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PROCEDIMIENTOS AUXILIARES DE DIAGNSTICO

EN DERMATOLOGA
Manuel Palomino Yamamoto *

En la prctica diaria el dermatlogo puede hacer uso o solicitar el apoyo de mltiples


mtodos o procedimientos auxiliares, algunos relativamente sencillos y otros ms
complejos asimismo existen procedimientos que se pueden realizar directamente en el
paciente o tambin aquellos que nos permiten analizar material obtenido del enfermo,
como muestras de piel, secreciones, sangre, etc.
En los ltimos aos la aparicin de nuevos mtodos de ayuda, han permitido lograr un
gran avance en el diagnstico y tratamiento de las numerosas enfermedades que
afectan la piel y sus anexos.
Entre los mtodos ms utilizados se encuentran:
1) Luz de Wood
2) Examen micolgico directo (KOH)
3) Examen parasitolgico directo
4) Prueba de Tzanck
5) Coloraciones
6) Cultivos
7) Diascopa
8) Dermatografismo
9) Campo oscuro
10) Inmunofluorescencia y otros mtodos inmunodiagnsticos
11) Citodiagnstico
12) Frotis por aposicin tisular
13) Frotis de exudado seroso tisular
14) Biopsia de piel
15) Microscopa electrnica
1. Luz de Wood.Es un mtodo prctico y til paral comprobar o descartar determinadas patologas.
Consiste en una fuente de luz ultravioleta de onda larga de 365 nm, la cual es filtrada
por vidrio de silicato de bario, que contiene un 9% de xido de nquel. Esta luz
aplicada a las lesiones de piel y anexos va a producir una fluorescencia caracterstica
de la enfermedad, el examen debe realizarse en completa oscuridad, es recomendable
encender la lmpara de Wood unos minutos antes, para que alcance su mxima
actividad, por ejemplo:
En tia capitis: se pueden diferenciar dos tipo de infeccin segn la formacin de
artrosporas fuera o dentro del pelo; los pelos infectados con M. audounii o M. cannis
van a exhibir una fluorescencia amarillo verde brillante, en T schoenleinii, va a
presentar una fluorescencia verde claro.

El eritrasma, infeccin causada por el C. minutissimun, la fluorescencia caracterstica


rojo brillante o rojo coral, es muy particular en esta entidad.
En el acn, el C. acnes a menudo causal fluorescencia rojo en los orificios de los
folculos.
En casos de lepra, vitligo y albinismo, las reas hipopigmentadas se vern ms
brillantes que las zonas adyacentes.
El melasma y las eflides son ms evidentes bajo la luz de Wood (la hiperpigmentacin
se hace ms evidente). La luz de Wood es til ante la sospecha de porfiria cutnea
tarda, donde se evidencia coloracin anaranjado-rosada en orina por porfirinas
excretadas.
Una aplicacin frecuente de luz de Wood, es en la tia versicolor que produce una
coloracin amarillo-oro.
MTODOS DE LABORATORIO:
2. Examen micolgico directo.Para descartar una dermatofitosis o una pitiriasis versicolor, el examen microscpico
de las escamas obtenidas por raspado y tratadas con hidrxido de potasio al 10%
elimina el material queratnico permitiendo as la identificacin de las hifas o esporas
de dermatofitos, las hifas y esporas de cndida y tia versicolor; pelos con esporas
endotrix y ectotrix, cristales de sal, cuerpos ovales de la cromomicosis, etc.
3. Examen parasitolgico directo.Prueba sencilla y de gran utilidad para confirmar la presencia de parsitos en la piel;
til en escabiosis y formas de pediculosis. Consiste en romper con una hoja de bistur
No15 la lesin ms representativa, el material se coloca sobre una lmina porta
objetos con aceite de inmersin y se observa en el microscopio. En pediculosis se
pueden observar los parsitos y los huevos; en escabiosis se observan parsitos,
huevos o heces.
4. Prueba de Tzank.Prueba para examinar las clulas de lesiones vesiculares y ampollares, es de
importancia en enfermedades como herpes zster y simple, varicela, necrlisis
epidrmico txica, estfilococcica y por drogas, urticaria pigmentosa ampollar y todas
las formas de pnfigos. La muestra se toma del fondo de la lesin raspando
suavemente con un bistur se deja secar y luego se colorea con la tincin de Giemsa:
Los hallazgos son:
- Clulas redondas = Herpes zster, simple, varicela.
- Clulas epidmicas = txicas, acantolticas, con ncleos picnticos amorfos, sugieren
el pnfigo vulgar
- Racimos de clulas epidmicas normales con eosinoflia intensa, indican dermatitis
herpetiforme.
- Cuerpos redondos y las clulas granulares nos hacen pensar en el pnfigo familiar
benigno.
- Las clulas de Tzanck del pnfigo vulgar tiene un ncleo nico grande, nuclolos
definidos y citoplasma fino.

