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INFORMES

DE
PRCTICA

UNACH
TCNICAS HISTOLGICAS

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO


FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE LABORATORIO CLNICO E HISTOPATOLGICO
CTEDRA DE TCNICAS HISTOLGICAS
INFORME N 01
RECONOCIMIENTO DE LAS REAS DEL LABORATORIO DE
ANATOMA PATOLGICA
DOCENTE:
UNACH
TCNICAS HISTOLGICAS

LCDO. IVN PEAFIEL


GRUPO N 01
TERCER SEMESTRE
PERODO ACADMICO:
OCTUBRE DEL 2015-FEBRERO 2016

APELLIDOS Y NOMBRES DEL ESTUDIANTE: Machado Yanza Carolina


Monserrath
FECHA DE LA PRCTICA: 28 de Octubre del 2015
FECHA DE ENTREGA: 04 de Noviembre del 2015

INTRODUCCIN

El laboratorio de anatoma patolgica representa un eslabn indispensable en la cadena


de trabajo para la prevencin y control del cncer crvico-uterino, pues al realizar el
estudio de las piezas quirrgicas provenientes de las Clnicas de Colposcopa, Servicios
y Centros Oncolgicos y emitir el diagnstico definitivo de forma precisa y oportuna,
puede favorecer o hasta obstaculizar la toma de decisiones correctas y oportunas por los
especialistas, para el manejo y seguimiento de las pacientes; adems de proporcionar la
informacin para el registro de neoplasias, as como tambin la informacin
epidemiolgica para la evaluacin del programa y para la elaboracin de ndices de
Salud Pblica, datos de correlacin con pronstico, sobrevida e ndices de
morbimortalidad. Informacin de gran trascendencia para poder evaluar y reformar las
polticas de salud en nuestra poblacin. El equipo que conforma el personal del
laboratorio de anatoma patolgica es de orden multidisciplinario; sus funciones y
organizacin dependern de la cantidad de trabajo y de la complejidad de los procesos
que se realicen en cada laboratorio en particular, pero cada integrante del equipo deber
contar con los conocimientos necesarios para su puesto especfico y con capacitacin

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especial (conocimientos generales de todos los procesos) en el resto de las reas por
tratarse de un departamento altamente especializado.

OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

Conocer las diferentes reas con las que consta el laboratorio de anatoma
patolgica, para tener un amplio conocimiento de que es la anatoma patolgica
con sus respectivas reas que son tiles para el Tratamiento de Tejidos, esto es
muy necesario para realizar un correcto trabajo dentro del Laboratorio de
Anatoma Patolgica,

OBJETIVOS ESPECFICOS

Recolectar la informacin terica de las cuatro reas que consta el laboratorio de


Anatoma Patolgica, para el momento de reconocer sea ms fcil.
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Reconocer cada rea del Laboratorio de Anatoma Patolgica, para ver el grado
de importancia a cada una de las reas.

Reconocer los diferentes insumos que se encuentra en el Laboratorio de


Anatoma Patolgica, para tener un correcto trabajo en el Laboratorio.

MARCO TERICO

LABORATORIO DE ANATOMA PATOLGICA


Es el rea donde se realizan los procesos macroscpico, qumico, de corte, de tincin,
montaje y tcnicas especiales esto es de acuerdo con la capacidad tcnica de cada
laboratorio. Deber contar con una mesa de trabajo y tomas de agua por cada proceso
que realice el laboratorio (inclusin en parafina, corte, tincin, montaje, histoqumica,
inmune histoqumica, descripcin macroscpica, etctera). Invariablemente sern
necesarios sistemas especiales para el manejo de los vapores, lquidos, desechos
qumicos y tejido residual producidos durante el procesamiento de las muestras
Ejemplo: extractores de aire, contenedores para residuos biolgico-infecciosos y punzo
cortantes, contenedores para qumicos de desecho, etctera. El equipo necesario no ser
siempre el mismo y depender de la complejidad de los procesos y de la cantidad de
trabajo, entonces puede incluir lo siguiente: procesador automatizado de tejidos, centro
de inclusin, dispensador de parafina si el centro de inclusin no lo tiene, micrtomo,
bao de flotacin, estufa de laboratorio, cubas de tincin, canastillas de tincin, casetes
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desechables o metlicos. Reactivos adecuados para cada proceso xilol, alcohol 96 y


absoluto,
colorantes, parafina histolgica con punto de fusin 58-60 de buena calidad, etctera.

