Clonacin

La clonacin (del griego , "retoo, rama")1 (copia idntica de un organismo a partir de su ADN) se puede definir como el
proceso por el que se consiguen, de forma asexual,2 copias idnticas de un organismo, clula o molcula ya desarrollado.
Se deben tomar en cuenta las siguientes caractersticas:
En primer lugar se necesita clonar las clulas (producto embrionario), ya que no se puede hacer un rgano o parte del
"clon" si no se cuenta con las clulas que forman a dicho cuerpo.
Ser parte de un organismo ya "desarrollado", porque la clonacin responde a un inters por obtener copias de un
determinado organismo, y slo cuando es adulto se pueden conocer sus caractersticas.
Por otro lado, se trata de crearlo de forma asexual.3 La reproduccin sexual no permite obtener copias idnticas, ya que
este tipo de reproduccin por su misma naturaleza genera diversidad mltiple.

Clonacion en la naturaleza
La clonacion es una forma natural de reproduccion utilizada por numerosas formas de vida por ms de 50 milenios
por plantas, hongos, y bacterias, esta es la forma en que se reproducen las colonias clonales, algunos ejemplos de estos organismos
son arndano, avellanos, Pando, Cafetero de Kentucky, Myricas y liquidmbar americano

Clonacin molecular
La clonacin molecular se utiliza en una amplia variedad de experimentos biolgicos y las aplicaciones prcticas van desde la toma
de huellas dactilares a produccin de protenas a gran escala.
En la prctica, con el fin de amplificar cualquier secuencia en un organismo vivo, la secuencia a clonar tiene que estar vinculada a un
origen de replicacin; que es una secuencia de ADN.
Transfeccin
Se introduce la secuencia formada dentro de clulas.
Seleccin
Finalmente se seleccionan las clulas que han sido transfectadas con xito con el nuevo ADN.
Inicialmente, el ADN de inters necesita ser aislado de un segmento de ADN de tamao adecuado. Posteriormente, se da el proceso de
ligacin cuando el fragmento amplificado se inserta en un vector de clonacin: El vector se linealiza (ya que es
circular),usando enzimas de restriccin y a continuacin se incuban en condiciones adecuadas el fragmento de ADN de inters y el
vector con la enzima ADN ligasa.
Tras la ligacin del vector con el inserto de inters, se produce la transfeccin dentro de las clulas, para ello las clulas transfectadas
son cultivadas; este proceso, es el proceso determinante, ya que es la parte en la que vemos si las clulas han sido transfectadas
exitosamente o no.
Tendremos que identificar por tanto las clulas transfectadas y las no transfectadas, existen vectores de clonacin modernos que
incluyen marcadores de resistencia a los antibiticos con los que slo las clulas que han sido transfectadas pueden crecer. Hay otros
vectores de clonacin que proporcionan color azul/ blanco cribado. De modo, que la investigacin de las colonias es necesaria para
confirmar que la clonacin se ha realizado correctamente.

Clonacin celular
Clonar una clula consiste en formar un grupo de ellas a partir de una sola. En el caso de organismos unicelulares
como bacterias y levaduras, este proceso es muy sencillo, y slo requiere la inoculacin de los productos adecuados.
Sin embargo, en el caso de cultivos de clulas en organismos multicelulares, la clonacin de las clulas es una tarea difcil, ya que
estas clulas necesitan unas condiciones del medio muy especficas.
Una tcnica til de cultivo de tejidos utilizada para clonar distintos linajes de clulas es el uso de aros de clonacin (cilindros).
De acuerdo con esta tcnica, una agrupacin de clulas unicelulares que han sido expuestas a un agente mutagnico o a un
medicamento utilizado para propiciar la seleccin se ponen en una alta dilucin para crear colonias aisladas; cada una proviniendo de
una sola clula potencialmente y clnicamente diferenciada.

En una primera etapa de crecimiento, cuando las colonias tienen slo unas pocas clulas; se sumergen aros estriles de poliestireno en
grasa, y se ponen sobre una colonia individual junto con una pequea cantidad de tripsina.
Las clulas que se clonan, se recolectan dentro del aro y se llevan a un nuevo contenedor para que contine su crecimiento en forma
natural.

