Master en Ingeniera Qumica

En 1910, el botnico ruso M. Tswett describi por vez primera esta tcnica, que fue
aplicada a la separacin de pigmentos de plantas, dndole el nombre de
cromatografa en referencia a las bandas coloreadas de pigmentos que se
separaban por su adsorcin selectiva sobre columnas de yeso ("chroma" (color) y
"graphein" (escribir)).
Tras su descubrimiento, la cromatografa quedo prcticamente olvidada hasta
1930, ao en que fue redescubierta por Kuhn y Lederer, quienes la aplicaron para
la separacin de carotenoides; a partir de este momento, el uso de esta tcnica se
fue extendiendo cada vez ms, al tiempo que se desarrollaban diferentes versiones
de la misma: cromatografa de reparto, de papel, de capa fina, etc.
Un hito importante en el desarrollo de la cromatografa lo constituy el desarrollo
de la cromatografa gas-lquido.
Hoy en da casi no hay campo de la qumica, biologa, medicina, etc. en el que no
se utilice la cromatografa en alguna de sus formas, tanto en su vertiente
preparativa como en la analtica; por otra parte el desarrollo sobre el uso conjunto
de la cromatografa con otras tcnicas analticas, as como el desarrollo de otros
tipos de cromatografa, como es por ejemplo la de fluidos supercrticos, hace
previsible una extensin an mayor de su uso.

La cromatografa es esencialmente un
mtodo fsico de separacin en el que
los componentes a separar se
distribuyen entre dos fases, una
inmvil (fase estacionaria), y otra
mvil (fase mvil) la cual percola a
travs de la primera.
El proceso cromatogrfico se da como
resultado del movimiento de los
componentes de la mezcla arrastrados
por la fase mvil a lo largo de la fase
estacionaria (elucin), producindose
la separacin debido a las diferencias
en las constantes de distribucin de
los componentes de la mezcla entre la
fase estacionaria y la mvil.
A la distribucin final de los
componentes en funcin de su
posicin sobre el lecho estacionario, o
del tiempo en que eluyen se le
denomina cromatograma.

Ejemplo: Se utiliza una columna rellena de CaCO3, en la que se introduce un extracto de hojas
verdes en ter de petrleo, y seguidamente se aade disolvente puro (ter de petrleo)
(eluyente), con el objetivo de separar tres componentes, clorofila, carotenos y xantofilas.
En esta separacin, la fase estacionaria es el relleno (CaCO3), la fase mvil es el ter de petrleo y
los componentes a separar, los distintos pigmentos vegetales, los cuales se encuentran sometidos
a dos fuerzas contrarias: el disolvente tiende a arrastrarlos hacia la salida y el CaCO3 a retenerlos.
Como este ltimo efecto es diferente para los distintos pigmentos, stos se mueven a diferente
velocidad y emergen de la columna a distintos tiempos. Cuando se mide la concentracin de cada
componente a la salida de la columna y se representa en funcin del volumen de fase mvil, o del
tiempo transcurrido desde la introduccin de la muestra, se obtiene una grfica denominada
"cromatograma".

Dependiendo de la naturaleza de la fase estacionaria y de la fase mvil

Cromatografa slido-lquido. La fase estacionaria es un slido y la mvil

un lquido.
Cromatografa lquido-lquido. La fase estacionaria es un lquido anclado a
un soporte slido y la fase mvil un lquido.
Cromatografa lquido-gas. La fase estacionaria es un lquido no voltil
impregnado en un slido y la fase mvil es un gas.
Cromatografa slido-gas. La fase estacionaria es un slido y la mvil un
gas.

Dependiendo del soporte o tcnica utilizada para desarrollar el cromatograma

Pueden distinguirse dos categoras: plana y en columna.

En cromatografa plana, la fase estacionaria puede estar constituida por una
hoja de papel (cromatografa en papel) o por una capa de un slido distribuido
uniformemente sobre una lmina de vidrio, plstico o aluminio (cromatografa
de capa fina).
En cromatografa en columna, la fase estacionaria est contenida en una
columna. Cuando la fase estacionaria es un lquido, ste debe inmovilizarse
sobre un soporte slido inerte, o sobre la propia columna.
La cromatografa plana est limitada al uso de fase mvil lquida, debido a las
dificultades inherentes para confinar un gas o un fluido supercrtico en una
superficie plana. Sin embargo, la cromatografa en columna puede utilizarse
en las modalidades de lquidos, gases y fluidos supercrticos.
En el caso de la cromatografa lquida en columna existen dos modalidades,
que pueden denominarse en funcin de su desarrollo cronolgico como
cromatografa clsica en columna y cromatografa de alta resolucin (CLAR o
HPLC:High Performance Liquid Chromatography).

