie de macaco denominada mangabei
fuliginoso. O HIV-2 prevalente na frica Ocidental, sendo menos virulento do que o
HIV-1, o vrus que est causando a epidemia global de AIDS. Uma vez que os mangabeis

Anlise Evolutiva

fuliginosos so caados para sustento e mantidos como animais de estimao na frica


Ocidental, e as seqncias gnicas dos vrus que os infectam so muito semelhantes s do
HIV-2, os pesquisadores concordam quanto hiptese de que provavelmente esse vrus
foi transmitido dos mangabeis fuliginosos para os humanos no passado recente. Assim que
o vrus passou aos humanos, a evoluo por seleo natural levou-o linhagem conhecida
como HIV-2. (O leitor pode observar que um vrus denominado SIVstm tambm um parente prximo do HIV-2. Essa linhagem foi obtida de um macaco-urso* em cativeiro, que
foi infectado a partir de um mangabei fuliginoso.)
Agora observe a linhagem laranja na parte superior da rvore. Essa linhagem diversificou-se em linhagens que infectam humanos e chimpanzs. Tais populaes incluem
o HIV-1, o vrus que est causando a epidemia de AIDS. Dado que os chimpanzs so
caados para sustento na frica e que as seqncias gnicas dos vrus que os infectam so
muito semelhantes ao HIV-1, Hahn e colaboradores inferiram que o SIV que infecta os
chimpanzs (SIVcpz) foi transmitido desses animais para os humanos, nos quais evoluiu para
o HIV-1.
A fim de examinar mais de perto esse evento de transmisso, Hahn e colaboradores
compararam as seqncias do gene que codifica as protenas encontradas na superfcie
dos vrions de HIV-1 e de SIVcpz. A rvore fundamentada nesses dados fornece uma viso
mais detalhada das relaes de parentesco entre esses vrus, que reproduzida na Figura
1.21b. Note que as linhagens de HIV formam trs grupamentos distintos, denominados
subgrupos M, N e O, pelos pesquisadores do HIV. Cada subgrupo do HIV intimamente
relacionado a uma linhagem diferente de SIVcpz, o que constitui evidncia de que esse
vrus saltou dos chimpanzs para os humanos em pelo menos trs ocasies diferentes.
Nesse caso, o HIV-1 foi transmitido pelos chimpanzs aos humanos no s uma vez, mas
mltiplas vezes. Reconstrues mais recentes, usando vrus amostrados de populaes de
chimpanzs selvagens, estabeleceram que o reservatrio natural do qual se derivam os trs
subgrupos de HIV-1 uma subespcie de chimpanzs, conhecida como Pan troglodytes
troglodytes (Keele et al., 2006).
Quando o SIV passou dos chimpanzs para os humanos? As pesquisas sobre esse aspecto concentraram-se no ramo do grupo M do HIV, na parte superior da rvore, na Figura
1.21b. O grupo M responsvel pela maior parte da epidemia mundial de AIDS.Vrios
grupos de pesquisadores usaram os dados de seqncia de vrias linhagens do grupo M
para estimar a idade do ltimo ancestral comum (ver Quadro 1.2). H uma incerteza
considervel, mas a melhor estimativa a de que o ltimo ancestral comum dos vrus do
grupo M do HIV-1 ainda existia na dcada de 1930. Em princpio, esse ancestral comum
podia ter vivido em um chimpanz ou em um humano. No entanto, a evidncia disponvel mais compatvel com um hospedeiro humano (Hillis, 2000; Rambaut et al., 2001;
Sharp et al., 2001). A conseqncia que as linhagens do grupo M do HIV-1 originaramse em uma transferncia do SIV, dos chimpanzs para os humanos, que ocorreu h mais
de 60 anos.
Uma lio mdica do fato de que o HIV-1 derivado do SIVcpz a de que os chimpanzs constituem um importante grupo animal para estudo. As perguntas fundamentais que
ainda devem ser respondidas so as seguintes: Quo comum o SIVcpz na vida selvagem?
Como transmitido? E, talvez a mais importante, por que esse vrus no faz os chimpanzs
adoecerem?

