UNIVERSIDAD DE CARABOBO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA DE MEDICINA
DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA

UNIDAD II
ENZIMAS

TEORA DE LAS COLISIONES:

La teora cintica molecular establece
que las molculas de los gases chocan
frecuentemente unas con otras.

Dependencia de la
reaccin con la [R]
Las reacciones qumicas ocurren
como resultado de los choques entre
molculas de los reactivos

V n colisiones
s

Teora De Colisiones
Para que haya una reaccin qumica, las molculas
que chocan deben tener una energa cintica total de
gran magnitud que las conlleve a superar la barrera
energtica que les impida fraccionarse

Energa cintica > ENERGA ACTIVACIN

Estado De Transicin Y Velocidad De La

Reaccin
S

Energa De Activacin:
Mnima cantidad de energa que
deben adquirir las molculas

para alcanzar el estado de

transicin.
Estado de Transicin:
Momento molecular fugaz.

Reordenamiento de cargas,
uniones inestables, etc.

CATALIZADOR

Compuesto

qumico

que REDUCE la energa

de

activacin,

ACELERANDO
velocidad
NOTA: NO tienen efecto alguno
sobre la constante de equilibrio

reaccin.

la

de

la

Los catalizadores reducen la energa de

activacin forzando a las molculas de
reactantes a un estado intermediario que se
parezca al estado de transicin pero de
MENOR ENERGA

Los catalizadores pueden unir

dos molculas de reactantes
en

la

orientacin

adecuada
reactividad.

mutua

aumentando

su

ORGNICO

INORGNICO

Protenas Globulares. Se
desnaturalizan

cidos, bases o metales

estables

Alta especificidad de
sustrato y de reaccin

Baja especificidad

Alta velocidad de
catlisis

Baja velocidad de
Catlisis

Sujetas a Inhibicin

No se inhiben

Son regulables

No son regulables

No se modifican con la
catlisis

Se consumen durante la
catlisis

enzimas
Concepto.
Son

protenas

que

aceleran

la

velocidad de las reaccione biolgicas.

(CATALIZADORES)
CARACTERSTICAS GENERALES.
Mantienen su configuracin una vez
realizada la reaccin.
Pueden ser regulables.
Actan en secuencias organizadas :
Sistemas multienzimticos.

Disminuyen la energa de activacin.

Poseen alta especificidad.
No alteran el equilibrio de la reaccin

enzimas
Sitio activo
Lugar de unin de la enzima al sustrato.
Puede poseen mas de un sitio activo.
Determina la especificidad de la enzima

Modelo de interaccin enzimasustrato

1. Modelo llave cerradura

propuesto por Emil Fisher en 1894.

Rigidez del sitio cataltico; Sustrato se adapta de manera exacta.

Modelo de interaccin enzimasustrato

1. Modelo Ajuste Inducido
Propuesto por Daniel Koshland.
El sustrato induce un cambio conformacional en la enzima y viceversa.
La enzima y el sustrato sufren una distorsin al unirse.

Enzimas.
son molculas que contribuyen con
la actividad cataltica de la enzima

FUNCIONES DE LOS
COFACTORES
Estabilizan la estructura tridimensional de
la enzima.

Facilitan la interaccin E-S.

Participa como segundo sustrato.
Pueden ser de 2 tipos: Orgnicos e

Inorgnicos

Enzimas.
Cofactores Orgnicos
Se denominan

Coenzimas. Son

derivados de las vitaminas. Se

unen de manera covalente a la
enzima.

Apoenzima:

Parte

proteica

de

la

holoenzima

Grupo

Prosttico: molcula

unida

covalentemente a la enzima

Apoenzima

Grupo Prosttico

Holoenzima

Enzimas.
Cofactores Inorgnicos

Suelen ser algunos metales: hierro,

magnesio, manganeso, etc. Se unen de

manera no covalente a la enzima.

Las enzimas que los presentan Se
denominan metaloproteinas.

