Universidad autnoma de Chiriqu

Facultad de Enfermera

Tema:
Aplicaciones clnicas del concepto de inhibicin
enzimtica
Asignatura:
Bioqumica

Estudiante:
Paola Del Cid
4-783-1545

Profesora:
Rosa Elena Caballero

Ao:
2015
II semestre

Investigacin
Sustancia inhibidora de la proteasa del HIV y su reaccin inhibidora
Todos los frmacos inhibidores de proteasa en uso en la actualidad para
combatir el VIH, as como los que se utilizan para combatir otras
enfermedades infecciosas e incluso el cncer, deben su existencia a un
descubrimiento realizado hace ms de 120 aos por el cientfico alemn
Wilhelm Khne. En 1876, Khne descubri una sustancia en el jugo
pancretico capaz de degradar otras sustancias biolgicas. Tambin
descubri que dicha sustancia, a la que llam tripsina, se origina como un
precursor inactivo, el tripsingeno, que se transforma en la tripsina activa.

Estos frmacos actan sobre la enzima proteasa inhibindola. La proteasa

es la responsable de la segmentacin de una protena del VIH en unidades
con capacidad infecciosa.
Si las protenas no se cortan, el nuevo virus no madura y no puede infectar
a otra clula.
Los inhibidores de la proteasa pueden interferir en el funcionamiento de la
enzima proteasa nativa.
Su aparicin a mediados de los 90 revolucion el tratamiento del VIH ya que
permitan, junto con los ITIAN e ITINN, atacar al virus en dos pasos distintos
y esenciales de su reproduccin, con lo que las posibilidades de inhibir su
actividad y mantener en el tiempo esa inhibicin, se incrementaron
enormemente. En definitiva, permiten atacar al virus desde distintos flancos
y conseguir as una mayor eficacia del tratamiento.
Khne realiz sus investigaciones mucho antes de que los cientficos
hubieran analizado las sustancias qumicas de los seres vivos. Actualmente,
los cientficos saben que en los cidos nucleicos desoxirribonucleico (ADN) y
ribonucleico (ARN) se almacena nuestra informacin gentica. El ADN y el
ARN especifican el orden exacto en el que las entidades qumicas
denominadas aminocidos deben estar alineadas para formar las protenas
que, a su vez, resultan esenciales para el funcionamiento celular. Algunas
protenas, por ejemplo, forman una red a modo de esqueleto que confiere a
las clulas su estructura. Otras permiten a la clula leer y reproducir las
instrucciones genticas codificadas en sus cidos nucleicos. Y otras
protenas, llamadas enzimas, actan a modo de catalizadores de la qumica
biolgica celular. Algunas enzimas permiten fabricar protenas; otras las
cortan.
El hallazgo de la tripsina convirti a Khne en el primer cientfico en
descubrir una enzima que degradaba las protenas. La tripsina result ser
una proteasa, un tipo de enzima cuya funcin se sabe actualmente que
consiste en cortar las protenas al romper los enlaces entre los aminocidos.
De hecho, las proteasas abundan en las clulas humanas, ya que las clulas
necesitan de distintas proteasas para realizar muchas de sus funciones.
El descubrimiento de Khne fue el primer paso crucial en el desarrollo de los
inhibidores de proteasa que se utilizan para combatir el VIH, pero an
tendra que pasar ms de medio siglo para que los cientficos llegaran a
utilizarlo. A principios de la dcada de 1930, John H. Northrop y Moses
Kunitz, de la Universidad Rockefeller de Nueva York, aislaron tripsina junto a
otra enzima digestiva relacionada, la quimotripsina, y las identificaron como
protenas. Dos dcadas ms tarde, en 1952, Frederick Sanger, de la
universidad inglesa de Cambridge, desarroll un mtodo para determinar la
secuencia de aminocidos de las protenas. En la dcada de 1960, otros
cientficos determinaron las secuencias de aminocidos de la tripsina y la
quimotripsina. Estas enzimas, las principales bestias de carga de la
digestin, descomponen conjuntamente las protenas de los alimentos. Al
comparar las secuencias de estas dos enzimas similares aunque
funcionalmente diferentes, los cientficos observaron por primera vez qu
partes de las proteasas eran importantes para su funcionamiento.