5. Coloraciones.Las principales coloraciones que se usan en dermatologaa son: coloracin de Gram, de


Ziehl Neelsen y Giemsa.

Con Gram, se identifican la mayora de las bacterias y Cndida albicans,


Grampositivos (azul) cocos y bacilos; gramnegativos (rosado) cocos o bacilos.
Ziehl Neelsen: Para identificar micobacterias cido alcohol resistentes tales
como M. leprae, M. tuberculosis, y micobacterias atpicas.
Giemsa: Muestras citolgicas de piel u otros tejidos, se usa para demostrar
cuerpos de Negri, especies diferentes de tunga, espiroquetas y protozoarios. Es
de uso fundamental en dermatologa para el diagnstico de leishmaniasis.

6. Cultivos.Tiene valor diagnstico importante en las dermatomicosis, micosis profundas,


infecciones bacterianas e infecciones por levaduras.
Dermatofitos = Agar dextrosa o Sabouraud con cicloheximida y cloranfenicol para
reducir la contaminacin mictica y bacteriana respectivamente.
En leishmaniasis = Agar sangre.
7. Diascopa.Se logra a travs de la compresin de las lesiones cutneas por medio de una lmina
de vidrio o plstico transparente con el objeto de eliminar por presin la sangre
acumulada en los capilares, ayuda a diferenciar entre la dilatacin visible como eritema
y la extravasacin de eritrocitos en la prpura.
En el carcinoma de clulas basales, su aspecto perlado se va a evidenciar ms; en los
granulomas cutneos, su coloracin amarilla se evidencia ms al desaparecer el
eritema.
8. Dermografismo.Es una forma de urticaria que es provocada al frotar la piel con un objeto puntiforme,
la friccin debe ser suave y si se producen los habones estamos en presencia de un
dermatografismo positivo; tiene valor diagnstico en la urticaria fsica, en la
mastocitosis, en el embarazo y en la fenilcetonuria.
9. Campo oscuro.Se usa para la visualizacin de diferentes trepanomatosis, especialmente en la sfilis.
Se presiona la lesin con una pinza y una vez que el exudado aparece se presiona
suavemente un portaobjetos al cual se le agrega una gota de aceite de inmersin y se
examina en el microscopio de campo oscuro con un objetivo de 1000x. En la lengua y
en los labios no se encuentran espiroquetas.
10. Inmunofluorescencia y otros mtodos inmunodiagnsticos.Existen 2 tipos de Inmunofluorescencia: la directa (piel) y la indirecta (suero). La IF
directa permite detectar la presencia y localizacin de inmunoglobulinas, componentes
del complemento y fibringeno. La IF directa indicada en cualquier tipo de pnfigos,
penfigoide ampollar, herpes gestationes, dermatitis herpetiforme, lupus eritematoso y
otras enfermedades del tejido conectivo.
Es importante la seleccin del sitio para la biopsia con el fin de obtener el mejor

resultado posible, En las enfermedades ampollares se torna piel normal no eritematosa


o membrana mucosa adyacente a cualquier lesin. En el LEDC se torna lesin
eritematosa y activa, evitando las zonas edematosas y telangiectsicas as como
tambin zonas previamente tratadas. Las pruebas intradrmicas se utilizan
principalmente como ayuda en el diagnstico de la lepra, leishmaniasis, esporotricosis,
TBC e histoplasmosis. Las lecturas de la prueba se efectan a las 48 horas despus de
haber sido aplicadas.
Otros mtodos inmunolgicos tiles en dermatologa son principalmente la
linfoblastognesis y los anticuerpos monoclonales, particularmente en enfermedades
donde se describen anormalidades de la inmunidad mediada por clulas como en la
lepra y en la leishmaniasis.
11. Citodiagnstico.La citologa empleada es usada para detectar las alteraciones que ocurren en las
clulas de la epidermis infectadas con el virus del molusco contagioso. Se selecciona
una lesin y con la punta de un bistur se rompe el techo de la lesin extrayendo el
contenido con la ayuda de un extractor de comedones. Se coloca el material entre 2
portaobjetos frotando por aposicin. Se tie con azul de metileno y se observa en el
microscopio.
El hallazgo consiste en la deteccin de los cuerpos de molusco que no son otra cosa
que queratinocitos con citoplasma lleno de partculas virales. Esta prueba est en
desuso por lo caracterstico de las lesiones de molusco contagioso lo cual hace muy
sencillo el diagnstico clnico.
12. Frotis por aposicin tisular.Su principal uso es para el diagnstico del granuloma inguinal y en la leishmaniasis
cutnea. Se toma una biopsia por punch de 3-4 mm de dimetro. Se descarta la
porcin superior y se diseca un fragmento de 1 mm el cual se va a colocar entre 2
lminas portaobjetos frotndose suavemente dejando secar ese material al aire
ambiente. Luego se tie con coloracin de Giemsa. Los hallazgos son los cuerpos de
Donovan y los cuerpos de leishmanias en el citoplasma de grandes macrfagos. Los
primeros se caracterizan por ser bilobulados y por poseer una cpsula clara o blanca
evidente. Los segundos son ovales y con un ncleo oscuro.
13. Frotis exudado seroso tisular.Este procedimiento es til para el diagnstico de lepra y para evaluar la terapia
antileprosa. Est indicado en todos los pacientes en los que se sospeche la enfermedad
o en aquellos pacientes ya diagnosticados en los que se desee conocer la efectividad
del tratamiento.
Se limpia la zona con alcohol y se pinza la piel hasta formar un rea blanca donde se
realiza una incisin de 5 mm de largo y 2 mm de profundidad hasta que se retira el
exudado colocndose sobre un portaobjetos dejndose secar al aire ambiente. Se fija
al calor y se tie. Los hallazgos consisten en bacilos cido alcohol resistente (BAAR)
slidos fragmentados o granulares. El resultado de la prueba se mide mediante 2
parmetros: el ndice bacteriano (IB) y el ndice morfolgico (IM). El IB cuantifica el
nmero de bacilos presentes por campo de inmersin y se reporta de la siguiente
forma:
1+ : 1-10 bacilos en 100 campos
2+ : 1-10 bacilos en 10 campos

