UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

CENTRO DE NANOCIENCIAS Y NANOTECNOLOGA

LICENCIATURA EN NANOTECNOLOGA
LABORATORIO DE SISTEMAS BIOLGICOS
PRCTICA # 1

Ttulo: Microscopa ptica

Fecha:
18.08.2014

Acadmico: M. en C. Roberto Vazquez Muoz

Integrantes:
Assad Bustillos, Julin David
Pasarn Snchez, Csar
Introduccin:
Antonie van Leeuwenhoek (Holanda, 1632-1723), un vendedor de telas, aficionado a pulir
lentes, logr fabricar lentes lo suficientemente poderosas como para observar bacterias,
hongos y protozoos, a los que llam "animlculos". El nombre deriva etimolgicamente de dos
races griegas: mikrs, que significa pequeo y skopoo, que significa observar. La
microscopia es el conjunto de tcnicas y mtodos destinados a hacer visible los objetos de
estudio que por su pequeez estn fuera del rango de resolucin del ojo normal. [1]
El primer microscopio compuesto fue desarrollado por Robert Hooke. A partir de ste, los
avances tecnolgicos permitieron llegar a los modernos microscopios de nuestro tiempo, los
que existen de varios tipos y son usados con diferentes fines.
El estudio detallado de los componentes de clulas y tejidos animales o vegetales requiere el
uso de instrumentos que permitan ampliar muchas veces ms la imagen de las estructuras
que los constituyen. As, hoy podemos hablar de avances tales como la tecnologa lser y de
la informtica a la microscopa. [2]
La iluminacin Khler (en honor a August Khler), es el mtodo utilizado en la iluminacin en los microscopios
pticos modernos ya que elimina la iluminacin desigual en el campo de visin para la muestra a observar.
Existen dos tipos, un mtodo en el que la luz se transmite a travs de la muestra y donde la luz se refleja desde
el espcimen. La iluminacin transmitida se usa para muestras transparentes o semitransparentes, mientras
que la reflejada tipo es til para los objetos tales como el metal. [3]

Palabras clave: Microscopio, Microscopa, Iluminacin.

Mtodo:
1 Se realiz con una descripcin general esquematizada acerca del microscopio y sus partes
as como sus funciones.
2 Se explicaron las funciones del ocular, cabeza, revlver, objetivos, brazo; la diferencia entre
los tornillos macro y micromtrico, y del diafragma y condensador.
3 Se manipul un microscopio por cada equipo de dos personas para hacer un reconocimiento
de las partes antes mencionadas manipulando con cuidad el aparato.
4 Se fij el revlver con el objetivo en el cual se tenga el menor aumento, esto es para no
daar tanto el lente del objetivo como la muestra a tratar. Se repartieron dos muestras a
observar por cada microscopio.

5 Se asignaron fueron una muestra de cncer de una pata de rata y de un fragmento de

manzana teida de dos colores, rojo y verde.
6 Se comenz por el objetivo ms bajo, se aument de nivel dos veces ms, ajustando
principalmente con el tornillo macromtrico, pero para los dos ltimos niveles solo se enfoc
con el tornillo micromtrico para as obtener un trabajo con mayor precisin y ms cuidado.
7 Despus de observar y manipular el microscopio con las dos muestras iniciales, se
observaron otras 2 adicionales: polen y una hoja de frijol.

Resultados:
Al conocer las partes del microscopio se tuvo una idea general sobre ste y se realiz el
siguiente esquema (Figura 1)

Figura 1 Partes ms importantes del microscopio:Ocular, cabeza, revlver, objetivos, brazo, tornillos
macro/micromtrico, lmpara, diafragma y condenzador.

Al poner la primer muestra (tejido de rata) en el microscopio, se manipul la iluminacin y los

cambios en la imagen se presentan a continuacin (Figura 2)

Figura 2 Aqu se puede mostrar diferencia en la textura de la imagen al manipular la luz que pasa a la muestra.

Posteriormente al analizar la muestra de manzana se manipul el nivel de aumento al igual

que en el tejido canceroso. (Figura 3) (Figura 4)

Figura 3 En las muestras de manzana, existe un claro aumento de la imagen manipulando los objetivos. Esto
demuestra cmo puedes manipular qu tan grande se desea una imagen de acuerdo a la necesidad del
experimento.

Figura 4 Se pueden apreciar aqu dos muestras de cncer en el hueso de la rata. Aqu tambin se puede apreciar
un aumento en la imagen.

Al finalizar las 2 muestras asignadas al principio, se observaron 2 muestras adicionales a las

asignadas originalmente

Figura 5. A la izquierda se puede apreciar polen y a la derecha una hoja de frijol.

Discusin y Conclusin:
Observamos las diferentes muestras que se tenan en el laboratorio, como la hoja de frijol, los
huesos de rata con cncer, polen, etc. Y pudimos resaltar la importancia del uso adecuado
del microscopio al ir aumentando poco a poco de aumento y cambiando los lentes para
apreciar cada vez una parte ms especfica de las muestras, con una muy buena resolucin.
Aprendimos a manejar la iluminacin Khoeler, y el microscopio. Conocer las partes que lo
conforman, como los tornillos macromtricos y micromtricos, la platina, el condensador, el
diafragma, etc.
Observamos la importancia de controlar la cantidad de luz que pasa por el diafragma, y usar
el condensador para mejorar la visin detallada de la muestra o preparacin.

