Extraccion Del Aceite de Romero

UNIVERSIDAD RAFAEL LANDVAR
FACULTAD DE INGENIERA
DEPARTAMENTO DE INGENIERA QUMICA
ANLISIS DE PARMETROS MICROBIOLGICOS Y FISICOQUMICOS DE

UN ACEITE ESENCIAL DE ROMERO OBTENIDO POR MEDIO DE LA
DESTILACIN POR ARRASTRE DE VAPOR
TESIS
Melisa Alejandra Rodas Ceballos

Carn: 1133806
Guatemala, Mayo 2012

Campus Central
UNIVERSIDAD RAFAEL LANDVAR

FACULTAD DE INGENIERA
DEPARTAMENTO DE INGENIERA QUMICA
ANLISIS DE PARMETROS MICROBIOLGICOS Y FISICOQUMICOS DE

UN ACEITE ESENCIAL DE ROMERO OBTENIDO POR MEDIO DE LA
DESTILACIN POR ARRASTRE DE VAPOR
TESIS
Presentado al consejo de la Facultad de Ingeniera
Por:
Melisa Alejandra Rodas Ceballos

Carn: 1133806
Previo a optar el ttulo de:
INGENIERO QUMICO
En el grado acadmico de:
LICENCIADO
Guatemala, Mayo 2012

Campus Central
DEDICATORIA Y/O AGRADECIMIENTOS
A DIOS
Por haberme permitido llegar hasta estos instantes de mi vida y poder cumplir una de mis
metas personales
A LA VIRGEN DEL SAGRADO CORAZN

Porqu ha sido mi protectora, mi gua y mi acompaante an en los momentos ms difciles
de mi vida, recordndome el poder de Dios por sobre todas las cosas.
A MIS PADRES
Adolfo Rodas y Maritza Ceballos de Rodas por su apoyo incondicional, por sus consejos,
por sus enseanzas durante toda mi vida, porque con su ejemplo me supieron educar de la
mejor manera, ensendome que con sacrificio y perseverancia se pueden lograr las metas
propuestas.
A MIS HERMANOS
Rita y Gustavo, por el apoyo incondicional y ser un ejemplo a seguir.
A MI BEBITO LINDO
Jaime Manolo Samayoa Gonzlez por su amor, su apoyo incondicional y llenar mi vida de
alegra.
A MI SOBRINOS
Juan Diego, Santiago, Isabella por llenar mi vida de alegra.
A MI ASESORA
Isis Lpez de Glvez por su apoyo, tiempo, esfuerzo, paciencia y consejos para lograr
alcanzar este objetivo.
RESUMEN EJECUTIVO
El presente trabajo titulado Anlisis de Parmetros Microbiolgicos y Fisicoqumicos de un

Aceite Esencial de Romero obtenido por medio de la Destilacin por arrastre de vapor,
surge de la necesidad de comparar dichos parmetros del aceite esencial de romero
obtenido de una planta cultivada en Guatemala con los parmetros internacionales
establecidos por la Norma UNE 84306:2006 y la Norma ISO 1342:2000.
El mtodo utilizado para la extraccin del aceite esencial fue la destilacin por arrastre de
vapor, para lo cual se realizaron varias destilaciones variando el tamao de batch de materia
prima 40, 50 y 60 gramos. Para los tamaos de batch de 40 y 60 gramos se realizaron dos
repeticiones y cinco repeticiones para el tamao de batch de 50 gramos.
Finalmente con el aceite esencial obtenido se determin el porcentaje de rendimiento y se

realizaron anlisis de parmetros bsicos (microbiolgicos, ndice de refraccin, densidad,
perfil cromatogrfico de aceites esenciales), para controlar la calidad del aceite esencial y
compararla con los parmetros internacionales establecidos.
Descriptores
Romero
Aceite esencial de romero
Destilacin por arrastre de vapor
NDICE
MARCO I
I.
INTRODUCCIN ............................................................................................................ 1
1.1.
Lo Escrito sobre el Tema ......................................................................................... 2
1.2.
Resumen Crtico del Marco Terico ........................................................................ 5
1.2.1. Aceite esencial ....................................................................................................... 5

1.2.2. Romero ................................................................................................................. 13
1.2.3. Preparacin preliminar de la materia prima ......................................................... 17
1.2.4. Control de Calidad de la Materia Prima .............................................................. 20
1.2.5. Aceite Esencial de Romero .................................................................................. 26
1.2.6. Control de Calidad de los Aceites Esenciales ...................................................... 28
1.2.7. Obtencin de Aceite Esencial por medio de Destilacin por Arrastre de Vapor a
Nivel Industrial .................................................................................................... 34
MARCO II
II.
PLANTEAMIENTO DEL P ROBLEMA ............................................................................ 40
2.1.
Objetivos ................................................................................................................ 42
2.1.1. Objetivo General .................................................................................................. 42

2.1.2. Objetivos Especficos ........................................................................................... 42
2.2.
Variables ................................................................................................................ 43
2.2.1. Variables Independientes ..................................................................................... 43

2.2.2. Variables Dependientes........................................................................................ 43
2.3.
Definicin de las Variables .................................................................................... 43
2.3.1. Variables Independientes ..................................................................................... 43

2.3.2. Variables Dependientes........................................................................................ 45
2.4.
Alcances y Lmites ................................................................................................. 47
2.4.1. Alcances ............................................................................................................... 47

2.4.2. Lmites ................................................................................................................. 47
2.5.
Aportes ................................................................................................................... 48
MARCO III
III.
3.1.
MTODO ..................................................................................................................... 50
Unidad de Anlisis ................................................................................................. 50
3.2.
Instrumentos........................................................................................................... 50
3.3.
Procedimiento ........................................................................................................ 53
3.3.1. Preparacin Preliminar de la Materia Prima ........................................................ 54

3.3.2. Anlisis Microbiolgico ....................................................................................... 54
3.3.3. Obtencin del Aceite Esencial de Romero .......................................................... 55
3.3.4. Densidad del Aceite Esencial de Romero ............................................................ 56
3.3.5. ndice de Refraccin del Aceite Esencial de Romero .......................................... 57
3.4.
Diseo y Metodologa Estadstico ......................................................................... 57
3.4.1. Diseo Experimental ............................................................................................ 57

3.4.2. Descripcin de las Unidades Experimentales ...................................................... 58
3.4.3. Variable Respuesta ............................................................................................... 58
3.4.4. Metodologa de Anlisis ...................................................................................... 58
MARCO IV
IV.
PRESENTACIN Y ANLISIS DE RESULTADOS ............................................................ 59
4.1.
Control de Calidad de la Materia Prima (Romero) ................................................ 59
4.1.1. Anlisis Organolpticos ....................................................................................... 59

4.1.2. Porcentaje de Humedad ....................................................................................... 60
4.1.3 Anlisis Higinico Microbiolgico ..................................................................... 60
4.2.
Control de Calidad del Aceite Esencial del Romero ............................................. 64
4.2.1. Propiedades Organolpticas ................................................................................. 64

4.2.2. Propiedades Fsicas .............................................................................................. 65
4.2.3 Cromatografa de Gases ...................................................................................... 66
4.3.
Porcentaje de Rendimiento del Aceite Esencial de Romero .................................. 74
MARCO V
V.
DISCUSIN .................................................................................................................. 75
5.1.
Control de Calidad de la Materia Prima (Romero) ................................................ 75
5.1.1. Anlisis Organolpticos ....................................................................................... 75

5.1.2. Anlisis Fisicoqumico Cuantitativo .................................................................... 75
5.1.3. Anlisis Microbiolgico ....................................................................................... 76
5.2.
Control de Calidad del Aceite Esencial del Romero ............................................. 78
5.2.1. Propiedades Organolpticos ................................................................................. 78
5.2.2. Propiedades Fsicas .............................................................................................. 79

5.2.3. Perfil Cromatogrfico .......................................................................................... 79
5.3
Porcentaje de Rendimiento del Aceite Esencial de Romero .................................. 82
MARCO VI
VI.
CONCLUSIONES .......................................................................................................... 85
MARCO VII
VII.
RECOMENDACIONES .................................................................................................. 87
MARCO VIII
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS ................................................................................ 89
8.1.
Referencia Bibliogrfica ........................................................................................ 89
MARCO IX
IX.
ANEXOS ..................................................................................................................... 95
9.1.
Anexo I (Glosario) ................................................................................................. 95
9.2.
Anexo II (Datos Originales).................................................................................. 97
9.3.
Anexo III (Cromatografa de Gases) .................................................................. 102
9.3.1. Cromatografa de gases del aceite esencial de romero Obtenido con un tamao de
batch de 40 gramos. ........................................................................................... 102
batch de 50 gramos. ........................................................................................... 106
batch de 60 gramos. ........................................................................................... 110
9.4.
Anexo IV (Densidad del Aceite Esencial de Romero) ....................................... 115
9.5.
Anexo V (Clculo de Muestra) ........................................................................... 116
9.6.
Anexo VI
(Especificaciones Reglamento Tcnico Centroamericano RTCA
71.03.45:07) .................................................................................................................... 120

9.7.
Anexo VII (Fotos) ............................................................................................... 121
NDICE DE TABLAS
Tabla No. 1: Composicin aproximada de las hojas secas de romero, 100 g. porcin
comestible ............................................................................................................................ 14
Tabla No. 2: Composicin qumica de las hojas de romero ................................................ 16
Tabla No. 3: Parmetros ms frecuentes utilizados en el control de calidad de las especies

vegetales aromticas ............................................................................................................ 21
Tabla No. 4: Caractersticas microbiolgicas del Extracto de Romero ............................... 22
Tabla No. 5: Especificaciones de limites microbianos expresados en UFC/ g, para

productos cosmticos ............................................................................................................ 22
Tabla No. 6: Componentes del aceite esencial de romero ................................................... 26
Tabla No. 7: Clasificacin de los parmetros analticos utilizados en el control de calidad

de aceites esenciales ............................................................................................................ 28
Tabla No. 8: Caractersticas organolpticas del romero, segn el control de calidad que se
debe llevar a la materia prima posterior a ser utilizada para la extraccin del
aceite esencial ...................................................................................................................... 59
Tabla No. 9: Porcentaje de Humedad Promedio. Segn el control de calidad de las especies
aromticas, con su respectiva desviacin respecto al valor terico ..................................... 60
Tabla No. 10: Anlisis microbiolgico del romero seco, segn el mtodo de recuento en
placa. Crecimiento de mohos y levaduras en el medio agar papa dextrosa, a las 72 horas de
incubacin a 32C ................................................................................................................ 60
placa. Crecimiento de Escherichia Coli en el medio agar chromocult, a las 72 horas de
incubacin a 32C ................................................................................................................ 62
placa. Crecimiento de aerobios mesfilos en el medio agar recuento total, a las 72 horas de
incubacin a 32C ................................................................................................................ 63
Tabla No. 13: Caractersticas organolpticas del aceite esencial de romero, segn los
parmetros analticos en el control de calidad de un aceite esencial ................................... 64
Tabla No. 14: ndice de refraccin promedio del aceite esencial de romero en los 3
diferentes tamaos de batch a 20C y su desviacin estndar respectiva. Utilizando las hojas
de romero secadas al ambiente ............................................................................................ 65
Tabla No. 15: Densidad del aceite esencial de romero. Utilizando las hojas de romero
secadas por medio de un horno de conveccin .................................................................... 65
Tabla No. 16: compuestos obtenidos en la cromatografa de gases del aceite esencial de
romero, con un tamao de batch de 40 gramos. Utilizando las hojas de romero secadas al
ambiente .............................................................................................................................. 66
ambiente ............................................................................................................................... 67
ambiente .............................................................................................................................. 68
Tabla No. 19: Comparacin de los compuestos obtenidos en la cromatografa de gases del
aceite esencial de romero, en los 3 diferentes tamaos de batch .......................................... 69
Tabla No. 20: Porcentaje de Rendimiento de la destilacin del aceite esencial por arrastre
de vapor del aceite esencial de romero obtenido en la destilacin por arrastre de vapor en
los 3 diferentes tamaos de batch ........................................................................................ 74
Tabla No. 21: Porcentaje de humedad presente en la planta de romero y el tiempo que
requiri la planta para obtener el porcentaje de humedad deseado ..................................... 97
Tabla No. 22: Datos generales del proceso de destilacin por arrastre de vapor, con 40
gramos de muestra (hojas de romero). Utilizando la planta secada al ambiente sobre papel
blanco de cocina .................................................................................................................. 97
blanco de cocina .................................................................................................................. 98
blanco de cocina ................................................................................................................. 99
gramos de muestra (hojas de romero). Utilizando la planta secada por medio del horno de
conveccin ........................................................................................................................... 99
Tabla No. 26: ndice de refraccin del aceite esencial de romero para los 3 diferentes
tamaos de batch, ledos a temperatura de 19C. Utilizando la planta secada al ambiente
sobre papel blanco de cocina ............................................................................................. 100
Tabla No. 27: ndice de refraccin del aceite esencial de romero para los 3 diferentes
tamaos de batch, a 20C. Utilizando la planta secada al ambiente sobre papel blanco de
cocina ................................................................................................................................. 101
Tabla No. 28: Densidad del aceite esencial de romero para 50 gramos de batch a 20.5C.
Utilizando la planta de secada por medio del horno de conveccin ................................... 101
Tabla No. 29: Porcentaje de Rendimiento del aceite esencial de romero obtenido en la
destilacin por arrastre de vapor en los 3 diferentes tamaos de batch. Utilizando la planta
secada al ambiente sobre papel blanco de cocina .............................................................. 101
NDICE DE FIGURAS
Figura No. 1: Planta de Romero .......................................................................................... 15
Figura No. 2: Esquemas de la parte de un horno ................................................................. 20
Figura No. 3: Principales Componentes de un equipo de extraccin mediante arrastre con

vapor .................................................................................................................................... 35
Figura No. 4: Mtodo para el recuento por dilucin para una solucin que contenga 100
bacterias por mililitro ........................................................................................................... 55
Figura No. 5: Equipo de destilacin por arrastre de vapor .................................................. 56
Figura No. 6: Secado de la planta de Romero sobre papel de envolver ............................ 121
Figura No. 7: Secado de la planta de romero en un horno de conveccin ........................ 121
Figura No. 8: Determinacin del porcentaje de humedad de la planta de romero por medio
de la balanza de humedad .................................................................................................. 122
Figura No. 9: Preparacin del extracto de romero para su anlisis microbiolgico ......... 122
Figura No. 10: Realizacin del mtodo de recuento por dilucin para su posterior sembrado
en un medio de cultivo ...................................................................................................... 122
Figura No. 11: Siembra del extracto de romero en el medio agar papa dextrosa, chromocult
y agar recuento total .......................................................................................................... 123
Figura No. 12: Lectura del nmero de colonias que crecieron en el medio agar papa
dextrosa .............................................................................................................................. 123
Figura No. 13: Lectura del nmero de colonias que crecieron en el medio chromocult ... 123
Figura No. 14: Lectura del nmero de colonias que crecieron en el medio recuento
total .................................................................................................................................... 124
Figura No. 15: Equipo de laboratorio utilizado para la destilacin por arrastre de vapor para
la obtencin del aceite esencial de romero ........................................................................ 124
Figura No. 16: Decantacin de la mezcla de agua y romero ............................................. 124
Figura No. 17: Filtracin de la mezcla de aceite y agua con sulfato de sodio anhidro ..... 125
Figura No. 18: Aceite esencial de romero obtenido .......................................................... 125
Figura No. 19: Determinacin de la densidad del aceite esencial de romero .................... 125
Figura No. 20: Refractmetro, utilizado para la determinacin del ndice de refraccin del
aceite esencial de romero ................................................................................................... 126
Figura No. 21: Cromatgrafo de gases, utilizado para la elaboracin de la cromatografa de

gases del aceite esencial de romero ................................................................................... 126
NDICE DE GRFICAS
Grfica No. 1: Cromatograma del aceite esencial de romero obtenido con un batch de
40 gramos ............................................................................................................................ 70
Grfica No. 2: Cromatograma del aceite esencial de romero, obtenido con un batch de
50 gramos ............................................................................................................................ 71
60 gramos ............................................................................................................................ 72
Grfica No. 4: Comparacin de los 3 cromatograma de aceite esencial de romero, obtenido

con los 3 diferentes tamaos de batch ................................................................................. 73
MARCO I
I. INTRODUCCIN
Guatemala, es un pas donde existen varios tipos de clima, lo cual hace que posea una
diversidad de recursos naturales que estn siendo rpidamente alterados debido a
factores fsicos, demogrficos y econmicos.
Lo anteriormente expuesto ha provocado que la mayor parte de la poblacin se

dedique a la agricultura, sin embargo, no se ha sabido aprovechar de la mejor manera
ya que la gran mayora de los productos que actualmente se cultivan, son los llamados
tradicionales, generando un incremento de la oferta en el mercado, lo que provoca
que los precios de estos productos disminuyan, tomando en cuenta que estos
productos se exportan hacia otros pases para su posterior procesamiento, las
empresas exportadoras logran conseguir dichos productos a muy bajo precio,
logrando aumentar sus ganancias y disminuyendo los ingresos para los agricultores
nacionales.
El romero es una planta cultivable en todo tipo de suelo, lo cual, lo hace una opcin
viable para producirlo en todas las regiones del pas. El romero se puede cultivar
predominantemente en la regin del altiplano y norte del pas ofreciendo a la
poblacin de esta regin una opcin ms en materia de cultivos. Actualmente el
romero se utiliza para aliviar dolores musculares, para obtencin de aceite esencial y
como aromatizante.
Los aceites esenciales son las sustancias que forman la esencia odorfera de un gran
nmero de especies vegetales. Tienen un gran potencial de aplicacin en distintas
industrias, tal es el caso del romero, principalmente en la cosmtica y farmacutica.
Actualmente en Guatemala, la produccin de aceite esencial de romero es poca, lo

cual hace difcil y complicado la obtencin del mismo. En el proyecto que se presenta
a continuacin se desarrollar el mtodo (destilacin por arrastre de vapor), para la
1
obtencin del aceite esencial de romero y se determinaran sus propiedades

organolpticas, fsico-qumicas y microbiolgicas.
El presente proyecto surgi de la necesidad de poder determinar los parmetros

microbiolgicos y fsico-qumicos del aceite esencial de romero obtenido de una
planta cultivada en Guatemala; adems beneficiar al pas, con el fin de aprovechar
de una mejor manera los recursos naturales. Beneficiar a la poblacin ya que da una
opcin al sector agrcola de poder cultivar una planta que no requiere de cuidados
especiales para su proliferacin y a las diferentes industrias ya que se podr disponer
del estudio de dicho aceite esencial para analizar su posible utilizacin principalmente
en productos cosmticos y farmacuticos.
1.1. Lo Escrito sobre el Tema
Guenther (1948), public sus textos sobre Aceites Esenciales, los cuales son un
tratado sobre la produccin, composicin qumica, aplicaciones y anlisis de
estos productos. Realiz un estudio completo de varios aceites esenciales de todo
el mundo y su libro es uno de los ms importantes en ste tema.
Cisneros (1988), en su trabajo de graduacin Destilacin industrial del aceite de

citronela, en el cual concluye que la destilacin por arrastre de vapor es el mejor
mtodo a utilizar con un consumo de vapor de 15 lt vap/min a presiones entre 70
y 80 psi. Recomienda metalizar de aluminio el tanque de destilacin para
producir aceite de calidad.
Piedrasanta (1997), en su trabajo de graduacin Extraccin de aceites esenciales

de romero con la aplicacin del mtodo de destilacin por arrastre de vapor,
variando los tamaos de batch a partir de pruebas a nivel de laboratorio y pruebas
a nivel de planta piloto, en el cual se determina que en la medida que la
temperatura de condensacin es menor, se va a obtener una mayor cantidad de
2
aceite esencial y de mejor calidad. Adems concluye que el rendimiento del

aceite esencial es directamente proporcional al tamao del batch.
Bandoni (2002), public su texto Los recursos vegetales aromticos en