3+
4+
5+
6+

:
:
:
:

1-10 bacilos en un campo promedio


10-100 bacilos en un campo promedio
100-1000 bacilos en un campo promedio
Ms de 1000 bacilos en un campo promedio

El ndice morfolgico expresa el porcentaje de bacilos que son de tamao y formas


normales y con una tincin uniforme (bacilos slido).
14. Biopsia de piel.La biopsia de piel es uno de los ms importantes mtodos auxiliares usados en
dermatologa. Puede ser diagntico y/o curativo y el material obtenido no se usa
solamente para el estudio histolgico sino que tambin puede usarse para microscopia
electrnica, cultivos, frotis por aposicin e Inmunofluorescencia directa. Antes de
realizar este procedimiento el mdico est en la obligacin de explicar el motivo de la
misma ya que en la mayora de los casos los pacientes se preocupan por la inminente
posibilidad de una lesin maligna as como tambin por el resultado cosmtico del
procedimiento.
Entre los factores que pueden afectar al resultado del estudio se encuentran la tcnica
empleada, el sitio de la biopsia, la cantidad de tejido tomado, tamao, forma y
profundidad de la muestra, la informacin clnica suministrada al Dermatopatlogo y la
preparacin tcnica de la misma.
Se deben realizar biopsias de piel de las lesiones primarias y no de las secundarias, ya
que stas pueden estar modificadas a causa de liquenificacin y cambios pigmentarios.
Existen 4 tipos de biopsia de piel, a saber, la biopsia por afeitado, por sacabocado
(punch), biopsia incisional para mediana y la biopsia excisional. No se debe subestimar
ningn tipo de lesin por ms benigna que parezca siendo indispensable y legal que a
todo paciente que se le extraiga una lesin o parte de ella sea analizada e informada
debidamente.
La piel debe ser frotada con alcoholisoproplico en suficiente cantidad seguida de la
aplicacin de la anestesia. Se realiza el procedimiento y se toman puntos de sutura si
es necesario, segn el tipo de biopsia realizada.
La biopsia por afeitado provee una seccin de piel confinada a la epidermis y dermis
superficial. Esta tcnica est totalmente contraindicada cuando se sospeche de
melanoma maligno, ya que el fragmento de piel obtenido no va a ser lo
suficientemente profundo para realizar el estudio histolgico completo. La biopsia por
afeitado se utiliza principalmente para remover neoplasias benignas como queratosis
seborreicas, acrocordones, verrugas planas, papilomas escamosos y ciertas lesiones
masculares pigmentadas como las eflides y lntigos.
Dentro de las desventajas de la biopsia por afeitado hay que mencionar la obtencin
de una muestra escasa y superficial que carece de la parte inferior de la dermis y del
tejido graso subcutneo. La cicatriz va a corresponder al tamao de la lesin original y
en algunos casos la hipopigmentacin residual puede ser muy evidente. La biopsia por
sacabocado (punch) es una de las mas utilizadas para el diagnstico de las
enfermedades inflamatorias y de neoplasias, Se utilizan instrumentos cilndricos que
poseen en uno de sus extremos un bistur en forma circular. Tienen dimetros entre 2
y 9 mm y proporcionan un fragmento cilndrico de piel desde la capa crnea hasta el
tejido graso subcutneo.

