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O nvel de Biossegurana 1 adequado ao trabalho que

envolva agentes bem caracterizados e conhecidos por no


provocarem doena em seres humanos sadios e que possuam
mnimo risco ao pessoal do laboratrio e ao meio ambiente.
O laboratrio no est separado das demais dependncias da
edificao. O trabalho conduzido, em geral, em bancada, com
adoo das boas prticas laboratoriais (BPL). Equipamentos
especficos de proteo ou caractersticas especiais de construo
no so geralmente usados ou exigidos. O pessoal do laboratrio
deve ter treinamento especfico nos procedimentos realizados no
laboratrio e devem ser supervisionados por um profissional
treinado em Biossegurana e com conhecimentos especficos da
rea.
Abaixo relacionamos os padres e prticas especiais,
equipamentos de segurana e detalhamento de itens referentes s
instalaes que devem ser respeitados quando houver a
manipulao de agentes classificados como microrganismos da
classe de risco 1.
Prticas Padres
1. Limitar o acesso ao laboratrio ou restring-lo somente s
pessoas autorizadas pela chefia do laboratrio.

2. Lavar as mos:
- antes e aps a manuseio de materiais viveis, aps a remoo
das luvas e antes de sarem do laboratrio.
- antes e aps o uso de luvas.
- antes e depois do contato fsico com pacientes.
- depois de manusear material infectante, mesmo quando as luvas
tenham sido usadas.
- antes de comer, beber, manusear alimentos e fumar.

- depois de usar o toalete, coar o nariz, cobrir a boca para


espirrar, pentear os cabelos.
- mos e antebraos devem ser lavados cuidadosamente (o uso de
escovas dever ser feito com ateno).
- manter lquidos anti-spticos para uso, caso no exista lavatrio
no local.

3. No comer, beber, fumar, mascar chicletes, manusear lentes de


contato, aplicar cosmticos ou armazenar alimentos para consumo
nas reas de trabalho. As pessoas que usam lentes de contato em
laboratrios devem usar tambm culos de proteo ou protetores
faciais. Os alimentos devem ser guardados fora das reas de
trabalho.

4. proibida a pipetagem com a boca; devem ser utilizados


dispositivos mecnicos.

5. Evitar o uso de calados que deixem os artelhos vista.

6. Manter as unhas cortadas.

7. No usar anis, pulseiras, relgios e cordes longos, durante as


atividades laboratoriais.

8. No lamber as etiquetas ou colocar objetos na boca.

9. No utilizar a pia do laboratrio como lavatrio.

10. Usar roupa de proteo durante o trabalho. Essas peas de


vesturio no devem ser usadas em outros espaos que no sejam
do laboratrio (escritrio, biblioteca, salas de estar e refeitrio).

11. Restringir ao mximo a utilizao de agulhas. Instituir


procedimentos operacionais padres para o manuseio das mesmas.

12. Todos os procedimentos devem ser realizados cuidadosamente


a fim de minimizar a criao de borrifos ou aerossis.

13. As superfcies de trabalho devem ser descontaminadas ao


trmino da atividades e sempre depois de qualquer derramamento
de material vivel.

14. Todas as culturas, colnias e outros resduos devem ser


descontaminados antes de serem descartados atravs de um
mtodo de descontaminao aprovado como, por exemplo,
esterilizao por calor mido (autoclave). Os materiais que forem
ser descontaminados fora do laboratrio devero ser colocados em
recipientes inquebrveis, prova de vazamentos e hermeticamente
fechados para serem transportados ao local desejado.

15. Afixar o smbolo internacional de "Risco Biolgico" na entrada


do laboratrio. Neste alerta deve constar o(s) agente(s)
manipulado(s) e o nome e nmero do telefone do pesquisador
responsvel.
16. Providenciar o exame mdico adequado, assim como vigilncia
e tratamento apropriados.

17. Presena de kits de primeiros socorros, na rea de apoio ao


laboratrio.

18. O responsvel pelo laboratrio precisa assegurar a capacitao


da equipe em relao s medidas de segurana e emergncia.

19. Deve haver um programa de controle de roedores e artrpodes.


Prticas Especiais
Nenhuma
Equipamento de Segurana (Barreiras Primrias)
1. Os equipamentos especiais de conteno, tais como as cabines
de segurana biolgica, no so geralmente exigidas para
manipulaes de agentes de classe de risco 1.
2. Uso de jalecos, aventais ou uniformes prprios, para evitarem a
contaminao ou sujeira de suas roupas normais.
3. Recomenda-se o uso de luvas para os casos de rachaduras ou
ferimentos na pele das mos.
4. culos protetores devero ser usados na execuo de
procedimentos que produzam borrifos ou salpicos.
Instalaes Laboratoriais (Barreiras Secundrias)
1. Possuir porta para controle do acesso.

2. Instalao de uma pia para lavagem das mos, prxima sada


do laboratrio.

3. O laboratrio deve ser projetado de modo a permitir fcil


limpeza. Carpetes e tapetes no so apropriados para laboratrios.

4. As paredes, o teto e os pisos devem ser lisos, impermeveis a


lquidos e resistentes a produtos qumicos e a desinfetantes que
so usados no laboratrio. Os pisos no devem ser escorregadios.
As superfcies horizontais devem ser evitadas, na medida do
possvel, para evitar o acmulo de poeira.

5. Superfcie das bancadas impermevel gua e resistente ao


calor moderado e aos solventes orgnicos, cidos, lcalis e
qumicos usados para a descontaminao da superfcie de trabalho
e do equipamento.

6. Os mveis do laboratrio devem ser capazes de suportar cargas


e usos previstos. Os espaos entre as bancadas, cabines e
equipamento devem ser suficientes de modo a permitir fcil acesso
para limpeza.

7. A iluminao deve ser adequada para todas as atividades.


Convm evitar os reflexos indesejveis e a luz ofuscante.

8. Se o laboratrio possuir janelas que se abram para o exterior,


estas devero conter telas de proteo contra insetos.
Referncias Bibliogrficas
Cardoso, T. A. O. Biossegurana no Manejo de Animais em
Experimentao. Pp.105-159. In: Oda, L.M. & Avila, S.M. (orgs.).
Biossegurana em Laboratrios de Sade Pblica. Ed. M.S., 1998.
304 p. ISBN: 85-85471-11-5

Centers for Disease Control and Prevention - CDC. Biosafety in


microbiological and biomedical laboratories. 4a. ed. U.S.
Department of Health and Human Services, Atlanta, 1999. 250p.

Lima e Silva, F. H. A. Barreiras de conteno. In: Oda, Leila


Macedo; vila, Suzana (Orgs) et al. Biossegurana em laboratrio
de sade pblica. Rio de Janeiro: Fiocruz. 1998. 304 p. ISBN: 8585471-11-5

O nvel de Biossegurana 2 semelhante ao nvel de


Biossegurana 1, sendo acrescentado de especificidades que
veremos a seguir. adequado ao trabalho que envolva agentes de
risco moderado para as pessoais e para o meio ambiente,
classificados como microrganismos da classe de risco 2.. Difere do
NB-1 nos seguintes aspectos:

(1) O pessoal de laboratrio dever ter um treinamento especfico


no manejo de agentes patognicos e devem ser supervisionados
por profissionais competentes;
(2) o acesso ao laboratrio deve ser limitado durante os
procedimentos operacionais;
(3) precaues extremas sero tomadas em relao a objetos
perfurocortantes infectados; e
(4) determinados procedimentos nos quais exista possibilidade de
formao de aerossis e borrifos infecciosos devem ser conduzidos
em cabines de segurana biolgica ou outros equipamentos de
conteno fsica.
Os seguintes padres e prticas especiais, equipamentos de
segurana (EPC e EPI) e instalaes so aplicveis aos agentes
designados para o Nvel de Biossegurana 2:
Prticas Padres
1. O acesso ao laboratrio restrito ou limitado somente s pessoas
autorizadas pela chefia.