Dependiendo del mecanismo de separacin

Cromatografa de adsorcin
La separacin depende de los equilibrios de adsorcin/desorcin de los
componentes de la mezcla, entre la fase estacionaria slida (adsorbente) y la
fase mvil lquida o gaseosa.
La fuerza con que es adsorbido un componente depende de: la polaridad del
componente, la actividad del adsorbente y la polaridad de la fase mvil.
En general cuanto ms polar es un compuesto ms fcilmente ser adsorbido.
La cromatografa de adsorcin, es una tcnica apropiada para la separacin de
compuestos de polaridad baja y media. La separacin de compuestos muy
polares requiere, debido a la gran retencin que ofrecen, la utilizacin de
adsorbentes muy poco activos, o bien, tratamientos qumicos previos para la
preparacin de la muestra a fin de reducir su polaridad.
Una caracterstica importante del adsorbente es el tamao de partcula. La
retencin es proporcional al rea superficial, la cual, a su vez, depende del
tamao de partcula y de la estructura interna de las partculas de adsorbente.
Cuanto menor sea el tamao de partcula, mayor ser el rea superficial del
adsorbente y, en consecuencia, mayor el nmero de centros activos
disponibles para la adsorcin.

Dependiendo del mecanismo de separacin

Cromatografa de reparto
Est basada en la separacin de una mezcla de sustancias mediante el
reparto existente entre la fase mvil (lquido o gas) (por ejemplo un
lquido no polar como el hexano) y la fase estacionaria (lquida)
(generalmente un lquido polar como por ejemplo etilen-glicol), soportada
o ligada sobre un slido adecuado (gel de slice, celulosa, tierra de
diatomeas, poli-estireno, etc.).
La mayor o menor migracin de un compuesto en este tipo de
cromatografa, ser funcin del coeficiente de reparto de ste entre la fase
estacionaria y la fase mvil.
La cromatografa de reparto es utilizable para la separacin de mezclas de
compuestos de polaridad media y alta.

Dependiendo del mecanismo de separacin

Cromatografa por tamao molecular

Tambin llamada de permeacin de gel, de tamiz molecular o de exclusin.
Consiste en la separacin de las molculas basndose en su tamao en lugar
de en su solubilidad o polaridad.
Las fases estacionarias empleadas para este tipo de cromatografa son
inorgnicas (zeolitas), o geles orgnicos compatibles con disolventes acuosos
(agarosa, poliacrilamida) u orgnicos (copolmeros estireno/divinilbenceno).
Estas fases estacionarias poseen cavidades en las cuales las molculas de los
compuestos a separar pueden penetrar y ser retenidas, siendo las molculas
mayores las eluidas.
El rango de trabajo de estas fases estacionarias, se define como el intervalo de
pesos moleculares que pueden ser separados; otro parmetro que caracteriza
a este tipo de fases, es su lmite de exclusin, que se define como el peso
molecular a partir del cual los compuestos pasarn a travs del lecho
estacionario sin experimentar retencin.

Dependiendo del mecanismo de separacin

Cromatografa de cambio inico

Las separaciones por intercambio inico, se llevan a cabo con materiales
insolubles y de textura porosa, los cuales presentan grupos reactivos
asociados a iones capaces de intercambiarse con los del medio que les
rodea, por lo que este tipo de cromatografa ha de realizarse en medio
lquido.
Se utiliza para la separacin de sustancias inicas, tanto inorgnicas como
orgnicas y estn basadas en los diferentes equilibrios de reparto de los
iones de la mezcla entre el material cambiador y la disolucin.
En general, se utilizan tres tipos de materiales: resinas, geles y celulosas.
La diferencia fundamental entre ellos reside en su microestructura ya que,
generalmente, las resinas presentan un tamao de poro mucho menor,
siendo apropiadas para la separacin de sustancias de pequeo volumen
molar.
Otras diferencias existentes entre los materiales son debidas a la
naturaleza de los grupos cambiadores (fuerza del grupo cambiador) y al
nmero de estos por unidad de peso de material (capacidad de cambio).