La biopsia incisional para mediana se usa en presencia de grandes lesiones tumorales,


por ejemplo, en el queratoacantoma, donde se realiza una incisin perpendicular a la
superficie de la piel desde el centro de la lesin hasta la base y luego se realiza una
segunda incisin paralela a la primera con varios milmetros de distancia.
La biopsia excisional es un procedimiento en el cual el rea aparentemente patolgica
es removida en su totalidad. Es la biopsia ideal en lesiones sospechosas de neoplasias
malignas particularmente en melanoma maligno.
15. Microscopa electrnica.La microscopa electrnica tiene mltiples aplicaciones en dermatologa pero su uso no
es frecuente por lo costoso y ausencia de estos instrumentos, que adems requieren
de un observador bien entrenado en este campo. Se utilizan no solamente para el
estudio estructural normal de la piel sino que su uso se ha extendido a la patologa
estructural. Todas las clulas de la piel y otras estructuras normales pueden ser
estudiadas con el microscopio electrnico. Las aplicaciones en patologa estructural
incluyen neoplasias, enfermedades caracterizadas por trastornos de la queratinizacin,
enfermedades pigmentarias, ampollares y el campo de la microscopa
inmunoelectrnica.
A continuacin se menciona las entidades en las cuales la microscopa electrnica ha
sido til en dermatologa: albinismo, melanoma amelantico, esclerosis tuberosa,
hipomelanosis, carcinoma metastsico cutneo, adenoma apocrino tubular, vitligo,
neurofibromatosis, incontinencia pigmenti, liquen aureus, verrugas virales, papulosis
bowenoide, eczema herptico, herpes simple vegetante, lupus eritematoso, amiloidosis
primaria sistmica, psoriasis, entrodermia psoriasiforme congnita, micosis fungoides,
sndrome de Sezary, sndrome de Hermansky-Pudlak, epidermolisis bulosa,
histiocitosis X, mastocitosis, mucopolisacaridosis y enfermedad de Hunter
NUEVOS PROCEDIMIENTOS DIAGNSTICOS:
Procedimientos realizados en los pacientes.DERMATOSCOPA 1
Consiste en la visualizacin directa de la lesin empleando el dermatoscpio, que es
una especie de lupa de microscopio con un aumento de 10x. El instrumento se coloca
sobre la lesin cutnea para ver sus detalles de superficie y lo que se transparenta de
ella a travs de la piel.
Est indicado principalmente en diagnstico diferencial de lesiones pigmentadas (nevi,
lentigos, melanomas) y su diferenciacin de lesiones vasculares.
El instrumento vale ms o menos 450 dlares y es transportable en un bolsillo,
requiere de aprendizaje y entrenamiento del operador
FOTOGRAFA DIGITAL COMPUTARIZADA
Permite guardar imgenes de buena resolucin de lesiones cutneas en el computador
para compararla con imgenes posteriores de las mismas lesiones y as hacer
seguimientos objetivos. La mquina fotogrfica cuesta ms o menos 500 dlares y hay
que disponer de un computador con memoria y velocidad altas.
VIDEO SCAN

Consiste en un equipo de fotografa de video que capta las caractersticas fotogrficas


de la lesin y las transmite al computador Permite ampliar la imagen hasta 100 o ms
veces dando una excelente resolucin. A mismo tiempo la imagen de la lesin se
puede conservar en la memoria del computador y tambin imprimir en papel
fotogrfico. Se usa en el control de nevi pigmentados, acn, vitligo, etc.
TELEDERMATOLOGA COMPUTACIONAL
Envo de imgenes computacionales de lesiones cutneas de pacientes a distancia
mediante circuitos de televisin.
TRICOGRAMA
Para realizar este procedimiento, se obtienen pelos del paciente en diferentes zonas
del cuero cabelludo. Estos pelos se estudian con un microscopio evaluando el
porcentaje de angenos, telgenos y catgenos. Estas cifras se comparan con el
patrn normal. Se usa en alopecias de cuero cabelludo principalmente en calvicie para
determinar el pronstico de la afeccin as como tambin para evaluar resultados del
tratamiento. Requiere de un profesional entrenado.
FOTOTRICOGRAMA
Se cortan los pelos a 0,5 cm del cuero cabelludo en un rea marcada de 2 cm. Se saca
una foto a color con el mximo de aumento posible y, se cuentan los pelos sobre una
plantilla cuadriculada ayudndose de una lupa. Se usa principalmente para fines de
investigacin de tratamientos de alopeca.
FOTOTEST
Cuando se sospecha una patologa provocada por la luz se irradia con una fuente
conocida de luz la piel del paciente para ver si se reproducen las lesiones cutneas
(como por ejemplo urticaria solar)
PRUEBAS DE CONTACTO Y FOTOCONTACTO
Este es un mtodo tradicional al cual se estn incorporando permanentemente nuevas
bateras con antgenos especficos para diferentes actividades o tipos de exposicin. En
ocasiones es necesario complementar el examen con exposicin a luz ultravioleta
(Tests del fotoparche)
PRUEBA DEL PARCHE ATPICO
Son pruebas con aero alrgenos. Se realizan aplicando una tela adhesiva para
desprender las capas superficiales y se aplica el alergeno se mide ala reaccin
inmediata y la retardada a las 24 y 48 horas.
El alergeno en concentraciones mayores de 1000 (5.000-10.000)PNU/gr (Unidades
nitrgeno proteico por gramo de alergeno) en petrolato es el procedimiento ms
adecuado. Existe una correlacin directa entre la prueba del parche atpico y los
niveles de IgE especifica srica anti alergnica. En ocasiones las pruebas del parche
pueden originar alergia. La prueba es mas positiva en pacientes que presentan la
erupcin en zonas expuestas.
Existira un subgrupo de pacientes con dermatitis atpica que reaccionan con aero
alergenos, tienen prueba de parche atpico positiva y niveles elevados de la IgE
especfica contra el mismo alergeno.
INTRADERMO REACCIONES Y PRICK TEST
Son tambin mtodos de rutina a los cuales se les est incorporando

