TEMA 4

FUNDAMENTOS DE
HISTOLOGA I

Tema4. Fundamentos de Histologa I

HISTOLOGA:
Histos: Tejido

Logos: Estudio

TEJIDO:
Agrupacin de clulas similares para llevar a cabo una funcin especfica.

HERRAMIENTAS DE ESTUDIO

Microscopa
ptica
Electrnica

Obtencin de muestras
Preparacin de la
muestra

Tema4. Fundamentos de Histologa 1

Tamaos relativos de las clula y sus componentes

Microscopio
ptico

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Recorrido
de la luz
Aumento

Imagen
visualizada
ojo

Lente ocular
Imagen intermedia
(invertida respecto
a la muestra)

Lente objetivo
Muestra
Ninguno

Condensador
Fuente de luz

Microscopio ptico

Microscopio Electrnico
de Transmisin (MET /TEM)
de Barrido (MEB / SEM)
Microscopio que utiliza un haz de
electrones para visualizar un objeto.
La potencia amplificadora de un
microscopio ptico est limitada por la
longitud de onda de la luz visible.
Para este microscopio se utiliza una
muestra ultrafina y la imagen se obtiene
de los electrones que atraviesan la
muestra.
Los microscopios electrnicos de
transmisin pueden aumentar un objeto
hasta un milln de veces.

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Microscopio Electrnico de
Transmisin (MET)

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Partes:
Can de electrones: emite los electrones que
chocan o atraviesan la muestra, creando una
imagen aumentada.
Lentes magnticas: crean campos que dirigen y
enfocan el haz de electrones.
Sistema de vaco para que los electrones no
puedan ser desviados por las molculas del aire.
Placa fotogrfica o pantalla fluorescente: se
coloca detrs del objeto a visualizar para registrar
la imagen aumentada.
Sistema de registro: muestra la imagen que
producen los electrones (ordenador)

Tema4. Fundamentos de Histologa 1

Historia:
El primer microscopio
electrnico de transmisin
(MET), fue desarrollado en
1932 por Ernst Ruska.
La ptica bsica de ese
primer microscopio
electrnico se mantiene
hasta nuestros das
Los cambios en los
microscopios modernos
consisten en adicionar ms
lentes para incrementar los
aumentos y darle mayor
versatilidad.
El primer MET comercial
lo construy Siemens en
1939

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Tema4. Fundamentos de Histologa 1

Tema4. Fundamentos de Histologa 1

Microscopio Electrnico de
Barrido (MEB) 1 (SEM)
MEde barrido

Ctodo

------il

Anodo
Lente
condensador
Serpentn
de exploracin
Haz de
exploraci
n

Espcimen

Imagen en
la pantalla de observacin

Microscopio el
ctr ni c o de
barrido

Tema4. Fundamentos de Histologa I

- No es necesario cortar el objeto en capas.

-El SEM explora la superficie de la imagen punto
por punto.

-Recorre la muestra con un haz muy concentrado

de electrones, que pueden dispersarse de la
muestra o provocar la aparicin de electrones
secundarios.
-Los electrones perdidos y los secundarios son
recogidos y contados; cada punto ledo corresponde
a un pxel en un monitor de televisin.
-A medida que el haz de electrones barre la
muestra, se presenta toda la imagen de la misma en
el monitor.
- Pueden ampliar los objetos 200.000 veces o ms.
-Produce imgenes tridimensionales realistas de la
superficie del objeto.

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EJEMPLOS

Glbulo rojo

Clula cortada
transversalmente

Piel humana

Glbulo blanco

Glomrulo renal

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Obtencin de las
muestras
In Vivo
Citologa
Biopsia
Post-mortem
Necropsia (animales)
Autopsia (humana)

Area de
excisin
(piel)

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Citologa

Obtencin

Impresin:

PAAF: Puncin con aguja fina

Raspado:
Hisopado

Citologa
Procesado
Muestras Slidas:
Squash
(aplastamiento)

Muestras Lquidas:
Frotis o extensin

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Citologa

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Tinciones
Wright
Panptico rpido

- Sencillas
- Muy usada en frotis sanguneos

Papanicolau: en clulas de cuello vaginal. Laboriosa

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Biopsia
Obtencin

Invasivas
Excisional: estirpacin de tumores
Incisional: slo se extra

1
1

un trozo de tejido
2

Min. Invasiva
Agujas tru-cut (1)
Punch (2)
Endoscopia (3)
colonoscopia

2-3

Biopsia

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Procesado

1. Fijacin
2. Tallado
3. Inclusin
4. Corte
5. Tincin

2
4

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Fijacin
Soluciones fijadoras:
MO: - Formaldehdo 4-10%. 24h mnimo
-

