FACULTAD DE

CIENCIAS NATURALES Y MATEMTICA

ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGA

ASIGNATURA: LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAR

DOCENTE: ERICK MERCADO

TRABAJO: ESTUDIO DE LAS BACTERIAS
AO: 2
INTEGRANTES:
BERIOSKA ROSAS CATOLN
MELGARJO ESPINOZA YESENIA SINTIA
MORCOLLA YUTO ALEX

2015

INTRODUCCIN

La tincin de Gram es uno de los mtodos de tincin ms importantes en el laboratorio bacteriolgico

y con el que el estudiante debe estar perfectamente familiarizado. Su utilidad prctica es indiscutible y en el
trabajo microscpico de rutina del Laboratorio de Microbiologa las referencias a la morfologa celular
bacteriana (cocos, bacilos, positivos, negativos, etc.) se basan justamente en la tincin de GRAM Esta tincin
se denominada as por el bacterilogo dans Christian Gram, quien la desarroll en 1844. Sobre la
base de su reaccin a la tincin de Gram, las bacterias pueden dividirse en dos grupos, Gram
positivas y Gram negativas (en este caso, los trminos positivo y negativo no tiene nada que ver con carga
elctrico, sino simplemente designan dos grupos morfolgicos distintos de bacterias).Las bacterias Gram-positivas
y Gram-negativas tien de forma distinta debido a las diferencias constitutivas en la estructura de sus paredes celulares.
La pared de la clula bacteriana sirve para dar su tamao y forma al organismo as como para prevenir la
lisis osmtica. El material de la pared celular bacteriana que confiere rigidez es el peptidoglucano. La pared de la clula
Gram-positiva es gruesa y consiste en varias capas interconectadas de peptidoglucano as como algo de cido teicoico.
Generalmente, 80%-90% de la pared de la clula Gram-positiva es peptidoglucano. La pared de la clula
Gram-negativa, por otro lado, contiene una capa mucho ms delgada, nicamente de peptidoglucano y est
rodeada por una membrana exterior compuesta de fosfolpidos, lipopolisacridos, y lipoprotenas.
Slo10% - 20% de la pared de la clula Gram-negativa es peptidoglucano. Debido a su importancia en taxonoma
bacteriana y a que indica diferencias fundamentales de la pared celular de las distintas bacterias,
describiremos aqu con algn detalle la tincin de Gram y las interpretaciones que actualmente se hacen sobre
el porqu de su funcionamiento.

MARCO TERICO
Bacterias:
Las bacterias son organismos unicelulares microscpicos, sin ncleo ni clorofila, que pueden presentarse
desnudas o con una cpsula gelatinosa, aisladas o en grupos y que pueden tener cilios o flagelos. La bacteria
es el ms simple y abundante de los organismos y puede vivir en tierra, agua, materia orgnica o en plantas y
animales.
Tienen una gran importancia en la naturaleza, pues estn presentes en los ciclos naturales del nitrgeno, del
carbono, del fsforo, etc. y pueden transformar sustancias orgnicas en inorgnicas y viceversa.
Son tambin muy importantes en las fermentaciones aprovechadas por la industria y en la produccin de
antibiticos. Desempean un factor importante en la destruccin de plantas y animales muertos.
En efecto, la vida en nuestro planeta no existira sin bacterias, las cuales permiten muchas de las funciones
esenciales de los ecosistemas. Una bacteria de tamao tpico es tan pequea que es completamente invisible a
la vista.
Clasificacin segn su forma:

a) Bacilos: bacterias con forma de barras

Con forma de barras o varillas, los bacilos suelen ser bacterias de tipo Gram positiva o negativa. Los ejemplos
ms populares son los de las bacterias de E.Coli y la salmonella, que comnmente, tambin son las
responsables de males como la intoxicacin por alimentos y la fiebre tifoidea. Dentro de los bacilos tambin
podemos nombrar a dos de las bacterias ms peligrosas que existen: el Bacillus anthracis, que causa la mortal
enfermedad pulmonar del ntrax y el Clostridium, que causa el botulismo, el ttanos y la gangrena.
b)

Cocos: bacterias con forma de esferas

Con su caracterstica forma esfrica, las bacterias conocidas como cocos tienen la capacidad de vivir como
clulas individuales o bien de enlazarse hasta forman cadenas y racimos. El Staphylococcus y el Streptococcus
son los dos tipos de bacterias ms comunes dentro de esta clasificacin y ambas suelen ser Gram positivas.
Igualmente, stas bacterias no suelen tener beneficios, sino que por el contrario, siempre nos resultan
perjudiciales. Pueden causar infecciones en la piel, intoxicacin alimenticia y tambin amigdalitis, entre otras
cosas.
c) Espirilos: bacterias con forma de espirales
Los espirilos, como bien nos indica su nombre, poseen una marcada forma de espiral. stas son bacterias
Gram negativas y terribles para la salud. Un claro ejemplo es la Treponema, que causa la enfermedad de
transmisin sexual de la sfilis.