permanentemente nuevos alergenos o antgenos. Se realiza una lectura inmediata y


una a las 24-48 horas para medir una respuesta retardada.
La evaluacin inmediata se mide por la formacin de eritema, roncha y/o la formacin
de ampolla. Se emplea en la prctica clnica para detectar alergenos alimentarios e
inhalantes. Tambin se utiliza para medir reacciones vasomotoras frente sustancias
como histamina, metacolina, sustancia P tripsina, etc.
DETERMINACIN DE ALERGIA A ALIMENTOS CON DOBLE CIEGO
El paciente debe eliminar los tratamientos sistmicos y todos los alimentos
sospechosos por 2 semanas y se les administra el alimento sospechoso en polvo,
congelado o en cpsulas. Se utiliza dextrosa o un alimento inocuo como placebo. Los
alergenos o placebo se administran 2 veces al da y se registran las manifestaciones
cutneas, digestivas o respiratorias que presenta el paciente. La cantidad de alimento
administrada se correlaciona con la intensidad de la reaccin observada.
IMPREGNACIN CON CIDO ACTICO
Se usa mucho en lesiones vulvares y de cuello uterino para detectar sectores con
presencia de virus papiloma.
Mtodos no invasivos para evaluar las caractersticas fsicas de la piel.MICROSCOPA CONFOCAL
El microscopio confocal permite visualizar la piel y sus anexos in vivo en forma
tridimensional. Es una tcnica no invasiva mediante la cual se pueden obtener
imgenes de secciones del tejido estudiado sin que realmente se haya realmente
seccionado o fijado.
Recientemente se ha incorporado un microscopio confocal que emite rayos lser y
permite que monocapas de clulas epidrmicas pueden ser claramente distinguidas in
vivo. (Confocal laser Scanning Microscopy). La fuente de lser es cercana al infrarojo
(NIR, 830 nm)y se asocia con una unidad para escaner muy rpida (Vivascope
Scanning Unit 1000 de Lucid Ltd, USA) que permite producir 20 imgenes por segundo
y permite explorar la piel 150 mm. (dermis papilar). Tcnica no invasiva de alta
resolucin y contraste. Se ha utilizado en psoriasis, previo a microciruga de Mohs para
ver mrgenes quirrgicos, en queratosis actnicas y en carcinoma baso y
espinocelulares.
ESPECTROSCOPIA IN VIVO
Se basa en la medicin de la absorcin de diferentes longitudes de onda por los
diversos componentes de la piel. Se han diseado espectroscopios con luz visible,
ultravioleta infrarojo. En Dermatologa se emplea para medir eritema y pigmentacin.
Es til para reconocer tumores pigmentados benignos y malignos. Tambin se puede
utilizar para identificar frmacos y depsitos se sustancias en la piel.
EXPOSICIN EPICUTNEA REPETIDA DE UN IRRITANTE SE SUPERFICIE
Es evaluada en forma visual y por la determinacin de la prdida de agua
transepidrmica (TEWL) que se mide con un evapormetro. Como por ejemplo, la
prdida de agua despus de la aplicacin de un irritante local como el lauril sulfato de
sodio), esta aumentada en dermatitis atpica y psoriasis lo cual se correlaciona con la
gravedad de la enfermedad. Esta correlacin no existe con la disminucin de la friccin
ni la capacitancia de la piel atpica.