2. No permitida a presena de crianas.

3. Lavar as mos:
antes e aps a manuseio de materiais viveis, aps a remoo
das luvas e antes de sair do laboratrio.
antes e aps o uso de luvas.
antes e depois do contato fsico com pacientes.
depois de manusear material infectante, mesmo quando as luvas
tenham sido usadas.

mos e antebraos devem ser lavados cuidadosamente (o uso de


escovas dever ser feito com ateno).

3. As salas devem ser mantidas trancadas quando fora de uso.


Manter um controle de chaves.

4. proibido comer, beber, fumar, mascar chicletes, manusear


lentes de contato e aplicar cosmticos nas reas de trabalho.

5. Os alimentos devem ser guardados fora das reas de trabalho.

6. proibida a pipetagem com a boca; devem ser utilizados


dispositivos mecnicos. proibido lamber as etiquetas ou colocar
os materiais na boca.

7. Durante o trabalho no laboratrio, a equipe deve usar roupas,


aventais ou uniformes prprios. Essas peas de vesturio no
devem ser usadas em outros espaos que no sejam do laboratrio
(escritrio, biblioteca, salas de estar e refeitrio). As roupas
contaminadas devem ser desinfetadas com tcnica adequada.

8. A indumentria para proteo dentro do laboratrio no deve ser


guardada no mesmo armrio, junto com trajes pessoais.

9. No permitidos o uso de calados que deixem os artelhos


vista.

10. Restringir ao mximo a utilizao de agulhas. Instituir


procedimentos operacionais padres para o manuseio das mesmas.

11. Todos os procedimentos devem ser realizados cuidadosamente


a fim de minimizar a criao de borrifos ou aerossis.

12. Usar culos de segurana e os protetores de face (visores),


assim como outros dispositivos de proteo sempre que forem
indicados para a proteo de olhos e face e contra os salpicos.

13. As superfcies de trabalho devem ser descontaminadas com


desinfetantes que sejam eficazes contra os agentes manipulados,
ao final do trabalho ou no final do dia e aps qualquer vazamento
ou borrifada de material vivel.

14. Usar luvas adequadas em todo o tipo de atividade que possa


resultar em contato acidental direto com sangue, tecidos, fluidos ou
animais infectados. Depois de usadas, as luvas sero removidas e
autoclavadas juntamente com o resduo do laboratrio, antes de
serem eliminadas.

15. odas as culturas, colnias e outros resduos devem ser


descontaminados antes de serem descartados atravs de um
mtodo de descontaminao aprovado como, por exemplo,
esterilizao por calor mido (autoclave). Os materiais que forem
ser descontaminados fora do prprio laboratrio devem ser
colocados em recipientes inquebrveis, prova de vazamentos e
hermeticamente fechados para serem transportados ao local
desejado.

16. Cabines de segurana biolgica devem ser usadas quando o


procedimento de alto potencial de produo de aerossis.

17. recomendvel no permitir o trabalho de pessoas portadoras


de ferimentos, queimaduras, imunodeficientes ou imunodeprimidas.

18. Cumpre providenciar o exame mdico peridico..

19. Presena de kits de primeiros socorros, na rea de apoio ao


laboratrio.

20. O responsvel pelo laboratrio precisa assegurar a capacitao


da equipe em relao s medidas de segurana e emergncia.

21. Deve haver um programa de controle de roedores e artrpodes.


Prticas Especiais
1. O acesso ao laboratrio dever ser limitado ou restrito de acordo
com a definio do chefe do laboratrio, quando o trabalho com
agentes infecciosos estiver sendo realizado. Em geral, pessoas
susceptveis s infeces, ou pessoas que quando infectadas
possam apresentar srias complicaes, no so permitidas no
laboratrio.

2. Estabelecimento de normas e de procedimentos com ampla


divulgao para todos os trabalhadores sobre o potencial de risco
associado ao trabalho, bem como sobre os requisitos especficos
(por exemplo, imunizao) para entrada em laboratrio.

3. O smbolo de "Risco Biolgico" deve ser colocado na entrada do


laboratrio onde agentes etiolgicos estiverem sendo utilizados.
Este sinal de alerta dever conter informaes como o(s) nome(s)
o(s) agente(s) manipulado(s), o nvel de Biossegurana, as

imunizaes necessrias, o nome e nmero do telefone do


pesquisador resposvel, o tipo de equipamento de proteo
individual que deve ser usado no laboratrio e os procedimentos
necessrios para sair do laboratrio.

4. O pessoal do laboratrio deve estar apropriadamente imunizado


ou examinado quanto aos agentes manipulados ou potencialmente
presentes no laboratrio (por exemplo, vacina contra a hepatite B
ou teste cutneo para a tuberculose).

5. Os procedimentos de Biossegurana devem ser incorporados


aos procedimentos operacionais padres ou a um manual de
Biossegurana especfico do laboratrio, adotado ou preparado pelo
diretor do laboratrio. Todo pessoal deve ser orientado sobre os
riscos e devem ler e seguir as instrues sobre as prticas e
procedimentos requeridos.

6. O chefe do laboratrio deve assegurar que o laboratrio e a


equipe de apoio receba um treinamento apropriado sobre os riscos
potenciais associados ao trabalho desenvolvido, as precaues
necessrias para preveno de exposio e os procedimentos para
avaliao das exposies. A equipe de funcionrios deve receber
cursos de atualizao anuais ou treinamento adicional quando
necessrio e tambm no caso de mudanas de normas ou de
procedimentos.

7. Deve-se sempre tomar uma enorme precauo em relao a


qualquer objeto perfurocortante, incluindo seringas e agulhas,
lminas, pipetas, tubos capilares e bisturis.
a. Agulhas e seringas hipodrmicas ou outros instrumentos
perfurocortantes devem ficar restritos ao laboratrio e usados
somente quando no houver outra alternativa. Recipientes plsticos
devem ser substitudos por recipientes de vidro sempre que
possvel.

b. Devem ser usadas somente seringas com agulha fixa ou agulha


e seringa em uma unidade nica descartvel usada para injeo ou
aspirao de materiais infecciosos. As agulhas descartveis usadas
no devem ser dobradas, quebradas, reutilizadas, removidas das
seringas ou manipuladas antes de serem desprezadas. Ao
contrrio, elas deverm ser cuidadosamente colocadas em recipiente
resistente a perfuraes localizado convenientemente, utilizado
para recolhimento de objetos perfurocortantes descartados. Objetos
perfurocortantes no descartveis devem ser colocados em um
recipiente cuja parede seja bem resistente para o transporte at a
rea para descontaminao, de preferncia atravs de uma
autoclave.
c. Vidros quebrados no devem ser manipulados diretamente com
a mo, devem ser removidos atravs de meios mecnicos como
uma vassoura e uma p de lixo ou pinas. Os recipientes que
contm agulhas, equipamentos cortantes e vidros quebrados
contaminados devem passar por um processo de descontaminao
antes de serem desprezados.

8. Os equipamentos laboratoriais com defeitos devem ser


descontaminados antes de serem enviados para conserto ou
removidos do local.

9. Respingos e acidentes resultantes de uma exposio ao material


infeccioso devem ser imediatamente notificados ao chefe do
laboratrio. A avaliao mdica, a vigilncia e o tratamento devem
ser providenciados e registros do acidente e das providncias
adotadas deverm ser mantidos por escrito.

10. proibida a presena de animais em reas laboratoriais.


Equipamento de Segurana (Barreira Primria)

1. Usar cabines de segurana biolgica, de preferncia de Classe


II, ou outro equipamento de proteo individual adequado ou
dispositivos de conteno fsica sempre que:
a. Sejam realizados procedimentos com elevado potencial de
criao de aerossis ou borrifos infecciosos como centrifugao,
triturao, homogeneizao, agitao vigorosa, misturas, ruptura
por sonificao ou abertura de recipientes contendo materiais
infecciosos onde a presso interna possa ser diferente da presso
ambiental.
b. Altas concentraes ou grandes volumes de agentes infecciosos
forem utilizados. Tais materiais s podem ser centrifugados fora das
cabines de segurana se forem utilizadas centrfugas de segurana
e frascos lacrados. Estes s devem ser abertos no interior de uma
cabine de segurana biolgica.