Latinoamrica, en el cual se presentan las principales particularidades de las
plantas, la relevancia y conveniencia de su explotacin, algunas de las
propiedades que le otorgan mayor valor comercial, su manejo agrcola, los
principales procesamientos industriales que las involucran, la metodologa para
evaluar sus calidades, sus mercados y su nivel de explotacin en la regin.
Lpez (2003), en su trabajo de graduacin Estudio de factibilidad de una planta

de extraccin de aceite esencial y oleorresina de pimienta, donde concluye que la
industria de los aceites esenciales y oleorresinas es una oportunidad de desarrollo
sostenible para la agroindustria guatemalteca.
Pineda (2005), en su trabajo de graduacin Comparacin del rendimiento y

caracterizacin del aceite esencial crudo de Citronella, variando el tamao de
muestra y el contenido de humedad, aplicando el mtodo de extraccin por
arrastre con vapor a nivel laboratorio concluye que no existe diferencia
significativa en el rendimiento del aceite esencial crudo de citronella, cuando ha
sido extrado de muestras con diferentes contenidos de humedad.
Santos (2006), en su trabajo de graduacin Evaluacin del rendimiento de Aceite

Esencial de Hinojo (Foeniculum Vulgare Miller) procedente de dos niveles
altitudinales de Guatemala, concluye que hay diferencia significativa en las
propiedades fisicoqumicas y composicin del aceite esencial extrado de los dos
niveles altitudinales de Guatemala.
Innatia (2007), en su artculo public las propiedades medicinales del aceite de

romero, lo utilizan en la aromaterapia, debido a que posee una fuerte capacidad
vigorizante que ayuda a mejorar el sistema de defensa del cuerpo y la circulacin
3
sangunea, actuando como preventivo de alergias, problemas en las vas

respiratorias y enfermedades virales. Tambin indic que se utiliza para limpiar
la piel, como tratamiento para la cada del cabello, caspa, fatiga mental, dolores
de cabeza y jaqueca.
Quezada (2008), en su trabajo de graduacin Evaluacin del rendimiento de

extraccin del aceite esencial crudo de organo proveniente de dos zonas de
distinta altitud, por medio del mtodo de arrastre de vapor a nivel planta piloto
concluye que se obtuvo un mejor rendimiento de extraccin de aceite esencial de
organo de las plantas cultivadas en Salama, Baja Verapaz comparadas con las
cultivadas en Zacapa, Zacapa.
Ramrez (2008), en su trabajo de graduacin Extraccin por arrastre de vapor y

anlisis de propiedades antioxidantes del aceite esencial de romero concluye que
la destilacin por arrastre de vapor, es una buena tcnica para la obtencin de
aceites esenciales, ya que no afecta las propiedades del aceite obtenido.
1.2. Resumen Crtico del Marco Terico
1.2.1. Aceite esencial
Segn Gunther (1948), un aceite esencial es un aceite voltil que se obtiene

por medio de la destilacin por vapor de la planta. Los aceites esenciales son
los compuestos odorferos de las mismas y se pueden aislar, se volatilizan con
vapor pero son poco solubles en agua; se evaporan a diferentes velocidades
bajo presin atmosfrica ordinaria y a una temperatura ambiente promedio de
24 C.
Los aceites esenciales se encuentran en las flores, hojas, races, frutos,

semillas y en la corteza de los vegetales. Los aceites se forman en las partes
verdes (que contienen clorofila) de la planta y cuando crece la planta stos son
transportados a los brotes en flor.
Los aceites esenciales poseen las propiedades caractersticas de ser voltiles y

de origen vegetal. La mayora son insolubles en agua y solubles en medio no
polar (benceno) y tambin pueden tener una alta solubilidad en ter y
alcohol. Dependiendo de su estructura qumica los aceites esenciales se
pueden clasificar en 6 clases: cetonas, alcoholes, esteres, lactonas, aldehdos y
xidos. Poseen normalmente una densidad menor a la del agua, refractan la
luz polarizada y normalmente su ndice de refraccin es elevado, tambin
presentan un poder rotatorio caracterstico.
Cuatro grupos principales, que son caractersticos de la mayora de los aceites

esenciales: terpeno (relacionados con isopreno o isopenteno), compuestos de
cadena lineal que no contengan las ramas laterales, derivados del benceno y
otros. Por otra parte, los aceites esenciales se pueden clasificar en dos grandes
grupos de compuestos orgnicos: los que contiene hidrgeno y carbono y los
que contienen carbono, hidrgeno y oxgeno.
5
Los aceites esenciales poseen un gran nmero de constituyentes, por lo que

sus especificaciones se basan en propiedades fsicas como: ndice de
refraccin, gravedad especfica y rotacin ptica, las cuales dependen de la
composicin qumica del aceite y se relacionan entre s.
El mismo autor establece que, la funcin de los aceites esenciales en la planta

no est totalmente definida, slo posee algunas hiptesis como:
1. Los aceites esenciales disminuyen la transpiracin de la planta, debido a

que penetran en los espacios intracelulares.
2. Benefician la circulacin de sustancias nutritivas en la planta, la cual

regula su metabolismo.
3. Disminuyen el crecimiento de hongos en las plantas y las protegen contra
los insectos, ya que son compuestos aromticos.
4. Pueden proporcionar un medio de preservacin a las plantas.
Comnmente las plantas ms jvenes producen una mayor cantidad de aceite

que las plantas de mayor edad. Las plantas de mayor edad dan como resultado
aceites ms oscuros y resinosos, debido a la evaporacin contina de las
fracciones ms ligeras del aceite. Al igual que las plantas en la etapa de
florecimiento producen una mayor cantidad de aceite en comparacin con las
plantas despus de florecer y cuando stas brotan.
La composicin de un aceite esencial puede variar dependiendo de la poca de

recoleccin de la planta, el lugar geogrfico o pequeos cambios genticos.
Composicin Qumica de los Aceites Esenciales Naturales
Los aceites esenciales contienen principalmente compuestos orgnicos

lquidos, los cuales son ms o menos voltiles. Su composicin qumica es:
(Piedrasanta, 1997)
a) steres: principalmente de cido benzoico, actico, saliclico y

cinmico.
b) Alcoholes: linalool, geraniol, citronelol, terpinol, mentol, borneol.
c) Aldehdos: citral, citronelal, benzaldehdo, cinamaldehdo, aldehdo
cumnico, vainilla.
d) cidos: benzoico, cinmico, mirstico, isovalrico; los que se
encuentran en estado libre.
e) Fenoles: eugenol, timol, carvacrol.
f)
Cetonas: carvona, mentona, pulegona, irona, fenchona, tujona,

alcanfor, metilnonil cetona, metil heptenona.
g) teres: cineol, ter internoo eucaliptol, anetol, safrol.

h) Lactonas: cumarina
i)
Terpenos: canfeno, pineno, limoneno, felandreno y credeno.
j)
Hidrocarburos: cimeno, estireno o feniletileno
Procesos de Obtencin de Aceites Esenciales Naturales
Se puede obtener aceite esencial por medio de los siguientes mtodos:

Destilacin en corriente de vapor o destilacin con arrastre de
vapor.
Maceracin.
Enfleurage (en este proceso se utiliza grasa como disolvente).
Extraccin con solventes voltiles.
Los aceites esenciales obtenidos por los mtodos mencionados con

anterioridad, se purifican por medio de destilacin al vaco. En el presente
trabajo de investigacin, se describir nicamente el primer mtodo de
obtencin de un aceite esencial.
Destilacin por arrastre de vapor

Guenther (1948), la destilacin se define como la separacin de
componentes de una mezcla de 2 o ms lquidos por medio de la diferencia
de su presin de vapor. (Pg. 88)
Pavia, Lampman y Kriz (1988), afirman que la destilacin simple y
fraccionada son aplicables nicamente a mezclas que son completamente
miscibles (solubles). Tambin definen la destilacin por arrastre de vapor
como el vapor que es usado para proveer una fase inmiscible. (Pg. 582)
El proceso de destilacin por arrastre de vapor se utiliza para recuperar una

de las fases inmiscibles y es el mtodo ms empleado para separar el aceite
esencial de las plantas. Tambin se utiliza para separar compuestos que
poseen puntos de ebullicin altos y se descomponen cerca de sus puntos de
ebullicin.
Cualquier sustancia que posee un punto de ebullicin determinado es

voltil y posee una presin de vapor definitiva, la cual depende de la
temperatura a la cual prevalece y sta es muy baja en comparacin a las
sustancias que poseen un punto de ebullicin alto. La ventaja de ste
mtodo es que el material destila a una temperatura menor a los 100C y se
deben mantener presiones menores a la atmosfrica. S las sustancias son
inestables o con un alto punto de ebullicin deben ser removidas de una
mezcla, para evitar la descomposicin. Como todos los gases se mezclan,
las dos sustancias pueden mezclarse en el vapor y codestilar. Cuando el
8
componente deseado (aceite) se enfra, se separa del agua por medio de un

decantador o vaso florentino. La destilacin por arrastre de vapor es
utilizada para aislar slidos y lquidos de fuentes naturales.
Existen 3 tipos de procesos de destilacin por medio de una corriente con

vapor, para producir aceite esencial (Gunther, 1948):
1. Destilacin en agua: mtodo en el cual se destila la planta en

contacto directo con el agua hirviendo, la cual es calentada por medio
de fuego directo, serpentn y chaqueta de vapor, la planta puede estar
sumergida o flotando en el agua dependiendo de su gravedad
especfica. Las flores de la planta se deben destilar por medio de ste
mtodo, porque al entrar en contacto con el vapor forman
aglomeraciones y se aglutinan, evitando el paso del vapor.
2. Destilacin en agua y vapor: el mtodo consiste en colocar la planta

en una placa perforada, la cual se coloca sobre el fondo del
alambique. Se llena con agua la parte inferior del alambique hasta por
debajo de la placa, se calienta el agua. El material de la planta
siempre est en contacto con vapor y no con agua hirviendo, el vapor
utilizado es saturado y hmedo.
3. Destilacin con vapor directo: es semejante al mtodo 2, con la

diferencia que no se encuentra agua en el fondo de alambique. En
ste mtodo se utiliza vapor saturado, sobrecalentado o seco, el cual
se genera por medio de una caldera.
Los principios que acompaan la destilacin por arrastre de vapor son:

(Guenther, 1948)
1. Difusin de los aceites esenciales y agua caliente a travs de las

membranas de la planta.
2. La hidrlisis de ciertos componentes de los aceites esenciales: La

hidrlisis se define como una reaccin qumica entre el agua y
algunos constituyentes del aceite esencial. Estos productos
naturales consisten parcialmente en esteres, que estn compuestos
de cidos orgnicos y alcoholes. En presencia de agua y sobre
todo en temperaturas elevadas los esteres tienden a reaccionar con
el agua, por lo que se debe evitar mucha cantidad de agua en el
alambique y un perodo de destilacin corta.
3. La descomposicin ocasionada por el calor: la destilacin se debe

llevar a cabo a una temperatura menor de 100C y una presin
menor a la atmosfrica, porque los constituyentes de los aceites
esenciales se descomponen a altas temperaturas.
Siguiendo las siguientes recomendaciones se obtiene un mejor rendimiento

y una mayor calidad del aceite esencial: (Guenther, 1948)
1. Mantener una temperatura lo ms baja posible, sin olvidar que la tasa

de produccin ser determinada por la temperatura.
2. En la destilacin por vapor, usar la menor cantidad de agua posible

que este en contacto directo con el material vegetal, pero se debe
tomar en cuenta que un poco de agua debe estar presente para
promover la difusin.
10
3. La trituracin del material vegetal antes de la destilacin, tomando en

cuenta que la reduccin excesiva del material vegetal resulta en la
formacin de canales de vapor a travs de la masa del material
vegetal, reduciendo la eficiencia debido al poco contacto entre el
vapor y la carga.
La destilacin por arrastre de vapor es utilizada para destilar compuestos

con punto de ebullicin altos que se descomponen en o cerca de sus puntos
de ebullicin, por lo que se pueden destilarse con vapor de agua a una
temperatura lo suficientemente baja para evitar su descomposicin.
Los diferentes constituyentes del aceite esencial son obtenidos en la

destilacin del material vegetal en el orden de sus puntos de ebullicin, por
lo que las fracciones de alto punto de ebullicin sern las ltimas en
destilar, generalmente con muy poco aceite. S el tiempo de destilacin es
muy corto, los constituyentes con punto de ebullicin alto no se obtienen y
se pierden. El tiempo de destilacin se elige con mucho cuidado, tomando
en cuenta que las destilaciones por arrastre de vapor duran entre dos, tres o
ms horas, segn la planta que se destile.
Los aceites esenciales que poseen constituyentes con punto de ebullicin

alto, se pueden aislar y purificar combinndolos con un lquidos inmiscible
con un punto de ebullicin menor. La temperatura de ebullicin de la
mezcla heterognea (lquidos inmiscibles) es inferior a la de cualquiera de
los dos por separado, sta es cercana a la temperatura del disolvente,
debido a que el vapor que se genera al inicio de la destilacin es ms rico
en el componente ms voltil (agua).
Cuando dos lquidos inmiscibles estn mezclados, dando una mezcla

heterognea,
cada
uno
ejerce
su
propia
presin
de
vapor,
independientemente uno del otro. El trmino de fraccin molar no aparece

11
en la ecuacin, debido a que los componentes son inmiscibles. Solamente

se suma la presin de vapor de los lquidos puro PA y PB a una temperatura
dada, para obtener la presin total sobre la mezcla. Cuando la presin total
es igual a 760 mmHg, la mezcla ebulle. (Pavia, Donald, Lampman, Gary y
Kriz, 1988)
Ptotal
Paceite
Pagua
La relacin de las presiones de vapor de dos lquidos, es directamente

proporcional a las concentraciones molares de ambas sustancias en la fase
gaseosa, por la ley de Dalton. La siguiente ecuacin define la composicin
del vapor de una mezcla inmiscible, P la presin de vapor: (Pavia, Donald,
Lampman, Gary y Kriz, 1988)
Paceite
Pagua
Moles aceite
Moles agua
vapor
Los lquidos inmiscibles se comportan como lo hacen, debido a una

incompatibilidad extrema entre los dos lquidos, lo cual conduce a una
mayor presin de vapor combinada, que la ley de Raoult podra predecir.
La alta presin de vapor combinada causa un punto de ebullicin bajo de la

mezcla, que por cada uno de los componentes por separado. Ninguno de los
dos lquidos se disuelve apreciablemente en el otro por lo que es evidente
que no obedece la ley de Raoult.
La composicin de vapor de dos lquidos inmiscibles es independiente de

la cantidad de A y B presente. Por lo tanto, la composicin de vapor debe
permanecer constante durante la destilacin de los lquidos. Los lquidos
inmiscibles actan como si fueran destilados simultneamente en
12
compartimientos separados, aunque en la prctica estn mezclados durante

la destilacin. Todos los gases se mezclan, ellos forman un vapor
homogneo y co-destilan.
La composicin de un destilado es constante durante una destilacin con

vapor, esto tambin requiere que el punto de ebullicin de la mezcla sea
constante. La mezcla debe ser inferior al punto de ebullicin del agua
(100C) y de la sustancia pura. Entre ms alto es este de la sustancia pura,
ms cerca sta de la temperatura de destilacin por vapor, pero no excede
los 100C. Una sustancia puede ser codestilada junto con agua a una
temperatura menor a los 100C, esto evita la descomposicin que puede
ocurrir a altas temperaturas con destilacin simple.
Para lquidos inmiscibles las proporciones molares de dos componentes y

la relacin de su presin de vapor en el punto de ebullicin de la mezcla en
la destilacin equivalen al peso de los dos lquidos que forman el destilado.
La relacin de pesos en el vapor depende de sus pesos moleculares, donde
W indica el peso y M el peso molecular. (Pavia, Donald, Lampman, Gary y
Kriz, 1988)
Waceite
Wagua
M P
M P
aceite
agua
1.2.2. Romero
Descripcin del Romero
La descripcin botnica de la planta es: (Valle, 2006)
Nombre vulgar: Romero

