SYNTHSE

mdecine/sciences

1990 ; 6 : 359-66

Le gnome mitochondrial
est-il impliqu
dans la carcinogense ?
Le gnome mitochondrial a une rplication autonome et
active , ne possde pas de systme de rparation bien
caractris, est peu protg par des protines et, du fait
du nombre important de molcules d ' ADN mitochondrial
par cellule , pourrait subir des altrations sans mettre en
pril la survie cellulaire . Les remaniements de l ' ADN
des mitochondries sont frquents au cours des traite
ments par les carcinognes et au cours des cancers . Des
squences d 'origine mitochondriale ont t dtectes dans
l ' ADN nuclaire ; elles seraient particulirement abon
dantes dans des tissus cancreux . L a place exacte des
modifications de l'ADN mitochondrial dans le proces
sus noplasique - piphnomne ou facteur intervenant
reste inconnue .
dans la cancrogense

Marisol Corral
Nicole Defer
Jacques Kruh

ADRESSE

-------

M. Corral : charge de recherche au Cnrs. N .

Defer : charge de recherche a u Cnrs. J . Kruh :

professeur a la facult de mdecine de Cochin-Port

Royal. Cnrs URA 1 1 47, 24, rue du

Faubourg-Saint-] acques,
France.

mis n 4 vol. 6, avril 90

es mitochondries sont-elles
impliques dans le proces
sus cancreux ? Ds 1 923 ,
O . Warburg, qui l'on
doit des dcouvertes majeures sur le mcanisme de la respira
tion cellulaire, constatant un dficit
respiratoire dans les cellules cancreu
ses, leur attribuait un rle important
dans la carcinogense. Inutile de dire
que cette hypothse fut trs contro
verse. Les remarquables travaux sur
l 'implication des gnes nuclaires et
en particulier des oncognes dans les
tapes successives de la cancrisation
firent oublier les mitochondries. Ce
n'est que rcemment que la mise en
vidence de diffrences de structure
du gnome mitochondrial dans les
cellules cancreuses a fait resurgir le
problme de l ' implication des mito
chondries dans la carcinogense et le
maintien de l 'tat cancreux.
La biologie molculaire des mito
chondries a t dcrite rcemment
dans mdecine/sciences [ 1 , 2] et de
manire plus dtaille dans plusieurs
revues gnrales [3 :.__ 5 ] . Nous n'en
rappellerons que quelques points

7 50 1 4

Paris ,

essentiels pour la comprhension de

la suite.
L'ADN mitochondrial (ADNmt) de
plusieurs espces a t entirement
squenc. Celui des mammifres a
une longueur d'environ 1 6 kb, celui
de l 'homme est de 1 6 569 pb. Cet
ADN est double brin et circulaire.
La c h ane l o u rde code pour
12 polypeptides, sous-units d'enzy
mes respiratoires, deux ARN riboso
maux et 1 4 ARN de transfert . La
chane lgre code pour un seul poly
peptide et huit ARN de transfert .
Les autres polypeptides de la chane
respiratoire, ainsi que les protines
impliques dans la rplication, la
transcription et la traduction du
gnome mitochondrial, sont cods
par l ' AD N nuclaire, synthtiss
dans le cytosol et imports dans la
mitochondrie par l ' intermdiaire ou
non de transporteurs membranaires.
L'ADN mt des mammifres est trs
compact, il est codant sur toute sa
longueur, l 'exception d ' une rgion
appele boucle D qui contient l 'ori
gine de rplication de la chane
lourde, ainsi que les deux promoteurs

3 59

RFRENCES

-------

1 . Rotig A, Bonnefont JP, Colonna M, et

al. Les remaniements du gnome mitochon
drial dans les dficits nergtiques de
l'enfant : de nouvelles maladies de systme ?
mdecine/sciences 1 989 ; 5 : 459- 7 1 .

de transcription, et d'une rgion trs

courte qui contient l'origine de rpli
cation de la chane lgre, qui
n'entre en jeu que lorsque les deux
tiers de la chane lourde sont
rpliqus.
Chaque chane est transcrite en une
seule molcule polycistronique conte
nant la copie de chaque gne cod
par la chane. Les ARN sont ensuite
dcoups au niveau des ARN de
transfert , les ARN messagers sont
polyadnyls. On notera l'absence
d'intron chez les mammifres .

