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Qumica de Productos Naturales 1

Laboratorio 1
28/08/2015

Muestreo y Determinacin del Porcentaje de Humedad de las Hojas de Tectona grandis.


Ryfkogel Del Cid, Bianca M.
Universidad Autnoma de Chiriqu-Facultad de Ciencias Naturales y Exactas.
Escuela de Qumica Qumica de Productos Naturales.
Resumen.
Para la obtencin del extracto y determinacin del
porcentaje de humedad de las hojas de Tectona grandis,
se realiz un muestro estratificado al azar en el bosque
forestal de la Universidad Autnoma de Chiriqu
(8.43458 Latitud Norte, 82,45254 Longitud Sur). Para
obtener las muestras, se seleccionaron arbustos jvenes
entre 1,5 m y 3 m, de los cuales aleatoriamente se
extrajeron hojas tiernas y maduras. La determinacin
del porcentaje de humedad se realiz mediante prdida
de peso en el horno a 105C, realizando pesadas de las
muestras cada 30 minutos durante 2 horas, hasta
obtener un peso constante, obtenindose un valor
promedio de 77,6% de humedad, el cual se encontr un
poco alejado del porcentaje de humedad reportado en la
literatura. Finalmente, para la obtencin de los
extractos se realiz la maceracin de las hojas de
Tectona grandis en medio acuoso y etanlico,
observndose que la obtencin de extracto es ms
rpida en presencia de agua y ms lenta en presencia de
etanol. Adems, en la extraccin etanlica la intensidad
de color fue mayor (rojo vino oscuro) que en medio
acuoso (rojo vino plido). Debido a que la composicin
qumica de los vegetales vara entre las diferentes
especies, en las distintas partes de la planta y segn sus
estados fenolgicos, la seleccin de la tcnica de
muestreo es fundamental para obtener una muestra
representativa que sea objeto de estudio en el
laboratorio. Adems, la seleccin de la muestra es
importante puesto que el anlisis generar resultados
confiables, siempre y cuando la muestra seleccionada
sea la ideal.
Palabras claves.
Extracto, follaje, humedad, maceracin, muestreo,
Tectona grandis.
bryfkogel_7227@hotmail.com

Objetivos.
a. Llevar a cabo un muestreo en el bosque forestal de
la Universidad Autnoma de Chiriqu para obtener
muestras representativas de Tectona grandis.
b. Determinar el porcentaje de humedad en las hojas de
plantas de Tectona grandis mediante diferencia de
peso del material seco y hmedo.
Marco terico.
Tectona grandis pertenece a la familia Verbenaceae, es
una especie latifoliada y helifila muy susceptible a la
competencia interespecfica en su fase inicial de
crecimiento (Briscoe,1995). En condiciones naturales la
teca requiere de temperaturas medias anuales entre
21C y 28C; y precipitacin media anual que vara de
760 a 5000 mm, preferentemente entre 1000 a 1800
mm/ao (Flinta, 1960), con una estacin seca bien
definida entre tres a siete meses, y en sitios con
altitudes desde el nivel del mar hasta los 1000 msnm
(Briscoe, 1995).
Por otro lado, el anlisis de plantas o anlisis foliar se
refiere generalmente al anlisis para determinar el
contenido de un nutriente en las hojas de las plantas.
Adems, el anlisis, muestreo o recoleccin foliar
requiere generalmente de caractersticas definidas
como: altura, hora, desarrollo de la planta, entre otras,
ya que la planta vara en nutrimentos bajo estas
condiciones, y en otros casos particulares, de la especie
de planta. Dicho anlisis incluye el % de humedad, el
peso en seco, los macro y micronutrientes, entre otros.
(Hochmuth, 2008).
Considerando el contenido de metabolitos y la
posibilidad del impacto de la planta de Teca no solo en
la industria maderable, sino en las industrias
farmacuticas y cosmtica (Castro, 1998), se ha
realizado la determinacin del porcentaje de humedad

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en las hojas maduras de esta planta, para conocer el


grado de dispersin de los metabolitos secundarios y la
influencia de las condiciones acuosas en las que se
encuentran estos metabolitos en estudios posteriores
que involucren la extraccin, separacin e
identificacin de los metabolitos secundarios por medio
de un anlisis fitoqumico.

