O CAPITULO 14 Vinc Segunda Edicion

CICLO CELULAR 1
737
1) CUANDO SE ROMPE EL CONTROL DE LA EXPRESION GENICA
741
2) PROTO-ONCOGENES, ONCOGENES Y GENES TUMOSUPRESORES

3) MECANISMOS QUE PROPICIAN LA DIVISIN DESCONTROLADA
DE UNA CLULA YA DIFERENCIADA 746
4) PROTENAS Y MECANISMOS PROTAGONISTAS DEL CONTROL
EN EL CICLO
CELULAR 748
a) La Familia de las Ciclinas 748
b) Kinasas Dependiente de Ciclinas (CDKS)
751
c) Mecanismo de Accin del Complejo Ciclina Kinasa 752
5) COREPRESORES DE LA TRANSCRIPCIN QUE NO SE UNEN
DIRECTAMENTE AL DNA COMO LO SON pRB, p107 y p130
753
a) Factor pRB 753
b) Factores p107 y p 130
754
6) FACTORES DE LA TRANSCRIPCIN QUE SE UNEN AL DNA

COMO p53 y E2F.
754
a) Factor p 53 754
b) Factor p 73 757
c) Factor E2F 757
7) APNDICE - CASPASAS - DIFERENCIA ENTRE NECROSIS Y
APOPTOSIS 758-60
8) INHIBIDORES DEL COMPLEJO CICLINA/CDK QUE INTEGRAN
LA FAMILIA CIP/KIP Y WAF 1 761
a) Protenas de la familia INK4 son p16, p19, p18
b) Familia de inhibidores incluye a los tipo CIP/ KIP
761
762
9) OTROS MODULADORES 762

a) Factor MDM2 762
b) Factor CDC 25 A, B Y C 762
c) Complejos Ligantes de Ubiquitina APC Y SCF
763
CICLO CELULAR 2
10) CICLO CELULAR
765
738
743
11) REPLICACIN EN LA FASE S 769

12) PUNTOS DE CONTROL G1/S, S, G2/M Y M
a) Primer Sitio de Control G1/S 772
b) Segundo Sitio de Control en la fase S
772
775
c) Tercer Sitio de Control en G2/ M

778
d) Cuarto Sitio de Control a Nivel de la Mitosis
(Sitio M), durante la formacin del Huso Mittico
779
13) EXPRESIN DE LOS GENES

784
FACTORES BASALES DE TRANSCRIPCIN ASOCIADOS
A LAS RNA POL I, II Y III COMO LO ES TFIIH
1) RNA pol en Eucariotes 784
2) Factores de Transcripcin 785
14) TRANSCRIPCIN BASAL
788
15) TRANSCRIPCIN INTENSIFICADA
791
739
784
Hctor Rocha L. Ciclo Celular y Control de la Expresin de los Genes
740
En este captulo se describirn primero los Mecanismos que controlan el Ciclo

Celular para continuar luego con la descripcin del Ciclo mismo y finalmente el
control de la expresin de los genes.
1) CUANDO SE ROMPE EL CONTROL DE LA EXPRESION GENICA.
Se asume que un organismo animal o vegetal se encuentra formado por un conjunto de
clulas diferenciadas, que se encuentran fuera del Ciclo Celular (fig. 1 15), es decir en la
etapa Go o de reposo. Las caractersticas especficas de sus tejidos dependern por un
lado de los genes que se estn expresando y por el otro lado de aquellos que
permanezcan silenciosos. Este proceso se encuentra a su vez vigilado por la actividad de
otros genes de cuya expresin depende que este panorama sea estable. Como resultado
de ello, podemos distinguir distintos tejidos y rganos diferenciados capaces de ser
desarrollados a partir de un mismo genoma.
El hecho de que una clula entre al Ciclo Celular se debe al producto de mltiples
seales cuyo origen puede ser tanto externo como interno. Estas seales son a su vez
capaces de desencadenar la orquestacin de una serie de eventos que controlan este
proceso. Entre las seales podemos encontrar algunas de origen qumico, otras de origen
elctrico y algunas producidas por contacto entre las mismas clulas. Todas ellas se
encuentran regulando por retroalimentacin, la expresin de los genes tanto del
crecimiento, como de la proliferacin de las clulas diferenciadas.
M (mitosis)
G2/M (sitio
de control)
G2
Etapa
de
Reposo
o Go
G1
G1/S (sitio de control)

Fig. 1 15. Ciclo Celular donde se observan los principales puntos de restriccin ubicados en
G1/S y en G2/M antes de la Mitosis.
La clula de un tejido diferenciado se encuentra normalmente en estado de reposo o G0.

Por otro lado, en el intervalo G1 ( gap 1 en ingls) del Ciclo Celular, conocido como
periodo de tiempo antes de la sntesis o etapa S (fig. 1 15), se reciben seales tanto del
741
ambiente celular como del estado interno de la clula. En este periodo G1, se prepara a la
clula para la replicacin del DNA que ocurre en la etapa S (por synthesis). En esta
ltima etapa, se sintetizan las hebras hijas del DNA, replicando los cromosomas mediante
el empleo de un programa interno. Este se caracteriza por no recibir modulacin desde el
medio externo como ocurre en G1. Posteriormente se pasa al intervalo G2 (gap 2),
donde la clula acumula material y se dispone ahora a la divisin fsica. Esta ltima
ocurre en la Mitosis (M), dando origen a dos clulas hijas con su respectiva dotacin de
cromosomas. El tiempo empleado puede ser de 6 a 24 hrs. y las 3 etapas consumen el 90
% de este. En general el tiempo que demora el Ciclo Celular depende de la ventana en el
intervalo G1, donde la clula decide si proliferar o no, en base a las seales moduladoras
que recibe tanto desde el exterior cmo interior. Mientras ms largo sea G1 mayor tiempo
tomar el Ciclo Celular.
El cuerpo humano contiene de 50 a 100 trillones de clulas (10 18 ), de estas algunos
billones (10 12 ) perecen diariamente y las restantes se deben multiplicar para reemplazar
a las otras. Tomando en cuenta que el tiempo de vida promedio es de 70 aos. Se tiene
al final un nmero astronmico de divisiones celulares, donde es necesario detener a las
clulas que han sufrido mutaciones o errores durante su vida media o en sus
preparativos para duplicarse. Estos errores pueden ocurrir cuando el DNA ha sido
expuesto a agentes fsicos o qumicos dainos o cuando una enfermedad determinada,
como la Ataxia Telangiectasia (ver captulo 13 ), es capaz de aumentar la susceptibilidad
de los cromosomas a este tipo de dao. En estos casos los errores pueden inducir a ms
errores, lo que sucede por ejemplo cuando se produce un huso mittico defectuoso, que
impide la correcta segregacin de los cromosomas.
La verificacin y balance de los intervalos G1 ( recepcin de seales) y G2 ( acumulacin
de material), se lleva a cabo en los Puntos de Control del Ciclo Celular. El primero y
ms conocido de ellos se encuentra destinado a evaluar el dao al DNA y se ubica hacia
el final del intervalo G1 (lmite G1/S). Otro de ellos, se encuentra en el intervalo G2 (lmite
G2/S), es decir mientras la clula aumenta de masa. En este ltimo sitio, se evalan tanto
la fidelidad de la replicacin del DNA, como la generacin del huso mittico para dividirse
posteriormente en M.
En aquellos tejidos como piel, sangre y epitelio intestinal, la divisin celular contina
durante toda la vida, en contraste con la clula nerviosa y la clula muscular que
permanecen en la etapa Go. Aqu las clulas permanecen en un estado de continua de
diferenciacin o bien sufren una llamada diferenciacin terminal. Por otro lado, las clulas
de otros tejidos pueden salir de Go, luego de un tiempo y volver a entrar al Ciclo Celular
normalmente. En el caso de las clulas cancerosas, tenemos que estas pierden la
capacidad de control por retroalimentacin y la comunicacin con las clulas
vecinas, por lo tanto se reproducen agresivamente migrando hacia otros tejidos,
invadiendo y destruyendo aquellos rganos necesarios para sostener la vida.
El estudio de los genes que controlan el Ciclo Celular, se inici observando el crecimiento
en los brotes de la levadura Sacharomyces Cerevisiae. Se emple este espcimen por
ser unicelular y contar con un ciclo que se encuentra regido tan solo por la
disponibilidad de sustrato, es decir sus clulas no pueden dividirse sino se alcanza un
tamao determinado. Adems, presenta la particularidad de que cuenta con solo 32
genes destinados a desarrollar las distintas etapas del Ciclo y que si alguno de ellos se
encuentra alterado por alguna mutacin, el Ciclo se detiene.
742
Mucho ms complejas son las clulas animales que estn sometidas a una red de seales
correspondientes a un organismo pluricelular, las que se encuentran a su vez
involucradas en la coordinacin de cada clula que forma un tejido. Desde la etapa
embrinica hasta la etapa adulta y a la vez regulan sus cambios metablicos en
coordinacin con el resto del organismo. As tenemos que las seales recibidas en G1,
son captadas por receptores y transmitidas por protenas de relevo que dependen de
dos tipos especiales de genes. Estos pueden ser conocidos como los Proto-oncogenes
y los Genes Tumosupresores (Fig. 2 15).
Factor de Crecimiento
VIA
ACELERADORA
Factor de
Inhibicin
VIA
FRENADORA
PROTEINAS
DE RELEVO
Protooncogenes
Liberacin o retencin
de Factores de
Transcripcin
Genes
Tumosupresores
NUCLEO
Fig. 2 15. Ambas vas de relevo se dirigen desde el exterior al ncleo pasando y amplificando
seales para controlar la expresin de los genes.
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2) PROTO-ONCOGENES, ONCOGENES Y GENES TUMOSUPRESORES
a) Proto-oncogenes: son los genes que normalmente codifican protenas que sirven de
relevo a seales qumicas que provienen desde el exterior de la clula y se dirigen hacia
los genes en el ncleo (fig. 2 15). Estas seales son transportadas por las protenas
conocidas como Factores de Crecimiento, Protenas Kinasas (asociadas y no asociadas
a receptores), Receptores asociados a la Protena G (activados por GTP), Protenas G
asociadas a membranas, Enzimas Fosforiladoras del tipo Serina y Treonina Kinasas
junto a Protenas que se unen al DNA, como son los mismos Factores de Transcripcin.
Todos estos elementos son capaces de amplificar la seal y acelerar la expresin de los
genes que conducen a la divisin celular, sin embargo cuando sufren alguna mutacin
inducen a una transformacin celular y pasan ahora a llamarse Oncogenes (del
Griego: Onkos = masa o tumor).
b) Oncogenes (Tabla 1 15): Estos genes no son capaces de controlar su expresin
y ya no permanecen silenciosos cuando la clula se encuentra en Go, ya que producen
una gran cantidad de copias anormales o defectuosas de sus propias protenas,
743
indicando que sufren ms de alguna mutacin. Esta puede ser tanto en los genes que
regulan el control de su expresin, como aquellos genes que son regulados y portan a la
vez una informacin defectuosa en sus copias proteicas. Todos estos errores son
cumulativos y arrastran a la clula fuera de Go, estimulando la divisin y proliferacin
celular sin control. Por ejemplo, en aves el gen viral v-src por Rous Sarcoma Virus,
estimula la formacin de un carcinoma de un espcimen a otro, por medio de una simple
infeccin viral. Sus efectos son capaces de sacar a la clula diferenciada de su estado de
reposo (fig. 3 15). Sin embargo, otra forma de este gen es del tipo no oncognica y se
encuentra silenciosa en el espcimen adulto, con el nombre de gen c-src, que se
encuentra clasificado como un Proto-Oncogn. Este gen fue activo durante el desarrollo,
pero ahora ya no se expresa en la clula diferenciada.
R E T R O V IR U S
LTR
S e c u e n c ia
r e p e titiv a
te r m in a l
q u e a c t a
com o
p r o m o to r a
gag
P r o te in a
d e la
C a p s u la
pol
env
Trans c r ip ta s a
In v e r s a
P r o te n a
d e la
e n v o ltu r a
onc
LTR
O ncogene
Fig. 3 15. Secuencias de un retrovirus que puede actuar promoviendo (aportan la secuencia para
la unin de la RNA pol ) la transcripcin de un proto-oncogn o introducir parte de este a la clula
normal.
El ejemplo anterior permite deducir que los proto-oncogenes tambin pueden constituir
oncogenes mediante la accin de un Retrovirus (fig. 3 15), muchos de los 100 o ms
oncogenes encontrados tienen su contrapartida en los retrovirus. El contenido de las
partculas virales puede integrarse al genoma e inducir su transcripcin. Incluso puede
ocurrir que un retrovirus sin un oncogen, se inserte cerca de un proto-oncogen del
husped e induzca o aumente la expresin de este en unas 30 o 100 veces. Esta
expresin anormal se atribuye a que las regiones LTR (Long Terminal Repeats) de los
retrovirus, contienen poderosos promotores y secuencias intensificadoras que son
responsables de estas caractersticas.
c) Genes Tumosupresores (Tabla 1 15 ) : Son lo contrario de lo anterior y codifican
protenas que normalmente inhiben o frenan la proliferacin celular. En el caso de
mutar, sus copias ya no son efectivas frenando la expresin (fig. 2 15). Normalmente
cuando las condiciones para la Mitosis son desfavorables, estos genes se activan y se
da tiempo a la clula para que repare el dao. En el caso de que sea este muy extenso,
la clula entra en la va de la Apoptosis o muerte programada. Este hecho ocurre por
digestin de sus cidos nucleicos y la denaturacin de sus protenas.
Lo anterior permite deducir que la alteracin de un gen Tumosupresor, debido a
una mutacin conducir a la prdida de su actividad inhibidora y aquellas clulas
diferenciadas, pero con DNA daado por mutaciones previas pasarn ahora a
744
reproducirse teniendo una ventaja selectiva sobre las clulas normales que s
morirn.
En la Tabla 1 15, se describen algunos Oncogenes y genes Tumosupresores
descubiertos en diferentes tipos celulares. Estos genes son capaces de actuar a distintos
niveles en la transmisin de seales desde el exterior de la clula hasta su ncleo.
TABLA 1 15
ONCOGENES
erb-B
Codifica para el receptor del factor de

crecimiento epidrmico (EGFR) y es una
Protena Kinasa transmembrana que forma
parte de una familia de receptores ubicados
en la membrana citoplasmtica. Se
encuentran relacionados con la curacin de
las heridas y pueden sufrir sobre expresin o
amplificacin.
N-ras
Codifica para una protena que acta como

relevo de seal estimulatoria en el citoplasma
(se une al GTP y es conocida como protena
G), sufre una mutacin puntual y se
encuentra implicado en las Leucemias
c-myb
Codifica para un Factor de Transcripcin. La

falta de su Ct inhibitorio por delecin o
disrupcin, lo activa de forma trans y aumenta
su capacidad de transformacin de clulas
hematopoyticas. Se encuentra su
contrapartida en el retrovirus generador de
leucemia de las aves como v-myb
Codifica para factores de transcripcin en el
ncleo que a su vez activan genes
promotores de crecimiento. Sufre de
translocacin y amplificacin. Implicado en las
leucemias, cncer a la mama, estmago y
pulmones
c-myc
GENES TUMOSUPRESORES
NF-1 Codifica para la protena que inhibe a la
protena estimuladora Ras en el
citoplasma. Implicado en cnceres del
sistema nervioso perifrico y leucemia
mieloide.
RB
Codifica para la protena pRB que en el

ncleo se une a los factores de
transcripcin de la familia E2F
impidiendo la expresin de los genes
necesarios paras entrar al Ciclo Celular.
P53
Codifica para la protena p53 que

