1.

Procedimiento de Operacin Estndar

(SOP)

CENTRO DEL AGUA Y DESARROLLO SUSTENTABLE

DETERMINACIN DEL CONTENIDO

ORGNICO EN SUELOS O SEDIMENTOS
MEDIANTE PRDIDA POR IGNICIN O
CALCINACIN
SOP ID: 002 | Fecha de elaboracin: 05 de Diciembre de 2014 | ltima revisin: Error! Nombre
desconocido de propiedad de documento. |
URL: http://www.cads.espol.edu.ec/laboratorio/sop/002

Nombre corto del

Determinacin del Contenido Orgnico
Procedimiento
Elaborado por
Fecha de
elaboracin

05/Diciembre/2014

Revisado por
Fecha de
revisin
Aprobado por

Luis Domnguez

Fecha de
aprobacin
Laboratorio en el
Laboratorio de Ecologa Aplicada y Evaluacin Ambiental
que se aplica
ID del
procedimiento

002

1.

Propsito y descripcin del mtodo

SOP 002

Determinacin del Contenido Orgnico

1 of 10

Centro del Agua y Desarrollo Sustentable (CADS)

Escuela Superior Politcnica del Litoral (ESPOL)
SOP 002| Laboratorio de Ecologa Aplicada y Evaluacin Ambiental

Para la determinacin del humus o materia orgnica muerta hay varios mtodos, si es un suelo con un alto contenido de arena se aplica la
calcinacin a una temperatura promedio de 500 600C, aplicando este mtodo se puede obtener resultados de manera simple y rpida.
(Steubing, Godoy, & Alberdi, 2001).
El mtodo por ignicin o calcinacin para la determinacin de la materia orgnica implica la destruccin climatizada de toda la materia orgnica
en el suelo o sedimento. Un peso conocido de la muestra se coloca en un crisol de cermica (o recipiente similar) que luego se calienta un
promedio de 6 a 8 horas entre 350 y 440C. (Nelson y Sommers, 1996; ASTM, 2000.: Blume et al, 1990). La muestra se enfra a continuacin en
un desecador y se pesa. Contenido de materia orgnica se calcula como la diferencia entre los pesos inicial y final de la muestra dividido por el
peso de la muestra inicial multiplicado por 100% veces. Todos los pesos deben corregirse, no debe contener humedad o agua antes de calcular
el contenido de materia orgnica, a continuacin se muestra la interpretacin de los resultados de materia orgnica.
La temperatura por el mtodo de calcinacin debe mantenerse por debajo de 440C para evitar la destruccin de los carbonatos inorgnicos
que pueden estar presentes en la muestra. Una preocupacin con esta tcnica es que algunos minerales de arcilla se pierda agua estructural
(es decir, agua que es parte de su matriz) o grupos hidroxilo a las temperaturas usadas para la combustin de las muestras. La prdida de agua
estructural aumentar el total de la prdida de peso de la muestra que lleva a una sobreestimacin en el contenido de materia orgnica. Uno de
los medios posibles para evitar este problema es a travs de la pre-tratamiento de la muestra a travs de la eliminacin de la materia mineral
usando HCl y cido HF. (Nelson y Sommers, 1996).

El mtodo de "prdida por ignicin" para la determinacin del contenido orgnico es ms aplicable a aquellos materiales identificados como
turbas, lodos orgnicos y suelos que contengan materia vegetal relativamente no descompuesta ni deteriorada o materiales de plantas frescas
como madera, races, pasto o materiales carbonceos como lignito, carbn, etc.
2.

Consideraciones de salud y seguridad

Peligros

Se considera que el analista debe respetar en todo momento las buenas prcticas de laboratorio durante la ejecucin del
presente procedimiento.
Este procedimiento conlleva el uso de mufla y estufa, el cual es un equipo que alcanza temperaturas de 440 c para este
procedimiento, por ende la liberacin de gases txicos e irritantes para las vas respiratorias y los ojos. Por esta razn los
pasos de este procedimiento que involucren la exposicin del analista al uso de la mufla debern ser realizados en la
campana de extraccin.
Haga uso de guantes, mandil y gafas de proteccin al manipular cualquier sustancia qumica.
Informacin adicional acerca de los qumicos que sern utilizados puede ser encontrada en sus respectivas hojas tcnicas
de seguridad mdica en la carpeta amarilla MSDS que se encuentra en el archivador del laboratorio.