Clonacin de organismos de forma natural

La clonacin de un organismo es crear un nuevo organismo con la misma informacin gentica proveniente de una clula existente.
Es un mtodo de reproduccin asexual, donde lafertilizacin no ocurre. En trminos generales, slo hay un progenitor involucrado.
Esta forma de reproduccin es muy comn en organismos como las amebas y otros seres unicelulares, aunque la mayora de
las plantas y hongos tambin se reproducen asexualmente.
Tambin se incluye la obtencin de gemelos idnticos de manera natural. Se considera como una alteracin espontnea durante el
desarrollo embrionario, ignorndose su causa, aunque existe una correlacin familiar estadsticamente significativa.

Gemelacin artificial
Este tipo de clonacin consiste en tomar un embrin de hasta 8 clulas y generar embriones idnticos preimplantatorios (se podran
generar hasta 8 embriones idnticos, uno a partir de cada blastmera). Las blastmeras biopsiadas del embrin original se introducen
individualmente o de dos en dos en una zona pelcida vaca (puede proceder de otro animal, pues despus el embrin sale de ella), o
en una cubierta artificial (ZPA), y de cada uno se generan embriones idnticos al original (clones).
En veterinaria se lleva haciendo ms de 30 aos (para preservar las razas puras y mantener los caracteres deseados de un determinado
animal), sin embargo, al considerarse una clonacin, est totalmente prohibido en humanos, principalmente porque los embriones
humanos pueden morir durante el proceso. Si se legalizase esta tcnica, el rendimiento por ciclo de fecundacin in vitro (FIV)
aumentara espectacularmente, pues se podran obtener muchos ms embriones y fcilmente; adems ya no sera necesario someter a
las mujeres a tratamientos fuertes de estimulacin ovrica, pues a partir de un slo embrin podran obtener hasta 8 clones: se
transfiere uno y los otros se congelaran, para poder ser transferidos aos despus o como reserva de seguridad, por si el hijo necesita
clulas madre para el tratamiento de alguna enfermedad.
En la pelcula Los nios del Brasil se explica lo que la ciencia saba en los aos 80 sobre la clonacin. La pelcula The 6th Day (El 6
da) plantea lo que la ficcin del 2000 esperaba de la clonacin para el 2015 en ambiente de crimen.

Separacin de blastmeros para estudios de diagnstico prenatal

En algunas especies, como los equinos, se ha utilizado la separacin de blastmeros de embriones previos a su implantacin para
efectuar estudios de diagnstico de enfermedades genticas. En ellos se ha determinado la viabilidad de los embriones analizados
despus de su transferencia en hembras receptoras, encontrndose tasas de gestacin de 21 %. La tcnica de separacin de los
blastmeros implica la remocin de la zona pelcida, ya sea por mtodos qumicos, mecnicos o enzimticos, para posteriormente
obtener los blastmeros mediante aspiracin, extrusin o disminucin de sus interacciones en soluciones libres de Ca2+ y Mg2+. En
humanos la separacin y cultivo de blastmeros aislados tambin han sido utilizados en estudios de biopsias de embriones en
diferentes etapas de segmentacin con la finalidad de dar alternativas a los estudios de diagnstico prenatal, evaluando a su vez el
desarrollo embrionario in vitro con el propsito de que se seleccionen los mejores embriones capaces de desarrollarse en blastocistos
y congelarlos mientras se evalan sus blastmeros aislados.

Clonacin reproductiva
Es impreciso distinguir entre clonacin humana reproductiva y otro tipo de clonacin debido a que toda clonacin humana es
reproductiva, pues siempre se produce un embrin humano. La diferencia realmente reside en el destino que se le d a
ese embrin.4 Este tipo de clonacin se basa en la creacin de una copia genticamente idntica a una copia actual o anterior de un ser
humano o animal. Es tcnicamente posible, pues se ha conseguido en animales, aunque tiene bajo rendimiento y conlleva ciertos
riesgos, como por ejemplo, problemas epigenticos (sndrome LOS: el clon crece mucho ms, que el animal original) y de
senescencia. Este tipo de clonacin est absolutamente prohibido en humanos, pues no tiene ningn sentido teraputico, aparte de que
al no ser una tcnica perfeccionada, pueden morir los embriones humanos en el proceso.
En 1996, fue clonada la oveja Dolly. Fue el primer mamfero clonado a partir del ADN derivado de un adulto en vez de ser utilizado
el ADN de un embrin. Pero aunque Dolly tena una apariencia saludable, se cuestionaba que envejeciera antes que una oveja normal,
es decir, que la fuente (Dolly) trasmiti su edad celular al clon. Adems fueron necesarios 277 embriones para producir este
nacimiento.
Sin embargo, algunos han especulado que haba un factor agravante al deceso de Dolly y era que tena una edad gentica de seis aos,
la misma edad de la oveja de la cual fue clonada. Una base para esta idea fue el hallazgo de sus telmeros cortos, que son