Nombre botnico: Rosmarinus officinalis L.
Reino: Vegetal
13
Subreino: Embryobionta
Divisin: Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsida
Subclase: Asteridae
Orden: Lamiales
Familia: Labiacease (Labiatae)
Gnero: Rosmarinus L.
Especie: Rosmarinus officinalis L.
Es un arbusto aromtico de color verde, puede medir hasta 1.2m de alto,

posee un tallo erecto con numerosas ramas, corteza exfoliante, finamente
puberulenta. Sus hojas son
gruesas, duras al tacto, opuestas, verdes,
numerosas, glandulares, obtusas, de 1-3 cm de largo, casi cilndricas y

dobladas hacia adentro. Sus flores son fragantes de 10-12 mm de largo en
pequeos grupos terminales, cliz bilabiado, color violeta, estilo largo. Su
fruto es ovalado y est divido en 4 secciones. Las hojas poseen un aroma a
eucalipto fresco, con olor alcanforado. El gnero (romero) se compone de
una sola especie. (Cceres, 1996)
Tabla No. 1: Composicin aproximada de las hojas secas de romero, 100g, porcin
comestible
Agua
Energa del alimento
9.3 g
331 kcal
Magnesio
Fsforo
220 mg
70 mg
Protena
4.9 g
Potasio
955 mg
Grasa
15.2 g
Sodio
50 mg
Total
de 64.1 g
Zinc
3 mg
carbohidratos
Fibra
17.7 g
cido ascrbico 61 mg
Ceniza
6.5 g
Niacina
1 mg
Calcio
1280 mg
Vitamina A
3128 IU
Hierro
29 mg
Otras vitaminas
Insignificante
Fuente: Farrell (1985)
14
Figura No. 1: Planta de Romero
Fuente: Aromaterapia (2011)
Hbitat
Se le encuentra desde el nivel del mar hasta los 1.500 m. de altitud en las
montaas ms clidas; prospera mejor en el piso basal que en el montano;
prefiere las zonas bajas o medias. Un menor rendimiento en la produccin
del aceite esencia se da cuando se cultiva a una mayor altitud.
Arbusto nativo de la cuenca del mediterrneo del sur de Europa, se cultiva

comercialmente en Europa y Norte Amrica en clima templado y
templado- clido. Se introdujo en toda Amrica para ser cultivado en clima
templado y seco en alturas variables. En Guatemala es cultivado en varios
departamentos, especialmente en el Altiplano central y Norte del pas.
(Cceres, 1996)
Agricultura
El romero tiene una zona de vida a una temperatura de 9-28C, con una
precipitacin anual de 0.3- 2.7m y un pH del suelo de 4.5-8.7. Es un
arbusto aromtico tolerante a la sequia, puede crecer en suelos rocosos y
arenosos, bien drenados y poco profundos. Se comercializa por semilla, los
cuales tienen un poder germinativos de 40%. En los viveros se siembran al
aire libre, los cuales se riegan constantemente y logran enraizar de 2-3
15
meses. Es un cultivo poco exigente, pero requiere fertilizacin orgnica,

debido a que es atacado por colepteros y nematodos. Las hojas se secan a
la sombra, para obtener aceite esencial u oleorresina, para ello se prefieren
los brotes florales, los rendimientos esperados son de 1.5- 2 ton/h de hojas
secas o 10- 15 kg/h de aceite esencial. La planta de romero se cosecha 2
veces al ao. (Cceres, 1996)
Composicin Qumica
Tabla No. 2: Composicin qumica de las hojas de romero
Aceite esencial
cidos
orgnicos
clorognico,
(cafeico, Taninos
fenlico,
neoclorognico, rosmarnnico)
Polifenoles
Alcaloides
deterpnicos Salvigenina
(rosmaricina)
Pigmentos
Flavonas (repitrina)
Flavnicos
Diterpenoides
Hispidulina
(picrosalvina, Genkwareno
romdiol, rosmarinol)
Glucsidos (apigenina, cido urslico
Nepetina
luteolina)
Fuente: Cceres (1996)
El cido rosmarnico posee actividad microbiana, antiviral, antiinflamatoria y antioxidante. Los cidos orgnicos le confieren a las hojas
de romero propiedades colerticas y diurticas, accin que es reforzada por
flavonoides, las cuales son espasmolticos. Los diterpenoides exceptuando
el rosmariquinona contribuyen a las propiedades biolgicos.
16
Historia del Romero
En la Edad Media, su nombre fue cambiado por la palabra Latina

rosmarinus, que significa roco del mar, a Rosa Mara o romero, en honor
a Mara, madre de Jess. Fue utilizado como incienso para las ceremonias
fnebres. Los rabes escribieron que el romero confort el cerebro, la
memoria y los sentidos internos. En los hospitales de Francia, se quemaba
el romero con enebro para sanitizar el aire y prevenir infecciones.
El aceite de romero fue utilizado por muchos dispensarios del boticario

para prevenir la calvicie. En el tiempo romano, el romero era smbolo de
fidelidad. El romero tambin fue utilizado como perfume para el bao de
las damas en Turqua.
1.2.3. Preparacin preliminar de la materia prima
Durante el proceso de recoleccin de la planta, las hierbas, hojas y flores, se

degradan, por lo que se debe realizar la misma en un perodo corto de tiempo.
Las semillas, frutos, racimos y rizomas no se degradan despus del

almacenamiento.
El control microbiolgico de la planta, se realiza por razones toxicolgicas y

de higiene.
El control de humedad es importante para la conservacin de la planta

aromtica. Se debe evitar el secado de la planta a pleno sol, porque las
sustancias activas se reducen o alteran por efecto de los rayos solares, y las
plantas ricas en aceites esenciales pueden perder entre un quinto y una tercera
parte de esas materias.
17
Se debe tomar en cuenta que antes de secar las plantas, se riegan para
limpiarlas de la tierra o polvo. Este se puede realizar con calor natural o
artificial; sea cual sea el sistema. El propsito es eliminar progresivamente la
humedad contenida en las partes tiles, mediante tcnicas adecuadas a cada
especie, de forma que no se pierdan o devalen las sustancias que se pretende
retener. Por lo que el control de la humedad es importante para la
conservacin de la materia vegetal.
Para aumentar la superficie de contacto, se debe triturar la planta para poder

as exponer ms glndulas de aceite y de la misma manera se reduce el grueso
de la planta. Esto permite una destilacin ms rpida, una mejor calidad y un
mayor rendimiento del aceite. La trituracin no debe ser excesiva porque las
glndulas que contienen el aceite se rompen y ste es liberado. El aceite
presenta una mayor fermentacin y auto-oxidacin, cuando se almacena en
presencia de aire y de las enzimas de la misma. Las partes no fibrosas de la
planta como las flores, hojas, etc., se pueden destilar sin realizar previamente
la trituracin.
Secado de la Planta
Proceso que permite extraer la humedad que contiene, para evitar que se
pudra o pierda las sustancias activas, adems permite que pueda ser
almacenada durante un tiempo determinado antes de su utilizacin. Antes
de secar la planta se riegan para limpiarlas de tierra, polvo e impurezas.
La planta se puede reducir en polvo y perder sus sustancias activas, si el

tiempo de secado es excesivo; un tiempo escaso de secado, provoca que la
humedad residual la haga enmohecer o pudrirse. La planta de romero no
se debe secar a pleno sol, porque las sustancias activas se reducen o se
alteran por efecto de los rayos solares.
18
En el proceso de secado, la prdida de la esencia es mayor que durante su

almacenamiento despus de haber sido secada, porque durante el primer
perodo de secado la planta aromtica retiene mucha humedad en sus
clulas y por medio de la difusin lleva su esencia hacia la superficie y la
ayuda a evaporarse.
Tiene como objetivo reducir tiempo de destilacin y disminuir la actividad

enzimtica de la planta que puede descomponer los principios aromticos,
por lo que debe ser un secado rpido. Segn Bandoni (2002), el proceso de
secado se realiza, hasta que, ste tenga un porcentaje de humedad entre 8%
a 15%.
a.
Horno para Laboratorio
Los hornos de laboratorio se utilizan para secar, calentar y cultivar

muestras y material de laboratorio. Pueden alcanzar una temperatura
mxima de 300C. La transferencia de calor se realiza mediante
conveccin que es el proceso por el cual el aire caliente asciende y el
aire frio desciende, permitiendo que se lleve a cabo dicho proceso por
medio de las resistencias incorporadas en las paredes interiores del
horno. Existe entrada de aire nuevo por medio de renovacin. Su
funcionamiento es ms eficaz y seguro, debido a que se controla la
temperatura mediante el termostato y el termmetro de forma
constante, siendo viable apagarlo en cualquier momento si se observa
que hay peligro.
19
Las partes de un horno son:
Figura No. 2: Esquemas de la parte de un horno
Fuente: Scribd (2011)
1.2.4. Control de Calidad de la Materia Prima
El control de calidad de la materia prima de las especies aromticas, es

importante, ya que sirve para garantizar la obtencin de un aceite esencial que
sea apto para consumo en la industria.
Segn Bandoni (2002), el objetivo del control de las especies vegetales

aromticas es asegurar lo siguiente:
La identidad del material, es decir, confirmar que corresponde a la parte de

la planta y a la especie vegetal prescrita.
Que se encuentra en las condiciones adecuadas de comercializacin en lo

que se refiere a su estado de conservacin y pureza.
Que contiene la cantidad adecuada de aceite esencial y que su composicin

es la correcta.
20
Para conseguir los objetivos se utilizan, los 5 tipos de anlisis que se resumen
en la tabla siguiente:
Tabla No. 3: Parmetros ms frecuentes utilizados en el control de calidad de las especies

vegetales aromticas.
TIPOS DE ANLISIS
PARMETROS ANALIZADOS
Y/O MTODOS MS
UTILIZADOS
Olor
Organolpticos
Color
Sabor
Anlisis macroscpico
Morfo-Anatmicos
Contenido de elementos extraos

Estudio de cortes histolgicos
Estudio de la micrografa del polvo
Histoqumica
Cualitativos
Reacciones de caracterizacin
Anlisis cromatogrficos por CCF,
CLAR o CG
Humedad
Fisicoqumicos
Contenido de aceite esencial

Contenido de otros constituyentes
Materia extrada con diferentes
Cuantitativos
disolventes
Cenizas totales, insolubles en HCl,
etc.
Metales pesados
Pesticidas- agroqumicos
Radioactividad residual
Microbiolgico Microorganismos aerobios totales
21
(bacterias, mohos, levaduras)
Higinico
Entero-bacterias, Escherichia coli,

Salmonella
Otros
Aflatoxinas
Fuente: Bandoni (2002)
Anlisis Microbiolgico
El romero posee propiedades antimicrobianas por sus componentes como:

alcanfor, eucaliptol o 1,8- cineol y verbenona. Los lmites microbiolgicos
del extracto de romero son:
Tabla No. 4: Caractersticas microbiolgicas del extracto de romero .

Bacterias
<100ufc/g
Hongos y levaduras
<100ufc/g
Patgenos
Ausente
Fuente: Valle (2006)
Tabla No. 5: Especificaciones de limites microbianos expresados en UFC/ g, para

productos cosmticos
Todos los productos
Recuento total de Mesfilos Aerobios
<103
Recuento total de mohos y levaduras
<102
Escherichia Coli
Ausente
Estaphilococcus Aureus
Ausente
Pseudomonas Aeruginosa
Ausente
Fuente: Reglamento Tcnico Centroamericano RTCA 71.03.45:07 (2007)
a) Mohos:
Los mohos pueden ser unicelulares (levaduras) y multicelulares, no

poseen clorofila y crecen en forma de filamentos, miden de 5-10
22
micras de grosor, son inmviles y ramificados. Su reproduccin puede

ser sexual o asexual.
Las necesidades del moho para sobrevivir (fisiologa) son:

o Los
mohos
necesitan
nutrientes
como
los
carbohidratos
(especialmente la glucosa), vitaminas, protenas.

o Requieren de un pH de 2.2 a 9.6, siendo el ptimo para su
crecimiento el de 5.6.
o Su temperatura de crecimiento es de 22C a 30C, siendo la ptima
25C. Todos los mohos se pueden destruir de 5 a 30 minutos a
temperatura de 60 a 63C.
o Los mohos son aerobios y necesitan oxgeno para su crecimiento.
o Requieren humedad de 14-15% para su crecimiento.
b) Levaduras
Carpenter (1969), los define como hongos cuya forma corriente y

dominante de crecimiento es unicelular. Las levaduras poseen tamao
de 1-5 micras por 5-30 micras de largo, no contienen clorofila. La
reproduccin de las levaduras puede ser sexual por ascosporas y
asexual por gemacin.
Las necesidades de la levadura para sobrevivir (fisiologa) son:

o Requieren nutrientes como glucosa, carbono, hidrgeno, nitrgeno,
fsforo, potasio, azufre, vitaminas.
o Las levaduras requieren mayor cantidad de humedad que los mohos,
la cual es mayor a 18%.
o Crecen en pH de 3 a 7.5, siendo el ptimo 4.5 y 5.
23
o Su temperatura de crecimiento es de 20 a 30C, siendo la ptima

25C.
o Las levaduras crecen en lugares aerobios y anaerobios.
El medio de cultivo utilizado para el aislamiento de mohos y levaduras

es el agar papa dextrosa, el cual est compuesto por: (MCD Lab, S.A.
de C.V., 2011)
o Infusin de papa: promueve un crecimiento abundante de los
hongos y levaduras.
o Dextrosa: promueve un crecimiento abundante de los hongos y
levaduras.
o Agar bacteriolgico: agente solidificante.
o pH de 5.60.2: por el bajo rango del pH, inhibe el crecimiento de la
flora acompaante.
Las levaduras crecen ms rpidamente que los mohos, pero

frecuentemente junto a ellos.
c) E. Coli
Bacteria patgena que se encuentra en el tracto intestinal del hombre y

animales de sangre caliente, tambin se encuentra en la plantas y en la
tierra.
El E. Coli es un bacilo estrecho de 1.1 a 1.5 micras de dimetro y de 2

a 6 micras de longitud, son mviles por flagelos pertricos o inmviles.
Las necesidades del E. Coli para sobrevivir (fisiologa) son:

o Son aerobias y anaerobias facultativas.
24
o La temperatura de crecimiento se encuentra de 7 a 44C, siendo la

ptima de 35 a 40C.
o El pH de crecimiento es de 4.4 a 9.
o Requieren
nutrientes
como
el
agua,
carbono,
compuestos
nitrogenados, fsforo, potasio, calcio, magnesio, glucosa y hierro.
El medio de cultivo utilizado para el aislamiento de la Escherichia Coli

es el Agar Chromocult, el cual se encuentra compuesto por: (Alonso y
Poveda, 2008)
o Peptona: garantiza un rpido crecimiento de bacterias, tambin de
coliformes con daos sublaterales.
o Cloruro sdico: brindan componentes esenciales garantizando un
rpido crecimiento de bacterias.
o Deshidrogenofofato potsico: brindan componentes esenciales
garantizando un rpido crecimiento de bacterias.
o Hidrogenofosfato dipotsico: brindan componentes esenciales
garantizando un rpido crecimiento de bacterias.
o Piruvato sdico: brindan componentes esenciales garantizando un
rpido crecimiento de bacterias.
o Triptfano: mejora la reaccin del indol para la confirmacin
adicional de E. coli
o Lauril sulfato sdico: inhibe el crecimiento de bacterias gran
positiva sin tener influencias negativas sobre el crecimiento de
bacterias (coliformes).
o Mezcla de cromgenos: permite la formacin simultnea de
coliformes totales y E. coli.
o Agar: se utiliza como medio solidificante.
En el medio de Agar Chromocult, las colonias de Escherichia Coli

crecen de color morado.
25
d) Mesfilos Aerobios
Microorganismos que requieren oxigeno para vivir y crecen en

temperaturas entre 15 a 45C, siendo la ptima 35C, la mnima de 15
a 20C y la mxima 45C. La presencia de un gran nmero de bacterias
aerobias mesfilas, se debe a varias razones, una es que crecen bien a
temperatura corporal humana o prxima a ella, otra es que la materia
prima se encuentra contaminada o el tratamiento desde el punto de
vista sanitario no es satisfactorio.
El medio de cultivo que se utiliza para el aislamiento de los mesfilos

aerobios es el Agar Recuento Total, el cual est compuesto por:
(britanialab, 2011)
o Extracto de levadura: nutriente que ayuda al abundante desarrollo
de las bacterias.
o Triptena: fuente de nitrgeno, vitaminas y aminocidos.
o Glucosa: constituye la fuente de nitrgeno, carbono y otros
elementos necesarios para el crecimiento bacteriano.
o Agar: se utiliza como medio solidificante.
1.2.5. Aceite Esencial de Romero
El aceite esencial de romero posee los siguientes componentes:
Tabla No. 6: Componentes del aceite esencial de romero.
Componente
% Mnimo
% Mximo
-pineno
18.0
26.0
Canfeno
7.0
13.0
- pineno
2.0
5.0
Mirceno
2.5
4.5
26
Limoneno
2.5
5.5
1,8- cineol o eucaliptol
16.0
23.0
Alcanfor
12.5
22.0
Linalol
0.5
2.5
Acetato de bornilo
0.5
2.5
Terpinen-4-ol
0.4
1.5
Borneol
1.0
4.5
-terpineol
1.0
4.0
Verbenona
0.7
2.5
Fuente: Norma UNE 84306:2006 (2006)
Segn Cceres (1996), el aceite esencial (1-2%) contiene esteres como acetato
de bornilo (1-7%) y alcoholes totales como borneol (8.4-14.3%). Los
principales componentes son: -pineno (7-25%), canfeno (2-9%), borneol
(18%), mirceno, -felandreno, limoneno, -terpineno, p-cimeno, linalool (1417%), 1,8- cineol o eucaliptol (14-32%), alcanfor (10-15%), cariofileno y terpineol.
Segn Heath (1978), el aceite esencial de romero posee los siguientes

componentes: -pineno, canfeno, 1,8 cineol o eucaliptol (17-30%) (que le da
al romero el aroma fresco a eucalipto), borneol (16- 20%), alcanfor (10%),
acetato de bornilo (2-7%), verbenona, terpineol.
El aceite esencial de romero posee propiedades antispticas como:

antiparasitarias, antirreumticas, analgsicas, cicatrizantes, estimulantes del
cuero cabelludo, previene la aparicin de la caspa y regula la secrecin
sebcea del cuero cabelludo. (Botanical Online, 2011)
Cuando se aplican fricciones sobre el cuero cabelludo con aceite de romero

en mezcla con aceite de almendra ayuda a mejorar la circulacin en la zona de
27
aplicacin como la salud capilar, favoreciendo el nacimiento del cuero

cabelludo. (Cceres, 1996)
Rendimiento del Aceite Esencial de Romero
El rendimiento es la cantidad de producto (en gramos) que se obtiene en

relacin a la cantidad de muestra utilizada (en gramos). Se calcula con la
siguiente frmula:
%ren dimiento
peso del aceite