2 . Nelson 1 , Degoul F , Marsac C , Ponsot

G, Lestienne P. Des dltions de l ' ADN
mitochondrial dans le syndrome de Kearns
Sayre et autres myopathies avec ophtalmo
plgie externe progressive. mdecine/sciences
1 989 ; 5 : 472-9.

N
L
,.---,

Les ARN messagers sont ensuite tra

duits en polypeptides en utilisant les
22 ARN de transfert et les ribosomes
prsents dans les mitochondries, qui
ont une structure diffrente de celle
des ribosomes cytoplasmiques.
Il est galement noter que le code
gntique utilis par les mitochon
dries n'est pas identique au code
gntique universel " utilis pour la
traduction des gnes nuclaires.
La compaction de l'ADNmt est par
ticulire aux mammifres. Chez la
levure, sa longueur est cinq fois plus

3m 10m 1,.---,
5m
,.---,

,.---,

3. Attardi G. Animal mitochondrial DNA :

an extreme example of genetic economy. /nt
Rev Cytol 1 985 ; 93 : 93- 1 45 .
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chondrial genes. /nt Rev Cytol 1 987 ; 1 08 :
1 49-208.

kb
No s
N O S

cyt.b

....,.

3.6
2.3

.....,.

...,_

...,_

1 .3

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1 6 5 R N A _..

...,_

N0 1

...,_

-.

1.6
1.1

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and carcinogenesis. /nt Rev Cytol 1 983 ; 1 5
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360

1 1 . Weiss MJ, Wang JR, Ha C S , et al.

Dequalinium, a topical antimicrobial agent,
displays anticarcinoma activity based on
selective mitochondrial accumulation. Proc
Natl Acad Sei USA 1 987 ; 84 : 5444-8.

Figure 1 . lvation de la concentration en ARNmt aprs traitement par

la DENA. Les ARN totaux extraits d 'hpatocytes normaux (NL), d'hpatocy

1 2 . Segal-Bendirdjian E, Coulaud D ,
Roques BP, Lepecq JB. Selective Joss of
mitochondrial DNA after treatment of cells
with ditercalinium, an antitumoral bis
intercalating agent. Cancer Res 1 988 ; 48 :
4982-92.

tes isols trois mois aprs traitement par la DENA (3 m) ou de tumeurs hpa
tiques isoles dix mois ( 1 0 m) et 1 5 mois ( 1 5 m) aprs le traitement ont t
analys par la technique de Northern blot en utilisant comme sondes soit un
fragment du gnome mitochondrial de souris contenant les gnes NOS, ND6
et cyt b, soit un fragment du gnome mitochondrial de souris contenant les
gnes ARN 1 6S et ND 1 .
mis n 4 vol. 6, avril 90

grande, presque tous les gnes sont

ports par un mme brin, il existe
des introns, ainsi que des rgions non
codantes entre les gnes.
Par ailleurs, les gnes mitochon
driaux prsentent un grand polymor
phisme, plus grand mme que le
polymorphisme nuclaire, si bien que
chaque individu d'une espce peut se
caractriser par son empreinte ,
mitochondriale comme par son
empreinte nuclaire.
A ce polymorphisme se superpose
parfois une htroplasmie mitochon
driale, c'est--dire la prsence dans
un mme tissu, et peut-tre mme
dans une mme cellule, de molcu
les d'ADN mt de structures diffren
tes avec rptition ou dltion de cer
taines squences. Une htroplasmie
constitutionnelle a t mise en vi
dence chez le lapin et dans certaines
souches de drosophile [6) .
Nous devons maintenant tudier les
modifications de l 'ADNmt observes
dans le cancer et essayer de voir dans
quelle mesure celles-ci peuvent tre
impliques dans le processus
cancreux.
L 'ADN mitochondrial
est la cible privilgie
des cancrognes
chimiques qui provoquent
des mutations dans cet
ADN

Il n'est pas surprenant que l'ADNmt

soit la cible privilgie des cancro
gnes chimiques et que les lsions
provoques par ces composs soient
persistantes.
L'ADNmt
se rplique indpen
damment de l'ADN nuclaire, tout
au long de la vie cellulaire. Il est
vraisemblable que l 'ADN monocat
naire soit particulirement sensible
aux effets des cancrognes.
L 'ADNmt est combin peu de
protines, alors que l'ADN nuclaire
est protg dans une certaine mesure
par les protines de la chromatine.
Les
systmes de rparation de
l 'ADN dans les mitochondries sont
peu efficaces , si bien que les lsions
provoques par les agents chimiques
peuvent persister au cours des rpli
cations successives dans la mesure o
les molcules lses ont conserv leur
capacit de rplication.
L' association prfrentielle de carcimis n 4 vol.

