1.

Objetivo

Determinar a concentrao de fsforo no soro

2. Fundamentos da Reao
Os ons fosfato regem com molibdato de amnia em um meio acido, formando um
complexo de fosfomolibdato de amnio. Por ao do acido ascrbico, em meio alcalino, o
complexo formado reduzido pelo azul de molibdnio, cuja absorbncia medida em 660
nanmetros, sendo diretamente proporcional a medida de fsforo no sangue.

3. Procedimento
Foram identificados trs tubos, como Branco(B), Teste(T) e Padro(P). Adicionou-

se 2,5 mL de cido ascrbico nos trs tubos, em seguida foi colocado 100L de soro
no tubo T e em seguida 100L da soluo padro no tubo P, agitando os tubos de
ensaio. Foi adicionada em cada tubo uma gota de molibdato, e as solues deixadas
em repouso por um minuto, percebe ento que as protenas se precipitam. Em
seguida foi colocado duas gotas de soluo alcalina em todos os tubos e novamente
em repouso, mais por 2 minutos, at que as protenas dissolvam.

Em seguida foi feita a leitura da absorbncia das solues dos tubos Teste e Padro
em 660nm, zerando o espectrofotmetro com a soluo do branco.
Esse procedimento est descrito na tabela abaixo:
Tabela 01. Procedimento
Tubos
Reagente 01 cido ascrbico
Soro (amostra)
Reagente 04 Soluo Padro
Reagente 02 Molibdato

Branco
2,5 mL
01 gota

Teste
2,5 mL
100 L
01 gota

Padro
2,5 mL
100 L
01 gota

Repousar 1 minuto (as protenas se precipitam)

Reagente 03 Soluo Alcalina

02 gotas

02 gotas

02 gotas

Aps isso foi feita a leitura das absorbncias dos tubos teste e padro em 660 nm,

zerando o espectrofotmetro com a soluo do branco.

4. Clculos e Resultados Obtidos

Fsforo(mg/dL)=

|.|do teste
x CP
|.|do padro

Absorbncia do padro = 0,401 nm

Absorbncia do teste = 0,539nm

Concentrao da soluo padro: 5 mg/dL

Fsforo=

0,539 nm
x 5 mg/dL
0,401 nm

Fsforo(mg/dL)=6,7 mg/dL

Valores de referncia: Crianas 3,0 a 7,0 mg/dL

Adultos 2,5 a 4,5 mg/dL

5. Discusso

O fosfato funciona como modificador covalente de muitas enzimas. Dentro das

clulas, nion importante que balanceia os ctions potssio e magnsio, e um dos
principais componentes da estrutura cristalina do osso e dos dentes. Do contedo corporal
total de fosfato, 85% esto contidos no esqueleto e 6% nos msculos.
Cerca de 70% do fosfato ingerido absorvido pelo intestino. Portanto, a excreo
urinria constitui o principal mecanismo capaz de preservar o balano de fosfato. Da carga
diria filtrada, os tbulos renais conseguem reabsorver de 70 a 100%, com mdia de 90%.
A regulao da absoro de fosfato, pelos tbulos renais, proporciona a flexibilidade
necessria para compensar as grandes oscilaes da ingesto diettica.
As reservas de fosfato dos tecidos moles, como massa muscular, sofrem
transferncia rpida com o reservatrio lquido extracelular de fosfato. Esse processo de
transferncia fator importante na regulao minuto a minuto da concentrao plasmtica
de fosfato. Cerca de 250 mg, ou metade do reservatrio lquido extracelular total de
500mg, entram e saem da massa ssea, diariamente, no processo de remodelagem do
osso.
A concentrao normal de fosfato no plasma de 2,5 a 4,5 mg/dL para adultos e
3,0 a 7,0 mg/dL. O valor encontrado na prtica foi de 4,4 mg/dL, o que significa que o soro
analisado encontra-se dentro dos valores aceitveis. Caso os valores se encontrassem
abaixo do valor de referncia o individuo poderia apresentar fraqueza muscular, formao
anormal do osso, perda da integridade das membranas das hemcias, etc.
A presena de quantidades elevadas de fsforo e clcio no organismo leva a que
estes dois elementos se combinem e formem depsitos contendo clcio nas articulaes,

nos rgos e nos vasos sanguneos. Estes depsitos podem provocar o endurecimento
dos tecidos, num processo denominado calcificao.
6. Concluso
O objetivo proposto pela pratica foi cumprido, pois foi possvel determinar os nveis
de fsforo no soro. O resultado encontrado estava dentro dos valores de referncia o que
significa que a concentrao considerada normal.
7. Referncias
[1] CHAMPE, Pamela C. & HARVEY, Richard A. - Bioqumica Ilustrada. Artes Mdicas.
Porto Alegre, 1997.
[2] Viso Geral do Metabolismo do Clcio e Fosfato. Disponvel em:
http://web.unifoa.edu.br/portal/plano_aula/arquivos/04054/Metabolismo%20%20Calcio
%20e%20Fosfato%20-%20FOA%20completo.pdf
[3] Metabolismo do Clcio e Fosfato. Disponvel em: http://www.uff.br/WebQuest/pdf/pot