*100
peso del romero
El rendimiento del aceite esencial de romero vara de 0.5% a 1.2% (Heath,

1978).
1.2.6. Control de Calidad de los Aceites Esenciales
La composicin y calidad de un aceite esencial vara de una especie vegetal a

otra, dentro del mismo gnero de la planta, y tambin dentro de la misma
especie dependiendo del clima, regin de cultivo, la madurez de la planta, etc.
Se deben tomar en cuenta los siguientes parmetros analticos en el control de

calidad de los aceites esenciales:
Tabla No. 7: Clasificacin de los parmetros analticos utilizados en el control de calidad de

aceites esenciales
Caractersticas Organolpticas
Determinaciones Fsicas
Olor
Color
Apariencia
Densidad
Poder Rotatorio
ndice de refraccin
28
ndices Qumicos
Caractersticas Cromatogrficas
Miscibilidad en etanol
Punto congelacin
Punto inflamacin
Rango destilacin
ndice de acidez
ndice de ster
ndice de saponificacin
ndice de acetilo
ndice de fenoles
Perfil Cromatogrfico CG
Cuantificacin
de
los
principales componentes
Caractersticas Espectroscpicas
Otras Determinaciones
Ultravioleta visible
Infrarrojo
Pesticidas
Metales Pesado
Se han realizado normas de calidad para aceites esenciales que se

comercializan, se cuenta con una norma UNE 84306:2006 para el aceite
esencial de romero y con una norma ISO 1342:2000, sin embargo esta norma
ISO, es una comparacin de los parmetros del romero proveniente de
Marruecos, Tunez y Espaa.
Las especificaciones para un determinado aceite esencial, son muy parecidas a

las establecidas por los diversos organismos. Se pueden hacer diferencias
principales en relacin al uso final que vaya a tener la esencia, para la
industria cosmtica la calidad se encuentra en la presencia de los
constituyentes activos definidos, aunque stos no se conozcan con certeza. Se
pueden cuantificar por medio de un perfil cromatogrfico.
29
Propiedades Organolpticas
Son el conjunto de descriptores de las caractersticas fsicas que tienen la

materia en general, como: sabor, color, textura, olor.
El aceite esencial de romero es un lquido incoloro o amarillo plido, posee

un olor caracterstico. (Food Chemical Codex, 1996)
Segn Heath (1978), el aceite esencial de romero posee el siguiente perfil

de olor:
Inicial: es un olor penetrante, irritante y picante. Eucalipto como

aromtico.
Persistente: el olor inicial se pierde y es rpidamente sustituido por

olor pesado a alcanfor que es persistente y tenaz.
Final: posee un olor a pimienta un poco leoso.
Segn la Norma UNE 84306:2006, el aceite esencial de romero obtenido

de la planta de romero de Espaa; posee las siguientes caractersticas:
Aspecto: lquido mvil transparente.
Color: de incoloro a amarillo plido o amarillo verdoso.
Olor: caracterstico, balsmico, a cineol, ms o menos alcanforado.
Es importante saber las propiedades organolpticas del aceite esencial de

romero, para poder comprobar si el producto cumple con las normas
establecidas para su control de calidad.
30
Propiedades Fsicas
Las propiedades fsicas de evaluadas en el aceite esencial de romero

obtenido segn la publicacin de Bandoni en 2002 y la norma UNE
84306:2006 son:
a) Densidad
La densidad es la masa de una sustancia dividida entre su volumen.

Casi todas las esencias poseen una densidad menor a la del agua, con
algunas excepciones, como: esencia de clavo, canela y ajo.
El aceite esencial de romero espaol posee una densidad que vara de

0.8940 a 0.913 g/cm3 a 25C. (Cceres, 1996)
El aceite esencial de romero espaol posee una densidad que vara de

de 0.892 a 0.910 g/cm3 a 20C. (Norma UNE 84306:2006)
b) ndice de Refraccin
El ndice de refraccin es una medida que determina la reduccin de la

velocidad de la luz al propagarse por un medio homogneo y es una
propiedad especfica de cada interfase y vara con la temperatura y con
la longitud de onda de la luz considerada. Los ndices de refraccin se
reportan a una temperatura de 20C.
Se necesitan de una a dos gotas de aceite para la determinacin del

ndice de refraccin, la temperatura se debe corregir al valor estndar
de 20C. El factor de correccin que se utiliza es de 0.00045 C, el
cual se suma cuando la temperatura medida es mayor de 20C y se
resta en caso contrario.
31
Este parmetro posee un inters en detectar adulteraciones y

envejecimiento, sus principales ventajas son la rapidez y sencillez con
que se pueden obtener.
El aceite esencial de romero espaol posee un ndice de refraccin que

vara de 1,464 a 1.472 a 20C. (Norma UNE 84306:2006)
El aceite esencial de romero posee un ndice de refraccin que vara de

1.464 a 1.476 a 20C. (Food Chemical Codex, 1996).
c) Cromatografa de Gases
La cromatografa de gases es una tcnica de separacin en donde la

fase mvil es un gas (helio, argn, nitrgeno, hidrgeno) y la fase
estacionaria est constituida por un lquido muy viscoso retenido en el
interior de la columna cromatogrfica. Es la mejor tcnica analtica de
separacin cuando el extracto de una planta contiene compuestos
voltiles que sean de inters.
La afinidad a la fase estacionaria de los distintos componentes del

aceite esencial, en el anlisis determina la separacin de los mismos;
algunos compuestos son afines a esta fase por lo que sern retenidos
por la misma y saldrn despus de un largo perodo de tiempo, por otro
lado algunos otros componentes no sern afines a la fase estacionaria
por lo que saldrn inmediatamente. Logrando as la separacin de los
distintos componentes del aceite esencial.
Las columnas cromatogrficas que se utilizan en la actualidad son de

tipo capilar, que son tubos de cuarzo flexible (slice fundido) en donde
la pared interna est recubierta con una capa fina de fase estacionaria.
32
Las fases estacionarias para el anlisis de aceites esenciales son

polietilenglicol y polidimetisiloxano que son fases polares.
El cromatgrafo posee un sistema de inyeccin, el cual es una cmara

de vaporizacin instantnea sellada por una junta de silicona, en donde
se inyecta la muestra por medio de una microjeringa o un
automuestrador. Tambin posee un detector, que indica la presencia de
las diferentes sustancias a medida que salen de la columna, ya que
estn separadas.
Se debe llevar un sistema de control de temperatura del horno (donde

se encuentra la columna cromatogrfica), debido a que influye
directamente sobre la separacin de los componentes del aceite
esencial. La temperatura depende del punto de ebullicin de los
diferentes componentes, sta se ajusta un poco por encima del punto de
ebullicin. El aceite esencial est constituido por varios componentes
por lo que se debe ajustar la rampa de temperatura, que consiste en
aumentar la temperatura por etapas o en forma gradual hasta separar
los componentes.
Cromatografa de Gases acoplada a Espectrometra de Masas

(CG-EM)
Es un mtodo muy adecuado para la identificacin de la

composicin de los aceites esenciales, debido a que los
componentes de los mismos son compuestos voltiles y de bajo
peso molecular (< 300g/mol). Los componentes de la esencia son
separados en el cromatgrafo, los cuales penetran en el
espectrmetro de masas, que permite registrar los diferentes
espectros de cada una de las sustancias separadas. Los
constituyentes de los aceites esenciales se identifican por medio de
33
patrones de fragmentacin que se observan en sus espectros de

masa. (Bandonni, 2002)
En el acoplamiento de la cromatografa de gases a la espectrometra

de masas, los componentes de los aceites esenciales se identifican
por medio de sus espectros de masas, obtenidos por 2 tcnicas:
ionizacin qumica e impacto electrnico. El espectrmetro de
masas contiene una biblioteca de espectros de masas que permite la
identificacin de los diferentes componentes del aceite esencial.
(Bandonni, 2002)
1.2.7. Obtencin de Aceite Esencial por medio de Destilacin por Arrastre de

Vapor a Nivel Industrial
Segn Bandoni (2002), la destilacin por arrastre con vapor, no ha podido ser
sustituida por la extraccin con solventes orgnicos o con calentamiento
directo por la gran cantidad de ventajas que tiene en relacin a estos dos
ltimos sistemas, como:
El vapor de agua es muy econmico en comparacin al costo de los
disolventes orgnicos.
Asegura que no se recaliente el aceite esencial.
No requiere el uso de equipos sofisticados.
Equipo utilizado para la Obtencin del Aceite Esencial por Arrastre de

Vapor
El equipo tradicional utilizado en la obtencin de aceite esencial a nivel

piloto, consta de los componentes mostrados en la siguiente figura:
34
Figura No. 3: Principales componentes de un equipo de extraccin mediante arrastre con

vapor
EXTRACTOR
Es el componente principal del equipo de extraccin por arrastre de

vapor, debido a que se lleva a cabo la extraccin del aceite. Las
condiciones a las que opere como: presin, flujo de vapor, temperatura
y altura del lecho del material vegetal; son importantes para llevar a
cabo una extraccin adecuada. El extractor est compuesto por el
alambique, el cabezal, el difusor de vapor, la camisa de vapor y donde
entra el vapor para la extraccin, as como la salida del condensado. El
extractor, tiene la misma funcin que el matraz de vidrio donde se
coloca la muestra a destilar (nivel laboratorio).
35
CUELLO DEL CISNE
Conducto que comunica la tapa del extractor con el condensador.

Dentro del cuello del cisne circula la mezcla del aceite esencial y el
vapor de agua. El cuello del cisne, tiene la misma funcin que los
tubos de unin de vaco o tubo de unin de 3 bocas (nivel laboratorio).
CONDENSADOR
Permite la condensacin de la mezcla de aceite esencial y vapor de

agua. Uno de los condensadores que se utiliza es el que consta de
serpentn y cmara de expansin (el que se observa en la figura No.2).
En este tipo de condensador la mezcla de vapores se alimenta en una
cmara de expansin, donde se obtiene la mayor parte de los
condensados, los cuales van descendiendo a la parte baja del
condensador. El serpentn y la cmara de expansin se colocan dentro
de un tanque de contencin en donde se va recirculando agua fra. El
agua fra para la condensacin se alimenta en la parte inferior del
tanque y se descarga por la parte superior del mismo.
Otro condensador que se utiliza es el de carcaza y tubos. En ste

equipo se alimenta la mezcla de vapores dentro de los tubos y el agua
de enfriamiento circula dentro de la carcaza, realizando la transferencia
de calor. Se ha demostrado que es mejor realizar un sistema de
inversin (agua dentro de los tubos y la mezcla de vapores dentro de la
carcaza), porque posee la ventaja de regular la velocidad del flujo del
lquido refrigerante y se puede controlar de una mejor manera la salida
de los condensados. El equipo se ubica de manera inclinada o en forma
vertical, para facilitar la descarga de los condensados.
36
A nivel laboratorio, tambin se utiliza un condensador de menor

tamao, el cual cumple con las mismas funciones que el condensador a
nivel industrial descrito con anterioridad.
SEPARADORES DE ACEITE ESENCIAL
Son llamados tambin frascos florentinos, son dispositivos que

realizan la separacin de un aceite esencial del vapor de agua
condensado. Debido a las caractersticas de los aceites esenciales se
pueden dividir en aceites esenciales pesados, son los que poseen una
densidad mayor a la densidad del agua por lo que se depositan en la
parte inferior del separador. Tambin se dividen en aceites esenciales
ligeros, son los que poseen una densidad menor a la densidad del agua
por lo que se acumulan en la superficie de la misma.
Los vasos florentino (nivel industrial), tienen la misma funcin que la

ampolla de decantacin (nivel laboratorio), la cual permite separar la
mezcla de aceite esencial y agua obtenida en la destilacin.
GENERADOR DE VAPOR
Es un equipo auxiliar que provee de vapor de agua al equipo de

extraccin, como la caldera. Segn Bandoni (2002), un generador de
vapor se puede definir como una serie de dispositivos que aprovechan
el poder calorfico de un combustible producen vapor. (Pg. 169)
A nivel laboratorio el matraz de vidrio que contiene agua y perlas de

ebullicin, es donde se lleva a cabo la generacin de vapor, por lo que
posee la misma funcin que la caldera (nivel industrial).
37
Aplicacin Industrial para Aceites Esenciales
En la industria de alimentos los aceites esenciales se utilizan para

condimentar carnes preparadas, embutidos, sopas, helados y queso.
Tambin se utilizan en la preparacin de bebidas alcohlicas y no

alcohlicas (refrescos).
En la industria farmacutica se usan en cremas dentales, analgsicos e

inhalantes para descongestionar las vas respiratorias.
Los aceites esenciales en la industria de cosmtica se utilizan para la

elaboracin de perfumes, aguas de tocador, colonias y extracto. Tambin se
utiliza para dentrficos, por su gran consumo de derivados de la menta.
El sector de perfumera industrial demanda una gran cantidad de aceites

esenciales que son empleados en productos que contienen composiciones
aromticas o aceites esenciales puros, como los geles de bao, jabones,
lociones, cremas, etc. Los perfumes de alta gama contienen una parte
importante de aceites de extracto de origen vegetal y de aceites esenciales.
Aplicacin Industrial del Aceite Esencial de Romero
Los productos industriales a base del aceite esencial de romero se usan en

perfumera, jabonera, aromatizante de ambiente, en la elaboracin de
shampoo, para el cuidado del cabello y en la elaboracin de cremas para el
cuidado de la piel cuando ests sufren por los cambios de estacin,
permitiendo mejorar la piel cansada y madura y para evitar la cada del
cabello. As como se utiliza para la elaboracin de acondicionadoras y
aceite para masajes del cuero cabelludo dejndolo fuerte, reluciente,
38
mejorando la circulacin sangunea del cuero cabelludo, regula la secrecin

sebcea y estimula el crecimiento. (Botanical Online, 2011)
Se utilizan para el cuidado de las uas frgiles y quebradizas, en la

elaboracin de cremas para la piel grasa, debido a sus propiedades
antioxidantes se utiliza en emulsiones de oleo-acuosas (cremas, lociones
faciales, cremas evanescentes, para las manos, para afeitarse). (Valle, 2006)
El aceite esencial de romero se puede verter en el agua del bao y estimula

enrgicamente la circulacin, es antisptico, sudorfico y tonificante.
(Aromaterapia, 2011)
El aceite esencial de romero se utiliza en medicina deportiva, para dar

masajes en las zonas lesionadas, porque ayuda a mejorar el estado de los
msculos y la inflamacin de los mismos. (Vitonica, 2011)
Tambin se utiliza para la elaboracin de dentfricos, para combatir el mal

aliento. Por sus propiedades relajantes y rejuvenecedoras (por sus
propiedades antioxidantes) se utiliza en aromaterapia y es utilizado para la
elaboracin de lociones repelentes de insectos. (Aromaterapia, 2011)
39
Marco II
II. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Con el paso del tiempo, el medio ambiente se est deteriorando y se hace necesario
para la humanidad poseer productos que sean naturales, fciles de obtener y sobre
todo que en su proceso no se produzca contaminacin.
La industria de los aceites esenciales en Guatemala est muy poco desarrollada,

actualmente existen tres empresas que se dedican a la obtencin de aceites
esenciales segn el Ministerio de Economa (Mineco) y la Union Europea, ao
2011. Sin embargo la produccin del aceite de romero es muy poca y se utiliza
primordialmente en la aromaterapia. En nuestro pas si bien es cierto contamos con
una gran cantidad de flora, sta en la mayora de casos solo se cultiva y se exporta
para su procesamiento en pases ms industrializados, generando que en Guatemala
se dejen de percibir mayores ganancias. El romero es una planta muy fcil de
producir y se puede cultivar en diferentes tipos de suelo, favoreciendo a los
diferentes sectores de la sociedad que quieran cultivarlo en cualquiera que sea la
regin que se encuentren; adems de esto, tiene propiedades que pueden
aprovecharse para ser utilizado principalmente en las industrias cosmtica y
farmacutica.
En Guatemala, la importacin y exportacin de los aceites esenciales en los ltimos

aos ha sido variable, mientras la importacin se mantiene, la exportacin muestra
un incremento considerable. Segn datos del Banco de Guatemala, para el ao 2010
las importaciones de aceites esenciales bajaron en un 3% con respecto al ao 2009,
sin embargo, para el ao 2011 estas importaciones se incrementaron tambin en un
3% lo que nos muestra una recuperacin con respecto al ao anterior en las
importaciones de dichos productos. Con respecto a las exportaciones de aceites
esenciales, para el ao 2010 se tuvo un incremento del 86% con respecto al ao
2009 y para el ao 2011 se tuvo un incremento del 13.5 %, con estos datos vemos
que la industria de los aceites esenciales va en crecimiento, por lo que se hace
40
necesario obtener dichos aceites con la mayor calidad posible y de una manera
relativamente fcil, que sean derivados de plantas que no requieran de mucho
cuidado para su proliferacin, siendo el caso del romero.
Con lo anteriormente expuesto se genera la siguiente pregunta: Se puede obtener

aceite esencial de romero por medio de la destilacin por arrastre de vapor para el
anlisis de parmetros microbiolgicos y fisicoqumico?
41
2.1. Objetivos
2.1.1. Objetivo General
Obtener el aceite esencial de romero por medio de la destilacin por

arrastre de vapor.
2.1.2. Objetivos Especficos
Determinar las propiedades organolpticas del romero.

