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UNIVERSIDAD DE COLIMA

FACULTAD DE CIENCIAS MARINAS

DETERMINACION DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN


CAMARON BLANCO ADULTO (Penaeus vannamei) CULTIVADO EN
LABORATORIO.

TESIS
PARA OBTENER EL GRADO DE MAESTRIA

EN ACUACULTURA

PRESENTA
ANA JUDITH MARMOLEJO RODRIGUEZ

ASESOR DE TESIS:
DR. ALEJANDRO OTTO MEYER WILLERER

ASESOR DE TESIS EXTERNO:


DR. FELIPE VAZQUEZ GUTIERREZ

CAMPUS EL NARANJO MANZANILLO, COLIMA, NOVIEMBRE DE 1999.

Facultad de Ciencias Marinas

M. en C. Sergio Alberto Lau Cham


Director de la Facultad de Ciencias Marinas
Presente.

Los que suscriben, Sinodales de la Comisin nombrada para examinar el


manuscrito de Tesis titulado:
Determinacin de plaguicidas organoclorados en camarn blanco
adulto Penaeus vannamei, cultivado en laboratorio.
que presenta la candidato al Grado Acadmico de Maestra en Ciencias:
Area. Acuacultura, la C.

Ana Judith Marmolejo Rodrguez


Manifiestan su aceptacin a dicho trabajo en virtud de que satisface los
requisitos sealados por las disposiciones reglamentarias y que s e han hecho
las correcciones que cada uno en particular consider pertinentes.
Atentamente

Sinodal Propietario

INDICE
Resumen
Agradecimientos
Dedicatoria
Introduccin
Antecedentes
Generales
Normatividad
Justificacin
Objetivos
Material y Mtodos
Localizacin del rea de Estudio
Procedencia de los camarones
Tratamiento de los camarones en laboratorio
Obtencin de los camarones, agua y sedimento
Tcnica Lab. Nutricin Fac. de Veterinaria
Tcnica Instituto de Fisiol. Celular
Tcnica Lab. Fisicoqumica ICMyL
Resultados
Patrones de plagucdas organoclorados estndares
Patrones de plagucidas organofosforados estndares
Blanco
Camarn hmedo por la Tcnica de Fac. Veterinaria
Camarn seco Tcnica de Fisiol. Celular
Camarn Material de Referencia (Soxhlet)
Camaron Material de Referencia (Microondas)
(Soxhlet)
Camarn Lab. Ciencias Mar.
(Soxhlet)
Camarn Isla Navidad
Camarn Lab. de Ciencias Marinas (Microondas)
Camarn Isla Navidad (Microondas)
Plaguicidas en Agua
Plaguicidas en Sedimento
Plaguicidas en Alimento

i
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iV

1
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6
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49
50
51
52 .
53
54

Discusin

55

Conclusiones

60

Recomendaciones

62

Bibliografa

64

Anexos

72

INDICE DE FIGURAS
............................
Fig.1. Cromatograma de estndares con once plaguicidas organoclo:ados
Fig. 2. Cromatograma de la mezcla de estndares de tres plaguicidas organofosforados .....
Fig. 3. Cromatograma delanlisis de u n blanco de muestra y solventes ..................................
Fig. 4. Cromatograma de la tcnica 1 ......................................................................................
Fig. 5. Cromatograma de la tcnica 2 ......................................................................................
Fig. 6. Cromatograma de muestra de control MRE procesada con la tcnica 3 .......................
Fig. 7. Cromatograma de muestra de control SRM analizada con la tcnica 4 .........................
Fig. 8. Cromatograma de muestra de camarn del LCM UAG procesadas ..............................
Fig. 9. Cromatograma de muestra de camarn procedentes de Isla Navidad, Col.,
Fig.
Fig.
Fig.
Fig.
Fig.
Fig.
Fig.
Fig.
Fig.
Fig.
Fig.

Fig.
Fig.

.41
..4 2
.43
..4 4
..4 5

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.47
.48

49
utilizando la tcnica No. 3 ...............................................................................................
10. Cromatograma de muestra de camarn del LCM UAG procesadas con
.50
la tcnica 4 .....................................................................................................................
ll. Cromatograma de muestra de camarn de Isla Navidad, Col., utilizando
51
la tcnica No. 4 ...............................................................................................................
12. Cromatograma del anlisis de agua marina de los estanques de cultivo de
..5 2
camarn en el LCM, Barra de Navidad, Jal. ..................................................................
13. Cromatograma del anlisis de sedimento marino de la laguna Barra de Navidad, Jal . . 53
14. Cromatograma del anlisis de alimento comercial para camarn adulto analizado
54
segn la tcnica 4 ...........................................................................................................
15. Cobre determinado en cabeza y msculo de camarn de diferentes
73
fuentes y e n alimento para; camarn ..............................................................................
16. Cadmio determinado en cabeza y msculo de camarn de diferentes
74
fuentes y en alimento para camarn ..............................................................................
17. Nquel determinado en cabeza y msculo de camarn de diferentes
75
fuentes y en alimento para camarn ..............................................................................
18. Plomo determinado en cabeza y msculo de camarn de diferentes
76
fuentes y en alimento para camarn ..............................................................................
19. Cromo determinado en cabeza y msculo de camarn de diferentes
77
fuentes y en alimento para camarn ..............................................................................
20. Extraccin de plaguicidas en muestras de sedimento y alimento.
78
Mtodo EPA D5369-93 ..................................................................................................
21. Extraccin de plaguicidas organoclorados en muestras de agua.
79
Mtodo EPA 508 ......................... ...................................................................................
22. Concentracin de extractos de muestras de organismos, agua sedimento
80
y alimento ....... ..............................................................................................................

RESUMEN
Marmolejo-Rodrguez A. J. 1999. Determinacin de plaguicidas organoclorados en
camarn blanco adulto (.Penaeus vannamei) cultivado en laboratorio. Tesis para
obtener el grado de Maestra en Acuacultura. Facultad de Ciencias Marinas,
Universidad de Colima.
Los camarones reproductores utilizados en el LCM de la Universidad Autnoma
Guadalajara ubicado en la Laguna de Barra de Navidad, en algunas ocasiones
disminuan la produccin de larva, sospechndose la presencia de plaguicidas
como inhibidores. Se realizaron determinaciones de plaguicidas organoclorados
en agua, sedimento, alimento y camarones cultivados durante cinco meses. Una
vez cosechados fueron congelados, transportados a la UNAM, D.F. y analizados
en el ICML. Se probaron cuatro tcnicas de extraccin, de las cuales las ms
apropiadas resultaron la del equipo soxhlet y aquella con microondas. Se inyect
l L de cada muestra concentrada en un cromatgrafo de gases HP5890 con
columna capilar. Se cont con estndar de referencia certificado de camarn
liofilizado obtenido de la Internationa/ Atomic Energy Agency, Mnaco. LOS
cromatogramas no mostraron plaguicidas de los camarones analizados ni en
agua, sedimento y alimento. Se concluy que ese cu!tivo de camarn en 1995 se
encontr libre de plaguicidas organoclorados y organofosforados.

ABSTRACT
Marmolejo-Rodrguez A. J. 1999. Determination of organochloride pesticides in
white adult shrimp (fenaeus vannamei) cultured in laboratory. Thess for Master
Degree in Aquaculture. Faculty of Marine Sciences, Colima University, Mxico.
Adult reproducing shrimp utilized in the LCM laboratory of the Universidad
Autnoma Guadalajara in Barra de Navidad Lagoon, presented decrease of larvae
production, presuming the presence of pesticides as inhibitors. Pesticide
determinations were done in water, sediment, feed and shrimp that were cultured
during five months. Once they were harvested, they were frozen and transported to
the ICML of UNAM in Mexico City, where they were analysed. Four extracting
techniques were probed, those with soxhlet equipment and with microwaves were
t h e m o s t s u c c e s s f u l . I L o f extracted liquid w a s i n j e c t e d i n t o a g a s
chromatographer
HP5890 equipped with a capilary column. A certificated
reference of liophilized shrimp (IAEA-Monaco) was used to standardize the
equipment. The obtained chromatogramms of the analyzed shrimp showed no
pesticides, nor did the water, sediment and feed samples. It was concluded, that
the shrimp culture in 1995 was free of organochloride and organofosfate
pesticides.