Se
anot
la
temperatura,
porcentaje
de
humedad % H., hora,
intensidad de luz y
localizacin
con
Google Maps.

Se realiz un muestreo
aleatorio estratificado en el
bosque forestal de la
Universidad Autnoma de
Chiriqu, en el que se
seleccion arbustos jvenes
de 1,5 m - 3 m de altura.

Materiales.
Descripcin
Vasos
Qumicos
Balanza
semianaltica
Bandeja de
Aluminio
Probetas
Bandeja de
Aluminio
Horno

Capacida
d
100mL y
250mL
Mx 200g
+/- 0,01g
-

Cantidad

25mL y
100mL
-

Mx
250C

Multiparmetr
os fsicos
medioambient
al

3
1
1

Hojas de Teca
120g
Tijera
1
Cinta mtrica
15metros
1
Bolsa plstica
1
Nota: (-) No hay referencia sobre el material

Procedimiento.

Aleatoriamente y en
zigzag, se colectaron
hojas
maduras
cortadas a una altura
de 1,5 m a 3 m.

Las hojas colectadas, se


colocaron en bolsas plsticas
y
fueron llevadas al
laboratorio para su anlisis.

B. Determinacin del Porcentaje de Humedad.


Se cortaron las
hojas de Teca
en pequeos
trozos.

En un vaso
qumico
se
pes 1,03 g de
trozos de hojas
de Teca.

Se calent en
el horno a
105C durante
2 horas.

Calculamos el
%H:
(peso
perdido/peso
inicial) *100

Pesamos
el
vaso con la
muestra seca.

Dejamos
enfriar.

C. Maceracin.
Se cortaron las hojas
de Teca en pequeos
trozos.

A. En un mortero se
maceraron 60g de
hojas
de
Teca,
utilizando
Etanol
como solvente.

En ambos casos (A y
B) se obtuvieron y
guardaron
los
extractos para anlisis
posteriores.

B. En otro mortero se
maceraron 60g de
hojas
de
Teca,
utilizando agua como
solvente.

A. Muestreo

Resultados obtenidos.
En el estudio realizado sobre la determinacin del
porcentaje de humedad, las condiciones ambientales en
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el lugar de muestreo (Figura 1.) se presentan en el


Cuadro 1, donde se logra observar un porcentaje de
humedad ambiental relativamente alto a una
temperatura de 31. 6 C.
Cuadro 1. Datos del sitio muestreo de hojas de Tectona
grandis.
Ubicacin
Coordenadas

Iluminacin
% Humedad
Temperatura
Altura de las hojas
Ruido

Parque Forestal de la
UNACHI
8.43458 Latitud Norte;
82,45254 Longitud
Sur
1410 Lux
72,4%
31,6 C
1,5 m y 3 m
54db

Humedad (%)=

Peso Perdido(g)
Peso inicial(g)

x 100

(La Rosa et al., 2011).

En la obtencin de los extractos de la hojas de Tectona


grandis, se realiz una maceracin manual empleando
dos solventes, etanol al 96% y agua a temperatura
ambiente. Los extractos obtenidos presentaban dos
coloraciones diferentes, el etanlico era ms intenso
(rojo vino) y el acuoso las traslucido (rojo plido), los
mismos se almacenaron a baja temperatura y en
envases color mbar.
Cuadro 3. Datos la extraccin sobre hojas de Tectona
grandis.
Masas
iniciales

Solvente

Volumen

Color del
extracto

60 g
60 g

Etanol
Agua

100 mL
50 mL

Rojo vino oscuro


Rojo vino plido

Figura 1. Coordenadas del sitio de muestreo.