Determinar el porcentaje de humedad del romero y compararlo con el
porcentaje de humedad terico.
Realizar un anlisis microbiolgico (mohos y levaduras, escherichia coli,
aerobios mesfilos) del extracto de romero y compararlo con los lmites
permitidos. Segn el Reglamento Tcnico Centroamericano RTCA
71.03.45:07.
Determinar las propiedades organolpticas del aceite esencial de romero.
Determinar las propiedades fsicas del aceite esencial de romero: densidad
e ndice de refraccin.
Determinar la composicin qumica del aceite esencial de romero por
medio del perfil cromatogrfico.
Comparar el rendimiento del aceite esencial obtenido con el rendimiento
terico, por medio de la destilacin por arrastre de vapor y poder
determinar la cantidad de muestra ptima para un mayor rendimiento.
42
2.2. Variables
2.2.1. Variables Independientes
Caractersticas organolpticas del romero.

Porcentaje de humedad del romero.
Anlisis microbiolgico del romero.
Propiedades organolpticas del aceite de romero.
Tiempo de destilacin por arrastre de vapor.
Tamao del batch (masa) en la destilacin por arrastre de vapor.
Rendimiento del aceite esencial de romero.
2.2.2. Variables Dependientes
ndice de refraccin.
Densidad del aceite esencial de romero.
Cromatografa de gases.
2.3. Definicin de las Variables

2.3.1. Variables Independientes
PROPIEDADES ORGANOLPTICAS DEL ROMERO
Def. Conceptual: son el conjunto de descriptores de las caractersticas

fsicas que tienen la materia en general, como: sabor, color, textura, olor.
(Descom, 2012)
Def. Operacional: el romero es un arbusto aromtico que posee
numerosas hojas de color verde, con flores de color violeta. Contiene un
aroma fresco a eucalipto, olor a alcanforado y sabor amargo. Se mide por
medio del sentido del olfato y vista del ser humano.
43
PORCENTAJE DE HUMEDAD DEL ROMERO DESPUS DEL

PROCESO DE SECADO
Def. Conceptual: tanto por ciento de vapor de agua que impregna un

cuerpo. (Zworykyn, 1997)
Def. Operacional: el romero debe tener un porcentaje de humedad entre
8 y 15%, se mide por medio de una balanza de humedad.
ANLISIS MICROBIOLGICO DEL ROMERO SECO
Def. Conceptual: examen de los microorganismo mediante la separacin

de sus componentes. (Zworykyn, 1997)
Def. Operacional: el extracto de romero debe tener ausencia de
patgenos; hongos y levaduras < 100ufc/g; bacterias < 100ufc/g
PROPIEDADES
ORGANOLPTICAS
DEL
ACEITE
DE
ROMERO
Def. Conceptual: son el conjunto de descriptores de las caractersticas

fsicas que tienen la materia en general, como: sabor, color, textura, olor.
(Descom, 2012)
Def. Operacional: el aceite esencial de romero es incoloro o de color
amarillo plido y posee un aroma a eucalipto fresco y olor a alcanforado.
Se mide por medio del sentido del olfato y vista del ser humano.
TIEMPO DE DESTILACIN POR ARRASTRE DE VAPOR
Def. Conceptual: duracin del proceso que se realiza mediante el paso

directo de vapor de agua por el seno del lquido no miscible en ella.
(Zworykyn, 1997)
44
Def. Operacional: el tiempo de destilacin del aceite esencial de romero

debe ser de 2 horas, este se mide por medio de un reloj.
TAMAO DEL BATCH (MASA) EN LA DESTILACIN POR

ARRASTRE DE VAPOR
Def. Conceptual: cantidad de materia de romero que se utiliza para el

proceso de destilacin por arrastre de vapor. (Zworykyn, 1997)
Def. Operacional: se utiliza 40, 50 y 60 gramos de hojas de romero
secas, se mide por medio de una balanza analtica.
RENDIMIENTO DEL ACEITE ESENCIAL DE ROMERO
Def. Conceptual: es la relacin entre la masa del aceite esencial obtenido

y la masa de materia vegetal alimentada al baln aforado de destilacin.
(Universidad Rafael Landvar, 2007)
Def. Operacional: el rendimientos del aceite esencial de romero vara de
0.5 a 1.2%. Se calcula por medio de la frmula: (Universidad Rafael
Landvar, 2007)
%ren dimiento
peso del aceite de romero

100
peso de la planta de romero
2.3.2. Variables Dependientes
NDICE DE REFRACCIN
Def. Conceptual: medida que determina la reduccin de la velocidad de

la luz al propagarse por un medio homogneo y es una propiedad
especfica de cada interfase y vara con la temperatura y con la longitud
de onda de la luz considerada. (Universidad Rafael Landvar, 2009)
45
Def. Operacional: el aceite esencial de romero posee un ndice de

refraccin que vara de 1.464 a 1.476 a 20C. Se mide por medio de un
refractmetro, si la temperatura a la que se mide el ndice de refraccin no
es de 20C, se puede usar la siguiente ecuacin: (Bandoni, 2002)
corregido
(observado) 0.00045(T de lectura-20)
DENSIDAD DEL ACEITE ESENCIAL DE ROMERO
Def. Conceptual: relacin entre masa partido volumen. (Chang, 1997)

Def. Operacional: el aceite esencial de romero posee una densidad que
vara de 0.8940 a 0.913 g/cm3 a 25C. Calculado por la frmula:
(Doncencia.udea, 2011)
masa picnmetro
aceite
masa picnmetro
Volumen picnmetro
PERFIL CROMATOGRFICO DE ACEITE ESENCIAL
Def. Conceptual: tcnica de separacin basada principalmente en

fenmenos de participacin entre una fase mvil gaseosa y una fase
estacionaria constituida por un lquido muy viscoso retenido en el interior
de una columna cromatogrfica. (Bandoni, 2002)
Def. Operacional: el aceite esencial de romero posee los siguientes
componentes: -pineno (18-26%), borneol (14.5%), mirceno (2.54.5%,
linalol (0.5-2.5%), 1,8- cineol o eucaliptol (16-23%), alcanfor (12.522%), acetato de bornilo (0.5-2.5%), canfeno (7-13%), - terpineol
(1-4%), Verbona (0.7-2.5%).
46
2.4. Alcances y Lmites

2.4.1. Alcances
El presente estudio pretende ser una gua para la obtencin de aceite esencial
de romero por medio de la destilacin por arrastre de vapor para el anlisis de
parmetros fisicoqumicos y microbiolgicos.
La materia prima proviene del Instituto de Ciencia y Tecnologa Agrcola

(ICTA) de la sede ubicada en Chimaltenango, Guatemala, ya que segn
investigaciones de campo realizadas a personas que comercializan en
cantidades pequeas esta planta, es el nico lugar en el cual se puede
conseguir dicho cultivo a granel.
Se realizaron pruebas microbiolgicas (E. Coli, aerobios mesfilos, mohos y

levaduras) al extracto de romero, tambin se determinaron las propiedades
fisicoqumicas (porcentaje de humedad) y organolpticas de la planta
aromtica (romero).
Se realizaron pruebas experimentales a nivel laboratorio para la obtencin del

aceite esencial de romero. Se determinaron sus propiedades fisicoqumicas
(densidad e ndice de refraccin), organolpticas y su composicin qumica
por medio de un perfil cromatogrfico acoplado a espectroscopia de masa.
2.4.2. Lmites
El mayor lmite que se encontr en el presente trabajo de estudio fue el equipo

que se utiliz para las pruebas de anlisis del aceite esencial de romero,
debido a que el laboratorio de la Universidad Rafael Landvar no contaba con
todo el equipo necesario para realizar las pruebas requeridas, por lo que se
tuvo que acudir a la Universidad del Valle de Guatemala y a la Universidad
47
San Carlos de Guatemala para la realizacin de las mismas. Tambin se tuvo

el lmite de que no existe mucha informacin referente al cultivo del romero
en Guatemala, lo cual lo hace difcil de obtener y ste solo se encuentra en el
Instituto de Ciencia y Tecnologa Agrcola (ICTA) ubicado en el
departamento de Chimaltenango.
Para obtener el porcentaje de rendimiento del aceite esencial obtenido se

realizaron dos repeticiones para los tamaos de batch de 40, 50 y 60 gramos,
debido a que el romero se da por temporadas por lo que no se contaba con la
materia prima suficiente para realizar 3 repeticiones por batch. Sin embargo,
se realizaron tres repeticiones ms para el batch de 50 gramos con la finalidad
de obtener suficiente aceite esencial de romero para determinar la densidad
del mismo.
Para la determinacin de la densidad del aceite esencial de romero obtenido se

realiz una repeticin, debido a que el rendimiento del aceite esencial es bajo
y no se obtuvo suficiente aceite para realizar ms repeticiones ni se contaba
con la suficiente materia prima para realizar varias extracciones y obtener as
ms aceite esencial de romero.
2.5. Aportes
A la industria guatemalteca, ya que al realizar el anlisis de las propiedades

microbiolgicas y fisicoqumicas del aceite esencial de romero se podr conocer
dichos parmetros y se podr evaluar si se utiliza en cualquier tipo de industria
que se desee utilizar.
A la Universidad Rafael Landvar como investigacin cientfica que integra y

aplica contenidos estudiados a lo largo de la carrera de Ingeniera Qumica y que
podra ser utilizada como fuente bibliogrfica, referente al romero, aceites
esenciales y el mtodo de destilacin por arrastre de vapor.
48
Al medio ambiente, ya que se presenta un proceso para la obtencin de un aceite

esencial, que no es contaminante debido a que se utiliza agua como solvente para
la extraccin del mismo.
49
Marco III
III. MTODO
3.1. Unidad de Anlisis
A. Sujetos
Se entrevist a la Investigadora del Proyecto de Recursos Naturales del

Instituto de Ciencia y Tecnologa Agrcola (ICTA), Inga. Marielos
Mrida, quien proporcion sus conocimientos y experiencia sobre el
cultivo de romero.
Se entrevist a la encargada del laboratorio de Instrumentacin Avanzada

de Qumica Analtica en la Universidad del Valle de Guatemala, Licda.
Ana Luisa de Montenegro, quin proporcion sus conocimientos y
experiencia sobre el proceso de cromatografa de gases y brind apoyo
necesario para realizar el anlisis de la composicin del aceite esencial de
romero mediante cromatografa de gases acoplada a espectrometra de
masas de las tres muestras de aceite esencial de romero.
B. Unidad de Anlisis
Planta de romero
Aceite esencial de romero
3.2. Instrumentos
Horno para laboratorio: marca VWR/ Sheldon Manufactering, modelo

1305U. Opera en un rango de temperatura de 40C a 200C, regulada por un
controlador de temperatura programada. Posee una uniformidad de
50
temperatura +/- 10C. Se emple para secar el romero, permitiendo un mayor

rendimiento del aceite.
Balanza de Humedad: marca OHAUS, modelo MB35 Halogen. Mide la

humedad de la muestra, para ello lleva la muestra a una temperatura de 100C.
Lee muestras mayores o iguales a 0.500 gramos de peso y menores o iguales a
35 gramos de peso. Registra lecturas en un rango de humedad de 0.01% a
100%. En la pantalla se muestran variables como el porcentaje de humedad,
tiempo, temperatura y peso de la muestra. (Incertidumbre de 0.01%).
Incubadora: marca Precision, modelo 5EG Grav. Opera en un rango de

temperatura desde temperatura ambiente hasta 65C. Tiene una capacidad
mxima de 10 estantes. Se emplea para incubar las muestras microbiolgicas.
Balanza: marca OHAUS Corporation. Modelo Triple Beam TJ2611. Tiene

una capacidad mxima de peso de 2610 gramos. Este instrumento se emplea
para pesar las hojas de romero, proporciona la lectura con un decimal, por lo
que no es muy exacto. (Incertidumbre de +/- 0.05 gramo)
Balanza analgica: marca Mettler Toledo, tipo AB204. Posee una carga
mxima de 210 gramos, con un valor mnimo de escala de 0.0001 gramos. Se
emplea para pesar el aceite esencial de romero obtenido, debido a que
proporciona la lectura con 4 decimales, por lo que es mucho ms exacta.
(Incertidumbre de +/- 0.00005g).
Equipo de destilacin por arrastre de vapor: el equipo consta de una estufa

de calentamiento marca Fisher Scientific, un baln aforado de 1000mL pyrex,
un baln aforado de 500mL pyrex marca IMREG, un condensador marca
KIMAX y un beaker de 600mL pyrex. Se emplea para llevar a cabo la
destilacin del romero.
51
Termmetro: marca VWR, modelo 61016048. Registra lecturas de

temperatura en un rango de 20C a 150C. Se utiliza para medir la
temperatura del aceite esencial de romero. (incertidumbre +/- 0.5 C).
Ampolla de Decantacin: marca Duran, modelo NS29. El instrumento tiene

una capacidad mxima de 250 mL, posee una escala de 10 en 10 mL. El
orifico por donde sale el lquido a decantar es modelo NS18.8 y posee un
dimetro de 4 mm. Se emplea para separar la mezcla de agua y aceite.
Refractmetro: marca Spectronic Instruments, modelo 334610. Lee ndices

de refraccin de lquidos y slidos entre 1.3 a 1.71. Se emplea para medir el
ndice de refraccin del aceite esencial de romero. (Incertidumbre de +/0.1%).
Cromatgrafo de gases: marca Agilent technologies, modelo 6850. La parte

de inyeccin se encuentra a una temperatura de 250C y una presin de
1.07psi, requiere gas tipo helio. La muestra se puede inyectar de manera
manual, con una microjeringa o automtica por medio de viales. El horno del
cromatgrafo posee un rango de temperatura de 50C a 300C, en donde la
temperatura se va incrementando por etapas. La columna cromatogrfica es de
tipo capilar, contiene 5% de fenil metil siloxano.
Espectrmetro de masa: marca Agilent Technologies, modelo 5975C. La

temperatura MS Source (fuente donde pasa el componente proveniente de la
columna al espectrmetro de masa) opera a una temperatura mxima de
250C, el MS Quad (donde se alinea el componente despus de haber sido
roto por los electrones) opera a una temperatura mxima de 200C.
52
3.3. Procedimiento
Fuente: elaboracin propia (2011)
53
3.3.1. Preparacin Preliminar de la Materia Prima
1.
Recolectar la planta de romero.
2.
Limpiar el romero, por medio de agua potable.
3.
Poner a secar el romero en un horno de laboratorio a una temperatura no

mayor de 35C o sobre papel blanco al aire libre.
4.
Separar las hojas de romero del tronco.
3.3.2. Anlisis Microbiolgico
1.
Colocar 10 gramos de hojas de romero en un frasco de vidrio

(previamente esterilizado) con 90 mL de agua y triturarlo en la licuadora
(muestra -1).
2.
Sembrar 1ml de la muestra -1 en cada medio de cultivo (agar papa

dextrosa, chromocult y agar recuento total).
3.
Para el anlisis microbiolgico se realizar el recuento por dilucin el

cual consiste en: (Ver figura No. 4)
3.1 Realizar la muestra -2, diluyendo 1mL de la muestra -1 en 9 mL de
agua estril y sembrar 1mL de la muestra -2 en cada medio de
cultivo.
3.2 Realizar la muestra -3, diluyendo 1mL de la muestra -2 en 9 mL de
agua estril y sembrar 1mL de la muestra -3 en cada medio de
cultivo.
3.3 Realizar el mismo procedimiento hasta la muestra -5 como se
muestra en la figura.
4.
Incubar las muestras entre 30 y 35C durante 24 a 72 horas.
5.
Leer el nmero de colonias que crecieron en cada muestra tomando en

cuenta que en la muestra -2 se deben multiplicar por 10 el nmero de
colonias que crecieron, en la -3 se debe multiplicar por 100, como se
muestra en la figura No. 4.
54
Figura No. 4: Mtodo para el recuento por dilucin de una solucin que contenga 100
bacterias por mililitro.
Fuente: Carpenter, (1969)
3.3.3. Obtencin del Aceite Esencial de Romero
1.
Armar el equipo de destilacin, como se muestra en la figura No. 5
2.
Pesar las hojas de romero y colocarlo en el matraz No.2, en el matraz

No. 1 coloca agua para generar una fuente de vapor.
3.
En el matraz No. 1, colocar agua con perlas de ebullicin. Dejar destilar

durante 2 horas aproximadamente.
4.
La mezcla de agua y aceite obtenido, se coloca en una ampolla de

decantacin y se le agrega ter dietlico, para realizar una extraccin y as
separar la sustancia del material lquido que la contiene.
5.
Lavar el baln receptor con ter etlico para recuperar la mayor cantidad
de muestra posible. Agitar e invertir el embudo de decantacin y liberar la
presin acumulada, debido a la presin del componente voltil.
6.
Dejar reposar hasta que las fases estn bien separadas. Y decantar.
55
7.
Remover el ter utilizando destilacin simple, con rotavapor o por medio

de un bao de Mara, para as obtener el peso del residuo y calcular el
porcentaje de aceite esencial presente en la muestra de romero.
8.
Si se muestra residuo de agua en el aceite, adicionar sulfato de sodio

anhidro, que es un agente secante que permite obtener el aceite esencial
de romero.
Figura No. 5: Equipo de destilacin por arrastre de vapor
Fuente: UNAM (2011)
3.3.4. Densidad del Aceite Esencial de Romero
1.
Para determinar la densidad del aceite esencial de romero, se toma un

picnmetro de 1mL y se pesa.
2.
Se le agrega 1mL del aceite de romero y se pesa nuevamente.
3.
Por diferencia de los pesos se obtiene la masa
4.
Calcular la densidad por medio la frmula: (Doncencia.udea, 2011)
masa picnmetro
aceite
masa picnmetro
Volumen picnmetro
56
3.3.5. ndice de Refraccin del Aceite Esencial de Romero
1.
Filtrar la muestra para eliminar cualquier impureza o traza de humedad
2.
Se limpian lo prismas del refractmetro con agua y se vierten unas gotas

de la muestra en el prisma inferior, ajustando ste contra el prisma
superior en forma tal que quede entre ellos una capa de muestra, libre de
burbujas de aire.
3.
Se deja en reposo de uno a dos minutos o hasta que la muestra alcance la

temperatura que corresponde.
4.
Se hacen girar las prismas hasta que el campo aparezca dividido en
una porcin obscura y otra iluminada, procurando que en la separacin de

ambas porciones no aparezca una banda de dispersin, sino una lnea
ntida. Se ajusta la posicin de esta lnea de modo que pase por el punto
de interseccin de los hilos del retculo y se lee sobre la escala el valor del
ndice de refraccin de la muestra.
3.4. Diseo y Metodologa Estadstico