6, avril 90

nognes chimiques l'ADN mt a t

montre par plusieurs auteurs, utili
sant en gnral des composs mar
qus .
Ainsi , u n driv du
benzo(a)pyrne ajout des cellules
d'embryon de souris se fixe 40
50 fois plus l 'ADNmt qu' l'ADN
nuclaire [ 7 ] , des composs polycycli
ques aromatiques ajouts ces
mmes cellules se fixent 50 500 fois
plus l ' ADNmt qu ' l ' ADN
nuclaire [8) . Lorsque l'on injecte de
la nitrosoure et de la nitrosodi
mthylamine dans le pritoine de
souris, on trouve cinq fois plus de
molcules associes l'ADNmt qu '
l'ADN nuclaire.
On a tudi l'effet mutagne des car
cinognes sur l'ADNmt par une
mthode particulirement intres
sante, utilisant une levure, S. cerevi
siae. Ephrussi avait isol en 1 953 [9)
un mutant de cette levure appel
mutant << petite et avait dmontr
que cette mutation tait en fait une
dltion de l'ADN mt totale ou par
tielle . L'ADN restant ventuel subit
une duplication ou une amplification
telle que la longueur totale de
l'ADNmt reste voisine de la normale .
Ces levures ne sont plus capables
d'utiliser l 'oxygne et ne peuvent
survivre que par la glycolyse anaro
bie. Wilkie et al. [ 1 0) ont montr que
sur 1 8 agents cancrognes tudis,
1 5 augmentaient significativement la
frquence des mutations << petites >>.
Des composs de structure voisine
mais non cancrognes n'ont en
revanche aucun effet mutagne de ce
type sur la levure.
Il semble donc clairement tabli que
les carcinognes chimiques, qui sont
l'origine d'un grand nombre de can
cers humains, peuvent se lier
l'ADNmt et provoquer des mutations.
On ne peut cependant affirmer actuel
lement que l'ADNmt est modifi dans
toutes les cellules cancreuses.
Par ailleurs, les mitochondries sont
galement les cibles d'agents antitu
moraux qui se fixent l'ADNmt. Il
en rsulte un arrt de la rplication
et la dgradation de cet ADN. Ainsi
le dqualinium, par ce mcanisme,
inhibe la croissance du carcinome du
clon [ 1 1 ) . Le ditercalinium, un
agent bis intercal ant , limine
l 'ADNmt de cellules leucmiques de
souris en culture [ 1 2 ) . La daunomy
cine , agent antileucmique , agit sp-

cifiquement en inhibant la transcrip

tion de l'ADNmt [ 1 3 ) .

L 'A DN mitochondrial
est modifi
dans les cellules
cancreuses

En 1 967 , Clayton et Vinograd [ 1 4 )

montrent l'existence dans les leucocy
tes de patients atteints de leucmie
chronique de formes inhabituelles
d'ADNmt : dimres de 10 p,m de
longueur (longueur normale : 5 p,m),
formant un cercle ferm, structures
formes de deux ou trois monomres
circulaires combins entre eux. Les
diffrences ne portent pas unique
ment sur la taille mais galement sur
la structure de 1 'ADN. Ainsi, dans
12 leucmies sur 1 4 cas tudis, on
observe des diffrences de taille des
fragments obtenus aprs digestion par
des enzymes de restriction , ces diff
rences sont du mme type dans tous
les cas, ce qui suggre qu 'elles
seraient associes au processus leuc
mique [ 1 5 ) . Des mutations ont t
mises en vidence dans les gnes
mitochondriaux codant pour quatre
ARN de transfert dans les hpatomes
de rat [ 1 6 , 1 7 ) .
Notre groupe (C nrs U A 1 1 47), en
collaboration avec l ' quipe de
C. Guguen-Guillouzo (Inserm U . 49 ,
Rennes), a t amen mettre en
vidence d' autres types de modifica
tions de l'ADN mitochondrial. Les
recherches ont port sur un hpatome
de rat induit par la dithylnitrosa
mine (DENA), un agent alkylant,
administr trois jours de suite aprs
une hpatectomie partielle . Des
nodules cancreux bien caractriss
sont obtenus partir du foie de 1 0
1 5 mois aprs administration du
cancrogne. Nous avons galement
tudi un hpatome en culture, les
cellules HTC qui ont t inities en
1 966 par Tomkins partir d ' un
hpatome de rat d'origine chimique.
Nos travaux nous ont permis de faire
les observations suivantes.
Le niveau des ARN messagers
d'origine mitochondriale est envi
ron 20 fois plus lev dans les
hpatomes que dans les hpatocy
tes normaux [ 1 8) . Cette augmenta
tion porte en particulier sur les trans
crits des gnes N D 1 , ND5 , ND6 ,
COI et C yt b (figure 2), alors que la