ENZIMAS. FACTORES FSICOS Y TERMODINMICOS

QUE DESFAVORECEN UNA REACCION:

Variacin de entropa

Capa de solvatacin
Distorsin de los sustratos.
Alineamiento inadecuado de los grupos funcionales.

ENZIMAS. Factores Que Contribuyen A La

Actividad Cataltica:
1. Proximidad, Orientacin Y Tensin Del Sustrato En Relacin Al
Grupo Cataltico:

La tensin generada ayuda a

llevar al complejo ES al estado
de transicin

ORIENTACION
PROXIMIDAD

Desfavorable
Desfavorable

Desfavorable

Favorable

Favorable

Favorable

ENZIMAS. Factores Que Contribuyen A La

Actividad Cataltica:
2. Distorsin Del Enlace Susceptible Del Sustrato Por Ajuste
Inducido De La Enzima.

Enzimas Lticas: Las enzimas unen al

sustrato

en

desfavorable
debilitndolo

una
para
y

conformacin
el

hacindolo

vulnerable a la ruptura.

enlace,
mas

ENZIMAS. Factores Que Contribuyen A La

Actividad Cataltica:
3. Catlisis cido - Bsica:
En las rx qumicas existen 2:
Mecanismo basado en la transferencia

Catlisis cido bsica

de electrones o protones entre dos

especfica:

molculas durante la interaccin E-S, el

cual

propicia

que

se

forme

reactivos.

en

productos

que

protones o hidroxilos del medio

un

intermediario que se descompone ms

fcilmente

catlisis que tan solo utiliza

en

Catlisis cido bsica

general:
Catlisis utiliza los protones o
hidroxilos provenientes de otras
molculas

ENZIMAS. Factores Que Contribuyen A La

Actividad Cataltica:
4. Catlisis Covalente.
Mecanismo de interaccin E-S, que implica la formacin entre ellos de un enlace
covalente transitorio.

Reaccin no enzimtica

A-B

H2O

A+B
Reaccin Enzimtica

A-B + :X

A-X + B

A + :X + B

1)

Efecto

Temperatura

De

La

La Vo se incrementa con el
Temperatura
ptima

aumento de temperatura.

velocidad

Coeficiente de
temperatura o Q10: es el
factor mediante el que se
aumenta la velocidad de un
temperatura

proceso biolgico para un

incremento de temperatura de
10C

2) Efecto Del Ph

pH ptimo
velocidad

El pH afecta el estado inico

del sitio activo. Igualmente
puede conducir a la
pH

desnaturalizacin de la enzima

3) Efecto De La Concentracin De
Enzima [E]

velocidad

La velocidad inicial de una

Reaccin enzimtica siempre es
proporcional a la [E]
Concentracin
[E]

4)

Efecto De La Concentracin De
Sustrato [S]
La

Vo es proporcional a la

concentracin

hasta

llegar

de

(enzima saturada)

sustrato,

una

Vmax

Expresin matemtica de la
hiprbola rectangular:
ECUACIN DE MICHAELISMENTEN

Vo = Vmx[S]
Km + [S]
Nota: esta ecuacin no hace
NINGUNA consideracin sobre

el mecanismo de la Rx
enzimtica

Ecuacin De Michaelis- Menten

Vo = Vmx[S]
Km + [S]

Vmx

Km

Velocidad inicial mxima de la reaccin

catalizada por una enzima y es el valor lmite al
que se aproxima Vo cuando la [S]
Constante de Michaelis. Es igual al valor de [S]
en que Vo = V mx. Se suele asociar con la
AFINIDAD de la enzima por el sustrato. A
menor Km mayor afinidad.