generalmente el resultado del proceso de envejecimiento. Sin embargo, el Roslin Institute ha establecido que los controles intensivos
de su salud no revelaron ninguna anormalidad en Dolly que pudieran pensar en envejecimiento prematuro.

Clonacin teraputica (o androptica)

Artculo principal: Ingeniera de tejidos
La clonacin teraputica, rea en la que se est investigando mucho actualmente, no consiste en clonar personas o crear bebs de
reserva,5 sino tejidos y rganos que poder trasplantar al paciente donante y curar as enfermedades. 6 Los diferentes avances en
legislacin internacional e investigacin permiten la clonacin de determinados tejidos animales y humanos con fines de investigacin
mdica. Este tipo de clonacin consiste en fusionar el ncleo de una clula adulta (madre o diferenciada) y un ovocito enucleado, al
que se le ha extrado el ncleo, para crear un embrin con el que trabajar.
De dicho embrin se pueden aislar clulas madre embrionarias compatibles con el futuro receptor del tejido. Las clulas madre se
aislan de la masa celular interna del embrin clonado una vez alcanzado el estado de blastocisto. Estas clulas madre poseen la
misma dotacin gentica que el paciente del que se tom la clula adulta y, por tanto, reproducen su misma dotacin antignica, la
estructura de protenas superficial de la clula, por lo que se puede evitar una reaccin de rechazo al trasplante. Una vez que se han
extrado las clulas madre de la masa celular interna, se destruye el embrin clonado.
De hecho, en enero de 2008, se anunci que se haban creado cinco embriones clonados a partir de clulas de piel humana, con vistas
a proporcionar una fuente viable de clulas madre embrionarias para el tratamiento de enfermedades; valindose de la misma tcnica
que dio origen a la oveja Dolly, cientficos de la empresa californiana Stemagen Corporation, con sede en La Jolla, California,
encabezados por Andrew French, han empleado las clulas de la piel de dos varones adultos as como los vulos de tres mujeres
jvenes (entre 20 y 24 aos) que se estaban sometiendo a un tratamiento de fertilidad. 7 Adems, en mayo de 2013 la Universidad de
Oregn desvel que se haban conseguido obtener mediante clonacin clulas embrionarias humanas. La tcnica tiene grandes
implicaciones en la medicina regenerativa, ya que se podran obtener clulas madre de un embrin en fase de blastocisto con las que
poder regenerar partes del cuerpo humano del propio donante sin riesgo de rechazo durante el trasplante. Adems, en el ao 2013 se
consigui la clonacin de un ejemplar de ratn de laboratorio a partir de una simple gota de sangre de la cola del ratn donante, hecho
que produjo un cambio en el panorama de la clonacin animal, pues esta ha sido la primera vez que se ha conseguido clonar un animal
sin necesidad de eutanasiar al animal donante, que es lo que se vena haciendo hasta ahora en la clonacin de animales como por
ejemplo en el caso de la oveja Dolly.8

Clonacin de sustitucin
Un cuarto tipo de clonacin sera la llamada clonacin de sustitucin que sera una combinacin de la clonacin reproductiva y la
clonacin teraputica. En este tipo de clonacin se producira la clonacin parcial de un tejido o una parte de un humano necesaria
para realizar un trasplante.