Discusin y Conclusin:
Se observaron las diferentes muestras que se tenan en el laboratorio, como la hoja de frijol,
los huesos de rata con cncer, polen, etc. Y se resalt la importancia del uso adecuado del
microscopio al ir aumentando poco a poco de aumento y cambiando los lentes para apreciar
cada vez una parte ms especfica de las muestras, con una muy buena resolucin.
Se aprendi a manejar la iluminacin Khler, y el microscopio. Se conocieron las partes que lo
conforman, como los tornillos macromtricos y micromtricos, la platina, el condensador, el
diafragma, etc.
Se observ la importancia de controlar la cantidad de luz que pasa por el diafragma, y usar el
condensador para mejorar la visin detallada de la muestra o preparacin.

Cuestionario:
1 Cules son los tres elementos centrales de la microscopia
Aumento: est dado por la curvatura de su lente y la distancia focal. Cada sistema de lentes
es capaz de producir una imagen aumentada cuyo valor se enuncia con la letra x, as que 10x
significa que la imagen est aumentada 10 veces,
Resolucin: Es la capacidad que tiene un sistema ptico de aislar dos puntos que se
encuentran muy prximos entre s. De manera que los puedas ver separados, uno del otro. La
distancia entre esos dos puntos se conoce como Lmite de Resolucin.
Contraste: La muestra se tie con algn colorante o se le hace un tratamiento para que la luz
permita observarla a detalle. [4]
2 Mencione tres tcnicas de microscopia ptica y dos de electrnica (Ejemplo y
aplicacin)
Microscopia ptica
Microscopa de campo claro
Se contrasta el objeto que se observa del medio que le rodea o las diferentes partes del
mismo objeto gracias a que la luz que lo atraviesa con respecto a la que no lo atraviesa
presenta diferencias en su longitud de onda (diferencias de color) y/o de amplitud (diferencias
de intensidad).
Microscopa de campo oscuro
La luz se hace incidir muy oblicuamente sobre la preparacin. Los rayos que la atraviesan o
no, pero que siguen ms o menos la trayectoria inicial no son recogidos por el objetivo. Slo la
luz que es difractada por el objeto, o que el objeto refleja casualmente, llega al objetivo. De
esta manera la imagen del objeto aparece clara sobre un fondo oscuro.
Microscopia electrnica
Microscopa electrnica de transmisin:
El espcimen se corta en lminas ultra finas (en el orden de nanmetros) que se colocan en
una rejilla de cobre, la cual es bombardeada con un haz de electrones enfocado. Una silueta
del espcimen se proyecta en una pantalla fluorescente o placa fotogrfica situada por debajo
del mismo. La resolucin puede ser de 0,2nm.
Microscopa electrnica de barrido:
Se observa la superficie de un espcimen slido. Se puede lograr una resolucin de 10nm y
un aumento hasta de 20.000x. Se producen imgenes muy interesantes en 3D gracias a una
mayor profundidad de campo. Se escanea la superficie del espcimen con un haz de
electrones (primarios) y los electrones que rebotan (secundarios) son recogidos por un
detector. La seal se observa en un monitor de televisin. Los tomos del espcimen
producen rayos X que tambin son detectados. [5]

3 Que son las aberraciones pticas esfrica y cromtica y a que se refiere

artefacto.
Aberracin de esfericidad: Es la ms importante en la microscopa electrnica y es el factor
que ms limita el poder de resolucin.

Aberraciones cromticas: Cuando la luz blanca atraviesa una lente, las diferentes frecuencias
son refractadas de acuerdo a su frecuencia. Cada color sigue un camino diferente por la lente,
y la incapacidad del lente de reunir nuevamente los colores se traduce a una diferencia de
tamao o a unas lneas de colores que rodean la imagen.
El trmino artefacto, es utilizado en la microscopia para indicar cualquier distorsin percibida
y/o cualquier otro error causado por un instrumento de la observacin o medicin, el cual
puede provocar una mala interpretacin o resultados errneos. [6]

Referencias:
Arraiza N & Navarro J. (2010). Manual de microscopia. Historia, descripcin y uso. Mexico: Auxilab. Pp 2-9.
Lanfranconi, M. Historia de la Microscopa. Introduccin a la Biologa. Fac. de Ciencias Exactas y Naturales.
Universidad Nacional de Mar de Plata. Recuperado el 15.08.2014 de
http://www.mdp.edu.ar/exactas/biologia/grupos/version%201_1/Practicos/archivo
s/049_055_LECTURA_Microscopia.pdf
Diez Guerra, F. Javier. (Febrero 2004). Tcnicas de microscopa ptica. Espaa: Arbor.

Referencias:
1 Arraiza N & Navarro J. (2010). Manual de microscopia. Historia, descripcin y uso. Mexico: Auxilab. Pp 2-9.
2 Lanfranconi, M. Historia de la Microscopa. Introduccin a la Biologa. Fac. de Ciencias Exactas y Naturales.
Universidad Nacional de Mar de Plata. Recuperado el 15.08.2014 de
http://www.mdp.edu.ar/exactas/biologia/grupos/version%201_1/Practicos/archivo
s/049_055_LECTURA_Microscopia.pdf
3 Nikon Instruments INC (2014) Iluminacin Koehler. Recuperado de
http://www.nikoninstruments.com/es_AMS/Centro-de-Informacion/Iluminacion-Koehler.
4.- Universidad Latina. (2010). Microscopia. 28.08.2014, de Universidad Latina Sitio web:
http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo3_5.htm
5.- MONTALVO ARENAS, C. (Agosto de 2010.). MICROSCOPA. 15.08.2014, de Facultad de medicina UNAM
Recuperado
de:
http://www.facmed.unam.mx/deptos/biocetis/PDF/Portal%20de%20Recursos%20en
%20Linea/Apuntes/2_microscopia.pdf
6.- IPB. (2011). Tipos de microscopia. 28.08.2014, de IPB Sitio web:
http://www.ipb.csic.es/servicios/Microscopia/uploads/3/6/2/2/3622788/microscopia_a_grandes_rasgos.pdf