3.4.1. Diseo Experimental
Experimentos
Experimento No. 1
Obtencin del aceite esencial de

romero variando el tamao del batch
(masa)
57
Tratamientos y Repeticiones en los Experimentos
Experimento
Tratamiento
Repeticiones
Se vario el tamao del Se realizaron las pruebas en

batch
1
(masa) duplicado para cada tamao de
empleando 40, 50 y 60 batch (6 datos en total). Se

gramos.
determin el rendimiento de
cada aceite esencial de romero
obtenido.
3.4.2. Descripcin de las Unidades Experimentales
Tamao del Batch (masa)
Se refiere a la cantidad de muestra a utilizar para la obtencin del aceite

esencial de romero, en donde se utilizar 40, 50 y 60 gramos
3.4.3. Variable Respuesta
En los experimentos la variable respuesta es el rendimiento del aceite esencial

de romero
3.4.4. Metodologa de Anlisis
Se realizaron clculos de desviacin estndar
al porcentaje de humedad
promedio de la planta de romero, al ndice de refraccin del aceite esencial de

romero obtenido por medio de la destilacin por arrastre de vapor y al
porcentaje de rendimiento de la destilacin por arrastre de vapor del aceite
esencial de romero obtenido en los 3 diferentes tamaos de batch, para poder
determinar que tan dispersos se encuentran los datos de su valor promedio.
58
Marco IV
IV.
PRESENTACIN Y ANLISIS DE RESULTADOS
4.1. Control de Calidad de la Materia Prima (Romero)
4.1.1. Anlisis Organolpticos
Tabla No. 8: Caractersticas organolpticas del romero, segn el control de

calidad que debe llevar la materia prima, posterior a ser utilizada para la
extraccin del aceite esencial.
ROMERO
CARACTERSTICA
OLOR
RESULTADOS DE
LABORATORIO
ORGANOLPTICAS
TERICAS*
Aroma a eucalipto
Olor a eucalipto fresco,
fresco.
olor alcanforado
Posee hojas verdes,

COLOR
CARACTERSTICAS
con flores color

violeta, ramas y
tronco de color caf.
Arbusto de color verde,

contiene flores estilo
largo color violeta,
ramas y un tronco color
caf
Fuente: Cceres (1996)
59
4.1.2. Porcentaje de Humedad
Tabla No. 9: Porcentaje de Humedad Promedio. Segn el control de calidad

de las especies aromticas, con su respectiva desviacin respecto al valor
terico.
INTERVALO
MUESTRA
PORCENTAJE
DESVIACIN
DE
TIEMPO
TEMPERATURA
PROMEDIO
ESTNDAR
PORCENTAJE
DE
DE SECADO
DE HUMEDAD
SECADO
DE HUMEDAD
TERICO*
Secado al
ambiente
11.95%
0.0136%
8%-15%
92 HRS
20-28C
8%-15%
26 HRS
33-35C
Secado en
Horno de
13.74%
Conveccin
*
0.0456%
4.1.3 Anlisis Higinico Microbiolgico
Tabla No. 10: Anlisis microbiolgico del romero seco, segn el mtodo de
recuento en placa. Crecimiento de mohos y levaduras en el medio agar papa
dextrosa, a las 72 horas de incubacin a 32C.
NMERO
TOTAL DE
COLONIAS POR
DILUCIN
OBSERVACIN
GRAMO DE
MUESTRA
PARMETROS
TERICOS*
PARMETROS
TERICOS
CONTENIDO EN
LA DILUCIN
Crecieron 13
1
colonias de mohos y
levaduras de color
130 colonias/g
<100 ufc/g
<102 ufc/g
60
amarillo, verde
oscuro y blancas
esponjosas.
Se observ 1 colonia
2
de moho y levadura
100 colonias/g
<100 ufc/g
<102 ufc/g
de color blanca.
<102 ufc/g
No se present
3
crecimiento de
Ausente
<100 ufc/g
mohos y levaduras
<102 ufc/g
No se present
4
crecimiento de
Ausente
<100 ufc/g
mohos y levaduras
<102 ufc/g
No se present
5
crecimiento de
Ausente
<100 ufc/g
mohos y levaduras
Fuente: Valle (2006) y Reglamento Tcnico Centroamericano RTCA 71.03:07 (2007)
En conclusin se obtuvieron 130 colonias / gramo de muestra en el

extracto de romero analizado.
61
Tabla No. 11: Anlisis microbiolgico del romero seco, segn el mtodo de
recuento en placa.
Crecimiento de Escherichia Coli en el medio agar
chromocult, a las 72 horas de incubacin a 32C.

NMERO
TOTAL DE
DILUCIN
OBSERVACIN
COLONIAS
PARMETROS
PARMETROS
POR GRAMO
TERICOS*
TERICOS
Ausente
Ausente
Ausente
Ausente
Ausente
Ausente
Ausente
Ausente
Ausente
Ausente
Ausente
Ausente
Ausente
Ausente
Ausente
DE MUESTRA
CONTENIDO
EN LA
DILUCIN
Hubo ausencia de
1
colonia de
Escherichia Coli
No se present
crecimiento de
Escherichia Coli
No se present
crecimiento de
Escherichia Coli
No se present
crecimiento de
Escherichia Coli
No se present
crecimiento de
Escherichia Coli
En conclusin se obtuvieron 0 colonias / gramo de muestra en el extracto

de romero analizado.
62
Tabla No. 12: Anlisis microbiolgico del romero seco segn el mtodo de
recuento en placa. Crecimiento de aerobios mesfilos en el medio agar
recuento total, a las 72 horas de incubacin a 32C.
NMERO TOTAL
MUESTRA
OBSERVACIN
DE COLONIAS
PARMETROS
PARMETROS
QUE CONTIENE
TERICOS*
TERICOS
LA MUEASTRA
Hubo crecimiento
1
de colonias de
MNPC
<100 ufc/g
Ausente
MNPC
<100 ufc/g
Ausente
MNPC
<100 ufc/g
Ausente
MNPC
<100 ufc/g
Ausente
<100 ufc/g
Ausente
color crema
Hubo crecimiento
2
de varias colonias
de color crema.
Se observ
crecimiento de 1
colonia de color
crema que cubre la

totalidad de la caja
petri, y unas
cuantas colonias
crema alrededor.
Se observ el
crecimiento de 1
colonia que cubre
la mitad de la caja
y alrededor varias
colonias unidas
entre s de color
crema
Se observ el
1,200,000
crecimiento de 12
colonias
63
colonias de color
crema.
(MNPC) MUY NUMEROSO PARA CONTAR
En conclusin se obtuvieron 1,200,000 colonias / gramo de muestra en el

extracto de romero analizado.
4.2. Control de Calidad del Aceite Esencial del Romero

4.2.1. Propiedades Organolpticas
Tabla No. 13: Caractersticas organolpticas del aceite esencial de romero,

segn los parmetros analticos en el control de calidad de un aceite esencial
ACEITE ESENCIAL DE ROMERO
OLOR
Aroma a eucalipto fresco.
COLOR
Amarillo plido.
APARIENCIA
Lquido viscoso
64
4.2.2. Propiedades Fsicas
Tabla No. 14: ndice de refraccin promedio del aceite esencial de romero en
los 3 diferentes tamaos de batch a 20C y su desviacin estndar respectiva.
Utilizando las hojas de romero secadas al ambiente.
TAMAO
NDICE DE
DESVIACIN
NDICE DE
DE
REFRACCIN
ESTNDAR
REFRACCIN
BATCH
PROMEDIO
TERICO*
-3
40 gramos
1.4783
2.53*10
1.464 - 1.476
50 gramos
1.4823
1.73*10-4
1.464 - 1.476
60 gramos
1.4816
5.77*10-5
1.464 - 1.476
Fuente: FOOD CHEMICAL CODEX (1996) y Norma UNE 84306:2006
Tabla No. 15: Densidad del aceite esencial de romero. Utilizando las hojas de
romero secadas por medio del horno de conveccin.
PORCENTAJE
*
TAMAO
DE
DE
DENSIDAD
BATCH
ERROR
RESPECTO
DENSIDAD
DENSIDAD
AL
TERICA*
TERICA
0.8940- 0.913
0.892 0.91
g/ml
g/ml (20C)
VALOR
TERICO
MAYOR
50 gramos
0.9460g/ml
(20.5 C)
3.61%
Fuente: FOOD CHEMICAL CODEX (1996) y Norma UNE 84306:2006
Fuente: Universidad San Carlos de Guatemala (2011)
65
4.2.3 Cromatografa de Gases
Tabla No. 16: Compuestos obtenidos en la cromatografa de gases del aceite

esencial de romero, con un tamao de batch de 40 gramos. Utilizando las
hojas de romero secadas al ambiente.
COMPUESTO
% DE CADA
% TERICO
% TERICO
TIEMPO DE
COMPONENTE
DE CADA
DE CADA
RETENCIN
CONTENIDO
COMPONENTE
COMPONENTE
(MIN)
EN LA
7 25
18 - 26
17 30
16 - 23
MUESTRA
-pineno
10.92
0.91
15.973
19.69
Terpineol
17.619
0.09
---
---
-linalool
19.466
3.71
---
---
Alcanfor
21.549
4.10
10 15
12.5 - 22
16 20
1.0 - 4.5
---
0.4 - 1.5
---
1.0 - 4.0
1,8-cineol o
eucaliptol
Borneol
4-terpineol
-terpineol
22.605 y
22.948
23.195
23.795 y
24.368
6.78
1.95
4.41
Verbenona
24.975
37.82
---
0.7 - 2.5
Cariofileno
34.083
0.28
---
----
27
0.5 2.5
Acetato de
Bornilo
Fuente: Heath (1978) y Norma UNE 84306:2006
66

% DE CADA
% TERICO
% TERICO
COMPONENTE
DE CADA
DE CADA
CONTENIDO EN
COMPONENTE
COMPONENTE
LA MUESTRA
10.886
0.20
7 25
18 26
15.895
20.37
17 30
16 23
Terpineol
19.185
0.26
---
---
-linalool
19.404
4.17
---
---
Alcanfor
21.499
4.48
10 15
12.5 22
16 20
1.0 - 4.5
---
0.4 - 1.5
---
1.0 - 4.0
TIEMPO DE
COMPUESTO
RETENCIN
(MIN)
-pineno
1,8-cineol o
eucaliptol
22.583,
Borneol
22.605,
6.80
22.762
4-terpineol
-terpineol
23.15
23.767 y
24.149
2.05
4.87
Verbenona
24.857
38.01
---
0.7 - 2.5
Cariofileno
34.066
0.24
---
----
27
0.5 2.5
Acetato de
Bornilo
67

% DE CADA
% TERICO
% TERICO
COMPONENTE
DE CADA
DE CADA
CONTENIDO EN
COMPONENTE
COMPONENTE
LA MUESTRA
10.863
0.68
7 25
18 26
15.951
18.96
17 30
16 23
Terpineol
17.596
0.16
---
---
-linalool
19.466
3.84
---
---
Alcanfor
21.555
4.56
10 15
12.5 22
16 20
1.0 - 4.5
---
0.4 - 1.5
---
1.0 - 4.0
TIEMPO DE
COMPUESTO
RETENCIN
(MIN)
-pineno
1,8-cineol o
eucaliptol
Borneol
4-terpineol
-terpineol
22.61 y
22.987
23.20
23.795 y
24.441
7.20
1.83
4.44
Verbenona
24.975
39.42
---
0.7 - 2.5
Cariofileno
34.094
0.48
---
----
2 -7
05. 2.5
Acetato de
Bornilo
68
Tabla No. 19: Comparacin de los compuestos obtenidos en la cromatografa

de gases del aceite esencial de romero, en los 3 diferentes tamaos de batch.
% DE CADA
% DE CADA
% DE CADA
COMPONENTE
COMPONENTE
COMPONENTE
CONTENIDO
CONTENIDO
CONTENIDO EN
EN LA
EN LA
LA MUESTRA
MUESTRA (40
MUESTRA (50
(60 GRAMOS)
GRAMOS)
GRAMOS)
0.91
0.20
0.68
19.69
20.37
18.96
Terpineol
0.09
0.26
0.16
-linalool
3.71
4.17
3.84
Alcanfor
4.10
4.48
4.56
Borneol
6.78
6.80
7.20
4-terpineol
1.95
2.05
1.83
-terpineol
4.41
4.87
4.44
Verbenona
37.82
38.01
39.42
Cariofileno
0.28
0.24
0.48
COMPUESTO
-pineno
1,8-cineol o
eucaliptol
Acetato de
Bornilo
69
Grfica No. 1: Cromatograma del aceite esencial de romero obtenido con un batch de
Abundance
(pA)
Tiempo
(minutos)
40 gramos
Fuente: Universidad del Valle de Guatemala (2011)

70
Abundance
(pA)
Tiempo
(minutos)
50 gramos

71
Grfica No. 3: Cromatograma del aceite esencial de romero, obtenido con un batch
Abundance
(pA)
Tiempo
(minutos)
de 60 gramos
72
Grfica No. 4: Comparacin de los 3 cromatograma de aceite esencial de romero,
Abundance
(pA)
Tiempo
(minutos)
obtenido con los 3 diferentes tamaos de batch

73
4.3. Porcentaje de Rendimiento del Aceite Esencial de Romero

Tabla No. 20: Porcentaje de Rendimiento de la destilacin por arrastre de vapor
del aceite esencial de romero obtenido en los 3 diferentes tamaos de batch.
DESVIACIN
ESTNDAR
RENDIMIENTO
TAMAO
DE BATCH
RENDIMIENTO
40 gramos
0.4249%
0.00548%
0.5%- 1.2%
50 gramos
0.7284%
0.00792%
0.5%- 1.2%
60 gramos
0.2663%
0.1211%
0.5%- 1.2%
TERICO*
Fuente: Heath (1978)
74
Marco V
V.
DISCUSIN
5.1. Control de Calidad de la Materia Prima (Romero)
Para el control de calidad de la materia prima (planta de romero), se realizaron:

anlisis organolptico, que es un conjunto de descriptores de las caractersticas
fsicos que tiene la materia prima; anlisis fisicoqumico cuantitativo (control de
humedad) el cual es importante para la conservacin de la planta aromtica y un
anlisis microbiolgico, el cual se realiza por razones toxicolgicas y de higiene.
Para posteriormente obtener aceite esencial de romero por medio del mtodo de
destilacin por arrastre de vapor, que es un proceso que permite recuperar una de
las fases inmiscibles y permite separar compuestos que poseen
puntos de
ebullicin altos y se descomponen cerca de sus puntos de ebullicin.
5.1.1. Anlisis Organolpticos
Dentro de los parmetros de control de calidad de la materia prima se realiz

el anlisis organolptico, dando como resultado hojas de color verde con un
aroma a eucalipto fresco, con flores de color violeta, tronco y tallo de color
caf; como se observa en la tabla No. 8 (pgina No.42). Los resultados
obtenidos son coherentes con la teora, la cual nos indica que la planta de
romero es un arbusto aromtico de color verde, que posee un tallo erecto con
numerosas ramas, sus hojas son gruesas, duras al tacto, opuestas, verdes y
sus flores son de color violeta. Las hojas poseen un aroma a eucalipto fresco.
5.1.2. Anlisis Fisicoqumico Cuantitativo
Se realiz un anlisis de parmetro fisicoqumico cuantitativo de las hojas de

romero secas, en la tabla No.9 (pgina No.42), se observa el porcentaje
75
promedio de humedad de la planta de romero. Como se observa en la tabla se

utilizaron dos mtodos para el secado del romero, uno de secado al ambiente y
uno de secado con horno de conveccin. En el mtodo de secado con horno de
conveccin se sec la planta de romero a una temperatura entre 33 y 35C, y
en el mtodo de secado al ambiente se dej secando bajo la sombra evitando
el contacto de la planta con los rayos del sol, tratando de no exponer la planta
a temperaturas mayores a 35C, debido a que la planta de romero tiene como
componente principal el aceite esencial y la sensibilidad al calor es una de las
propiedades qumicas con mayor influencia sobre el componente, porque el
aceite esencial es muy voltil y en l se encuentran los principios activos, tales
como -pineno, 1,8-cineol o eucaliptol, Terpineol, -linalool, que son sus
componentes ms voltiles,
las cuales al estar expuestas a temperatura
mayores a los 35 C, podran afectar la calidad y el rendimiento del aceite

esencial obtenido.
El tiempo de secado por el mtodo de secado al horno fue de 26 horas y el
tiempo de secado por el mtodo de secado al ambiente fue de 92 horas, como
se observa en la tabla No.9 (pgina No.42). En los dos mtodos utilizados del
secado del romero se obtuvo un porcentaje promedio de humedad que se
encuentra dentro de los parmetros establecidos (8 a 15% de humedad
residual, segn Bandoni, 2002), con una mnima desviacin estndar. Por lo
cual el secado con ambos mtodos es aceptable para la preparacin de la
planta en el proceso de destilacin por arrastre de vapor para la obtencin del
aceite esencial de romero.
5.1.3. Anlisis Microbiolgico
Por ltimo se realiz el tipo de anlisis microbiolgico al extracto de romero

