BIOTECNOL

OGIA
PROTEINA DE ORIGEN
UNICECULAR
(SCP)

Mirchak, Gonzalo
Pedra, Nicols
Tantalean, Cristhian
UTN-FRM Ingeniera Qumica 2015

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Fundamento
Ciertos
microorganismos
pueden degradar distintos sustratos
produciendo cantidades de protenas unicelulares o SCP aptas para el
consumo animal y humano. La economa de este mtodo de produccin
se basa en que las materias primas utilizadas provienen de los desechos
de distintas industrias (petrolera, papelera, azucarera, aceitera, etc.).
Claro est que el tipo de microorganismo utilizado, depender del tipo
de materia prima que se trate.

Qu es una protena?
Son macromolculas que contienen carbono, hidrogeno, oxigeno,
nitrgeno y generalmente azufre y fosforo, pero su elemento
caracterstico es el nitrgeno. Las protenas estn presentes en el
protoplasma y su importancia en este es que forman parte como
material estructural bsico del mismo.
Las molculas proteicas estn constituidas por aminocidos, estos
difieren en sus estructuras pero todos tienen un grupo amino y un grupo
acido.
Cuando se ingieren protenas estas son degradadas en sus aminocidos
componentes para podes ser absorbidas y pasar al torrente sanguneo.
Estos son transportados a todas las partes del cuerpo, para sintetizar
nuevas protenas o ser metabolizadas, con liberacin de energa

Qu es la protena unicelular?
Podemos decir que se denomina bioproteina o protena unicelular, a
aquella que se obtiene de la biomasa microbiana de bacterias,
levaduras, algas y hongos filamentosos. La protena unicelular deriva de
la retraccin de "protenas de organismos unicelulares", el cual es el
trmino ms adecuado.

Por qu producir SCP?

El inters de la produccin de SCP fue estimulado por muchas
publicaciones relacionadas con la salud, la alimentacin y la agricultura
acerca de una escasez de protena a nivel mundial. En los pases
desarrollados los altos niveles de vida han originado una creciente
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demanda de protenas de alta calidad
para compuestos alimenticios,
estos son preparados para satisfacer los requerimientos nutricionales
totales del animal, la SCP podra ser una alternativa para evitar que
todas esas protenas (Cereales, harinas de pescado, soja, etc.) sean
utilizadas para el consumo animal, haciendo as estos productos ms
accesibles para el consumo humano, la produccin a gran escala de SCP
hara que la produccin animal sea menos dependiente de protenas
importadas

Adems las protenas unicelulares son utilizadas con xito en

tratamientos de recuperacin de personas afectadas con cncer y sida,
adems de estar indicadas para paliar los efectos de la desnutricin
infantil.

Produccin de Protena de origen unicelular a partir de

alcanos
Introduccin
Los alcanos pueden ser catabolizados por muchas levaduras y por
algunos hongos (por ej. Mucorales y Moniliales) y por algunas
bacterias (Parcialmente mediante oxidacin).
La desventaja del uso de alcanos es que no son fcilmente solubles.
Catabolismo de alcanos de cadena larga
Existen 2 vas para el catabolismo de los alcanos: La oxidacin terminal
y la oxidacin sub-terminal

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La oxidacin terminal es la va principal del metabolismo en las bacterias

y levaduras
Procesos a gran escala que utilizan levaduras
Dos productos del petrleo han sido utilizados como materias primas
a El gas-ol, tambin conocido como fuel-ol o gasolina disel:
La fermentacin del gas-ol se llev a cabo en un fermentador
aero-elevado con una velocidad de aireacin alta. Puesto que los alcanos
constituyen solamente una pequea porcin del gas-ol, este, insoluble
tena que ser aadido repetidamente al medio de crecimiento. Esto daba
lugar a un mezclado pobre, es decir bajos rendimientos

b Los alcanos:
En comparacin de glucosa Candida tropicalis crece mucho ms
pobremente sobre alcanos, pero el rendimiento es mejor y el consumo
de oxigeno es similar

Fermentacin del metanol

El metanol fue en su momento el substrato ms importante para la
produccin de protena de origen unicelular, aunque ya no es tan as

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debido a factores de coste, igualmente
sigue teniendo muchas ventajas
sobre los otros substratos.