En qu consiste el efecto de la aspirina con la

ciclooxigenasa?

El cido acetilsaliclico interfiere con la sntesis de las prostaglandinas

inhibiendo de forma irreversible la ciclooxigenasa, una de los dos enzimas
que actan sobre el cido araquidnico. La ciclooxigenasa existe en forma
de dos isoenzimas: la ciclooxigenasa-1 (COX-1) y la ciclooxigenasa-2 (COX2). Estas isoenzimas estn codificadas por genes diferentes, presentes en
lugares diferentes (la COX-1 est presente sobre todo en el retculo
endoplsmico, mientras que la COX-2 se encuentra en la membrana
nuclear) y tienen funciones diferentes. La COX-1 se expresa en casi todos
los tejidos y es responsable de la sntesis de prostaglandinas en respuesta a
estmulos hormonales, para mantener la funcin renal normal, as como la
integridad de la mucosa gstrica y para la hemostasis. La COX-2 se expresa
slo en el cerebro, los riones, los rganos reproductores y algunos
tumores. Sin embargo, la COX-2 es inducible en muchas clulas como
respuesta a algunos mediadores de la inflamacin como son la interleukina1, el TNF, los mitgenos, lipopoliscaridos y radicales libres.
Se ha observado un aumento de la expresin de la COX-2 en adenomas
colorectables as como en otros cnceres.
La aspirina acetila la serina en ambas COX y como casi todos los tejidos
producen eicosanoides, los efectos del frmaco son muy diversos:
Efectos antitrombticos: La COX-1 de las plaquetas genera el
tromboxano A2, un potente vasoconstrictor y agonista de las plaquetas. Los
efectos de la aspirina sobre la agregacin plaquetaria tienen lugar con dosis
mucho menores que las requeridas para un efecto analgsico o antiinflamatorio. La COX-1 de las plaquetas es ms sensible que la COX-1 del
endotelio, lo que explica la necesidad de dosis muy bajas de aspirina para
conseguir un efecto antitrombtico, lo que es deseable en pacientes con
enfermedad coronaria. La inhibicin de la COX-1 plaquetaria ocasiona una
disminucin de la agregacin plaquetaria con un aumento del tiempo de
sangrado. Estos efectos sobre la hemostasia desaparecen a las 36 horas de
la administracin de la ltima dosis. Aunque el cido acetilsaliclco no acta
sobre la agregacin plaquetaria inducida por la trombina (que se produce
cuando se activan las plaquetas como consecuencia de la ruptura de una
placa de ateroma al inicio de un episodio de angina inestable), se
recomienda su administracin en pacientes con historia de enfermedad
coronaria y de angina estable. Se cree que los efectos beneficiosos de la
aspirina en la profilaxis del infarto de miocardio se deben a su capacidad
para reducir los niveles de protena C reactiva.
Con dosis muy altas, la aspirina tambin ejerce un efecto inhibitorio sobre la
hemostasis dependiente de la vitamina K, con lo que se altera la sintesis de
protrombina resultando una hipoprotrombinemia.
Efectos anti-inflamatorios: Se cree que la actividad anti-inflamatoria del
cido acetil-saliclico se debe a la inhibicin perifrica de la accin de la
COX-1 y de la COX-2, aunque la aspirina puede tambin inhibir la sntesis de
otros mediadores de la inflamacin. Sin embargo, se cree que la respuesta
inflamatoria ms importante est mediatizada por la COX-2 ya que esta
enzima es inducible por las citocinas. La inhibicin de la COX-2 por la
aspirina reduce la sntesis de las prostaglandinas E y F, prostaglandinas que
responsables de la vasodilatacin y la permeabilidad capilar lo que, a su
vez, aumenta la movilidad de fludos y leucocitos que ocasionan nsables de
la inflamacin, enrojecimiento y dolor. El cido acetil-saliclico no solo
disminuye la permeabilidad capilar sino que tambin reduce la liberacin de
enzimas destructoras de los lisosomas.