361

Brin lourd H

RFRENCES

Brin lger L

-------

ND4

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i : 697-8.
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tomas. Exp Cel/ Res 1 989 ; 184 : 1 58-66.
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ture of a eDNA clone specifie to hepatoma
cells w i t h rearranged m i tochondrial
sequence. Nuc/eic Acids Res 1 988 ; 1 6 :
1 0935.

362

22. Corral M , Kitzis A, Baffet G , et al.

RNAs containing mitochondrial ND6 and
COI sequences present an abnormal struc
ture in chemically induced hepatomas.
Nucleic Acids Res 1 989 ; 1 7 : 5 1 9 1 -206.

Figure 2 . Gnome mitochondrial des mammifres. Le gnome comprend

un ADN double brin circulaire d'en viron 1 6, 5 kb. Nous n 'avons indiqu que
les gnes dont il est question dans l'article. Tous les polypeptides cods sont
des sous-units d 'enzymes de la chaine respiratoire qui sont localises dans
la membrane interne de la mitochondrie. Tous sont cods par la chaine lourde,
H, l'exception de ND6 qui est cod par la chaine lgre, L. La rplication
de la chaine lourde a pour origine une rgion appele Ow situe dans un seg
ment appel boucle D, qui comprend galement les promoteurs de la trans
cription des deux brins. La rplication de la chaine lgre a pour origine la
rgion 0 . ND 1 6 : sous-units 1 6 de la NADH desh ydrognase ; CO/
Ill : so bs-units 1 Ill de la cytochrome oxydase. La plus grande partie des
constituants enzymatiques est code par l'ADN nuclaire, synthtise sur les
ribosomes cytoplasmiques et importe dans les mitochondries.

concentration globale des ARN cel

lulaires n'est pas significativement
modifie [ 19 ] . Cette augmentation
apparat ds le 3< mois qui suit le
traitement par le carcinogne, long
temps avant l' apparition des nodules
cancreux, et elle se maintient au
del du 1 5< mois. Il est donc peu
vraisemblable qu'elle rsulte des
modifications ultrastructurales impor
tantes conscutives la cancrisation.
Ces diffrents ARN sont synthtiss
partir de la chane lourde (
l 'exception du transcrit de ND6) et
possdent des dures de vie diffren
tes. L ' lvation coordonne du
niveau de ces ARN suggre des
modifications du niveau des transcrits
primaires et un effet en trans de pro
duits de gnes nuclaires sur le taux
de transcription mitochondrial.

Glaichenhaus et al. [20] ont observ

dans des fibroblastes de souris trans
fects par E l A de SV40, par l'anti
gne T de polyome ou par l'onco
gne c-myc, une augmentation de la
concentration des transcrits COI,
ND2 , ND3, ND4, COll et
ARN 1 6S .
I l existe dans les tumeurs hpati
ques des molcules d 'ADNmt pos
sdant une structure diffrente de
celle observe dans les hpatocytes
normaux. Ainsi l' analyse d'une ban
que d'ADN complmentaire d 'hpa
tome nous a permis de mettre en vi
dence un clone de 580 bp prsentant
d'un ct une forte homologie avec
1 'extrmit N terminale du gne ND6
et de l 'autre ct une forte homolo
gie avec l'extrmit N terminale du
gne COI. Ces deux squences ne
mis n 4 vol. 6, avril 90