AGRADECIMIENTOS

El presente trabajo representa la culminacin del esfuerzo conjunto de muchas


personas y varas instituciones sin las cuales no hubiera sido posible realizarse y
con las que estar infinitamente agradecida. Las condiciones bajo las cuales
desarroll este trabajo no son parecidas a las de la mayora de los estudiantes de
este programa de maestra, sin embargo al concluir esta investigacin veo que s
bien estuve llena de retos desde el principio,

me sirv an mas para valorar la

delicada tarea que implica la investigacin cientfica y el cumplimiento con altos


estndares acadmicos. El haber participado con el Dr. Felipe Vzquez Gutirrez mi
asesor de tesis externo en la puesta en marcha de las tcnicas analticas en el
departamento de Cromatografa de Gases del Laboratorio de Fisicoqumica Marina
del Instituto de Ciencias del Mar y Limnologa de la UNAM dedicada principalmente
a investgaciones

de oceanologa y Iimnologa,donde

ciertamente hubo grandes

retos que fueron ms alla de una clsica nvestigacn de maestra, sta situacin
particular, aunque no apreciada en su verdadera dimensin por algunos, ayud
singularmente

mi

formacin

profesional.

Por

ello

quero

agradecer

al

Dr.

Alejandro Meyer Willerer por su invaluable ayuda, por darme la seguridad de poder
trabajar en Instituciones de excelencia acadmica y por prestar ayuda inmediata e
incondicional en esta tesis cuando as se lo solicit, y poder ver editada finalmente
esta tesis, al Dr. Felipe Vzquez Gutirrez por su persistente y persuasiva demanda
de un trabajo de alta calidad, su permanente disposicin a discutir ideas y resolver
problemas de todo tipo. Para ambos su apoyo y guianza durante esta investigacin
fueron escenciales para la consecucin de las metas originalmente establecidas.

La participacin

de mis sinodales,

M en C. Alberto Lau Cham, y M. en C. Carlos

Lezama Cervantes agradezco sus valiosos comentarios porque me alentaron a


concluir este estudio.

La investigacin de mi tsis se vi fuertemente favorecida por la valiosa ayuda


prestada, por la M. en C. Carmen Mrquez, del Instituto de Qumica quien me
ense Cromatografa de gases; del Dr. Gilberto Daz-Gonzlez, del ICMyL
darme buenos tips.

por

La Dra. Victoria Chagolla del Instituto de Fisiologa Celular, el MVZ Juan Orta del
Depto. de Nutricin de la Fac. De Veterinaria, La Dra. Vicenta Pea y el Tc.
Gerardo, del Instituto de Bomdcas, la Qum en A. Alejandra Guerrero Rodrguez,
todos ellos de la UNAM, agradezco su tiempo y su ayuda acadmica.

Tambin agradezco al Dr.

Virender Sharma, de Texas A&M Unversty su inters en

publicar, su constante apoyo y disponibilidad fue ciertamente una gran aportacin


a m formacn.

Deseo hacer un reconocimiento a la famila Navarro lver por todos sus nimos y
buena voluntad, asimismo a m Madre Gloria Rodrguez Rueda por todo su ejemplo
y respaldo moral.

Muy especialmente agradezco a mi esposo Vctor Ren Magallanes Ordez, por


sus comentarios y orientaciones relacionadas con mi trabajo de tesis as como por
su apoyo incondicional para seguir con mis metas profesionales y...

. ..eternamente agradecida con Jess por permitirme sentr su presencia en cada


microsegundo de m vida.

iv

. ..a Pablo Ren


y a Romn Vinicio o Ana Fabiola.

1. INTRODUCCIN
El uso extendido de contaminantes orgnicos como plaguicidas,
hidrocarburos, y bifenilos policlorados (PCBs),

ocasiona problemas de gran

complejidad, su persistencia es tal que ya se han encontrado en muchos


ecosistemas del planeta e incluso en sangre y secreciones de seres humanos,
por lo que es importante su estudio y seguimiento en todos los sistemas de vida
del planeta.

Se define como plaguicida a la sustancia o mezcla de ellas, destinada a


prevenir, destruir o controlar plagas incluyendo los vectores de enfermedad
humana o animal, las especies no deseadas de plantas o animales que ocasionan
dao duradero u otras que interfieren con la produccin, procesamiento,
almacenamiento, transporte y comercializacin de alimentos, artculos agrcolas
de consumo (como cereales en rama, azcar de remolacha y semillas de
algodn), madera y sus productos, forraje para animales o productos que puedan
administrrseles para el control de insectos, arcnidos u otras plagas corporales.
Este trmino incluye sustancias destinadas al crecimiento de plantas, defoliantes,
desecantes, agentes para ralear frutas o sustancias para evitar la cada prematura
del fruto y productos aplicados a los cultivos, ya sea antes de la cosecha o
despus de ella para prevenir su deterioro durante el almacenamiento o
transporte (FAO, 1990).

Descripciones parecidas han sido adoptadas por la Comisin del Codex


Alimentarius y por pases del Consejo Europeo en 1984. Se excluyen los
fertilizantes, los nutrimentos de plantas y animales, los aditivos alimentarios y las
drogas para animales (Henao, et al., 1991). Algunos plaguicidas pueden ser de
orgen biolgico, por ejemplo el Bacllus thuringiensis, empleado en campaas de
salud pblica para el control de los mosquitos que transmiten la malaria y el
Simulium

Sp. vector de la oncocercosis.

La mayora de los plaguicidas son de origen qumico sinttico y para su


venta comercial, combinan algn ingrediente activo que est elaborado para
combatir determinados tipos de plagas, con uno o varios ingredientes inertes que
diluyen el producto txico o constituyen su excipiente.

La agencia de Proteccin al Ambiente de Estados Unidos de Norteamrica


(EPA. 1991) por ejemplo, mantiene un registro de 1500 ingredientes activos, la
mayora de los cuales se caracterizan por ser compuestos orgnicos. LOS
formuladores mezclan estos compuestos con uno o varios de aproximadamente
900 excipientes para elaborar los aproximadamente 50,000 plaguicidas
comerciales registrados para su empleo en los Estados Unidos de Norteamrica.

En general, rara vez se tienen en cuenta las consecuencias del empleo de


sustancias excipientes, aunque por si solas constituyen una gran parte del
producto comercial, y a veces sus efectos nocivos superan a los de los propios
ingredientes activos. Por ejemplo el tetracloruro de carbono y el cloroformo que
son sustancias txicas para el hgado y el sistema nervioso central, pueden
utilizarse como ingredientes inertes sin ser mencionados en la etiqueta del
/
producto (Henao, 1991).

Los efectos adversos de los plaguicidas para la salud pueden deberse


tambin a impurezas, tales como las dioxinas en ciertos herbicidas de tipo
clorofenoxi, la etilentiourea en los fungicidas a base de bisditiocarbamatos o el
isomalatin en el malatin. Entre los efectos provocados por estos productos
tenemos la neurotoxicidad, neuropatas, dermatitis, cncer, teratognesis, etc.
(Henao, 1991)

El conocer las ventajas y desventajas de utilizar plaguicidas, permite


determinar la conveniencia de utilizar productos menos persistentes, pero ms
txicos, o buscar alternativas biolgicas (biocontroles), que son menos peligrosas
para los seres vivos, pero desafortunadamente en la actualidad son menos
eficientes.

Esto tiene relevancia debido a las tasas de mortalidad que se

presentan en pases de Amrica Latina, con especial inters en nuestro pas


(CPEHS, 1986).

Los casos de intoxicacin con plaguicidas se producen por utilizar


productos altamente txicos como los carbamatos, o demasiado persistentes
como los organoclorados. En muchos de los casos se manejan mezclas de
plaguicidas al libre arbitrio, sin que sean supervisadas por personal especializado,
reutilizndose los envases, y aplicndose los productos sin ninguna proteccin.
Es comn encotrar residuos de compuestos organoclorados y organofosforados
en aguas de los pozos y en ros. En las zonas agrcolas, los suelos pueden
contener residuos de plaguicidas utilizados en los cultivos. La persistencia de
estas sustancias fluctan de unos meses a varios aos (Albert, 1988).

Por otra parte, el problema de la reutilizacin en envases provoca


numerosas intoxicaciones tanto en seres humanos como en diversas especies. El
problema radica principalmente en que un residuo de plaguicida es catalogado
como peligroso (SEDESOL, 1994), por lo tanto se le debe dar un manejo especial
(lo cual no siempre sucede). En Mxico la nica empresa autorizada para el
confinamiento (forma de disposicin final de residuos peligrosos) de este tipo de
residuos, es la empresa Residuos Industriales Multiquim que solo acepta
recipientes o contenedores de algunos plaguicidas como volatn, cupravit,
manzate, hinosan, racumin y hemacur (PROFEPA,1994).