Clonacin de especies extintas y en peligro de extincin

La clonacin de especies extintas, ha sido un sueo para muchos cientficos.Uno de los objetivos previstos para la clonacin fue
el mamut lanudo, pero los intentos de extraer ADN de mamuts congelados no han tenido xito, aunque un equipo ruso-japons est
trabajando en ello.
En 2001, una vaca llamada Bessie dio a luz a un gaur (un bisonte indio) clonado de Asia, una especie en peligro, pero el ternero muri
despus de dos das.
En 2003, un banteng (tipo de toro) fue clonado con xito, adems tambin fueron clonadas con xito tres fieras de frica a partir de
embriones congelados. stos xitos han dado esperanzas sobre la posibilidad de que otras especies extintas puedan ser clonadas. De
cara a esta posibilidad; las muestras de tejidos del ltimo bucardo (cabra montesa) fueron congelados rpidamente tras su muerte.
Los investigadores tambin estn considerando la clonacin de especies en peligro de extincin como el panda gigante, el ocelote, y
guepardos.
En 2002, los genetistas en el Museo Australiano anunciaron que haban replicado el ADN del Tigre de Tasmania, extinto hace 65 aos
con la reaccin en cadena de la polimerasa. Sin embargo en el ao 2005, tuvieron que parar el proyecto ya que las clulas no se haban
conservado bien.
Uno de los obstculos en el intento de clonar especies extintas es la necesidad de mantener el ADN en perfecto estado, muy bien
conservado

Cronologa de la gentica y la biologa molecular

1.000 a.C.:.los babilonios celebran con ritos religiosos la polinizacin de las palmeras.
323 a.C.: Aristteles especula sobre la naturaleza de la reproduccin y la herencia.
100-300: se escriben en la India textos metafricos sobre la naturaleza de la reproduccin humana.
1676: se confirma la reproduccin sexual en las plantas.
1677: se contempla el esperma animal a travs del microscopio.
1838: se descubre que todos los organismos vivos estn compuestos por clulas.
1859: Darwin hace pblica su teora sobre la evolucin de las especies.
1866: Mendel describe en los guisantes las unidades fundamentales de la herencia (que posteriormente recibirn el nombre
de genes).
1871: se asla el ADN en el ncleo de una clula.
1883: Francis Galton acua el trmino eugenesia.
1887: se descubre que las clulas reproductivas constituyen un linaje continuo, diferente de las otras clulas del cuerpo.
1908: se establecen modelos matemticos de las frecuencias gnicas en poblaciones mendelianas.
1909: las unidades fundamentales de la herencia biolgica reciben el nombre de genes.
1924: la Ley de Inmigracin en EE.UU. limita la entrada al pas sobre la base del origen racial o tnico.
1925: se descubre que la actividad del gen est relacionada con su posicin en el cromosoma.
1927: se descubre que los rayos X causan mutaciones genticas.
1931: treinta estados de los EE.UU. tienen leyes de esterilizacin obligatoria.
1933: la Alemania nazi esteriliza a 56.244 "defectuosos hereditarios".
1933-45: el holocausto nazi extermina a seis millones de judos por medio de su poltica eugensica.
1943: el ADN es identificado como la molcula gentica.
1940-50: se descubre que cada gen codifica una nica protena.
1953: se propone la estructura en doble hlice del ADN.