detiene la divisin celular y puede
conducir a las clulas a la Apoptosis.
Se encuentra en el ncleo.
Es claro que los genes Tumosupresores al ser estimulados actan en conjunto con los
Proto-oncogenes para decidir si una clula prolifera o no. Por lo tanto si cualquiera de los
elementos de la cascada formada por las protenas inhibitorias desaparece, se corta su
efecto. Es sabido que aquellos cnceres producidos tanto por mutacin en los Protooncogenes como por mutacin de los genes Tumo-supresores, son del peor pronostico,
ya que la proliferacin celular es acelerada y a la vez no tiene freno.
d) Genes involucrados en la reparacin del DNA, constituyen un tipo de genes
similares a los anteriores. Su falla se encuentra relacionada con la perdida del control
durante el Ciclo Celular. La misin de ellos es velar porque cada copia de las hebras
madres sea replicada de una forma exacta y a su vez deben evitar la inestabilidad de los
cromosomas. La alteracin de dichos genes por medio de algunas mutaciones, induce a
los siguientes sndromes:
745
1) Ataxia (falta de coordinacin) Telangiectasia (dilatacin de los capilares), se produce

por falla del gen ATM que a su vez provoca Leucemia o Linfoma.
2) Anemia de Fanconi, conocida como falla en el gen FancD2, que provoca Leucemia
mielognica aguda.
3) Sndrome de Bloom, falla del gen BLM que codifica para una DNA Helicasa, cuya
falta provoca una alta incidencia en la ruptura de los cromosomas.
4) Xeroderma Pigmentosum, caracterizado por una falta de reparacin en los
cromosomas expuestos a la luz UV y que produce una alta susceptibilidad al cncer
hereditario al colon sin la presencia de plipos.
5) Sndrome de Li-Fraumeni, producido a causa de los genes tumosupresores de la
familia TP53, que entrega instrucciones para la sntesis de p53 y CHEK2 por Check
point Kinase 2 o Protena Kinasa relacionada con reparacin al dao causado al DNA.
La falla de ambos genes a la vez predispone a sarcomas, leucemias, tumores de mama,
tumores cerebrales y adrenales.
6) Sndrome de ruptura de los cromosomas o Sndrome de Nijmegen, cuyo gen
responsable es el NBS1. Este se relaciona con el procesamiento de las rupturas
producidas en la doble hebra de DNA, su falla provoca Leucemia o Linfoma.
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3) MECANISMOS QUE PROPICIAN LA DIVISIN DESCONTROLADA DE UNA
CLULA YA DIFERENCIADA
Los siguientes mecanismos sacan del reposo a una clula diferenciada:
a) La insercin, que puede ocurrir en cualquiera de los lados del proto-oncogen. Este
tipo de activacin se ha demostrado en el caso de los proto-oncogenes c-myc y c-myb
(Tabla 1-16). Ms an, pueden ocurrir mutaciones del tipo puntual, como sucede con cras, ubicado en el cromosoma humano 11, donde el cambio de una Guanina por una
Citosina se relaciona con el cncer a la vejiga. Esta mutacin hace que el aminocido
Glicina, normalmente en la posicin 12 de una protena G (Transductora de mensajes
con subunidades , y ) se cambie por Valina. Este cambio no permite la liberacin de
GTP de la subunidad de esta protena y queda continuamente activada, haciendo que
la seal pase hacia el ncleo donde provoca una transformacin.
b) La deleciones o prdida de una secuencia. Este tipo de accidente molecular
provoca una transformacin de los tejidos, como ocurre con el oncogen del receptor
EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor), ubicado en el cromosoma 7. Cuando este
receptor sufre la delecin del dominio que se une al ligante que lo activa, forma un
dmero donde la enzima Tirosina Kinasa que es parte normal de su estructura permanece
ahora activa y no es controlada por el ligante, por lo tanto el receptor permanece activado.
Es decir como si el ligante estuviera unido continuamente al receptor y pasa seales que
no han llegado o no existen, desencadenando una respuesta anormal en la clula.
c) Las translocaciones que ocurren en los cromosomas, son tambin fuente de
alteracin para uno o ms de los elementos de la cascada transductora de seales. Este
746
proceso se observa en el cromosoma Philadelphia, que contiene una fusin entre los
oncogenes bcr1 y abl, que a su vez activan continuamente a la Kinasa de abl
provocando un tipo especfico de Leucemia.
d) Otro de estos casos ocurre como consecuencia de la amplificacin accidental de los
proto-oncogenes, al aumentar su nmero de copias. Este mecanismo, tambin
desemboca en el desarrollo de algn tipo de cncer.
Por lo tanto, en base a lo anterior se puede concluir que al menos en las clulas
Humanas, la transformacin ocurre por una o todas las causas anteriores, es decir
cuando fallan los genes Tumosupresores, se estimulan los Oncogenes sin
contrapartida o falla la reparacin del DNA. La consecuencia de las fallas anteriores es
la aparicin de una nueva actividad enzimtica denominada Telomersica. Es interesante
hacer notar la presencia de una nueva enzima denominada Telomerasa (Fig. 4 15) por
Telmero o extremo de los cromosomas, en aquellas clulas que han perdido su
diferenciacin y que se consideran malignas o cancerosas.
GGGG
GGGG
5
CCCC
GGGG
GGGG
Hebra hija o extremo ms corto

donde el cebador fue hidrolizado
por la DNA pol I
GGGG
GGGG
1: Telmeros o secuencias
repetidas en tandem en la hebra
madre en grupos de 5
GGGG
3: La Telomerasa posee un RNA
CCCC
CCCC
cebador incluido, propio de su

estructura
GGGG
GGGG
GGGG
GGGG
4: La elongacin por la Telomerasa deja espacio para la
CCCC
unin de un cebador que es parte de la Telomerasa.
GGGG
GGGG
GGGG
GGGG
DNA pol
CCCC
CCCC
6:
2: Secuencia
repetida por la
Telomerasa y
adicionada al grupo
de secuencias
anteriores
del telmero
CCCC
CCCC
GGGG
5: Cebador hecho por la
Telomerasa
La DNA pol I tiene ahora lugar de anclaje y completa la hebra hija retardada
Fig. 4 15. La Telomerasa posee una secuencia de RNA complementario al repetido y el resto lo
constituyen las subunidades de protena pertenecientes a la enzima.
Los Telmeros no tienen secuencias codificantes de protenas y presentan solo

secuencias del tipo repetitivo en grupos de a 5 dispuestas en tandem. La actividad de la
enzima Telomerasa, radica en la elongacin del extremo de los Telmeros cuando el
cromosoma se replica una y otra vez. Lo sorprendente de esta enzima, es que no se
encuentra presente en la clula normal, donde por cada Mitosis se acortan los
cromosomas. Esto se debe a que la DNA pol I avanza solo en direccin 5 a 3 y el
747
cebador de RNA que emplea para anclarse e iniciar la replicacin, es eliminado por la
actividad exonucleasa de la DNA pol I, dejando el extremo 5 ms corto en la hebra hija.
De esta manera, despus de un total de 50 a 60 replicaciones se produce un acortamiento
notable, comparado con la clula cancergena que es inmortal y cuyos cromosomas no se
acortan a causa de que los telmeros son reparados oportunamente por la Telomerasa,
ya que esta enzima incrementa el nmero de secuencias repetitivas y deja espacio para
que entre un cebador de RNA que es parte de la misma enzima. La DNApol I se ancla a
este cebador y completa la replicacin de la hebra madre al rellenar el hueco en la hebra
hija.
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4) PROTENAS Y MECANISMOS PROTAGONISTAS DEL CONTROL EN EL CICLO
CELULAR.
Los procesos que ocurren en el Ciclo Celular se basan en el control que se ejerce sobre
un complejo formado por dos protenas. Una de ellas es la subunidad reguladora
denominada Ciclina y la otra es la subunidad cataltica que fosforila sustratos y a la vez
es fosforilada. A esta ltima se la denomina Kinasa dependiente de Ciclina (CDK) (fig.
5 -15).
El Ciclo Celular es un sistema de elevada complejidad, donde es necesario analizar el
control, la identidad y el comportamiento de cada uno de sus integrantes. De esta manera
se pretende distinguir, como ocurren aquellas transformaciones que conducen a la clula
a replicarse normalmente o indiscriminadamente (cncer):
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a) LA FAMILIA DE LAS CICLINAS
Las Ciclinas (fig. 5 -15), integran una familia de protenas que comparten un segmento de
su secuencia. Durante el Ciclo Celular, las Ciclinas son controladas en su expresin a
nivel de transcripcin y degradacin, cambiando en cantidad y especificidad de
accin. De esta manera, son capaces de caracterizar cada etapa del Ciclo y a su vez
aseguran la continuidad de este. Luego de que cada Ciclina ha cumplido con su funcin,
son destruidas mediante la accin de sistemas especializados (APC y SCF, ms
adelante), manteniendo as la unidireccionalidad del Ciclo Celular.
Los complejos entre Ciclinas y CDKs, una vez formados regulan su actividad mediante
distintos procesos. Entre ellos tenemos fosforilacin, defosforilacin y unin a protenas
inhibitorias capaces de retardar la actividad de este complejo. De esta manera se hace al
Ciclo Celular ms lento y se le da tiempo suficiente a los sistemas de reparacin, para
subsanar aquellas fallas y errores ocurridos durante situaciones adversas, como aquellos
efectos genotxicos causados tanto por radiacin como la presencia de agentes qumicos,
fuera de aquellos errores normales cometidos durante la replicacin del DNA.
Las Ciclinas son a su vez capaces de regular la especificidad de las CDKs. Esta
tarea la ejecutan mediante la induccin de cambios conformacionales, mientras que la
actividad misma del complejo Ciclina/ CDK es regulada por las fosforilaciones y
defosforilaciones de la subunidad cataltica desde otros factores.
748
CICLINAS:
SON LAS SUBUNIDADES
REGULATORIAS DE LAS
KINASAS, QUE SE
EXPRESAN
PERIDICAMENTE
DURANTE EL CICLO.
CONFIEREN ACTIVACIN
Y DISTINTAS
ESPECIFICIDADES
5
CICLINA Ubiquitina
1
KINASA
4 CKI
Ubiquitina
P-Thr(14)P-Tyr(15)- DENDIENTE DE -Thr(160)- P
CICLINA(Cdk)
KINASAS
DEPENDIENTES
DE CICLINAS:
SON LAS SUBUNI-DADES
CATALTICAS ACTIVADAS
POR LAS CICLINAS. SON
CONS-TITUTIVAS.
ACTAN COMO SERINA
Y/O TREONINA KINASA.
AL FOSFORILAR ACTIVAN,
INHIBEN Y/O MARCAN
PARA LA DEGRADACIN
1 : Activacin de las Kinasas por asociacin entre Ciclinas y Cdk

2 : Control por fosforilacin inhibitoria de Thr 14 y Tyr 15
3 : Control por fosforilacin activadora de Thr 160 mediante CAK, este ltimo formado
por el complejo CDK7- Ciclina H - MAT1.
4 : Unin con inhibidores de Cdk denominados como CKIs (Inhibidor de la Kinasa
dependiente de Ciclina)
5 : Degradacin de Ciclinas y/o CKIs por medio de Ubiquitinacin
Fig. 5 15. Control del Ciclo celular mediante el Complejo Ciclina Kinasa dependiente de Ciclina
(CDK).
Las Ciclinas poseen un segmento de secuencia homloga de aproximadamente 100

aminocidos, que es altamente conservado y que se denomina Cyclin box donde se
encuentra una Secuencia tpica de la Ciclina. Esta regin es la que se une a la Cdk.
En general, las Ciclinas se dividen en dos tipos, las G1(Ciclinas D y E) y las Mitticas
(Ciclinas A y B). Las G1 son de vida media corta y se degradan por sus secuencias
conocidas por las siglas PEST, ubicadas en el extremo Ct de la Cyclin box. Por otro lado,
las Mitticas duran ms tiempo y se acumulan durante G2, para unirse a las Cdks y formar
el Factor de Promocin de la Mitosis o MPF. Este ltimo acta como la seal necesaria
para entrar a la Mitosis.
Las Ciclinas mitticas (A y B) se degradan precisamente antes de entrar a la mitosis, por
medio de la marcacin con Ubiquitina. Este ltimo es un pptido sealizador, que se une
a la secuencia tpica denominada secuencia para la destruccin. Esta se encuentra
localizado hacia el lado N terminal de la secuencia comn a todas las Ciclinas. La unin
de la Ubiquitina es llevada a cabo por los sistemas APC y SCF. Estos sistemas de
proteasas, se conocen bajo el nombre de APC por Complejo Promotor de la Anafase
y SCF por Skp1-Cullin-Fbox (o complejo de tres protenas). Ambos contienen al
Proteosoma 26 S encargado de hidrolizar a las Ciclinas.
749
Ciclina D
Ciclina E
Ciclina A
Ciclina B
G0 G1
INKs
G1/S
Cip/Kip
Cip/Kip
G2
G2/M
Fosforilacin
Ciclina B Cdc2
Ciclina A Cdk2/Cdc2
Ciclina E Cdk2
Ciclina D- Cdk4/Cdk6
Fig. 6 -15. Niveles de las distintas Ciclinas durante el Ciclo Celular
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b) KINASAS DEPENDIENTE DE CICLINAS (CDKS).
750
En la Tabla 2 15 se observan los distintos complejos fosforilantes Ciclina CDK, donde

tanto CDK4 como CDK6 son tpicas de G1 y se activan por las Ciclinas D (Ver figura 12 15).
TABLA 2 15
Pares de Ciclina
CDK
Etapa
del
Ciclo
Sustrato
Efecto Regulatorio
Ciclina D/CDK4,6
Ciclina E/CDK2
Ciclina E/CDK2
G1
pRB fosforilado
pRB fosforilado
Suelta los E2F de pRB para que E2F se

una al DNA e inicie la transcripcin
Reafirma el efecto de fosforilacin sobre
pRB
Ciclina A/CDK2
G1/S
Ciclina A/ CDC2 o
CDK1
G2,
G2/M
E2F-1/DP1 fosforilado
p53
Se une a E2F1/DP1 y lo fosforila

impidiendo que se unan al DNA
Estimula especificidad
de unin al DNA
Ciclina B/ CDC2 o
CDK1
G2/M
ORC fosforilado
Paso de G2 a M
TFIID
Inhibicin
Fosforilacin del
Dominio
carboxiterminal de
RNA pol II (CTD
Ciclina B/CDC27
Como parte de
TFIIH/Cdk7
Como parte de la
actividad CAK:
Cdk7
Ciclina C/CDK8,
Ciclina
H/CDK7/MAT1
(factor de
ensamblaje)
Ciclina B/CDC2
Ciclina B/CDC2
Fosforila otras CDKs
G1, S,
G2, M
RNA pol II
TFIIIB
Poly (A) Polimerasa
Inhibicin
Inhibicin
A continuacin a finales de G1 aparece la actividad fosforilante de CDK2 que se mantiene

hasta S con la Ciclina E y Ciclina A. En la etapa S, se tiene la actividad de CDC2 o
CDK1 y adems la actividad de CDK7. En G2 se tiene a CDK2 y CDC2 con Ciclina A,
para terminar con CDC2 y Ciclina B en la Mitosis.
751
CAK o el complejo entre CDK7 y Ciclina H, no vara su expresin durante el Ciclo y

