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Fundamentos de la tcnica
QU ES LA CROMATOGRAFA?
CROMATOGRAFA INICA
Tanto FASE MVIL como FASE ESTACIONARIA son INICAS
INTERCAMBIADORES INICOS
Intercambiadores inicos: Fases slidas de matriz normalmente polimrica
sobre cuya superficie se fijan covalentemente grupos activos inicos. Debido
a la condicin de electroneutralidad hay siempre un contrain opuestamente
cargado en la vecindad del punto activo cargado. El contrain o ION
ELUYENTE normalmente se origina de la fase mvil.
x(RSO3- H+)
slido
+
M x+
disolucin
x(RSO3-) Mx+
slido
xH+
disolucin
x(RN(CH3)3+OH-)
slido
Ax
disolucin
x(RN(CH3)3)+Ax- +
slido
xOHdisolucin
ORDEN DE ELUCIN
(1) AFINIDAD de los iones por los puntos activos
A) CARGA
tR (Nitrato) < tR (Sulfato)
B) TAMAO
tR: F- < Cl- < Br- << IC) POLARIZABILIDAD
tR (Sulfato) < tR (Tiocianato)
//
(HPO4)2pH=9.5
3.6mM de Na2CO3
//
(H2PO4)pH=9
4.5mMNa2CO3
1.4mM NaHCO3
//
H3PO4
ORDEN DE ELUCIN
(3) FUERZA INICA DE LA FASE MVIL
-FUERZA INICA tR
- Vara la SELECTIVIDAD ENTRE IONES DE DISTINO SIGNO
FASE ESTACIONARIA
Composicin de la fase ESTACIONARIA:
- Sustrato/resina
- Grupos activos
CAPACIDAD DE UN
INTERCAMBIADOR INICO
Materiales de BAJA capacidad: Q < 100 umol/g
Materiales de MEDIA capacidad: 100 < Q < 200 umol/g
Materiales de ALTA capacidad: Q >200 umol/g
Efectos:
FASE MVIL
- Mantiene ionizados los grupos activos de la fase estacionaria
- Disuelve y transporta la muestra
-Controla la retencin de la muestra
- Regula el pH
ANIONES
CATIONES
NaOH
NaHCO3
Na2CO3
HNO3
cido metanosulfnico
cido tartrico
DETECCIN
Modos de deteccin:
Kc= L/A
Tanto los iones ANALITO como los iones ELUYENTE son especies cargadas, con
una determinada CONDUCTIVIDAD.
SIN SUPRESIN
DE
CONDUCTIVIDAD
MODOS DE TRABAJO
CON SUPRESIN
DE
CONDUCTIVIDAD
VENTAJAS
La conductividad del eluyente es reducida
Se aumenta la seal del analito.