A diversidade do HIV e a dificuldade de desenvolver uma vacina


Outra lio mdica das rvores evolutivas do HIV uma pista quanto razo de ser to
difcil, aos pesquisadores da AIDS, desenvolver uma vacina eficaz. As vacinas foram responsveis pelas histrias de grande sucesso no controle de doenas virais, da poliomielite
*

N. de T. Nome vulgar dos macacos da espcie Macaca arctoides. Fonte: Recomendao da Comisso das Comunidades Europias, de 18/06/2007, publicada no Jornal Oficial da Unio Europia de 30/07/2007; site acessado em
20/08/2007.

27

Os dois tipos principais de


HIV, o HIV-2 e o HIV-1, foram
transmitidos aos humanos
por diferentes fontes. O HIV2 originou-se dos mangabeis
fuliginosos, enquanto o HIV-1 foi
transmitido originalmente pelos
chimpanzs.

Cada subgrupo principal do


HIV-1 originou-se em eventos
independentes de transmisso
dos chimpanzs para os humanos.

28

Scott Freeman & Jon C. Herron

Quadro 1.2

Quando o HIV se transferiu dos chimpanzs para os humanos?

Neste quadro, descrevemos, em linhas gerais, o mtodo


usado por Bette Korber e colaboradores (2000) para estimar a poca do ancestral comum das linhagens do grupo
M do HIV-1. Esses pesquisadores analisaram as seqncias
nucleotdicas de 159 amostras diferentes de HIV-1.
Inicialmente, Korber e colaboradores reconstruram
uma rvore evolutiva a partir dos seus dados de seqncias. Essa rvore, mostrada na Figura 1.22a, no apresenta
raiz, parecendo um pouco diferente das rvores que vimos
anteriormente, na Figura 1.21. Cada ramo representa uma
determinada seqncia. Ao longo da rvore, a distncia da
ponta de um ramo ponta de outro indica a diferena
gentica entre duas seqncias. Essa rvore dividida em
vrios ramos diferentes, cujas linhagens de HIV so referidas como subtipos, sendo designadas por letras. O ponto de ramificao, no centro da rvore, ressaltado em cor
laranja, representa o ancestral comum das 159 seqncias
das pontas dos ramos.
A seguir, os mesmos pesquisadores prepararam um grfico que mostra a diferena gentica entre cada vrion da
rvore e o ancestral comum, em funo do ano em que o
vrion foi coletado (Figura 1.22b). Os vrions individuais
so representados no grfico por letras coloridas correspondentes ao seu subtipo. Como vimos na Figura 1.17a
(pgina 19), em relao aos vrions que evoluem no inte-

rior de um nico paciente, os vrions analisados na Figura


1.22b apresentam divergncia crescente com o passar do
tempo. Isto , quanto mais tarde a amostra foi coletada,
maior a sua diferena gentica com o ancestral comum.
A linha laranja a de melhor ajuste estatstico ao longo
dos dados plotados.
Finalmente, Korber e colaboradores extrapolaram
essa linha retrocedendo no tempo, a fim de estimarem
o ano em que uma amostra deveria ter sido coletada
para ter uma diferena gentica nula com o ancestral
comum (Figura 1.22c). Em outras palavras, retrocederam data de existncia do prprio ancestral comum. A
linha de melhor ajuste alcana zero em 1931. A extrapolao um pouco arriscada, podendo haver tambm
distores nos dados, devido a erros de amostragem. A
verdadeira relao entre a divergncia de seqncias e o
tempo poderia estar em qualquer lugar entre as linhas
cinzentas da figura. Com 95% de confiana, esses pesquisadores estimam que o ancestral comum dos vrions
de seu grupo M viveu durante o perodo entre 1915 e
1941, o que est indicado pela barra preta, no eixo horizontal da Figura 1.22c. Anlises adicionais realizadas
pela mesma equipe e por outras produziram estimativas
semelhantes (Salemi et al., 2001; Sharp et al., 2001; Yusim et al., 2001).