Dependiendo del mecanismo de separacin

Resumen de los tipos de cromatografa (Separation Process Principles, 3rd Edition; J. D. Seader (University of
Utah); Ernest J. Henley (University of Houston); D. Keith Roper).


Los sorbentes (fases estacionarias pueden venir en muchas formas y composiciones qumicas
debido a las diversas formas que se aplica la cromatografa.

La mezcla a separar, despus de la inyeccin en el fluido portador para formar la fase mvil,
puede ser un lquido (cromatografa lquida) o un gas (cromatografa de gases). A menudo, la
mezcla es inicialmente un lquido, pero se vaporiza por el gas portador, dando una mezcla de
gases como fase mvil.

Los gases portadores son inertes y no interactan con el sorbente o alimento. Los lquidos
portadores pueden interactuar y deben ser seleccionados cuidadosamente.

La fase estacionaria puede ser un slido, un lquido soportado o unido a un slido, o un gel.

Con un adsorbente poroso slido, el mecanismo de separacin es la adsorcin. Si el mecanismo
deseado es el intercambio inico, se utiliza una sustancia cambiadora de iones, polimrica o
sinttica. Con un gel de polmero o un slido microporoso, es posible una cromatografa del tipo
exclusin.

En columnas de relleno (> 1 mm de dimetro interno), los sorbentes son en forma de partculas.

En las columnas capilares (<0,5 mm dimetro interior), el sorbente es la pared interior o un
revestimiento sobre esa pared.

Cada tipo de sorbente se puede aplicar a hojas de vidrio, plstico, o aluminio para su uso en
cromatografa de capa fina (o plana) o a una hoja de material de celulosa para uso en
cromatografa de papel.

Si se utiliza una bomba en lugar de la gravedad para pasar una fase mvil lquida a travs de una
columna de relleno, se utiliza la cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC).

Los dos adsorbentes ms comunes utilizados en la cromatografa son almina porosa y gel de
slice poroso. De menor importancia son carbono, xido de magnesio, y carbonatos.

Ejemplo: Seleccionar un modo de cromatografa para la separacin de las

siguientes mezclas:
a) mezcla de gases, O2, CO, CO2 y SO2
b) mezcla vaporizada de antraceno, frenantreno, pireno y criseno
c) solucin acuosa conteniendo Ca+2 y Ba+2.
Solucin:
Cromatografa gas-slido, en la que la fase mvil es un gas y la fase
estacionaria un slido-adsorbente.
Cromatografa gas-lquido, en la que la fase mvil es un gas y la fase
estacionaria un lquido soportado en un slido.
Cromatografa de intercambio de in, en la que la fase mvil es un lquido y la
fase estacionaria una resina polimrica.

Existen diferentes formas de operar en cromatografa.

Anlisis por elucin: es la tcnica utilizada en casi todas las separaciones
cromatogrficas. En ella, el paso de la fase mvil se contina indefinidamente hasta que
los componentes separados de la mezcla emergen al final del lecho cromatogrfico.
Esta tcnica presenta la desventaja de que los compuestos con retenciones muy altas
pueden no ser observados.
Anlisis por desarrollo: el cromatograma se desarrolla hasta que el frente del
disolvente alcanza el final del lecho , de forma que los constituyentes de la mezcla una
vez separados permanecen sobre el lecho al finalizar la separacin. La tcnica de
anlisis por desarrollo presenta la ventaja de que es analizable la totalidad de la
muestra, incluyendo los compuestos de muy baja o muy alta retencin.
Anlisis frontal: basado en la diferencia de afinidad del adsorbente por cada una de las
sustancias a separar. Se utiliza una pequea columna, que es saturada sucesivamente
por cada una de las sustancias a separar, emergiendo de ella el primer componente
puro hasta que la columna se satura del segundo componente, momento en el que
empezar a emerger ste mezclado con el primero.
Anlisis por desplazamiento: se aade una sustancia desplazante que va incorporada
dentro de la fase mvil y que es ms fcilmente retenida, desplazando la mezcla por la
columna al mismo tiempo que se separa.