En el Cuadro 2 se presentan los resultados obtenidos


del anlisis del clculo del porcentaje de humedad, en
la que las hojas estudiadas presentaron un 77,6 % de
humedad.

Figura 2. Maceracin de las hojas de Tectona grandis con


etanol 96%.

Cuadro 2. Datos obtenidos en la determinacin del


porcentaje de humedad de las hojas de Tectona grandis.
Peso de la muestra inicial (g)
1,03
Peso del vaso vaco (g)
61,26
Vaso + muestra (g)
61,49
Peso de la muestra seca (g)
0,23
Peso perdido (g)
0,80
% Humedad
77,6%
*Las muestras fueron pesadas cada 30 min, hasta obtener un
peso constante.
* Para la determinacin del porcentaje de humedad se
emple la frmula:

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Discusin de resultados.
Para obtener los extractos y porcentajes de humedad, de
las hojas de Tectona grandis, se realiz un muestreo
aleatorio estratificado, que es una tcnica de muestreo
basada en el criterio que la seleccin debe contemplar
los estratos que se desean estudiar (Abarca, 2003). El
muestreo se desarroll en el bosque forestal de la
Universidad Autnoma de Chiriqu (8.43458 Latitud
Norte, 82,45254 Longitud Sur). Para obtener las
muestras, se seleccionaron arbustos jvenes entre 1,5 m

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y 3 m, de los cuales aleatoriamente se extrajeron hojas


tiernas y maduras.

de la planta as como en algunos aspectos relacionados


con la cubierta vegetal (Reuter and Robinson, 1998).

Debido a que la composicin qumica de los vegetales


vara entre las diferentes especies, en las distintas partes
de la planta y segn sus estados fenolgicos, la
seleccin de la tcnica de muestreo es fundamental para
obtener una muestra representativa que sea objeto de
estudio en el laboratorio. Adems, la seleccin de la
muestra es importante puesto que el anlisis generar
resultados confiables, siempre y cuando la muestra
seleccionada sea la adecuada (Via, 2013).

Es por ello es por ello que hay que tener en cuenta


estos factores a la hora de realizar el muestreo para no
seleccionar hojas con alto contenido de agua y de esa
manera permitir en anlisis posteriores la determinacin
de algunos nutrientes o la extraccin metabolitos
secundarios.

La determinacin del porcentaje de humedad se realiz


mediante prdida de peso en el horno a 105C,
obtenindose un valor promedio de 77,6%. Este mtodo
se fundamenta en la evaporacin del agua contenida en
la muestra, determinndose por diferencia de peso entre
el material seco y hmedo. El valor obtenido est
alejado del porcentaje de humedad reportado para el
tronco, cuyo valor es de 72,1 % segn Abarca (2003).
El resultado relativamente alto puede atribuirse a que la
mayora de las hojas eran de follaje reciente, las cuales
contienen an mucha agua en su interior y clima del
sitio donde se realiz el muestreo es hmedo tropical,
propio de la regin (Somarriba et al., 1999). Adems de
esto, las nervaduras contribuyen a un aumento del peso
y aumentan el porcentaje de error durante el ensayo
(Bates, 1971).
Aunado a esto, se debe considerar que el contenido de
agua libre en la plantas se ve afectado por diferentes
factores ambientales como lo son la intensidad de luz,
temperatura, humedad, y el viento. La luz incide sobre
el desarrollo y/o crecimiento de las plantas, puesto que
con intensidad insuficiente se producen ahilamientos,
cambios de forma de limbos foliares y dimorfismo
foliar; estratificacin como resultado de la lucha por la
luz; las especies de sombra viven en las partes menos
iluminadas del bosque (Begon, Harper, y Townsend,
1995). El viento influye en la distribucin (transporte
de disporas) y en la morfologa de plantas y
vegetacin. La temperatura influye en la transpiracin
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Respecto a la metodologa, un secado por medio de