1956: son identificados 23 pares de cromosomas en las clulas del cuerpo humano.
1966: se descifra el cdigo gentico completo del ADN.
1972: se crea la primera molcula de ADN recombinante en el laboratorio.
1973: tienen lugar los primeros experimentos de ingeniera gentica en los que genes de una especie se introducen en
organismos de otra especie y funcionan correctamente.
1975: la conferencia de Asilomar evala los riesgos biolgicos de las tecnologas de ADN recombinante, y aprueba una
moratoria de los experimentos con estas tecnologas.
1975: se obtienen por primera vez los hibridomas que producen anticuerpos monoclonales.
1976: se funda en EE.UU. Genentech, la primera empresa de ingeniera gentica.
1977: mediante tcnicas de ingeniera gentica se fabrica con xito una hormona humana en una bacteria.
1977: los cientficos desarrollan las primeras tcnicas para secuenciar con rapidez los mensajes qumicos de las molculas
del ADN.
1978: se clona el gen de la insulina humana.
1980: el Tribunal Supremo de los EE.UU. dictamina que se pueden patentar los microbios obtenidos mediante ingeniera
gentica.
1981: primer diagnstico prenatal de una enfermedad humana por medio del anlisis del ADN.
1982: se crea el primer ratn transgnico (el "superratn"), insertando el gen de la hormona del crecimiento de la rata en
vulos de ratona fecundados.
1982: se produce insulina utilizando tcnicas de ADN recombinante.
1983: se inventa la tcnica PCR, que permite replicar (copiar) genes especficos con gran rapidez.
1984: creacin de las primeras plantas transgnicas.
1985: se inicia el empleo de interferones en el tratamiento de enfermedades vricas.
1985: se utiliza por primera vez la "huella gentica" en una investigacin judicial en Gran Bretaa.
1986: se autorizan las pruebas clnicas de la vacuna contra la hepatitis B obtenida mediante ingeniera gentica.
1987: propuesta comercial para establecer la secuencia completa del genoma humano (proyecto Genoma), compuesto
aproximadamente por 100.000 genes.
1987: comercializacin del primer anticuerpo monoclonal de uso teraputico.
1988: primera patente de un organismo producido mediante ingeniera gentica.
1989: comercializacin de las primeras mquinas automticas de secuenciacin del ADN.
1990: primer tratamiento con xito mediante terapia gnica en nios con trastornos inmunolgicos ("nios burbuja"). Se
ponen en marcha numerosos protocolos experimentales de terapia gnica para intentar curar enfermedades cancerosas y
metablicas.
1994: se comercializa en California el primer vegetal modificado genticamente (un tomate) y se autoriza en Holanda la
reproduccin del primer toro transgnico.
1995: se completan las primeras secuencias completas de genomas de organismos: se trata de las bacterias Hemophilus
influenzae y Mycoplasma genitalium.
1996: por primera vez se completa la secuencia del genoma de un organismo eucaritico, la levadura cervecera
"Saccharomyces cerevisiae". Por otra parte, el catlogo de genes humanos que Victor McKusick y sus colaboradores de la
Universidad John Hopkins actualizan cada semana contiene ya ms de cinco mil genes conocidos. El proyecto Genoma,
coordinado por HUGO (Human Genome Organization), avanza a buen ritmo.
1997: Clonacin del primer mamfero, una oveja llamada "Dolly".
2000: Descodificacin del PGH
2003: Primer clon humano (se supone)

INGENIERA GENTICA
La ingeniera gentica es la tecnologa del control y transferencia de ADN de un organismo a otro, lo que posibilita la correccin de
los defectos genticos y la creacin de nuevas cepas (microorganismos), variedades (plantas) y razas (animales) para una obtencin
ms eficiente de sus productos.

Tcnicas
La ingeniera gentica incluye un conjunto de tcnicas biotecnolgicas, entre las que destacan:
La tecnologa del ADN recombinante;
La secuenciacin del ADN;
La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).
Plasmocitosis
Clonacin molecular
Mutacin excepcional
Transgnesis
Bloqueo gnico

La tecnologa del ADN recombinante

La tecnologa del ADN recombinante consiste en aislar y manipular un fragmento de ADN de un organismo para "recombinarlo" con
el de otro organismo.
Generalmente se trata el ADN con una endonucleasa de restriccin que origina en este caso un corte escalonado en las dos hebras
dobles de ADN. Los extremos escalonados de ambas hebras de ADN son complementarios, una condicin que tienen que tener si se
quieren unir. Los dos ADNs as cortados se mezclan, se calientan y s enfran suavemente. Sus extremos cohesivos se aparearn

dando lugar a un nuevo ADN recombinado, con uniones no covalentes. Las uniones covalentes se forman aadiendo ADN ligasa y
una fuente energtica para formar los enlaces.
Otra enzima clave para unir ADNs es la transferencia terminal, que puede adicionar muchos residuos
de desoxirribonucletidos sucesivos al extremo 3de las hebras del ADN. De este modo pueden construirse colas de poli Guanina en
los extremos 3 de una de las hebras de ADN y colas de poli Citosina en los extremos de la otra cadena. Como estas colas son
complementarias, permitirn que los dos ADNs se unan por complementariedad. Posteriormente, se forman los enlaces covalentes por
la ADN ligasa.
El ADN recombinado se inserta en un ADN vector que acte como vehculo para introducirlo en una clula hospedadora que lo
replique, los vectores o transportadores ms utilizados son los plsmidos y el ADN del fago lambda.