Constante de distribucin y separaciones

Los componentes a separar, en su desplazamiento a lo largo del sistema cromatogrfico se
mueven a diferentes velocidades, dependiendo de la afinidad de cada uno por la fase
estacionaria, respecto a la fase mvil.
Cada uno de ellos se distribuye entre las dos fases segn un equilibrio caracterizado por
una constante denominada constante de distribucin o coeficiente de distribucin.
Para un componente A,
A
KA = S
AM
donde [As] es la concentracin de A en la fase estacionaria y [AM] la concentracin de A en
la fase mvil.
Cuanto mayor sea el valor de K, mayor ser la afinidad del componente por la fase
estacionaria y menor ser la velocidad a la que se mueve a travs del sistema.
Para una muestra que contenga los componentes A, B y C, si KA > KB > KC el componente A
se desplazar a lo largo del sistema ms lentamente que el B, y ste ms despacio que el C.

Retencin y factor de capacidad

Los parmetros caractersticos de un sistema cromatogrfico y de un cromatograma son:
 Volumen muerto (VM): volumen total de fase mvil utilizado igual al volumen vaco o
intersticial de la columna.
 Volumen de retencin (VR ): volumen de fase mvil necesario para transportar la banda
de un componente desde el punto de inyeccin, a travs de la columna, hasta el
detector.
 Tiempo muerto (tm): tiempo necesario para que una especie no retenida pase a travs
de la columna y alcance el detector.
 Tiempo de retencin (tR): tiempo necesario para que el componente, una vez inyectado
pase a travs de la columna y alcance el detector.
 Tiempo de retencin corregido
o ajustado (t'R): tiempo real
que la fase estacionaria ha
retrasado el avance del
compuesto, y por tanto que el
componente ha necesitado
para atravesar la columna
(diferencia entre el tiempo de
retencin y el tiempo muerto.

Retencin y factor de capacidad

Factor de capacidad (k') ,
  

=
=


expresa la retencin de un compuesto por la fase estacionaria. En la prctica, valores de k'
comprendidos entre 1 y 15, para no alargar excesivamente los tiempos de separacin.
Al ser el volumen proporcional al tiempo,
  

=
=


Es un parmetro independiente de la velocidad de flujo de la fase mvil y de las
dimensiones de la columna, y puede usarse para comparar retenciones en instrumentos
diferentes.
Volumen de retencin, de la expresin anterior,
VR = VM (1 + k')
que en cromatografa de adsorcin se modifica,
VR = VM + kA As
donde kA es el coeficiente de adsorcin y As el rea superficial del adsorbente.

Retencin y factor de capacidad

Factor de separacin o selectividad , , permite expresar la capacidad de una determinada
fase estacionaria para separar dos componentes A y B :
=kB'/k'A
que puede determinarse fcilmente de forma directa midiendo los tiempos de retencin
de las especies A y B sobre un cromatograma experimental, ya que,

=



 

Dispersin y anchura de las bandas

Cuando se introduce, en forma de banda muy estrecha, una mezcla de los componentes a separar
en una columna cromatogrfica (cabeza de columna), al eluir la mezcla desde un extremo a otro de
la columna, se observa que las bandas de soluto se van ensanchando al mismo tiempo que se
separan.

Este proceso es debido fundamentalmente a la difusin de las molculas de la banda, que tienden
a distribuirse uniformemente en todo el volumen disponible.

El proceso de difusin es dependiente del tiempo, de forma que la dispersin de la banda
aumentar en funcin del tiempo de elucin.

Dispersin y anchura de las bandas

Dado que los movimientos de las molculas son al azar, la concentracin final de las molculas
dentro de una banda cromatogrfica adoptar, en un caso ideal, un perfil de distribucin normal, y
el registro de las concentraciones de la banda en funcin del volumen eludo o del tiempo, dar
lugar a una forma gaussiana de anchura definida por la desviacin standard de la dispersin.

La anchura de los picos est directamente relacionada con el tiempo de residencia en la columna
(inversamente proporcional a la velocidad de flujo de la fase mvil)

A mayor tiempo, mayor dispersin, de forma que las especies eluidas al final presentan picos ms
anchos que las eluidas al comienzo.

El ensanchamiento de los picos de los distintos componentes del analito acta en detrimento de
la separacin, de forma que el objetivo en cromatografa es la obtencin de picos estrechos y
simtricos.