Hiprbola Rectangular
Caracterstica

A [sustrato], muy bajas, la

Rx es de primer orden,
Vo= K[S]
A [sustrato], muy altas, Vo
tiene una Vmx, y la Rx es de
orden cero,
Vo= K

Ecuacin De Michaelis- Menten

[sustrato] < Km, la Vo

depende de la [S]
[sustrato] > Km, la Vo se
hace mxima (Vmx)

[sustrato] = Km, la
Vo = Vmx

Linealizacin de la Ecuacin de Michaelis

- Menten
Ecuacin De Lineweaver-Burk
1 =
Vo

Km . 1 + 1 _
Vmx[S] Vmx

mx

Ecuacin de una lnea recta

Inhibicin Reversible Competitiva:

El inhibidor se une al sitio activo de

la enzima.
Inhibidor molecularmente similar al
sustrato.
Se forma el complejo EI
El

efecto

inhibitorio

aumentando la [sustrato]

se

revierte

Inhibicin Reversible Competitiva:

El valor de Km aumenta pero la Vmx es la misma

Inhibicin Reversible NO Competitiva:

El inhibidor NO se une al
sitio activo de la enzima,

sino a un sitio diferente.

Inhibidor molecularmente

diferente al sustrato.
Se forma el complejo EI y
EIS

Inhibicin Reversible NO Competitiva:

El valor de Km no se modifica, mientras que la Vmax

disminuye.

Inhibicin Ireversible
El inhibidor se combina de forma
covalente con la enzimas y la inactiva.
Se combinan con grupos funcionales del sitio
activo produciendo inactividad.

Iones metales pesados (Pb, Hg)

Yodactamida
Insecticidas

REDUCEN LA ACTIVIDAD
ENZIMTICA

Conjunto de enzimas que actan en secuencia catalizando Reacciones

consecutivas de una ruta metablica

Tipos:
1) Disociados

simples:

Enzimas separadas fsicamente.

2) No disociados o complejos:
Enzimas asociadas fsicamente

3) Asociados a estructuras supramoleculares:

Enzimas no unidas entre s

fsicamente pero localizadas en
la misma estructura ej. Cadena

transportadora de electrones

Caractersticas Generales:

Cada enzima tiene su propio Km y su propia Vmx

La velocidad de cada reaccion viene determinada por la [S] y [E] individual

Existe por lo menos una enzima reguladora o alostrica
Presentan alto grado de organizacin
Los intermediarios deben difundir distancias cortas entre una enzima y otra.
La velocidad de cada secuencia es ajustada minuto a minuto

Regulacin de la actividad enzimtica (a corto

plazo):
enzima

Grupo
Fosfato

sustrato

enzima

1) Disponibilidad De Sustrato.
Interconversin reversible entre sus

Grupo
Fosfato

Fosforilacin y
desfosforilacin de
residuos.

formas activas e inactivas:

a) Fosforilacin y desfosforilacin de
residuos.
b) Metilacin, acetilacin y la
nucleotidilacin

Regulacin de la actividad enzimtica (a corto

plazo):
2) Modificacin Covalente.
Interconversin Irreversible entre sus
formas activas e inactivas:

a) Ruptura proteoltica de
zimogenos o proenzimas

Regulacin de la actividad enzimtica (a corto

plazo):
3) Regulacin Alostrica:
Regulacin producida por efectores
alostricos de PM bajo

ALOSTERISMO. Cambios

conformacionales y funcionales
de la enzima por fijacin de una
molcula en un sitio de la
superficie de la enzima
ENZIMAS ALOSTERICAS. Son

protenas que funcionan a travs de la

unin reversible, no covalente, de
compuestos reguladores denominados
reguladores alostricos.

 Poseen mltiples subunidades y

varios sitios reguladores
Controlan la velocidad de una
ruta metablica

Los moduladores alostricos pueden ser: Activadores o Inhibidores.