Los plaguicidas organoclorados se encuentran distribudos en el medio


ambiente y en cantidades considerables son introducidos al medio acutico
intencionalmente para controlar larvas de insectos indeseables o bien entran por
lixiviacin a los sistemas de riego. Tambin pueden provenir de las descargas
domsticas o industriales de las grandes ciudades.

El problema de la presencia de plaguicidas tambin se presenta en lugares


tursticos donde existen playas cercanas a una vegetacin exhuberante, y que al
proliferar plagas, se ponen en prctica programas de fumigacin para no tener un
impacto negativo sobre la afluencia turstica.

Las tierras que son tiles para la agricultura se ven expuestas a ser
atacadas por plagas de insectos; por practicar el monocultivo (por no cultivarlas en
forma rotativa) con la presencia de alguna plaga, se utilizan estos biocidas para
proteger las siembras, pero al esparcir hidrocarburos organoclorados tales como
aldrn, lindano, dieldrin, DDT, DDD y DDE,

se afectan tambin las aves

insectvoras y hasta el ser humano a travs de los productos extrados del campo.

La determinacin de plaguicidas organoclorados en acuacultivos es


necesaria, debido a que stos tienen una gran persistencia en el agua y en los
seres que la habitan. Son bioacumulables en peces, crustceos y moluscos entre
otros, volvindose txicos, segn la cantidad que tiende a incrementarse (Galindo
Reyes, 1996, Daz- Gonzlez, 1992). Esto es de considerarse, ya que el consumo
de estos organismos con gran potencial alimenticio y de popularidad general a
nivel mundial, estando contaminados con alguno de estos pesticidas, provocaran
entre otros efectos carcinognicos en el ser humano.

Se encuentran los plaguicidas sobre todo en acuacultivos, que de alguna


manera se ven afectados por actividades agrcolas. Estos campos agrcolas al
ser sometidos al uso de insecticidas, herbicidas y fungicidas para su buen
desarrollo,

permiten el ingreso

de los plaguicidas organoclorados y

organofosforados al agua de riego.


Tambin con las precipitaciones pluviales se integran stos a lagos, ros o
esteros, de donde se toma el agua para los acuacultivos y son asimilados y
acumulados por los peces, crustceos o moluscos.

2. ANTECEDENTES
2.1. Generales

Histricamente las primeras medidas para mitigar plagas fueron a base de


sales vegetales e inorgnicas. Desde el ao 1000 a.C., se conocen formas de
mejorar la produccin de alimentos, y el cuidado de las cosechas de insectos
nocivos. A continuacin se describe el uso de plaguicidas a travs del tiempo
segn William (1967) y Hernndez, (1982) en: Garca-Almanza, (1996).

Entre 1915-1920, se desarrollaron y se usaron varios insecticidas


arsenicales como resultado de la la.Guerra Mundial. En 1929, se utilizaron
compuestos del flor como insecticidas de ingestin en sustitucin de l o s
arsenicales no dejando residuos venenosos en las cosechas. El azufre, arsnico y
plomo se utiliz para eliminar gorgojos de plantas, y en 1929 se emple la nicotina
para destruir piojos de plantas sin causar dao al follaje. En 1948 el empleo de la
rotenona en los Estados Unidos de Norteamrica en sustitucin de las sales de
arsnico y plomo. En 1959 se emple mundialmente el polvo de Piretro como
veneno para piojos y pulgas.

Dentro de los txicos orgnicos de amplio espectro, comienza en 1932 la


era moderna de los insecticidas orgnicos usando el ter tiocano dietlico.

En 1939 se descubren las propiedades del DDT y entre 1940 y 1948


comienza el desarrollo y empleo de una gran variedad de insecticidas
organoclorados como BHC, Toxafeno, dieldrin, endrin, heptacloro, aldrn, lindano
y clordano.

En 1944 se abre la industria de los plaguicidas organofosforados, al


comercializar Bayer el paratin etlico. En 1949 sintetizan el primer piretroide
sinttico Cinexin Y. En el periodo comprendido entre 1952-1965 se desarrolla el
uso de otros organofosforados como Usatin, Folimat, Asunto, Malatin, Naleo,
Dipterex, etc. En 1953 se comercializa el carbaryl como primer carbamato.

Desde 1956 se utilizan tambin hormonas y otros productos biolgicos de


espectro restringido junto con el control biolgico, mediante hormonas juveniles y
anlogos sintticos para controlar poblaciones de insectos.

En 1959 se

identificaron las feromonas y en 1973 se sintetiza el Altosid juvenoide cientfico


siendo el primer agente morfogentico aprobado por la EPA. En 1976-1982
nuevos agentes qumicos de este tipo son utilizados, como feromonas y
juvenoides.

En el primer mundo para utilizar un plaguicida, se requiere de muchas


horas y dinero en investigacin previa. El costo puede variar desde el
descubrimiento hasta la comercializacin, lo cual lleva un tiempo promedio de 8
aos y en 1987 se estim un costo promedio de 50 millones de dlares.

La introduccin de plaguicidas en la actualidad es ms dificil por la cantidad


de requisitos que se deben de cubrir y de justificar para ser utilizados. La
composicin qumica tiene bsicamente un ingrediente activo el cual puede ser un
compuesto inorgnico, como los derivados de cobre, azufre, zinc y alumnio,
compuesto orgnico donde la mayora proviene de origen sinttico, como los
plaguicidas, aunque tambin son considerados los de origen botnico como lo son
los extrados de plantas.

Los plaguicidas biolgicos pueden ser virus,

microorganismos o derivados de su metabolismo, formulados como insumos, para


una plaga en particular.

8
Para aplicar un plaguicida es importante conocer su persistencia, SU
movilidad, los usos, el ingrediente activo, entre otras caractersticas.

La persistencia es la duracin sin cambio molecular que experimenta el


plaguicida desde que entra al ambiente. Es importante notar que existen algunos
plaguicidas ligeramente persistentes que duran menos de 4 semanas como lo
son el malatin, metil paratin dentro de los organofosforados; Poco persistentes
de cuatro a 26 semanas como lo son

el paratin, Timet; medianamente

persistentes de 27 a 52 semanas, y altamente persistentes con ms de un ao


y menos de veinte (organoclorados) y mas de veinte aos como puede ser casos
especficos de aplicaciones del DDT. (CICOPLAFEST, SARH, SSA, SEDESOL,
SECOFI, 1994).

Su movilidad puede deberse a su dosificacin area, la lixiviacin de los


suelos cuando hay lluvias, y el arrastre por el viento en el caso de follajes.
Tambin pueden presentar fotodescomposicin, la cual se debe principalmente a
la radiacin solar. La descomposicin qumica puede ser por medio de reacciones
como oxidacin, reduccin, e hidrlisis, y pueden darse en el agua, en el suelo y
en el aire.

Mediante estas reacciones se pueden descomponer algunos

plaguicidas y activar otros, dando lugar a la formacin de compuestos inactivos o


de otros potencialmente ms peligrosos para la vida. Tambin puede haber
adsorcin por coloides en el suelo, siendo los suelos arcillosos los ms
susceptibles. (Garca-Almanza, 1996).

La actividad microbiolgica es el principal medio para su degradacin en el


suelo, y se ve afectada por la temperatura, humedad, pH, contenido de materia
orgnica y presencia de nutrimentos. Un suelo con buen contenido de nutrimentos
favorece el desarrollo de microorganismos y los plaguicidas orgnicos se
descomponen con mayor rapidz.

El uso de los insecticidas puede variar desde agrcola, forestal, urbano


(areas domsticas, medios de transporte, lugares tursticos), jardinera (jardines y
plantas de ornato), salud pblica, pecuarios (incluso para animales domsticos)
industriales (procesamiento de productos y subproductos y para el cuidado de
reas industriales). (Daz-Gonzlez, 1992)

El ingrediente activo principal que los forma los clasifica en


organoclorados,

organofosforados, carbamatos,

de cobre, de azufre etc. La

formulacin puede ser slida, lquida y gaseosa.

Los plaguicidas organoclorados comprenden una pequea parte de


sustancias orgnicas sintticas, que se han utilizado en Estados Unidos desde
hace medio siglo para usos agrcolas y forestales. Estas a su vez afectan a los
organismos acuticos, tanto en ros y lagos y finalmente los que se encuentran en
zonas costeras (Mearns et a/.,1988).