sont spares que par 230 bp au lieu

de 9 kb dans le gnome mitochon
drial normal (figure 2) [2 1 ] .
Des expriences de protection contre
la digestion par la nuclase S 1 ,
nuclase qui n'attaque que l ' ADN
simple brin, montrent qu ' il existe
dans les tumeurs, mais non dans les
hpatocytes normaux, des transcrits
possdant une structure homologue
celle du clone isol [22 ] . Cette obser
vation pose le problme d'un gnome
de structure au moins partiellement
modifie dans la mitochondrie des
tumeurs. La rponse dfinitive
cette question ne pourra tre appor
te que par le squenage de la
rgion intresse de l'ADN mt. Une
rponse partielle a pu tre nanmoins
apporte par l'isolement, partir
d ' une tumeur, d ' un fragment
d 'ADNmt de 3 kb reconnu par les
sondes ND6 et COI, mais non par
la sonde ND4, alors que ND4 est
normalement localis entre ND6 et
COI . On peut noter par ailleurs que
cette rgion de l 'ADNmt correspond
aux rgions modifies dans la plupart
des myopathies mitochondriales [ 1 ,
2] .
Il existe une htroplasmie de
l'ADN mt dans les cellules tumora
les. La figure 3 montre les produits de
digestion par l'enzyme de restriction
Bgl II d'ADNmt d'hpatomes et
d'hpatocytes normaux. On observe
des bandes supplmentaires avec
l'ADNmt de tumeur. La somme des
tailles des bandes dans ce cas est
suprieure la taille du gnome
mitochondrial normal . Des observa
tions analogues ont t faites avec les
ADNmt provenant de tumeurs d'ani
maux diffrents et en utilisant
d'autres enzymes de restriction. Le
seul polymorphisme ne peut rendre
compte de ces observations, car
l'ADN mt provenant d'un tissu nor
mal des mmes animaux ne prsente
pas ces bandes supplmentaires.
Il semble donc que, dans ces tumeurs
comme dans les myopathies d'origine
mitochondriale , l'htroplasmie mito
chondriale soit la rgle, sans que l'on
puisse, l'heure actuelle, prciser le
niveau de cette htroplasmie, tissu
laire ou cellulaire.
On peut penser que la coexistence de
molcules d'ADNmt normales et
modifies permet d'assurer la survie
cellulaire. Le problme est pos du
mis n 4 vol. 6, avril 90

NL

Kb

1 4,5

Tl

T2

Kb

__...

2,2
1 ,8

___..

1 ,8

0,96
0,86
0,7

Figure 3. Comparaison de I 'ADNmt d 'hpatocytes normaux et de la

tumeur hpatique. L 'ADNmt a t isol d 'hpatocytes de rats normaux (NL)

et de deux hpa tomes ( T 1 , T2) et trait par un enzyme de restriction, Bg/11.

Dans les hpatocytes normaux, il se libre deux fragments de 1 4, 5 et 1, 8 kb
respectivement. Dans les hpatomes, il se libre au moins quatre fragments
supplmentaires. Ce rsultat suggre une htroplasmie de I'ADNmt dans les
hpa tomes.

363

rle des molcules d'ADNmt modi

fies dans la carcinogense.
Des squences
homologues
des squences
mitochondriales
sont prsentes
dans le noyau cellulaire

RFRENCES

-------

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364

L'existence, dans le noyau cellulaire,

de squences d'ADN homologues
des squences mitochondriales a
d'abord t mise en vidence chez les
eucaryotes infrieurs. Chez Podospora,
on a mis en vidence une amplifica
tion de squences mitochondriales
suivie d'une migration de ces squen
ces dans le noyau, ceci a cependant
t contest. Chez l'oursin de mer et
dans la levure, on a galement mis
en vidence des squences mitochon
driales dans le noyau, en particulier
un gne mitochondrial de levure
codant pour une protine riboso
male [23 ] . De telles squences ont t
trouves mme chez des mutants
ayant perdu l'ADNmt.
Il est maintenant admis qu'il y aurait
passage de fragments d'ADNmt dans
le noyau, peut-tre par l 'interm
diaire d' ARN qui ont subi une trans
cription inverse. Le mme phno
mne existe chez les vgtaux, un
fragment d'ADNmt a t mis en vi
dence, dans le noyau de variants de
mas prsentant le phnotype stri
lit mle cytoplasmique
Cepen
dant, les travaux les plus intressants
pour nous ont port sur le rat et
l 'homme. Ainsi, on a mis en vi
dence chez le rat, dans le noyau cel
lulaire , une squence de 3 kb
d'ADNmt comprenant en particulier
la boucle D et une partie des gnes
codant pour les ARN riboso
maux [24] . Notre groupe a mis en
vidence, dans le noyau de cellules
de foie, de rein et de cerveau de rat,
des squences homologues aux gnes
mitochondriaux COI, COll , COlii
et ND6 [25] . Chez l'homme, on a
trouv dans le noyau des squences
mitochondriales , en particulier les
gnes ND4 et ND5 . L 'analyse des
rgions de l'ADN nuclaire entourant
ces gnes ne rvle pas d'homologie
avec les rgions quivalentes du
gnome mitochondrial. Fait remar
quable, il y eut peu de mutations
dans ces squences nuclaires qui
"

