Univ.

de Talca
Gentica Humana
Inst. Ciencias Biolgicas
Medicina

Taller 03: Lectura Recombinacin

Extracto del libro Karp. G. 2011. Biologa Celular y Molecular. Conceptos y experimentos.
Mcgraw-Hill Interamericana Editores, S.A. Captulo 14. Reproduccin Celular. 14.3
Meiosis. Pags. 597-598.

Recombinacin gentica durante la meiosis

Adems de reducir el nmero de cromosomas como lo requiere la
reproduccin sexual, la meiosis incrementa la variabilidad gentica en una
poblacin de organismos de una generacin a la siguiente. La distribucin
independiente permite que los cromosomas maternos y paternos se revuelvan
durante la formacin de los gametos, y la recombinacin gentica
(entrecruzamiento) posibilita que los alelos maternos y paternos en un
cromosoma determinado se entremezclen tambin. Sin esta recombinacin, los
alelos de un cromosoma particular permaneceran juntos generacin tras
generacin. Al mezclar los alelos maternos y los paternos entre cromosomas
homlogos, la meiosis genera organismos con genotipos y fenotipos nuevos en
los que puede actuar la seleccin natural.
La recombinacin comprende la rotura fsica de molculas individuales de
DNA y la ligadura de los extremos dobles cortados de un DNA con los extremos
dobles cortados del cromosoma homlogo. La recombinacin es un proceso muy
preciso que ocurre sin adicin ni prdida de un solo par de bases. Para mantener
tal exactitud, la recombinacin depende de secuencias de bases complementarias
que existen entre una cadena sencilla de un cromosoma y la cadena homloga de
otro cromosoma, como se explica ms adelante. La precisin de la recombinacin
se asegura mejor con la participacin de las enzimas para reparacin del DNA que
llenan los huecos que se forman durante el proceso de intercambio.
La figura 14-47 muestra un modelo simplificado de los pasos propuestos
que ocurren durante la recombinacin en las clulas eucariotas. En este modelo
dos DNA dobles que estn a punto de recombinarse se alinean uno junto al otro
como resultado de algn tipo de bsqueda de homologa en el que las molculas
homlogas de DNA se relacionan entre s en preparacin para la recombinacin.
Una vez que se alinean, una enzima (Spo11) genera una rotura en la cadena
doble en una de las dobles hlices de DNA (paso 1, fig. 14-47). Luego la brecha se
ensancha (reseca) como se indica en el paso 2. La reseccin puede ocurrir
mediante la accin de exonucleasa 5' 3' o por un mecanismo alternativo.

Sin que esto importe, las cadenas rotas tienen colas de una sola cadena
expuestas, cada una con una terminacin 3' OH.
En el modelo que se muestra en la figura 14-47, una de las hebras de una
sola cadena deja su propia molcula de doble hlice e invade la molcula de DNA
de una cromtide no hermana y forma enlaces de hidrgeno con la cadena
complementaria en la molcula de doble hlice vecina (paso 3).

En E. coli este proceso en el que una sola cadena invade una molcula doble
homloga y desplaza la cadena correspondiente en esa cadena doble es
catalizado por una protena recombinasa llamada proteina RecA.La protena RecA
se polimeriza para formar un filamento que se une a lo largo del DNA de cadena
sencilla y facilita la invasin de esa cadena a una doble hlice doble homloga sin
cortes. Las clulas eucariotas tienen homlogos de RecA (p. ej., Rad51) y se cree
que catalizan la invasin de cadenas. La invasin de cadenas impulsa la actividad
de reparacin del DNA (seccin 13.3) que llena los huecos, como se muestra en el
cuarto paso.
Como resultado del intercambio recproco de las cadenas de DNA, las dos
cadenas dobles establecen enlaces covalentes entre s para formar una molcula
conjunta (o heterodoble) que contiene un par de entrecruzamientos de DNA, o
uniones de Holliday, que flanquean la regin de intercambio de cadenas (pasos 4
y 5, fig. 14-47). Estas uniones reciben su nombre de Robin Holliday, el
investigador que propuso su existencia en 1964. No es necesario que este
intermediario de la recombinacin sea una estructura esttica porque el punto de
unin puede moverse en una u otra direccin (fenmeno conocido como
migracion de rama) mediante el rompimiento de los enlaces hidrgeno que
sujetan los pares originales de cadenas para reformar los enlaces hidrgeno entre
cadenas de los dobles recin unidos (paso 5). La formacin de uniones de Holliday
y la migracin de rama tienen lugar durante el paquiteno.
Para resolver las uniones de Holliday, que estn interconectadas y restaurar
el DNA a dos cadenas de dobles hlices, debe ocurrir otra ronda de corte del DNA.
Dos productos alternativos pueden generarse segn las cadenas particulares de
DNA que se corten y liguen. En un caso, las dos dobles contienen slo fragmentos
cortos de intercambio gentico, lo que representa una falta de entrecruzamiento
(paso 6, fig. 14-47). En la va alternativa de rotura y ligadura, la doble hlice de
una molcula de DNA se une por enlace covalente con la doble de la molcula
homloga, lo que crea un sitio de recombinacin gentica (es decir, un
entrecruzamiento) (paso 7). Estudios recientes sugieren que la decisin de que
una interaccin de recombinacin resulte en un entrecruzamiento o una falta de
entrecruzamiento se toma antes de la etapa en la que la unin de Holliday doble
se resuelva. Los entrecruzamientos, que representan la fusin de un cromosoma
materno y uno paterno (paso 7), se desarrollan en el quiasma necesario para
mantener unidos los homlogos durante la meiosis I.
Cul es la participacin de las roturas en la cadena de DNA en la
recombinacin gentica?
Asuma por un momento que el entrecruzamiento no ocurre. Habra acuerdo
en que se recibi la mitad de los cromosomas de cada uno de los padres?
Habra acuerdo en que se recibi un cuarto de los cromosomas de cada uno
de los abuelos? Cambiaran las respuestas a estas preguntas si se
considerara que hubo entrecruzamiento?
Los fetos cuyas clulas son triploides (es decir, contienen tres juegos
completos de cromosomas) se desarrollan a trmino y mueren en la
lactancia, mientras que los fetos con trisomas cromosmicas individuales
suelen correr peor suerte. Cmo se explica esta observacin?

 Suponga que se incuba una clula meitica en [ 3H]timidina entre las etapas
leptoteno y cigoteno, luego se fija la clula durante el paquiteno y se
prepara una autorradiografa. Se encuentra que los quiasmas son sitios con
concentracin de granos de plata. Qu dice respecto al mecanismo de
recombinacin?