NORMAS DE BIOSEGURIDAD DENTRO DEL LABORATORIO DE ANATOMA


PATOGICA

1. Ingrese siempre al Laboratorio de Anatoma Patolgica con: mandil, guantes,


mascarilla, gorro (Cubre cabello), botas cirugas para prevenir el ingreso o
contaminacin de las muestras provenientes de las diferentes cirugas y anlisis
de tejidos.
2. Cuando se trabaje en el laboratorio siempre la direccin por la que se transcurre
es por la derecha para prevenir accidentes lamentables que pueden afectar el
correcto diagnstico de la muestra.
3. La forma de ponerse los guantes es sobre el mandil, para as evitar accidentes al
momento del transporte de las muestras en el Laboratorio de Anatoma
Patolgica.
4. Al momento de desechar los materiales que se utilice ya sea para barreras de
Bioseguridad o para la realizacin de cortes histolgicos, se deben desechar en
los contenedores que son precisos para cada material usado.

REAS DEL LABORATORIO DE ANATOMA PATOLGICA

La Anatoma Patolgica estudia las alteraciones morfolgicas, tanto macro-micro y


ultramicroscpicas que se producen durante la enfermedad, y se diferencia de la
patologa general que estudia las alteraciones fisiolgicas asociadas a la enfermedad. La
utilidad de la Anatoma Patolgica es a diferentes niveles, como el diagnstico y el
estudio de la patogenia de las lesiones: el conjunto de los procesos que conducen a la
aparicin de las lesiones, por qu se producen y sus consecuencias. Las lesiones pueden
ser ms o menos especficas a enfermedades por tanto ms o menos tiles a la hora del
diagnstico. La Anatoma Patolgica utiliza ciertas herramientas, como el examen de
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necropsia, biopsia y la citologa. En fin el Laboratorio de Anatoma Patolgica consta de


cuatro reas las cuales son:

1.
2.
3.
4.

rea de Macroscopa
rea de Procesamiento de Tejidos
rea de Inclusin de Tejidos
rea de Microscopa

REA DE MACROSCOPA
En esta rea es el paso ms importante al llevar a cabo las tcnicas de preparacin de
muestras histolgicas. No importa el cuidado con el que procese y seccione las muestras
de tejido, los detalles morfolgicos esenciales solo se mostrarn si el tejido se fija de
manera adecuada y rpido. En esta rea se determina las caractersticas de los rganos,
el lavado de los diferentes rganos que llegan al Laboratorio de Anatoma Patolgica ya
que estos llegan al laboratorio con sustancias qumicas tales como el formol o fijador,
estas sustancias sirven para la conservacin de los diferentes rganos que sirvieran para
el correcto diagnstico de los mismos. Para esto se utiliza una tabla con corcho para
realizar los cortes histolgicos con bistur, que son propios del rea macroscpica, por
ejemplo si llega el corazn se lo mide, se lo pesa, se determina el color y los aspectos de
una alguna patologa que se puede ver a simple vista.

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REA DE PROCESAMIENTO DE TEJIDO


Los cuatro pasos del procesamiento de tejidos (deshidratacin, aclaramiento e
infiltracin) son pasos secuenciales designados para remover toda el agua que se puede
extraer de los mismos y reemplazarla con un medio que se solidifique. Todo este
proceso demora aproximadamente 12 horas exactamente.