OTROS MTODOS NO INVASIVOS


Diversas tcnicas utilizadas en investigacin permite evaluar las caractersticas de la
piel as como tambin el efecto que agentes teraputicos ejercen sobre las propiedades
de la piel sana o enferma. Entre estas destacan la profilometra de rplicas de piel
(mide la topografa cutnea), la medicin del grado de friccin (friccionometro) y la
medicin de la capacitancia la cual se realiza con un cornemetro. La piel seca se
caracteriza por valores aumentados de aspereza, reduccin del nmero de cumbres
topogrficas y la friccin y capacitancia estn disminuidas. Otro procedimiento de este
tipo es el de la microdilisis cutnea la cual tiene posibilidades diagnticas y
teraputicas.
Exmenes de imaginologa.ECOTOMOGRAFA
Utiliza ultrasonido como fuente de energa. Es energa no ionizante. Se transmite como
una onda de presin mecnica atenundose por reflexin, refraccin, dispersin y
absorcin a medida que se aleja de la fuente emisora. Las imgenes las formas el
ultrasonido reflejado que vuelve a la fuente emisora y que se llama ECO. Sinnimos
ecografa, ecotomografa, ultrasonografa o ultrasonido diagnstico. Es inocuo, bien
tolerado, asequible, de rpida ejecucin y no tiene contraindicaciones. Es subjetivo
(dependiente del operador) y requiere entrenamiento.
Indicado en aumento de volumen de partes blandas para descartar tumores,
desgarros, hemorragias o cuerpos extraos, adenopatas, quistes.
ECODOPPLER Y ECODOPPLER COLOR
El doppler acta en forma similar al radar de sonido siendo en este caso los eritrocitos
los que actan como mviles. Una modificacin reciente es el ecodoppler de
ultrasonido y de color que permite visualizar el desplazamiento de los glbulos rojos
por las venas (azul) y arterias (rojo). Se usa para el estudio de forma y funcin de
estructuras vasculares del sistema venoso de extremidades inferiores y sistema
arterial de extremidades inferiores principalmente.
PLETISMOGRAFA
Se utiliza para medir volumen sanguneo en los vasos arteriales y venosos. Se usa un
manguito similar al de toma de presin arterial, pero en este caso est conectado a un
pletismgrafo que mide volumen en lugar de presin. Una reciente modificacin es la
fotopletismografa que mide los cambios de volumen mediante cambio de colores. El
mtodo es til para diagnosticar obstrucciones venosas.
TOMOGRAFA AXIAL COMPUTARIZADA (TAC)
Serie de imgenes de secciones transversas continuas de un tejido u rgano que
miradas en conjunto proporcionan una informacin tridimensional de las estructuras.
Usa un tubo de Rayos X pero con detectores que miden la atenuacin de los haces de
rayos X que pasan a travs de secciones del cuerpo desde ciertos ngulos diferentes, y
con estos valores un computador reconstruye imgenes del interior del objeto o sujeto
examinado. Es muy sensible y permite medir cuantitativamente la densidad de cada
estructura o parte de ella (metstasis, abcsesos, hematomas, infartos). Estos
resultados se mejoran con contraste positivo (yodado o baritado) o negativo (C02 o
aire) o contraste endovenoso. Otro sinnimo de este procedimiento es Scanner.
Un nuevo procedimiento de este tipo es la tomografa ptica de coherencia que es de
mayor resolucin que la tomografa axial y tiene una penetracin en la piel de 1mm.