SOP 002

Determinacin de Contenido Orgnico

2 of 10

Centro del Agua y Desarrollo Sustentable (CADS)

Escuela Superior Politcnica del Litoral (ESPOL)
SOP 002| Laboratorio de Ecologa Aplicada y Evaluacin Ambiental

Entrenamiento
requerido

El presente procedimiento requiere que el analista cuente con un entrenamiento bsico en tcnicas de laboratorio. Deber
adems ser entrenado en el correcto uso de la mufla, estufa y dems equipos empleados (ej. Desecador, Balanza Analtica).
El encargado del laboratorio ser el responsable de proveer este entrenamiento.

Medidas de
respuesta a
accidentes y
emergencias

El lavador de ojos se encuentra en

La ducha esta en

El botiqun de primeros auxilios est sobre el mueble central de trabajo

El kit para control de derrames qumicos esta en

El extintor est a la salida del laboratorio

Hay un botn para activar la alarma de incendio a la bajada de los laboratorios

Ante una emergencia, los nmeros de emergencia estn en la pared junto a la entrada.

Materiales necesarios

3.

Materiales

Notas

Mufla

Que sea capaz de mantener

una temperatura contina de
440 10 C.

Horno

Debe ser capaz de mantener

temperaturas de 105 5 C.

Desecador

Balanza Analtica
Refrigerador

Costo referencial

Con un desecante efectivo, es

muy usada la slice gel para
este fin.
De 1200g de capacidad y con
una sensibilidad mnima de
0.01g.
Debe ser capaz de mantener
temperaturas de 4 2 C.

Campana de extraccin

Verificar funcionamiento antes

de su uso

Agua destilada

Obtenida del Laboratorio de

Servicios
Generales
del
DCQA

Pinzas Grandes para crisol

Manipulacin de crisoles

Crisol

De porcelana, de 30 a 50 ml
de capacidad.

Guantes Trmicos

Manipulacin
a
altas
temperaturas en la mufla

Guantes de Nitrilo

Proteccin personal y evitar

contaminacin de muestras

Esptula

Tomar cantidad de muestra

requerida para el anlisis

Bandejas

Pueden ser de porcelana,

SOP 002

Informacin para pedidos

Determinacin de Contenido Orgnico

3 of 10

Centro del Agua y Desarrollo Sustentable (CADS)

Escuela Superior Politcnica del Litoral (ESPOL)
SOP 002| Laboratorio de Ecologa Aplicada y Evaluacin Ambiental

metlicos a prueba de moho o

de vidrio.
Fundas Hermticas o Frascos

Guardar la muestra en campo

y
almacenamiento
en
laboratorio

Pala de Ponar

Verificar funcionamiento antes

de su uso

Cuerda o Soga

Verificar tamao y resistencia

antes de su uso

Molde de Aluminio

Tomar cantidad de muestra

requerida para el anlisis

4.