Eficacia de la columna
El tema de la eficacia de un sistema cromatogrfico se aborda desde dos puntos de vista:

La teora de platos: se basa en considerar que la columna est constituida por numerosas,
pero discretas capas estrechas, denominadas platos tericos, en trminos anlogos a lo
que ocurre en la teora de la destilacin fraccionada o de la extraccin en contracorriente.
Se considera que en cada plato se establece un equilibrio del componente entre la fase
mvil y la fase estacionaria, y el desplazamiento del analito a travs de la columna se trata
como una transferencia de la fase mvil desde un plato al siguiente.
La eficacia de la columna aumenta al hacerlo el nmero de estas transferencias, esto es, al
aumentar el nmero de platos tericos.
La teora cintica: considera que el ensanchamiento de las bandas se produce como
consecuencia de que los distintos procesos de transferencia de masa durante el
desplazamiento de una especie a lo largo de la columna ocurren a velocidad finita.
Segn esta teora, la forma de los picos depende de los siguientes factores:
* Difusin por turbulencia y trayectorias seguidas por la fase mvil
* Difusin longitudinal del soluto a lo largo de la columna
* Equilibrio del soluto entre las fases mvil y estacionaria

Eficacia de la columna: Teora de platos

Para expresar la calidad de un pico, se utiliza un parmetro relativo que tenga en cuenta tanto la
retencin como la anchura de la banda,


tR, tiempo de retencin, desviacin estndar de la banda cromatogrfica
El nmero de platos tericos se define como el cuadrado del cociente anterior:
N=(tR /)2
As, el nmero de platos tericos de una columna puede calcularse utilizando la anchura de uno de
sus picos, normalmente el ltimo (w=4 o w1/2 =2,35) que pueda medirse directamente sobre el
cromatograma,
2
tR 2
tR
N=16
N=5,545
w
w1/2

Eficacia de la columna: Teora de platos

El nmero de platos de una columna cromatogrfica depende de su longitud, por lo que para
comparar la eficacia de columnas con diferente longitud, L, se introduce el concepto de altura
equivalente de un plato terico,

H=

L
N

Al considerar la eficacia, solamente se han tenido en cuenta los efectos propios de la columna,
aunque existen otros parmetros del sistema (anchura de banda inicial, velocidad de la fase mvil,
etc.) que contribuyen al ensanchamiento de las bandas cromatogrficas.

Eficacia de la columna
La separacin entre dos bandas cromatogrficas, puede estudiarse en funcin de dos parmetros
 La retencin relativa o factor de separacin,
=kB'/k'A
 La resolucin,
t
Rs = w +w
1 2
2
Una separacin total de dos bandas requerir valores de y de Rs lo ms elevados posible
Un valor elevado de Rs puede conseguirse aumentando la eficacia de la columna (mayor longitud de
columna, menores dispersiones de banda, etc.)
El valor de es constante para cada sistema cromatogrfico y solamente podr variarse alterando la
fase estacionaria o la mvil (cambiando de sistema cromatogrfico).
La solucin de un problema real de separacin entre dos bandas deber darse en funcin de los
valores de y Rs que presente
 para valores altos de y bajos de Rs, la separacin podr conseguirse mediante un aumento de
eficacia
 para valores bajos de no es practico intentar la separacin en base a un aumento de eficacia y
debe procederse a un cambio del sistema.

Teora cintica. La curva AETP

Es la representacin de la altura equivalente a un plato terico, frente a la velocidad lineal de la
fase mvil.
Los factores que contribuyen al ensanchamiento de una banda cromatogrfica que se mueve a lo
largo de una columna son los siguientes:
1. Difusin molecular.
2. Irregularidades en el relleno (difusin de Eddy).
3. Resistencia a la transferencia de materia en la fase mvil.
4. Resistencia a la transferencia de materia en la fase estacionaria.
La difusin molecular es debida a la dispersin de las molculas de la banda a lo largo de la columna,
tanto si se mueve como si est en reposo.
La desviacin originada por difusin molecular viene dada por,
2Dm L
 =
u
Dm coeficiente de difusin molecular, L longitud de la columna, u velocidad lineal del eluyente y
coeficiente de tortuosidad, que tiene en cuenta la perturbacin de la difusin molecular debida a
irregularidades de la fase estacionaria.
El ensanchamiento de la banda por la irregularidad de la fase estacionaria, viene dado por,
 =aL/
a es un coeficiente que ser funcin del tamao medio de la partcula y del coeficiente de dispersin
en la fase mvil