(hojas de romero con agua desmineralizada), el cual se utiliz el mtodo de
recuento por dilucin. En la tabla No. 10 (pgina No.43) se observa que hubo
crecimiento de 13 colonias de mohos y levaduras en la dilucin -1 (1:10), la
cual equivale a 130 colonias por gramo de muestra, y un crecimiento de 1
76
colonia de mohos y levaduras en la dilucin -2 (1:100), que equivale a

100 colonias/gramo de muestra. No hubo crecimiento de colonias de mohos y
levaduras en la dilucin -3 (1:1000), en la dilucin -4 (1:10000) y en la
dilucin -5 (1: 100000).
De los parmetros evaluados de la materia prima se observa que el extracto de

romero no cumple con las especificaciones establecidas por Valle 2006 y con
los parmetros establecidos por el Reglamento tcnico centroamericano
RTCA 71.03.45:07 (anexo VI), ya que el valor es mayor a 100ucf/g. Esto se
dio, debido a que despus del secado el porcentaje de humedad contenido en
la planta estaba entre 11% y 14%, adems de una temperatura ambiente entre
22 y 25C, son las condiciones propicias para que los mohos se desarrollen, ya
que requieren una humedad entre 14% y 15% y temperaturas de crecimiento
entre 22 y 20C.
En la tabla No. 11 (pgina No.44) se observa la ausencia de E. Coli desde la

dilucin -1 hasta la dilucin -5 segn el mtodo de recuento en placa por
dilucin, por lo que en este parmetro el extracto de romero cumple con los
parmetros establecidos por el Reglamento tcnico centroamericano RTCA
71.03.45:07 (anexo VI), en ausencia de E. Coli.
Por ltimo en la tabla No. 12 (pgina No.45) se observa de la dilucin -1 a la

-4, hubo crecimiento de colonias de aerobios mesfilos pero fueron
incontables (MNPC) por lo que se toma como resultado la lectura de la
dilucin -5, la que nos indica que el extracto de romero contena 1,200,000
colonias de gramo por muestra, por lo que no cumple con las especificaciones
establecidas por Valle 2006 y con los parmetros establecidos por el
Reglamento tcnico centroamericano RTCA 71.03.45:07 (anexo VI). Esto se
dio, debido a varias razones: 1) la manipulacin del romero durante el cultivo,
ya que no se conoce las prcticas higinicas que puedan tener las personas
responsables de esta tarea. 2) la manipulacin durante su procesamiento, ya
77
que el romero se manipul sin la utilizacin de guantes en el laboratorio, y

estos microorganismos crecen a temperatura corporal humana (37C), por lo
que fue propicio su crecimiento durante toda la manipulacin en la
elaboracin del anlisis microbiolgico. 3) el romero no recibi ningn
tratamiento de desinfeccin, solo de limpieza, permitiendo eliminar
nicamente el polvo, tierra que contena la planta de romero en la superficie.
Estas razones pueden ser las responsables de contaminacin de tipo
microbiolgico con microorganismos mesfilos aerobios.
5.2. Control de Calidad del Aceite Esencial del Romero

Se llevaron a cabo pruebas de control de calidad del aceite esencial de romero
obtenido por medio de la destilacin por arrastre de vapor de las hojas de romero
secas, para poder evaluar los parmetros fisicoqumicos y compararlos con los
parmetros fisicoqumcos establecidos por la norma UNE 84306:2006.
5.2.1. Propiedades Organolpticos
Se evaluaron las caractersticas organolpticas del aceite esencial de romero

como se indica en los parmetros analticos, en la norma UNE 84306:2006.
En la tabla No. 13 (pgina No.46), se observan las caractersticas del aceite
esencial destilado como: olor, color y apariencia, las cuales son similares a las
dictaminadas por la norma UNE 84306:2006, cuyos parmetros se tomaron
como referencia para la respectiva comparacin, por lo que el aceite esencial
de romero obtenido cumple con las caractersticas organolpticas para su
control de calidad.
78
5.2.2. Propiedades Fsicas
Por otro lado se evaluaron las propiedades fsicas del aceite esencial de
romero, las cuales se pueden observar en la tabla No. 14 (pgina No.46) y
tabla No. 15 (pgina No.46). En la tabla No. 14 (pgina No.46) se muestran
los ndices de refraccin promedio medidos para los 3 diferentes tamaos de
batch, como se puede observar los 3 ndices de refraccin medidos son
mayores a los parmetros que indica Food Chemical Codex, 1996 y la norma
UNE84306:2006 (1.464 y 1.472)
En la tabla No. 15 (pgina No.46) se muestra la densidad del aceite esencial

de romero obtenido (0.9460g/cm3 a 20.5C), el cual tambin es mayor al
rango que indica la teora (0.8940 a 0.913 g/cm 3) y la norma
UNE84306:2006 (0.892 a 0.910 g/cm 3 a 20C). Esta diferencia entre el
valor resultante y la literatura se debe a la diferencia de origen de la
planta, puesto que el romero utilizado para esta investigacin fue
cosechado en el ICTA de Chimaltenango, y el rango reportado es para el
pas de Espaa.
Los cambios obtenidos en el ndice de refraccin y la densidad del aceite

esencial de romero, se deben a diversos factores como las condiciones
climticas (cantidad de lluvia, luminosidad), la altura, los distintos suelos
(pH, humedad, etc.), el manejo agrcola (riegos, abonos, tiempo de
cosecha) y el post cosecha (tiempo de oreado, desecado, almacenamiento),
ya que este valor tambin vara dependiendo del lugar de origen de la
planta.
5.2.3. Perfil Cromatogrfico
Se evalu el porcentaje de constituyentes del aceite esencial de romero

obtenido por medio de las hojas de romero secas utilizando el mtodo de
79
destilacin por arrastre de vapor por medio de una cromatagrafa de gases

acoplada a un espectrmetro de masas.
Para los tres diferentes tamaos de batch se realiz la cuantificacin de los

constituyentes del aceite esencial de romero, mostrados en la tabla No. 16
(pgina No. 47), tabla No. 17 (pgina No. 47) y tabla No. 18 (pgina
No.48).
Los componentes mayoritarios cuantificados en la cromatografa de gases

para los tres diferentes tamaos de batch son, el eucaliptol o 1,8 cineol y
la verbenona. Para 40 gramos de batch se obtuvo un 19.69% de eucaliptol
y 37.82% de verbenona, para 50 gramos de batch se obtuvo un 20.37% de
eucaliptol y un 38.01% de verbenona, y para el batch de 60 gramos se
obtuvo 18.96% de eucaliptol y 39.42% de verbenona. El componente de
eucaliptol es el que le proporciona olor agradable a eucalipto fresco al
aceite esencial de romero, tambin posee propiedades expectorantes y
mucolticas. La verbenona posee propiedades antispticas y bactericidas.
El alcanfor que se encuentra en un menor porcentaje en nuestro aceite esencial

de romero extrado, en el cual 40 gramos de batch se obtuvo 4.10%; para 50
gramos de batch se obtuvo 4.48%; y para 60 gramos de batch se obtuvo
4.56%. Este constituyente del romero posee
propiedades mucolticas,
neurotxicas y regenerador celular, tambin se utiliza en aromaterapia para

tratamientos de dolor, reguladora trmico.
El borneol, linalool y terpineol que se encuentra en menor porcentaje, posee

la propiedad de dar un olor agradable por lo que se utiliza como fragancia en
perfumera, productos de limpieza, jabones y detergentes. El -pineno que
tambin se encuentra en menor porcentaje, posee propiedades estimulante,
descongestionante antivrico y antitumoral.
80
Como se puede observar el aceite esencial de romero posee una variedad de

constituyentes que le confieren propiedades para uso en la industria cosmtica
y farmacutica.
En la tabla No. 19 (pgina No. 49) se puede observar las comparaciones

en la cuantificacin de los constituyentes del aceite esencial de romero en
los 3 diferentes tamaos de batch. Como se observa en dicha tabla, se
presenta una variacin entre ellos en el porcentaje de constituyentes del
romero, debido a que los compuestos del aceite esencial contenido en la
planta, no son homogneos en todas sus partes, ya que posee una
composicin compleja y que al encontrarse en su hbitat natural, cada
parte de la planta est expuesta a diferentes condiciones climticas como
la luminosidad y lluvia. Por otro lado, durante el proceso de destilaciones
por arrastre de vapor se realizaron mediciones de temperatura, por lo que
se abri el baln que contena las hojas de romero con agua y vapor,
volatilizndose una parte de -pineno, por ser este el constituyente ms
voltil del aceite esencial de romero.
Los cromatogramas mostrados en la grfica No. 1(pgina No.50) (40 gramos

de tamao de batch), grfico No. 2 (pgina No.51) (50 gramos de tamao de
batch) y grfico No. 3 (pgina No.52) (60 gramos de tamao de batch) y el
grfico No. 4 (pgina No.53) (cromatograma que compara cada una de las
cromatografas de los tres diferentes tamaos de batch); se puede observar que
si hay diferencia entre los porcentajes de constituyentes para los tres tamaos
de batch, por las razones descritas en el prrafo anterior, sin embargo se dan
los mismos picos caractersticos para los tres cromatogramas (batch 40, 50 y
60 gramos).
81
5.3
Porcentaje de Rendimiento del Aceite Esencial de Romero

El aceite esencial de romero se obtuvo por medio de un equipo de destilacin
armado en la Universidad Rafael Landvar, en el cual se coloc el material
vegetal (hojas de romero sin triturar secas; batch de 40, 50 y 60 gramos) dentro
de un baln y se le agreg agua, aparte en otro baln se agreg el agua suficiente
(900ml) con tres perlas de ebullicin para generar el vapor suficiente para llevar
a cabo la destilacin. Posteriormente la mezcla de aceite esencial y agua se
separ por medio de una ampolla de decantacin utilizando ter dietlico como
disolvente, para despus evaporar el ter dietlico en bao mara, si se obtena
aceite an con porciones de agua se le adicionaba un poco de ter dietlico y se
filtraba con sulfato de sodio anhidro, para remover el agua y obtener as el aceite
esencial de romero.
Para las destilaciones por arrastre de vapor para los batch de 40, 50 y la segunda
repeticin de 60 gramos se utilizaron hojas secas de romero sin triturar. Para la
primera repeticin de 60 gramos se utilizaron hojas secas de romero sin triturar y
tallo seco triturado.
En la tabla No. 20 (pgina No.54), se puede observar los porcentajes de

rendimiento obtenidos con los 3 diferentes tamaos de batch. El tamao de batch
de 40 gramos se obtuvo un rendimiento de 0.42490.00548%, en el de 50
gramos se obtuvo un rendimiento de 0.72840.00792% y el de 60 gramos se
obtuvo un rendimiento de 0.266350.1211%, en este se obtuvo una mayor
desviacin estndar, porque en la primera destilacin se utilizo hojas de romero y
rama triturada debido a que en la teora nos indica que el aceite esencial se
encuentra en las flores, hojas, races, frutos, semillas, ramas y de la corteza
vegetal, por otro lado en la norma UNE 84306:2006, para la evaluacin de los
parmetros de calidad utilizaron un aceite esencial de romero obtenido por medio
de la destilacin por arrastre de vapor de las ramas y flores del romero.
82
El rendimiento de extraccin terico es de 0.5% a 1.2%, como se puede observar

el rendimiento obtenido en el tamao de batch de 50 gramos se encuentra cerca
del lmite inferior del rango del rendimiento terico y el rendimiento obtenido en
los tamaos de batch de 40 y 60 gramos se encuentra por debajo del lmite
inferior. Esto se debe a que al realizar la destilacin por arrastre de vapor para
los tres diferentes tamaos de batch, se le agreg un 30% ms de agua, de la
cantidad recomendada (3 veces el peso de la muestra total), debido a que dicha
cantidad, no era suficiente para llegar al nivel medio del volumen del baln que
contena la masa de romero, adicionalmente el vapor (producido por el baln
aforado que contena agua y perlas de ebullicin), al tener contacto con el agua
contenida en el baln, est se condensaba, aumentando la cantidad de agua en el
baln que contena las hojas de romero, permitiendo que se hidrolizaran ciertos
componentes del aceite esencial. Principalmente los esteres compuestos por
cidos orgnicos y alcoholes, tienden a reaccionar con el agua, el acetato de
bornilo que es un ster, presente en el aceite esencial de romero se debe encontrar
en un porcentaje terico segn norma UNE 84306:2006 en un rango entre 0.5 a
2.5%, pero como se observa en la tabla No. 14 (pgina No. 46), tabla No. 15
(pgina No. 46) y tabla No. 16 (pgina No.47), no se encontr dicho componente
para cada tamao de batch analizado; con dicho resultado se comprueba que el
acetato de bornilo, se hidroliz durante el proceso de destilacin por arrastre de
vapor.
Por otro lado para el batch de 60 gramos el rendimiento obtenido es mnimo,

porque las hojas de romero se encontraban confinadas por lo que los espacios
intermedios desaparecieron, impidiendo la penetracin del vapor y que este
tuviera contacto con cada partcula de la planta para que el aceite esencial
contenido en las hojas de romero se difundiera en el agua abandonando un lugar
de una regin de alta concentracin a uno de baja concentracin.
Otra causa por la que en el batch de 40 gramos el rendimiento obtenido est por
debajo del rendimiento terico, es porque haba mucho espacio intermedio entre
83
las hojas de romero y el tiempo de destilacin fue el mismo que para un batch de
50 y 60 gramos, permitiendo que el vapor que contena el aceite esencial de
romero volviera a condensar, llevndose a cabo una destilacin fraccionada.
El equipo de destilacin utilizado para obtener el aceite esencial de romero no

contena un termmetro para poder medir la temperatura a la cual se llevaba a
cabo la destilacin por arrastre de vapor del aceite esencial de romero, solo unas
pocas veces se desarmaba el aparato de destilacin rpidamente y se meda la
temperatura la cual se encontraba en 92C, por lo que se puede concluir que la
temperatura a la cual se llev a cabo la destilacin por arrastre con vapor fue
menor a 100C impidiendo que los constituyentes del aceite esencial de romero
se descompongan.
Debido a los resultados de rendimiento obtenidos se concluye que la cantidad

ptima en el equipo de destilacin utilizado para obtener aceite esencial de
romero, es de 50 gramos.
84
Marco VI
VI.
1.
CONCLUSIONES
Se obtuvo el aceite esencial de romero por medio de la destilacin por arrastre de

vapor.
2.
El romero posee un aroma a eucalipto fresco y hojas verdes con flores de color
violeta y un tronco de color caf.
3.
En el anlisis fisicoqumico cuantitativo la muestra de romero que se sec al

ambiente sobre papel blanco de cocina se obtuvo un porcentaje de rendimiento de
11.950.0136%.
4.
En el anlisis fisicoqumico cuantitativo la muestra de romero que se sec en el

horno de conveccin se obtuvo un porcentaje de rendimiento de 13.740.0456%.
5.
En el anlisis microbiolgico realizado al extracto de romero para mohos y

levaduras se obtuvo un crecimiento de 130 colonias/g.
6.
En el anlisis microbiolgico realizado al extracto de romero para E. coli no se

obtuvo crecimiento de colonias.
7.
En el anlisis microbiolgico realizado al extracto de romero para mesfilo

aerobios se obtuvo crecimiento de 1,200,000 ufc/g.
8.
El aceite esencial de romero obtenido present una apariencia viscosa, con un

color amarillo plido y un aroma a eucalipto fresco.
9.
El aceite esencial de romero obtenido posee una densidad de 0.9460g/cm3.
85
10. El aceite esencial de romero obtenido en un tamao de batch de 40 gramos posee

un ndice de refraccin de 1.47830.002532, para un tamao de batch de 50
gramos posee un ndice de refraccin de 1.48231.73*10-4, para un tamao de
batch de 60 gramos posee un ndice de refraccin de 1.48165.77*10-5.
11. El aceite esencial de romero obtenido en un tamao de batch de 40 gramos posee

una composicin qumica de 19.69% de eucaliptol, 37.82% de verbenona y 4.10%
de alcanfor. Para el tamao de batch de 50 gramos posee una composicin qumica
de 20.37% de eucaliptol, 38.01% de verbenona y 4.48% de alcanfor. Para el
tamao de batch de 60 gramos posee una composicin qumica de 18.96% de
eucaliptol, 39.42% de verbenona y 4.56% de alcanfor.
12. El porcentaje de rendimiento obtenido en el proceso de obtencin del aceite

esencial de romero utilizando un tamao de batch de 40 gramos fue de
0.42490.00548%.

0.72840.00792%.

