UNIVERSIDAD PRIVADA

ANTENOR ORREGO

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

TEMA:

DETERMINACION DE COLESTEROL HDL Y LDL EN SUERO

CURSO: Bioqumica
NOMBRE: Vivar Balczar Adriana Lizbeth
CICLO: II
PROFESOR:
Prof. Cecilia Bardales
TURNO:
Martes 7:00 9:40 am

2015

20

I.

INTRODUCCION
COLESTEROL HDL
Las lipoprotenas plasmticas son partculas esfricas que contienen
cantidades variables de colesterol, triglicridos, fosfolpidos y
protenas. Estas partculas solubilizan y transportan el colesterol en
el torrente sanguneo.
La proporcin relativa de protenas y lpidos determina la densidad de
estas lipoprotenas.
La funcin principal de las lipoprotenas de alta densidad o HDL en el
metabolismo lipdico es la captacin y transporte de colesterol desde
los tejidos perifricos al hgado en un proceso conocido como
transporte reverso de colesterol.
El HDL colesterol bajo, est asociado con un alto riesgo de
enfermedad cardiaca. Por este motivo la determinacin de HDL
colesterol es una herramienta til en la identificacin de individuos de
alto riesgo.
COLESTEROL LDL
El contenido aproximado de colesterol en cada familia de
lipoprotenas es (en % por unidad de peso): 1% en los quilomicrones,
18% en las VLDL, 50% en las LDL y 23% en las HDL. Dado que cada
familia posee distinta actividad biolgica, el significado clnico de un
aumento de colesterol depende de la o las lipoprotenas que se
encuentran en exceso.
Por otra parte, los mecanismos reguladores de los niveles
plasmticos de lipoprotenas son muy complejos y pueden ser
afectados por mltiples factores (genticos, ambientales, fisiolgicos
o patolgicos), siendo posible encontrar valores de colesterol total
cercanos al rango normal acompaados de alteraciones en las
fracciones lipoproteicas.
Las LDL han sido las ms estudiadas por su importante actividad
biolgica:
- las LDL, producto del metabolismo de las VLDL en plasma, son las
encargadas del transporte del colesterol exgeno (y en mucho
menos proporcin, endgeno) hacia el interior de las clulas.
Diversos estudios epidemiolgicos han confirmado que el exceso de
colesterol de LDL con respecto a un valor crtico (1,9 g/l) debe ser
considerado como factor de riesgo para el desarrollo de enfermedad
cardaca coronaria, considerando que el efecto protector de las HDL
slo parece tener relevancia dentro de cierto rango de
concentraciones de colesterol circulante.

II.

III.

OBJETIVOS

Determinar la cantidad de colesterol HDL en suero sanguneo.

Determinar la cantidad de colesterol LDL en suero sanguneo.

MATERIALES
Muestra de sangre
Tubo de ensayo
Reactivos
Cubetas
Micropipetas
Centrfuga
Espectrofotmetro
Reloj

IV.

PROCEDIMIENTO
Colesterol HDL
En un tubo de Khan medimos 0,5 ml (500 ul) de muestra, y
agregamos 50 ul de Reactivo Precipitante. Homogenizamos agitando
durante 20 segundos y dejar 30 40 minutos en refrigerador (4 10
C) o 15 minutos en bao de agua a la misma temperatura. No
colocar en congelador. Centrifugamos 15 minutos a 3000 r.p.m.
Usamos el sobrenadante lmpido como muestra.
En 3 tubos de fotocolormetro marcados B, S y D colocar:
B

Sobrenadante

100 ul

Standard

20 ul

2 ml

2 ml

2 ml

Reactivo de trabajo

Mezclamos e incubamos 5 minutos a 37C si se usa el reactivo de

trabajo de colestat enzimtico AA/liquida o 15 minutos a 37C cuando
se usa el de colestat enzimtico. Retirar del bao y enfriar. Leer a
505 nm en espectrofotmetro en colormetro con filtro verde (490
530 nm), llevamos a cero con el Blanco.

Colesterol LDL
En un tubo de Kahn, colocar:
Muestra: 200 ul
Reactivo A: 100 ul
Homogenizamos agitando durante 20 minutos y dejar 15 minutos en
un bao de agua a 20 25C. Centrifugar 15 minutos a 300 r.p.m.
Separar inmediatamente el sobrenadante.
Usar el sobrenadante como muestra para el ensayo colormetro.
En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido),
colocar:
B

Sobrenadante

100 ul

Standard

20 ul

2 ml

2 ml

2 ml

Reactivo de trabajo

Mezclamos e incubamos 5 minutos a 37C si se usa el reactivo de

trabajo de colestat enzimtico AA/liquida o 15 minutos a 37C cuando
se usa el de colestat enzimtico. Retirar del bao y enfriar. Leer a
505 nm en espectrofotmetro en colormetro con filtro verde (490
530 nm), llevamos a cero con el Blanco.
V.

RESULTADOS
Colesterol HDL

Colesterol LDL

VI.

CALCULOS

VALORES DE REFERENCIA
HDL colesterol: 0,40 0,60 g/l
LDL colesterol:
- Riesgo bajo: <1,29
- Riesgo moderado a elevado: >1,30 y 1,89 g/l
- Riesgo muy elevado > 1,90 g/l
VII.
-

CONCLUSIONES
Si bien el colesterol es esencial para el funcionamiento de nuestro
organismo tambin es necesario que tomemos control y regulemos la
cantidad presente de este lpido.
No se deben descuidar los niveles de colesterol a medida que se avanza
en edad y adems se debe ir poniendo ms atencin.
Seguir dietas saludables y modos de vida que incluya una buena
cantidad de actividades fsicas.

VIII.

BIBLIOGRAFIA

MONTGOMERY, CONWAY, SPECTOR, CHARPEEI. Bioqumica

casos y texto. SEXTA EDICION. HARCOURT BRACE. Madrid

HARPER. Bioqumica ilustrada. 29 EDICION. LANGE EDITORES.

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