Coloracin Gram:
La tincin de Gram es uno de los mtodos de tincin ms importantes en el laboratorio bacteriolgico y con el
que el estudiante debe estar perfectamente familiarizado.
Su utilidad prctica es indiscutible y en el trabajo microscpico de rutina del laboratorio de Microbiologa las
referencias a las referencias a la morfologa celular bacteriana (cocos, bacilos, positivos, negativos, etc.) se
basan justamente en la tincin de GRAM.
La Tincin Gram, la cual divide a la mayora de bacterias significante clnicamente en dos grupos principales, es
el primer paso en la identificacin bacteriana.

Bacterias teidas prpuras son Gram + su pared celular tiene capa gruesa de peptidoglicano y cido
teicoico.
Bacteria stained pink are Gram su pared celular tiene capa gruesa de peptidoglicano y
lipopoisacridos sin cido teicocico.

En bacterias Gram positivas, la tincin cristal violeta prpura es atrapado por la capa de peptidoglicano la cual
forma la cubierta exterior de la clula. En bacterias Gram negativas, la membrana externa de lipopolisacridos
evita alcanzar la tincin en la capa de peptidoglicano. La membrana externa es luego permebealizada por el
tratamiento con acetona y el colorante de contraste safranina es atrapado por la capa de peptidoglicano.

RESULTADOS
En las muestras siguiente se observara la utilizacin del mtodo Tincin Gram, tomaremos como ejemplo la
siguiente Imagen como referencia.

1.- EN YOGURT:
Al observar al microscopio a un
aumento de 1000x, agregando
a la muestra aceite de
inmersin, se observa cocos
en forma de cadena, el color
observado es violeta; esto nos
indica que es gram positiva.
1000

2.-

SARRO DENTARIO:

Se observ a un aumento de
1000X agregando a la muestra
aceite de inmersin para una
mejora visin, se encontr
bacilos alargados, el color
observado es rosado; esto nos
indica que es de gram negativo

1000

3.-MUESTRA BACTERIANA:

Se observ a un aumento
de 1000X, agregando a la
muestra aceite de
inmersin para una mejora
visin, se identific bacilos,
el color observado es
rosado; esto nos indica que
es de gram negativo.
1000

DISCUSIN DE RESULTADOS

Los compuestos qumicos que contiene los colorantes, nos ayudan a identificar estudios de
gram positiva o negativa, gracias a estos compuestos qumicos nos brindan gran importancia
en el diagnostico y buen tratamiento de la patologa relacionada a microorganismos, es
necesario saber cmo influyen en las manifestaciones clnicas las diferencias existentes entre
la pared celular de las bacterias Gram positivas y Gram negativas en su deteccin y en el
tratamiento.
El colorante cristal de violeta (c.v) forma un compuesto con el lugol, as al baarle con agua a
la muestra no habr cambios, luego de esto al agregarle alcohol nos ayuda a colorear solo las
de gram positiva y por ltimo la safranina que es de coloracin contraste nos ayuda a identificar
las de gram negativa observndose un color violeta. Estas bacterias al agregarle dicha tincin
sufren una toxificacin, debido a esto las bacterias mueren y solo se observan la morfologa de
bacterias distinguiendo las de gram (+) y gram (-).

BIBLIOGRAFA

Biologa y Microbiologa Ambiental practica de laboratorio 1ra edicin, Rosa L. Acevedo

Barrios, Carlos A. Severiche Sierra. Pag 450
Microbiologa e Inmunologa Depart. Qumica Biolgica Facultad de Ciencias Exactas y
Naturales Universidad de Buenos Aires, Gua de trabajos Prcticos 2014. Pag 24
Artculo de revisin Las tinciones bsicas en el laboratorio de microbiologa
www.mediagrafic.org.mx
http://mx.encarta.msn.com/text_761574409__1/Bacteria.html
http://mx.encarta.msn.com/encyclopedia_761574409/Bacteria.html
Brock Biologa de los microorganismos Madigan, Michael T. Octava edicin revisada,1949,
pag. 870
http://www.medynet.com/elmedico/aula/tema11/freuma2.htm
Gua de trabajos prcticos Microbiologa e inmunologa, segundo semestre 2002, PUC

ANEXO
Tincin gram para muestra de placa Petri:
Extensin: En un porta bien limpio (con alcohol, papel de filtro y flameado) se coloca una gota
de agua destilada con un asa de siembra, previamente esterilizada a la llama, se lleva una
pequea cantidad de suspensin de bacterias o, en su caso, de una colonia.
Con el asa se extiende la gota y las bacterias sobre el portaobjetos y se fija la extensin por el
calor, calentando suavemente a la llama del mechero hasta que se seque.

Coloracin:
1 minuto en cristal violeta de Hucker (colorante inicial) se lava con agua destilada, 1 minuto en
lugol (mordiente), se decolora con alcohol de 95 (decolorante), se lava con agua destilada
1 minuto en fucsina bsica (colorante de contraste), se lava con agua corriente. Se seca
suavemente y sin frotar con papel de filtro
Una vez que la preparacin est totalmente seca, poner una gota muy pequea de aceite de
cedro y observar al microscopio con el objetivo de inmersin.