regula positivamente a CDC2 y CDK2, que fosforilan a las kinasas en las Treoninas.
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c) MECANISMO DE ACCIN DEL COMPLEJO CICLINA KINASA
En el caso genrico del complejo CiclinaCDK ocurre que la CDK en especial CDK2, se
encuentra formada por dos lbulos en cada uno de sus extremos. El Nt tiene segmentos
de estructura - pegada y el lbulo del extremo Ct tienen estructura - hlice. Entre ambos
lbulos queda el sitio activo donde se une el ATP y la entrada a este mismo se encuentra
resguardada por el bucle T.
Al unirse la Ciclina a CDK2, se provoca el acercamiento de tres residuos de Argininas
dispersos en la estructura, uno de ellos unido a la hlice de secuencia PSTAIRE, el otro
unido al bucle T y el ltimo pertenece al bucle cataltico. El bucle T, es un sitio
especfico de la secuencia, donde se encuentra una Serina o una Treonina capaz de ser
fosforilada y que ejerce a la vez un cambio conformacional, que se imparte al resto de la
protena. De esta manera las tres Argininas se desplazan siendo coincidentes en el bucle
T, donde forman un bolsillo en el que la Thr 160, es fosforilada por CAK (Ciclina HCDK7). Esto se traduce en la abertura del sitio cataltico para aceptar y fosforilar a una
protena como sustrato, adems se estabiliza la forma activa de la estructura y se produce
un aumento de la interaccin con la Ciclina por medio del aumento de los enlaces
hidrgeno. Por otro lado, la fosforilacin en Tyr 15 y Thr 14 de la secuencia por otras
kinasas acta inhibiendo la actividad fosforilante.
En general acerca de la actividad de las Kinasas se pueden desprender los
siguientes conceptos:
1) Los complejos Ciclina/CDK se encuentran involucrados en todos los procesos de
activacin del Ciclo Celular incluyendo a la Mitosis
2) Las Kinasas dependientes de Ciclinas son constitutivas, mientras que las
Ciclinas son inducibles.
3) La especificidad de las Kinasas depende exclusivamente de las Ciclinas.
4) La actividad enzimtica de las Kinasas es regulada por procesos de Fosforilacin
y Defosforilacin.
5) Los inhibidores de las Kinasas (CDKIs o CKIs) actan por unin a las Kinasas.
6) Los sistemas Ubiquitina-Proteosoma son los encargados de hidrolizar a las
Ciclinas y a los CDKIs.
7) Una gran cantidad de sustratos son fosforilados por las Kinasas resultando en
activacin, inhibicin adems de marcacin para la degradacin e incluso el
reconocimiento de su ubicacin en distintos compartimentos de la clula.
8) En general existen 4 mecanismos para controlar la actividad de las Kinasas:
a) Unin de las Ciclinas
752
b) Unin de los CDKIs (Inhibidores de las Kinasas dependientes de Ciclina)

c) Fosforilaciones activadoras e inhibitorias
d) Degradaciones mediadas por Ubiquitinas de Ciclinas y CDKIs
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5) COREPRESORES DE LA TRANSCRIPCIN QUE NO SE UNEN DIRECTAMENTE
AL DNA COMO LO SON pRB, p107 Y p130.
a) Factor pRB
La funcin de la protena pRB 105 110 kD (998 aminocidos), se determin al
descubrirse que faltaba total o parcialmente en un tipo especial de cncer que afecta a
nios con una muy baja incidencia y que se conoce como Retinoblastoma Retinal. El
gen responsable, es de 200kb y no se encuentra presente a causa de una delecin total o
parcial del brazo largo (q) del cromosoma 13, banda 14 (13q14). La enfermedad
tambin aparece cuando el gen se encuentra normalmente presente, pero debido a un
error durante la etapa de procesamiento en el transcrito primario (RNAhn), se producen
copias proteicas no funcionales que se encuentran mal ensambladas.
Cuando uno de los alelos del gen RB se pierde por alguna delecin accidental en las
clulas somticas no se produce ningn efecto, sin embargo la perdida de este alelo en
las clulas germinales crea un portador con un fenotipo an normal, cuya descendencia
tendr mayor probabilidad de tener una segunda mutacin en los heterozigotos, pero en el
alelo normal adquiriendo ahora la enfermedad a una edad mas avanzada. Por otro lado, la
perdida de ambos alelos en un homocigoto hace que la enfermedad aparezca a temprana
edad.
pRB es fosforilado por los complejos Ciclina/ CDKs y normalmente la protena pRB, no
se encuentra fosforilada o bien se le halla hipofosforilada en la clula en reposo. pRB
forma parte de un complejo inhibidor de la expresin (pRB-E2F-Gen), precisamente de
aquellos genes que son necesarios para entrar al Ciclo Celular o pasar por los distintos
puntos de control del Ciclo. pRB tiene por funcin retener a los factores activadores
de la familia E2F en un complejo que se halla en su forma inactiva.
Cuando pRB en el complejo es fosforilado progresivamente o hiperfosforilado, libera
a los factores de transcripcin, dejando ahora al factor E2F unido al Gen. A su vez
E2F activa de forma trans (alelo paterno y materno) la expresin de los genes. Por lo
tanto sin pRB, las clulas abandonan Go y se replican an con el DNA daado
producindose el Cncer de la Retina o Retinoblastoma.
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b) Factor p 107 y p 130.

Otras protenas de la familia de pRB denominada tumosupresora, son las protenas p107
(107 kDs) y p130 (130kDs), ambas retienen o inactivan a algunos de los factores de
transcripcin de la familia E2F (fig.11-15) y a su vez inhiben la expresin de varios genes
que solo pueden ser liberados por fosforilacin.
753
Tanto pRB como p107 y p130, se les puede denominar protenas bolsillo, ya que
tienen por funcin reclutar o echarse al bolsillo a la Histona Deacetilasa (HDAC). Esta
ltima junto a la otra enzima Histona Acetil Transferasa (HAT), tienen por funcin
deacetilar y acetilar respectivamente a las Histonas, precisamente en el grupo -Amino
de sus Lisinas. Al ser Acetilada una Lisina esta pierde su carga positiva, por introduccin
del grupo N- Acetilo y ya no interacciona con los fosfatos negativos del DNA. De esta
manera se pierde la estabilidad del nucleosoma que se desarma para dejar DNA al
descubierto e iniciar la transcripcin. Una complicacin que presenta este mecanismo, es
que el efecto depende en parte, de la identidad de las Histonas pertenecientes al
Nucleosoma y la posicin en la secuencia de las Lisinas modificadas. En otras
palabras, cuando pRB se halla hiperfosforilado no se une a E2F y tampoco recluta a
HDAC, quedando el DNA descubierto para su expresin. El mecanismo exacto an
no se ha dilucidado.
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6) FACTORES DE TRANSCRIPCIN QUE SE UNEN AL DNA (p53, p73 Y E2F).
a) FACTOR p53
Uno de los primeros genes tumosupresores que fue encontrado en vertebrados es el p53,
de 393 codones y 53 kD ubicado en el cromosoma 17 regin p13 (brazo corto, banda 13).
Durante el Ciclo Celular normal, el gen p53 es inactivo, pero en el caso de que ocurra
dao en el DNA como radiacin UV, agentes qumicos o variacin del pool de los
nucletidos. La clula expresa este gen y su producto la protena p53, aumenta de vida
media manteniendo a la clula en reposo, es decir permite que el dao que estimul su
expresin sea reparado. Si este dao es muy extenso o el gen es activado muy tarde
para prevenir la divisin celular, la clula entra en Apoptosis o muerte programada. De
esta manera se eliminan permanentemente los errores genticos.
La protena del gen p53, posee a su vez modificaciones post-traduccionales que la
hacen an ms activa. As su dominio cerca del Nt (amino terminal) es acdico con
cargas +, similares a las de los factores de transcripcin y se une al DNA en la forma
de un tetrmero. Esta conformacin es tambin promovida por las interacciones de su
dominio en el extremo Ct (carboxilo terminal) que una vez fosforilado, tiene la capacidad
de activar la transcripcin de un gen conocido como p21/ WAF1. El producto de este
gen, acta a su vez inhibiendo la accin de los complejos Ciclina-Kinasa dependiente
de Ciclina. De esta manera se impide la accin fosforilante de estos sobre pRB y no se
expresan los genes que permiten el paso por el punto de restriccin antes del lmite G1/S,
como se ver ms adelante.
La vida media de la protena p53 es de corta duracin (15 a 30 minutos) y se encuentra
sujeta a fosforilaciones por los complejos Ciclina A-CDK2 y Ciclina B-CDC2 que operan
en la fase S y G2/M, pero no por las Ciclinas de la fase G1 como Ciclina E/CDK2 y
Ciclina D1/ CDK4.
Por otro lado, el gen p53 puede sufrir a su vez, mutaciones en ciertos lugares
denominados puntos calientes y que se encuentran ubicados entre los codones 129146, 171-179, 234-260, y 270-287. Sucede aqu, que no todos los daos son reparados
con la misma premura y a causa de ello, ocurren mutaciones permanentes en los
aminocidos 175, 248 y 273 que conducen a la prdida de la funcin. En estos casos la
754
protena p53, no es capaz de inducir la expresin de p21 (Protena inhibidora del

Complejo Ciclina/CDK) y de retardar por consiguiente el Ciclo Celular o dirigirlo hacia la
Apoptosis (muerte celular). La clula alterada se divide as, con su DNA daado y este es
pasado a la descendencia.
En general las mutaciones por insercin o delecin en ambos alelos de este gen se
asocian con cncer al colon, mamas, hgado y pulmones.
Por lo tanto la clula con p53 daado tiene una ventaja selectiva sobre aquellas
clulas normales, pero tambin daadas que se dirigen hacia el proceso de
Apoptosis.
La forma mutante de p53 parece tener an ms afinidad por el DNA que la forma wild
type (original, no mutada) y acta de manera dominante tipo trans, es decir como un
oncogn (trans significa que afecta al gen de su alelo materno y paterno) estimulando en
este caso la proliferacin celular a diferencia de su forma original, que es en realidad
tumo-supresora.
ESTIMULO
GENOTXICO
MDM2
secuestra
Degradacin
p53
SENSORES
P19/ARF
Aumento en la
cantidad o en la
actividad de p53
Transactivacin
Corte y Empalme
alternativo en locus
ARF-INK4a
BAX
Transactivacin
P21
APOPTOSIS
P16 / INK4A
pRB
E2F
Ciclina D
CDK4
Transactivacin
Complejo activador
Ciclina /CDK
inhibido por p21 y
p16
P
E2F
pRB
MUERTE
CELULAR
DETENCIN
EN G1
PASO A LA
FASE S
Fig. 7 15. Apoptosis y detencin en G1 del Ciclo Celular mediados por la protena p53. pRB no
es fosforilado y permanece unido a E2F.
El balance entre la diferenciacin celular, progreso en el Ciclo Celular y Apoptosis se

encuentra regulado por la razn pRB y p53. Si el nivel de pRB es mayor que el de E2F la
clula no progresa en el Ciclo como ocurre en Go. Por otro lado si la cantidad de pRB
fosforilado es mayor que la cantidad de pRB no fosforilado y este es menor que la
cantidad de factor de transcripcin, la clula progresar en el Ciclo Celular pasando a S y
luego a G2/M. Cualquier dao que sea detectado en este proceso aumentar los niveles
de p53 y empezar el proceso Apopttico.
Durante la Apoptosis la clula no libera contenido intracelular y no produce inflamacin
como en la necrosis celular. Durante la Apoptosis se produce una agrupacin de los
organelos junto a la formacin de agregados por los ribosomas, incremento en el volumen
755
de las mitocondrias y generacin de vacuolas por el retculo endoplsmico que junto a la

anterior condensacin del citoplasma y cromatina, forman los cuerpos apoptticos. En
estos casos ocurre que en la superficie de la clula se muestra Fosfatidil Serina, N-Acetil
Glucosamina y Lectinas o receptores opsnicos, que a su vez estimulan la fagocitosis por
clulas vecinas del parnquima.
En la figura 7 15, se observa el dao causado al DNA por luz UV y/o radiacin, lo que se
denomina como estmulo genotxico. Este ltimo es capaz de detener la sntesis de DNA
y RNA mediante un agotamiento del pool de nucletidos, ya que no se continan
sintetizando las enzimas correspondientes, las cuales son inhibidas en su transcripcin.
Los sensores que reconocen el dao al DNA, se encuentran constituidos por una serie de
protenas codificadas por aquellos genes cuya falla acarrea los siguientes sndromes:
Ataxia Telangiectasia, Sndrome de ruptura de los cromosomas o sndrome
Nijmegen, Anemia de Fanconi y sndrome de Bloom como se vio anteriormente.
Una vez reconocido el dao, se activa la produccin y/ o actividad de la protena p53 por
medio de aquellos mecanismos de control a nivel de la transcripcin o post transcripcin.
La protena p53 es capaz de autorregularse al inducir el factor MDM2, este ltimo
disminuye los niveles del mismo p53, ya sea por degradacin o bien secuestrando la
protena misma hacia el nucleolo. Por otro lado, p53 estimula mediante transactivacin la
sntesis de la protena p21 que inhibe directamente la fosforilacin y/o activacin de pRB
(fig. 7 -15). A continuacin se activa el sistema ARF/INK que significa Alternative
reading frame / Inhibitor of Cyclin Dependent Kinase, donde se emplean exones
comunes (2 y 3) para generar protenas totalmente diferentes como p16 y p19, donde
ambas presentan el primer exn diferente. La primera de ellas p16 es parte del sistema
INK4a y acta directamente como inhibidor del complejo Ciclina D/CDK4, mientras que la
segunda p19, es parte del sistema ARF que inhibe a MDM2 e indirectamente impide el
crecimiento celular por medio del aumento de los niveles de p53, que ya no es
secuestrado por MDM2. Esto ltimo se traduce en un aumento de los niveles de inhibidor
p21 sobre el complejo CiclinaD/CDK4.
En base a lo anterior, no se puede pasar a la fase S y continuar con el Ciclo,
producindose el arresto o detencin en la fase G1. En cuanto a la Apoptosis, p53 induce
por transactivacin el factor BAX, que acta sobre la Mitocondria e induce un
desacoplamiento entre la Fosforilacin Oxidativa y la Cadena de Transporte de
Electrones. Este hecho deja sin energa al sistema y conduce a una posterior muerte
celular. Un mejor anlisis de estos procesos se encontrar en el siguiente Apndice al
final de este tema.
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b) FACTOR p73
p73 tiene dominios con un cierto grado de identidad con p53. 29% para el dominio de
transactivacin, 63% para el dominio de unin al DNA y 38% para el dominio responsable
de la oligomerizacin.
El gen de la p73 se halla asociado a la regin del brazo corto del cromosoma 1, banda
36(1p36). Cuando este gen se encuentra con una delecin (le falta un pedazo), se
produce un tipo de cncer conocido como neuroblastoma. Por otro lado, este mismo gen
presenta los mismos puntos calientes que p53. Presenta lugares de su secuencia con
una alta incidencia de mutaciones, como lo es aquella zona entre los residuos 113 y 190.
756
Otra evidencia que la liga a p53 es que el producto proteico de p73 inhibe el crecimiento
de las clulas de neuroblastoma in vitro y tambin parece promover la apoptosis.
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c) FACTOR E2F.
Estos incluyen a la familia E2F 1, 2 y 3 que se unen predominantemente a pRB, ms el
factor E2F4 que se une a todas las protenas como pRB, p107 y p130, mientras que
E2F5 se une a p130. Estos factores se necesitan libres para pasar desde Go a G1 y el
punto de restriccin antes del lmite G1/S.
Los factores E2F heterodimerizan con otras protenas relacionadas distantemente y que
son las DP-1, 2 y 3, las cuales se emplean para mejorar su eficiencia de unin con el
DNA. Estas ltimas montan la capacidad de unin al DNA mediante el complejo E2F-DP.
Por lo tanto DP es considerado como un factor activador que promueve en forma
cooperativa la actividad de los promotores de la familia E2F.
De esta manera, el heterodmero E2F-DP funciona como activador trans (activa alelo
paterno y materno) de la transcripcin de aquellas secuencias promotoras que se
encuentran ubicadas corriente arriba de los genes. Estos genes ahora activados
codifican para las siguientes enzimas y factores: Dihidrofolato Reductasa (DHFR),
Timidina Kinasa (TK), Timidilato Sintasa (TS), DNA polimerasa (DNApol), CDC2,
Ciclina E y Ciclina A. PCNA por Antgeno Nuclear de la Clula Proliferativa y
Factores de licenciamiento (familias CDC y MCM). Adems de aquellos genes que
regulan la proliferacin celular como:
c-Myc, B-Myb, pRB, p107, E2F1, E2F2, CDK1,
p21, p27 y p19
En general, la va del E2F-pRB se encuentra formada por la familia E2F de factores
de transcripcin, la familia de las Protenas del Retinoblastoma o Protenas Bolsillo,
Ciclinas y Kinasas dependientes de Ciclina (CDKs) e Inhibidores de las Kinasas
dependientes de Ciclina ( CKIs o CDKis). De esta manera regulan el progreso
durante el Ciclo Celular, adems tambin regulan la Apoptosis celular. Esta ltima
va se encuentra descontinuada en la mayora de los cnceres.
La familia E2F1, 2 y 3 tiene una secuencia aminoacdica donde se distinguen
distintos motivos como la regin donde se une la Ciclina, regin donde se une el
DNA, la regin responsable de la dimerizacin, la caja marcada, la zona de
transactivacin y la zona del bolsillo. Mientras que los factores reforzadores del
efecto como DP1 y DP2 que son expresados a lo largo del Ciclo comparten algunas
regiones homlogas como la zona de unin al DNA y la zona responsable por la
dimerizacin. En general con E2F forman un heterodmero que pueden estar
reprimido, inhibido o activado, segn sea el grado de fosforilacin.
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7) APNDICE- CASPASAS- DIFERENCIAS ENTRE NECROSIS Y APOPTOSIS
757
Aqu se describen como ejemplos, algunas de las vas entre las cuales p53 no se
encuentra mediando la Apoptosis Celular, sin embargo los mecanismos para destruir la
clula son similares a nivel de la Mitocondria.
CASPASAS
Son proteasas que existen en la forma de Zimgenos. Tienen tres dominios el prodominio del Nt, un dominio p20 y otro p10. Pueden ser activadas por otra Caspasa, por la
induccin en la cercana de otra molcula y por asociacin con alguna subunidad
regulatoria. Poseen en el sitio activo Cistena y rompen el enlace peptdico despus de un
residuo de Asprtico. Este efecto puede activar o desactivar a otro miembro de la va de
sealizacin desencadenando o inhibiendo su efecto.
Existen en general dos tipos, el Tipo I son iniciadoras de pro-dominio largo, que sirve
para interaccionar con otras molculas y Tipo II o efectoras con un Pro-dominio corto y
son el producto de la va de sealizacin.
Las Caspasas actan sobre mltiples blancos, por ejemplo Lamin A o Laminina A. Esta
ltima es una protena estructural que mantiene la integridad del ncleo, otro blanco es
PARP o poly-ADP Ribosa Polimerasa, que se encuentra involucrada en la reparacin del
DNA, RB protena tumo supresora y a la vez reguladora del ciclo celular, Histona H1 otra
protena esencial que se necesita para la organizacin de la cromatina y CAD o DNA asa
activada por Caspasa, encargada de romper el DNA en clulas apoptticas.
Otra de estas vas la constituye la activacin de Linfocitos citotxicos que inyectan la
enzima denominada Granzima B. Esta ltima estimula los niveles de Caspasa 8 que
cataliza el paso de Pro-caspasa 9 a Caspasa 9 activa, que a su vez desencadena una
cascada amplificadora de Caspasas, cuyo resultado final consiste en la protelisis de la
integridad estructural tanto del citoplasma como del ncleo, atacando protenas del
citoesqueleto y aquellas enzimas involucradas tanto en la replicacin como reparacin del
DNA. La Apoptosis celular puede ser mediante seales externas a la clula y este tipo se
denomina como instructiva, ya que es transmitida por receptores en la membrana celular.
El otro tipo es interno o intrnseco y es mediado por la Mitocondria.
Aquellos receptores en la superficie de la clula denominados TNF-R1 (Tumoral Necrosis
Factor) caen en el primer tipo y son especficos para el Factor de Necrosis Tumoral (fig. 8
15).
En su estructura presentan varios dominios y entre ellos encontramos a DD por Death
Domain, que solo enfoca hacia el lado citoplasmtico de la clula. DD se une se une
lateralmente al dominio homlogo DD de una molcula adaptadora, denominada FADD o
MORT1. Esta ltima contiene al dominio DED por Death Effector Domain . A su vez el
dominio DED de la molcula adaptadora se une al dominio homlogo de la molcula ProCaspasa 8 (Caspasa: Proteasa tipo Zimgeno) que a su vez da origen a la molcula
funcional como Caspasa-8. Esta ltima activar por protelisis a p22BID, convirtindola
en una protena de menor peso molecular como p15BID. Esta ltima migra dentro de la
membrana mitocondrial y acta como un factor pro-apopttico estimulando la abertura del
canal PTP. Este hecho provoca la prdida del gradiente electroqumico,
758
LINFOCITOS
CITOTXICOS
TNF: Factor Tumoral de Necrosis