semblent avoir conserv la structure

d'un ADNmt ancestral. Bien que le
transfert de matriel gntique des
organelles vers le noyau soit un v
nement rare, on peut considrer que
des fragments d'ADNmt ont t int
grs de manire continue dans
l 'ADN nuclaire au cours de 1' vo
lution [26] . La signification et le rle
ventuels de ces squences nuclaires
sont inconnus. Ce sont trs vraisem
blablement des pseudognes, essen
tiellement pour deux raisons. D 'une
part du fait de la diffrence de signi
fication de certains codons, en parti
culier des codons stop, d 'autre part
du fait que les squences prsentes
dans le noyau peuvent ne pas conte
nir des gnes entiers. Enfin, il est
peu probable qu'il existe des squen
ces promotrices pour ces gnes. Ces
squences pourraient intervenir par
leurs produits d'expression ou par
leur action sur les gnes voisins. On
peut imaginer qu'elles moduleraient
l'expression de gnes codant pour des
sous-units d'enzymes de la mem
brane interne des mitochondries .
Dans les hpatomes induits par la
DENA, nous avons montr [25] que
les copies des gnes mitochondriaux
COI, COl l , COIII et ND6 taient
prsentes dans le noyau, ce que nous
avions dj observ dans les tissus
normaux, mais galement que le
nombre de copies tait suprieur
dans les tumeurs et que leur organi
sation tait diffrente de celle obser
ve dans les tissus normaux. Il est
remarquable que ces diffrences aient
galement t retrouves dans le tissu
hpatique morphologiquement nor
mal de rats prsentant des nodules
cancreux. Deux hypothses pour
raient rendre compte de ces diffren
ces : (1) sous la pression des carci
nognes, il y a migration dans le
noyau de squences mitochondriales
modifies ou non ; (2) le carcinogne
ragit avec l'ADN nuclaire comme
avec l 'ADNmt et modifie la structure
de certaines squences.
Des squences diffrentes, telles que
nous les avons observes dans les
hpatomes [25] , pourraient dans cer
tains cas rsulter de l 'action des ions
superoxydes et hydroxyles sur l'ADN
et sur les membranes mitochondria
les [ 2 7-29] et jouer un rle , par
exemple en activant des oncognes
ou en drglant l 'expression de gnes

mis n 4 vol. 6, avril 90

impliqus dans la prolifration cellu

laire . Ceci reste cependant, l'heure
actuelle , entirement hypothtique .
Les modifications
de /'ADNmt
sont-elles associes
une diminution
de la respiration
cellulaire ?

Une diminution de la capacit respi

ratoire des cellules cancreuses a t
mise en vidence par 0. W ar
burg (30]. Cette observation a t
confirme par un certain nombre de
laboratoires, conteste par d' autres,
si bien que la question reste ouverte.
On peut penser que les importantes
anomalies observes dans l'ADN mt
doivent se traduire par une diminu
tion de la synthse d'un certain nom
bre d'enzymes respiratoires. Il ne faut
pas oublier cependant que dans beau
coup de cas, les modifications ne por
tent que sur une partie des gnomes
mitochondriaux et que des molcules
normales d'ADN pourraient subsister
de sorte que les mitochondries struc
ture normale pourraient suffire assu
rer un fonctionnement normal de la
chane de transfert d'lectrons.
Nous avons, en collaboration avec le
professeur P. Vignais, de Grenoble ,
tudi la capacit respiratoire des
mitochondries des tumeurs hpati
ques par des mthodes spectrophoto
mtriques et des mesures enzymati
ques. Nous avons observ une dimi
nution importante des activits des
complexes I, II, III et IV. Nous pen
sons donc que les hpatomes induits
par la DENA ont une activit respi
ratoire fortement diminue. Dans
1 'tat actuel de nos connaissances,
ceci ne peut tre gnralis
l 'ensemble des cancers .