La curva AETP
El ensanchamiento de la banda debido a la resistencia a la transferencia de materia, en la fase mvil y
en la fase estacionaria, vendr dado por,
 L 

 =

 L 

 =

d es el dimetro medio de la partcula del lecho estacionario y Cm y Ce coeficientes que dependen
respectivamente de la fase mvil y de la fase estacionaria.
A partir de las ecuaciones anteriores, se puede deducir que la desviacin total de la banda vendr
dada por,
2Dm L
 L   L 

/
 =
+aL +
+
u


Y en consecuencia, la altura equivalente de plato terico, vendr dada por la expresin:
  2Dm
   "  
/
H= =
=
+a +
+


L
u
!
!
Expresin matemtica de la curva de AEPT o ecuacin de Van Deemter
$=

%
+ ( + )&
&

La curva AETP

La altura de plato es funcin del dimetro de las partculas de la fase estacionaria, mejorndose la
eficacia del sistema cromatogrfico a medida que disminuye el tamao de partcula.

La eficacia de una columna cromatogrfica, ser tambin funcin de la velocidad lineal de la fase
mvil

Asismetra de picos
Como primera aproximacin, se ha considerado que los picos cromatogrficos eran
gaussianos (simtricos). En la prctica no es as y la realizacin de clculos en base a esta
suposicin, puede llevar a errores significativos si se trabaja con picos muy distorsionados.
El modelo de la curva de Gauss slo es apropiado cuando se trabaja con picos cuya
asimetra es ligera.
Factor de asimetra,
b+f
FA = b+fw
w=|b-f|
Los factores de asimetra elevados deben ser evitados (por los errores en la cuantificacin
y por la prdida de resolucin). Un pico con FA = 1,1 ocasiona una prdida de eficacia de un
10 %.
La asimetra de los picos puede ser debida a:
resolucin incompleta de dos bandas
reacciones qumicas del compuesto en la
columna
volmenes muertos en el sistema
cromatogrfico
tcnicas de inyeccin incorrectas, etc.

Factores extra-columna que distorsionan la banda

 Introduccin de la muestra: tericamente suele considerarse que la muestra se
introduce en el sistema cromatogrfico de forma que ocupa una capa de espesor
infinitamente pequeo.
Sin embargo, en la realidad, la muestra ocupa un volumen finito, y a veces
relativamente grande.
Por ejemplo, en cromatografa de gases un micro-litro de una sustancia lquida
inyectada puede ocupar un volumen del orden de 0.5 mL cuando se vaporiza a 250 , y
ello representa varios centmetros de longitud de columna.
En cromatografa lquida suelen emplearse bucles conteniendo un determinado
volumen de muestra.
En cromatografa en papel y de capa fina la muestra deber aplicarse en forma de una
gota tan pequea como sea posible.
 Volmenes muertos en el sistema de inyeccin, detector y tubos de conexin: por
volumen muerto se considera el existente entre el punto de inyeccin de la muestra y el
punto de deteccin, excepto el volumen ocupado por la fase estacionaria. Cualquier
zona del sistema en la que estn presentes el soluto y la fase mvil, pero no expuesta a
la fase estacionaria contribuye a la difusin del soluto y, en consecuencia, al
ensanchamiento de las bandas cromatogrficas.
Debern usarse tubos estrechos para las conexiones entre el sistema de inyeccin y la
columna, y entre sta y el detector.

Separation Process Principles, 3rd Edition; J. D. Seader (University of Utah); Ernest J.

Henley (University of Houston); D. Keith Roper. John Wiley & Sons, Inc., 2010.
Tnicas Analticas de Separacin; M. Valclcer y A. Gmez. Editorial Revert S.A., Barcelona
1988.
http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatografia/principios_
de_cromatografia.pdf
Material docente, Universidad Politcnica de Cartagena, www.upct.es.
Introduccin al Anlisis Instrumental, L. Hernndez Hernndez y C. Gnzlez Prez, Ed.
Ariel, 2002.