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MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 358010

MICROBIOLOGA AMBIENTAL

TRABAJO COLABORATIVO
FASE II

NMERO DE GRUPO COLABORATIVO.

358010_27

NOMBRES Y APELLIDOS DE ESTUDIANTES


QUE NO COLABORARON Y NOMBRE DEL
CEAD.

______________________

GRUPO 358010_27

Director
JORGE ALEJANDRO RODRIGUEZ

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD


ESCUELA DE CIENCIAS AGRCOLAS, PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE - ECAPMA
SEPTIEMBRE DE 2015

ACTIVIDADES A REALIZAR

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1. Lea el Captulo 8 pginas 255 a 275 del libro Ingeniera Ambiental captulo 8, que se
encuentra en el entorno de conocimiento Unidad II Bacteriologa y Micologa
descripcin microscpica y macroscpica.

2. Segn la lectura recomendada, cuales son los grupos de clasificacin de los


microorganismos?

GRUPO

Bacterias

Algas

Hongos

Protozoarios

Rotiferos

Crustceos

GRUPOS DE CLASIFICACIN DE MICROORGANISMOS


CARACTERISTICAS
Procariotas , unicelulares , contenido de ADN disperso en el citoplasma
Mviles , con presencia de estmulos desfavorables pueden formar estructuras de
resistencia
Indicadores ideales de contaminacin
Importancia ambiental en la calidad y estudio del agua (bacterias coliformes, streptococs
fecales , actinomicetatos , pseudomonas entre otras)
Eucariticos
Capacitados para realizar el proceso de fotosntesis.
Relacin simbitica con diversos organismos (corales, hongos, organismos marinos, y
otros)
Clasificacin segn: qumica y morfologa de la pared celular, almacenamiento de la
fotosisntes, nmero de flagelo, morfologa de la clula, habitad, estructura de
reproduccin.
Eucariontes y saprotofos
Morfolgicamente unicelulares
Aerbicos o anaerbicos
Asociacin por simbiosis
Necesitan compuestos carbonado ricos en energa
Descomponedores de diversos compuestos orgnicos (celulosa, quitina queratina, lignina,
protenas, hidrocarburos.
Absorben azucares y aminocidos simples de las clulas del hospedante.
Eucariotas, unicelulares, hetertrofos
Desempean un papel muy importante en el agua (cadena alimentaria) o en relacin de
simbiosis
Animales microscpicos acuticos y semiacuaticos
Alimento indispensable para algunos peces (cadena alimentaria en ecosistemas
acuticos)
Invertebrados artrpodos (mayoritariamente acuticos )
Reproduccin ovipora y fecundacin externa
Especies carnvoras o filtradoras

3. Con sus propias palabras y anlisis defina qu es una bacteria.


La bacteria es un organismo de una sola clula, con movilidad propia, que puede vivir adentro o
afuera de un ambiente ideal de vida para ellas; de tamao microscpico y diversidad en su
forma, por ejemplo: esferas, barras, hlices, entre otras.
Carecen de ncleo y rganos internos. Las bacterias pueden vivir en cualquier hbitat; incluso
algunas especies sobreviven en el espacio exterior. Estas caractersticas convierten a las
bacterias en el organismo ms abundante del mundo: pueden convivir 40 millones de clulas
bacterianas en apenas un gramo de tierra

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Existe una particularidad con estos organismos y es que son los que ms abundan en el
planeta tierra pudiendo convivir hasta 40 millones de clulas bacterianas en apenas un gramo
de tierra, se pueden encontrar en los ms diversos hbitats, incluso en aquellos que suponen
las ms desfavorables condiciones para la subsistencia de cualquier organismo vivo. Por tanto
son demasiado resistentes.
4. Nombre los agentes con los cuales se tien las bacterias para observar su
morfologa?
Tcnica de Tincin para las Bacterias:
2 Grupos:

Las coloraciones que se usan para teir los preparados de bacterias, se pueden dividir en:
simples, diferenciales y especiales. Las primeras, por ejemplo el Azul de metileno, nos permiten
observar la existencia de bacterias, su morfologa, su agrupacin, la presencia de esporos y la
existencia de otros tipos celulares. Las diferenciales (por ejemplo la coloracin de Gram y la de
Ziehl Nielseen) adems de lo anterior, permiten la diferenciacin de las bacterias porque usan
diferentes colorantes que se comportan distinto segn el microorganismo en cuestin. Las
tinciones especiales se usan para objetivar distintas estructuras como la cpsula, el ncleo, los
flagelos, los esporos, etc. Antes de la coloracin hay que realizar la preparacin y la fijacin del
frotis. La preparacin del frotis consiste en extender homogneamente la muestra (por ejemplo
un cultivo bacteriano) o una suspensin de la misma sobre una lmina. Una vez preparado el
frotis debe secarse y fijarse (por ejemplo con calor). Con la fijacin del frotis se pretende
obtener la muerte de los microorganismos, la adhesin a la lmina y la conservacin de su
morfologa. Despus de preparar y fijar el frotis, se puede realizar cualquier tipo de coloracin
(simple o diferencial). La coloracin de Gram es la ms usada en bacteriologa; debe su nombre
a quin la describi en 1884. Es una coloracin diferencial, dado que las bacterias pueden
clasificarse segn su respuesta en grampositivas o gramnegativas. Las primeras se tien de
color azul violeta y las segundas adquieren un color rosado o rojo. La diferente reaccin de las
bacterias a la coloracin de Gram se relaciona con diferencias fundamentales de la envoltura
celular de estas dos clases de clulas.
Es probable que la diferencia entre las bacterias grampositivas y gramnegativas se deba a la
naturaleza fsica de sus paredes celulares. El peptidoglicano no se tie por s mismo, ms bien
parece actuar como barrera de permeabilidad para evitar la prdida de cristal violeta. Durante el
proceso de coloracin las bacterias se tien primero con cristal violeta y luego se tratan con
yoduro para favorecer la retencin del colorante. En la decoloracin con etanol, se cree que el
alcohol contrae los poros de la capa gruesa de peptidoglicano y se retiene el complejo colorante
yoduro; as las bacterias adquieren color violeta. Por el contrario, la capa de peptidoglicano de
las bacterias gramnegativas es muy fina, con menos enlaces y con poros de mayor tamao.
Adems, es posible que le tratamiento con alcohol extraiga suficientes lpidos de la membrana
externa como para aumentar su porosidad. Por estos motivos el alcohol elimina ms fcilmente
el complejo cristal violeta yoduro en las bacterias gramnegativas. Tomado de: (M. Prez)

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5. Explique por qu es importante el tamao, la forma y la disposicin de las bacterias


para describir la morfologa bacteriana?
Caractersticas como el tamao, la forma y disposicin de las bacterias son importantes ya que
van a constituir la morfologa propia de las clulas bacterianas. Estas observaciones pueden
llevarse a cabo con exmenes directos en fresco o por medio de tinciones. Adems de las
Caractersticas ya mencionadas, algunas especies bacterianas presentan otras, como la
presencia de diferentes elementos facultativos: flagelos, cpsulas, esporas, corpsculos
metacromticos, etc.; y que igualmente forman parte de su morfologa
La morfologa: nos da una informacin primaria sobre el tipo de bacteria, no de forma
concluyente pero s como paso previo a cualquier proceso de identificacin y clasificacin
taxonmica.
El Tamao: Las bacterias son de pequeo tamao, por lo que se hace necesario el microscopio
para su observacin. Su tamao se mide en micras (1 m = 10-6 m) y oscila entre 0,2 m de
algunos cocos y las 5-8 m de largo por 1,5 m de ancho de los bacilos. El tamao es una
caracterstica para cada tipo bacteriano y se puede medir con gran exactitud y fiabilidad.
La Forma: Es caracterstico de cada tipo de bacteria, y su forma como organismo individual
viene dada por la rigidez de su pared. Las bacterias adoptan fundamentalmente alguna de las
siguientes formas:

Esfrica: cuando tiene forma esfrica recibe el nombre de coco y a su forma se la denomina
cocoidea. En los cocos aislados su esfericidad puede oscilar entre formas esferoides,
ovoides, lanceoladas y reniformes cilndrica, helicoidal, filamentosa o formas intermedias de
los casos anteriores.
Cilndrica: recibe el nombre de bacilo y a su forma se la denomina bacilar. Las formas
alargadas de los bacilos aislados pueden ser rectas, ahusadas, ramificadas, curvas y
espirales.
Filamentosa: suelen presentar al microscopio ptico un aspecto muy similar al de los
hongos. Estas formas son caractersticas de las bacterias llamadas filamentosas. Las
bacterias que presentan formas intermedias entre los cocos y los bacilos se denominan
cocobacilos, que en muchos casos, ms que una forma caracterstica de una u otra especie,
corresponden a la etapa inicial del desarrollo de muchos bacilos, aunque no siempre.

