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Cintica del consumo de substrato

Villanueva A.C.

3.0
CINETICA DEL CONSUMO
DE SUSTRATO
Dr. CARLOS E. VILLANUEVA AGUILAR
Ctedra:
Diseo de Bioprocesos y Biotecnologa Microbiana

CONTENIDO
1. VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO (rsx) PARA EL CRECIMIENTO
1.1. Velocidad de consumo de sustrato (rsx)
1.1. 1. Aplicando Yx/s (rendimiento celular)
1.1.2. Aplicando r x (velocidad de crecimiento celular)
1.1.3. Aplicando q sx ( velocidad especifica de consumo de substrato)
1.2. Velocidad especifica de consumo de sustrato (qs)
2. VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO (rsp) PARA EL PRODUCTO
2.1. Velocidad de consumo de sustrato (rsp)
2.1.1. Aplicando Yp/s (rendimiento del producto)
2.1.2. Aplicando r p (velocidad de formacin de producto)
2.1.3. Aplicando q sp ( velocidad especifica de consumo de substrato)
2.2. Velocidad especifica de consumo de sustrato (qs)
3. MANTENIMIENTO CELULAR
3.1.
Concepto.
3.2.
Velocidad de consumo de la fuente de carbono y energa
3.3.
Relacin entre los rendimientos Yx/s y Yx/s
4. REQUERIMIENTO DE OXIGENO
4.1. Velocidad de consumo de oxigeno (ro2)
4.2. Velocidad especifica de consumo oxigeno (q o2)

4.3.

Concepto de concentracin critica de oxigeno disuelto (Cc)

Cintica del consumo de substrato

Villanueva A.C.

LISTA DE SMBOLOS

Concentraciones
P
S
X

Producto
Substrato
Biomasa

Coeficientes
m
Yx/s
Yp/s

Mantenimiento
Coeficiente de rendimiento celular (biomasa)
Coeficiente de rendimiento de producto

Velocidades especficas

qP
qS
q02

Velocidad especifica de crecimiento


Velocidad especifica de muerte celular
Velocidad especifica de formacin de producto
Velocidad especifica de consumo de substrato
Velocidad especifica de consumo de oxigeno

Velocidades
rX
rS
rP
ro2

Velocidad de crecimiento celular


Velocidad de consumo de substrato
Velocidad de formacin de producto
Velocidad de consumo de oxigeno

Cintica del consumo de substrato

Villanueva Aguilar Carlos E,

1.VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO (rsx) PARA


EL CRECIMIENTO
1.1.

VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO ( rsx )

1.1.1. Aplicando Yx/s (Rendimiento Celular):


Si reordenamos la Ec. (1) y derivamos respecto al tiempo se obtiene Ec. (25):
(1)

Yx/s

= - dx / ds

Yx/s

dx / dt / - ds / dt

Despejando:
(24)

- ds / dt

- ds / dt
1 / Yx/s . dx / dt

Aplicando sus equivalentes:


rs

1 / Yx/s

. rx

donde: rs = velocidad de consumo sustrato


rx = velocidad de crecimiento celular

Reordenando
(25)

VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO ( rsx )

rsx

= rx / Yx/s

1.1.2. Aplicando rx ( velocidad de crecimiento celular ):


Introduciendo la Ec. (18) en la Ec. (25) se obtiene Ec. (26):
(18)

rX

(25)

rS

rX / Yx/s

(26)

donde: = velocidad especifica de crecimiento

VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO ( rSx )

rsx

x / Yx/s

1.1.3. Aplicando qSX ( velocidad especifica de consumo de sustrato ):


(27)

VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO (rsx )


rS

tambin puede expresarse como:

rsx

= qsx . x

Cintica del consumo de substrato

Villanueva Aguilar Carlos E,

1.2. VELOCIDAD ESPECIFICA DE CONSUMO SUSTRATO ( qsx )


1.2.1. Comparando rS ( velocidad de consumo de sustrato):
Comparando las Ec. (26) y (27), se obtiene Ec. (28)
(26) y (27)

x / Yx/s

qSx . x

Despejando qS
qSx
(28)

x / Yx/s . x

VELOCIDAD ESPECIFICA DE CONSUMO SUSTRATO (qSX )

qsx

Si:

/ Yx/s

= m ;

se tendr: qxx = qsm;

es decir ambos parmetros estn directamente relacionados


(28b)

qsxm =

m / Yx/s

Es evidente hasta aqu que el crecimiento puede ser caracterizado


mediante 3 parmetros:

Ks
m
Yx/s.
Estos dependen tanto del microorganismo como del medio de cultivo
empleado, por lo que su evaluacin debe realizarse para cada caso
particular.
Referencia: FAO Pg. 38

Cintica del consumo de substrato

Villanueva Aguilar Carlos E,

2.VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO (rsp) PARA


LA FORMACIN DE PRODUCTO
2.1.

VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUBSTRATO ( rsp )


2.1.1. Aplicando Yp/s (Rendimiento de Producto):

Si reordenamos la Ec. (1) y derivamos respecto al tiempo se obtiene Ec. (25):


(1)

Yp/s

= - dp / ds

Yp/s

dp / dt / - ds / dt

Despejando:
(24)

- ds / dt

- ds / dt
1 / Yp/s . dp / dt

Aplicando sus equivalentes:


rs

1 / Yp/s

. rp

donde: rs = velocidad de consumo sustrato


rp = velocidad de formacin producto

Reordenando
(25)

VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO (rsp )

rsp

= rp / Yp/s

2.1.2. Aplicando rp ( velocidad de formacin de producto ):


Introduciendo la Ec. (18) en la Ec. (25) se obtiene Ec. (29):
(18)

rp =

qp x

(25)

rS

rp / Yp/s

(29)

donde: qp =velocidad especifica formacin de producto

VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO (rsp )

rsp

= qp x / Yp/s

2.1.3. Aplicando qSP ( velocidad especifica de consumo de substrato):


(30)

VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO (rsp )


rSp

tambin puede expresarse como:

rsp

= qsp . x

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Villanueva Aguilar Carlos E,

2.2. VELOCIDAD ESPECIFICA DE CONSUMO SUSTRATO ( qsp )


2.2.1. Comparando rSP ( velocidades de consumo de sustrato):
Comparando las Ec. (29) y (30), se obtiene Ec. (31)
(29) y (30)

qp x / Yp/s

qSP . x

Despejando qSp
qSP
(31)

qp x / Yp/s . x

VELOCIDAD ESPECIFICA DE CONSUMO SUSTRATO (qSP )

qsp

qp

/ Yp/s

Referencia: FAO Pg. 38


Cintica del consumo de substrato

Villanueva Aguilar Carlos E,

3.MANTENIMIENTO CELULAR
3.1. Concepto.
3.2. Velocidad de consumo de la fuente de carbono y energa
3.3. Relacin entre los rendimientos Yx/s y Y x/s
3.1. Concepto.

La ( Ec. 25 ) Velocidad de consumo de sustrato ( rs)

rs = rx / Yx/s

(Ec.25)

Establece que el consumo de substrato solo es posible cuando hay crecimiento.

Sin embargo, cuando el substrato considerado es la fuente de C y Energa , puede


darse el caso en que el crecimiento es nulo ( rx = 0 ) pero ocurre consumo de substrato
( rs = 0 ).

A ste consumo de substrato que no redunda en Biomasa se le asocia con el


mantenimiento de funciones vitales ( recambio de material celular, mantenimiento de
gradientes de concentracin y movilidad )

3.2.

Velocidad de consumo de la fuente de carbono y energa ( Ec. 29 )

Piert ha propuesto la sgte. ecuacin para la velocidad de consumo de la fuente de


carbono y energa
( Ec. 29 )

rs = rx / Yx/s

ms X

Donde:
ms

Coeficiente de mantenimiento

Yx/s

Rendimiento que se obtendra si el mantenimiento fuese nulo.


En la prctica existe mantenimiento de funciones vitales; en consecuencia
Yx/s es el rendimiento observable.
El valor de Yx/s es obviamente inferior al de Yx/s

Cintica del consumo de substrato

Villanueva Aguilar Carlos E,

3.3. Relacin entre los rendimientos Yx/s y Y x/s


La Relacin entre ambos se obtiene dividiendo la ( Ec. 29 ) por rx , obteniendo la ( Ec. 29
b)
(Ec.29 )

rs

rx / Yx/s

ms X

(Ec.29b)

rs / r x =

1 / Yx/s

m s X / rx

Introduciendo las ecuaciones (25) y (18) en (29b) y suprimiendo X se tiene (30)


(Ec.25)
Ec.18)

(Ec.30)

rs
rX

=
=

rx / Yx/s
X

rx / Yx/s / rx =

1 / Yx/s

ms X / X

1 / Yx/s =

1 / Yx/s

ms /

De la Ec. 30 surge claramente que cuando ms

0;

Yx/s

Yx/s

Debe destacarse que Yx/s es el rendimiento observable, mientras que Yx/s solo
puede ser evaluado indirectamente mediante la (Ec. 30 ).