1. FIJACIN Todos los tejidos, bien cuando se extraen de un organismo o bien


cuando el organismo en el que estn muere, sufren dos tipos de procesos
degradativos: autolisis por accin de enzimas intracelulares, es decir, auto
digestin, y putrefaccin por accin bacteriana. Adems, el procesamiento
histolgico posterior del tejido para poner de manifiesto y observar determinadas
estructuras supone una metodologa que puede degradar las estructuras
tisulares. Fijar un tejido es preservar sus caractersticas morfolgicas y
moleculares lo ms parecidas posibles a las que posea en su estado vivo. Es
como hacer una fotografa del tejido vivo y poder observarla, tras cierto
tratamiento, con el microscopio. As, los fijadores deben evitar la autolisis,
proteger frente a ataques bacterianos, insolubilizar elementos solubles que se
quieren estudiar, evitar distorsiones y retracciones tisulares, penetrar y preparar el
tejido para poder llevar a cabo tinciones especficas posteriores, si es necesario,
etctera. No existe un fijador universal, ni un mtodo de fijacin nico. Incluso
podemos usar varios fijadores secuencialmente segn nuestras necesidades. La
eleccin depende de las caractersticas fijadoras que necesitemos. Por ejemplo, si
queremos estudiar actividades enzimticas debemos usar un fijador que no nos
altere el centro activo de las enzimas en las que estamos interesados, y quiz para
ello tengamos que sacrificar en cierta medida la morfologa tisular. Si queremos
estudiar la ultraestructura celular debemos usar fijadores que la preserven y que
protejan a las membranas celulares durante el procesamiento de inclusin en
resinas, y quiz esto altere su apetencia por los colorantes generales. Si queremos
teir un determinado componente celular difcilmente teible quiz debamos usar
un fijador que lo modifique para que sea reconocido ms fcilmente por los
colorantes.

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2. DESHIDRATACIN Es necesario que se quite el agua de las muestras para que


luego se puedan cortar con el micrtomo. La deshidratacin se obtiene con alcohol
etlico de graduacin creciente, comenzando por el alcohol 70, luego tres
alcoholes 96 (para completar las 24hs.). Luego tres alcoholes de 100 (durante
24hs aproximadamente). Recordando que la deshidratacin incompleta perjudica
la inclusin y, en cambio, la permanencia prolongada en alcohol absoluto no altera
las piezas, es preferible emplear el tiempo de permanencia en el bao de
deshidratacin. Los procesadores automticos de tejidos perfeccionan el
procesamiento mediante el uso de calor, vaco, presin, y agitacin, tambin logran
que tengan lugar durante la noche sin la presencia del personal, ste mtodo es el
utilizado en el laboratorio. En esta etapa se utiliza 2 cubas y en algunos caso ms
de tres.

3. ACLARACIN. Terminada la deshidratacin las muestras se hallan embebidas en


alcohol absoluto. La parafina, que debe penetrarlos, es insoluble en el alcohol, de
ah la necesidad de un lquido intermediario que sea miscible al mismo tiempo en
el alcohol 100 y la parafina. Se utiliza para este fin el xilol. Cuando las muestras
se hallan impregnadas en solvente, adquieren una acentuada transparencia,
considerndose a esta como ndice de penetracin. Para este proceso se utiliza 6
vasos.

4. IMPREGNACIN EN PARAFINA Es necesario mantener tres recipientes con


parafina de 58C-60C de punto fusin, en forma lquida. El tiempo total de
procesamiento est estimado en un mnimo de 3-4hs a 24hs, segn el tamao de la
muestra.

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REA DE INCLUSIN DE TEJIDOS


Es el proceso de rodear un tejido con una sustancia firme, tal como la cera, para poder
obtener secciones bien delgadas. La parafina es el medio de inclusin ms comn. A-1
Los centros de inclusin son sistemas multifuncionales que usualmente incluyen un
proveedor de parafina, un tanque para mantener las muestras, una placa de temperatura
tibia para orientar la muestra en parafina derretida y una placa fra para transformar la
parafina derretida en un bloque slido, luego que la muestra haya sido orientada, siendo
este mtodo el utilizado en nuestro Laboratorio.
CENTRO DE INCLUSION. MICROTOMA
La eleccin de las cuchillas para el micrtomo (acero inoxidable o descartable) depende
de la estructura de la muestra. Los cortes ptimos son de 4 a 6 micrones; se depositan
los cortes con su cara brillante hacia abajo sobre un portaobjeto con albmina y agua, se
extiende el corte con un pincel seco y se ayuda con una aguja histolgica. Los cortes
son llevados a una estufa de 37- 47C durante 20 minutos.