2. Proteo para o rosto (mscaras de proteo, protetor facial,


culos de proteo ou outra proteo para respingos) deve ser
usada para prevenir respingos ou sprays proveniente de materiais
infecciosos ou de outros materiais perigosos, quando for necessria
a manipulao de microrganismos fora das cabines de segurana
biolgica.

3. Utilizao de roupas apropriadas como jalecos, gorros ou


uniformes de proteo, dentro do laboratrio. Antes de sair do
laboratrio para as reas externas (cantina, biblioteca, escritrio
administrativo), a roupa protetora deve ser retirada e deixada no
laboratrio, ou encaminhada para a lavanderia da instituio. A
equipe do laboratrio nunca deve lev-la para a casa.

4. Devem ser usadas luvas, quando houver um contato direto com


materiais e superfcies potencialmente infecciosas ou equipamentos
contaminados. O mais adequado usar dois pares de luvas. Essas
luvas devem ser desprezadas quando estiverem contaminadas, o
trabalho com materiais infecciosos for concludo ou quando a
integridade da luva estiver comprometida. Luvas descartveis no
podem ser lavadas, reutilizadas ou usadas para tocar superfcies

"limpas" (teclado, telefones, etc.), e no devem ser usadas fora do


laboratrio. As mos devero ser lavadas aps a remoo das
luvas. Luvas descartveis no devem ser reutilizadas.
Instalaes Laboratoriais (Barreiras Secundrias)
1. exigido um sistema de portas com trancas.

2. Considere a construo de novos laboratrios longe de rea


pblicas.

3. O laboratrio deve possuir uma pia para a lavagem das mos,


prximo sada do mesmo. recomendado a utilizao de
torneiras com acionamento automtico (clulas fotoeltricas) ou que
sejam acionadas com o p.

4. O laboratrio deve ser projetado de modo a permitir fcil limpeza


e descontaminao. Carpetes e tapetes no so apropriados para
laboratrio.

2. As paredes, o teto e os pisos devem ser lisos, impermeveis a


lquidos e resistentes a produtos qumicos e a desinfetantes que
so usados no laboratrio. Os pisos no devem ser escorregadios.
As superfcies horizontais devem ser evitadas, na medida do
possvel, para evitar o acmulo de poeira.

3. Superfcie das bancadas impermevel gua e resistente ao


calor moderado e aos solventes orgnicos, cidos, lcalis e
qumicos usados para a descontaminao da superfcie de trabalho
e do equipamento.

5. Os mveis do laboratrio devem suportar cargas e usos


previstos com espaamento suficiente entre as bancadas, cabines e
equipamentos para permitir acesso fcil para limpeza. As cadeiras e
outros mveis utilizados no trabalho laboratorial devem ser cobertos
com um material que no seja tecido e que possa ser facilmente
descontaminado.

6. Cabines de segurana biolgica devem ser instaladas, de forma


que a variao da entrada e sada de ar da sala, no provoque
alterao nos padres de conteno de seu funcionamento. As
cabines de segurana biolgica devem estar localizadas longe de
portas, janelas que possam ser abertas e fora de reas laboratoriais
com fluxo intenso de pessoas, de forma que sejam mantidos os
parmetros de fluxo de ar nestas cabines de segurana biolgica.

7. Um lava olhos deve estar disponvel.

8. A iluminao deve ser adequada para todas as atividades,


evitando reflexos e luzes fortes e ofuscantes que possam impedir a
viso.

9. Providenciar sistema mecnico de ventilao que proporcione


um fluxo interno de ar sem que haja uma recirculao para os
espaos fora do laboratrio.

11. Deve ser reservado um local, fora da rea do laboratrio,


destinado ao armazenamento de substncias qumicas.

12. Deve haver um sistema de segurana para combate


incndios e sadas de emergncia.

13. A gua utilizada deve ser de boa qualidade e nunca deve faltar.
O sistema de gua pblica precisa ser protegido por um dispositivo
anti-refluxo.

14. O fornecimento de eletricidade precisa ser adequado. Sistema


de gerador, afim de manter os equipamentos indispensveis
(cabines de segurana biolgica, freezers, etc).

15. necessrio haver uma autoclave no prprio local ou prximo


ao mesmo (dentro do prdio).

16. Para que sejam atendidas as exigncias performace e ao


controle da poluio, os seguintes aspectos relativos ao descarte do
resduo slido merecem ateno especial:
as autoclaves para tratamento do lixo slido exigem desenho,
tamanho e utilidades especiais;
pode haver necessidade de desinfeco da gua do esgoto.
Referncias Bibliogrficas
Cardoso, T. A. O. Biossegurana no Manejo de Animais em
Experimentao. Pp.105-159. In: Oda, L.M. & Avila, S.M. (orgs.).
Biossegurana em Laboratrios de Sade Pblica. Ed. M.S., 1998.
304 p. ISBN: 85-85471-11-5

Centers for Disease Control and Prevention - CDC. Biosafety in


microbiological and biomedical laboratories. 4a. ed. U.S.
Department of Health and Human Services, Atlanta, 1999. 250p.

Lima e Silva, F. H. A. Barreiras de conteno. In: Oda, Leila


Macedo; vila, Suzana (Orgs) et al. Biossegurana em laboratrio

de sade pblica. Rio de Janeiro: Fiocruz. 1998. 304 p. ISBN: 8585471-11-5


O nvel de Biossegurana 3 possui semelhanas ao nvel de
Biossegurana 2 e ao nvel de Biossegurana 1, sendo
acrescentado de especificidades que veremos a seguir, porisso
recomendamos a leitura dos dois nves anteriores.
O laboratrio de nvel de Biossegurana 3, ou de conteno,
destina-se ao trabalho com agentes de risco biolgico da classe 3,
ou seja, com microrganismos que acarretam elevado risco individual
e baixo risco para a comunidade. aplicvel para laboratrios
clnicos, de diagnstico, ensino e pesquisa ou de produo onde o
trabalho com agentes exticos possa causar doenas srias ou
potencialmente fatais como resultado de exposio por inalao. A
equipe profissional deve possuir treinamento especfico no manejo
de agentes patognicos, potencialmente letais, devendo ser
supervisionados por profissional altamente capacitado e que possua
vasta experincia com estes agentes.
Esse nvel de conteno exige a intensificao dos programas de
boas prticas laboratoriais e de segurana, alm da existncia
obrigatria de dispositivos de segurana e do uso, igualmente
obrigatrio, de cabine de segurana biolgica. Os trabalhadores
devem usar roupas de proteo especficas para esta rea e
equipamentos de proteo individual.
Alm dos prticas padres e especiais estabelecidas para os
laboratrios NB-1 e NB-2, devem ser adotadas as recomendaes
abaixo descritas que se aplicam manipulao de agentes
classificados como sendo da classe de risco 3.
Prticas Padres
1. O acesso ao laboratrio rigorosamente limitado.

2. O trabalho no laboratrio deve ser executado em dupla.

3. Lavar as mos:

antes e aps a manuseio de materiais viveis, aps a remoo


das luvas e antes de sair do laboratrio.
antes e aps o uso de luvas.
depois de manusear material infectante, mesmo quando as luvas
tenham sido usadas.

4. proibido comer, beber, fumar, manusear lentes de contato e


aplicar cosmticos dentro da rea de trabalho. As pessoas que
usarem lentes de contato em laboratrios devem tambm usar
culos de proteo ou protetores faciais. Os alimentos devem ser
armazenados fora do ambiente de trabalho em armrios ou
geladeiras utilizadas somente para este fim.