Solucin de Bouin (6-8 horas). Lavar con

Alcohol 70 Acido pcrico

Acido actico
Formol
- Solucin de Zinc: 24h mnimo.
Acetato de calcio 3 mM
Acetato de zinc 0,25 M
Cloruro de zinc 0,4 M

ME: Glutaraldehido + Tetraxido de osmio

Congelacin: el corte se realiza con criostato

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Tallado
- Delimitar al mximo la
zona a estudiar
-Tomar suficientes
fragmentos
representativos
- Optimizar el espacio
dentro del cassette

Inclusin

MO: Parafina o resinas

sintticas Xilol-Alcohol-Parafina

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Tema4. Fundamentos de Histo/ogla 1

ME: Resinas duras

LfQUIOO
INTERMEDIARIO

xido de propileno
3x10 min
xido de propileno :resin;, (1:1)
Hasta b ev; por.1cin del xido d propileno.
ntr 10 y 20 horas. depfndiendo de r cantid d
de solucin u iliz d

R in

Mold

POLIMERIZACIN
ESTUFA - 60

Bloque d r sin
polim riz da

Corte

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Microtomo para parafina (MO): Para material incluido en parafina

Secciones de 5 a 20 m de grosor

Vibratomo (MO): Corta material no incluido, aunque s fijado o duro

Secciones de 30 a centenares de m de grosor
Criostato (MO): Material congelado
Secciones de 10 a 40 m
Ultramicrotomo (MET): Para material incluido en resinas
Secciones del orden de nanometros de grosor

Ultracriotomo (MET): Su uso no est muy extendido

Cuando se necesitan secciones del orden de nanometro
Material que no se debe incluir

Tema4. Fundamentos de Histologa 1

elevadora

Tincin

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Tincin general.
-Una de las tinciones ms comnmente usada en histologa es la
hematoxilina-eosina (H-E) sobre cortes de parafina.

- Se usa un colorante bsico y otro cido para teir de diferente color a

las
estructuras cidas y bsicas de la clula.
- Antes de la tincin:
desparafinado e hidratacin
* Xilol
* Alcohol: graduacin decreciente
* Agua

Tema4. Fundamentos de Histologa I

- Despus de la tincin:
lavado y deshidratacin:
* Agua
* Alcohol: graduacin creciente
- Montaje:
* Medio de montaje (DPX)
* Cubreobjetos

Tincin

Tema4. Fundamentos de Histologa 1

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Tinciones de semifinos
(ME):

A partir de la observacin
del semifino se elije qu
porcin cortaremos en el
ultrafino

Tema4. Fundamentos de Histologa I

El ultrafino se contrasta con

metales pesados
As chocan mejor los electrones

La imagen siempre es en
blanco y negro, aunque
Puede colorearse en el
ordenador

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Tinciones Histoqumicas (MO):

- Consisten en la modificacin qumica de molculas del tejido para
posteriormente poder colorearlas.
- Existen tcnicas histoqumicas para detectar glcidos, protenas y
nucletidos.
- La tcnica histoqumica ms empleada es la reaccin de PAS (Periodic
Acid Schiff). Se utiliza para la deteccin de hidratos de carbono, libres o
conjugados.
- Modificacin qumica del tejido con formacin de grupos aldehdos que se
teirn con el reactivo de Schiff, para dar un color rojizo brillante.

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Otras tinciones de inters

-Tricrmica de Masson:

Azul oscuro: Ncleo

Rojo: msculo, queratina y citoplasma
Azul claro: colgeno, mucingeno

-Tincin con Orcena: Marrn: Fibras elsticas

-Tincin de plata:

Negro: Fibras reticulares

-Tincin de Sudn:

Para tincin de grasas. Se tien de rojo

ME de transmisin

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Cilios
Corte longitudinal
y tranversal

Microvellosidades ID

Clulas
caliciformes
en colon

Epitelio
respiratorio

Tema4. Fundamentos de Histologa I

ME de barrido

Axones nerviosos

Bronquio ciliado

Tubo seminfero

Epitelio nasal

Mucosa estomacal

Glbulo blanco

Intestino delgado

Tema4. Fundamentos de Histologa I

ME de barrido

1: bronquiolo
1
2: arteria
2

Epitelio trquea fetal

(con y sin cilios)