varola. A dificuldade de projetar drogas antivirais, aliada velocidade em que o HIV


desenvolveu resistncia s drogas, tornou o desenvolvimento de vacinas uma prioridade
urgente para a comunidade cientfica que pesquisa a AIDS. possvel projetar uma vacina
que torne as pessoas imunes ao HIV?
As vacinas funcionam aparelhando o sistema imune para responder imediatamente a
uma infeco. Para reagir s infeces bacterianas e virais, as clulas T devem identificar
uma protena do patgeno como estranha, ou no-prpria. Como vimos na Seo 1.3, um
fragmento dessa protena estranha que reconhecido como no-prprio e desencadeia
uma resposta das clulas T denominado eptopo. As vacinas constituem-se de eptopos de
vrions mortos ou enfraquecidos. Ainda que nenhuma infeco real ocorra aps a vacinao, o sistema imune responde ativando as clulas que reconhecem os eptopos apresentados. Caso uma autntica infeco se inicie posteriormente, o sistema imune est preparado
para reagir mais rapidamente do que, de outro modo, poderia reagir. Em geral, o invasor
eliminado antes que a infeco cause uma doena.
No caso do HIV, a maioria dos eptopos apresentados ao sistema imune derivada da
protena gp120 que recobre a superfcie do vrion (ver Figura 1.5 na pgina 7). Ento,
para ser eficaz, a vacina deveria conter eptopos da protena gp120 encontrada em muitas
linhagens diferentes de HIV. As rvores evolutivas que examinamos revelam a existncia de
muitos subgrupos diferentes de HIV-1 em conseqncia sua transmisso independente
dos chimpanzs para os humanos. A diversidade resultante das linhagens de HIV desafia

Anlise Evolutiva

(b)

Ancestral
comum
D

C
J
0,10

Figura 1.22 poca do ancestral comum de linhagens do grupo M do HIV-1. (a) rvore evolutiva sem
raiz para 159 amostras de HIV do grupo M. A ponta de
cada ramo representa um vrion; a distncia da ponta
de um vrion ponta de outro representa a diferena
gentica entre esses dois vrions. O ponto de cor laranja assinala o ancestral comum de todas as linhagens do
grupo M. (b) Este grfico mostra a diferena gentica
entre cada amostra de HIV em (a) e o ancestral comum, como uma funo da poca em que a amostra
foi coletada. A linha de melhor ajuste estatstico a
de cor laranja. (c) A extrapolao da linha de melhor
ajuste estatstico em (b) para a diferena gentica nula
fornece uma estimativa da poca em que o ancestral
comum existia. Segundo Korber et al. (2000).

0,18
0,16
0,14
0,12
0,10
1980

1985
1990
1995
Ano de coleta da amostra

2000

0,2

(c)
Divergncia do ancestral comum

0,20
Divergncia do ancestral comum

(a)