5. O smbolo de "Risco Biolgico" deve ser colocado na entrada do


laboratrio onde agentes etiolgicos estiverem sendo utilizados.
Este sinal de alerta dever conter informaes como o(s) nome(s)
o(s) agente(s) manipulado(s), o nvel de Biossegurana, as
imunizaes necessrias, o nome e nmero do telefone do
pesquisador resposvel, o tipo de equipamento de proteo
individual que deve ser usado no laboratrio e os procedimentos
necessrios para sair do laboratrio.

6. obrigatrio o uso de roupas de proteo especficas


(macaces, uniformes que possuam menor soluo de
descontinuidade, no se admitindo roupas abotoadas na frente),
uso de mscaras, gorros, luvas, pr-ps ou sapatilhas. Os EPI
devem ser autoclavados antes de serem lavados ou descartados.

7. Os trajes do laboratrio no sero utilizados fora da rea de


bioconteno.

8. proibido a pipetagem com a boca, devem ser utilizados


dispositivos mecnicos.

9. Restringir ao mximo a utilizao de agulhas. Deve haver


procedimentos padres para o manuseio de agulhas e de outros
materiais perfurocortantes e seu cumprimento ser constantemente
supervisionado.

10. Todos os procedimentos devem ser realizados cuidadosamente


a fim de minimizar a formao de aerossis.

11. As superfcies de trabalho devem ser descontaminadas com


desinfetantes que sejam eficazes contra os agentes manipulados,
ao final do trabalho ou no final do dia e aps qualquer vazamento
ou borrifada de material vivel.

12. Todas as culturas, colnias e outros resduos relacionados


devem ser obrigatoriamente descontaminados antes de serem
descartados, atravs da esterilizao por calor mido, ou seja,
autoclavao. Todos os resduos devem ser obrigatoriamente
esterilizados antes de serem removidos do laboratrio.
13. Os procedimentos de Biossegurana devem ser incorporados
aos procedimentos operacionais padres ou a um manual de
Biossegurana especfico do laboratrio, adotado ou preparado pelo
diretor do laboratrio. Todo pessoal deve ser orientado sobre os
riscos e devem ler e seguir as instrues sobre as prticas e
procedimentos requeridos.
14. O chefe do laboratrio deve assegurar que o laboratrio e a
equipe de apoio receba um treinamento apropriado sobre os riscos
potenciais associados ao trabalho desenvolvido, as precaues
necessrias para preveno de exposio e os procedimentos para
avaliao das exposies. A equipe de funcionrios deve receber
cursos de atualizao anuais ou treinamento adicional quando
necessrio e tambm no caso de mudanas de normas ou de
procedimentos.

15. Deve ser providenciado um programa rotineiro de controle de


insetos e roedores.
Prticas Especiais
1. No permitido o trabalho ou a presena de mulheres grvidas,
de pessoas portadoras de ferimentos ou queimaduras,
imunodeficientes ou imunodeprimidas.

2. O chefe do laboratrio deve estabelecer normas e


procedimentos pelos quais s sero admitidas no laboratrio que j
tiverem recebido informaes sobre o potencial de risco, que
atendam todos os requisitos para a entrada no mesmo (por
exemplo, imunizao) e que obedeam a todas as regras para
entrada e sada no laboratrio.

3. O pessoal do laboratrio deve ser apropriadamente imunizado


ou examinado quanto aos agentes manipulados ou potencialmente
presentes no laboratrio (por exemplo, vacina para hepatite B ou
teste cutneo para tuberculose) e exames peridicos so
recomendados.

4. Amostras sorolgicas de toda a equipe e das pessoas expostas


ao risco devem ser coletadas e armazenadas adequadamente para
futura referncia. Amostras sorolgicas adicionais podero ser
periodicamente coletadas, dependendo dos agentes manipulados
ou do funcionamento do laboratrio.

5. O chefe do laboratrio deve assegurar que antes que o trabalho


com os microrganismos classificados com da classe de risco 3 se
inicie, toda a equipe do laboratrio demonstre estar apto para as
prticas e tcnicas padres de segurana e demonstre habilidade
tambm nas prticas e operaes especficas do laboratrio.

6. Deve-se tomar uma extrema precauo, quando objetos


cortantes, incluindo seringas e agulhas, lminas, pipetas, tubos
capilares e bisturis forem manipulados.
a. Agulhas e seringas hipodrmicas ou outros instrumentos
perfurocortantes devem ficar restritos ao laboratrio e usados
somente quando no houver outra alternativa. Recipientes plsticos
devem ser substitudos por recipientes de vidro sempre que
possvel.
b. Devem ser usadas somente seringas com agulha fixa ou agulha
e seringa em uma unidade descartvel (por exemplo, quando a
agulha parte integrante da seringa) usada para injeo ou
aspirao de materiais infecciosos. As agulhas descartveis usadas
no devem ser dobradas, quebradas, reutilizadas, removidas das
seringas ou manipuladas antes de serem desprezadas. Elas devem
ser cuidadosamente colocadas em um recipiente de paredes
rgidas, resistente a perfuraes, localizado prximo rea de
trabalho, utilizado para recolhimento de objetos perfurocortantes
desprezados. Estes recipientes devem ser esterelizados antes de
serem removidos da rea de bioconteno para o descarte e
disposio final.
c. Vidros quebrados no devem ser manipulados diretamente com
a mo, devem ser removidos atravs de meios mecnicos como
uma vassoura e uma p de lixo ou pinas.

7. Todas as manipulaes abertas que envolvam materiais


infecciosos devem ser conduzidas no interior de cabines de
segurana biolgica ou de outros dispositivos de conteno fsica
dentro de um mdulo de conteno. Nenhum trabalho onde
tenhamos que abrir a pele para alcanarmos os vasos dever ser
conduzido em bancadas abertas. A limpeza dever ser facilitada
atravs do uso de toalhas absorventes com uma face de plstico
voltada para baixo, recobrindo as superfcies de trabalho no
perfuradas das cabines de segurana biolgica.

8. O equipamento laboratorial e as superfcies de trabalho devem


ser descontaminadas rotineiramente com um desinfetante eficaz
aps a concluso do trabalho com materiais infecciosos,
especialmente no caso de derramamento, vazamentos ou outras
contaminaes por materiais infecciosos.
a. Vazamentos
de
materiais
infecciosos
devem
ser
descontaminados, contidos e limpos pela equipe do laboratrio
equipadas para trabalharem com material infeccioso concentrado.
Os procedimentos operacionais padres a respeito deste tipo de
incidente devem ser desenvolvidos.
b. Respingos e acidentes resultantes de uma exposio ao material
infeccioso devem ser imediatamente notificados ao chefe do
laboratrio. A avaliao mdica, a vigilncia e o tratamento devem
ser providenciados e registros do acidente e das providncias
adotadas deverm ser mantidos por escrito.
c. Os equipamentos laboratoriais com defeitos devem ser
descontaminados antes de serem enviados para conserto ou
removidos do local.
Equipamento de Segurana (Barreiras Primrias)
1. Roupas de proteo como macaces, uniformes que possuam
menor soluo de descontinuidade, no se admitindo roupas
abotoadas na frente, devem ser usadas pela equipe quando estiver
dentro do laboratrio. A roupa de proteo no deve ser usada fora
do laboratrio. Antes de ser lavada ou descartada esta roupa deve
ser esterilizada e deve sempre ser trocada quando contaminada.

2. obrigatrio o uso de luvas quando estiver manuseando


materiais infecciosos. Avaliar a utilizao de dois pares de luva.
Recomenda-se a mudana freqente das luvas acompanhada de
lavagem das mos.

3. Todas as manipulaes de materiais infecciosos devem ser


conduzidas em uma cabine de segurana biolgica de Classe II
ou de Classe III.