0.266350.1211%.
15. El tamao de muestra ptima para la extraccin del aceite esencial de romero en
este trabajo de investigacin con el equipo de destilacin por arrastre con vapor
utilizado es de 50 gramos.
86
Marco VII
VII. RECOMENDACIONES
1.
Controlar las condiciones de cultivo, corte y manipulacin de la planta, para que

pueda cumplir con los parmetros microbiolgicos establecidos por Valle, 2006.
2.
Desinfectar la planta de romero, para iniciar con una materia prima de menor carga
microbiana.
3.
Guardar la planta de romero durante la noche cuando est se ponga a secar al aire
libre, para impedir la condensacin del agua por la humedad o lluvia
y as
disminuir el riesgo de prdida de la esencia, impidiendo que el rendimiento del

aceite esencial disminuya.
4.
Cuando se ponga a secar la planta de romero al aire libre, tener en cuenta de

ponerlo en un cuarto especial para impedir que la planta de romero se contamine
con micro-organismos que se encuentren en el ambiente.
5.
Utilizar un equipo de destilacin en el cual se pueda llevar un mayor control sobre

la temperatura del proceso de produccin del aceite esencial de romero, para
impedir su descomposicin a temperaturas elevadas.
6.
Realizar una reacomodacin de las hojas de romero para impedir que se aglomeren
en el fondo del baln, y obtener un aceite de mayor calidad y aumentar el
rendimiento del mismo.
7.
Agregar la cantidad necesaria de agua al baln que contiene las hojas de romero
para promover la difusin, y no una mayor cantidad que pueda ocasionar la
hidrlisis de los constituyentes del aceite esencial de romero.
87
8.
Realizar las pruebas por triplicado para una mayor confiabilidad de los resultados
obtenidos.
9.
Evaluar los parmetros establecidos por la norma UNE 84306:2006 como: Perfil
cromatogrfico, ndice de refraccin, poder rotatorio, ndice de acidez,
miscibilidad con etanol al 90%, punto de inflamacin, densidad relativa y
caractersticas organolpticas.
10. Utilizar otros equipos de diferentes capacidades para verificar si existe una
variacin considerable con respecto al rendimiento del aceite esencial, para los 3
batch evaluados durante el trabajo de graduacin.
11. Evaluar diferentes tipos de solvente como: metanol, isopropanol, acetona, hexano,
cloruro de metileno y dicloruro de metileno; para poder obtener aceite esencial de
romero mediante la extraccin con solventes voltil.
12. Realizar pruebas del comportamiento del aceite esencial de romero, en el

desarrollo productos cosmticos y farmacuticos. Debido a sus propiedades
calmantes, anti-inflamatorias, antispticas, ayuda a prevenir la aparicin de la
caspa y a regular la secrecin sebcea del cuero cabelludo.
88
Marco VIII
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
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94
Marco IX
IX. ANEXOS
9.1. Anexo I (Glosario)
Aceite Esencial: compuestos odorferos naturales que ocurre en las plantas y que
son aisladas de las mimas.
Densidad: relacin entre masa partido volumen
Destilacin por arrastre de vapor: separacin de los componentes de una solucin

por diferencia de volatilidades, en la cual el material dentro de la mezcla se pone en
contacto con vapor, oxgeno o hidrgeno.
Condensador: aparato que emplea dos fluidos con el propsito de que uno de ellos
cambie de fase, para su posterior uso.
Cromatografa de gases: medio para la separacin, caracterizacin y anlisis

cuantitativo de los aceites esenciales, es una tcnica que funciona por medio de
difusin.
Fases: una parte de un material que se caracteriza por tener propiedades

homogneas a travs de ella, y que se separa de otra interfase.
Humedad: contenido de agua en un material (Gramos).
ndice de refraccin: medida que determina la reduccin de la velocidad de la luz

al propagarse por un medio homogneo y es una propiedad especfica de cada
interfase.
95
Rendimiento: es la relacin entre el aceite esencial obtenido y la masa de materia

vegetal alimentada al alambique de destilacin
Secado: separacin de pequeas cantidades de agua contenidas en un slido por

medios mecnicos.
Porcentaje de Humedad: tanto por ciento de vapor de agua que impregna un

cuerpo.
Solubilidad: capacidad que tiene un compuesto de difundirse en otro, por tener

similitud estructural en sus molculas.
96
9.2. Anexo II (Datos Originales)
Tabla No. 21: Porcentaje de humedad presente en la planta de romero y el

tiempo que requiri la planta para obtener el porcentaje de humedad deseado.
Muestra
Porcentaje de Humedad
Tiempo de
secado
Corrida 1
Corrida 2
Corrida 3
13.52%
11.10%
11.23%
10.86%
18.99%
11.36%
secado al
ambiente
92 hrs.
Secado en el
horno de
26 hrs
conveccin
Tabla No. 22: Datos generales del proceso de destilacin por arrastre de vapor,
con 40 gramos de muestra. Utilizando la planta secada al ambiente sobre papel
blanco de cocina.
Tiempo de destilacin
Parte de la planta
aromtica utilizada para
la extraccin
Cantidad obtenida de
CORRIDA 1
CORRIDA 2
3 horas
2 horas
Tallo triturado y hojas

sin triturar
Hojas sin triturar
600mL
500mL
Cantidad de ter
40mL en 30mL de
40mL en 30mL de
utilizado
destilado
destilado
1200mL
900mL
destilado
Cantidad de agua
utilizada para generar
vapor
97
Peso del vial
6.4267 gramos
6.4267 gramos
Peso vial + aceite
6.5951 gramos
6.5982 gramos
Peso aceite
0.1684 gramos
0.1715 gramos
con 50 gramos de muestra (hojas de romero). Utilizando la planta secada al
ambiente sobre papel blanco de cocina.
CORRIDA 1
CORRIDA 2
2 horas
2 horas
Hojas sin triturar
Hojas sin triturar
500mL
500mL
Cantidad de ter
40mL en 30mL de
40mL en 30mL de
utilizado
destilado
destilado
Cantidad de agua
900mL
900mL
Peso del vial
6.3014 gramos
6.3014 gramos
Peso vial + aceite
6.6628 gramos
6.6684 gramos
Peso aceite
0.3614 gramos
0.367 gramos
Parte de la planta
la extraccin
destilado

vapor
98
con 60 gramos de muestra (hojas de romero). Utilizando la planta secada al
ambiente sobre papel blanco de cocina.
CORRIDA 1
CORRIDA 2
2 horas
2 horas
Hojas sin triturar
Hojas sin triturar
500mL
500mL
Cantidad de ter
40mL en 30mL de
40mL en 30mL de
utilizado
destilado
destilado
900mL
900mL
Peso del vial
6.3409 gramos
6.3409 gramos
Peso vial + aceite
6.4493 gramos
6.5521 gramos
Peso aceite
0.1084 gramos
0.2112 gramos
Parte de la planta
la extraccin
destilado
Cantidad de agua
vapor
con 50 gramos de muestra (hojas de romero). Utilizando la planta secada por
medio del horno de conveccin
Tiempo de
destilacin
CORRIDA 1
CORRIDA 2
CORRIDA 3
2 horas
2 horas
2 horas
Hojas sin triturar
Hojas sin triturar
Parte de la planta
aromtica
utilizada para la
Hojas sin
triturar
extraccin
99
Cantidad obtenida
410mL
410mL
400mL
Cantidad de ter
30mL en 20mL de
20mL en 40mL
20mL en 40mL
utilizado
destilado
de destilado
de destilado
900mL
900mL
900mL
41.6395 gramos
41.6395 gramos
41.6395 gramos
42.0135 gramos
42.057 gramos
42.0087 gramos
0.374 gramos
0.362 gramos
0.3692 gramos
de destilado
Cantidad de agua
utilizada para
generar vapor
Peso del frasco
mbar
Peso frasco mbar
+ aceite
Peso aceite
Tabla No. 26: ndice de refraccin del aceite esencial de romero para los 3
diferentes tamaos de batch, ledos a temperatura de 19C. Utilizando la planta
secada al ambiente sobre papel blanco de cocina.
TAMAO DE
CORRIDA 1
CORRIDA 2
CORRIDA 3
40 gramos
1.476
1.4814
1.4794
50 gramos
1.4826
1.4826
1.4829
60 gramos
1.482
1.4821
1.482
BATCH
100
Tabla No. 27: ndice de refraccin del aceite esencial de romero para los 3
diferentes tamaos de batch, a 20C. Utilizando la planta secada al ambiente
sobre papel blanco de cocina.
TAMAO DE
CORRIDA 1
CORRIDA 2
CORRIDA 3
40 gramos
1.47555
1.4805
1.47895
50 gramos
1.48215
1.48215
1.48245
60 gramos
1.48155
1.48165
1.48155
BATCH
Tabla No. 28: Densidad del aceite esencial de romero para 50 gramos de batch a
20.5C. Utilizando la planta de secada por medio del horno de conveccin.
PESO DEL PICNMETRO
3.198 gramos
VOLUMEN DEL PICNMETRO
1.13 mililitros
PESO DEL PICNMETRO + ACEITE
4.267 gramos
ESENCIAL DE ROMERO
Tabla No. 29: Porcentaje de Rendimiento del aceite esencial de romero obtenido
en la destilacin por arrastre de vapor en los 3 diferentes tamaos de batch.
Utilizando la planta secada al ambiente sobre papel blanco de cocina
TAMAO DE
CORRIDA 1
CORRIDA 2
40 gramos
0.421%
0.4287%
50 gramos
0.7228%
0.734%
60 gramos
0.1807%
0.352%
BATCH
101
9.3.
Anexo III (Cromatografa de Gases)
9.3.1. Cromatografa de gases del aceite esencial de romero Obtenido con un

tamao de batch de 40 gramos.
102
103
104
105

106
107
108
109

110
111
112
113
114
9.4. Anexo IV (Densidad del Aceite Esencial de Romero)
115
9.5. Anexo V (Clculo de Muestra)
Clculo del porcentaje de humedad promedia y la desviacin estndar del

porcentaje de humedad promedio de la planta de romero con el mtodo de secado
al ambiente.
Promedio
- 13.52% +11.10% +11.23%
x=
= 11.95%
3
Desviacin estndar
(x - x)2
j=1 j
N
Sx =
S%Humedad =
N -1
13.52% -11.95%
+ 11.10% -11.95%
2
11.23% -11.95%
2
= 0.0136%
Clculo del porcentaje de rendimiento del aceite esencial de romero obtenido en

la destilacin por arrastre de vapor con un tamao de batch de 40 gramos.
%ren dimiento
peso del aceite

*100
peso del romero
peso del romero= 40 gramos

peso del vial= 6.4267 gramos
peso vial+ aceite= 6.5951 gramos
peso aceite= (peso vial+aceite)-peso vial
peso aceite=(6.5961-6.4267)gramos
peso aceite=0.1684gramos
116
%ren dim iento

%ren dim iento
0.1684gramos
*100
40gramos
0.421%
Los porcentajes de rendimiento para los diferentes tamaos de batch se puede

observar en la tabla No. 26 y 27.
Clculo de la desviacin estndar del porcentaje de rendimiento del aceite

esencial de romero obtenido en la destilacin por arrastre de vapor con un
Promedio
- 0.42875% + 0.421%
x=
= 0.424875%
2
Desviacin estndar
(x - x)2
j=1 j
N
Sx =
S
=
40gr
N -1
0.42875% - 0.424875%
+ 0.421% - 0.424875%
1
2
= 0.00548
Clculo de la correccin del ndice de refraccin del aceite esencial de romero

obtenido en la destilacin por arrastre de vapor con un tamao de batch de 40
gramos, medido a 19C.
(observado) = 1.476
T de lectura = 19 C
corregido = (observado) + 0.00045(T de lectura - 20)

corregido = 1.476 + (0.00045)(19 - 20)
corregido = 1.47555
117
Clculo de la desviacin estndar del ndice de refraccin del aceite esencial de

romero obtenido en la destilacin por arrastre de vapor con un tamao de batch
de 40 gramos, a la temperatura corregida de 20C.
Promedio
- 1.47555 +1.4805 +1.47895
x=
= 1.4783
3
Desviacin estndar
(x - x)2
j=1 j
N
Sx =
N -1
S
=
40gr
1.47555 -1.4783
+ 1.4805 -1.4783
2
+ 1.47895 -1.4783
2
= 0.002532
Clculo de la densidad del aceite esencial de romero obtenido en la destilacin

por arrastre de vapor con un tamao de batch de 50 gramos, utilizando el aceite
obtenido en las tres corridas realizadas.
Peso del picnmetro = 3.198g

Volumen del picnmetro = 1.13mL
Peso del picnmetro + aceite = 4.267g
aceite =
masa picnmetro+aceite - masa picnmetro

Volumen picnmetro
4.267g - 3.198g
1.13mL
= 0.9460 g
mL
aceite =
aceite
118
Clculo del porcentaje de error de la densidad del aceite esencial de romero

obtenido en la destilacin por arrastre de vapor con un tamao de batch de 50
gramos, respecto al valor terico mayor.
%ERROR =
% ERROR =
Valor Experimental - Valor terico Mayor

100
Valor terico Mayor
0.9460 g
- 0.913 g
ml
ml 100
g
0.913
ml
% ERROR = 3.61%
119
9.6. Anexo VI (Especificaciones Reglamento Tcnico Centroamericano RTCA

71.03.45:07)
120
9.7. Anexo VII (Fotos)
Figura No. 6: Secado de la planta de romero sobre papel de envolver.
Figura No. 7: Secado de la planta de romero en un horno de conveccin
121
Figura No. 8: Determinacin del porcentaje de humedad de la planta de romero por

medio de la balanza de humedad
Figura No. 9: Preparacin del extracto de romero para su anlisis microbiolgico.
Figura No. 10: Realizacin del mtodo de recuento por dilucin para su posterior
sembrado en un medio de cultivo
122
Figura No. 11: Siembra del extracto de romero en el medio agar papa dextrosa,
chromocult y agar recuento total.
Figura No. 12: Lectura del nmero de colonias que crecieron en el medio agar papa
dextrosa.
Figura No. 13: Lectura del nmero de colonias que crecieron en el medio
chromocult.
123
Figura No. 14: Lectura del nmero de colonias que crecieron en el medio recuento
total.
Figura No. 15: Equipo de laboratorio utilizado para la destilacin por arrastre de
vapor para la obtencin del aceite esencial de romero.
Figura No. 16: Decantacin de la mezcla de agua y romero.
124
Figura No. 17: Filtracin de la mezcla de aceite y agua con sulfato de sodio
anhidro.
Figura No. 18: Aceite esencial de romero obtenido.
Figura No. 19: Determinacin de la densidad del aceite esencial de romero.
125
Figura No. 20: Refractmetro, utilizado para la determinacin del ndice de

refraccin del aceite esencial de romero.
Figura No. 21: Cromatgrafo de gases, utilizado para la elaboracin de la

cromatografa de gases del aceite esencial de romero.
126

Extraccion Del Aceite de Romero

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UNIVERSIDAD RAFAEL LANDVAR

ANLISIS DE PARMETROS MICROBIOLGICOS Y FISICOQUMICOS DE

Melisa Alejandra Rodas Ceballos

Guatemala, Mayo 2012

UNIVERSIDAD RAFAEL LANDVAR

ANLISIS DE PARMETROS MICROBIOLGICOS Y FISICOQUMICOS DE

Presentado al consejo de la Facultad de Ingeniera

Melisa Alejandra Rodas Ceballos

Previo a optar el ttulo de:

En el grado acadmico de:

Guatemala, Mayo 2012

DEDICATORIA Y/O AGRADECIMIENTOS

A LA VIRGEN DEL SAGRADO CORAZN

El presente trabajo titulado Anlisis de Parmetros Microbiolgicos y Fisicoqumicos de un

Finalmente con el aceite esencial obtenido se determin el porcentaje de rendimiento y se

Lo Escrito sobre el Tema ......................................................................................... 2

Resumen Crtico del Marco Terico ........................................................................ 5

1.2.1. Aceite esencial ....................................................................................................... 5

PLANTEAMIENTO DEL P ROBLEMA ............................................................................ 40

2.1.1. Objetivo General .................................................................................................. 42

2.2.1. Variables Independientes ..................................................................................... 43

Definicin de las Variables .................................................................................... 43

2.3.1. Variables Independientes ..................................................................................... 43

Alcances y Lmites ................................................................................................. 47

2.4.1. Alcances ............................................................................................................... 47

Unidad de Anlisis ................................................................................................. 50

3.3.1. Preparacin Preliminar de la Materia Prima ........................................................ 54

Diseo y Metodologa Estadstico ......................................................................... 57

3.4.1. Diseo Experimental ............................................................................................ 57

PRESENTACIN Y ANLISIS DE RESULTADOS ............................................................ 59

Control de Calidad de la Materia Prima (Romero) ................................................ 59

4.1.1. Anlisis Organolpticos ....................................................................................... 59

Control de Calidad del Aceite Esencial del Romero ............................................. 64

4.2.1. Propiedades Organolpticas ................................................................................. 64

Porcentaje de Rendimiento del Aceite Esencial de Romero .................................. 74

Control de Calidad de la Materia Prima (Romero) ................................................ 75

5.1.1. Anlisis Organolpticos ....................................................................................... 75

Control de Calidad del Aceite Esencial del Romero ............................................. 78

5.2.1. Propiedades Organolpticos ................................................................................. 78

5.2.2. Propiedades Fsicas .............................................................................................. 79

Porcentaje de Rendimiento del Aceite Esencial de Romero .................................. 82

Referencia Bibliogrfica ........................................................................................ 89

Anexo I (Glosario) ................................................................................................. 95

Anexo II (Datos Originales).................................................................................. 97

Anexo III (Cromatografa de Gases) .................................................................. 102

Anexo IV (Densidad del Aceite Esencial de Romero) ....................................... 115

Anexo V (Clculo de Muestra) ........................................................................... 116

(Especificaciones Reglamento Tcnico Centroamericano RTCA

71.03.45:07) .................................................................................................................... 120

Anexo VII (Fotos) ............................................................................................... 121

Tabla No. 2: Composicin qumica de las hojas de romero ................................................ 16

Tabla No. 3: Parmetros ms frecuentes utilizados en el control de calidad de las especies

Tabla No. 4: Caractersticas microbiolgicas del Extracto de Romero ............................... 22

Tabla No. 5: Especificaciones de limites microbianos expresados en UFC/ g, para

Tabla No. 6: Componentes del aceite esencial de romero ................................................... 26

Tabla No. 7: Clasificacin de los parmetros analticos utilizados en el control de calidad

Figura No. 1: Planta de Romero .......................................................................................... 15

Figura No. 2: Esquemas de la parte de un horno ................................................................. 20

Figura No. 3: Principales Componentes de un equipo de extraccin mediante arrastre con

Figura No. 5: Equipo de destilacin por arrastre de vapor .................................................. 56

Figura No. 7: Secado de la planta de romero en un horno de conveccin ........................ 121

Figura No. 16: Decantacin de la mezcla de agua y romero ............................................. 124

Figura No. 18: Aceite esencial de romero obtenido .......................................................... 125