En pases desarrollados se han tomado serias medidas para reducir el


efecto futuro ocasionado por la accin de los plaguicidas como es el caso de la
cancelacin del uso del DDT y el arochlor. Tambin se han propuesto
descontinuar, es decir, utilizar el dieldrin hasta agotar existencias. La fbrica
productora del clordano puede decidir en cualquier momento eliminar este
producto del mercado, ya que se han revelado estudios de su toxicidad y
persistencia en el medio (FAO/UNEP,1991).

La estructura de la industria de los plaguicidas en Mxico est conformada


por empresas que efectan dos procesos productivos bien definidos, como las

10
que fabrican los ingredientes activos (grado tcnico), que para su procesamiento
requiere de materias primas bsicas y productos intermedios que pueden ser
derivados de la industria petroqumica, metalrgica, y de fermentacin. Son
ingredientes de alta concentracin y toxicidad, por lo que su manejo inadecuado
es muy riesgoso. (Albert, 1990)

Tambin hay empresas formuladoras que se dedican a mezclar los


ingredientes activos con otros materiales (inertes, disolventes y emulsificantes)
para elaborar los productos terminados a diferentes concentraciones. Estos son
los que se aplican en la agricultura. (Albert, 1988)

En 1959 se comienzan a fabricar los agroqumicos en nuestro pas (DDT,


BHC), los fungicidas a base de tiocarbamatos y algunos otros productos
inorgnicos. Desde entonces la industria se vio favorecida y creci gracias al
cultivo del algodn altamente tecnificado el cual requera grandes cantidades de
plaguicidas, (Toxafeno) pero tambin por la presencia de buenas condiciones
para instalar nuevas plantas qumicas y la construccin de grandes obras de
irrigacin que estimulaban el uso masivo de diversos insumos agrcolas. A pesar
del crecimiento de la industria el continuo aumento en la demanda de
agroqumicos provoc que durante los aos sesenta se importaran 165 diferentes
productos (Restrepo, 1988). Para cubrir este dficit, el Gobierno Federal inici en
1968 un programa de fabricacin de

DDT, BHC y Toxafeno, a travs de

Guanomex (hoy Fertilizantes Mexicanos FERTIMEX). Actualmente 35 empresas


conforman la industria de plaguicidas. Entre ellas destacan 11 que son solamente
importadoras mientras que 24 empresas producen los ingredientes activos, estas
ltimas disponen de una capacidad de 62,000 toneladas por ao. (GarcaAlmanza, 1996)

ll

Los plaguicidas importados provienen en su mayor parte de los Estados


Unidos, alrededor de 12,000 toneladas promedio anual, y poco ms de un 10% de
Alemania, aunque tambin se importan de Suiza, Italia, Dinamarca, Israel, Japn,
Francia y el Reino Unido, en orden de importancia. ( Tycooly-lnternational 1982).

El mercado de los plaguicidas en el pas ha ido en constante aumento; en


1960 se vendieron 14,000 toneladas y 34,000 toneladas seis aos despus. La
Asociacin Mexicana de Estudios para la Defensa del Consumidor, calcul que en
1986 se vendieron en Mxico alrededor de 60 mil toneladas. Dentro de IOS
volmenes vendidos los insecticidas ocuparon en promedio 51%, los herbicidas
31%, los fungicidas 15% y el 3% restante, otros (Restrepo, 1988).

Con frecuencia la prensa y las publicaciones especializadas recogen


denuncias sobre intoxicacin de personas y daos al medio en todo el pas. En el
agro las cosas son mas difciles, se ha llamado la atencin sobre el uso anrquico
y elevado de plaguicidas y se enfatiza la falta de proteccin a los trabajadores del
campo. ( Rosales-Hoz, 1979).

Desde el punto de vista sanitario, muchas de las enfermedades humanas


en los trpicos pueden ser transmitidas por huspedes intermedios como lo son
malaria, enfermedad de Chagas, dengue, oncocercosis, filariasis, tripanosomiasis,
esquitosomiasis,

leishmaniasis, p e s t e ,

fiebre amarilla y tifo, aunque la

contaminacin por residuos de plaguicidas organoclorados puede tener efectos


adversos a largo plazo para la salud humana. Estos efectos se irn descubriendo
en personas expuestas a estos productos durante lapsos prolongados y en
cantidades considerables. Existen estudios donde se relacionan la salud humana
con el incremento de estos productos en la naturaleza o con el uso de estos
pesticidas en la casa o jardn, ya que se introduce por medio de la respiracin o
de la alimentacin.

12

En los mamferos se acumula en tejidos con mayor cantidad de lpidos,


como es el caso de la leche materna, hgado y cerebro (Albert y Brcenas,

1988).

Un estudio reciente efectuado por el World Healfh Organizafion (WHO) sobre DDT
en la leche materna mostr mas akos niveles en pases en subdesarrollo, que en
pases europeos desarrollados. En estos ltimos se controla el uso del DDT desde
hace una dcada (Infernafional Mussel

Wafch Commifee, 1992). Aunque el uso

de este producto est prohibido o severamente restringido, en muchos pases se


mantiene su aprobacin para las campaas de salud pblica.

En la acuacultura hay monitoreos para evaluar la concentracin de


pesticidas organoclorados, como es el caso del proyecto Mussel Wafch Projecf ,
donde utilizan bivalvos como indicadores biolgicos, por su habilidad de
concentrar la mayora de los contaminantes y por sus hbitos sedentarios
(Infernfafional Musselwafch Commifee, 1992). Otros estudios utilizan el msculo
de Plafichfhys flesus para monitorear la contaminacin por plaguicidas en reas
costeras (Cossa et al., 1992).

En Mxico se han realizado muy pocos estudios de plaguicidas en cultivos


de camarn. En la Baha Santa Mara y en el estero de Teacpan, en el Estado de
Sinaloa, se encontraron plaguicidas en agua, sedimento, en almejas y en
camarones,

sobresaliendo la concentracin

de

lindano

con

un

nivel

potencialmente daino, al sobrepasar el lmite permisible por la Federal Water


Pollution Control Administration of the United States (FWPA) (Galindo Reyes et
al., 1996). En camarn y en el agua del estero de Uras Sinaloa, se encontraron
cantidades de plaguicidas potencialmente peligrosos, siendo una zona agrcola
con un buen potencial acucola. (Galindo Reyes, 1992).

Algunos niveles de concentracin corresponden a los causales de daos


fisiolgicos y bioqumicos de camarones, por lo que la contaminacin por

13

plaguicidas est relacionada con el lento crecimiento y diversas patoligas en


estos

organismos. El consumo humano de este alimento marino podra

representar un riesgo para la salud porque el factor de bioacumulacin de los


plaguicidas encontrados en la Bahia de Ohura Sinaloa tienen un rango de 3.6 a
675 ppb. Estos fueron encontrados en 6 de 20 estaciones donde se obtuvieron
camarones y los analitos presentes fueron Aldrin, Endrin, Methyl Paratin, DDT y
Lindano. (Galindo Reyes et al., 1999).

Para poder determinar los plaguicidas que estn en agua, sedimento y en


organismos o tejidos de organismos, se tiene que extraer y concentrar cada
muestra para poder detectar hasta cantidades en el orden de partes por billn
(ppb). Para esto sirve la cromatografa, que es una herramienta bastante til y que
permite medir estos compuestos con una excelente precisin. Con el detector de
Captura de Electrones

se pueden observar lmites mnimos de plaguicidas

organoclorados en bajas concentraciones (ppb). En el caso de los plaguicidas


organofosforados si no se tiene el detector de Nitrgeno-Fsforo, se puede usar el
detector de ionizacin de flama, el cual permite cuantificar en orden de partes por
milln (ppm) (Hewlett Packard, 1992).

2.2. NORMATIVIDAD
2.2.1. Internacional

El Principio de Informacin y Consentimiento Previo (PIC) se desarrolla a


partir del intercambio de informacin que se fomenta en el cdigo donde el
Artculo No. 9 establece, que cualquier pas que tome una decisin para prohibir o
restringir severamente un plaguicida con objeto de proteger la salud y el ambiente,

14

debe notificar a la FAO de inmediato para que proporcione a las autoridades


competentes la informacin referida. Se deber informar la identidad del producto
con el nombre qumico especfico del principio activo, un resumen de las acciones
adoptadas y sus fundamentos, y en caso de restricciones de uso, el nombre y
direccin del punto de contacto,si se requiere. Si un plaguicida ha sido objeto de
prohibicin o restriccin y el pas se encuentra inscrito en el PIC, ese plaguicida
no ser exportado a dicho pas.