3: alvolos
con poros
alveolares

PRINCIPALES TEJIDOS
1. Tejido epitelial
2. Tejido conectivo

3. Tejido muscular
4. Tejido nervioso

Tema4. Fundamentos de Histologa I

TEJIDO EPITELIAL

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Origen:
Ectodermo: la mayor parte de la piel
epitelio que tapiza cavidad anal
epitelio que tapiza la cavidad bucal
epitelio que tapiza las fosas nasales

Endodermo: epitelio de casi todo el tubo digestivo

epitelio del rbol respiratorio
epitelio de hgado y pncreas

Epitelio nasal

Mesodermo: epitelio del rin

epitelio de los rganos reproductores

Morfologa:
Clulas muy juntas (glucoprotenas)
Escasa o nula sustancia intercelular
ntima conexin

Bronquio ciliado

Tema4. Fundamentos de Histologa I

TEJIDO EPITELIAL
Funciones:

Revestir
Aislar
Tapizar
Separar
Secretar sustancias (epitelio glandular)
Regulacin de la prdida de agua

Caractersticas:

Alta capacidad de regeneracin

Avascular (se nutre a partir de los vasos del tej. Conjuntivo)
Descansa sobre una lmina basal (colgeno tipo IV y glucoprotenas)
Polaridad de las clulas:
Polo apical: mira a la luz y en l encontramos vellosidades, cilios, flagelos
Polo basal: superficie paralela a la lmina basal

TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Escamoso
Epitelio simple

Cuboidal

Cilndrico
Escamoso no queratinizado

Tej. Epitelial
De revestimiento

Queratinizado
Epitelio estratificado

Cuboidal
Cilndrico

Tej. Epitelial
Glandular

Pseudoestratificado

Cilndrico pseudoestratificado
Transicional relajado

De transicin

Distendido

TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin

Tema4. Fundamentos de Histologa I

G. exocrinas
Segn donde se vierte
la secrecin

G. endocrinas
G. mixtas

Tej. Epitelial
Glandular

G. serosas
Segn el material segregado

G. mucosas
G. seromucosas
G. merocrinas

Segn la manera de segregar

G. holocrinas
G. apocrinas

TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Escamoso
Epitelio simple

Cuboidal

Cilndrico
Escamoso no queratinizado

Tej. Epitelial
De revestimiento

Queratinizado
Epitelio estratificado

Cuboidal
Cilndrico

Pseudoestratificado

Cilndrico pseudoestratificado
Transicional relajado

De transicin

Distendidodo

TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Tej. Epitelial
De revestimiento

Escamoso

- Endotelio de los vasos

- Mesotelios (pleuras, pericardio, peritoneo)

Epitelio simple
Cuboidal
- Conductos de glndulas
- Capa externa retina
- Tbulos contorneados rin

Cilndrico
- Algunos conductos
- Intestino (microvellosidades)
- Trompas uterinas (cilios)

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Escamoso

Vaso. Corte
longitudinal

Vaso. Corte
transversal

Membrana
serosa

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Cuboidal

Epitelio
glandular
Folculos tiroideos

Tbulos
contorneados
rin

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Cilndrico

Intestino

TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Escamoso
Epitelio simple

Cuboidal

Cilndrico
Escamoso no queratinizado

Tej. Epitelial
De revestimiento

Queratinizado
Epitelio estratificado

Cuboidal
Cilndrico

Pseudoestratificado

Cilndrico pseudoestratificado
Transicional relajado

De transicin

Distendidodo

TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin
Tej. Epitelial
De revestimiento

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Escamoso no queratinizado
En esfago

Queratinizado
Epitelio estratificado

Piel

Cilndrico
Cuboidal
Conductos interlobulillares
de glndulas salibares
En partes de uretra masculina
Conjuntiva del ojo

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Escamoso no queratinizado

Escamoso queratinizado

Esfago

Piel

Estratificado cuboidal

Estratificado cilndrico

Conductos de glndulas

Conjuntiva

TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Escamoso
Epitelio simple

Cuboidal

Cilndrico
Escamoso no queratinizado

Tej. Epitelial
De revestimiento

Queratinizado
Epitelio estratificado

Cuboidal
Cilndrico

Pseudoestratificado

Cilndrico pseudoestratificado
Transicional relajado

De transicin

Distendido

TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Tej. Epitelial
De revestimiento
Cilndrico
pseudoestratificado

Pseudoestratificado

Conductos del epiddimo

Transicional relajado
De transicin

Vejiga
Tbulos renales

Distendido
Vara entre
Estratificado cilndrico y cuboidal

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Pseudoestratificado
De transicin