RESONANCIA MAGNTICA
No emplea rayos X sino una combinacin de campos magnticos potentes y pulsos de
radiofrecuencia para obtener imgenes seccionales del cuerpo humano.
Se requiere de un resonador con un imn en forma de tnel donde se introduce al
paciente acostado en una camilla desplazable. El imn alinea los protones y luego los
pulsos de radiofrecuencia los alteran y emiten energa que es recogida por bobinas que
codifican digitalmente la seal y la envan al computador que forma imgenes
seccionales y las imprime en placas radiogrficas. Tiene gran resolucin de contraste,
no emplea radiaciones ionizantes y no tiene efectos biolgicos apreciables.
En piel se usa en tumores benignos o malignos de partes blandas o hueso para
evaluacin prequirrgica y para los controles postratamiento. Sus limitaciones son el
costo (doble valor que el TAC), el tiempo (45 min. en el interior de la mquina), y su
sensibilidad a los movimientos del enfermo. Esta contraindicada cuando el paciente
tiene dispositivos con activacin elctrica o mecnica como marcapasos, etc. tambin
en embarazo, personas que tengan tatuajes o maquillajes que contenga partculas de
hierro y personas con claustrofobia u obesidad porque stos ltimos no caben en el
cilindro.
CINTIGRAFA CON YODO RADIACTIVO O TECNECIO MARCADO
Evaluacin cuantitativa de captacin y eliminacin del radiofrmaco por un tejido
especfico, Tcnica no invasiva. Basta va oral o puncin venosa. Implica baja dosis de
radiacin. Tiene buena sensibilidad para detectar alteraciones funcionales.
Cuantificable mediante computador Permite seguimiento de procesos fisiolgicos a lo
largo de minutos u horas. No ocasiona efectos colaterales y puede ser usado en nios
o pacientes crticos. El tecnecio necesita adems una gamma cmara, se administra
por va endovenosa y el examen se realiza a los 20 minutos.
Una aplicacin de gran utilidad para detectar metstasis de melanomas es la
linfoescintigrafa cutnea. Se inyecta en forma intradrmica un radiocoloide en el sitio
del melanoma primario. Se utilizan compuestos de tecnecio-99m tales como el 99m
Tc-SC, 99 Tc-sulfuro de antimonio o el 99mTc-trisulfuro. La imagen de la gamma
cmara muestra el flujo del radiocoloide a travs de los linfticos subdrmicos hacia
los ganglios. Se localizan en esta forma los ganglios ms vecinos al tumor o centinelas.
Se extraen estos ganglios y se realiza una biopsia de estos. Si el primer ganglio
centinela es negativo los restantes tambin estarn libres de tumor. En ese caso el
vaciamiento ganglionar total no es necesario.
Existen varias modificaciones de la tcnica de linfocintigrafa. Se puede realizar en
forma intraoperatoria inyectando junto al radio coloide un colorante azul isosulfan al
1%, linfazurir azul con lo cual aumenta la sensibilidad de la tcnica a un 99% 20.22
Medicina nuclear.Test de C14 en aire espirado: Deteccin no invasiva de helicobacter Pilori en el rea
gastroduodenal. Se administra al paciente una cpsula de rea marcada con C14 y
luego se mide el C02 marcado en el aire espirado.
El helicobacter Pilori tiene una enzima que desdobla la urea en amonio y C02
detectndose as su presencia. Es til en diagnstico y seguimiento del tratamiento
especialmente en rea duodenal (90% HP) y esta en estudio su deteccin en roscea y

algunas urticarias, etc.


Anlisis de muestras de pacientes.MAPEO CON INMUNOFLUORESCENCIA
Se refiere al estudio de un tejido en sus diversas estructuras empleando diferentes
marcadores fluorescentes y al mismo tiempo midiendo la cantidad de fluorescencia.
Una aplicacin de este mtodo es el empleado para reconocer antgenos segn su
localizacin en la membrana basal empleando el mtodo de separacin con cloruro de
sodio en epidermis bulosa. En este caso se emplean anticuerpos marcados preparados
contra antgenos especficos de membrana.
ENZIMOINMUNOENSAYO
Es similar a los anteriores pero se emplea istopos Inmunoelectro ultaramicroscopa
enzimas de restriccin (endonucleasas).
Northern blot: Permite estudiar el ARN de la misma forma Western blot: Se utiliza para
analizar antgenos proteicos separando las protenas mediante electroforesis y
transponindolas a una membrana slida. Esta se incuba con anticuerpos que se
detectan luego con sondas marcadas radiactivamente o con enzimas. Se incorporan los
antgenos conocidos a un gel de nitrocelulosa y se les incuba con el suero problema y
un marcador para evidenciar la unin antgeno anticuerpo. Una vez incorporado el
suero, se hace una inmunoglobina que se une al antgeno. Se han desarrollado nuevos
marcadores que dan mayor sensibilidad a la tcnica como ocurre con la
quimiolumuniscencia que son de utilidad para estudiar infecciones virales.
ELISA
Como hemos visto previamente este mtodo permite reconocer antgenos
visualizndolos por una reaccin enzimtica. A diferencia del inmunoblotting no
denatura al antgeno. Un importante aporte con este mtodo es el ELISA con
desmoglena lo cual permitir hacer reaccionar el suero de un paciente con pnfigo y
poder identificar de forma rpida y segura el tipo de pnfigo.
PCR (Reaccin en cadena de Polimerasa)
Permite identificar trozos de protenas mediante la identificacin de la secuencia de sus
bases. Existen trozos preparados llamados sondas (primers). Es muy sensible pero a
veces puede llevar a error por contaminacin de la muestra. Se usa en infecciones
virales (herpes, simple versus zoster virus papiloma y su tipificacin, citomegalovirus,
HTLV HIV Epstein Barr herpes 6, 7, 8, sarampin, adenovirus, parvovirus (eritema
infeccioso), varicela-zoster, hepatitis B. Tambin en infecciones bacterianas, micticas,
parasitarias y neoplasia, leucemias linfomas y melanomas. Tambin en enfermedades
genticas (epidermolisis bulosa simple, etc)
Un mtodo derivado del PCR es el PCR in situ que consiste en amplificar el ADN blanco
y luego se detecta mediante hibridizacin in situ con sondas ADN o ARN. Otro
procedimiento de PCR modificado es el TCR G que permite evaluar la clonalidad de los
linfocitos T de gran utilidad para la clasificacin de linfomas T Consiste en la
amplificacin por PCR del reordenamiento gentico del linfocito T (TCR).
HIBRIDIZACIN IN SITU
Es la unin desigual de fragmentos marcados de ADN o ARN de una hebra con
secuencias complementarias de ellas llamadas sondas en condiciones apropiadas para