Almacenamiento, preservacin y disposicin de la muestra

Toma de la muestra en campo

4.1
Almacenamiento
y preservacin La muestra de sedimentos se puede tomar usando una draga, pistn o una esptula dependiendo de la accesibilidad o
disponibilidad de equipos.
Cuando se usa una esptula, se toma la muestra en las orillas del rio o laguna usando una esptula, as como se debe
colocar la cantidad suficiente en fundas hermticas.
Cuando se usa una draga o pistn para tomar muestras de sedimentos adicionalmente se necesitara una cuerda para
manipular la draga y un bote para llegar al sitio de muestreo que generalmente suele ser al centro del rio o laguna.
Asegurar que la draga o pistn este correctamente sujeta al bote, adems, el cabo de la draga debe tener la longitud de
acuerdo a la profundidad del cuerpo de agua que se est analizando.
Lanzar la draga o pistn asegurndose de que haya recogido el sedimento en el fondo del cuerpo de agua. La cantidad
de lanzamientos depender de la cantidad de sedimentos que se obtuvieron en cada lanzamiento.
Una vez que se sube la draga o pistn, colocar inmediatamente la muestra de sedimentos en el recipiente, para de esta
manera evitar perdida de muestra. Se recomienda usar
Colocar la cantidad suficiente de cada muestra en fundas hermticas, previamente rotuladas usando marcadores; luego
cerrar las fundas sin que estas contengan aire.
Almacenar las muestras en hieleras, equipadas con ice pack para mantener las muestras a una temperatura de 4C.

Almacenamiento y Preservacin de la muestra en laboratorio

Una vez que se ha tomado la muestra, para el almacenamiento se debe guardar en un contenedor apropiado y rotulados:
bolsa de papel o plstico, o bote de plstico, fundas hermticas por ejemplo y mantenerse tanto como sea posible en su
estado original, evitando cualquier tipo de contaminacin y de transformacin, y esto se debe hacerlo en un congelador que
sea capaz de mantener una temperatura aproximada de 4C. Aqu tenemos 3 opciones para preservar las muestras
dependiendo del tipo de estudio, espacio en las instalaciones del laboratorio, disponibilidad de materiales y equipos:
N

SOP 002

Matriz

Contenedor

Preservacin

Determinacin de Contenido Orgnico

Volumen

Tiempo de
conservacin
4 of 10

Centro del Agua y Desarrollo Sustentable (CADS)

Escuela Superior Politcnica del Litoral (ESPOL)
SOP 002| Laboratorio de Ecologa Aplicada y Evaluacin Ambiental

Sedimento
o Suelo

Funda Hermtica o
Botella Plstica /Vidrio

Congelacin (-15C)

1 Kg

6 meses

Sedimento
o Suelo

Funda Hermtica o
Botella Plstica /Vidrio

Refrigeracin (4C)

1 Kg

48 horas

Sedimento
o Suelo

Funda Hermtica o
Botella Plstica /Vidrio

Temperatura Ambiente
(Secar)

1 Kg

6 meses

En el laboratorio el primer paso para la mejor conservacin de la muestra es el secado al aire, bien esttico o dinmico, pero
en cualquier caso no calentado previamente. La temperatura del aire no debe pasar de los 35C (con humedades relativas
menores del 60%), porque a mayores temperaturas puede ocasionar cambios drsticos en algunas caractersticas fsicas y
qumicas del suelo o sedimento. El secado conduce normalmente a aumentar la cementacin, lo que puede afectar despus
al anlisis granulomtrico. Si tiene lugar adems a alta temperatura puede producir cambios en el estado de oxidacin de los
elementos (Fe2+ por ejemplo) y en el potasio de cambio, y la forma de presentarse el N y el P, as como producir ciertas
reacciones microbiolgicas. Estas transformaciones sern ms importantes cuanto ms tiempo dure el secado.
Para secar una muestra, en la misma funda hermtica se debe extender en el molde de aluminio y destruir con cuidado los
agregados groseros que se detecten a simple vista, por ejemplo con rodillos de madera o maza de mortero de caucho. Una
muestra debe estar hmeda el menor tiempo posible porque se considera que en general en una muestra seca se reducen
las reacciones qumicas y bioqumicas al mnimo, evitando que tales reacciones sean una posible fuente de error.
*Para acelerar el proceso de secado de la muestra y dependiendo de los parmetros a analizar se puede hacer uso de una
estufa u horno y hacerlo a una temperatura no mayor a 60c.
**En general es recomendable que las muestras se analicen tan pronto como sea posible, en caso contrario deben
conservarse en refrigeracin a 4C o en el congelador a -15C.
4.2 Disposicin

En el caso 1 y 2, para disposicin de las muestras en congelacin o refrigeracin se las mantiene en Funda Hermtica o
Botella Plstica /Vidrio a la temperatura ideal y en la Refrigeradora o Congelador hasta su posterior anlisis.
Para el caso 3, una vez seca la muestra de la puede mantener en lugar fresco y seco a temperatura ambiente o bien se
puede pasar a la fase de preparacin realizada antes del anlisis (homogenizacin, molienda, tamizado y reduccin del
tamao).