6. Haga a mano alzada el boceto de una bacteria.

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7. De 5 ejemplos (Gnero y especie) de Bacterias que pueda encontrar en su entorno laboral y


que sean utilizados en ingeniera ambiental.

Tabla (tomado de: microbiologa ambiental cursos)


8. Haga a mano alzada el boceto de una bacteria filamentosa y una bacteria ramificada
con el nombre del gnero y la especie.

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9. Haga a mano alzada el boceto de una bacteria con capsula, una bacteria con flagelo y,
una bacteria con endospora con el nombre del gnero y la especie.

10. De acuerdo con los requerimientos nutricionales de los microrganismos, de dos ejemplos de
cada uno (hetertrofos, auttrofos)
REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
Hetertrofos: Obtienen energa qumica y los Auttrofos: clasificados de acuerdo a dos procesos
precursores para la formacin de sus Fotosintticos: la absorcin y trasformacin de energa
componentes, del proceso de oxidacin en los luminosa en energa qumica permite formar molculas
compuestos orgnicos que ingieren a travs de orgnicas ms sencillas, a partir del CO2 (Fuente de
su alimentacin.
tomos de carbono) siendo necesaria el agua y las sales
(incorporan del medio los compuestos orgnicos minerales.
ricos en energa )
Quimio sintticos: (reacciones oxidativas exotrmicas)
utilizan las molculas orgnicas que se obtienen en la
fotosntesis, van a ser usadas en todas las relaciones
catablicas, lo cual permite obtener ATP, para llevar a
cabo sus actividades y sintetizar nuevos componentes.
(sintetizan materia , a partir del agua , sales minerales ,
CO2 ,gracias a la energa solar)

Ejemplos: animales, hongos, la mayora de las Ejemplos: plantas, algas y algunas bacterias.
bacterias y protozoos.
Fotosintticas : bacterias verdes y purpureas

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Simbiosis. Obtencin de beneficios mutuos de Quimio sintticos : bacterias nitrificantes , sulfo bacterias
tipo nutritivo:
ferro bacterias
Cangrejo ermitao y anemona: el cangrejo lleva
consigo la anemona protegindola de los
posibles depredadores y la anemona obtiene
alimentacin ms fcilmente.
Tiburn y rmora: con el tiburn y la rmora, el
tiburn no es afectado, bsicamente obtiene
beneficio, mientras que la rmora obtiene un
transporte, que le beneficia
11. Para la propagacin y multiplicacin de Bacterias, en laboratorio se utilizan medios
de cultivo con diferentes requerimientos nutricionales, cules son los medios de
cultivo ms utilizados para propagacin de bacterias?

12. Escriba 6 caracterizaciones de crecimiento sobre Agar Nutritivo Inclinado y escriba su


significado con un boceto hecho a mano alzada.

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ABUNDANCIA DE CRECIMIENTO. La cantidad de crecimiento es designada como


ninguna, leve, moderada o abundante.
PIGMENTACIN: Los microorganismos, pueden producir pigmentos intracelulares que
son responsables de la coloracin de las colonias.
PTICAS: puede evaluarse con base en la cantidad de luz transmitida a travs del
crecimiento, esta caracterstica son descritas como(opaca, traslucida, o transparente)
FORMA: La apariencia del crecimiento de la siembra es una sola lnea sobre la
superficie del agar inclinado se designa de la siguiente manera:
o
o
o
o
o
o

FILIFORME: Crecimiento en forma de hilo con bordes lisos continuos.


EQUINULADO: Crecimiento en forma de hilo con bordes irregulares continuos.
BARBADO: Colonias semi-confluentes o no confluentes.
DIFUSO: Crecimiento difuso o reducido.
ARSBORECENTE: Crecimiento en forma de rbol.
RIZOIDE: Crecimiento en forma de raz.

13. Escriba 4 caracterizaciones de crecimiento en Caldo Nutritivo


significado con un boceto hecho a mano alzada

y escriba su

TURBIDEZ FINA UNIFORME: Crecimiento fino y totalmente disperso


FLOCULANTE: Crecimiento en agregados escamosos totalmente dispersos
PELICULA: Crecimiento en superficie como plataforma grueso.
SEDIMENTO: Concentracin del crecimiento en el fondo del caldo, puede ser granular,
escamosos o floculante.