DESPARAFINIZACIN
Como la parafina impide la coloracin, corresponde eliminarla, utilizando, para tal fin,
solventes como el xilol. Los cortes estn completamente deshidratados y, como se
emplea un colorante en solucin acuosa, resulta necesaria su hidratacin previamente

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con alcoholes de graduacin decreciente hasta llegar al agua (xilol, alcohol 100, 96,
70 y agua destilada).
HEMATOXILINA-EOSINA
Hay dos mtodos de hematoxolina, de Mayer y de Harris. La cromatina nuclear se tie
con la solucin de hematoxilina, se deja el portaobjeto en la solucin, durante 5
minutos, el corte toma color pardo que luego se vira con agua corriente y cambia al
azul. Existen varios tipos de tincin del citoplasma con eosina, unas solubles en agua y
otras en alcohol, entre las primeras (ms aconsejables) denominadas amarillentas.
Secuencia de tincin:
- Xileno.
- Xileno.
- Alcohol 100.
- Alcohol 100.
- Alcohol 96.
- Alcohol 96.
- Alcohol 80.
- Agua destilada.
- Hematoxilina Mayer.
- Agua corriente.
MEDIOS DE MONTAJE
El paso final en la preparacin de una lmina portaobjetos es el de cubrir la porcin que
contiene el tejido con un cubreobjetos. Esto hace que la lmina sea permanente y
permite el examen microscpico. Para pegar la laminilla hay tres medios de montaje que
se pueden usar: resinas naturales, resinas sintticas usadas en la actualidad y medios
acuosos (estos ltimos se usan en estructuras alteradas por la deshidratacin o de
medios basados en xileno como tinciones para lpidos).

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TCNICAS ESPECIALES.
a) Tejido conectivo: - Coloracin tricrmica de Gomori. - Coloracin tricrmica de
Masson. A-1
b) Hidratos de Carbono. - cido Perydico-Schiff (PASS).
c) Microorganismos. - Mtodo de Ziehl-Neelsen para bacterias cido-alcoholresistente- Giemsa

REA DE MICROSCOPIA
Muestras identificadas y registradas. Bloques para tallar seleccionados. Bloques
procesados para estudios histopatolgicos. Bloques cortados con micrtomo o criostato.
Preparaciones teidas. Muestras para ultramicroscopa procesadas. Resultados e
incidencias registrados. Bloques y preparaciones histolgicas archivados. En esta rea
es la ltima para todo el procesamiento de tejido, esta rea ya es de observacin del
mdico patlogo, para una correcta observacin y determinar un examen preciso para el
posterior es preciso que en las tres reas del tratamiento de tejidos hayan sido correctos
para un correcto tratamiento del paciente.

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BIBLIOGRAFA

http://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/1-proceso.php
http://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/2-fijacion.php
https://icpwiki.wikispaces.com/Laboratorio+de+Anatom%C3%ADa+Patologica
http://www.chospab.es/publicaciones/protocolosEnfermeria/documentos/5cad81
0c4f849a5f3c62e56635f32c01.pdf

CONCLUSIONES:
1. La informacin recolectada gracias a la gua de practica fue de gran utilidad
pues al momento de ir escuchando la explicacin en el Laboratorio, fue de gran
ayuda porque sirvi para tener rpido el reconociendo de cada rea, los
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diferentes equipos que se encuentran en ellas, e insumos que sirven para las
diferentes tcnicas que son para el tratamiento de tejidos.
2. Las reas de laboratorio de Anatoma Patolgica consta de: una rea de
Macroscopa que sirve para determinar las diferentes caractersticas de los
rganos que llegan, rea de procesamiento de tejido, este es de gran ayuda este
proceso dura aproximadamente por 12 horas, rea de inclusin de parafina y el
rea microscopia que sirve para la determinacin de las patologas existentes en
los rganos que llegan al Laboratorio de Anatoma Patolgica.
3. Cada rea tiene su grado de importancia para el procesamiento de tejidos pues
cada rea realiza diferentes funciones que son de realce para el proceso del
Tratamiento de Tejidos.

RECOMENDACIONES
1. Siempre dentro de un laboratorio se debe tomar muy en cuenta las normas de
bioseguridad para cuidar nuestra salud, tanto de los rganos que se receptan en
el laboratorio de anatoma patolgica, y tambin para cuidar la salud del
personal y para reservar el orden institucional.
2. Cuidar cada uno de los equipos y dar su respectiva calibracin, que se
encuentran en el laboratorio de Anatoma patolgica, para as tener un buen
desempeo laboral y evitar errores que pueden producir un mal diagnstico
mdico.

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