Listado del Registro Internacional de Productos Qumicos Potencialmente


Txicos segn el Principio de Informacin y Consentimiento Previos (PIC)
(FAO/UNEP,1991).

Aldrn

Clordano

Clordimeform

Cihexatin

Dieldrn

Dinoseb

DDT

Dibromuro de etileno EDB Fluoracetamida

Hexacloruro de benceno Heptacloro

Mercurio Inorgnico.

@CH)
Mercurio Orgnico

Paraquat

Paratin Metlico

2,4,5, T

Paratin etlico

15

Candidatos al procedimiento de informacin y Consentimiento previo PIC.

Aldicarb

Bromuro de Metilo

Amitrol

Compuestos de Arsnico Captafol

Carbofurn

Clorobencilato

Cloropicrina

Demetn (Systox)

Diclorvox

Dicofol

Endosulfn

Estricnina

Fosfamidn

Fluoracetato de Sodio
I

Generadores de Fosfina

Metamidofos

Lindano
I

Metadomil

Metoxicloro

Mirex

Monocrotofos

Pentaclorofenol

Pirofosfato de tetraetilo
(TEPP).

Plaguicidas de los cuales se cree que su ingrediente activo ya no ser producido


distribuido o utilizado.

Compuestos de Plomo

Dibromocloropropano

Endrn

(DBCP)
Kelevan

Leptofos

Nitrofen

Shraden

Strobano

Sulfato de Talio

Telodrn

Toxafeno

La red Internacional de Accin sobre Plaguicidas (Pesticide Action Network


Internafional-PAN)

es una coalicin de grupos de ciudadanos en todo el mundo

para detener el mal uso de los plaguicidas y promover el control sustentable de

16

plagas. La campaa internacional de la Docena Sucia fue lanzada el 5 de Junio


de 1985 como la primera accin conjunta de PAN, (PAN Internafional,

1990).

Para esta campaa fueron seleccionados varios productos basndose en varios


criterios:
Riesgos comprobados para los seres humanos o el ambiente
Uso extensivo especialmente en los pases en vas de desarrollo existencia
de prohibiciones y
Restricciones en pases exportadores e importancia como ejemplos de
otros aspectos ms amplios de los problemas que ocasionan los plaguicidas en el
nivel internacional.

Esto es para garantizar que la seguridad de la salud humana y del


ambiente sean consideradas como prioridades en todas las decisiones polticas
sobre plaguicdas, acabar con el uso de plaguicidas si no se cuenta con las
medidas de seguridad adecuadas, eliminar las dobles normas en el comercio
global de plaguicdas y generar apoyo para la investigacin y utilizacin de
mtodos seguros y sustentables de control de plagas. Colectivamente, los
plaguicidas de la docena sucia causan intoxicaciones, muerte y destruccin
ambiental cada ao. Entre este grupo de plaguicidas se encuentran :

Aldicarb (Temik)

Canfeclor (Toxafeno)

Clordano

Heptacloro

Clordimeform

DBCP

DDT

Aldrn, Dieldrn y Endrn


1

HCH (BCH)

Lindano

Paratin

Metil-paratin

2,4,5,~

EDB
I

1Paraquat
Pentaclorofenol

17

2.2.2. Nacional.

La Ley General del Equilibrio Ecolgico y la Proteccin al Ambiente (SEDESOL,


1994),

establece:

Segn el artculo lo. Esta Ley es reglamentaria de las disposiciones de la


Constitucin Poltica de los Estados Unidos Mexicanos que se refieren a la
preservacin y restauracin del equilibrio ecolgico, as como a la proteccin al
ambiente, en el territorio nacional y las zonas sobre las que la nacin ejerce su
soberana y jurisdiccin. Sus disposiciones son de orden pblico e inters social y
en sus objetivos est establecer las bases para la prevencin y el control de la
contaminacin del aire, agua y suelo.

2.2.2.2. Caractersticas de los compuestos analizados:


A continuacin se listan algunas caractersticas de los analitos que fueron
buscados en las muestras (SEDESOL, 1994; CICOPLAFEST, 1994):

El DDT (CAS 50-29-3)


S u f r m u l a m o l e c u l a r e s C14H9Cl5.
clorofenil)l

S i n n i m o s p-pDDT, 2,2,bis(p-

,l ,l tricloroetano, Diclorodifeniltricloroetano.

ENT

1506,

Dicofano,

Clorofenotano Guesarol y Neocid.

El DDT y sus metabolitos son txicos y cancergenos con largo tiempo de


persistencia en suelos y agua. En los humanos la exposicin por DDT es por
ingestin de comida contaminada. En el aire y agua y de consumo, SU
concentracin es insignificante, y la cantidad es menor de 0.01 mglao. La

18

concentracin para la proteccin de animales marinos debe ser de O.OOlpg/L en


un promedio de 24 horas y nunca exceder 0.13 pg/L.

En el humano

preferentemente debe ser de cero. Puede penetrar por inhalacin, absorcin de la


piel, por ingestin y por contacto con piel y ojos. El DDT es moderadamente ms
txico en el hombre que en otros organismos, sin embargo su solubilidad en agua
es baja (0.0012ppm) y es mas alta en grasa (100,000 ppm). Es un producto que
puede dividirse de tal manera que el DDE (metabolito = tiene propiedades
similares. Ambos compuestos son altamente persistentes en los organismos
vivientes. Es un plaguicida restringido, de uso oficial, forma parte del registro del
PIC y de la docena sucia.

LD 50 oral, es de 250 mg/kg. Su ingestin diaria admisible (EPA) es de


0.021 mg/persona. Su lmite permisible para agua de abastecimiento O.O5mg/L.
Su lmite mximo permisible para cuerpos de agua (EPA) es de O.O02pg/L.

Los

sntomas incluyen parlisis de la lengua, labios y cara, confusin, convulsiones,


\
vmitos, irritacin de la piel y ojos atacando al Sistema Nervioso Central, hgado,
riones y piel.

DDD (CAS 72-54-8)


Sinnimo:

1,2, Dicloro-2,2-di(P-clorofenil)etano, T D E , Rotano. T i p o

insecticida organoclorado, metabolito del DDT. Su uso es agrcola, existe baja


toxicidad en mamferos, LD50 (oral, ratas) es de 5000mg/kg.

En cuanto a efectos a la salud altera el sistema nervioso central y se


considera txico para aves y peces ya que es fuertemente bioacumulable en su
tejido (Factores de bioconcentracin reportados en el rango de 933-6500 veces).
Es altamente persistente en suelo, sedimentos y agua ; su vida media reportada
es aproximadamente de 190 aos tambin es extremadamente txico en
invertebrados acuticos.

19

DDE (CAS 72-55-9)

Su nombre qumico es

1 ,l ,-diclore-2.2-bis(p-clorofenil)etileno. es un

Insecticida, tiene algunos ismeros como pp DDE: 1 ,l ,dicloro 2,2-bis (p-clorofenl),


etileno.

Es altamente persistente en suelo y sedimentos pero no en agua. Su vida


media es de 15 aos en suelos y ms de 1100 das en sedimentos como el DDT y
el DDE, es altamente bioacumulable con factor de concentracin en tejido de
peces y es altamete txico en una gran variedad de vertebrados e invertebrados
acuticos.

DIELDRIN (CAS 60-57-I)


Frmula moleklar Cl2 HI8 Cl 6 0. Su punto de fusin 175176C. Slido
cristalino, cancergeno y txico.
Sinnimos 1,2,3,4,10,10 hexacloro-6, 7- Epoxy 1,4,4a,5,6,7,8,8a-Octahidro1,4endo-exo-5,8-dimetanonaftaleno,

Octalox, Heod, ENT-16225.

Es

un

compuesto que junto con el aldrn pertenecen al grupo de los insecticidas


hidrocarbonados.