La secuenciacin del ADN

Es un conjunto de tcnicas que permiten conocer el orden en que aparecen los nucletidos en el ADN, que es la base de la
informacin gentica de los organismos. Mediante esta tcnica tiene aplicaciones mdicas, como la bsqueda de algn polimorfismo
gentico que se asocie con una enfermedad; bsicas: comparar la historia evolutiva de un organismo; o forenses.
La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
La tcnica de la PCR aprovecha la actividad enzimtica por la que se replica el ADN en las clulas para conseguir una gran cantidad
de copias de ADN a partir de cantidades pequeas. Se utiliza una polimerasa o una mezcla de varias que puedan resistir temperaturas
elevadas, siendo la ms comn la polimerasa taq.
La tcnica consiste en realizar varios ciclos de temperaturas elevadas para conseguir la desnaturalizacin del ADN y temperaturas ms
bajas para la amplificacin del ADN desnaturalizado mediante la polimerasa.

Biotecnologa gentica
En la dcada de 1970 se abrieron nuevas perspectivas en el campo de las biotecnologas gracias a la elaboracin de nuevas tcnicas
que permiten llegar directamente al material que est en el origen de todas las caractersticas y procesos vitales, es decir, el ADN. Este
conjunto de tcnicas moleculares de manipulacin gentica recibe el nombre de ingeniera gentica.
Su objetivo es la manipulacin in Vitro del ADN, la introduccin de este ADN as modificado en clulas vivas y la incorporacin del
mismo como parte del material hereditario de dichas clulas. De este modo, ADN de diversas procedencias, por ejemplo, la fraccin
de ADN humano regula la sntesis de insulina, puede introducirse en bacterias de manera que pasa a formar parte de su genoma y
lograr as que la bacteria adquiera la capacidad de elaborar insulina.
Terapia gentica
La terapia gentica consiste en sustituir o aadir, segn el caso, una copia normal de la regin defectuosa del ADN para poder
solucionar y restablecer la funcin alterada, evitando el desarrollo de enfermedades de origen gentico, como por ejemplo la facultad
defensiva ante las enfermedades infecciosas. Las enfermedades con las que se ha empezado a trabajar son, entre otras, la deficiencia
de la enzima ADA (adenosina desaminasa), conocida como la de los nios burbuja y la DMD o distrofia muscular de Duchenne.

La posibilidad de curar las enfermedades genticas con un tratamiento especfico justifica los esfuerzos que se estn realizando en
este sentido.
Implicaciones ticas
La ingeniera gentica tiene aplicaciones en campos muy diversos; dos de los ms importantes son la medicina y la creacin de nuevas
especies o mejora de las existentes. El progreso en estos mbitos puede aportar resultados capaces de aliviar algunos problemas de
gran importancia, pero no se debe olvidar que la explotacin comercial de las tecnologas requeridas slo est al alcance de unas
pocas empresas multinacionales. Como era de esperar, la tradicional dependencia econmica de los pases subdesarrollados tiene en la
ingeniera gentica un nuevo elemento de desequilibrio. En otro orden de cosas, la ingeniera gentica puede plantear graves
problemas ticos. Hay opiniones muy diversas sobre dnde han de situarse los lmites de manipulacin del material que est en la
base de todos los procesos vitales.
Al inicio de los experimentos del ADN recombinante, varios investigadores mostraron su preocupacin por los riesgos que se pueden
realizar con dichas tcnicas. En varios pases se crearon comits para discutir el uso y la aplicacin de tcnicas de ingeniera gentica.

Ingeniera gentica en seres vivos

Ingeniera gentica en bacterias
Son los seres vivos ms utilizados en Ingeniera Gentica. La ms utilizada es la Escherichia coli. Se usa prcticamente en todos los
procesos de I.G.
Otra de las aplicaciones ms actuales que se han hecho, ha sido modificar genticamente bacterias que vivan en el sistema digestivo
del ser humano en un lapso mnimo de 6 meses a 1 ao, con el objetivo de disminuir el apetito. Esta investigacin se basa en N-acilfosfatidiletanolamina, y N-acil-etanolamina, encargadas de mandar seales al hipotlamo, que es el encargado de la ingesta de
alimentos.