4. Quando um procedimento ou processo no puder ser conduzido


dentro de uma cabine de segurana biolgica devem ser utilizadas
combinaes apropriadas de equipamentos de proteo individual
(por exemplo, respiradores, protetores faciais) com dispositivos de
conteno fsica (por exemplo, centrfugas de segurana e frascos
selados).
Instalaes do Laboratrio (Barreiras Secundrias)
1. O laboratrio dever estar separado das reas de trnsito
irrestrito do prdio com acesso restrito. Uma maneira de separ-lo
consiste em localiz-lo na extremidade cega do corredor ou em
levantar uma diviso e, a via de acesso feita atravs de uma antesala (air-lock) depois do laboratrio de nvel de Biossegurana 2.

2. Acesso feito atravs de vestbulo pressurizado, com sistema


de dupla porta e intertravamento automtico como requisito bsico
para entrada no laboratrio a partir de corredores de acesso ou
outras reas contguas.

3. A rea de escritrio deve ser localizada fora da rea de


bioconteno.

4. Existncia de um lavatrio para as mos, lava-olhos e chuveiro


de emergncia, no vestbulo de acesso ao laboratrio, com
dispositivo de acionamento com os ps ou automatizado.

5. As superfcies das paredes internas, pisos e tetos das reas,


onde os agentes da classe de risco 3 so manipulados, devem ser
construdas e mantidas de forma que facilitem a limpeza e a
descontaminao. Toda a superfcie deve ser selada e sem
reentrncias. As paredes, tetos e pisos devem ser lisas,
impermeveis e resistentes a substncias qumicas e desinfetantes
normalmente usados no laboratrio. Os pisos devem ser
monolticos e anti - derrapante. Orifcios ou aberturas nas
superfcies de pisos, paredes e teto devem ser selados. Dutos e
espaos entre portas e esquadrias devem permitir o selamento para
facilitar a descontaminao.

6. As bancadas devem ser impermeveis e resistentes ao calor


moderado e aos solventes orgnicos, cidos, lcalis e solventes
qumicos utilizados para descontaminao de superfcies e
equipamentos.

7. Os mveis do laboratrio devem suportar cargas e usos


previstos com espaamento suficiente entre as bancadas, cabines e
equipamentos para permitir acesso fcil para a limpeza. As cadeiras
e outros mveis utilizados em um laboratrio devem ser cobertos
por uma material que no seja tecido e possa ser facilmente
descontaminado.

8. Todas as janelas do devem possuir caixilhos metlicos, ser fixas


e hermeticamente vedadas.

9. Deve estar disponvel, na rea de bioconteno, uma autoclave


para descontaminao de todo o material utilizado nesta rea.
Deve-se considerar os meios de descontaminao de
equipamentos.

10. Cabines de segurana biolgica devem ser instaladas, de


forma que a variao da entrada e sada de ar da sala, no

provoque alterao nos padres de conteno de seu


funcionamento. As cabines de segurana biolgica devem estar
localizadas longe de portas, janelas que possam ser abertas e fora
de reas laboratoriais com fluxo intenso de pessoas, de forma que
sejam mantidos os parmetros de fluxo de ar nestas cabines de
segurana biolgica.

11. O laboratrio deve ter um sistema de ar independente, com


ventilao unidirecional onde o fluxo de ar penetra no laboratrio
atravs da rea de entrada. O ar de exausto no deve recircular
em outras reas do prdio. Equilbrio do sistema de
ventilao/exausto prevenindo pressurizao e assegurando
presso negativa. O ar exaurido da rea de bioconteno deve ser
descarregado, verticalmente, para fora do prdio, em reas livres de
construes e de entradas de ar. Deve ser filtrado atravs de filtro
HEPA (High Efficiency Particulated Air).

12. Alarmes para falhas nos sistemas de insuflao, exausto,


pressurizao, intercomunicao, temperatura, umidade, incndios
dentre outros. Providenciar monitor visual com um painel de
controle.

13. O ar exaurido de uma cabine de segurana biolgica Classe II,


filtrado por filtro absoluto tipo HEPA poder recircular no interior do
laboratrio se a cabine for testada e certificada anualmente. O ar
exaurido das cabines de segurana biolgica deve ser retirado
diretamente para fora do ambiente de trabalho atravs do sistema
de exausto do edifcio.

14. As linhas de vcuo devem ser protegidas por sifes contendo


desinfetantes lquidos e filtros HEPA, ou o equivalente. Os filtros
devem ser substitudos quando necessrio. Uma alternativa usar
uma bomba a vcuo porttil (tambm adequadamente protegida
com sifes e filtros).

15. A iluminao deve ser adequada para todas as atividades,


evitando reflexos e brilhos que possam ofuscar a viso.
16. O projeto da instalao e os procedimentos operacionais do
nvel de Biossegurana 3 devem ser documentados. Os parmetros
operacionais e das instalaes devem ser verificados quanto ao
funcionamento ideal antes que o estabelecimento inicie suas
atividades. As instalaes devem ser verificadas pelo menos uma
vez ao ano.

17. Deve haver um sistema de segurana para combate


incndios e sadas de emergncia.

18. A gua utilizada deve ser de boa qualidade e nunca deve faltar.
O sistema de gua pblica precisa ser protegido por um dispositivo
anti-refluxo.

19. O fornecimento de eletricidade precisa ser adequado. Sistema


de gerador, afim de manter os equipamentos indispensveis
(cabines de segurana biolgica, freezers, etc).

20. Protees adicionais ao meio ambiente (por exemplo, chuveiros


para a equipe, filtros absolutos tipo HEPA para filtrao do ar
insuflado, conteno de outras linhas de servios e a
descontaminao dos efluentes lquidos) deve ser considerada em
conformidade com a avaliao de risco, com as recomendaes
para manipulao de determinado agente patogncico, atividade
desenvolvida , condies do local ou outras normas locais,
estaduais ou federais aplicveis.
Referncias Bibliogrficas
Cardoso, T. A. O. Biossegurana no Manejo de Animais em
Experimentao. Pp.105-159. In: Oda, L.M. & Avila, S.M. (orgs.).

Biossegurana em Laboratrios de Sade Pblica. Ed. M.S., 1998.


304 p. ISBN: 85-85471-11-5
Centers for Disease Control and Prevention - CDC. Biosafety in
microbiological and biomedical laboratories. 4a. ed. U.S.
Department of Health and Human Services, Atlanta, 1999. 250p.
Lima e Silva, F. H. A. Barreiras de conteno. In: Oda, Leila
Macedo; vila, Suzana (Orgs) et al. Biossegurana em laboratrio
de sade pblica. Rio de Janeiro: Fiocruz. 1998. 304 p. ISBN: 8585471-11-5
O nvel de Biossegurana 4 possui semelhanas quanto aos
procedimentos
e
prticas
estabelecidas
ao
nvel
de
Biossegurana 3, nvel de Biossegurana 2 e ao nvel de
Biossegurana 1, sendo acrescentado de especificidades que
veremos a seguir, porisso recomendamos a leitura dos trs nves
anteriores, sendo que s deve operar com tcnicos especializados
e treinados em procedimentos de Biossegurana.
Recomenda-se que os laboratrios de nvel de Biossegurana 4,
ou de conteno mxima, s funcionem sob o controle direto das
autoridades sanitrias, alm disso, dada a grande complexidade do
trabalho, a equipe do laboratrio dever ter um treinamento
especfico e completo direcionado para a manipulao de agentes
infecciosos extremamente perigosos e dever ser capaz de
entender as funes da conteno primria e secundria, das
prticas padres especficas, do equipamento de conteno e das
caractersticas do planejamento do laboratrio. necessrio a
elaborao de um manual de trabalho pormenorizado; este deve ser
testado previamente atravs de exerccios de treinamento.
O nvel de Biossegurana 4 indicado para o trabalho que
envolva agentes exticos e perigosos que exponham o indivduo a
um alto risco de contaminao de infeces que podem ser fatais,
alm de apresentarem um potencial relevado de transmisso por
aerossis, classificados como microrganismos da classe de risco
4.
Os trabalhadores devem ser supervisionados por profissionais
altamente competentes, treinados e com vasta experincia no
manuseio dos agentes manuseados, alm dos procedimentos de
segurana especficos.