Les modifications
du gnome mitochondrial
jouent-elles un rle
dans la carcinogense ?

Des modifications de l ' ADN mt

entranant un dysfonctionnement des
mitochondries peuvent-elles tre la
cause ou seulement la consquence
des profonds bouleversements dus au
processus de cancrisation ? Plusieurs
arguments feraient plutt penser un
mis n 1 vol. 6, avril 90

rle actif dans la carcinogense : le

fait que les carcinognes chimiques se
lient prfrentiellement l'ADNmt et
provoquent des mutations, la relative
prcocit des modifications molculai
res mitochondriales qui prcdent les
modifications ultrastructurales. Il ne
s'agit cependant que de prsomption.
Nous allons passer en revue quel
ques-unes des thories qui ont t
avances pour tenter d' associer carci
nogense et altration du gnome
mitochondrial. Une question prala
ble se pose : les modifications de
l 'ADN mt subsistent-elles aprs un
certain nombre de rplications ? On
sait que les systmes de rparation de
1 'ADN mt sont peu efficaces si bien
que les modifications provoques par
les carcinognes ne sont pas corriges
efficacement. L'tude des maladies
mitochondriales a montr qu'il y avait
en gnral htroplasmie. Cette ht
roplasmie existe-t-elle dans une mme
cellule et se maintient-elle au cours
des divisions cellulaires ? La rponse
est complexe, en effet, l'tude des cul
tures cellulaires clones a montr qu'il
pourrait y avoir la fois sgrgation
et maintien de l 'htroplasmie. L'uti
lisation des hybrides cellulaires et des
cybrides a montr, dans certains cas,
une limination progressive de l'ADN
mut [3 1 ] et, dans d' autres cas , une
rpartition sensiblement stochastique
avec persistance des deux types
d'ADN mt au cours des divisions cel
lulaires successives ( 3 2 ] . Il n'est pas
exclu que, dans certains cas, la pro
portion des molcules mutes aug
mente avec les divisions cellulaires,
pour peu que les origines de rplica
tion soient conserves. En fait, les
thories proposes actuellement pour
impliquer les mitochondries dans la
carcinogense ont peu de supports
exprimentaux, mais certaines pour
raient servir de point de dpart pour
des thories plus labores .
Plusieurs hypothses
ont t proposes
pour expliquer
le rle ventuel
des mitochondries
dans la carcinogense

Rle des dficiences respiratoires et

des agents oxydants. Nous avons vu
que Warburg avait mis l'hypothse
que la dficience respiratoire qu 'il

avait observe dans la cellule canc

reuse pouvait jouer un rle fonda
mental dans la carcinogense . Cette
dficience respiratoire a t retrouve
par d ' autres auteurs dont nous
mmes, mais conteste par certains.
Il est difficile de comprendre , dans
nos conceptions actuelles , comment
cette dficience pourrait provoquer le
phnomne tumoral ; on penserait
plutt qu 'elle rsulterait des modifi
cations de l 'ADNmt ou du fait que
la tumeur serait moins bien irrigue
par le sang circulant.
On a montr ( 2 7 , 28] que de nom
breux carcinognes chimiques, en
particulier les promoteurs de
tumeurs, provoquaient la formation
d'ions superoxydes et de radicaux
hydroxyles qui sont de puissants oxy
dants. De plus, une enzyme , la su
peroxyde dismutase, qui dtruit les
ions superoxydes, a une activit
diminue dans les cellules cancreu
ses (comme d' ailleurs au cours de la
snescence, priode de la vie pendant
laquelle l'incidence du cancer est le
ve). On a par ailleurs montr que
les radicaux fortement oxydants favo
risaient la carcinogense (29] . Or, les
radicaux et ions oxydants provoquent
des mutations et des cassures de
l' ADN. Il n'est donc pas exclu, quel
que soit le mcanisme impliqu, que
la baisse de l ' activit superoxyde dis
mutase puisse intervenir dans la for
mation de tumeurs.
Effet des mutations de l'ADNmt
sur la structure des membranes
plasmiques. On sait que les cellules
cancreuses prsentent des diffrences
de structure de la membrane plasmi
que, diffrences qui peuvent, au
moins en partie, tre responsables de
la perte de contrle de la croissance
cellulaire, des caractristiques d'adh
sion de la cellule cancreuse et des
relations intercellulaires.
Deux types d' expriences semblent
impliquer l'ADN mt dans le contrle
de la formation de la membrane plas
mique. Les mutants petites de levure,
qui prsentent une dltion de
l 'ADNmt, ont perdu en partie la
capacit de concentrer certains sucres
dans la cellule, cette incapacit est
leve si 1 'on rtablit la permabilit
cellulaire . C e s rn u tations de
l 'ADNmt pourraient donc provoquer
des altrations de la membrane plas
mique ( 1 0, 3 3 ) : C hez la souris, un