Ingeniera gentica en levaduras y hongos

Son junto con las bacterias los sistemas ms utilizados. El Saccharomyces cerevisiae fue el primer sistema eucariota secuenciado
completamente. Otra levadura importante es P. pastoris, utilizada para conseguir proinsulina en cultivo discontinuo y quitinasa en
cultivo continuo. En el campo de los hongos destaca por su labor mdica el Penicillium.
Otra aplicacin ha sido la levadura P. pastoris se ha usado para producir grandes cantidades de protenas, gracias a que es capaz de
crecer en los reactores hasta alcanzar muy altas densidades celulares. Por ejemplo, se ha utilizado para producir quitinasa humana en
cultivo continuo (0,3 g/L/da) o proinsulina humana en un sistema discontinuo (1,5 g/L).

Ratones knockout.

Ingeniera Gentica en animales

La manipulacin gentica de los animales persigue mltiples objetivos: aumentar el rendimiento del ganado, producir animales con
enfermedades humanas para la investigacin, elaborar frmacos, etc.
Produccin animal por ingeniera gentica:
Peces transgnicos: las principales aplicaciones en animales se han realizado en peces, debido a que la fecundacin es externa, lo cual
permite la introduccin del gen en el cigoto antes de que se unan el ncleo del espermatozoide y el del vulo. Se han producido carpas
transgnicas que crecen mucho ms rpido, debido a la incorporacin del gen de la hormona del crecimiento de la trucha, y salmones
transgnicos, que resisten mejor las bajas temperaturas. Mamferos: se han obtenido ratones transgnicos, con distintos genes
modificados. Sin embargo, todava su aplicacin para la mejora de especies es preliminar, enfocndose el estudio desde un punto de
vista ms bien puramente cientfico.
Ingeniera Gentica en plantas
Actualmente se han desarrollado plantas transgnicas de ms de cuarenta especies. Mediante ingeniera gentica se han conseguido
plantas resistentes a enfermedades producidas por virus, bacterias o insectos. Estas plantas son capaces de producir antibiticos,
toxinas y otras sustancias que atacan a los microorganismos. Tambin se han conseguido otro tipo de mejoras, como la produccin de
distintas sustancias en los alimentos que aumentan su calidad nutricional, mejorar las cualidades organolpticas de un producto o que
ciertas plantas sean ms resistentes a determinados factores ambientales, como el fro.
Las tcnicas de ingeniera gentica tambin permiten el desarrollo de plantas que den frutos de maduracin muy lenta. As, es posible
recoger tomates maduros de la tomatera y que lleguen al consumidor conservando intactos su sabor, olor, color y textura. La mejora
de la calidad de las semillas es tambin un objetivo.
Las aplicaciones farmacuticas son otro gran punto de inters. La biotecnologa permite desarrollar plantas transgnicas que producen
sustancias de inters farmacolgico, como anticuerpos, ciertas protenas y hormonas, como la hormona del crecimiento.

Aplicaciones de la Ingeniera Gentica en medicina e industria farmacutica

Obtencin de protenas de seres vivos
Una serie de hormonas como la insulina, la hormona del crecimiento, factores de coagulacin, etc., tienen un inters mdico y
comercial muy grande. Antes, la obtencin de estas protenas se realizaba mediante su extraccin directa a partir de tejidos o fluidos
corporales. En la actualidad, gracias a la tecnologa del ADN recombinante, se clonan los genes de ciertas protenas humanas en
microorganismos adecuados para su fabricacin comercial. Un ejemplo tpico es la produccin de insulina que se obtiene a partir de la
levadura Sacharomyces cerevisae, en la cual se clona el gen de la insulina en humanos.
Obtencin de vacunas recombinantes
El sistema tradicional de obtencin de vacunas a partir de microorganismos patgenos inactivos, puede comportar un riesgo potencial.
Muchas vacunas, como la de la hepatitis B, se obtienen actualmente por ingeniera gentica. Como la mayora de los factores
antignicos son protenas lo que se hace es clonar el gen de la protena correspondiente.