0,15

0,1

0,05

0
1900 1920 1940 1960 1980 2000
Ano de coleta da amostra

o desenvolvimento de vacinas. Alm disso, visto que a transmisso dos SIVs aos humanos
ocorreu repetidamente no passado, provvel que continue no futuro, tambm.
Os comprimentos dos ramos nas Figuras 1.21b e 1.22a sugerem que a divergncia
das seqncias alta, mesmo nos subgrupos de HIV-1. Na verdade, as protenas do envelope das linhagens de HIV do mesmo subgrupo podem diferir em cerca de 20%, e em
linhagens de subtipos diferentes essa diferena pode chegar a 35% (Gaschen et al., 2002).
Pesquisa de Tuofo Zhu e colaboradores (1998) tambm repisa esse aspecto. Os referidos
pesquisadores seqenciaram os genes de HIV-1 encontrados em uma amostra de sangue
obtida de um homem procedente do Congo, em 1959. Essa a amostra mais remota de
HIV descoberta at o momento. A anlise dos pesquisadores mostra que a amostra de
1959 notavelmente diferente das linhagens contemporneas. Nas prprias palavras dos
referidos autores (p. 596), a diversificao do HIV-1, h 40-50 anos passados, sinaliza
ainda para uma maior heterogeneidade viral nas dcadas vindouras. A rpida evoluo
do HIV, como a rpida alterao gentica observada geralmente nos vrus da gripe e do
resfriado, dificulta a produo de vacinas.
Os resultados do primeiro estudo amplo de uma vacina contra a AIDS foram publicados no incio de 2003 (Cohen, 2003a, b). A vacina AIDSVAX, produzida pela VaxGen,
no conseguiu proteger os indivduos que a tomaram mais do que um placebo. Muitos
pesquisadores esto pessimistas quanto s perspectivas de se descobrir, enfim, uma vacina
eficaz contra a AIDS (Korber et al., 1998; Letvin, 1998; Baltimore e Heilman, 1998). Outros no desistiram (ver Baltimore, 2000; Cohen, 2002b). No entanto, aqueles que conti-

29

30

Scott Freeman & Jon C. Herron

nuam a pesquisar por vacinas esto sofisticando suas estratgias de pesquisa (Gashen et al.,
2002; Nickle et al., 2003). Alguns, por exemplo, esto pesquisando vacinas regionais, com
eptopos similares aos do subtipo de HIV predominante localmente, em vez de vacinas
globais. A vacina regional possivelmente inclui eptopos semelhantes aos do ancestral comum inferido na reconstruo de uma rvore evolutiva de linhagens locais, maximizando
sua similaridade diversidade de linhagens existentes atualmente. As vacinas regionais
fornecem outro exemplo de como os mtodos analticos da biologia evolutiva servem
como instrumentos valiosos nas tentativas de melhorar a sade pblica. Discutiremos outra aplicao da anlise evolutiva no planejamento de vacinas no Captulo 14.

Resumo
Toda vez que invade uma clula hospedeira, um vrion de
HIV transcreve reversamente seu genoma de RNA em uma
cpia de DNA que funciona como molde para a prxima
gerao de partculas virais. Uma vez que a transcrio reversa propensa a erros, uma populao de HIV desenvolve rapidamente substancial diversidade gentica. Algumas
variantes genticas replicam-se depressa, enquanto outras
morrem. Conseqentemente, a composio da populao
ir modificar-se no decorrer do tempo, ou seja, a populao
evoluir.
Do mesmo modo que as populaes de HIV evoluem em
resposta seleo imposta pelos seus hospedeiros, tambm as
populaes hospedeiras podem evoluir em resposta seleo
imposta pelos vrus. Algumas populaes humanas possuem
variao gentica para a suscetibilidade infeco do HIV.
Se, durante uma epidemia de AIDS, os indivduos suscetveis
morrerem em taxas mais altas do que os resistentes, ao longo do tempo a composio gentica dessas populaes ir
modificar-se.
O potencial de evoluo rpida do HIV tem conseqncias profundas para os indivduos e para a sade pblica. No
interior dos indivduos infectados, as populaes de HIV desenvolvem, com rapidez, a resistncia a qualquer droga anti-

retroviral isolada e podem at mostrar resistncia aos coquetis de mltiplas drogas.


Sem um tratamento anti-retroviral eficaz, as populaes
de HIV tambm evoluem continuamente para escapar da
resposta imune do hospedeiro, um processo que, em ltima anlise, contribui para o colapso do sistema imune e o
incio da AIDS. Entre os indivduos infectados, o HIV diversifica-se to velozmente e a tal ponto que ser difcil ou
impossvel desenvolver uma vacina eficaz de amplo espectro.
Nossa maior esperana para reduzir a epidemia mundial de
AIDS continua sendo a educao individual voltada para o
incentivo da prtica de sexo seguro e do uso de agulhas nocontaminadas.
O HIV pertence a uma famlia de vrus que infectam diversos primatas. As rvores evolutivas com base em comparaes genticas revelam que o HIV-2 foi transmitido para os
humanos pelos mangabeis fuliginosos, enquanto o HIV-1 o
foi pelos chimpanzs, em mais de uma ocasio.
Focalizando, neste captulo, a adaptao e a diversificao
do HIV, introduzimos tpicos que repercutiro ao longo do
texto: mutao e variao, competio, seleo natural, reconstruo filogentica, diversificao de linhagem e aplicaes da
teoria evolucionista aos problemas cientficos e humanos.