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14. Estudie y escriba los nombres macroscpicos de las colonias de bacterias Unidades
Formadoras de Colonia-(UFC)-que crecen en placas de Agar Nutritivo por 1) forma, 2)
elevacin y 3) borde.

Colonias de bacterias en medio de cultivo:

15. Con el grupo colaborativo, escojan un sitio o regin del pas, donde hipotticamente
ustedes como futuros ingenieros ambientales realizarn un diagrama de flujo o un

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protocolo para realizar un muestreo con el fin de obtener en laboratorio la


recuperacin de bacterias con inters ambiental (ser lo ms concretos posibles,
pueden trabajar con fuentes termales, plantas de tratamiento, suelos, abonos
orgnicos etc.) En el encabezado del diagrama deben ir los siguientes datos de la
zona: Nombre, departamento, municipio, condiciones climticas.
Departamento:
Municipio:
Condiciones Climticas:

Valle del Cauca


Cali
La Temperatura promedio es de 23 C y su altura sobre el nivel del
mar es de 1.001 metros.

16. Realice una descripcin breve sobre los hongos.


Los hongos poseen caractersticas muy particulares que los hacen diferentes de las plantas, ya
que no elaboran su propio alimento mediante la fotosntesis como ellas sino que viven a
expensas de otros organismos, vivos o muertos.
Tambin se diferencian de los animales porque no poseen la capacidad de desplazarse o
moverse sobre el medio o superficie en que crecen. Constituyen un grupo de seres vivos que
pueden estar formados por una sola clula (unicelulares) o por muchas (pluricelulares).
Los hongos se originan a partir de esporas, que son clulas especializadas que tienen la misma
funcin que las semillas en las plantas. Cuando las esporas encuentran las condiciones
adecuadas de humedad, temperatura, luz y nutrientes, entre otras, germinan y producen hifas,

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que son unas estructuras filamentosas que constituyen la unidad estructural fundamental de la
mayora de los hongos.
17. Describa las caracterizaciones macroscpicas de hongos filamentosos:
1) MICELIO ALGODONOSO: El hongo lo constituye el micelio y los cuerpos fructferos que
son equivalentes de los frutos en un rbol. Las hifas se ramifican y forman una masa
algodonosa conocida como micelio que crece sobre la superficie. Estos cuerpos fructferos
son estacionales y su funcin principal es producir esporas.
2) PULVERULENTO: Este tipo de hongo es roya cuyo micelio parece ser perenne e inicia una
nueva infeccin cuando la planta desarrolla estaciones; un ejemplo de este es el picnios
son de color caf y estn distribuidos entre las hojas con los eciosoros que son de aspecto
meloso y las parafisis salientes sueltas elementos estriles entre los frtiles, por ejemplo
hifas estriles entre las ascas del himenio de un ascocarpo, filamentos estriles entre los
gametangios.
3) ATERCIOPELADO: se caracteriza porque tiene una Superficie con pelos cortos, finos,
suaves y dispuestos compactamente.

18. Haga a mano alzada el boceto de las caracterizaciones macroscpicas de una


levadura teida con lugol. Qu parmetros utiliza para describir la macroscopa de
una levadura: los bacterianos o los de hongos filamentosos y por qu?
Levadura Teida Con Lugol

Parmetros macroscopa
PROTOZOS
REINO

protista

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REPRODUCCIN
CICLO DE VIDA
TEMPERATURA OPTIMA
PH MINIMO
PH OPTIMO
CLASIFICACIN

REINO
REPRIDUCCIN
CLASIFICACIN
CLASIFICACIN CELULAR

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fisin multiple y fisin simple


quiste trfico o vegetatico
160c y 400c
3.0 a 9.0
6.0 a 8.0
clase mastigophora (flagelos)
vida parasitaria
vida libre
clase sarcodina (rhozopodia o amebas)
clase ciliophora (ciliados)
clase esporosoa (esporozoarios o apicomplexa)
ALGAS
Protista
asexualmente: biparticin, fragmentacin o esporas
sexualmente: gametos
pigmento verde (algas verdes), marrones o caf (algas
marrones o algas pardas) o rojas (algas rojas)
algas unicelulares
algas multicelulares

De acuerdo a los parmetros utilizados citolgicos, reproductivos, ecolgicos y molares, permite


la comparacin de los ADN y obtener un rbol filogenitico mostrando las relaciones evolutivas
entre las especies.
19. Realice a mano alzada un boceto de dos Hongos que sean de inters ambiental y una
breve descripcin de cada uno.
Son dos las principales y ms conocidas simbiosis fngicas;