formas uniones estables. Hay tcnicas isotpicas (marcadas con elementos


radioactivos) y tcnicas no isotpicas o calorimtricas (usan biotinao digoxigenina) que
son ms rpidas y ms baratas.
Se usa para detectar bajo numero de copias de virus como agentes infecciosos o
carcingenos.
ANTGENOS DE REGIONES DE ORGANIZACIN NUCLEOLAR (AGNOR)
Son segmentos de ADNr que transcriben el ARNr asociado a protenas argirfilas. La
unin de estas protenas con la plata se evidencia en la microscopa ptica como
puntos negros en los nucleolos. El nmero de antgeno-Nor en la interfase nucleolar
refleja la actividad de sntesis y proliferacin celular. Tambin se puede evaluar la
imagen de antgeno-Nor por video computadora. Es una tcnica sencilla y eficaz para
diferenciar patologa benigna y maligna.
ESTUDIOS INMUNOHISTOQUMICOS COMBINADOS
Ganglio centinela:
El corte seriado de ganglios negativos con biopsia rpida, revela metstasis ocultas
que incluyen tincin con anticuerpos monoclonales para antgenos S 100 y HMB 45 y
un mtodo empleando la reaccin de transcripcin en cadena de polimerasa reversa o
RT-PCP para identificar la presencia de antgenos asociado al melanoma tales como la
deteccin de ARN mensajero de los antgenos tirosinasa, MAGE-1, GAGE, MART-1
Cultivos de tejidos:
Se han cultivado queratinocitos, melanocitos, fibroblastos, etc. Es una tcnica compleja
y requiere contar con personal y laboratorios adecuados. Uno de sus principales usos
es hacer piel artificial para cubrir quemaduras extensas. Se emplea en el diagnstico
del genoma y para realizar procedimientos de ingeniera gentica. Su uso principal es
en investigacin.
PROCEDIMIENTOS BACTERIOLGICOS
Cultivos microbiolgicos:
Son tcnicas clsicas que estn incorporando permanentemente nuevos medios de
cultivo para las diferentes variedades de microorganismos.
Carga Viral:
Se cuantifica el RNS Viral en sangre perifrica mediante una RT-PCR (Transcripcin
reversa) en diluciones seriadas de sangre del paciente. Permite cuantificar replicacin
viral activa. Es automatizado.
ESTUDIOS SEROLGICOS Y SANGUNEOS
En atopa y enfermedades alrgicas se han incorporado un nmero importante de
tcnicas entre estas pueden mencionarse.
Estudio en clulas sanguneas, adems de determinar el nmero y las caractersticas
morfolgicas celulares se pueden estudiar la liberacin de productos celulares tales
como degranulacin de los basfilos, liberacin de histamina por leucocitos y niveles de
triptasa de los mastocitos entre otros.
PROTENA CATINICA DE LOS EOSINFILOS (ECP)

Se determina en el suelo del paciente. Es un buen marcador de severidad en la


dermatitis atpica. La protena eosinoflica X (PEX). PEX en las heces es ms efectiva.
Baja a niveles normales al suspender la dieta. Es un mtodo no invasivo.
NIVELES PLASMTICOS Y URINARIOS DE HISTAMINA
En orina se estudia la N-methyl histamina que es el metabolito en la orina de la
histamina. Este es un buen parmetro para estudiar hipersensibilidad por alimentos. La
determinacin de niveles sanguneos y en orina de 24 horas son de utilidad para
evaluar los pacientes con mastocitosis.
Determinacin de alfa-1 antitripsina se determina por inmunodifusin radial. La
deficiencia de esta enzima se ha detectado en paniculitis de Weber-Christian, sndrome
de Ehlers-Danlos, enfisema, cirrosis alcohlica, diabetes mellitus, Merkelsson
Rosenthal, sarcoma de Kaposi y en el SIDA.
Otras mediciones:
a. Inhibidor de C1 esterasa. Esta disminuido en el edema angioneurtico hereditario.
b. Niveles de glucagon, aumenta en el glucagonoma.
c. cido 5 hidroxi indol actico. Aumenta en la orina a mas de 6mg en las 24 horas en
el sndrome del carcinoide.
LABORATORIO INMUNOLGICO
En la especialidad se utilizan diversas tcnicas inmunolgicas para determinar los
factores o agentes causales de una determinada dermatosis. Entre ellas destacan las
pruebas cutneas, las pruebas de sensibilizacin, los estudios serolgicos y los
estudios inmunopatolgicos.

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