Adems de las bacterias metiltrofas obligadas que crecen sobre

compuestos C1, las bacterias metiltrofas facultativas las levaduras y los
hongos pueden metabolizar hidrocarburos de cadena larga. En contraste
con muchas bacterias, las levaduras son incapaces de utilizar
compuestos C1 distinto del metanol.
En esta produccin se emplean bacterias ms que levaduras, por las
siguientes razones: crecimiento rpido, mayor contenido en protena,
mejores rendimientos y requerimientos ms sencillos del medio de
cultivo.

Biosntesis
A_ Oxidacin del metanol
CH3OH

HCHO

HCOOH

CO2

La primer etapa hasta formaldehido requiere de la enzima metanol

deshidrogenasa inducible no especifica, cataliza la reaccin utilizando
NAD+ (nicotinamida adenina dinucletido) como aceptor de electrones.
No se origina ganancia de energa
Metanol + NAD+

Formaldehdo + NADH

La siguiente etapa es la oxidacin del formaldehido para obtener acido

frmico se puede llevar a cabo por varias enzimas:

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1. Con glutatin reducido (GSH)5 utilizando NAD+ una reaccin que

tambin existe en levaduras
HCHO + NAD + H 2O
HCOOH + NADH2
2. Una formaldehido deshidrogenasa dependiente de diclorofenolindofenol (DCPIP)
3. Una metanol deshidrogenasa inespecfica.
En esta etapa se obtiene de dos a tres molculas de ATP por mol de
substrato.
La ltima etapa implica una enzima formato deshidrogenasa
dependiente de NAD y produce 3 ATP por mol de substrato
HCOOH + NAD

CO2 + NADH2

B_ Asimilacin de carbn por los organismos que oxidan metanol.

Las bacterias que crecen sobre metanol deben producir molculas de C 3
que luego introducen en el metabolismo primario como piruvato.
El CO2 puede ser tomado por los organismos fotosintticos a travs del
ciclo de la ribulosa difosfato
El formaldehido puede ser condensado con ribulosa-5-P en el ciclo de la
ribulosa monofosfato (mayor rendimiento en bacterias)
En la va de la serina la condensacin de formaldehido y glicina tiene
lugar por accin de la serina transhidroxiacetona

Protena de origen unicelular obtenida a partir de

celulosa
La celulosa de origen natural y de residuos de madera es un material
inicial atractivo para la produccin de etanol, pero lamentablemente
esta mezclada con sustancias como lignina, hemicelulosa, almidn,
protenas, sales. Por lo tanto debe ser pretratada al fin de degradar la
celulosa a azucares fermentables. El pretratamiento puede ser
enzimtico (celulasas) o qumico (hidrolisis acida).
Solamente las celulasas extracelulares pueden ser utilizadas
comercialmente. Tales celulasas son excretadas tanto por bacterias
(Cellulomonas y actinomeicetos) como por hongos (Trichoderma,
Penicillium, Thermoascus, Humicola).

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La celulosa es un complejo enzimtico
que consiste en al menos tres
enzimas:

a) Exo-B-1,4-glucanasa, tambin denominada celobiohidrolasa o C 1

celulasa
b) Endo-B-1,4-glucanasa, tambin denominada endocelulasa
c) B-1,4-glucosidasa, o celobiasa
Se produce azcar a partir de celulosa con celulasas, esto se utiliza
como substrato para la reduccin de SCP
Es un proceso muy caro.

Protena de origen unicelular obtenida a partir de

carbohidratos
El cultivo a gran escala de levaduras sobre melazas se utiliza
ampliamente en la fabricacin de levadura de panadera y en menor
escala para levadura como alimento. Adems varios procesos de
levadura a gran escala utilizan suero (principal azcar componente es la
lactosa) como material de partida.
El hongo Fusarium graminearum se crece en forma completamente
continua sobre glucosa se aaden sales minerales y biotinia, con amonio
como fuente de nitrgeno. El pH se regula a 6 y la temperatura de
incubacin 30C. Se obtiene 1kg de peso hmedo de micelio fngico a
partir de 1kg de glucosa, con un contenido de protena de 136g.
El cultivo, tomado directamente del fermentador se calienta a 64C para
inactivar proteasas y para activar RNAsas endgenas. Despus de 30
min de calentamiento se reduce el contenido en RNA ribosomal desde 9
a 1.1 % y los productos de degradacin difunden de las clulas. La
protena desecada se prepara finalmente en estructuras que recuerdan
la carne de cerdo, pollo o vaca y se aade un saborizante artificial
adecuado.