TNF-R1: Receptor de TNF
DD
G
R
A
N
Z
I
M
A
ADAPTADOR O PROTS.
FADD/MORT
ANT
DED
P15
BID
Pro-Caspasa 8
P22
BID
PTP
P15
BID
Pro Caspasa 9
ProCaspasa 3
Caspasa
Tetramrica 8
Caspasa 9- Activa
Caspasa 3
Cascada
de
Activacin
de las
Caspasas
Fig. 8 -15. Vas de Apoptosis en la clula.
desacoplamiento de la fosforilacin oxidativa, produccin de ROS ( Reactive Oxygen

Species por radicales libres del Oxgeno altamente txicos), disminucin del elemento
reductor protector de membranas GSH y de ATP, liberacin de Ca +2, Pro-caspasa y
otras Proteasas al citoplasma. En fin, toda una cadena de eventos conducentes a la
muerte celular.
A continuacin en la Tabla 3 15, se observan algunas de las diferencias entre Necrosis
y Apoptosis.
TABLA 3-15
DIFERENCIAS ENTRE NECROSIS Y APOPTOSIS
759
CARACTERSTICAS
NECROSIS
APOPTOSIS
Respuesta de los
tejidos
A nivel de los tejidos
Inflamacin
Ninguna
Grupos de clulas
afectadas
Clulas hinchadas
Perdida de la integridad y
formacin de vesculas
En pedazos
Solo clulas individuales

Clulas se condensan
Formacin de cuerpos
apoptticos en vesculas
Morfologa Intacta
Agregados irregulares de
cromatina
Condensacin de la
cromatina
Volumen celular
Membrana celular
Organelos
citoplasmticos.
Ncleo
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8) INHIBIDORES DEL COMPLEJO CICLINA/CDK QUE INTEGRAN LA FAMILIA INK 4

Y CIP/KIP, WAF1
a) Protenas de la familia INK4 son p16, p19, p18 (fig. 9-15).
Las Kinasas dependientes de las Ciclinas D, E y A pueden ser inhibidas por las familias
de inhibidores (CDKIs) correspondientes a las protenas INK4 (Inhibidores de Kinasa,
Tabla 4 15), representadas por p16 (INK4a), p15 (INK4b), p18 (INK4c) y p19
(INK4d). Todos se unen a los complejos de G1 (fig. 9 15), como lo es Ciclina D
CDK4,6 aunque tambin pueden ser inhibidores de CDK2. La protena tumo-supresora
llamada p16 (sinnimo Mts1), es un regulador negativo del complejo Ciclina D-CDK4.
760
F a m ilia IN K 4
F a m ilia C ip / K ip
p19
p21
p18
T G F -B
p57
p15
p53
P r o te n a
p27
M yc
s e c u e s tr a dora
de p27
p16
C ic lin a D
C ic lin a
CDK 4
p 107
CDK 2
p130
p RB
E 2F
DP
G e n d e C ic lin a E
G e n d e C ic lin a A
O tr o s G e n e s
G1
Fig. 9- 15. Cadena de Inhibidores del Ciclo Celular
Al parecer modula o inhibe la fosforilacin de pRB por este complejo. Por lo tanto
cuando p16 sufre mutaciones o deleciones, el complejo se hace activo y pRB es
fosforilado totalmente, liberando sin control a los factores de transcripcin E2B pasando
por el punto de restriccin antes del lmite G1/S. En algunos tipos de cnceres al pulmn,
el 20% ha perdido la funcin de p16 y el 80% ha perdido la funcin de pRB.
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b) Familia de inhibidores incluye a los tipo CIP/ KIP.
Se encuentran constituidos por las protenas p21 (Cip 1), p27 (Kip1) y p57 (Kip2), que
pueden bloquear directamente la accin fosforiladora del Complejo Ciclina E CDK2 en
la fase G1 tarda para que la clula no pase a S. Tambin son capaces de unirse, pero en
menor grado a los complejos Ciclinas D-CDK4,6.
Factor KIP1 o protena p27 y Kip2 o p57, permanecen altas durante Go y caen en
respuesta a la estimulacin mitognica. La protena p27 se une al complejo CiclinaDCDK4,6 bloqueando la entrada a la fase S y tambin a los complejos Ciclina E-CDK2 y
Ciclina A-CDK2 , (Tabla 4 15).
Factor WAF1 ( wild type fragment 1), es la protena p21 (Cip1). Es producida cuando la
protena p53 aumenta su nivel despus para detectar dao al DNA. La p53 se une a la
761
regin regulatoria del gen de la protena p21, conocido como CIP1 y hace expresar a
este gen su protena inhibidora que acta sobre el complejo CiclinaD-CDK4,6. Este hecho
inhibe la fosforilacin de pRB, que no llega a soltar a los E2F, que a su vez continuarn
inhibiendo la expresin de los genes.
p21 es capaz de unirse a ambos complejos Ciclina D1-CDK4 y Ciclina D2-CDK4,
adems de los otros complejos Ciclina E- CDK y Ciclina A-CDK.
TABLA 4 15
Induccin por:
Senescencia
TGF- (Tumor
Growth Factor)
Senescencia,
diferenciacin
Diferenciacin
Familia de
inhibidores CDKIs
p16 (INK 4)
Sistemas Blanco
Ciclina D/CDK 4 ,6
p15 (INK 4b)
p18 (INK 4c)
p19 (INK 4d)
Dao al DNA,
diferenciacin y
senescencia
p21 (Cip/Kip)
TGF-
Diferenciacin
p27(Cip/Kip)
p57(Cip/Kip)
Ciclina D /CDK 4,6

Ciclina E /CDK2,
Ciclina A /CDK2
Ciclina B/ CDK1
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9) OTROS MODULADORES
a) Factor MDM2
Este es la enzima E3 del sistema de unin de Ubiquitina a el factor p53. Su gen es a su
vez controlado por p53 y su funcin es regular la actividad de p53, ya que al unirse
a p53 inhibe o detiene el exceso de este en la Apoptosis, tambin impide que p53
detenga al Ciclo Celular en el punto de restriccin G1/S. Es incluso capaz de marcar para
la degradacin por proteasas a p53. Su nivel se reduce cuando se une a p19, ya que este
ltimo promueve la degradacin de MDM2. La protena p19 es una protena supresora de
MDM2 que a su vez es antagonista a p53.
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b) CDC 25 A, B y C
Esta es una familia de fosfatasas de aproximadamente 500 aminocidos que muestran su
homologa hacia el lado Ct. Son especialistas en remover fosfatos de las Tirosinas de los
Complejos Ciclina-CDKs, especialmente en el Complejo Ciclina B-CDK1(Cdc2) en el
punto de transicin G2/M. CDC25 aparece en clulas que estn proliferando y conduce a
las clulas a las fases S y M. Esta familia de fosfatasas puede ser a su vez fosforilada.
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762
c) COMPLEJOS LIGANTES DE UBIQUITINA APC Y SCF.

Unir Ubiquitina a un sustrato requiere de tres enzimas E1 por activadora, E2 por
conjugadora y E3 por ligadora de la misma Ubiquitina. El progreso por el Ciclo Celular
requiere de la actividad de varios Complejos cuya actividad consiste en reconocer
sustratos ( Ciclinas y CDKis) y ligarles Ubiquitina para que sean reconocidos por el
Proteosoma que los procede a hidrolizar. De esta manera se queman las distintas etapas
y no se repiten nuevamente.
DEGRADACIN DEPENDIENTE DE APC

SECURINA
Ciclina B
SECURINA
Ciclina B Ubi
Ciclina B
Ubi
Ubi
Separacin
de los Cromosomas
METAFASE
Ciclina B Ubi
Ubi
Ubi
Salida
de la Mitosis
ANAFASE
CITOKINESIS
Fig 10 15. El Complejo APC marca a Securina (mantiene cromosomas juntos) y Ciclina B para
se destruccin permitiendo a la Mitosis continuar con su rutina normal.
El Complejo APC (fig. 10 15) o Anaphase Promoting Complex , es necesario para

salir de la mitosis, ya que interviene en la degradacin de complejos fosforilados de
Ciclina B/ CDKs en la fase M junto a Securina, que mantiene a los cromosomas unidos.
La destruccin de Securina mantiene la euploida o nmero normal de cromosomas y la
degradacin de las Ciclinas B confiere estabilidad al material gentico a la salida de la
Mitosis (fig. 10 15).
APC es activado por las molculas denominadas Cdc20 y Hct1. Cdc20, es la subunidad
activadora de APC, se une en Metafase y Anafase. Posterior a su efecto viene la accin
de las enzimas E1 y E2 ms la unin de la Ubiquitina. Por otro lado Hct1 o Cdh1
(relacionado a Cdc20), mantiene activo a APC despus de Anafase y a travs de G1.
El otro Complejo, es denominado SCF (fig. 11 -15) por Scaffold proteins y es
necesario para alcanzar la fase S. Interviene como SCFSkp1 y se encuentra formado por
la unin de las protenas Skp1,Cullin (como parte de E3-ligasa) y la protena FBP
denominada F-box por su dominio de 40 aminocidos necesario para la especificidad.
Otra protena de este complejo es la Roc1. Existe, un Complejo homlogo al primero y es
el Skp2-Cullin-F-box que es denominado SCFSkp2 .
SCF es capaz de inducir la formacin de una cadena de mltiples unidades de Ubiquitina
en los CDKIs: p21 y p27, que son los inhibidores de los complejos Ciclina/ CDKs que
una vez destruidos, permiten el paso a la fase S. Los CDKIs (p21 , p27) se fosforilan
primero mediante una kinasa para ser posteriormente reconocidos por las actividades
763
enzimticas del complejo SCF, como son E1, E2 y E3 que junto a la unin de varias
unidades de Ubiquitina forman una cola bifurcada que finalmente es reconocida por el
Proteosoma y es degradada. En la fase S, este mismo sistema degrada al complejo
Ciclina A-CDK, reconocido por el motivo F-box de la protena FBP. Es tambin posible
que SCF intervenga en la degradacin de las Ciclinas D y E.
Skp1
E3
Roc1
Cull 1
FBP
E2
Ubi
Sustrato
Fig. 11 15. Protenas o subunidades que forman el Complejo SCF
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10) CICLO CELULAR