O acesso ao laboratrio deve ser rigorosamente controlado por


sistemas automtizados. A instalao laboratorial deve estar
localizada em uma edificao separada ou em uma rea controlada
dentro do edifcio, que seja totalmente isolada de todas as outras.
Um manual de operaes especfico para as instalaes deve ser
preparado ou adotado.
O trabalho deve ser executado exclusivamente dentro de cabines
de segurana biolgica Classe III ou dentro de cabines de
segurana biolgica da Classe II associadas ao uso de roupas de
proteo com presso positiva, ventiladas por sistema de suporte
de vida. O laboratrio do nvel de Biossegurana 4 deve possuir
caractersticas especficas quanto ao projeto e a engenharia para
preveno da disseminao de microorganismos no meio ambiente
As seguintes prticas de segurana padres e especiais e as
instalaes se aplicam aos agentes pertencentes ao nvel de
Biossegurana 4:
Prticas Padres
1. O acesso ao laboratrio deve se rigorosamente limitado e
controlado.

2. proibido o trabalho de pessoas


imunocomprometidas ou imunodeprimidas,
ferimentos e de mulheres grvidas.

que estiverem
portadores de

3. O trabalho no laboratrio deve ser sempre executado em dupla.

4. Existncia de um sistema de conteno primria, constitudo de


um ou mais dos seguintes equipamentos: cabines de segurana
biolgica da classe III, macaces ventilados com presso positiva.
Neste ltimo caso, exige-se um chuveiro especial para desinfeco
qumica das pessoas que deixam o vesturio.

5. Restringir ao mximo a utilizao de agulhas. Deve haver


procedimentos padres para o manuseio de agulhas e de outros
materiais perfurocortantes e seu cumprimento ser constantemente
supervisionado.

6. Todos os procedimentos devem ser realizados cuidadosamente


a fim de minimizar a formao de aerossis.

7. As superfcies de trabalho devem ser descontaminadas com


desinfetantes que sejam eficazes contra os agentes manipulados,
ao final do trabalho ou no final do dia e aps qualquer vazamento
ou borrifada de material vivel.

8. Todos os resduos produzidos devem ser obrigatoriamente


esterilizados antes de serem retirados do laboratrio. Todos os
resduos devem ser incinerados aps serem removidos do
laboratrio.

9. Todos os lquidos que deixam o laboratrio, incluindo a gua do


chuveiro, precisam ser descontaminados antes de serem
definitivamente descartados.

10. Os procedimentos de Biossegurana devem ser incorporados


aos procedimentos operacionais padres ou a um manual de
Biossegurana especfico do laboratrio, adotado ou preparado pelo
diretor do laboratrio. Todo pessoal deve ser orientado sobre os
riscos e devem ler e seguir as instrues sobre as prticas e
procedimentos requeridos.

11. Deve-se providenciar um programa rotineiro de controle de


insetos e roedores.

Prticas Especiais
1. Somente as pessoas envolvidas na programao e no suporte
ao programa a ser desenvolvido e cujas presenas forem
solicitadas no local ou nas salas do laboratrio devem ter permisso
para entrada no local. O chefe do laboratrio dever ter a
responsabilidade final no controle do acesso. Antes de entrar no
laboratrio, as pessoas devem ser avisadas sobre o risco potencial
e devem ser instrudas sobre as medidas apropriadas de
segurana. As pessoas autorizadas devem cumprir com rigor as
instrues dadas e todos os outros procedimentos aplicveis para a
entrada e sada do laboratrio. Deve haver registro de entrada e de
sada de pessoal.

2. O chefe do laboratrio deve ser o responsvel por assegurar


que, antes de iniciar o trabalho com microrganismos pertencentes
classe de risco 4, toda a equipe demonstre uma alta competncia
em relao s prticas e tcnicas de segurana e em prticas e
operaes especiais especficas para a execuo das atividades do
laboratrio. Isto poder incluir uma experincia anterior no
manuseio de patgenos humanos ou culturas de clulas, ou um
treinamento especfico fornecido pela chefia do laboratrio ou por
outro perito com experincia nestas tcnicas e prticas
microbiolgicas singulares.

3. O pessoal do laboratrio deve ser apropriadamente imunizado e


examinado periodicamente.

4. Amostras sorolgicas de toda a equipe do laboratrio e de outras


pessoas expostas a um elevado risco devero ser coletadas e
armazenadas. Amostras sorolgicas adicionais devem ser
periodicamente coletadas, dependendo dos agentes manipulados
ou do funcionamento do laboratrio. Ao estabelecer um programa
de vigilncia sorolgica deve-se considerar a disponibilidade dos
mtodos para a avaliao do anticorpo do(s) agente(s) em questo.
O programa para o teste das amostras sorolgicas deve ter um

intervalo a cada coleta e o responsvel pelo projeto deve comunicar


os resultados aos participantes.

5. Um manual sobre Biossegurana deve ser preparado e adotado.


A equipe deve ser avisada quanto aos perigos e riscos especiais e
deve ler e seguir as instrues sobre as prticas e procedimentos.

6. A equipe do laboratrio e a equipe de apoio devem receber


treinamento adequado sobre os perigos e riscos associados ao
trabalho, as precaues necessrias para a preveno de
exposies e os procedimentos de avaliao da exposio. A
equipe tambm deve participar de cursos de atualizao anual ou
treinamento adicional quando necessrio em caso de mudanas
nos procedimentos.

7. A entrada e sada de pessoal do laboratrio devem ocorrer


somente aps uso do chuveiro e troca de roupas. Os funcionrios
devem usar o chuveiro de descontaminao a cada sada do
laboratrio.

8. Todos os materias de entrada devem ser descontaminadas em


autoclave de dupla porta, cmara de fumigao ou sistema de
antecmara pressurizada antes de serem utilizados.

9. Deve-se sempre tomar extrema precauo com qualquer objeto


perfurocortante contaminado, como seringas e agulhas, lminas,
pipetas, tubos capilares e bisturi.
a. Agulhas e seringas hipodrmicas ou outros instrumentos
cortantes so restritos ao laboratrio e usados somente quando no
houver outra alternativa para inoculao parenteral, flebotomia ou
aspirao de fludos de animais de laboratrio e de garrafas com
diafragma. Recipientes plsticos devem ser substitudos por
recipientes de vidro sempre que possvel.

b. Devem ser usadas somente seringas com agulhas fixas ou


agulha e seringa em uma unidade nica e descartvel (por
exemplo, quando a agulha parte integrante da seringa) usada
para injeo ou aspirao de materiais infecciosos. As agulhas
descartveis usadas no devem ser dobradas, quebradas,
reutilizadas, removidas das seringas ou manipuladas antes de
serem desprezadas. Ao contrrio, elas devem ser cuidadosamente
acondicionadas em um recipiente resistente a perfuraes
localizado convenientemente, utilizado para recolhimento de objetos
cortantes desprezados. Objetos cortantes no descartveis devem
ser acondicionados em um recipiente cuja parede dever ser bem
resistente para o transporte at uma rea para descontaminao,
de preferncia atravs de uma autoclave.
c. Vidros quebrados no devem ser manipulados diretamente com
a mo, devem ser removidos atravs de meios mecnicos como
uma vassoura e uma p de lixo, pinas ou frceps. Os recipientes
que contm agulhas, equipamentos cortantes e vidros quebrados
contaminados devem passar por esterilizao antes de serem
incinerados.

10. Nenhum material, com exceo do material biolgico que deve


permanecer intacto ou vivel pode ser removido de um laboratrio
de nvel de Biossegurana 4, sem antes ter sido autoclavado.
Equipamentos ou materiais que no resistam a temperaturas
elevadas ou ao vapor devem ser descontaminados utilizando-se
outras metodologias de descontaminao comprovadas e
validadas.