.Efectos analgsicos: los efectos analgsicos de la aspirina son, al

parecer, efectos indirectos sobre el sistema nervioso central. Al disminuir la
sntesis de prostaglandinas, la aspirina reduce la percepcin del dolor.
.Efectos antipirticos: son el resultado de la inhibicin de la sntesis de
prostaglandinas en el hipotlamo, lo que a su vez induce una vasodilatacin
periferca y sudoracin.
.Efectos antiproliferativos: Aun cuando el cido acetilsaliclco acetila la
COX-2, esta enzima acetilada retiene algo de su capacidad para metabolizar
el cido araquidnico para producir al cido graso 15Rhydroxieicosatetraenoic (15R-HETE). Se sabe que los hidroxicidos tienen
efetos antiproliferativos. No se sabe con exactitud si los efectos de la
aspirina reduciendo los niveles de prostaglandinas contribuyen a su
actividad antitumoral.
.Efectos renales: Los salicilatos actan sobre los tbulos renales afectando
la resorcin del cido rico. En dosis bajas, de 1-2 g/da, los salicilatos
inhiben la secrectin activa de cido rico en la orina a travs de los tbulos
proximales. En dosis ms altas ((> 5 g/dias), los salicilatos inhiben la
reabsorcin tubular de cido rico, lo que ocasiona un efecto uricosrico. A
dosis intermedias, la aspirina no modifica la eliminacin del cido rico
.Otros efectos: En el tratamiento de la conjuntivitis primaveral, la aspirina
previene la formacin de prostaglandina D2, un mediador secundario de los
mastocitos y de las condiciones alrgicas.

En qu consiste el efecto del captopril sobre la enzima

convertidora de la angiotensina?
Los inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina (IECA) son una
clase de medicamentos que se emplean principalmente en el tratamiento
de la hipertensin arterial, de las insuficiencia cardaca crnica y tambin
de la Enfermedad renal crnica y forman parte de la inhibicin de una serie
de reacciones que regulan la presin sangunea: el sistema renina
angiotensina aldosterona. Las sustancias inhibidoras ECA se descubrieron
por primera vez en venenos de serpientes. Los inhibidores ECA ms
importantes utilizados para tratamientos son el captopril (Capoten), el
enalapril, el lisinopril y el ramipril. Por su gran significado teraputico, stos
se cuentan entre los frmacos ms vendidos.
El captopril s sintetiz en 1977 por Cushman y colbs mediante un mtodo
racional que comprendi anlisis del efecto inhibitorio de la teprotide,
ingerencia acerca del efecto de la ECA sobre sustrato y analoga con la
carboxipeptidasa A, que se saba que estaba inhibida por el cido Dbenzilsuccinico. Estos investigadores propusieron una hiptesis a partir de
la cual la ECA podra inhibirse mediante succinil aminocidos que
correspondieran en cuanto a longitud al pptido desdoblado por la ECA.
Esta hiptesis result cierta y propici finalmente la sntesis de una serie de
derivados carboxialcanoil y mercapto alcanoil que actuaron como potentes
inhibidores competitivos de la ECA.
Se han sintetizado muchos inhibidores de la ECA, que pueden clasificarse
en tres grupos amplios con base a la estructura qumica, (1) frmacos que
contienen sulfihidrilo, relacionados desde el punto de vista estructural con
el Captopril (Fentropril, Peralotril, Zofenopril, Alacepril.), (2) frmacos que
contienen dicarbxido relacionados en el aspecto estructural con el
Enalapril ( Lisinopril, Benazepril, Quinapril, Maexipril, Ramipril, Espirapril,
Perindopril, Indolapril, Pentopril, Enalapril, Cilazapril.), (3)frmacos que
contienen fsforo y muestran relacin estructural con el Fosinopril.6,7,8.