Questes
1. Quando o HIV se introduziu na populao humana e de que
fonte partiu? Como sabemos disso?
2. Reexamine o processo pelo qual a populao de HIV desenvolve resistncia droga AZT no interior do hospedeiro
humano. Como um cenrio semelhante explicaria a evoluo da resistncia a antibiticos em uma populao de
bactrias?
3. No incio da dcada de 1990, os pesquisadores comearam a
encontrar linhagens de HIV-1 resistentes AZT em pacientes
com infeco recente, que jamais haviam recebido essa droga.
Como isso pode acontecer?
4. Que caractersticas do HIV contribuem para sua evoluo
rpida?

5. Conhecido o risco de evoluo de resistncia, voc sabe por


que no foram dadas altas doses de AZT imediatamente aos
dois pacientes mostrados na Figura 1.11, em vez de iniciar seu
tratamento com baixas doses?
6. A idia subjacente ao tratamento com mltiplas drogas para
o HIV aumentar o nmero de mutaes necessrias para
desenvolver resistncia e, portanto, reduzir a quantidade de
variao gentica da populao viral para sobreviver em presena das drogas. Poderamos obter o mesmo efeito usando
drogas anti-retrovirais em seqncia, em vez de simultaneamente? Por que sim, ou por que no?
7. Alguns mdicos defendem os feriados sem drogas como
uma maneira de auxiliar os pacientes com HIV a agentar
os efeitos colaterais do tratamento com mltiplas drogas. Se-

Anlise Evolutiva

gundo essa prescrio, com muita freqncia os pacientes parariam de tomar as drogas durante algum tempo. Sob o ponto
de vista evolucionista, essa parece uma boa idia ou uma m
idia? Justifique sua resposta.
8. Lembre-se de que discutimos dois tipos diferentes de seleo
neste captulo: a seleo de diferentes linhagens virais no interior de um hospedeiro e a seleo das linhagens virais que
so capazes de se transmitirem de um hospedeiro para outro.
Agora, considere a hiptese, defendida tradicionalmente pelos
pesquisadores da rea biomdica, de que os agentes que causam doenas evoluem naturalmente em formas mais benignas,
quando os sistemas imunes de seus hospedeiros desenvolvem
respostas mais eficientes contra eles. A evidncia que examinamos, sobre a evoluo do HIV intra e inter-hospedeiros,
compatvel com essa hiptese? Por que sim, ou por que no?
9. Os autores de fico cientfica freqentemente fazem declaraes interessantes sobre a evoluo:
a. Responda seguinte citao do Dr. Spock, personagem do
seriado Jornada nas Estrelas: Um parasita realmente bemsucedido o comensal, vivendo amistosamente com seu
hospedeiro ou at oferecendo-lhe vantagens, como, por
exemplo, os protozorios que vivem no sistema digestrio
dos trmites e digerem a madeira que eles comem. Um
parasita que regular e inevitavelmente mata seu hospedeiro
no consegue sobreviver por muito tempo, no sentido evolutivo, a menos que se multiplique com enorme rapidez;
ele no um pr-sobrevivente.

31

b. O HIV uma mquina molecular robtica diminuta.