Valores de ms de 0.01 a 0.04 g g1 h1 son frecuentes de hallar pero se incrementan


con la temperatura y con la presin osmtica del medio de cultivo.

Son ejemplos para Saccharomyces cerevisiae, creciendo en anaerobiosis se


encuentra un valor de ms = 0.036 g g1 h1 mientras que es diez veces superior
si el medio contiene una concentracin de NaCl 1M , lo cual da cuenta del trabajo
osmtico que deben realizar las clulas.

De este modo el mantenimiento celular posee una implicancia tecnolgica directa,


ya que un proceso destinado a la produccin de Biomasa debe conducirse de modo
tal que el valor de ms sea pequeo.

Cintica del consumo de substrato

Villanueva Aguilar Carlos E,

4. REQUERIMIENTO DE OXIGENO
4.1. La Velocidad de Consumo de Oxgeno ( rO2 )
4.2. Velocidad Especfica de Consumo de Oxgeno (q02)

En las fermentaciones aerobias, la obtencin de energa est ligada a la presencia de


02.

Es el aceptor final de los electrones en la cadena de citrocomos donde se genera


abundante ATP ( Adenosin trifosfato ).

Las molculas de ATP aportarn la energa necesaria para las reacciones de sntesis
con las que el microorganismo se fabricar a si mismo, y la requerida para el
mantenimiento celular.

4.1.

La Velocidad de Consumo de Oxgeno ( rO2 )

Por analoga con la ( Ec. 29 ) se puede expresar Ec.( 31a)


(Ec.29 )
( Ec. 31a)

rs

rx / Yx/s

ms X

r02 = rx / Yx/o

m0 X

Donde
m0
Yx/o

Es el coeficiente de mantenimiento en base al oxigeno


Es el rendimiento en base al 02 consumido que se obtendr

cuando m0 = 0
Cintica del consumo de substrato

Villanueva A.C.

4.2. Velocidad Especfica de Consumo de Oxgeno (q02)

Dividiendo varios miembros de la Ec. (31a) por X , se obtiene:


( Ec. 31b)

r02 / X

Introduciendo en (31 b):

r02 = q02 . X
rx =

rx / Yx/o . X

r02 velocidad de consumo de 02


rx velocidad de crecimiento celular

Se obtiene la (Ec. 32a):


( Ec. 32a)

q02 . X / X

X / Yx/o . X

m0 X / X

Cintica del consumo de substrato

m0 X / X

Villanueva A.C.

Suprimiendo X se tiene Ec. 32b


( Ec. 32b)
q02 = / Yx/o
+
Donde:
q02
Velocidad especifica de consumo de 02

Velocidad especifica de crecimiento

m0
Yx/o

m0

Coeficiente de mantenimiento en base al oxigeno


Rendimiento en base al 02 consumido que se obtendr cuando m0 = 0

En un cultivo en medio lquido los microorganismos utilizan substancialmente el 0 2 que


est disuelto, y el valor de q02 depende de cual sea sta concentracin.
Por analoga con la ecuacin de Monod y cuando el 02 es el substrato limitante se suele
representar sta dependencia como :

q02
Donde:
C
KO
q02max

q02max C / ko + C

Concentracin de O2 disuelto
Constante de saturacin
Velocidad especifica mxima de consumo; se obtiene cuando C > KO

Cintica del consumo de substrato

Villanueva Aguilar Carlos E,

Velocidad especfica mximade consumo de oxgeno


para diferentes microorganismos

4.3. Concepto de concentracin critica de oxigeno disuelto (Cc)

En la prctica se utiliza principalmente el concepto de Cc .

La Cc es el valor por encima del cual q02 es independiente de la concentracin de


oxgeno disuelto y por lo tanto el crecimiento no est limitado por 02.

En stas condiciones el valor q02 depende del cual sea el valor de , el cual ser
funcin del substrato que limita el crecimiento.

Si la concentracin de ste es saturante ser = m y q02 = q02m.

Los valores de Cc para la mayora de los organismos estn en el orden de 0.1 a 1mg
L-1 (3.1 - 31 uM) valores relativamente bajos si se compara con la solubilidad del 02 ,
que a 30C y 0.21 atmsferas en medios acuosos diluidos es de 7.8 mg L -1.