Produccin de SCP a partir de aguas residuales

Las aguas residuales domesticas no son actualmente adecuadas para la
produccin de SCP a gran escala, pero pueden ser en el futuro
importantes para la produccin de metano.
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7 para la produccin de SCP las
Hasta el presente, han sido utilizadas
aguas residuales del procesamiento de la celulosa, de la produccin del
caf, de la produccin del almidn y del procesamiento de alimentos.

Los lquidos sulfiticos residuales de la produccin del papel y de la

celulosa han sido utilizados tambin extensamente para producir SCP
por las siguientes razones:
1 Disponibilidad consistente de grandes cantidades.
2 baja inversin y costes de produccin y
3 Existencia de organismos capaces de altas velocidades de
crecimiento sobre el sustrato.
Los organismos adecuados para el crecimiento sobre lquidos sulfiticos
son:
-

Candida utilis
Candida tropicalis
Chaetomium cellulolyticum
Paecilomyces varioti

MATRIZ DE TAGUCHI para 4 variables con 2 niveles

Para realizar la matriz se designaron 4 variables: Zinc, Magnesio, Calcio
y Hierro. Siendo nuestro sustrato celulosa.
La produccin de enzimas con Trichoderma viride ha sido optimizada,
pero los rendimientos de celulasas son todava relativamente bajos. Los
efectos del control del pH, edad del inculo y aditivos al medio de cultivo
han sido probados en un medio bsico que contiene KH 2PO4 0.2%,
(NH4)2SO4 0.14%, urea 0.03%, MgSO4..7H2O 0.03%, CaCl2 0.03%,
FeSO4.7H2O 5mg/l, MnSO4.H2O 1.6mg/l, ZnSO4 1.4 mg/l y CoCl2 2mg/l.
A partir de estos datos nosotros obtenemos los valores de referencia,
luego se calcula dos niveles para cada una de las variables: un nivel
superior al de referencia y otro inferior.
Finalmente se realiza la matriz de Taguchi que va a tener 16
combinaciones diferentes: 24
a) ZINC
Valor de referencia (Zn) ----------5.65x10

-4

g/l de Zn

Como en el laboratorio lo encontramos como ZnCl

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8 - 4 g/l de ZnCl
Valor de referencia (ZnCl) --------8.7x10

Valor de referencia (ZnCl) en 40ml ----3.48x10 -5 g/l de ZnCl

Al ser una cantidad muy pequea para pesar, se opta por preparar una
solucin mil veces ms concentrada. Luego se extrae 1ml de sta nueva
solucin para obtener as la concentracin requerida.

Valor de referencia final (VRF) ------- 0.035 g/l

Concentracin inferior-------para 2.825x10-4 g/l de Zn
Tomo 0.5ml de VRF
Concentracin superior------para 8.475x10-4 g/l de Zn
Tomo 1.5ml de VRF

b) MANGANESO
Valor de referencia (Mn) -------------------- 5.2 x10- 4 g/l de Mn
Valor de referencia (MnSO4.H2O) --------1.6x10 -3 g/l de MnSO4.H2O
Valor de referencia (MnSO4.H2O) en 40ml --------6.4x10 -5 g/l de
MnSO4.H2O

Valor de referencia final (VRF) -------0.064 g/l

Concentracin inferior-------para 2.6x10-4 g/l de Mn
Tomo 0.5ml de VRF
Concentracin superior--------para 7.8x10-4 g/l de Mn
Tomo 1.5ml de VRF

c) MAGNESIO
Valor de referencia (Mg) ----------------------0.2g/l de Mg
Valor de referencia (MgSO4.7H2O) -------- 2.03 g/l de MgSO4.7H2O
Valor de referencia (MgSO4.7H2O en 40 ml -------- 0.0812 g/l de
MgSO4.7H2O

Valor de referencia final (VRF) -------81.2 g/l

Concentracin inferior -------para 0.16 g/l de Mg
Tomo 0.8ml de VRF
Concentracin superior--------para 0.24g/l de Mg
Tomo 1.2ml de VRF

d) HIERRO
Valor de referencia (Fe) ---------- 1x10-3 g/l de Fe
Valor de referencia (FeCl3) -------- 0.003g/l de FeCl3
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Valor de referencia (FeCl3) en 40ml -------1.2x10-4 g/l de FeCl3

Valor de referencia final (VRF) -------0.12 g/l

Concentracin inferior-------para 0.008 g/l
Tomo 0.8ml de VRF
Concentracin superior--------para 0.0012g/l
Tomo 1.2ml de VRF