La primera es la que forman con algas o cianofceas para formar lquenes, y otra es la que
forman con las races de plantas vasculares para formar las micorrizas.
HONGO SIMBIONTES
Importancia ambiental este hongo participa en la cadena alimentaria ya que descompone la
materia orgnica
HONGO LOS LIQUENES
Como consecuencia de la simbiosis liqunica, se forman numerosos metabolitos secundarios
(sustancias) que solo aparecen en el liquen y no en sus componentes aislados. Estas
sustancias son segregadas al exterior de las hifas, en forma de pequeos cristales, y
proporcionan a muchos lquenes una coloracin caracterstica

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20. Diligencie la siguiente tabla, teniendo en cuenta las caractersticas de una bacteria y un
hongo, suponga que est observando los microorganismos en el laboratorio, los gneros y
especies de cada uno son de libre escogencia por cada grupo de estudiantes.
Mnera: Bacteria
Neisseria
Gnero y especie:
Neisseria
Gram-negativas.
Descripcin microscpica:
Las Neisseria son diplococos, que se asemejan a
granos de caf al ser observados con el microscopio
ptico.
Boceto representativo de la morfologa microscpica:

Fung: hongo filamentoso


Cladosporium cladosporioides
Gnero y especie:
Demaciceas (Orden forma Moniliales,
Subdivisin Deuteromicotinas)

Descripcin macroscpica:
En la descripcin macroscpica los diplococos se
asemejan a la forma de largas cadenas.

Descripcin macroscpica :
Da lugar a conidios que generalmente quedan en
cadenas acrpetas, o a veces se presentan solitarios.,
con una cicatriz en la base y pueden ser unicelulares

Boceto representativo de la morfologa macroscpica:

Boceto representativo de la morfologa macroscpica:

Descripcin microscpica:
Los conidios de Cladosporium pueden aparecer
encadenados o solitarios.
Boceto representativo de la morfologa microscpica:

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Qu y Para qu es un agar nutritivo?


El agar es una sustancia gelatinosa derivada de la purificacin de las paredes celulares de las algas rojas. Se
aade a medios microbiolgicos para fines de solidificacin. No tiene ningn valor nutricional, por lo que
cuando se utiliza en microbiologa para cultivo de microorganismos, diversos nutrientes se aaden para
aumentar el crecimiento de bacterias en placas de Petri o tubos de ensayo.
Su uso est descripto en muchos procedimientos para el anlisis de alimentos, aguas y otros materiales de
importancia sanitaria.
Qu es una caja de Petri?
La placa de Petri es un recipiente redondo, de cristal o plstico, con una cubierta de la misma forma que la
placa, pero algo ms grande de dimetro, para que se pueda colocar encima y cerrar el recipiente, aunque no
de forma hermtica.

Qu es un tubo de laboratorio para agar nutritivo?


Un tubo de laboratorio, forma parte del material de vidrio de un laboratorio qumico. Este instrumento permite la
preparacin de soluciones y toma de muestras lquidas o semilquidas.
Cuando un tubo de ensayo se utiliza para el almacenamiento de las bacterias suele colocarse en posicin
inclinada, puesto que los cultivos lquidos se solidifican cuando el tubo est en esta posicin. Una tapa con
rosca evita que el agar en el tubo se seque.

21. Describa las siguientes pruebas microbiolgicas aplicadas a la ingeniera ambiental


(una descripcin breve, no es copiar y pegar, me interesa que ustedes las indaguen y
emitan un concepto claro y sencillo.)

Filtracin por membrana en aguas potables

El anlisis microbiolgico del agua, es para averiguar y conocer que microorganismos


presentes en una muestra de agua ya que la presencia de bacterias patgenas en un riesgo
para el ser humano. La tcnica de la filtracin por membrana es pasar la muestra por una fibra
micro poroso para retener los microorganismos, la mayora de estas membranas tienes un
tamao de 0,45 micras.

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Se debe de hacer un anlisis completo, ya que hay que tener en cuenta los causales que
contamina el agua, ya que puede ser de manera industrial, minera, agrcola y aguas residuales
por consumo humano
Se desarrolla en 5 pasos
1. en unas buen medio esterilizado y con las instrumentara adecuada, se coloca el filtro de
membrana en el porta filtros de la rampa de filtracin al vaci.
2. se coloca el embudo del filtro previamente esterilizado.
3. se agregan 100 ml de agua
4. se recoge el filtro con unas pinzas estriles y se coloca en medios de cultivos selectivos.
5. se incuban a 37c durante 1 a 2 das

Nmero Ms probable de E. coli y Coliformes fecales en abonos orgnicos.