ES persistente en el medio ambiente con vida media reportada entre 175


das y 3 aos) y tiene una volatilidad extremadamente baja (a presin de vapor de
0.000000178 mm de mercurio a 20 C y una baja solubilidad en agua (186pgIL a
25-19C). El dieldrn es extremadamente no polar, resultando tener una elevada
afinidad por las grasas, lo cual explica la razn de su retencin en la grasa de los

20

animales, en la cera de las plantas y otras sustancias orgnicas en el medio


ambiente por eso se puede decir que es bioacumulable en la cadena alimenticia.
En animales marinos la concentracin no debe exceder de 0.71ug/L y en los
humanos es de cero. Su determinacin en agua puede ser por extracciones con
cloruro de metileno seguido por cromatografa de gases. Sus rutas de entrada son
por inhalacin, absorcin en la piel, contacto con piel y ojos, ingestin. LOS
sntomas que pueden causar son vmitos, nuseas, convulsiones, coma entre
otros. Ataca al Sistema nervioso central, hgado riones y piel.

ALDRIN (CAS 309-00-Z)


Slido cristalino, Cl2 HI 8 Cl6. Punto de fusin 104C. Sinnimos HHDN.
1,2,3,4,10,10-hexacloro,

1,4,4a,5,8,8a-hexahidro-1,4,-endo-exo-5,8,-

dimetano-

naftaleno.

Es carcingeno y su exposicin puede ser por aire, agua y alimentos


debido a su persistencia en el medio ambiente. Su concentracin en aguas no
debe excederse de 3.0 ug/L para aguas marinas el lmite es de 1.3 ug/L. Las rutas
de exposicin son por inhalacin, absorcin de la piel, ingestin, irritacin de IOS
ojos y contacto por piel. Ataca principfiente al Sistema nervioso central, riones,
hgado y piel. El aldrin es muy estable trmicamente y su descomposicin no se
aprecia a 250 C, puede ser degradado por actividad con metales como el sodio
en alcohol.

Este analito es entre moderadamente a altamente persistente en suelos


donde rpidamente se convierte en dieldrin. Su vida media se ha estimado entre
20 das a 1 ao.

21

CLORDANO (CAS 57-74-9)


Sustancia lquida, flamable, cancergena, muy peligrosa y contaminante
txico. Su frmula molecular es Cl0 H6 Cl8
Sinnimos

1,2,4,5,6,7,8,8-octacloro-2,3,3a,4,7,a-hexahidro-4,7-metano-l

H-

indeno, o tambin como octacloro.

Es el modelo general de insecticidas del grupo de hidrocarburos policclicos


clorados, llamados insecticidas ciclodienos. Es un insecticida de casas y jardines
que afecta principalmente a nios como resultado del consumo de leche materna.

En agua subterrnea donde hay biodegradacin, la vida media ha sido


reportada arriba de 7.6 aos y en suelo puede ser de ms de 20 aos.

La concentracin mxima para la proteccin de la vida marina es de


O.O04yg/L

en un promedio de 24 horas y no debe exceder de 0.09 pg/L. Para

proteger la salud humana la concentracin debe ser de cero. Las rutas de entrada
en el cuerpo humano son por in&acin, absorcin en la piel, ingestin y contacto
con la piel y ojos. Entre los efectos que puede producir estn la visin borrosa,
confusin, ataxia, delirio, dolor abdominal, nuseas, vmitos, diarrea, irritabilidad,
convulsiones, anurias, etc.

LINDAN0

Sinnimo: 1,2,3,4,5,6-hexaclorociclohexano

(ismero gama), es de uso agrcola,

slido, su solubilidad es de 10 ppm en agua, es un plaguicida restringido en


Mxico, forma parte de la docena sucia y es candidato al registro del PIC
(Principio de Informacin y Consentimiento Previo). La ingestin diaria admisible

22

segn la EPA es de O.O035mg/persona,

el lmite para agua de abastecimiento

tambin de acuerdo con la EPA es de O.O05mg/L.

Siendo el lmite mximo

permisible para cuerpos de agua (EPA) de 0.020 pg/L. El lmite permisible para
agua potable segn la NOM-127 es de 2pg/L.Afecta al sistema nervioso, es txico
para los peces. En cuanto al tratamiento/disposicin: Tratamiento en suelos
(aerobio-anaerobio) encapsulacin y relleno sanitario, e incineracin a altas
temperaturas. Su L.D. 50 (oral) es de 88 mg/kg.

MALATION
SU

nombre qumico es 5-(1,2-bis(Etioxicarbonilo)etil) O,O-dimetilfosforoditionato.

El uso principal es agrcola, pecuario en jardinera y urbano, es un


insecticida organofosforado de contacto, y es poco persistente.

Su vida media es en suelo de 168-72 horas, en aire de 9.8-1.0 horas, en


agua superficial de 1236-100 horas, en agua subterrnea de 2,472-200 horas. Se
biodegrada en cuanto a sus propiedades fsicas es lquido, de color amarillo
caf obscuro, es ligeramente soluble en agua.

Su toxicologa LD50 (oral, ratas) es de lOOmg/kg.


admisible segun la CICOPLAFEST, (1994) es de 0.02 mg/kg.

Su ingesta diaria
El criterio de la

calidad del agua de abastecimiento es de O.lpg/L. Su lmite mximo permisible


para cuerpos de agua (EPA) es de 0.008 pg/L.

En cuanto a efectos a la salud es moderadamente peligroso, irritante


drmico y de mucosas y del tracto digestivo, es inhibidor de la colinesterasa, daa

al sistema nervioso central, produce cianosis, y dao al miocardio. Es altamente


txico para peces y abejas. Su tratamiento y disposicin es en suelos (anaerobio),
relleno sanitario (solo en pequeas cantidades) y disposicin despus de
incinerarlo a altas temperaturas.

Nombre qumico: 1 ,l ,Dimetil-4.4-bipiridium bis (metil sulfato)


Sinnimos: Gramoxones, Dextronax, Esgram, Weedol, metilviologen. SU
USO

es agrcola el tipo es herbicida orgnico y desecante del grupo de IOS

bipiridilos de contacto y postemergente. Es poco persistente, slido de color


amarillo, inodoro, es muy soluble en agua, muy ligeramente soluble en alcohol e
insoluble en hidrocarburos. Su toxicologia LD50 (oral, ratas) es de 150mg/kg,
ingesta diaria admisible segn CICOPLAFEST, (1994) es de 0.004mgIkg. Provoca
muerte por ingestin si se ingiere una solucin de 114ml al 20%. Es un plaguicida
restringido en Mxico, restringido por la ONU, forma parte del PIC y de la docena
sucia. En cuanto a efectos a la salud es moderadamente peligroso, si se ingiere
produce fibrosis pulmonar, es irritante ocular y drmico, provoca dao al
miocardio, tambin produce alteraciones respiratorias severas asi como edema
pulmonar. Es txico para peces y aves, en suelos aerobio, anaerobio (mezclar
con detergente casero y enterrar en suelo de arcilla) como tratamiento para los
suelos.

24

2.3 JUSTIFICACIN:

El propsito de realizar un estudio sobre plaguicidas es debido a que en las


ltimas dcadas se ha detectado la presencia de estos compuestos qumicos en
casi cualquier parte de nuestro ambiente, lo cual

trae consecuencias muy

peligrosas para el ser humano.

Entre los agentes qumicos ambientales que pueden afectar el material


gentico y causar malformaciones congnitas y mutaciones, se encuentran los
plaguicidas, siendo la anencefalia una de las afecciones relacionadas con estos
productos, ATSDR, 1995. En nuestro pas, se han presentado nios recin
nacidos con problemas de anencefalia, relacionado con la contaminacin por
plaguicidas (SSA, 1994).

Existen contados estudios en Mxico sobre la determinacin de plaguicidas


en cultivos de camarn. Se desconoce si existen trabajos con reproductores de
Penaeus vannamei o Lifopenaeus vannamei como propuesto por Prez Farfante
y Kensley (1997). No se ha determinado el efecto que ocasionan stos en
distintos eslabones de la cadena trfica costera, por lo que es importante SU
seguimiento para poder controlar su uso.

Adems son contados los trabajos publicados donde se pueda conocer la


contaminacin por plaguicidas a nivel nacional. En la zona comprendida entre los
Estados de Jalisco, Colima y Michoacn no se encontraron reportes de estudios
de mediciones de plaguicidas a nivel de la costa ni de crustceos extrados del
mar.

25

L OS principales contaminantes de los alimentos en Mxico son IOS


plaguicidas organoclorados y sus productos de biotransformacin, en segundo
lugar estn los residuos de plaguicidas organofosforados (Albert, 1990).

La presencia o ausencia de cantidades detectables

de plaguicidas

organoclorados en camarn se podr afirmar con el presente trabajo y en caso de


enoctrarse estos analitos, cuantificar en forma confiable, ya que los agricultores
del valle de Cihuatln utilizan plaguicidas biodegradables para sus plantaciones
de coco, limn y pltano.