Vacunas atenuadas: Se eliminan los genes de virulencia de un agente infeccioso para provocar una respuesta inmune. El organismo
modificado genticamente puede usarse como lo que es llamado una vacuna viva sin que exista riesgo de que se revierta al tipo
virulento. Actualmente se est ensayando una vacuna de cepas estables del Vibrio cholerae, ste se encuentra desprovisto del gen que
codifica para su enterotoxina, la cual provoca la enfermedad. Otro ensayo existente ha sido en la Salmonella, a la cual se le han
quitado ciertos genes que aunque no son virulentos, convierten a la cepa en atenuada una vez desaparecidos, es decir que disminuyen
su virulencia 1, 000, 000 de veces. Su efectividad ha logrado demostrarse en ovejas, bovinos, pollos y hasta en humanos
recientemente

Vacunas de organismos recombinantes vivos: Para estas se utilizan microorganismos no patgenos a los cuales se incorporan genes de
agentes patgenos que codifican para los antgenos que desencadenan la respuesta inmune. El virus vacunal tiene un genoma amplio y
secuenciado que permite acomodar varios genes forneos en su interior por lo que es un vector recombinante muy utilizado. A partir
de ste mtodo se ha logrado desarrollar la vacuna contra la rabia insertando el genoma del virus, provocando la respuesta inmune en
el organismo del hospedador. De igual manera se han ensayado las expresiones de genes que codifican para antgenos de virus de la
hepatitis B, de la gripe y del herpes simple. Con este mtodo, se podra lograr el desarrollo de vacunas que inmunicen
simultneamente para varias enfermedades, insertando en el virus recombinante varios genes de distintos organismos patgenos a la
vez.

Vacunas de subunidades: Para agentes infecciosos que no se pueden mantener en cultivo, se aslan los genes que codifican para las
protenas causantes de la respuesta. Dichos genes se pueden clonar y expresar en un husped alternativo tales como bacterias,
levaduras o lneas celulares de mamferos. Luego de insertado el gen de inters, la bacteria o levadura recombinante inicia con la
produccin de subunidades de protenas en grandes cantidades, mismas que son recolectadas y purificadas para utilizarlas como
vacunas. La vacuna contra la hepatitis B fue la primera puesta en el mercado y siendo producida por este mtodo.

Vacunas de ADN: Consisten en plsmidos en los que se introduce tan slo una diminuta cantidad del material gentico del patgeno
contra el que se pretende. Al inyectar el plsmido en el msculo o la piel, ste penetra dentro de la clula y llega al ncleo,
comandando entonces la produccin de los antgenos del patgeno que desencadenarn la respuesta inmune. As, se traslada la fbrica
de la vacuna a los tejidos del husped. En la actualidad se realizan ensayos de diversas vacunas de este tipo, algunos ejemplos son la
vacuna para la hepatitis B, para la malaria, para la gripe, para el herpes simple y para el SIDA.
Diagnstico de enfermedades de origen gentico
Conociendo la secuencia de nucletidos de un gen responsable de una cierta anomala, se puede diagnosticar si este gen anmalo est
presente en un determinado individuo.
Hasta ahora ha sido posible la localizacin de los genes responsables de la fibrosis qustica, la distrofia muscular, la hemofilia o el
Alzheimer. Para identificar estos genes se usan sondas de ADN.
La clonacin de genes puede rendir dos tipos de productos: el DNA clonado, til como reactivo especfico en ensayos de diagnstico
por hibridacin o bien los productos proteicos de los genes clonados (antgenos purificados para inmunodiagnostico en produccin de
vacunas). Hay descritas cerca de 500 enfermedades hereditarias producidas por mutaciones recesivas. Las tcnicas de ingeniera
gentica han servido para diagnosticar algunas de ellas, por ejemplo, la anemia flaciforme.

Obtencin de anticuerpos monoclonales

Este proceso abre las puertas para luchar contra enfermedades como el cncer y diagnosticarlo incluso antes de que aparezcan los
primeros sntomas.
El interfern fue el primer medicamento producido por ingeniera gentica. Es utilizado como medicamento complementario a la
quimioterapia para la cura del cncer. Su produccin era cara hasta 1980, pero genes de interfern fueron introducidos en bacterias
usando tecnologa de recombinacin del ADN permitiendo as el cultivo masivo y purificacin de las emisiones bacterianas.