11. Um sistema de notificao de acidentes e exposies


laboratoriais, absentesmo de empregados e doenas associadas
ao laboratrio deve ser organizado, bem como um sistema de
vigilncia mdica. Relatos por escrito devero ser preparados e
mantidos. Deve-se ainda, prever uma unidade de quarentena,
isolamento e cuidados mdicos para o pessoal contaminado por
doenas conhecidas ou potencialmente associado a laboratrio.

12. Todos os materiais no relacionados ao experimento que


estiver sendo realizado no momento no devem ser permitidos no
laboratrio.
Equipamento de Segurana (Barreiras Primrias)
Todos os procedimentos dentro do laboratrio devem ser
conduzidos em cabines de segurana biolgica Classe III ou
cabines de Classe II usadas em associao com roupas de
proteo pessoal com presso positiva e ventiladas por sistema de
suporte de vida.
Instalao do Laboratrio (Barreiras Secundrias)
Existem dois modelos de laboratrio de nvel de
Biossegurana 4:
(A) Laboratrio onde todas as manipulaes do agente so
realizadas em uma cabine de segurana biolgica Classe III
(B) Laboratrio onde a equipe usa uma roupa de proteo
depresso positiva.

Os laboratrios de nvel de Biossegurana 4 podem se basear em


um dos modelos ou em uma combinao dos dois modelos na
construo de um s laboratrio. Se a combinao for utilizada,
cada tipo deve atender todos os requisitos identificados para o
mesmo.

(A) Laboratrio com uso de cabine de seguran biolgica Classe III

1. O laboratrio de nvel de Biossegurana 4 deve estar separado


do prdio ou em uma rea claramente demarcada e isolada dentro
de um prdio.

2. A entrada e a sada de tcnicos deve ser feita atravs de


sanitrios/vestirios de barreira, com diferencial de presso e
sistema de bloqueio de dupla porta, providos de dispositivos de
fechamento automtico e de intertravamento. O controle de acesso
deve ser feito atravs de sistema de leitor de ris, leitor de digital,
carto magntico ou outro sistema automtico.

3. Devem estar previstas cmaras de entradas e sadas de


pessoal, para troca de roupas, separadas por chuveiro. Deve ser
um sistema de autoclave de duas portas, um tanque de imerso
contendo desinfetante, uma cmara de fumigao ou uma ante-sala
ventilada para descontaminao na barreira de conteno para o
fluxo de materiais, estoques ou equipamentos que no passam no
interior dos pelos vestirios para chegarem at a sala.

4. Inspees dirias de todos os parmetros de conteno (por


exemplo, fluxo de ar direcionado) e sistemas de suporte de vida
devem estar concludos antes que o trabalho se inicie dentro do
laboratrio para assegurar que este esteja funcionando de acordo
com os parmetros de operao.

5. As paredes, tetos e pisos do laboratrio devem ser construdos


com sistema de vedao interna, para permitir maior eficincia da
fumigao e evitar o acesso de animais e insetos. As superfcies
internas do laboratrio devem ser resistentes a lquidos e produtos
qumicos para facilitar a limpeza e a descontaminao da rea.

6. As bancadas devem possuir superfcies seladas e sem


reentrncias que devero ser impermeveis gua e resistentes ao
calor moderado e aos solventes orgnicos, cidos, lcalis e
solventes qumicos utilizados na descontaminao das superfcies
de trabalho e dos equipamentos.

7. Os mveis do laboratrio devem ter uma construo simples e


devero suportar cargas e usos previstos. O espaamento entre as
bancadas, as cabines e armrios e o equipamento deve ser
suficiente para facilitar a limpeza e a descontaminao. As cadeiras
e outros mveis usados em um laboratrio devem ser cobertos por
um material que no seja tecido e que possa ser facilmente
descontaminado.

8. Pias com acionamento automtico ou que sejam acionadas sem


uso das mos, devero ser construdas prximas porta da sala da
cabine e perto dos vestirios internos e externos.

9. Se existir um sistema central de vcuo, este no deve servir as


reas fora da sala das cabines. Filtros HEPA em srie devem ser
colocados da forma mais prtica possvel em cada ponto onde ser
utilizado ou prximo da vlvula de servio. Os filtros devem ser
instalados de forma a permitir a descontaminao e a substituio
local dos mesmos. Outras linhas utilitrias, como a de gs e
lquidos, que convergem para a sala das cabines devem ser
protegidas por dispositivos que evitem o retorno do fluxo.

10. Todas as janelas devem ser seladas.

11. A cabine de segurana biolgica Classe III deve possuir


autoclave de porta dupla para a descontaminao de todos os
materiais utilizados. As portas da autoclave que abre para fora da
barreira de conteno deve ser selada s paredes. Estas portas
devem ser controladas automaticamente de forma que a porta
externa da autoclave somente possa ser aberta depois que o ciclo
de "esterilizao" da autoclave tenha sido concludo.

12. Os efluentes lquidos, incluindo a gua dos vasos sanitrios,


dos chuveiros de desinfeco qumica, das pias e de outras fontes
devem ser descontaminados atravs de um mtodo de

descontaminao comprovado, de preferncia atravs de um


tratamento por calor - antes de serem jogados no esgoto sanitrio.
O processo usado para a descontaminao de dejetos lquidos
deve ser validado fisicamente e biologicamente.

13. Todos os laboratrios deverm possuir um sistema de ventilao


sem uma re-circulao. Os sistemas de insuflao e de exausto
devem estar equilibrados para assegurar um fluxo de ar direcionado
da rea de menos risco para rea(s) de maior risco potencial. O
sistema de ar no laboratrio dever prever uma presso diferencial
e fluxo unidirecionado de modo a assegurar diferencial de presso
que no permita a sada do agente de risco. O fluxo de ar
direcionado/presso diferencial deve ser monitorado e deve conter
um alarme que acuse qualquer irregularidade no sistema. Um
dispositivo visual que monitorize a presso de maneira apropriada,
que indique e confirme o diferencial da presso da sala das cabines
deve ser providenciado. O fluxo de ar de entrada e sada tambm
deve ser monitorado, e um sistema de controle HEPA deve existir
para evitar uma contnua pressurizao positiva do laboratrio. A
cabine de Classe III deve ser diretamente conectada ao sistema de
exaustores. Se a cabine de Classe III estiver conectada ao sistema
de abastecimento, isto dever ser feito de forma que previna uma
pressurizao positiva da cabine.

14. O ar de exausto dos laboratrios e das cabines deve passar


por um sistema de dupla filtragem com filtros absolutos tipo HEPA
em srie. Este ar deve ser liberado longe dos espaos ocupados e
das entradas de ar. Os filtros devem estar localizados de maneira
mais prxima possvel da fonte a fim de minimizar a quantidade de
canos potencialmente contaminados. Todos os filtros HEPA devem
ser testados e certificados anualmente. A instalao dos filtros
HEPA deve ser projetada de tal forma que permita uma
descontaminao in situ do filtro antes deste ser removido, ou
antes, da remoo do filtro em um recipiente selado e de conteno
de gs para subseqente descontaminao e destruio atravs da
incinerao. O projeto do abrigo do filtro HEPA deve facilitar a
validao da instalao do filtro. O uso de filtros HEPA prcertificado pode ser vantajoso. A vida mdia de filtros HEPA de
exausto pode ser prolongada atravs de uma pr-filtrao
adequada do ar insuflado.

15. O projeto e procedimentos operacionais de um laboratrio de


nvel de Biossegurana 4 devem ser documentados. O local deve
ser testado em funo do projeto e dos parmetros operacionais
para ser verificado se realmente atendem a todos os critrios antes
que comecem a funcionar. Os locais devem ser checados
novamente pelo menos uma vez ao ano e os procedimentos neles
existentes devem ser modificados de acordo com a experincia
operacional.

16. Sistemas de comunicaes apropriados devem ser instalados


entre o laboratrio e o exterior (por exemplo, fax, computador,
interfone).