Despus de analizar los mecanismos individuales involucrados en el control del Ciclo
Celular es necesario entrar a observar en que orden se integran y el grado de
complejidad que alcanzan al reunirse todos estos mecanismos en un proceso delicado. La
clula tiene la capacidad para multiplicarse, permanecer en reposo o diferenciarse y
cualquiera de las elecciones que tome depender del control que exista en el paso
Go/G1. En reposo la clula normal recibe una sinfona de seales tanto del tipo
estimuladoras como inhibitorias y el camino que decida tomar depender del balance o
imbalance entre ambas seales.
A lo largo de todo el Ciclo (Fig. 12 15), se observa la aparicin y desaparicin de las
Ciclinas junto a la actividad fosforilante de los distintos complejos Ciclina CDKs,
acompaada por la actividad contraria o defosforilante de las fosfatasas Cdcs, junto a
la regulacin en la transcripcin de nuevos factores y el control de su actividad por medio
de protelisis, llevada a cabo por los sistemas APC y SCF. Otra de las formas de
regulacin incluye el secuestro de factores por MDM2 y 14-3-3, junto al efecto de
inhibidores del tipo Cip/Kip e INK. En general, las Ciclinas D y E aparecen en la fase G1,
764
las Ciclinas E y A aparecen durante la fase S del Ciclo (replicacin del DNA) y las
Ciclinas A y B durante las fases G2 y M (Mitosis).
Mitosis regulada por

unin de Ciclina tipo B
Go
Ciclina tipo D se unen

a CDK4 y CDK6.
Actividad esencial para
entrar a G1
Ciclinas D Ciclinas D
Ciclinas B
CDK4
CDK 1
CDK 6
M
G1
2
G2
S
Ciclinas A
CDK 1
Ciclinas A
CDK
2
Ciclina tipo E se asocia

a CDK2 y regula el
progreso de G1 a S. Se
inducen por Ciclina D y
refuerzan esta accin
Ciclina tipo A se une a

CDK2 y se requieren
durante fase S para
promover paso de G2 a
M con CDK1
Ciclinas E
CDK 2
Fig. 12 -15. Complejos Ciclina/ CDK activan las distintas partes del Ciclo celular
El Ciclo se inicia normalmente por medio de los factores de crecimiento o mitgenos,

que actan sobre la clula en reposo o la etapa Go e inducen la aparicin de las Ciclinas
tipo D en G1 (Ciclinas G1: D y E), representadas por la familia D1, D2 y D3, etc. (Fig. 12
15).
En algunas ocasiones puede ocurrir que la Ciclina D1 se sobre-exprese anormalmente,
como resultado de una amplificacin gnica o una translocacin accidental y que
junto a la enzima CDK4, que es donde ejerce su accin activadora, se dispare fuera de
control. De esta forma se sacara a la clula de la etapa Go y se la llevara a la
transformacin inducida. En ambos casos normal y alterado, las Ciclinas de la familia D
se asocian a las Kinasas CDK4 y 6 para formar el Complejo Ciclina CDK4,6 y hacer
entrar a la clula al Ciclo (Figs. 13 15).
A continuacin se observa que para activar a este complejo se necesita del concurso de
CAK o Kinasa Activadora de CDKs. Esta es una familia de enzimas fosforiladoras. La
fosforilacin se lleva a cabo en la Thr 160 con lo cual el complejo Ciclina D-CDK 4,6 Thr
160-P se encuentra activado. Por otro lado existe tambin una familia de protenas
defosforiladoras o Fosfatasas, Cdc25 A, B y C que pueden desactivar y cada una de
ellas tiene una distinta afinidad por los Complejos Ciclina/CDKs.
Continuando con el Ciclo, una vez fosforilado el complejo Ciclina D-CDK 4,6 Thr 160-P
entra al ncleo y fosforila a su vez a las protenas de la familia pRB, p107 y p130 (fig. 14 15). Estas ltimas se encuentran inhibiendo la transcripcin de los genes encargados de
preparar a la clula para la entrada al Ciclo Celular (paso Go/G1) o para pasar el punto de
Control antes del lmite G1/S. Como consecuencia de lo anterior se fosforila
progresivamente pRB, que se suelta del complejo inhibidor pRB-E2F-DP- DNA (DP, por
765
DNA Binding Protein, es una protena relacionada con los E2Fs) y se expresan
sucesivamente los genes de las Ciclinas E, A y B, ms los genes de la fase S, G1 y M
junto a la enzima Dihidroflico Reductasa y Timidina Kinasa (Figs. 13 15).
Los genes son activados en forma trans, es decir se activan tanto el alelo paterno como el
materno por el complejo E2F-DP- DNA.
Ciclina D CAK Ciclina D

CDK4,6 P
CDK4,6
P
pRB
Fosforilacin
P P
Fosforilacin
por CAK
pRB
pRB
P
Fosforilacin
E2F E2F
E2F E2F
Ciclina E
CAK
Ciclina E
CDK 2
CDK 2
Fosforilacin
por CAK
E2F E2F
Activacin de Genes de las Ciclinas E, A y B

ms genes de las fases S, G2 y M junto a
DHFR y TK
Fig. 13 15. Activacin por Fosforilacin de complejos Ciclina/CDK por CAK y control del
Complejo pRB - E2F- DNA mediante fosforilacin en G1. Efecto de la Ciclina D y posterior refuerzo
de la Ciclina E para fosforilar a pRB. E2F queda libre e inicia la transcripcin (DHFR : Dihidrofolato
Reductasa) y (TK :Timidina Kinasa).
Luego, para que la clula pase de G1 a S, las Ciclinas G1 de la familia D deben

experimentar protelisis, dejando de esta manera lugar a las Ciclinas E y A. Estas ltimas
han sido recin sintetizadas por los genes expresados por el mecanismo de la fase
anterior o G1. Al mismo tiempo se fosforilan los CDKIs, que podran inhibir el Ciclo, por lo
que son hidrolizados y destruidos por los sistemas Ubiquitina/ Proteosoma 26S. De esta
forma se deja libre de influencias a los nuevos complejos Ciclina/CDKs para continuar.
766
Dao al
DNA
Apoptosis
p53
p27
Ataxia Telangiactasia
p21
CICLINAS
D1, D2, D3
TGF-
Familia INK4
p15,p16,p18,p19
CICLINAS
D1, D2, D3
CICLINAS
D1, D2, D3
CDK 4, 6
CDK 4, 6
CDK 4, 6
GENES
REPRIMIDOS
p107
pRB
E2F
4,2,3
E2F
4,5
DP
p130
pRB
E2F
4,2,3,
p107
DP
DNA
E2F
4,5
DP
DNA
Genes que permiten

pasar control G1/S
P
p130
P
P
P
P
GENES DESREPRIMIDOS
DP
DNA
Fosforilacin por CDK4,6

de la familia pRB
E2F
4,5
DP
E2F
4,5
DP
DNA
DHFR -TK -TS - POL - CDC2 - E2F1 Ciclina E, A - p107 - E2F 1,2
Fig. 14-15. Activacin e inhibicin de pRB, p107 y p130. Se expresan enzimas para la sntesis de
DNA y las Ciclinas de la fase S y los CDKs correspondientes que se mantienen latentes por accin
de los CDKis. (DHFR : Dihidroflico Reductasa. TK: Timidina Kinasa, TS Timidina Sintasa)
Por su parte la Ciclina E (figs. 13 15), aumenta y disminuye rpidamente en el lmite

G1/S y en su periodo ascendente se asocia a la Kinasa CDK2 acelerando la fosforilacin
de la familia pRB, previa fosforilacin de la Thr 160 del complejo Ciclina E- CDK2 por
CAK. Su efecto contribuye a liberar ms factores E2F, para que estos pasen a actuar
de forma trans sobre sus respectivos genes. Por otro lado, el complejo Ciclina E -CDK2 es
tambin capaz de actuar por retroalimentacin positiva, es decir estimula su propia
sntesis.
767
Ms adelante en el Ciclo, la Ciclina A (figs. 14,15 15) se expresa despus de la Ciclina

E, entre la lnea divisoria de la etapa G1 y S. La Ciclina A se hace importante para esta
transicin, al asociarse a CDK2 en la fase S y an con CDC2 (CDK1) en la fase tarda
de S y en el inicio de G2 (fig. 9 15). Posteriormente baja su concentracin en la fase M.
Al parecer se encuentra relacionada con el paso por el punto de control G2/M, donde se
comprueba la normalidad del huso mittico antes de poder continuar.
P18
P15
P19
P21
P16
G1
M
Ciclina D1
Ciclina D2
Ciclina D3
CDK4,6
CDK4,6
CDK4,6
Ciclina A
CDK 1
Ciclina E
E2F
E2F
p107
Ciclina A
P21
P
P
P27
CDK2
pRB
p107
CDK 1
pRB
DP1
Ciclina B
CDK 1
G2
E2F
E2F
pRB
P
CDC25A
Ciclina A
CDK 1
P
pRB
pRB
E2F
pRB
Ciclina A
P
P
E2F
Ciclina H
CDC25
P27
CDC25A
CDK2
P21
CDK7
Fig 15 15. Control del Ciclo Celular en todas sus fases G1, S, G2 y M.
En la fase S participan las Ciclinas E y A (fig. 15 -15), el complejo Ciclina A CDK2 es a

su vez fosforilado y mantenido inactivo por el otro complejo CAK o Ciclina H-CDK7.
Posteriormente, Cdc 25A defosforila al complejo Ciclina A-CDK2, el cual pasa ahora a
fosforilar al complejo RB- E2F, donde RB se libera ya fosforilado y deja libre a E2F que
junto a DP1, permiten la expresin de nuevos genes. En esta fase los Complejos
Ciclina/CDKs fosforilan los sitios regulatorios de las protenas que formarn los sitios de
768
Pre-replicacin del DNA, cuyo ensamblaje original ocurri en G1. El evitar el ensamblaje
de nuevos complejos asegura que no exista ms de una replicacin por sitio.
Durante la fase S otros complejos Ciclina-CDK se forman, pero son mantenidos inactivos
por su fosforilacin en sitios inhibitorios, especialmente por Wee1.
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11) REPLICACIN EN LA FASE
La replicacin del DNA tienen lugar en la fase S y depende de la asociacin de una serie
de protenas en distintos lugares de cada cromosoma. Estos sitios de unin en el DNA se
denominan orgenes de replicacin (RO) y poseen una secuencia especial. A ellos se une
el complejo proteico de reconocimiento del origen (ORC), que provee de un sitio o
plataforma al cual se pueden unir factores adicionales. Este proceso es capaz de provocar
la separacin de la doble hebra, para recibir an nuevos factores destinados a la
replicacin. La presencia de los factores que constituyen el ORC o complejo de replicacin
depende a su vez de la actividad presentada por el factor E2F. Este es liberado por la
accin de las Ciclinas A-CDK2 y Ciclina E -CDK2 (fig. 16 - 15). El complejo de replicacin
a su vez, presenta dos estados:
Defosforilacin
P
ORC
ORC
Al Citoplasma
P
MCM2-7
P
P
cdc 45
ORC
Horquilla de
Replicacin
ORC
P
Geminina
Cdt1
P
Cdt1
cdc6
Cdt1
cdc6
ORC
MCM2-7
M
G2
post-RC
pre-RC
G1
Degaradacin
de Geminina
Cdt1
cdc6
ORC
adquisicin de la
licencia
licencia activada
por fosforilacin
G1/S
cdk
Enzimas
hcdc7 Fosforiladoras
disparan la
iniciacin
Degradacin y
exportacin
Fig. 16 15. Activacin de la maquinaria de replicacin en los ORC.
a) uno que se denomina pre-replicativo (pre-RC) y parte en la fase de Mitosis tarda o

inicio de G1. En aquellos sitios del DNA donde se origina la replicacin (fig. 13 - 15), el
ORC permanece asociado durante todo el Ciclo Celular y una vez que la clula ha
completado la Mitosis, aparecen los factores para adquirir licencia para replicar. Estos
ltimos son los llamados Cdc6 y Cdt1, ambos se integran a la cromatina en el ORC y a su
vez permiten la entrada del factor MCM 2-7 (por mini chromosome maintenance).
769
Este es supuestamente una helicasa de replicacin, cuyo montaje en el complejo es

evitado por una protena denominada Geminina, que acta como regulador negativo. Por
lo tanto es necesario que la Geminina, se encuentre degradada para que se monte el
complejo, lo que ocurre en la fase de Mitosis tarda e inicio de G1.
b) el otro estado es post- replicativo (post-RC), que existe desde el inicio de la etapa S y
termina en la etapa final M. A continuacin de esta etapa aparecen dos Kinasas a la vez,
denominadas cdk y HsDbf4 (hcdc7 o cdc7) que se requieren para activar la licencia
de los Orgenes de Replicacin. La actividad de las Kinasas provoca fosforilacin de
Cdc45 que se une al complejo MCM2-7 fosforilado ORC- Cromatina, lo que es
seguido por el desenrrollamiento de los sitios de inicio de la replicacin. Posteriormente,
protenas de la replicacin controladas por E2F, como lo son RPA, DNA Polimerasa y
se integran al sitio de replicacin. Est claro que solo el aumento de las Kinasas cdk y
hsDbf4 (hcdc7) en G1/S, dispara la iniciacin y replicacin del DNA, pasando luego a la
etapa post-RC, donde se genera nuevamente este complejo, pero solo hacia la etapa
final de la mitosis. Las protenas MCM se mueven lejos del origen desenrollando el DNA y
el ensamblaje posterior de complejos pre-replicativos es bloqueado por actividad de CDK.
Esta kinasa activa la replicacin y evita re-iniciacin en la fase S. De esta manera todo el
DNA se replica tan solo una vez.
La replicacin depende entonces de los factores cdt1 y cdc6. La ausencia de estos
factores en y durante el final de la etapa S, evita el adquirir nuevamente la licencia de
replicacin por los Replicones. Ambos factores no aparecen hasta despus de la Mitosis,
asegurando que la replicacin sea de tan solo una vez por ciclo. Por otro lado los
cromosomas mitticos no inician la replicacin del DNA hasta que no se monten
totalmente los complejos ORC y se adquiera la licencia. Map2 es el mecanismo que evita
el licenciamiento en esta etapa. La fosforilacin inhibitoria de ORC y MCM2 por kinasas
mitticas, les evita interactuar entre ellos y otras subunidades para formar el complejo de
replicacin junto al reclutamiento de otros factores junto a ORC/MCM/DNA
Por otro lado, el paso desde la etapa G2 a M se encuentra controlado por la Fosfatasa
Cdc25 que acta sobre el complejo fosforilado Ciclina B/ Cdc2 (fig. 17 15). Este
complejo controla el arreglo de los microtbulos durante la Mitosis y se forma al unirse la
Ciclina B con la subunidad Kinsica Cdc2. Una vez formado se fosforila por los
compuestos Myt, Wee y CAK (fig. 17 15), sin embargo el complejo permanece inactivo
y solo se activa por la defosforilacin de Tyr 15 por medio de la fosfatasa Cdc25. Una vez
que el complejo se encuentra activo fosforila al complejo de la protena Rb E2F- gen,
quedando E2F libre de unirse con DP1 al DNA para iniciar la transcripcin de los genes
involucrados en la fase M, como son los genes encargados de la formacin de los
microtbulos del huso mittico, la condensacin de la cromatina y ruptura de la membrana
nuclear. La Ciclina B se degrada cuando las clulas entran en la Anafase.
En la misma fase M fase actan los complejos de Ciclina Mittica (Ciclinas A y B) / CDKs,
que sufren defosforilacin de los sitios inhibitorios. Por otro lado las actividades de la
Ciclina A-CDK2 y Ciclina E CDK2 son esenciales para el inicio y completacin de la
replicacin del DNA, adems aseguran de que este evento ocurra tan solo una vez por
770
Ciclina B
Ciclina B
CDC2
Ciclina B
CDC2
CDC2
P P
P
T14 Y15 T161
T14 Y15 T161
Complejo
inactivo
CAK
(Thr 161)
P
T14 Y15 T161
Cdc 25
CACAK
APC
+ Ub
Complejo
activo que
promueve el
ensamble del
Huso mitotico,
condensacin
de la cromatina
y ruptura de la
membrana
nuclear
Ciclina B Ub
CDC2
Wee 1
(Tyr 15)
Myt
P
T14 Y15 T161
CDC2
(Thr14)
Ciclina B
Fig. 17 15. Activacin del Complejo Ciclina B-CDC2 mediante fosforilacin y defosforilacin
especfica. APC es el complejo que une o liga la Ubiquitina a la Ciclina B.
Ciclo. Ambos complejos, al fosforilar a la protena RB dejan libre la capacidad para

aumentar la transcripcin de histonas y otros genes relacionados con la replicacin.
TABLA 5 15
CUADRO RESUMEN DEL CICLO CELULAR
ACTIVACIN DEL CICLO
FASE DEL CICLO
Complejo Ciclina D-Cdk4,6
Reprimen a pRB por fosforilacin y se produce la

liberacin de E2F para iniciar transcripcin y paso
por G1
Inicio de fase S
Preparacin para la Mitosis
Inicio de Mitosis
Complejo Ciclina E Cdk2