Epiddimo

Rin
De transicin

Vejiga
urinaria

Resumen epitelio simple

Tipo

Simple

Cbico simple

Cilndrico simple

Psudoestratificado

Forma

celular

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Localizacion

Funciones

Aplanada

De revestimiento:
Alveolos pulmonares
Pared cap. de Bowman
Vasos sanguneos
Vasos linfticos
Pleura y Peritoneo

Membrana
limitante
Transporte
Intercambio de gases
Lubricacin

Cuboidea

Tirodes
Ovario
Tbulos renales

Secrecin
Absorcin
Proteccin

Cilndrica

S. Paranasales, tero,
Bronquios pequeos
Tracto digestivo
Vescula biliar

Transporte
Absorcin
Secrecin
Proteccin

Vas urinarias desde

clices renales hasta
uretra

Secrecin
Absorcin
Lubricacin
Proteccin
Transporte

Cilndrica.
no todas
llegan a
la superficie

Resumen estratificado

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Forma
celular

Localizacion

Escamoso
Estratificado
NO queratinizado

Aplanadas con
ncleo

Cav. oral, Epiglotis,

Esfago, Vagina
Cuerdas vocales

Proteccin
Secrecin

Escamoso
Estratificado
Queratinizado

Aplanadas
sin ncleo

Epidermis,
Parte de enca

Proteccin

Cuboideas

Conductos de las
glndulas
sudorparas

Absorcin
Secrecin

Cilndrico
estratificado

Cilndricas

Conjuntiva ocular,
Conductos excretores
Uretra masculina

Secrecin
Absorcin
Proteccin

Transicional

En forma de
cpula (relajado)
Aplanada
(distendida)

Vias urinarias desde

clices renales hasta
uretra

Proteccin
Distensible

Tipo

Cuboideo
Estratificado

Funciones

TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin

Tema4. Fundamentos de Histologa I

G. exocrinas

Tej. Epitelial
Glandular

-Vierten su secrecin por medio de un sistema de

conducto, su secrecin es externa.
- En algunas glndulas, la secrecin se caracteriza
por contener clulas vivas integras.

G. endocrinas
Segn donde se vierte
la secrecin

-Vierten sus secreciones en forma directa hacia la

sangre o la linfa como secreciones internas (hormonas)
- Carecen de conductos

G. mixtas

- Presentan ambos sistemas de excrecin

Tema4. Fundamentos de Histologa 1

Al exterior
del cuerpo

A una cavidad
del cuerpo

Secrecin


Conducto
externo

'

G. EXOCRINAS
Clasificacin segn las ramificaciones de
Verde: porcin secretora
Morado: conducto de la glndula

Tema4. Fundamentos de Histologa I

TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin

Tema4. Fundamentos de Histologa I

G. serosas

Tej. Epitelial
Glandular

-Secretan lquido acuoso rico en enzimas

- Elemplo: pncreas exocrino

G. mucosas
- Secretan mucingenos:
(protenas glucosiladas grandes) + H2O =
Sustancia gelatinosa (mucina)

Segn el material
segregado

-Ejemplos: clulas caliciformes

g. salivales menores de lengua y paladar
S

G. mucoserosas
-Poseen acinos (unidades secretorias)
que producen
secreciones serosas (S) y
secreciones mucosas (M)
- Ejemplo: g. sublinguales y submandibulares
M

TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin
Tej. Epitelial
Glandular

Segn la manera
de segregar

Tema4. Fundamentos de Histologa I

G. Merocrinas
-Liberacin del producto
secretorio
por exocitosis
- La clula permanece intacta
- Elemplo: g. partida

EXOCRINAS
G. Apocrinas
-Se libera una porcin
de citoplasma

G. Holocrinas
- Cuando madura la
clula secretora,
se combierte
en el producto
secretorio
- Elemplo: g. sebcea

- Elemplo: g. mamaria

Tema4. Fundamentos de Histologa 1

Segn la manera
de segregar

Merocrina

..

. .

Secrecin
Clula intacta

Tema4. Fundamentos de Histologa 1

Segn la manera
de segregar

Apocrina

Pellizcamiento de

una porcin de la
clula (secrecin)

Tema4. Fundamentos de Histologa 1

Segn la manera
de segregar

Holocrina

Clula en
desintegracin
y su contenido
(secrec in)

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Esquema de una
Glndula salival.

Organizacin de
sus unidades secretoras
y sistemas de conductos