calor no es tan efectivo si las muestras secas sern
analizadas posteriormente ya que existe la posibilidad
de volatilizacin o descomposicin de los metabolitos,
por ello, se debe considerar otros mtodos como la
deshidratacin por medio de microondas o liofilizacin
que permiten tener muestras con un mejor secado,
garantizando la integridad de la misma al no utilizar
calor como condicin fsica para eliminar el contenido
de agua, permitiendo determinaciones analticas ms
confiables a partir de la muestra anhidra (Della Rocca y
Mascheroni, 2010; Valencia, Rodriguez y Giraldo,
2011).
Para la obtencin de los extractos, se realiz la
maceracin de las hojas de Tectona grandis en medio
acuoso y etanlico. Se maceraron 60 g de muestra con
agua y 60 g con etanol. Se observ que la obtencin de
extracto es ms rpida en presencia de agua y ms lenta
en presencia de etanol. La maceracin provoca el
rompimiento por friccin de la pared celular vegetal,
permitiendo la liberacin de los componentes activos.
Adems, en la extraccin etanlica la intensidad de
color fue mayor (rojo vino oscuro) que en medio
acuoso (rojo vino plido), esto se debe a que el etanol
es menos polar que el agua, lo que le permite
solubilizar mayor proporcin de componentes de la
planta, como las antocianinas y las clorofilas,
resultando en una mayor intensidad de coloracin.
Adems, el etanol atraviesa las clulas de la planta en
una sola direccin, creando un equilibrio entre el
solvente dentro y fuera de la clula. De esta manera, al
adicionar nuevas proporciones de etanol, los

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componentes de la planta ceden de manera progresiva


(Rojas, 2009).
Conclusiones.
En la realizacin del muestreo y en la obtencin de los
extractos de las hojas de Tectona grandis, se pudo
llegar a las siguientes conclusiones:
a. El diseo de muestreo es una de la partes ms
importantes de toda investigacin de campo, ya que
de ello dependen mucho el desarrollo de la
investigacin, nuestros resultados y la relevancia
estadstica de los mismos, debido a que las
condiciones en que se toma la muestra est
relacionada directamente a la calidad de los
resultados segn los parmetros que se analizan.
b. Las condiciones medioambientales en la que se
realiz el muestreo de la hojas de Tectona grandis
fueron ptimas para el almacenaje y transporte de la
muestra considerando la poca lluviosa del ao.
c. El porcentaje de humedad obtenido en las hojas de
Tectona grandis fue relativamente alto y est bien
relacionado con la temporada de lluvias que se
registran en la regin de la Ciudad de David, que
proporcional a la humedad relativa en el lugar de
muestreo.
d. El porcentaje de humedad obtenido puede diferir con
otros ensayos realizados, ya que en el estudio
realizado se contemplaron las enervadoras de toda la
hoja de la Tectona grandis, que aportan un contenido
hdrico considerable.
e. El tamao de la muestra de hojas de Tectona grandis
que fue sometida al secado influye directamente en
la calidad de secado para la determinacin del
porcentaje de humedad.
f. La extraccin en medio etanlico de las hojas de
Tectona grandis permite una mayor obtencin de
pigmentaciones en comparacin con una extraccin
acuosa, con una relacin indirecta respecto a la
polaridad de los dos solventes.
g. En el proceso de extraccin, una maceracin
continua es eficaz si es realizada por un dispositivo
mecnico, ya que este garantiza mayor superficie de
contacto del solvente con la muestra en comparacin
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con la maceracin manual, que implic un desgaste


fsico.
h. El almacenaje de los extractos es fundamental si
estos son de inters analtico, ya que factores como
la temperatura y la luz pueden descomponer u oxidar
los metabolitos presentes, por lo que es
indispensable almacenarlos a bajas temperaturas y
en envases color mbar.

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