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Proceso
1._ Alimentacin
2._ Aire
3._ Esterilizador
4._ Fermentador
5._Intercambiador
de Calor
6._ Sedimentador
8._ Corriente
acuosa
9._ Barro de
protenas
10._ Separador
centrifugo
11._ Evaporador
12._ Corriente
acuosa

Descripcin del proceso

Los microorganismos celuloliticos crecen continuamente en un
fermentador agitado. La alimentacin es consumida totalmente durante
la fermentacin. El agua es removida durante la cosecha y el producto
final secado para dar un polvo fino o granos, de acuerdo al uso final.
Fermentacin
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Los nutrientes minerales y los factores esenciales para el crecimiento y

propagacin celular, son alimentados continuamente con una solucin
acuosa a un ritmo controlado en el fermentador.
La materia prima se une a la alimentacin acuosa despus de pasar por
un sistema de esterilizacin. En este, el medio es calentado, y llevado a
altas temperaturas el tiempo suficiente para matar todos los
microorganismos que pueda contener. La economa de calor es obtenida
por intercambio entre la corriente de alimentacin fra que entra al
estabilizador, y la corriente esterilizada caliente que sale. Una vez
enfriada, la corriente esterilizada es alimentada directamente al
fermentador.
Todo el oxgeno necesario para el crecimiento celular, es provisto por
una corriente continua de aire insuflado dentro del fermentador. El
nitrgeno, vital para el crecimiento celular, es provisto como amoniaco,
alimentado continuamente en junto con la corriente de aire. Este
amoniaco, sirve tambin para mantener el pH deseado del contenido del
fermentador, el ritmo de adicin esta automticamente controlado de
acuerdo con el pH.
El alto calor liberado durante la fermentacin, junto con la relativamente
baja temperatura de fermentacin alrededor de 30C -, necesita
enfriamiento externo. El caldo fermentado es por lo tanto des-aireado y
bombeado a un intercambiador de calor externo, a travs de agua de
enfriamiento externo es regulado la temperatura de fermentacin. Una
corriente de fermentado es enviado continuamente a este circuito de
enfriado para mantener un retraso constante en el fermentador
Pre cultivo en Fermentacin
La concentracin optima del inoculo para el fermentador, determina el
nmero de etapas de pre cultivo de fermentacin necesaria.
Esterilizacin del medio de cultivo
El medio de cultivo que se prepara inicialmente contiene una variedad
de clulas vegetativas diferentes y de esporas, derivadas de los

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12 y del recipiente. Estos deben ser
constituyentes del medio, del agua
eliminados por un procesamiento adecuado antes de la inoculacin.

Algunos mtodos utilizados son:

- Esterilizacin por calor
- Radiacin
- Mtodos qumicos
- Separacin mecnica de los microorganismos.
Esterilizacin del aire de Fermentacin
Las fermentacin operan en condiciones de agitacin vigorosa y el aire
que se suministra y el aire que se suministra tiene que ser esterilizado
para evitar el crecimiento de microorganismos extraos que pueda
contener.
Decantacin
Previo a la centrifugacin la solucin debe pasar por un proceso de
decantacin los cuales pueden ser:
-

Decantadores Centrfugos.
Decantadores Gravitatorios.

Desecacin
Es esencial secar el producto final de tal manera que su actividad no se
pierda. Este proceso implica transferencia de calor al producto hmedo y
el desprendimiento de la humedad con una corriente gaseosa.

Conclusin
La SCP competir con fuentes naturales de protenas, como la harina de
soja o la de pescado. Los costos de produccin estarn fuertemente
influenciados por la naturaleza de la materia prima que se utiliza. Si se
utilizan productos que provienen de desechos industriales, el costo de la
materia prima no tendr importancia en el costo final de la SCP, en
cambio si se utiliza materia prima til, como gas natural, entonces los
costos jugaran un papel importante.

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Otro factor determinante, ser el destino
final de la SCP, ya que si se
destinara a consumo humano, su costo ser aproximadamente diez
veces ms caro que si se destinara al consumo animal

Bibliografa
_Crueger W. y Crueger A. 1989. Biotecnologa manual de microbiologa
industrial
_http://www.monografias.com/trabajos33/produccionbiomasa/produccion-biomasa.shtml
_Wikipedia enciclopedia libre
_http://delytes-delytestrabajos.blogspot.com.ar/2011/09/produccion-deproteina-unicelular.html.
_Apuntes de la Catedra Biotecnologa. UTN-FRM Ingeniera Qumica.

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