Ciclina A se une tambin a Cdk2
Complejo Ciclina B-Cdc2 (Cdk1), a este
complejo se le llama tambin promotor de
fase Mittica o MPF
CONTROL DEL CICLO
Activacin de CDKs
Inhibicin de CDKs
MECANISMO
Unin a Ciclinas Fosforilacin por CAK o Ciclina H
- Cdk7
Control sobre E2F
Transcripcin
Protelisis por sistemas SCF o APC
Localizacin ncleo o citoplasma
Fosforilacin
La Ciclina B que regula la entrada a la fase M, aumenta desde la fase S alcanzando un

mximo en el punto de control G2/M y se asocia con CDK1 y CDC2. Ambas Ciclinas A y
B mantienen a la familia pRB fosforilada al mximo hasta que la clula completa la mitosis
y reentra a G1 o pasa a Go. En la figura 17-15, CAK es el complejo fosforilante formado
771
por Ciclina H - CDK7 - MAT1 (por Menage A Trois o factor ensamblador) y promueve
una respuesta transcripcional que se le compara a la producida por el factor de
transcripcin TFIIH y a otros ms de la misma familia como TFIIE y TFIIF.
A continuacin (Tabla 5 15), se puede observar la vigencia de los distintos complejos
activadores junto a los inhibidores presentes durante las diferentes fases del Ciclo Celular.
Volver al inicio
12) PUNTOS DE CONTROL DEL CICLO CELULAR
a) PRIMERO G1 / S (Dao al DNA)
A medida que la clula se prepara para replicar su DNA en la fase S y crecer en G2
para luego dividirse en dos celulas hijas en la fase M, aparecen ciertos Puntos de
Control (fig. 18 -15). Estos permiten asegurar la sincronizacin y la secuencia de las
transiciones. De esta manera, se pretende mantener la alta fidelidad durante la replicacin
del DNA. Sin la presencia de los puntos de control, se producira una inestabilidad
genmica conducente al cncer. Por lo tanto, los genes que intervienen en este proceso
son altamente conservados en las distintas especies.
Todos es tos puntos de control vigilan el correcto desempeo secuencial de los
mecanismos que rigen el Ciclo Celular. El punto G1/S se relaciona con la partida del Ciclo
Celular, mientras que S depende del dao que haya sufrido el DNA. G2/M depende de
que la replicacin sea completa y que el DNA no halla sufrido daos. A su vez activa al
Control de la replicacin del DNA
Control de la
formacin del huso
G2/M
CENTROSOMAS
Control del dao en el DNA

o dao Genotxico en G1/S
G1
G2
Fig. 18 15. Distintos puntos de control para la replicacin del DNA.
Complejo Promotor de la Anafase o APC (Anaphase Promotor Complex) para el paso por
la Mitosis desencadenando la destrucccin de muchas protenas mediante el mecanismo
de Poliubiquitinacin y Proteosoma. El Ciclo se detiene si la clula no esta preparada para
la replicacin del DNA en G1/S o su divisin en G2/M. Primer Sitio de Control G1/S
(VA DEL ATM / ATR / CHK2(CHK1)-p53 / MDM2- p21)
772
Inestabilidad
Genmica y
CNCER
INHIBICIN DE LA
HORQUILLA DE
REPLICACIN
RELOCALIZACIN
DE LOS
ATR
DAO
AL DNA
ACTIVACION
DE LOS ATM
Inh. complejo
Ciclina-CDKs ,
Reparacin del
DNA,
Remodelacin de
la Cromatina
MODULACIN EN EL
DESTINO DE LA
CLULA
Apoptosis
Fig.19-15. Pasos a seguir despus del dao al DNA
Dao al DNA o
estrs genotxico
Destruccin por
Proteosoma 26S
Ubiquitina
Cdc25A
P53
P21
Ciclina E
CDK2
CDK2
P21 se une a los

complejos
Ciclina/CDK para
disminuir la
fosforilacin de
RB
E2F
Ciclina E
Ser 15
CDK
Cdc25A
es
una
Fosfatasa que activa
las Kinasas del Ciclo
Celular. En este caso
se
marca
por
fosforilacin para su
unin a Ubiquitina y
posterior destruccin
por el Proteosoma
26S
Cdc25C
No se activa
MDM2 es una ligasa

de Ubiquitina y su
presencia mantiene
los niveles de P53
bajos.
En este caso es inh.
por fosforilacin y
p53 aumenta
Ciclina
Va lenta
Va rpida
Cdc25A
ATM / ATR
Chk1/2
MDM2
E2F
RB
Inh. de Ciclina E, promotora de paso

G1/S(inh. sint. DNA).
Detencin del Ciclo en G1.
No hay transicin a S por solo algunas
horas a menos que el paso
lento de p53 contine apoyando
RB
P
Inhibicin de la
Sntesis de Ciclina DCDK4,
Ciclina E - CDK2 y Ciclina
A-CDK2
Fig. 20 15. El Complejo ATM/ATR tiene una va rpida y otra lenta .
Los sensores de las alteraciones y/o lesiones que sufre el DNA traspasan esta
informacin a dos enzimas denominadas ATM y ATR. ATM es el gen que codifica para
773
una kinasa, cuyo gen mutado provoca la enfermedad denominada Ataxia

Telangiectasia que predispone al cncer. Por otro lado, ATR es otro gen de la familia,
que codifica para una kinasa relacionada secuencialmente con ATM y la kinasa Rad3.
Tanto ATM como ATR pueden ser considerados como genes tumosupresores. Los
productos de la expresin de ambos genes ATM y ATR son enzimas capaces de fosforilar
activando a otras dos Kinasas Chk1 y Chk2 respectivamente. Posteriormente, ambas
desencadenan una cascada de regulacin conducente a detener o retardar el Ciclo
Celular (fig. 19 -15). Los factores proteicos empleados para este fin sern aquellos que
modifican la actividad de los distintos complejos Ciclina-CDKs.
La primera cascada (ATM) de regulacin o Va rpida detiene el progreso en G1. Las Chk
1 y 2 fosforilan e inactivan a la Cdc25 (fig. 20 -15). De esta manera ya no puede activar al
complejo CDK2/CiclinaE. El Ciclo se detiene en G1 por solo un tiempo determinado.
La Va lenta o segunda cascada se relaciona con el aumento del nivel de p53, debido a la
fosforilacin e inhibicin de MDM2 (factor que marca para la destruccin a p53), seguido
del aumento de la transcripcin de p21. Este ltimo acta como inhibidor de las Kinasas
dependientes de Ciclinas, tales como CiclinaD-CDK4, CiclinaE-CDK2 y CiclinaA-CDK2.
De esta manera, se apoya la detencin provocada por la Va rpida en G1, al mismo
tiempo se frena la fase S y se detiene el paso a la fase G2. De esta manera se da tiempo
para inducir a los genes involucrados en la reparacin del dao.
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b) SEGUNDO SITIO DE CONTROL EN LA FASE S.

Este mecanismo debe detener la replicacin del DNA de forma casi instantnea y a la vez
evitar que se formen nuevos sitios de inicio. Para ello existen dos procesos mediados por
774
los productos de los genes o kinasas ATM y ATR (fig. 21-15). La ruptura del DNA por
radiacin provoca una alteracin de la Cromatina que conduce a una fosforilacin de ATM
que a su vez desencadena la respuesta fosforilando una serie de protenas destinadas a
detener el Ciclo y reparar el dao.
P
P
mdm
2
ATM/ATR
CHK2
P
p53
SMC1
1
Ser 343
P
NBS1
Brca1
1
Rad50
Mre11
p21
Detencin en G1 o
Apoptosis
Ser 957
Ser 966
P
P
FancD2
Control en fase S
Brca1
hRad17
Control en G2
Fig. 21 -15. Transduccin de seales mediante fosforilacin de distintas Protenas en la fase S.

SMC1 es Cohesina, una protena que necesaria para la perfecta condensacin y segregacin de
los cromosomas en la Mitosis.
Las protenas fosforiladas por este sistema provienen de una serie de mecanismos de
regulacin, cuya falla puede provocar todo tipo de alteraciones a la clula. En la siguiente
Tabla 6- 15, se observa la relacin entre las alteraciones de los genes codificantes de las
protenas responsables de la cadena de control (SMC1, NBS1, Brca1, etc.) y el tipo de
cncer que producen, cuando han sufrido una mutacin, se han expresado de forma
alterada o hacen muchas o pocas copias de si mismas fuera de tiempo. El tipo de cncer
provocado puede ser adquirido o hereditario (presente en clula germinal).
Por otro lado la luz UV y los agentes alquilantes desencadenan una respuesta similar de
la Kinasa ATR, que tambin inicia o desencadena la cascada por fosforilacin.
El propsito de este mecanismo es inhibir al sistema CiclinaB CDC2.
TABLA 6 -15
Gen
Enfermedad
Predisposicin a Cncer
provocado por su
775
Sndrome
familiar
mutacin
ATM
Ataxia-Telangiectasia
NBS1
Sndrome de
Nijmegen
Anemia de Fanconi
Carcinoma
Sndrome de LiFraumeni
FancD2
Brca 1
P53,CHEK2
Carcinoma, Leucemia,
Linfoma
Leucemia, Linfoma
CDC25A
Leucemia mielognica aguda

Ovario y mamas
Sarcomas, leucemias,
tumores cerebrales, tumores
adrenales y otros
Amplio espectro de cnceres
Retinoblastoma
familiar
Carcinoma
RB
s
s
Mamas, cerebro, pulmones,

cuello y linfoma
No se sabe
En la figura 22 -15 se observa a lo largo del Ciclo los distintos estados de activacin del
Complejo CiclinaB-CDC2. Es inactivo en G1 despus de la defosforilacin por Cdc 25 y
destruccin de la Ciclina B por el sistema Ubiquitina/Proteosoma 26S. Tambin es inactivo
cuando se encuentra totalmente fosforilado en G2 por los factores kinasas representados
por Wee1, Myt y CAK y solo Cdc25 hidroliza los fosfatos correspondientes para su
activacin en M. A su vez Cdc25 es fosforilado por el complejo activo para aumentar su
actividad.
In a c t i v o
G2
A c tiv o
C ic lin a B
Cdc 25
CDC2
P
T14
P
Y15
C ic lin a B
CDC2
P
T161
P
T161
W e e 1 (Tyr 15)
M y t (T h r 1 4 )
D e s tr u c c i n
d e C i c l in a B
C A K (T h r 1 6 1 )
CDC2
S /G 2
CDC2
C ic lin a B
In a c t i v o
G1
In a c t i v o
Fig. 22 15. Regulacin de la actividad de CiclinaB CDC2. Este complejo prepara a la
Clula para entrar a la Mitosis.
Otro punto de control en la fase S, es aquel que asegura de que ocurra solo una vez por
ciclo, as tenemos que el ensamblaje del complejo de pre-reconocimiento ubicado en el
punto de origen de la replicacin ocurre en pequeas secciones de DNA esenciales
para este proceso. El montaje del complejo ORC, como se explic anteriormente es
llevado a cabo por una serie de protenas unidas a estas secuencias y ocurre en G1, que
es donde se originan los complejos iniciadores. Para entender este punto de control se
deben analizar e identificar los factores que contribuyen a su formacin y aquellos otros
776
factores que la inhiben. En el paso G1/S, tenemos a dos kinasas y sus complejos activos
CDK4/6- Ciclina D y CDK2-Ciclina E, ms los factores de transcripcin que incluyen a
R2B y E2F.
En G1 el represor Rb-HDAC se une al E2F-DP1 factor de transcripcin inhibiendo el
sistema corriente abajo. Fosforilacin de CDK4/6 y CDK2 disocia el complejo represor
donde se encuentra Rb, permitiendo la transcripcin de los genes para la fase S y que son
necesarios para la replicacin del DNA.
Algunos de los otros factores que son controlados incluyen la presencia de TGF beta,
dao al DNA, inhibicin por contacto, senescencia replicativa y remocin del factor de
transcripcin. Los cuatro primeros actan induciendo a miembros de los inhibidores INK4
y Kip/Cip. La remocin del factor de crecimiento activa a GSK 3 beta que fosforila a Ciclina
D conduciendo a una rpida Ubiquitinacin y degradacin de Proteosomas.
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c) TERCER SITIO DE CONTROL EN G2/ M

El punto de control menos conocido corresponde al lmite G2/M que ocurre antes de la
divisin celular. En este punto se debe evitar el inicio de la Mitosis, cuando se ha sufrido
algn dao previo en el DNA durante G1, S o el mismo G2.
777
Retencin en
el Citoplasma
Dao al DNA o
estrs genotxico
Retencin en
el Citoplasma
14-3-3
CDC2
Chk1/2
ATM / ATR
P53
Ciclina
CDK
14-3-3
Cdc25C
Ciclina B
CDC2
GADD45
P21
Cdc25C
E2F
Cdc25C
Ciclina B
(CDC2) CDK1
E2F
Ciclina B
(CDC2) CDK1
No se activa
Detencin en
G2
RB
P
No hay entrada a
la fase S
RB
P
Inhibicin de la sntesis
de Ciclina B y CDC2
Fig 23 15. Eliminacin de CDC25, efecto inhibitorio de P21 y factor RB unido a E2F impiden la
activacin del complejo CiclinaB/CDC2 y la liberacin del factor E2F para estimular la sntesis de
CilinaB y CDC2.
En la figura 23 15 se observa que el estrs genotxico activa a los sistemas ATM/ATR

conduciendo a la fosforilacin y activacin de las kinasas CHK1 y CHK2, seguido de
fosforilacin de Cdc25C. La entrada a la Mitosis se detienen cuando la Fosfatasa Cdc25c
es retenida en el citoplasma por medio de la protena 14-3-3, que impide su accin sobre
el complejo fosforilado Ciclina B/ (CDC2) CDK1.
El sistema ATM/ATR tambin activa el sistema de seales p53 que contribuye a
mantener a las clulas en G2, al retener en el citoplasma mediante la protena 14-3-3
a la kinasa CDK1 (CDC2). Por otro lado se observa el efecto de p 21, que reduce la
fosforilacin de RB y evita que E2F se libere para mediar la expresin de Ciclina B y
CDC2. La protena p21 tambin se une al complejo Ciclina B/CDC2 (CDK1) para bloquear
la entrada a la Mitosis. GADD45 otra protena de la va de p53 tambin se puede unir al
complejo Ciclina B/CDC2 (CDK1) para inhibirlo (fig. 23-15).
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778
d) CUARTO SITIO DE CONTROL A NIVEL DE LA MITOSIS (SITIO M), DURANTE LA