La presencia de plaguicidas puede deberse a la contaminacin del agua


con la que fueron regados tales cultivos y arrastrados al Ro Marabasco llegando
a la Laguna de Barra de Navidad, que forma el lmite entre los Estados de Clima
y Jalisco. Tambin se podr deber a los ingredientes del alimento suministrado
durante su cultivo. Otra causa puede ser la inclusin de estos plaguicidas en el
sedimento que los adsorbe del agua a travs del tiempo.

Dada la necesidad de vender productos con un alto valor comercial, se


justifica encontrar camarones libres de plaguicidas de plaguicidas que cumplan
con los requerimientos internacionales y que se puedan por lo tanto exportar. Esto
justifica el presente estudio en donde se aplican tcnicas de Qumica Analtica
ambiental . Tambin es necesario efectuar los anlisis correspondientes del agua
y del sedimento de la zona, ya que se podrn efectuar estudios de construccin
de granjas camaroncolas en un futuro cercano y con mayor seguridad de contar
con fuente de agua y sedimento que cumplen con las normas nacionales e
internacionales.

26

3. OBJETIVO GENERAL
Determinar cuantitativamente la presencia de plaguicidas organoclorados
en camarones blancos adultos Litopenaeus vannamei
vannamel)

(Boone) (Mopenaeus

cultivados y madurados en laboratorio bajo condiciones controladas.

3.1. OBJETIVOS ESPECFICOS:

3.1.1. Determinar la concentracin de plaguicidas como aldrn, lindano, dieldrn,


DDT, DDE y DDD en el msculo y en la cabeza del camarn blanco del Pacfico,
mantenido en cautiverio bajo condiciones ptimas de cultivo durante por cuatro
meses en agua tratada por dos diferentes sistemas de filtracin y preparacin.

3.1.2. Evaluar la concentracin de plaguicidas en el agua que se utiliza para el


cultivo de esos camarones.

3.1.3. Detectar la concentracin de plaguicidas en el sedimento de la Laguna de


Barra de Navidad, Jal., de donde se obtiene el agua para el cultivo de IOS
camarones.

3.1.4. Encontrar la concentracin de plaguicidas en el alimento suministrado a los


camarones durante su cultivo.

3.15 Investigar posibles fuentes de plaguicidas que se lleguen a detectar en los


organismos cultivados con agua de la Laguna de Barra de Navidad.

27

4. MATERIALES Y METODOS
4.1 Localizacin del rea de estudio :

El cultivo de camarn y su respectiva reproduccin en cautiverio, se


desarrollaron en el Laboratorio de Ciencias Marinas de la Facultad de Ciencias
Naturales y Agropecuarias de la Universidad Autnoma de Guadalajara (U.A.G.),
con sede en Barra de Navidad, que se localiza al sur deL Estado de Jalisco. Esta
es una zona donde desemboca temporalmente el Ro Marabasco que atraviesa la
zona agrcola montaosa y el valle frtil de Cihuatln entre los Estados de Colima
y Jalisco. El agua proveniente de la Laguna de Barra de Navidad, fue introducida
por medio de una bomba de 3 caballos de fuerza a travs de una red hidrulica,
fue previamente tratada con Na2EDTA

(1 Ippm) a fin de disminuir el grado de

toxicidad de metales pesados como lo recomienda Castille et al.,(l981). Y segn


anlisis realizados presenta condiciones ptimas de salinidad, oxgeno disuelto y
nutrientes para su cultivo (Lin Cabello, 1995).

4.2. Procedencia de camarones :

En este estudio se realizaron mediciones en organismos cultivados, en


agua,

en sedimento y en alimento nico suministrado. Los organismos

reproductores fueron transportados de un centro de acopio en el Puerto de San


Blas Nayarit, hasta las instalaciones del Laboratorio de Ciencias Marinas, en
Barra de Navidad, Jal., Facultad de Ciencias Naturales y Agropecuarias de la
Universidad Autnoma de Guadalajara.

28

4.3. Tratamiento de camarones vivos dentro del Laboratorio.

Los organismos fueron aclimatados y observados durante 20 das en unas


instalaciones en Isla Navidad, Colima, fuera del Laboratorio de Ciencias Marinas
(U.A.G.),

Al final de este periodo los camarones se trasladaron

a las

instalaciones del Laboratorio, en donde fueron separados por tanques en el lapso


de la cuarentena y posterior a ella, los camarones obtuvieron dieta comercial
dividida en tres raciones diarias.

LOS camarones se mantuvieron en las instalaciones del Laboratorio con el


fin de iniciar desoves con cuatro diferentes tratamientos alimenticios. Se
seleccion un tratamiento con alimento comercial, para que se pudieran
comparar con aquellos camarones que se quedaron en Isla Navidad con el mismo
alimento comercial. Los camarones que se mantuvieron en Isla Navidad se
utilizaran para reponer los que se murieran antes del inicio del experimento en el
Laboratorio. Esta corrida dur cuatro meses al igual que

los camarones

guardados en Isla Navidad.

La diferencia entre los dos tratamientos consisti nicamente en el


tratamiento que se le dio al agua. En Isla Navidad el agua es bombeada
directamente de la Laguna de Barra de Navidad a un sistema de almacenamiento
en tinacos previa filtracin por filtro de arena. En el Laboratorio de Ciencias
Marinas el agua se extrae de un pozo de 4 metros de profundidad y a 10 metros
de la playa, pero dentro de la Laguna. Posteriormente el agua es filtrada por
arena, por cartucho de 10 y 1 vrn de poro y una adicin de ll ppm de Na
gETA, tratada por Luz Ultravioleta y finalmente almacenada en depsito obscuro.

29

4.4. Obtencin de camarones, agua, sedim,ento y transporte.

Para el anlisis de plaguicidas se obtuvieron del Laobratorio 5 kg de


camarones (estos fueron comprados a la U.A.G.) se colectaron vivos de dos
cultivos en estanques bajo condiciones controladas. Uno se efectu en Isla
Navidad, Col. Con filtracin sencilla por arena y sin otro tratamiento previo, y el
otro se efectu en el Laboratorio de Ciencias Marinas (U.A.G.) ubicado en Barra
de Navidad, Jal.

Una vez congelados los dos lotes de camarn a -15C, congelados junto
con el agua colectada en el Lab. Ciencias Marinas y de Isla Navidad as como el
sedimento de la Laguna de Barra de Navidad fueron transportados va area a la
Ciudad de Mxico, hasta su procesamiento.

4.5. Manejo y anlisis de muestras :

Es de gran importancia enfatizar las medidas de higiene previas al


anlisis, esto es porque cualquier contaminacin presente puede alterar el
.
contenido del cromatograma.

Los reactivos debern ser grado plaguicida (G.P.), y verificarse mediante un


blanco. El reactivo cuando ya tiene mucho tiempo y fue destapado, puede generar
impurezas que al inyectar directamente casi no se observan o se ven unos picos
muy pequeos, pero despus del proceso estos picos se concentran en un 1 :120200% y estos picos que se vean pequeos, crecen considerablemente al grado
de que pueden interferir en el cromatograma cuando se pretende analizar la
muestra.

30

Por este motivo existe un sistema de limpieza, el cual consiste en lavar el


material de vidrio (ya que para nada se utilizan materiales de origen plstico) con
jabn Extran diludo al 5% y se enjuaga con abundante agua, luego con mezcla
crmica dejando de 15min a 2 hrs el material.

Posteriormente enjuagar, dejar

escurrir hasta sequedad y luego enjuagar con diclorometano grado plaguicida, (0


para residuos orgnicos), y de preferencia colocarlo en un horno a 5OOC,
(Recordar que a mas de 700C se puede fundir el vidrio) poner una capa de
papel aluminio enjuagado en la superficie de la boca del frasco y se cierra. Esto
mismo es para matraces erlenmeyer, pipetas, frascos colectores de muestra,
viales, etc. los matraces volumtricos no se someten al calentamiento del horno o
mufla. Pero este y todo el material se debe enjuagar generosamente con el mismo
solvente inmediatamente despus de usarse.

