Obtencin de Componentes

Sanguneos: Fraccionamiento
Enrique Girona Llobera
31 de enero de 2008

Blundell J, The Lancet, 1829

Ca. 1876, Bellevue Hospital, N.Y.

1892. Adler J, Transfusin de sangre de cabra, detalle. (Simon Bernheim

"Transfusion de sang de chevre et tuberculose pulmonaire")

Dr. Durn, 1937

Dr. Lewisohn, 1915

Fenwal, 1953

Hemoterapia
Los progresos en la obtencin y
conservacin de los diferentes
componentes sanguneos han hecho
posible la administracin separada de las
distintas fracciones hemticas

Hemoterapia Moderna

Hemoterapia

Plasma
Plaquetas
Glbulos
Blancos
Glbulos
Rojos

1,026
1,058
1,062-1,082
1,100

 Distintas configuraciones bolsas de

extraccin:
Arriba-Abajo, Arriba-Arriba

Filtracin prealmacenamiento
Fraccionadores automticos

Centrifugacin
Suave
Centrifugacin

Media

PRP
CH
Plasma
Plasma
CLP
CLP
CHPL
CHPL

Intensa

Plasma
CH

Conservacin
Como consecuencia de
fraccionar la donacin
de sangre total.

Componentes
sanguneos obtenidos
precisan condiciones
diferentes para su
conservacin.

Condiciones ptimas de
Almacenamiento
En el caso de componentes celulares
(hemates y plaquetas) el almacenamiento
debe asegurar no solo la FUNCIN si no
tambin su VIABILIDAD.
En el caso del plasma y sus derivados,
deben conservar la funcin de las
protenas, especialmente de los factores
de coagulacin.

Hemates

Almacenamiento de los hemates

OBJETIVO:
Mantenimiento de la viabilidad celular:
Supervivencia de los hemates a las 24 horas
de la transfusin (75%).

Mantenimiento de su funcin celular:

Capacidad de las clulas transfundidas para
transportar normalmente el oxgeno a los
tejidos.

Refrigerados a 2 C a 6 C

Conservacin de los hemates

Produce una serie de alteraciones:
Lesin de almacenamiento:
1. Cambios bioqumicos
2. Cambios biomecnicos

Metabolismo del hemate

Dos fosfatos orgnicos desempean un
papel fundamental:
2,3-difosfoglicerato (2,3-DPG)
Adenosintrifosfato (ATP)

L 2,3-DPG hace que la hemoglobina tenga una

mayor afinidad por el O2 J cesin menor del
mismo a los tejidos.

 Grupos S-nitrosotioles S nitrosohemoglobina

Accin sobre arteriolas y capilaresJincremento
flujo sanguneo

1.Cambios bioqumicos
a)

Descenso progresivo en los niveles de 2,3DPG.

Progresivo descenso en la concentracin de
ATP y cambios morfolgicos en los hemates.
Cambios metablicos:

b)
c)

Preferencia va gliclisis anaerobia frente a la

pentosa fosfato, perdiendo poder reductor
volvindose ms sensible a ataques oxidativos.

1.Cambios Bioqumicos: 2,3-DPG

Los niveles de 2,3-DPG disminuyen
linealmente las dos primeras semanas de
almacenamiento.
Recuperacin rpida de la mitad de los
niveles de 2,3-DPG a las 12 horas de
transfundidos.
A las 24 horas niveles normales de 2,3DPG.

Metabolismo Hemate
90% va Glicolisis anaerobia
Energa: ATP
NADH: Mantiene el hierro
reducido (ferroso).
2,3-Difosfoglicerato:
Regula afinidad de la
hemoglobina por el oxgeno

Soluciones de almacenamiento
ACD: Acido-CitratoDextrosa (glucosa)
CPD: Citrato-FosfatoDextrosa (glucosa).
Retrasa la prdida de 2,3DPG, mejorando la
funcin y ligeramente la
supervivencia al
incrementar el pH.
CPD-A: Citrato-FosfatoDextrosa (glucosa)-Adenina.
Adenina se desamina en
inosina rpidamente
niveles aceptables de
ATP.

2.Cambios biomecnicos
a) Prdida de fosfolpidos de la membrana
eritrocitaria y una distribucin anmala
de los mismos:
Equinocitos y esferocitos

b) Aumento de la fragilidad osmtica:

Hemlisis de los hemates

Soluciones aditivas
CPDA-1; CPDA-2
Incremento cantidad de glucosa

SAG-M:
Manitol como protector de la membrana
eritrocitaria.