FORMACIN DEL HUSO MITTICO.
En primer lugar es necesario analizar las distintas etapas de la Mitosis que se
distinguen por las siguientes caractersticas:
Profase: Se desarma la envoltura nuclear. La entrada a la fase M se produce por
fosforilacin de los filamentos de Lamininas Nucleares por los complejos Ciclina /CDKs. A
consecuencias de ellos se produce la depolimerizacin del filamento y se desarma la
estructura carioesqueltica de la superficie nucleoplsmica perteneciente a la membrana
nuclear.
Metafase: la membrana nuclear desaparece y se alinean los centrolos en los polos
opuestos, las fibras polares se extienden desde los polos de la clula. Las fibras polares
se extienden desde los polos al centro de la clula. Los cromosomas se mueven al azar
hasta que se unen los cinetocros a los microtbulos, que nacen de los centrmeros y se
alinea en la placa metafsica en ngulo recto a los microtbulos del huso. Los
cromosomas se mantienen en esta placa debido a la tensin similar que ocurre en ambos
centrmeros.
Anafase: Las Fosfatasas hidrolizan los Fosfatos agregados a protenas por complejos de
Ciclinas Mitticas / CDKs (MPF). Como se observ anteriormente el complejo APC-Cdh1
contribuye a la Ubiquitinizacin de las Ciclinas mitticas que son posteriormente
degradas mediante el Proteosoma 26S.
Telofase: Los cromosomas se hinchan y pierden su condensacin. Se vuelve a formar la
membrana nuclear, aparece el aparato de Golgi y el citoplasma se divide.
Se termina la Mitosis cuando se degradan las Ciclinas B.
Citocinesis o kinesis: Empieza con una hendidura en la membrana citoplasmtica
conducente a la divisin del citoplasma, citoesqueleto, organelos y membrana en dos
clulas hijas. Se produce un anillo de actina y miosina con una contraccin perpendicular
al huso mittico que empuja los cromosomas hacia cada extremo asegurando a la
formacin de dos ncleos. Una vez terminada la separacin el anillo desaparece.
A continuacin se analizar el sitio de Control M:
El sitio de control M o restriccin de la Mitosis, detecta cualquiera fallas a nivel de G2 y
Profase, luego entre la Metafase y la Anafase y finalmente a la salida de la Mitosis entre
Telofase y G1. En estos subsitios se detecta una serie de procesos entre los cuales
tenemos:
a) la correcta unin de las fibras del huso con los cinetocros de los cromosomas.
b) El correcto alineamiento y formacin del huso mittico.
779
c) inhibicin del proceso de citocinesis o divisin de la clula al inhibir la formacin de un

cinturn de actina y miosina, que al apretarse produce dos clulas hijas. Ahora si el dao
es irreparable normalmente se produce la Apoptosis Celular.
APC: reconoce la caja o secuencia de
CICLINA B
destruccin en aquellas protenas

donde agrega la Ubiquitina
MPF
Cdc2
APC: activado liga Ubiquitina

Inhibidor de la
Anafase PDS1,
CUT2 (Securina,
Separasa, Scc1)
G2
Profase
Metafase
Hidrlisis
CICLINA B
Hidrlisis
Cdc2
Cdc2
Anafase
Telofase
G1
Citocinesis
Fig. 24 15. MPF puede controlar la entrada en la Profase, Anafase y salida de la Mitosis.
El Control de la actividad Fosforilante de MPF (Factor Promotor de la Maduracin) se lleva a cabo
mediante su destruccin. Esta se encuentra determinada por la actividad Ligasa presentada por el
Complejo Promotor de la Anafase (APC) activo (Se activa por el mismo MPF), que une Ubiquitina a
Ciclina B durante la Anafase tarda de la Mitosis. Si APC (Complejo Promotor de la Anafase) se
mantiene inactivo la clula permanece en la anafase y se retarda segregacin de los cromosomas,
no se promueve Telofase.
Para conocer la complejidad del sistema que emplea la clula es necesario desglosar este
sitio de restriccin y analizar el desempeo individual de sus componentes:
Las Ciclinas Mitticas (Ciclinas A y B) forman complejos regulatorios con las CDKs.
Estos, a su vez se mantienen inactivos por fosforilacin en los sitios inhibitorios y solo
previo a la mitosis se activan por defosforilacin. La funcin del Complejo Cdk1/Ciclinas
A y B denominado Factor de Maduracin (MPF) o Factor Promotor de la Fase M es
ser una Kinasa. Esta propiedad la emplea para activar protenas que a su vez
promueven en cascada una serie de pasos destinados a preparar a la clula para la
separacin de los cromosomas y la divisin celular. Adems, se fosforila a la miosina
para facilitar la Citokinesis y se activa al Complejo Promotor de la Anafase (APC) o
Ciclosoma mismo, para que este destruya a la ciclina B por unin de la Ubiquitina. De
esta manera MPF se autoregula y prepara a la vez la produccin de Ciclinas G1 para la
proxima vuelta del ciclo.
APC es un regulador maestro que controla multiples eventos y entre ellos tenemos a :
a) La separacin de cromtidas hermanas o desde Metafase a Anafase
b) Movimiento de los cromosomas en la Anafase
780
c) Salida de la Mitosis
d) Licencia para la replicacin del DNA y acoplamiento entre fase S y M.
Todos estos procesos se han mantenido inalterados durante la evolucin, lo que indica su
grado de importancia. Mediante su correcto funcionamiento se evita que aquellas clulas
con cromosomas mal alineados den origen durante la mitosis a clulas con un nmero
anormal de cromosomas o aneuploides.
El proceso de unin de los cromosomas a los microtbulos es estocstico o al azar (lo
contrario a determinstico), ya que no todos los cromosomas se alinean hacia el ecuador
de la clula al mismo tiempo. Por lo tanto es necesario evitar que tan solo un cromosoma
mal alineado, sea capaz de pasar a la anafase. Para ello se requiere de la presencia de
aquellas protenas de control ubicadas en el cinetocoro y que forman un complejo
macromolecular ubicado en el centrmero de los cromosomas. Este ltimo establece
conexiones con los microtbulos del huso mittico.
Las protenas de control manejan las actividades mecnicas entre las protenas
asociadas al cinetocoro y los microtbulos destinados a separar a las cromtidas
hermanas hacia el ecuador de la clula. Los defectos en las actividades mecnicas del
cinetocoro activan a su vez a las protenas de control, para iniciar una seal que es
amplificada en el entorno de la clula y que finalmente previene la activacin del
proceso proteoltico necesario para la separacin de las cromtidas hermanas al principio
de la anafase.
Para que esta cadena de eventos ocurra normalmente se debe revisar la formacin misma
del huso mittico. El huso debe ser bipolar y los cromosomas deben ser tirados a los
polos opuestos formando la placa metafsica. El sitio control, evita que la anafase
(separacin misma de los cromosomas) parta muy rpido, ya que se trata de un proceso
coordinado que depende de la expresin de una serie de otros genes. Estos ltimos
debern a su vez ser activados de manera secuencial evitando el mal alineamiento de los
cromosomas, para que la segregacin sea correcta. De esta forma no se permite la
existencia de cinetocoros defectuosos.
La segregacin exacta de los cromosomas durante la Mitosis requiere de la destrucccin
coordinada de los reguladores mitticos securina y ciclina. El APC es un complejo de
multiples subunidades que une Ubiquitina a diversos sustratos. Pose una Protena
Ligasa o E3 (uno de las tres actividades del complejo de activacin y unin de la
Ubiquitina) que cataliza la Poliubiquitinacin de protenas y por lo tanto promueve su
destruccin por el Proteosoma 26S.
Durante la Mitosis el activador Cdc20 se une al APC y recluta sustratos por medio de una
interaccin con el motivo o secuencia blanco conservada que se denomina la caja de
destruccin.
El proceso normal de Protelisis fue necesario para deshacerse de las Ciclinas de G1 y
pasar a la etapa S regulando la actividad de las CDK, as como ahora es necesario para
disparar la etapa de anafase en la mitosis, regulando el manejo de los cromosomas y la
formacin del huso. (figs. 24,25 y 26-15).
En el caso de que se requiera retardar el proceso anterior para un control en la fase M
(lmite G2/M), aparecen enzimas que remueven las Ubiquitinas y retrasan y prolongan el
efecto de las Ciclinas en el huso mittico (fig. 24-15). En otras palabras las etapas de
formacin del huso y la separacin de los cromosomas (anafase) son qumicamente
detectadas en el punto de control para comprobar su normalidad.
781
PDS1 Y CUT2 junto a Ciclina B: Son las protenas inhibidoras de la Anafase y Telofase
respectivamente. Deben unirse a la Ubiquitina mediante la accin de APC o E3 para ser
degradados y permitir la continuacin del Ciclo cuando no existen daos en la formacin
del huso.
MAD : (Mitotic arrest deficient) , existen dos genes MAD y codifican protenas que unen el
cinetocoro a un microtubulo de la fibra del huso. Si falla la unin, MAD permanece y
bloquea la entrada a la anafase. Las mutaciones en MAD producen clulas con muy
pocos o muchos cromosomas (aneuploida), que son tpicas de las clulas cancerosas.
BUB 1
BUB 3
MAD1,2
INHIBICIN DE
COMPLEJO
Cdc20
APC- Cdc20
No se separan los
cromosomas
RUPTURA DEL
MICROTUBULO
METAFASE
CROMOSOMA SIN
UNIN AL
CINETOCORO
ANAFASE
APOPTOSIS
Fig. 25-15. El punto de control del huso mittico distingue la falta de alineamiento de los
cromosomas y las alteraciones de los microtbulos, activando a Bub1, Bub3 y Mad2-Cdc20
que mandan a la clula a la Apoptosis o retrasan la Anafase.
Cdc20 es un promotor que puede ser activado por Mad 1,2. Estas ltimas son dos
protenas mediadoras del sitio de control del huso junto a Bub1 (kinasa) y Bub3
(Budding Uninhibited Benomyl) que corresponden a protenas transductoras de la seal
que se produce cuando los cinetocros no se han unido al microtbulo (figs. 25,26-15).
Todos estos factores se ubican junto a los cinetocros y regulan la interaccin entre
cinetocoro y los microtbulos. Todos estos factores son necesarios para inhibir el Ciclo
Celular, en el caso de que se pierda algunas de las actividades mediadas por los
microtbulos. La falla de estos sistemas conduce a una aneuploida, es decir a un nmero
aberrante de cromosomas lo que a su vez conduce al cncer.
782
MPF inactivo
CDK1
Ciclina B
MPF activo
Ciclina B degradada por unin de

Ubiquitina y Proteosoma
APC activado por MPF y
Separacin de
cromtidas hermanas
unin a Cdc20
SEPARASA
INACTIVA
Cdc20
SEPARASA
ACTIVA
SECURINA
Restos de
Scc1
Scc1
Cohesina
Cohesina
SECURINA
Ubi
Ubi
METAFASE
Ubi
ANAFASE
Fig. 26 15. Las Cohesinas mantienen a las cromtidas unidas durante la Metafase inhibiendo el
progreso hacia la anafase. Estas a su vez pueden ser degradadas por las Separinas o enzimas
con actividad de Separasas (Proteasa) que son a su vez inhibidas por Securina. La degradacin
de las Securinas se encuentra a su vez promovida por la Poliubiquitinacin dependiente de APC.
Por otro lado la inhibicin del Complejo APC-Cdc20 impide la separacin y progresin de la
Anafase. Cohesina y Scc1 son protenas que mantienen las cromtidas unidas.
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783
13) EXPRESION DE LOS GENES

FACTORES BASALES DE TRANSCRIPCIN ASOCIADOS A LAS RNA POL I, II Y III
COMO LO ES TFIIH
1) RNA POL EN EUCARIOTES
Existen tres RNA pol en los Eucariontes y cada una transcribe un nmero limitado de
genes reconociendo a sus promotores especficos. Cada una funciona con un nmero
relativamente alto de factores de transcripcin y la posicin inicial de ellos es guiada por
un factor conocido como TBP (TATA Binding Protein).
Pol I: Se ubica en el nucleolo, transcribe RNA ribosomal (Fig. 23 - 16) y no es sensible a
la Alfa-Amanitina (toxina del hongo Amanita Phaloides). Los genes que codifican para los
RNAr se encuentran en las reas del cromosoma denominadas organizador nuclear y se
transcriben copias mltiples en tandem 1:1:1 de 18S: 5,8S : 28S, excepto para el RNAr
5S transcrito por pol III. La transcripcin es altamente coordinada con el estado de
crecimiento de la clula.
La secuencia que controla la expresin de este gen tiene dos partes, por un lado la
secuencia promotora central que se extiende de -45 a +20 y es necesaria y suficiente para
la transcripcin basal. La otra parte es el elemento de control CE (Upstream Control
Element) que se encuentra corriente arriba de -180 a -107 pb y que se puede llamar el
intensificador. La protena UBF1 (Upstream Binding Factor) se une por sus extremos
conectando a ambas secuencias y
5,8S
18S
5,8S
28S
18S
28S
Transcripcin por
RNA pol I
5,8S
18S
Procesamiento de RNA r
28S
28S
RNA 5S y
50 prots.
30 prots
40S
18S
5,8S
60S
40S
60S
Fig. 27 -15. Transcripcin por RNA pol I de los RNA ribosomales y procesamiento del transcrito
primario.
aumenta la eficiencia de entrada de la RNA pol I. Ambas secuencias son ricas en GC y

son 85% idnticas. Posteriormente se une la protena SL1 cooperativamente e incluye el
784
TBP que es el elemento comn a pol I, II y III. Por otro lado se ha visto que la protena
RB cuando no esta unida inhibiendo a los E2F, puede tambin inhibir a la protena UBF.
Los genes del RNAr consisten en repeticiones en tandem de cerca de 200 genes con
regiones espaciadoras. El transcrito primario tiene 45S de RNAr y es posteriormente
procesado a 18S, 5,8S y 28S
Pol II: Se ubica en el Nucleoplasma y transcribe RNA heteronuclear que despus de
procesado pasa a ser RNA mensajero y es inhibida por bajas concentraciones de Amanitina (0,03 ugr/ml). El sistema de transcripcin para la RNA pol II consta de la
secuencia de consenso ubicada en la caja promotora TATA a -26 o -34pb (-30pb) desde
donde empieza el gen. Otras secuencias promotoras son CAAT a -75pb y la caja GC con
la secuencia GGGCGG y la caja ATTTGCAT de -50 a -120pb.
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2) FACTORES DE TRANSCRIPCIN
Los factores que intervienen en la transcripcin son los siguientes:
a) Las protenas de unin o los factores de transcripcin que se unen a la secuencia
promotora central TATA a -30pb del inicio. Entre ellos tenemos a la protena que se
une a TATA denominada TBP (TATA Binding Protein) ms otros factores asociados
(TAF) que en conjunto se denominan TFIIID (fig. 28 15). Tambin parecen encontrarse
involucrados mecanismos de regulacin post-traduccionales.
Sitios corriente arriba

para muchos factores
como c-Fos, c-Jun,
c-Myc/Max
ATF /
CREB
RNA pol II
TFIIE
c-myc/max
Sp1
D-EBP
TGACCTCA CACGTG
GGGCGG CCAAT
Secuencias reconocidas por los factores - 100
TFIID
TATA
EXON intron
- 25
Gen
EXON
Fig. 28 - 15. La Transcripcin de un gen Eucaritico cualquiera requiere de la presencia de los

