Prctica 4

Morfologa colonial y celular

Objetivo
Que el alumno aprenda y determine los diferentes tipos de
morfologa colonial y celular.

Introduccin
Varias tcnicas pueden utilizarse en el examen microscpico directo de muestras clnicas, ya sea para demostrar la presencia de
microorganismos u observar ciertas caractersticas bioqumicas, fisiolgicas o serolgicas. Las tcnicas ms comnmente
empleadas en los laboratorios de microbiologa revisaremos en la presente prctica.
Debido a que el ndice de refraccin de las bacterias y otros microorganismos es muy semejante al del medio de montaje, las
bacterias pueden a menudo no ser visibles con iluminacin en campo brillante, por ende se tienen que hacer ciertas manipulaciones con la fuente de luz, El ajuste ms simple consiste en bajar el condensador de modo que l foco de luz transmitida no se
concentre directamente sobre el objeto.
Debido a que las bacterias y otros microorganismos son pequeos y su protoplasma posee un ndice de refraccin cercano al
del agua, se requieren generalmente funciones biolgicas para visualizarlos adecuadamente o demostrar el fino detalle de sus
estructuras internas.
Los colorantes no slo sirven para la tincin directa de materiales biolgicos, sino que tambin se pueden emplear a fin de
demostrar las funciones fisiolgicas de los microorganismos empleando las llamadas tcnicas supravitales.

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Prctica 4
Morfologa colonial y celular

Prctica 4
Morfologa colonial y celular

Materiales y Equipos.

Cuadro 1. Morfologa de las colonias presentes en las cajas.

Materiales

Colonia
Forma
Elevacin
Borde
Color
Esquema

Equipos

Portaobjetos
Cubreobjetos
100 ml de agua destilada
Cajas con diferentes microorganismos.
Hisopos estriles.

Microscopio estereoscpico
Microscopio compuesto
Asa bacteriolgica
Cajas de Petri
Mechero bunsen

Morfologa celular

Mtodo

1. Colocar una pequea gota de agua en un portaobjetos limpio. Hacer esto para cada una de las muestras
proporcionadas.

Morfologa Colonial

2. Con el asa de siembra previamente flameada transferir una pequea cantidad del cultivo en medio slido a

a) Observe las cajas Petri que se le proporcionaran en el microscopio estereoscpico.

b) Identifique las diferentes colonias que estn presentes.
c) Auxilindose de las figura 1 describa la morfologa colonial y microscpica de las colonias identificadas y anote sus resultados
en el cuadro 1.

la gota. Remover la mezcla hasta formar una suspensin homognea y extenderla para facilitar su secado.
3. Esperar hasta que la fina pelcula de lquido se evapore o bien acelerar este proceso con un ventilador o un
secador. No eliminar el lquido calentando el portaobjetos a la llama, pues las clulas pueden deformarse o
romperse.
4. Fijacin de la muestra. Pasar tres veces el portaobjetos por la llama durante unos segundos. Dejar enfriar el
portaobjetos entre los pases.

Forma

5. Cubra los portaobjetos con Cristal Violeta, deje reposar durante un minuto
puntiforme

circular

filamentosa

amiboide

rizoide

fusiforme

6. Lavar las preparaciones con agua para eliminar el exceso de colorante. Para ello, inclinar el portaobjetos y
aplicar el chorro de agua en su parte superior permitiendo que resbale sobre el frotis. No dirigir el agua
directamente sobre el frotis pues podra arrastrar parte de l consigo.

Elevacin
Borde

plana

elevada

pulvinada

convexa

umbonada

7. Eliminar la mxima cantidad de agua de los portaobjetos golpendolos por su canto con cuidado contra la
superficie de la mesa de trabajo.
8. Esperar hasta que el lquido se evapore. Este proceso se puede acelerar secando el portaobjetos por simple

entero

ondulado

lobulado

crenado

filamentoso

enrollado

presin entre dos papeles de filtro (en ningn caso frotar el portaobjetos).
9. Observar al microscopio bajo el objetivo 100X. Usar aceite de inmersin.
10. Describir la forma celular de cada una de las muestras.

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Morfologa colonial y celular

Anlisis de prueba bucal

Hacer un raspado de enca de una persona con problemas de gingivitis y seguir los pasos descritos en la metodologa de
MORFOLOGA CELULAR.

Cuestionario
1.- Cules son las caractersticas de la morfologa colonial y celular de B. subtilis y Aspergillus niger ?
A cuales de tus muestras corresponden?
2.- A que se deben las diferentes formas coloniales de las bacterias?
3.- Cual fue la finalidad de utilizar cristal violeta en esta prctica?
4.- De qu depende la intensidad de coloracin de un colorante?
5.- Por qu no es conveniente utilizar el microorganismo Treponema pallidum en practicas como esta?
6.- Cules son las formas celulares que se esperaban ver en la muestra de la persona con gingivitis?

Referencias
1. Atlas, R. W. Microbiology. 2. Edition. Mc. Millan Public. Co. 1988. Alexopoules, C. J. Introduccin a la Micologa.
Universitaria de Buenos Aires, Argentina. 1966.
2. Brock, T.D.; Smith y M.T. Madigan. Biologa de los Microorganismos. 8. Edicin. Prentice- Hall. Espaa.
3. Campbell, R. Ecologa Microbiana. 1. Edicin. Limusa. 1987. Mxico. Deacon, J. W. Introduccin a la Micologa
Moderna. 1. Edicin. Limusa. 1993.
4. Fernndez, E. Microbiologa e inocuidad alimentaria, Ed. Universidad de Quertaro. 2000. Mxico.