ADSOL:
Incremento dosis de adenina

Viabilidad de los hemates

Refrigerados
ACD CPD: 21 das
CPDA: 35 das
Soluciones aditivas:
SAG-M [Salina, adenina, glucosa, manitol]: 42
das.
ADSOL: 45 das.

Futuro
Estandarizacin de los CH
Alargamiento de caducidad actual
Disminucin riesgo transfusional por
infeccin
CH universales

Estandarizacin
Disminuir la variabilidad en el contenido
de hemoglobina por unidad
Adaptar extraccin a la volemia y
hemoglobina/hematocrito del donante.
Eritrofresis

Conocer la cantidad de hemoglobina de

los CHs ajustara el consumo a las
unidades necesarias.

Incremento Caducidad
1986 (Meryman, et al.): Posible almacenar
hemates viables durante 100 das.
Soluciones Aditivas Experimentales (EAS):

NaCl
NaH-CO3
Na2HPO4
adenina
glucosa
manitol.

EAS76: Cambios en
la concentracin de
NaCl } K12 semanas
(2003 Hess et al.)

haematologica 2007;92 (Extra 1) 63-66

Disminucin riesgo transfusional

por infeccin
Inactivacin de patgenos en CHs:
Cerus: S-303, suspendido en Fase III (2003)
Anticuerpos en 2 pacientes transfundidos con
hemates tratados

CH universales

Tratamiento enzimtico
PEGilacin (PoliEtilenGlicol)

Accin Enzimtica

Liu et al. Nature Biotechnology 2007

Plaquetas

Centrifugacin
Suave
Centrifugacin

Media

PRP J [PQ]
CH
Plasma
Plasma
CLPx 5 + SAP J pool
CLP
CHPL
CHPL

Intensa

Plasma
CH

Almacenamiento de plaquetas
El almacenamiento debe asegurar no slo
la FUNCIN si no tambin su
VIABILIDAD.
No contienen ADN ni ARN J activacin y
liberacin de sus grnulos J incapaces de
resintetizarlos.
Particularmente susceptibles a daarse si
se almacenan de manera incorrecta.

Plaquetas: Cambios Morfolgicos

por Activacin

1m

grnulos

microfilamentos
microtbulos

Puntos crticos en la conservacin

de las plaquetas
Temperatura
pH
Intercambio gaseoso

Conservacin de Plaquetas
Temperatura:
Fro produce DAO PLAQUETARIO J las
plaquetas cambian su forma DISCOIDAL por
ESFRICA.

18-24C
Observacin del fenmeno del remolino u
ondas muar (Swirling)

Conservacin de Plaquetas
pH:
Prdida rpida del glucgeno intraplaquetario
J Lactato J L pH
pH de 6,2 a 6,8 J cambios reversibles
pH < 6,2 J proceso irreversible:
Hinchazn
Aglutinacin
Lisis

6,4-7,4

Conservacin de Plaquetas
Intercambio gaseoso:
Bolsa permeable a los gases:
Oxigenacin adecuada
Eliminacin del dixido de carbono resultante del
metabolismo del cido lctico

Mantenerse en agitacin contnua:

Facilitar el intercambio gaseoso a travs de la bolsa.

24 horas sin agitacin, sin dao irreversible

plaquetar.

Conservacin de Plaquetas
Viabilidad plaquetar: 7 das
Periodo mximo de conservacin: 5 das
Riesgo de sepsis en receptores por
contaminacin bacteriana.

RD 1088/2005: hasta 7 das si se emplea

un mtodo de deteccin o reduccin de
contaminacin bacteriana.

El Problema:

El problema: contaminacin

Inactivacin
Plaquetas:
Amotosaln (psoraleno S-59), Cerus.
Riboflavina, Gambro.

Intercept (Cerus)

Mirasol (Gambro BCT)

Automatizacin

Parmetros Fraccionamiento
Extraccin de 450 mL 45 mL [+ 63 mL de
CPD, (100 mL de SAG-M)]
T conservacin sangre recin extrada:
Refrigerada entre +20 C y +24 C :
Placas de 1,4 butanodiol ( de + 37 C a +
22 C)
Hasta un mximo de 18-24 horas
prefraccionamiento (mnimo 2 horas).

Moltes Grcies!!!