5.

Descripcin del mtodo

5.1 Lmite de
deteccin del
mtodo

Porcentaje de Contenido Orgnico Voltil

5.2
Interferencias

Presencia de detritos como madera, rocas, plsticos, huesos, etc.

5.3 Antes del

anlisis

Muestra Congelada
Se debe trasladar la muestra congelada (-15c) a una refrigeradora a 4c para evitar cambios bruscos de temperatura y una
fcil manipulacin posterior de la misma para su anlisis.
Muestra Refrigerada
Se debe homogenizar la muestra y luego secar a temperatura ambiente o en una estufa con un temperatura que no supere
los 60C, mientras se va secando se recomienda irla fisurando y rompiendo para tener un secado ms rpido secado, evitar
bloques duros, e ir removiendo detritos que se vallan localizando.

SOP 002

Determinacin de Contenido Orgnico

5 of 10

Centro del Agua y Desarrollo Sustentable (CADS)

Escuela Superior Politcnica del Litoral (ESPOL)
SOP 002| Laboratorio de Ecologa Aplicada y Evaluacin Ambiental

Muestra Seca
La muestra hay que homogenizarla bien y retirar en lo posible los detritos que se observen durante este proceso de
homogenizacin, molienda y reduccin del tamao de partculas por diferentes tcnicas.
5.3 Mtodo de
anlisis

PROCEDIMIENTO
Las mediciones que se obtendrn en el laboratorio deben ser anotadas en un libro de laboratorio o bitcora en la que deben
constar datos tales como cdigo de la muestra, fecha en la que fue tomada la muestra, nmero del crisol, pesos, etc. A
continuacin se muestra un ejemplo de tabla que puede ser usada para registrar datos:

minar porcentaje de humedad de la muestra, que si bien es cierto no es una dato necesario para calcu

A continuacin se muestra el procedimiento seguido para el desarrollo de este ensayo:

1.1. Preparacin de los materiales

SOP 002

Previo al desarrollo del ensayo se deben rotular los crisoles de preferencia con un nmero escrito a lpiz.
Todos los crisoles deben tener un nmero diferente para evitar confusiones.
Antes de usar los crisoles, estos deben ser lavados para luego ser secados en un horno a 100C por 15
minutos para eliminar cualquier contenido de humedad. Ya secos, se deben conservar en el desecador
previo a su uso.
La balanza debe de estar nivelada, calibrada y encerada antes de usarla.

Determinacin de Contenido Orgnico

6 of 10

Centro del Agua y Desarrollo Sustentable (CADS)

Escuela Superior Politcnica del Litoral (ESPOL)
SOP 002| Laboratorio de Ecologa Aplicada y Evaluacin Ambiental

Balanza encerada

Balanza nivelada

Asegurarse de que la silica gel del desecador este de un color azul intenso, si no es as remover la silica
gel del desecador y colocarla en un vaso de precipitacin para luego colocarla en el horno a una
temperatura de 100C por toda la noche o hasta que adquiera la coloracin recomendada.

Silica gel secada en el horno

Colocacin de la silica gel en el desecador

Usar mascarilla y guantes al manipular la silica g

1.2. Muestra representativa

SOP 002

Descongelar la muestra y colocar en el refrigerador un da antes del anlisis, luego dejar reposar al
ambiente hasta que adquiera la temperatura ambiente o hasta que adquiera una consistencia manejable.
Luego, se debe homogenizar la muestra con el uso de un recipiente plstico y una paleta de la siguiente
manera: Colocar la mayor parte de la muestra como sea posible en un recipiente plstico, con el uso de
una paleta de madera realizar movimientos circulares, con el objetivo de obtener una muestra
Determinacin de Contenido Orgnico

7 of 10

Centro del Agua y Desarrollo Sustentable (CADS)

Escuela Superior Politcnica del Litoral (ESPOL)
SOP 002| Laboratorio de Ecologa Aplicada y Evaluacin Ambiental

homognea.
Una vez homogenizada la muestra se procede a sacar del desecador el crisol que previamente ha sido
secado y rotulado, para luego llenarlo con mnimo 50g de muestra.