En la actualidad hay nueve inhibidores de la ECA aprobados para uso en

Estados Unidos: Benazepril, Captopril, Enalapril, Fosinopril, Lisinopril,
Quinapril, Ramipril, Esperapril, Maexipril. En todo el mundo se emplean
unos diecisis.9.
En general estos frmacos difieren en cuanto a tres propiedades.
a) Potencia.
b) Si la inhibicin de la ECA se debe de manera primaria al medicamento en
s o a conversin de un pro frmaco en un metabolito activo.

Qu reaccin cataliza la acetilcolinesterasa?

La acetilcolinesterasa es una esterasa que hidroliza a la acetilcolina,
neurotransmisor en muchas sinapsis, especialmente en las placas
neuromotoras.
La acetilcolinesterasa es una enzima situada en las hendiduras sinpticas y
all va a hidrolizar a la acetilcolina, despus de que sta haya realizado su
funcin mediante la unin a sus receptores, permitiendo as que las sinapsis
colinrgicas transmitan los impulsos nerviosos. La reaccin catalizada es la
hidrlisis de la acetilcolina hasta colina y acetato:
La acetilcolinesterasa es una esterasa tipo B y tiene un resto de SER en el
centro activo y cursa con un mecanismo de accin cataltica del tipo
"catlisis covalente", con la generacin de un intermediario covalente.
En el centro activo de la enzima se distinguen dos dominios, denominados
esterico, donde reside el resto de SER, y aninico donde tiene un GLU que
le proporciona carga negativa, adecuada para la aproximacin y orientacin
del sustrato con su carga positiva.
La reaccin qumica producida en este proceso es:
En la 1 etapa de la reaccin, el resto de SER del centro activo de la
acetilcolinesterasa reacciona con la acetilcolina, generndose un intermedio
acetil-enzima y la liberacin de la colina.
Paso 1: Acetilcolina + enzima (Acetilcolinesterasa) ------> Colina +
Acetilcolinesterasa acetilada
En la 2 etapa de la reaccin se produce la hidrlisis de la acetilenzima, regenerndose la acetilcolinesterasa y liberndose el
acetato.
Paso 2: Acetilcolinesterasa acetilada + H2O ------> Acetilcolinesterasa +
cido actico
Este mecanismo de accin es caracterstico de las SERin-proteasas, similar
al de la quimitripsina.

Qu efecto tiene sobre esta enzima el

diisopropilflurofosfato?
El DIFP es el diisopropilfluorofosfato q actua como un inhibidor irreversible
de la enzima acetilcolinesterasa. Osea se une a ella de manera covalente
provocando q aumente la acetilcolina en la hendidura sinptica por no
poder degradarla, aumentando as su accin sobre los receptores
postsinapticos.

Existe una enzima llamada pralidoxima q se utiliza para poder revertir esa
unin con rganos fosforados pero tiene un rango de tiempo para actuar si
se pasa ese tiempo no funciona.
El diisopropilfluorofosfato (DFP) se muestra como un ejemplo de inhibidor
irreversible de la proteasa en el apartado "Inhibidores irreversibles" arriba a
la derecha. La enzima hidroliza el enlace entre el fsforo y el flor, pero el
residuo de fosfato se mantiene unido a una serina en el centro activo,
inactivndolo.22 Adems, el DFP tambin reacciona con el centro activo de
la acetilcolinesterasa en la sinapsis de las neuronas, lo que lo convierte en
una potente neurotoxina, con una dosis letal a partir de cantidades
inferiores a 100 mg.