365

antigne de surface Mta est transmis

par hrdit maternelle. L 'utilisation
de la mthode d'hybridation cellu
laire et celle d'un colorant spcifique
de la mitochondrie, la rhodamine, a
permis de montrer que la synthse de
cet antigne ncessitait la prsence de
mitochondries normales fonctionnel
les [34] . On ne comprend pas bien le
mcanisme d 'intervention des mito
chondries dans la synthse d' antig
nes de surface cellulaire. On a mis
l'hypothse [ 1 0 , 33] que des secteurs
de la membrane mitochondriale con
trleraient 1' expression de certains
gnes nuclaires, en particlier de
gnes codant pour des protines de
la membrane plasmique . Des diff
rences de structure de la membrane
mitochondriale rsultant de change
ments de structure de l ' ADN mt
modifieraient aussi l'expression de ces
gnes nuclaires.
Rle des squences d'ADNmt incor
por dans l'ADN nuclaire. On
ignore actuellement le rle que les
squences nuclaires homologues aux
squences mitochondriales pourraient
jouer dans la cellule normale. O n
peut mettre l'hypothse que des
modifications de structure de ces
squences telles que nous les avons
observes dans les hpatomes pour
raient jouer un rle dans la carcino
gense soit en agissant sur les gnes
codant pour les sous-units d' enzy
mes mitochondriales, soit en modi-

fiant l'expression de gnes nuclaires

contrlant la prolifration cellulaire.
Action des facteurs commands par
l'ADN nuclaire sur l'expression de
gnes mitochondriaux. L 'hypothse
selon laquelle la carcinogense rsul
terait de perturbations de l'expression
du gnome mitochondrial ne permet
pas d'exclure la participation du
gnome nuclaire. On sait que la
rplication de l 'ADNmt et sa trans
cription sont sous le contrle de pro
tines codes par l'ADN nuclaire. Il
en est de mme des facteurs de rgu
lation intervenant dans ces processus.
Des mutations portant sur l'ADN
nuclaire peuvent avoir pour cons
quence la synthse de facteurs de
rgulation modifis qui altreraient
l ' expression de gnes mitochon
driaux.
De nombreuses observations permet
tent de penser que le gnome mito
chondrial est impliqu dans la carci
nogense sans que l'on puisse,
l'heure actuelle, valuer l 'importance
de cette implication, et encore moins
son mcanisme. Il est nanmoins trs
vraisemblable que les mitochondries
jouent un rle dans le cancer, surtout
le cancer d'origine chimique, et les
thories du cancer ne peuvent ngli
ger ce fait l'heure actuelle.
Ainsi, on peut tendre la cancro
logie le chapitre en plein dveloppe
ment du rle des mitochondries en
pathologie humaine

Summary
Is th e mitochondrial genome
i n volved in ca rcinog e nes i s ?
Severa! observations favor the idea
that alterations of the mitochon
drial genome could be involved in
carcinogenesis : (a) mtDNA is a
preferential target for chemical
carcinogcns which induce muta
tions, (b) in leukemia white blood
cells mtDNA presents an abnor
mal length and an abnormal res
triction pattern, severa! mutations
have been characterized ; ( c) we
have observed in chemically indu
ced rat hepatomas severa! altera
tions : a very high leve! of mito
chondrial transcripts, the presence
of mRNAs with a modified struc
ture, an altered restriction pattern
of mtDNA, which in addition sug
gests a mitochondrial hetero
plasmy, a modified structure of
the mtDNA sequences present in
cell nuclei, a strong decrease in
the activity of severa! respiratory
complexes. Severa] hypotheses
have been proposed to explain the
possible role of the mitochondrial
alteration in carcinogenesis.

TIRS PART

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J . Kruh.

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mis n 4 vol. 6, avril 90