No tomar objetos ajenos a la muestra tales como basura u objetos muy

de cada muestra para luego poder comparar resultados. Dependiendo de la disponibilidad de material

1.3. Secar la muestra a 105C

Cuando ya se ha obtenido el crisol con la muestra, lo tomamos con una pinza y lo pesamos, este dato se
anota en la fila PESO DEL CRISOL + MUESTRA HUMEDA (Este solo nos servir para obtener el
porcentaje de humedad de la muestra).
Llevar el crisol al horno con el uso de una pinza a una temperatura de 105C, por 17 horas o hasta que no
haya cambios en su peso a la temperatura indicada.
Una vez transcurrido el tiempo de secado, sacar el crisol y colocarlo en el desecador durante un tiempo
de 60 minutos o hasta que alcance la temperatura ambiente.

mero de muestras que se podrn analizar simultneamente depender de la disponibilidad de materia

Crisol en el desecador

SOP 002

Llevar el crisol del desecador a la balanza, previamente encendida y calibrada, mediante el uso de una
pinza. Observar el dato de masa y anotarlo en la columna PESO DEL CRISOL + MUESTRA SECA para
el uso posterior en los clculos, luego colocar el crisol nuevamente en el desecador.

Determinacin de Contenido Orgnico

8 of 10

Centro del Agua y Desarrollo Sustentable (CADS)

Escuela Superior Politcnica del Litoral (ESPOL)
SOP 002| Laboratorio de Ecologa Aplicada y Evaluacin Ambiental

1.4. Calcinar la muestra a 440C

Llevar el crisol del desecador a la mufla durante un tiempo de 8 horas a una temperatura de 440C,

estra dentro del horno antes de encenderlo para que esta aumente gradualmente de temperatura, ya q

(durante los primeros minutos por lo menos) ya que debido a las altas temperaturas, el crisol o la mue

Luego de que ha trascurrido el tiempo de la muestra en la mufla, sacar la muestra y colocarla en el

desecador durante un tiempo de 120 minutos o hasta que alcance la temperatura ambiente.

Crisoles en la mufla

Crisoles en el desecador luego de la mufla

Colocar el crisol en la balanza, observar el dato de masa y anotarlo en la columna PESO CRISOL +
MUESTRA CALCINADA.

References:

8.

SOP 002

D 2974-00. Standard Test Methods for Moisture, Ash, and Organic Matter of Peat and Other Organic Soils. United States.

Documentacin adicional

Determinacin de Contenido Orgnico

9 of 10

Centro del Agua y Desarrollo Sustentable (CADS)

Escuela Superior Politcnica del Litoral (ESPOL)
SOP 002| Laboratorio de Ecologa Aplicada y Evaluacin Ambiental

Literatura recomendada.

Steubing, L., Godoy, R., & Alberdi, M. (2001). Mtodos de ecologa vegetal (Primera edicin ed.). Santiago de Chile, Chile: Editorial
Universitaria, S.A.

Blume, L.J., B.A. Schumacher, P.W. Shaffer et al. 1990. Handbook of Methods for Acid Deposition Studies Laboratory Analyses for Soil
Chemistry. U.S. Environmental Protection Agency, Las Vegas, NV

Nelson, D.W. and L.E. Sommers. 1996. Total carbon, organic carbon, and organic matter. In: Methods of Soil Analysis, Part 2, 2nd ed.,
A.L. Page et al., Ed. Agronomy. 9:961-1010. Am. Soc. of Agron., Inc. Madison, WI.

SOP 002

Determinacin de Contenido Orgnico

10 of 10