factores basales que reconocen TATA y CCAAT a -25 y -100 pb respectivamente.
Corriente arriba del gen se puede apreciar un ejemplo de los otros factores que pueden intervenir
en la expresin, donde ATF/CREB es la protena que responde al AMPc, c-myc/max es el
heterodmero zipper de Leucina, Sp1 reconoce cajas GC con dedos de Zn, la C/EBP es una
protena intensificadora con afinidad y especificidad por el DNA.
b) Los elementos de respuesta hormonal (HRE), son secuencias que permiten que la
transcripcin responda a un estmulo especfico otorgando una expresin gentica
coordinada a factores ambientales o relacionados al desarrollo de la clula. Estas
secuencias son reconocidas como elementos discretos ubicadas a -100 o -200pb
785
corriente arriba del inicio del gen. Existen muchos tipos deferentes en distintas clases de
genes. A ellas se unen los complejos Hormona-Receptor permitiendo el control directo
por las hormonas.
Los HRE son de actividad cis, es decir afectan al gen del mismo alelo que los produce
y no al gen del alelo opuesto. Entre las hormonas que actan por este mecanismo
tenemos a los Estrgenos (ERE) y Tiroxina (RE).
c) Los factores de transcripcin se unen a las secuencias intensificadoras. Estas
ltimas son secuencias ubicadas corriente arriba o abajo a distancias de hasta 3kB.
Incluso pueden actuar cuando se ubican entre los genes. Su funcin es unirse a protenas
que aumentan la velocidad de transcripcin mediante cambios en la estructura de la
cromatina, mejorando la accesibilidad al DNA por los componentes encargados de la
transcripcin, algunos de ellos son especficos de cada tejido.
Algunos de los factores moduladores de la transcripcin pueden encontrarse
relacionados con el AMPc como la familia ATA/CREE que se une a un elemento de
respuesta formado por un octanucletido palindrmico TGACCTCA. Poseen estructura
Zipper de Leucina y forman homodmeros entre si y heterodmeros con miembros de la
familia AP1.
.
G EN R N Ar 5S
5S
5S
TFIIIA
E lem entos
de
control para
TFIIIA
C om plejo M etaestable
TFIIIC
C om plejo estable I
TFIIIB
C om plejo estable II
R N A pol III
C om plejo lim itante de velocidad
Fig. 29 - 15. Unin secuencial de los Factores de Transcripcin previa a la unin de la RNA pol III
a los genes que codifican para el RNA 5S.
AP1 es un heterodmero de protena producto de dos genes Jun y Fos que transforman
clulas en cultivo si se sobre expresan. Ambos genes tienen sitios de unin para el
heterodmero en la secuencia palindrmica TGA(C/G)TCA corriente arriba permitiendo el
control por retroalimentacin.
AP2 es un factor de transcripcin que estimula la accin de la RNA pol II mediante el
reconocimiento de secuencias 5-GCCCCAGGC-3 en genes destinados a regular la
morfognesis
786
Pol III: Se ubica en el Nucleoplasma y transcribe RNA de transferencia (fig. 25 -15), RNA
5S y algn RNAsn (Small nuclear empleado en corte de intrones). Se inhibe solo por
altas concentraciones de -amanitina (100 ugr/ml).
Al menos 5 factores proteicos se necesitan para la Transcripcin del RNA 5S por la pol III,
mientras que los sitios de reconocimiento se encuentran a diferencia de los otros
sistemas, en el interior de la secuencia codificadora y no corriente arriba de ella.
La RNA pol III aparece relacionada con el control del Ciclo Celular y parece ser
modulada por fosforilacin de Ciclina B/Cdc2 kinasa y MPF (Factor promotor de Mitosis)
cuyo blanco es tambin similar al de pol II como lo es TFIIIB compuesto por TBP- TAFs
La secuencia promotora de RNA 5S va de +50 a +80pbs y para los RNAt de +10 a
+20pbs o de +50 a +60 pbs. El Factor TFIIIB contiene TBP o factor posicionador. TFIIIA y
TFIIIC son considerados factores de ensamblaje. La enzima RNA pol III necesita de los
tres factores TFIIIA, B y/o C para hacer un complejo de iniciacin estable .
Volver al inicio
14) TRANSCRIPCION BASAL

Con el fin de encontrar una relacin entre el sistema que regula el Ciclo Celular y los
factores de transcripcin que regulan la expresin de los distintos genes destinados a
codificar los factores, enzimas y activadores que permiten el crecimiento y la divisin
celular procederemos a esclarecer la presencia de este contacto.
787
IN IC IAC IO N D E L A R N A p o l II
(M o d elo d e Inic iac i n S ec uencia l)
T AT A
IN I
T AF
TBP
TBP
T F IIA
TFIIB
R N A p o l II
E ucario te
TFIIF
TFIIE
H elicasa
TFIIH
P rotena
K inasa
TFIIB
TFIIE
T F IIA
TFIIF
TFIIH
C TD
E l C om plejo de P re-iniciacin hidroliza ATP para abrir el D N A en el prom otor TATA. La
polim erizacin de los prim eros N TP y la Fosforilacin de C TD conducen a que TFIIB , TFIIE
y TFIIH se liberen. La enzim a R N ApolII em pieza a elongar y TFIID m s TFIIA perm anecen en TATA.
Fig. 30 - 15. Modelo secuencial de unin para los Factores de Transcripcin que favorecen la
transcripcin basal. Los Factores de Transcripcin y la RNA pol II se ensamblan progresivamente
en un orden preferido para formar el complejo de pre-iniciacin (in vitro), ya que la unin de los
primeros factores facilita la unin de los restantes. La protena TBP inicia el proceso de la
Transcripcin al unirse a la caja TATA, lo puede hacer sola o en compaa de los TAF.
Los genes Eucariticos parecen estar mayormente regulados a nivel de la Transcripcin.

Por lo tanto la iniciacin del Complejo de Transcripcin es un evento fino que requiere del
concurso de varios factores proteicos y distintas actividades enzimticas. Entre ellas
tenemos a la RNA polimerasa II que cuenta con un dominio Carboxi-terminal (CTD)
donde se repite en tandem cerca de 50 veces la secuencia Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Thr.
La fosforilacin de esta secuencia en los residuos de Ser y Thr modula su actividad y
produce un dominio altamente cargado que permite a la RNA pol II liberarse del
complejo de iniciacin al disminuir su afinidad por TFIID (fig. 30 15) y empezar la
elongacin. Por otro lado corriente arriba del gen se encuentra la caja TATA,
donde se une la Protena TBP (TATA Binding Protein) en la hendidura pequea del
DNA. Los factores anexos a TBP se denominan TAF ( TATA Associated Factors) y
788
pueden ser o no necesarios para montar el complejo de transcripcin inicial.

Cuando se forma un complejo entre ambos TBP y TAF, nace el Factor de
Transcripcin correspondiente a la sigla TFIID. TBP es solo necesario para iniciar la
transcripcin, no es as TBF que puede o no estar presente .
Una vez formado el complejo TATA-TBP o TATA TBP-TAF (TATA -TFIID), se unen
secuencialmente los factores, TFIIA primero y luego TFIIB. Ambos se unen a los
extremos del complejo TATA-TFIID, para as crear el Complejo que confiere
estabilizacin. Posteriormente entra TFIIF que media la asociacin de la RNA pol I con el
Complejo ya formado y finalmente se asocia TFIIE que ayuda a la unin de TFIIH. Este
ltimo tiene varias actividades, primero una Kinasa que fosforila la cola CTD y libera a la
RNA pol II para la transcripcin, segundo una actividad ATPsica dependiente de DNA y
una DNA helicasa. Se requiere ATP para la sntesis de RNA a menos que el templado de
DNA se encuentre superenrrollado negativamente. En estos casos no se requiere de
TFIIH. El Complejo de inicio sin TFIIE y TFIIH produce solo transcritos cortos.
En la siguiente Tabla 7 - 15, aparecen los distintos factores de transcripcin junto a
sus caractersticas moleculares y su funcin.
TABLA 7 - 15
Factor
N de
Subunidades
Peso
Molecular
kD
38
15 a 250
TFIID : TBP
TFIID: TAF
1
12
TFIIA
TFIIB
12 o 19 ,
35
35
TFIIF
30, 74
TFIIE
34 , 57
TFIIH
35 a 89
Funciones
Reconoce secuencia promotora mnima TATA

Reconoce promotor distinto a TATA.
regulacin positiva y negativa
Estabiliza complejo TBP-DNA. Anti-represin
Selecciona el sitio de partida para la RNApol
II
Marca la RNA pol II para el promotor.
Destabiliza interacciones no especficas entre
pol II y DNA
Modula la actividad TFIIH helicasa, ATPasa y
kinasa. Facilita la separacin de las hebras en
el promotor
La Helicasa separa hebras en el promotor ,
actividad de CTD kinasa libera la RNA pol II
para iniciar la transcripcin, actividad
ATPsica aumenta exhibicin del promotor
De esta manera se forma el complejo de pre-iniciacin que posteriormente hidroliza ATP

para abrir ambas hebras y empezar la etapa de elongacin.
En este momento la cola CTD de la RNA pol II queda abierta a una posible fosforilacin
moduladora que la hace empezar a transcribir, mientras que TFIIB, TFIIE y TFIIH se
disocian. TFIID y TFIIA permanecen en TATA a medida que la RNA pol II avanza.
La actividad Kinasa de TFIIH hace que se fosforece CTD, reduce la afinidad por de RNA
pol II por TFIID y permite que pol II se aleje del promotor. La actividad Helicasa permite
que el DNA se abra corriente abajo del promotor.
789
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15) TRANSCRIPCION INTENSIFICADA

Para cada tejido o tipo de clula existen los factores Activadores de la Transcripcin que
se definen como cualquiera protena necesaria para iniciar la transcripcin, pero que no
son una polimerasa. Estos se unen a secuencias intensificadoras que se encuentran
corriente arriba o abajo de los genes y a la vez promueven la formacin de complejos de
iniciacin mediante la unin a dos sitios. Una parte de ellos reconoce a la secuencia
790
intensificadora y se une a ella mientras que la otra reconoce y se une al TFIID que su vez
se haya unido a TATA.
Entre ellos encontramos a distintas familias como
a) Zipper de Leucina: Se forma cuando se repiten las Leucinas en una Alfa- Hlice cada
7 aminocidos. Los residuos R de las distintas Leucinas salen hacia afuera del dominio
Alfa-hlice y de esta manera interdigitan con los residuos de otro dominio similar y
estabilizan la dimerizacin.
La protena activadora AP-1 es un factor de transcripcin que se controla por fosforilacin
y oxidacin. Su estructura consta de un zipper de Leucina entre homodmeros de Jun o
heterodmeros de Jun/Fos que se unen a la secuencia palindrmica de TGA(C/G)TCA. La
familia Jun consiste de c-Jun, JunB y JunD, mientras que la familia Fos incluye a c-Fos,
FosB, Fra-1 y Fra-2, todos ellos estructuralmente relacionados. Tanto Jun como Fos
tienen su contrapartida en oncogenes virales como v-Jun (Avian Sarcoma Virus ) y v-Fos (
Murine ratn Sarcoma Virus) .
b) Hlix-bucle-Hlix: Su estructura se encuentra compuesta de dos regiones de AlfaHlice separadas por una regin variable que forma un bucle entre ambas. Se le halla
implicada en dimerizacin de protenas. Posee una regin con aminocidos bsicos en el
N terminal necesario para la unin al DNA en secuencias especficas. Las protenas que
no poseen este Nt actan como represoras de las otras que si lo tienen ya que al unirse a
ellas las secuestran y evitan su unin al DNA.
Como ejemplo de este tipo tenemos al factor de transcripcin denominado c-myc. Este se
encuentra sobre-expresado en una serie de neoplasias, como linfomas, leucemias, y
cnceres al pulmn, ovario, crvico, pecho y gstrico. Adems, pertenece a una familia
de oncogenes que producen protenas similares como c-, N- y L-myc. Normalmente es un
factor de transcripcin expresado durante el desarrollo embrionario que estimula a la
clula a entrar al Ciclo Celular secuestrando a la protena inhibidora p27 (Fig. 6 -14). Los
mitgenos lo estimulan, mientras que las seales inhibidoras del crecimiento y
estimuladoras de la diferenciacin lo inhiben y permanece silencioso en un tejido
diferenciado, sin embargo puede expresarse nuevamente debido a los siguientes eventos
accidentales, como lo son la insercin de un retrovirus, la translocacin de un
cromosoma y la amplificacin gnica.
Su conformacin es la de un Nt Bsico-Hlice-bucle-Hlice-Zipper de Leucina. Myc
puede an dimerizar con otra protena denominada Max, para unirse al DNA en la
secuencia CACGTG y activar la transcripcin de promotores adyacentes. Su forma activa
es en realidad dmeros de Myc/Max (actividad trans) que inducen la progresin del Ciclo
Celular, Apoptosis y Transformacin maligna.
Max tambin forma heterodmeros con Myc dando las protenas Mad1, Mxi-1 o Mad2,
Mad3, Mad 4 y Mnt. Estas protenas se pueden unir se a la secuencia anterior y
antagonizar Myc
Uno de los elementos de control del gen c-Myc se encuentra de -115 a -142 pb corriente
arriba de su promotor Pi. Este elemento es hipersensible a la nucleasa y esta formado
por una hebra codificadora de homopiridina y la otra hebra no codificadora de
homopurina. y de su integridad depende el 75 a 85% del control de la transcripcin de
este gen.
791
c) Dedos de Zn: En este motivo se encuentran residuos de Cistena e Histidina que se

unen a tomos de Zn. El dominio en forma de dedo de esta complejo coordinado con el
metal se introduce en secuencias especficas en la hendidura mayor del DNA. Como
ejemplo se encuentra TFIIIA de la RNA pol III.
d) Homeodominio: Dominio conservado de 60 aminocidos encontrados en los distintos
factores de transcripcin .Son responsables de la estructura bsica de un organismo, por
Ej. columna vertebral o patas y antenas en moscas.
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REFERENCIAS
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Nature, 389, 149 - 152, 1997
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274,
1664- 1671, 1996
792
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http://www.harcourt-international.com/e-books/pdf/952.pdf
Cell cycle checkpoint signaling through the ATM and ATR kinases
Robert T. Abraham
Genes and Development
Vol. 15, No. 17, pp. 2177-2196, September 1, 2001
793

O CAPITULO 14 Vinc Segunda Edicion

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CICLO CELULAR 1

1) CUANDO SE ROMPE EL CONTROL DE LA EXPRESION GENICA

2) PROTO-ONCOGENES, ONCOGENES Y GENES TUMOSUPRESORES

6) FACTORES DE LA TRANSCRIPCIN QUE SE UNEN AL DNA

9) OTROS MODULADORES 762

11) REPLICACIN EN LA FASE S 769

c) Tercer Sitio de Control en G2/ M

13) EXPRESIN DE LOS GENES

15) TRANSCRIPCIN INTENSIFICADA

Hctor Rocha L. Ciclo Celular y Control de la Expresin de los Genes

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En este captulo se describirn primero los Mecanismos que controlan el Ciclo

G1/S (sitio de control)

La clula de un tejido diferenciado se encuentra normalmente en estado de reposo o G0.

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Codifica para el receptor del factor de

Codifica para una protena que acta como

Codifica para un Factor de Transcripcin. La

Codifica para la protena pRB que en el

Codifica para la protena p53 que

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1) Ataxia (falta de coordinacin) Telangiectasia (dilatacin de los capilares), se produce

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Hebra hija o extremo ms corto

3: La Telomerasa posee un RNA

cebador incluido, propio de su

4: La elongacin por la Telomerasa deja espacio para la

unin de un cebador que es parte de la Telomerasa.

Los Telmeros no tienen secuencias codificantes de protenas y presentan solo

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P-Thr(14)P-Tyr(15)- DENDIENTE DE -Thr(160)- P

1 : Activacin de las Kinasas por asociacin entre Ciclinas y Cdk

Las Ciclinas poseen un segmento de secuencia homloga de aproximadamente 100

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b) KINASAS DEPENDIENTE DE CICLINAS (CDKS).

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En la Tabla 2 15 se observan los distintos complejos fosforilantes Ciclina CDK, donde

Suelta los E2F de pRB para que E2F se

Se une a E2F1/DP1 y lo fosforila

Fosforila otras CDKs

A continuacin a finales de G1 aparece la actividad fosforilante de CDK2 que se mantiene

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CAK o el complejo entre CDK7 y Ciclina H, no vara su expresin durante el Ciclo y

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b) Unin de los CDKIs (Inhibidores de las Kinasas dependientes de Ciclina)

b) Factor p 107 y p 130.

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protena p53, no es capaz de inducir la expresin de p21 (Protena inhibidora del

El balance entre la diferenciacin celular, progreso en el Ciclo Celular y Apoptosis se

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de las mitocondrias y generacin de vacuolas por el retculo endoplsmico que junto a la

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TNF: Factor Tumoral de Necrosis

Fig. 8 -15. Vas de Apoptosis en la clula.

desacoplamiento de la fosforilacin oxidativa, produccin de ROS ( Reactive Oxygen

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Solo clulas individuales