El contacto con los organismos patgenos presentes en el compost se da por dos formas
contacto:
Directo y contacto indirecto
Contacto directo: manipular el abono durante la aplicacin y inseminacin de los productos
utilizados
Contacto indirecto: contaminacin con los productos que se genera en abono

Recuento de Pseudomonas fluorescens en suelos.

Las bacterias P. fluorescens


Son organismos aerobios quimioorganotrficos, es decir, que su metabolismo se basa en
reacciones de xido-reduccin para obtener energa, utilizando sustancias oxidables a pH
neutro o bsico. Su dimetro vara entre 0,5 y 0,8 m.
Se reproducen a temperaturas mesfilas (entre 25 y 30C) y como todo el gnero de
Pseudomonas presentan una gran capacidad para utilizar diversidad de nutrientes, lo que
explica su ubicuidad. Su versatilidad nutricional ligada a su dotacin enzimtica, hace de estas
bacterias un grupo importante ecolgicamente, dado que son probablemente responsables de
la degradacin aerbica de muchos compuestos en los diferentes ecosistemas.

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El conteo en placa o de colonias es un mtodo de medicin de biomasa que permite el recuento


de clulas viables y consiste en determinar el nmero de clulas capaces de reproducirse y
generar colonias sobre un medio slido (cada clula viable da origen a una colonia). Por lo tanto
este mtodo no es capaz de cuantificar clulas vivas pero incapaces de reproducirse.

Para realizar el conteo en placa, la muestra original se diluy varias veces para disminuir
suficientemente la poblacin celular.
Posteriormente, 100 l de cada dilucin se derramaron y extendieron sobre placas de
Petri con agar nutritivo.
Se dejaron incubar a 28C en forma invertida.
Luego del perodo de crecimiento, se examinaron las placas y se contaron aqullas que
tienen entre 30 y 300 colonias por placa para realizar un adecuado anlisis estadstico.
La curva de calibracin realizada que relaciona la absorbancia con las unidades
formadoras de colonias por ml (UFC/ml).
La medicin de absorbancia es un mtodo sencillo y ms rpido que el conteo en placa
pero es menos sensible y est limitado a cultivos celulares con concentraciones de 107
clulas/ml o mayores.

Curva de calibracin Absorbancia vs UFC/ml para cultivos de P. fluorescens.


La ecuacin de la lnea de mejor ajuste es:

Utilizando esta ecuacin puede determinarse, mediante medidas de absorbancia, el nmero de


unidades formadoras de colonias. As por ejemplo, para un cultivo con una absorbancia de 0,5
le correspondera 3 x 108 UFC/ml.
BIBLIOGRAFIA

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Diaz, C. (2011). http://sedici.unlp.edu.ar/. Obtenido de Captulo 5 Caracterizacin microbiolgica:


http://sedici.unlp.edu.ar/bitstream/handle/10915/2685/5_-_Caracterizaci%C3%B3n_microbiol
%C3%B3gica.pdf?sequence=1
LOZADA, J. P. (2010). http://repository.javeriana.edu.co/. Obtenido de
http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/8434/1/tesis404.pdf
M. Prez, M. M. (s.f.). higiene.edu.uy. Obtenido de
http://www.higiene.edu.uy/cefa/2008/MorfologiayEstructuraBacteriana.pdf
Perez, C. D. (26 de 07 de 2001). http://www.pv.fagro.edu.uy/. Obtenido de uso de Pseudomonas
fluorescentes nativas para el control de enfermedades de implantacin:
http://www.pv.fagro.edu.uy/fitopato/publica/Pseudomonas%20fluorescentes.pdf
Resource., C. A. (Copyright 2008). http://ocw.um.es/. Obtenido de http://ocw.um.es/cc.-de-la-salud/higieneinspeccion-y-control-alimentario/practicas-1/practica-1-analisis-microbiologico-de-aguas-por
W.Heinke, J. G. (1999). Microbiologa y epidemologa cap. 8. Mxico: MEG WEIST. Obtenido de
http://campus02.unad.edu.co/ecapma01/mod/lesson/view.php?id=19294

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