Cuando el propio sustrato es un

Cuando

una

modulador,

sustrato

es

ste

se

denomina

modulador HOMOtrpico

molcula
un

diferente

modulador,

del

ste

denomina modulador HETEROtrpico

se

SITIO ALOSTRICO

Propiedades

Mecanismo de
RETROINHIBICIN

Cintica Enzimtica En Reacciones Catalizadas Por Enzimas

Alostricas
Enzimas Homotrpicas

Curva de saturacin sigmoidea

No siguen la relacin
hiperblica de la Ecuacin de
Michaelis-Menten

Pequeos cambios en la
[Modulador] se pueden
asociar a grandes rasgos en la

actividad

Cintica Enzimtica En Reacciones Catalizadas Por Enzimas

Alostricas
Enzimas Heterotrpicas
Es difcil generalizar sobre una
forma caracterstica
Un activador puede hacer que
la curva sea ms prxima a un
hiprbola
Un inhibidor puede producir
una curva de saturacin
sigmoidea

Regulacin de la actividad enzimtica (a Largo

plazo):

1) Control Gentico:

Procesos genticos y moleculares de

Induccin Represin

Enzimas que difieren estructuralmente entre s pero posen la

misma actividad cataltica

Caractersticas Generales:
Son codificadas por genes distintos pero estructuralmente
relacionados.
Tiene valores de pH y punto isoelctrico distintos
Poseen diferencias en la composicin y secuenciacin de
Aminocidos.
Sus valores de Km y Vmx son distintos.

Segn Su Composicin Qumica:

SIMPLES

CONJUGADAS

Por si solas tienen efecto

Requieren de un componente

cataltico

qumico adicional llamado COFACTOR

Segn La Rx Que Catalizan:

1. Oxidorreductasas. Catalizan reacciones de oxido reduccin
de todo tipo

Tipos de oxidoreductsas

1. Oxidasas.

4. Peroxidasas

2. Deshidrogenasas

5. Catalasas

3. Oxigenasas

Oxidorreductasas:
1.- Oxidasas. Transfieren electrones de la molcula donadora al O2

AH2 + O2 A(ox) + H2O

2.- Deshidrogenasas. Transfieren electrones de un sustrato a otro

AH2 + NAD+ A (ox) + NADH + H+

Oxidorreductasas:
3.- Oxigenasas. Catalizan la incorporacin de 2 tomos de oxgeno
a un sustrato libre

A + O2

AO2

4.- Peroxidasas. Reducen los perxidos, usando varios aceptores de

electrones

H2O2 + AH2 2H2O + A

Oxidorreductasas:
5.- Catalasas: Utilizan el perxido de hidrgeno como donador y aceptor
de electrones
H2O2 + H2O2 2H2O + O2

2.- Transferasas. Catalizan la transferencia de un grupo de

tomos intacto de una molcula donadora a un aceptor

Transaldolasas
Transcetolasas
Aciltransferasas
Metiltransferasas
Fosfomutasas
Kinasas

Aminotransferasas

3.- Hidrolasas: Catalizan el rompimiento hidroltico de enlaces

mediante la adicin de agua

Esterasas

Desaminasas: Catalizan la desaminacin de un

Glucosidasas

sustrato con la participacin del agua

Fosfatasas
Thiolasas
Fosfolipasas

=O

Peptidasas

H2N C NH2 + H2O 2NH3 + CO2

Urea
Ureasa

4.- Liasas: Catalizan reacciones en las que se eliminan grupos

para formar un doble enlace o se aaden a un doble enlace

Descarboxilasas.
Aldolasas
cetolasas
Hidratasa

Deshidratasas: Catalizan la
deshidratacin de un sustrato

5.- Isomerasas: Catalizan varios tipos de reordenamientos

intramoleculares

Epimerasas o racemasas: Catalizan

cambios de localizacin de grupos

alrededor de un carbono asimtrico

Mutasas: Catalizan transferencias
intramoleculares de grupos
2- fosfoglicerato 3-fosfoglicerato

6.- Ligasas. Catalizan la formacin de un enlace entre dos

molculas de sustrato

Sintetasas

Carboxilasas:

Catalizan la sntesis de un
compuesto a partir de la condensacin de un sustrato
con CO2

+ ATP + CO2

Citrato

+ ADP + Pi

Oxaloacetato