(B) Laboratrio com utilizao de roupa de proteo especfica com


presso positiva

1. A instalao deste laboratrio deve ser em um edifcio separado


ou de uma rea claramente demarcada e isolada dentro do edifcio.
As salas devem ser construdas de forma que assegurem a
passagem atravs dos vestirios e da rea de descontaminao
antes da entrada na(s) sala(s) onde h a manipulao dos agentes
de risco biolgico da classe de risco 4.

2. Vestirios interno e externo, separados por um chuveiro devem


ser construdos para a entrada e sada da equipe. Uma rea para
que a equipe vista as roupas protetoras deve ser construda para
proporcionar uma proteo pessoal equivalente quela
proporcionada pelas cabines de segurana biolgica Classe III. As
pessoas que entram nesta rea devem vestir uma roupa de pea
nica de presso positiva e que seja ventilada por um sistema de
suporte de vida protegido pelo sistema de filtros HEPA. O sistema
de suporte de vida inclui compressores de respirao de ar, alarmes
e tanques de ar de reforo de emergncia. A entrada nesta rea

deve ser feita atravs de uma cmara de compresso adaptada


com portas hermticas.
3. Um chuveiro qumico para descontaminao da superfcie da
roupa antes que o trabalhador saia da rea deve ser instalado.

4. Um gerador de luz, automaticamente acionado em casos de


emergncia, deve ser instalado para evitar que os sistemas de
suporte de vida, os alarmes, a iluminao, os controles de entrada e
sada e as cabines de segurana parem de funcionar.

5. A iluminao e os sistemas de comunicao de emergncia


devem ser instalados.
6. Todas as aberturas e fendas dentro da concha interna da sala da
roupa de proteo, do chuveiro qumico e das fechaduras devem
ser seladas.

7. Uma inspeo diria de todos os parmetros de conteno (por


exemplo, o fluxo de ar direcionado, chuveiros qumicos) e dos
sistemas de suporte de vida devem estar concludos antes que o
trabalho no laboratrio se inicie para garantir que o laboratrio
esteja operando de acordo com os parmetros operacionais.

8. Uma autoclave de portas duplas deve ser instalada na barreira


de conteno para descontaminao dos dejetos a serem
removidos da rea do laboratrio escafandro. A porta da autoclave,
que se abre para a rea externa da sala escafandro, deve ser
automaticamente controlada de forma que a porta exterior s possa
ser aberta depois que o ciclo de "esterilizao" esteja concludo.

9. As paredes, pisos e tetos do laboratrio devem ser construdos


de maneira que formem uma concha interna selada, que facilite a
fumigao e que evite a entrada de animais e insetos. As
superfcies internas devem ser impermeveis e resistentes as

solues qumicas, facilitando a limpeza e a descontaminao da


rea. Todas as aberturas e fendas nestas estruturas e superfcies
devem ser seladas. Qualquer sistema de drenagem do piso deve
conter sifes cheios de desinfetante qumico de eficcia
comprovada contra o agente alvo e devem estar conectados
diretamente ao sistema de descontaminao de resduos lquidos.
O esgoto e outras linhas de servio devem possuir filtros HEPA.

10. Acessrios internos como dutos de ventilao, sistemas de


suprimento de luz e gua devem ser instalados de maneira que
minimizem a rea da superfcie horizontal.

11. As bancadas devem possuir superfcies seladas e sem


emendas que devero ser impermeveis e resistentes ao calor
moderado e aos solventes orgnicos, cidos, lcalis e solventes
qumicos utilizados na descontaminao das superfcies de trabalho
e nos equipamentos.

12. As bancadas devem ser impermeveis e resistentes ao calor


moderado e aos solventes orgnicos, cidos, lcalis e solventes
qumicos utilizados para descontaminao de superfcies e
equipamentos. Recomenda-se o uso de materiais no porosos.

13. Os mveis do laboratrio devem ter uma construo simples e


devem suportar cargas e usos previstos. As cadeiras e outros
mveis do laboratrio devem ser cobertos por um material que no
seja tecido e que possa ser facilmente descontaminado.

14. Pias com funcionamento automtico ou que sejam acionadas


sem o uso das mos, devem ser construdas prximas rea em
conjunto com a roupa de proteo.

15. Todos os servios de gs e lquidos devem ser protegidos por


dispositivos que evitem o retorno do fluxo.

16. Todas as janelas devem ser seladas.

17. Efluentes lquidos provenientes das pias, dos canos de esgoto


do piso (se utilizado), das cmaras da autoclave e de outras fontes
dentro da barreira de conteno devem ser descontaminados
atravs de um mtodo de descontaminao comprovado, de
preferncia atravs de um tratamento com calor - antes de serem
jogados no esgoto sanitrio. Os efluentes vindo de chuveiros e
vasos sanitrios limpos devem ser jogados no esgoto sem antes
passar por um tratamento. O processo usado para a
descontaminao de dejetos lquidos dever ser validado
fisicamente e biologicamente.

18. Todos os laboratrios devem possuir um sistema de ventilao


sem re-circulao. Os componentes de insuflao e exausto de ar
do sistema devem estar equilibrados para assegurar um fluxo de ar
direcionado da rea de menos risco para rea(s) de maior perigo. O
fluxo de ar direcionado/presso diferencial entre as reas
adjacentes deve ser monitorado e deveconter um alarme para
indicar qualquer irregularidade no sistema. Um dispositivo visual
que monitore a presso de maneira apropriada, que indique e
confirme o diferencial da presso da sala das cabines deve ser
providenciado e deve ser colocado na entrada do vestirio. O fluxo
de ar nos componentes de abastecimento e escape tambm deve
ser monitorado, e um sistema de controle HVAC deve ser instalado
para evitar uma pressurizao positiva do laboratrio.

19. O ar de exausto deve passar por dois filtros absolutos tipo


HEPA em srie antes de ser jogado para fora. O ar deve ser
lanado distante dos espaos ocupados e das entradas de ar. Os
filtros HEPA devem estar localizados de maneira mais prxima
possvel da fonte a fim de minimizar a extenso dos canos
potencialmente contaminados. Todos os filtros HEPA devem ser

testados e certificados anualmente. O local da instalao dos filtros


HEPA deve ser projetado de maneira que permita uma
descontaminao in situ do filtro antes deste ser removido. Este
local deve facilitar a validao da instalao do filtro. O uso de filtros
HEPA pr-certificados pode ser vantajoso. A vida mdia de filtros
HEPA exaustores pode ser prolongada atravs de uma pr-filtrao
adequada do ar fornecido.

20. O posicionamento dos pontos de entrada e sada de ar deve


ser de tal forma que os espaos de ar estticos dentro do
laboratrio sejam minimizados.

21. O projeto e procedimentos operacionais de um laboratrio de


nvel de Biossegurana 4 devem ser documentados. O local deve
ser testado em funo do projeto e dos parmetros operacionais
para que se verifique se realmente atendem a todas as
necessidades antes que comecem a funcionar. Os locais devem ser
checados novamente uma vez ao ano e os procedimentos neles
existentes devem ser modificados de acordo com a experincia
operacional.

22. Sistemas de comunicaes apropriados devem ser instalados


entre o laboratrio e o exterior (por exemplo, fax, computador,
interfone).
Referncias Bibliogrficas
Cardoso, T. A. O. Biossegurana no Manejo de Animais em
Experimentao. Pp.105-159. In: Oda, L.M. & Avila, S.M. (orgs.).
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304 p. ISBN: 85-85471-11-5

Centers for Disease Control and Prevention - CDC. Biosafety in


microbiological and biomedical laboratories. 4a. ed. U.S.
Department of Health and Human Services, Atlanta, 1999. 250p.

Lima e Silva, F. H. A. Barreiras de conteno. In: Oda, Leila


Macedo; vila, Suzana (Orgs) et al. Biossegurana em laboratrio
de sade pblica. Rio de Janeiro: Fiocruz. 1998. 304 p. ISBN: 8585471-11-5

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