Esto podra conducir al error de suponer que no constituye un problema satisfacer los
requerimientos de 02 en los cultivos, pero el siguiente ejercicio demostrar todo lo
contrario.
Concentracin crtica de oxgeno

Cintica del consumo de substrato

Villanueva Aguilar Carlos E,

Concentracin crtica de oxgeno para el cultivo de diferentes organismos

Solubilidad de oxgeno en agua y en soluciones acuosas

XL: fraccin molar de oxgeno en agua


mg/L = mM x 32

UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO


FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS
Diseo de Bioprocesos y Biotecnologa Microbiana

BIOINGENIERA Y BIOTECNOLOGIA

PRACTICA

CONCENTRACIN CRITICA DE OXIGENO DISUELTO (Cc)


Dr. Blgo. Carlos E. Villanueva Aguilar
Maestra Microbiologa Industrial y Biotecnologa

INTRODUCCIN
En la prctica se utiliza principalmente el concepto de Cc . La Cc es el valor por
encima del cual q02 es independiente de la concentracin de oxgeno disuelto y por
lo tanto el crecimiento no est limitado por 02.
En stas condiciones el valor q02 depende del cual sea el valor de , el cual ser
funcin del substrato que limita el crecimiento. Si la concentracin de ste es
saturante ser = m y q02 = q02m.
Los valores de Cc para la mayora de los organismos estn en el orden de 0.1 a
1mg L-1 , valores relativamente bajos si se compara con la solubilidad del 02, que a
30C y 0.21 atmsferas en medios acuosos diluidos es de 7.8 mg L -1.
Esto podra conducir al error de suponer que no constituye un problema satisfacer
los requerimientos de 02 en los cultivos, pero el sgte. ejercicio demostrar todo lo
contrario.

OBJETIVOS:
1. Calcular la velocidad de crecimiento ( rx) de un cultivo microbiano, la velocidad
del consumo de oxigeno (rO2) y concentracin crtica del oxigeno disuelto (Cc ).
2. Calcular el tiempo transcurrido hasta que la concentracin de 0 2 se hace crtica e
igual a 0.5 mg L-1

MATERIALES:
- Datos experimentales
- Calculadora

PROCEDIMIENTOS:
1. DATOS EXPERIMENTALES:

Se tiene una poblacin microbiana creciendo activamente en un medio de cultivo,


obtenindose los siguientes datos experimentales:

Concentracin celular
Velocidad especifica de crecimiento
Coeficiente de mantenimiento
Rendimiento cuando manteniendo es nulo
Concentracin de oxigeno disuelto inicial

mo
Yx/o
Co

= 10
g L-1
= 0.15 h-1.
= 2.6 mg g -1 h -1
= 1 g g-1
= 7.8 mg L-1

Calcular el tiempo transcurrido hasta que la concentracin de 0 2 se hace


crtica e igual a 0.5 mg L-1 ?.
2. CLCULO DE LA VELOCIDAD DE CRECIMIENTO (rx)

Ec. (18)

rx = u x
=
rx =

3. CLCULO DE VELOCIDAD DE CONSUMO DE OXIGENO (r02)

( Ec. 31a)

r02 = rx / Yx/o

m0 X

r02 =
r02 =
4. CONCENTRACIN CRITICA DE OXIGENO DISUELTO

Si se tiene:
Por analoga:

rx

dx /dt

ro2 = - dc / dt

u . x

= qo2 . x

ro2 = - dc / dt
Integrando sta ecuacin con la condicin
Donde

to

Co : Concentracin de 02 disuelto a to = O
C : Concentracin crtica de oxgeno disuelto a t

Co

Resulta:

- dc / dt

r o2
t

- dc

Co

ro2 . dt
to

Co - C

ro2 ( t - to)

- C

- Co + r o2 ( t - to)

Concentracin Crtica de Oxigeno


Disuelto:

Co - r o2 t

5. CALCULO DEL TIEMPO NECESARIO PARA QUE Cc = 0.5

Despejando t:

Co -

rO2 t
rO2 t
rO2 t

Tiempo requerido para


Concentracin Critica de Oxgeno

De donde el tiempo necesario para que:

=
=
=

C
- Co + C
Co - C

Co - C
= -----------------rO2

Cc = C = 0.5

ser:

7.8 mgL-1 - 0.5 mg L-1


= -------------------------------1526 mg L-1 h-1

4.8

. 10 -3 h

17.3 segundos

Por tanto, en escasos segundos el crecimiento comenzar a estar limitado por el


oxgeno, y eventualmente llegar a detenerse cuando la concentracin sea nula, a
menos que sea repuesto continuamente y a una velocidad comparable a la del
consumo.
Este aspecto es fundamental en el diseo de biorreactores destinados a cultivos
aerobios, ya que debern ser capaces de suministrar oxgeno a altas velocidades a
fin de satisfacer la demanda.