Muitos livros de fico cientfica descrevem robs que
evoluem, tornando-se inteligentes e conscientes (e, geralmente, buscam a liberdade, desenvolvem emoes e
iniciam guerras com os humanos). Em que condies os
robs realmente poderiam evoluir? necessrio que os
robs se reproduzam, por exemplo?
10. Como o HIV-2 ilustra a transao entre virulncia (dano ao
hospedeiro atual) e transmisso (transferncia para novos hospedeiros)?
11. Alguns pesquisadores esperam que as populaes humanas
evoluam em resposta epidemia de AIDS, pois os alelos que
conferem resistncia infeco do HIV devem aumentar sua
freqncia na populao ao longo do tempo. Voc concorda
com essa predio? Caso afirmativo, quando e onde voc acha
que isso acontecer primeiro? Como voc planejaria um estudo para testar suas predies?
12. Suponha que o HIV fosse o ancestral dos SIVs, no o contrrio. Se os vrus de imunodeficincia fossem transmitidos,
originalmente, dos humanos para os macacos e chimpanzs,
faa um esboo de como seria, ento, a Figura 1.21a.
13. Nem todos os vrus so perigosos (o do resfriado comum
um exemplo). No entanto, o HIV quase 100% letal. Descreva as trs hipteses principais segundo as quais o HIV
to letal.

Explorando a literatura
14. A resistncia a drogas evoluiu em uma ampla variedade de
vrus, bactrias e outros parasitas. Os seguintes artigos descrevem a evoluo da resistncia a drogas no vrus da hepatite B
(HBV) e na bactria que causa a tuberculose:

dores utilizam, ento, uma rvore evolutiva reconstruda para


testar sua hiptese. Pense em como esse teste poderia funcionar. Se tal hiptese for verdadeira, como ser essa rvore? E se
for falsa? Depois, consulte o artigo de Trask et al.:

Blower, S. M., and T. Chou. 2004. Modeling the emergence of hot zones: tuberculosis and the amplification dynamics of drug resistance.
Nature Medicine 10: 11111116.

Trask, S. A., C. A. Derdeyn, U. Fideli, et al. 2002. Molecular epidemiology


of human immunodeficiency virus type 1 transmission in a heterosexual cohort of discordant couples in Zambia. Journal of Virology 76:
397405.

Shaw, T. A., A. Bartholomeusz, and S. Locarnini. 2006. HBV drug resistance: mechanisms, detection and interpretation. Journal of Hepatology
44: 593606.

15. Para documentao da natureza contingente da seleo natural no contexto da resistncia a drogas no HIV, veja:

Tambm veja uma interessante atualizao desse tpico, que


descobriu que o risco de adquirir o HIV de um parceiro infectado mais alto quando ambos compartilham certos alelos
do sistema imune:

Devereux, H. L.,V. C. Emery, M. A. Johnson, and C. Loveday. 2001. Relative fitness in vivo of HIV-1 variants with multiple drug resistanceassociated mutations. Journal of Medical Virology 65: 218224.

Dorak, M., J. Tang, J. Penman-Aguilar, et al. 2004. Transmission of HIV-1


and HLA-B allele-sharing within serodiscordant heterosexual Zambian couples. Lancet 363: 21372139.

16. Este artigo mostra que a mutao que torna o HIV resistente
droga anti-retroviral 3TC tambm torna a transcriptase reversa menos propensa a erros:

18. No Quadro 1.1, discutimos vrias classes novas de drogas


anti-HIV, incluindo os inibidores de fuso. Algumas drogas
desse tipo agem mediante ligao com a CCR5, impedindo
o HIV de se ligar a essa protena e us-la como co-receptora.
Imagine o tratamento de uma infeco de HIV apenas com
um desses antagonistas da CCR5. Como a populao de
HIV evoluiria em resposta? Isto , faa a predio dos tipos
de mutaes que poderiam atingir alta freqncia, porque
conferem ao HIV a capacidade de se replicar em presena da
droga. Depois leia:

Wainberg, M. A., W. C. Drosopoulos, H. Salomon, et al. 1996. Enhanced


fidelity of 3TC-selected mutant HIV-1 reverse transcriptase. Science
271: 12821285.

17. Stanley Trask e colaboradores (2002) formularam a hiptese


de que a maioria das transmisses do HIV-1 na frica Subsaariana ocorre entre casais. Ou seja, o marido adquire o HIV e
depois o transmite sua esposa, ou vice-versa. Esses pesquisa-

32

Scott Freeman & Jon C. Herron

Mosier, D. E., G. R. Picchio, R. J. Gulizia, et al. 1999. Highly potent


RANTES analogues either prevent CCR5-using human immunodeficiency virus type 1 infection in vivo or [remainder of title truncated to avoid giving away an answer]. Journal of Virology 73:
35443550.
Trkola, A., S. E. Kuhmann, J. M. Strizki, et al. 2002. HIV-1 escape from
a small molecule, CCR5-specific entry inhibitor does not involve
[remainder of title truncated to avoid giving away an answer]. Proceedings of the National Academy of Sciences USA 99: 395400.

Para mais informaes sobre essa classe de drogas, veja:


Krambovitis, E., F. Porichis, and D. A. Spandidos. 2005. HIV entry inhibitors: a new generation of antiretroviral drugs. Acta Pharmacologica Sinica
26: 11651173.

19. Veja o seguinte artigo para uma reviso dos recentes esforos
para desenvolver uma vacina contra o HIV:
Girard, Marc P., S. K. Osmanov, and M. P. Kieny. 2006. A review of vaccine research and development:The human immunodeficiency virus
(HIV). Vaccine 24: 40624081.

20. A AIDS gerou numerosas teorias marginais controversas. Algumas negam a relao entre o HIV e a AIDS, afirmando que
o HIV um vrus oportunista inofensivo e que a prpria
AIDS causada por outros fatores, como o abuso de drogas. Essas hipteses foram progressivamente desacreditadas nas
duas ltimas dcadas, mas ainda merecem crdito de muitas
pessoas, inclusive de homens homossexuais e alguns funcionrios de sade pblica (principalmente na frica do Sul). Outra hiptese marginal afirma que o HIV no se originou de
chimpanzs selvagens, mas de uma vacina oral experimental
contra a poliomielite, derivada de culturas de clulas de chimpanz e administrada a muitos africanos durante os ltimos
anos da dcada de 1950.
Leia mais sobre a histria e o estado atual dessas hipteses
nos artigos AIDS reappraisal e OPV AIDS hypothesis na

enciclopdia Wikipdia (www.wikipedia.org), editada publicamente. Em sua opinio, essas hipteses foram testadas adequadamente?
A hiptese OPV foi o tema de recente pesquisa. H pouco, os pesquisadores conseguiram obter amostras da vacina
contra a plio que foi usada na frica na dcada de 1950.
Mediante seqenciamento dos RNAs ribossmicos presentes nas vacinas, conseguiram testar se a espcie usada no preparo da vacina era realmente de chimpanz, como haviam
proposto. Alm disso, existem novas informaes sobre se e
onde havia populaes de chimpanzs selvagens que continham o tipo de SIV que tem relao mais prxima com o
HIV. Veja:
Berry, N., A. Jenkins, J. Martin, et al. 2005. Mitochondrial DNA and retroviral RNA analyses of archival oral polio vaccine (OPV CHAT)
materials: evidence of [rest of title deleted to avoid giving away the
answer]. Vaccine 23: 16391648.
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of pandemic and nonpandemic HIV-1. Science Express Reports (www.
sciencemag.org),10.1126/science.1126531.

21. Veja os seguintes artigos e websites para informaes recentes


sobre a pandemia de HIV:
Stover, J., S. Bertozzi, J-P Gutierrez, et al. 2006. The global impact of scaling up HIV/AIDS prevention programs in low- and middle-income
countries. Science 311: 14741476.
Guia e reviso de literatura recente sobre o HIV da revista New Scientist:
http://www.newscientist.com/channel/health/hiv
Manual mdico completo sobre o HIV, disponvel para baixar em PDF
gratuitamente: http://www.hivmedicine.com/
Website da AIDS do National Institute of Health: http://www.niaid.nih.
gov/daids/
Artigo detalhado sobre o HIV da enciclopdia Wikipdia, editada publicamente, com referncias, links e notcias recentes: www.wikipedia.
org/wiki/hiv

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