Las jeringas (marca Hewlett Packard y Hamilton) de 10l~L de inyeccin


para el cromatgrafo se lavaron con solvente (acetona-metano1

1 :l) en un bao

ultrasnico. Las jeringas se encuentran calibradas con sus respectivos mbolos


por lo que no deben de intercambiarse. Tambin al cabo de un mes de uso, es
conveniente lavarlas con cido actico al 40% pasndose una corriente de ste
por la jeringa y posteriormente enjuagarse con agua grado plaguicda,
succionando con un matraz kifasatto ayudado con vaco y sus respectivas
trampas de humedad. Esto se debe realizar cada 20 inyecciones, y despus de
cada inyeccin se deber enjuagar 30 veces con acetona grado plaguicida.

31

Las cuatro tcnicas en relacin a la extraccin en tejido de camarn, son :

0 Realizada Eon el apoyo del Laboratorio de Nutricin de la Facultad de


Veterinaria UNAM.
Q Aprendida en el Laboratorio del Instituto de Fisiologa Celular UNAM.
Q La que se mont con el equipo soxhlet en el laboratorio de Fisicoqumica
Marina UNAM de acuerdo a las tcnicas del ASTM, 1993., EPA, 1992,
GERGJ 992.
0 La que se realiz con el equipo de extraccin de compuestos orgnicos
por tecnologa de microondas.

4.51. Laboratorio de Nutricin de la Facultad de Veterinaria - UNAM

Se le inyect estndar interno a un camarn testigo y a otro no,


posteriormente se licu con ter de petrleo, se filtr con fibra de vidrio preparada,
que consiste en un calentamiento en mufla a 500C por 5 horas, colocada en un
embudo previamente lavado y se concentr con aire. Se pas por una columna
cromatogrfica de Icm de dimetro empacada con florisil activado y desactivado
para purificacin, se reconcentr con aire y se inyect en el cromatgrafo. El
florisil se activa colocndolo sobre un filtro whatman en un filtro Gooch en un
matraz kitasatto, se le agrega a saturacin agua destilada libre de plaguicidas, (el
agua libre de plaguicidas se puede preparar si es que no se compra, realizando
una extraccin con embudos de separacin utilizando agua destilada. Se realizan
3 extracciones con 20mL de cloruro de metileno para un litro de auga destilada y
se puede considerar como agua libre de plaguicidas) y se filtra.

32

El filtrado se reparte en una o varias cpsulas de porcelana y se mete a la


mufla a 660C por 6 horas y posteriormente se coloca en una estufa a 130C y se
deja toda la noche (12 horas). Despus se deja reposar en temperatura ambiente
y en una hora se puede utilizar.

El florisil se desactiv con el 5% de agua libre de plaguicidas en rotavapor


hasta que se homogenize, esto es para dar a las molculas una textura apropiada
para que al pasar el extracto y elur con solventes, ste se purifique
adecuadamente. La desactivacin se debe hacer antes de usarse y no se debe
utilizar el florisil desactivado despus de 7 das.

El sulfato de sodio anhidro se coloca en una mufla y se somete a una


temperatura de 440C por 4 horas. Y se guarda en un frasco previamente lavado,
El Sulfato de sodio es ms estable, puede durar hasta un mes pero de preferencia
se prepara cada 15 das.

4.5.2. Laboratorio de Fisiologa Celular - UNAM.

El mtodo Foltch.

El camarn se puso a secar a 60C en una estufa por 8 horas.


Se coloc un mortero dentro de un recipiente plstico ms grande donde tena
hielo seco y NaCI. Dentro del mortero se realiz la maceracin del camarn con
ayuda de nitrgeno lquido para que ste lo cristalice y pudiera hacerse polvo. La
extraccin se efectu mediante maceracin con nitrgeno lquido y utilizando
posteriormente una mezcla 2 : 1 cloroformo-metano1

aproximadamente 50mL/g se

esperaron 2 dias para que se extrajeran los lpidos ( hasta que el tejido deja de
flotar y se precipita hasta el fondo del recipiente. Se filtr en buchner, se recogi el
filtrado en un vaso de precipitado previamente tarado . Se realiz una dilisis : El

33

vaso se llen de agua y se meti en un reciupiente lleno de agua. Asi se hace una
extraccin. Los vasos quedaron parados en el fondo del recipiente). Despus de
12 horas aproximadam&te

se sacaron los vasos y se retir la mayor cantidad de

agua posible, se agreg Cloroformo hasta que cambi el color blanco. Se evapor
a sequedad con luz infraroja y se pes. para la extraccin de los analitos se
purific el extracto y se concentr con nitrgeno.

4.53. Laboratorio de Fisicoqumica en el Instituto de Ciencias del Mar y


Limnologa de la UNAM.

Primero se separaron las cabezas, el cefalotorax, telson, pleopodos etc. del


msculo y se trat por separado.

Las muestras consistieron en :


a). Camarones de Isla Navidad, sin marca, msculo.
b). Camarones de Isla Navidad, sin marca, cabeza, telson, cefalotorax, plepodos.
c). Camarones del Laboratorio, con marca, msculo.
d). Camarones del Laboratorio, con marca, cabeza, telson, cefalotorax, plepodos

En el Instituto de Investigaciones biomdicas-UNAM se liofilizaron los


camarones 125g peso hmedo correspondieron a 20g en peso seco. Para la
liofilizacin se tuvieron que moler con un homogenizador de tejido los camarones
agregndole un poco de agua hasta formar una especie de pasta, la cual fue
congelada con acetona y CO2 slido y distribuda en toda la superficie del
contenedor del vidrio del vaso especial del liofilizador, ah se coloc a una presion
reducida aprox. loe-3 mbar y temperatura -46C controladas, y se dej por 24
horas. Al da siguiente se recolect la muestra seca.

34

4.4.3.1. Extraccin con equipo soxhlet.

Se colocaron ell cartuchos de acetato de celulosa de 90X33mm,

20 g del

camarn liofilizado y se realiz la extraccin con 300mL de cloruro de metileno por


18 horas y 16 ciclos por hora, se concentr en equipo kuderna-danish colocado en
un bao mara a una temperatura de 64C para que en la parte superior de la
columna Snyder de tres bolas, se tuviera una temperatura de 34C que es el
punto de ebullicin del cloruro de metileno a la altura de la Ciudad de Mxico. Se
purific con florisil adicionndole 2.5cm de sulfato de sodio anhidro para evitar
humedad y se eluy con IOOml de diclorometano, el cual se concentr en kuderna
danish, se sec con gas nitrgeno y se le adicion ImL de MTBE (Metil ter-butileter). Esto se realiz por duplicado.

Es importante hacer notar que se cont con un material de referencia de


tejido de camarn con fines de certificacin de la tcnica.

4.5.3.2. Extraccin por microondas

La separacin y clasificacin de muestras de camarn, adems de la


liofilizacin, fueron iguales que las descritas en 453.1. Se utiliz un sistema de
microondas para extraccin por solventes modelo MES 1000, de Materiales y
Equipos Falcn S.A. de C.V. el cual reemplaza totalmente el uso del sistema
soxhlet, reduce el tiempo de extraccin a menos de 30 minutos, posee la
capacidad para correr 12 muestras simultneamente, reduce el volumen de
solvente a 50ml por muestra, mejora la eficiencia de extraccin siendo superior a
los mtodos tradicionales cuando se trata de muestras pequeas (5g mximo),
controla y reproduce estrictamente las condiciones de extraccin y mejora la
reproducibilidad.

35

Para la extraccin, se colocaron 5 gramos de muestra y se les adicionaron


50ml de una mezcla de 1 :l acetona-hexano y se someti a una presin de 30
psi por 30 minutos (2weces). Esto se realiz por triplicado, tanto al material de
referencia, como las muestras.

El material de referencia que se utiliz fue el MA-A-YOC. Estos estndares


se compraron en el Laboratorio Internacional de Radioactividad Marina de la IAEA
(Infernafional Atomic Energy A g e n c y ) e n M n a c o . Y s u c o s t o e s d e
aproximadamente $350 dlares por 200g de msculo de camarn.

La preparacin del estndar de referencia en el Laboratorio de Mnaco


SRM-MA-A-3/0C fue realizado por personal calificado que se dedica a preparar
estndares de referencia. Su preparacin se describe a continuacin : 200 kg de
camarones congelados fueron colectados y cada organismo fue tratado de la
manera siguiente : El abdomen fue separado del cefalotorax el cual fue
descartado. La cutcula fue removida y slo el msculo fue conservado, luego el
tejido suave fue congelado y liofilizado. El tejido fue tratado en material de acero y
vidrio solamente (evitando el contacto con plstico).

Se realiz una

homogenizacin en un tambor rotatorio por una semana, posteriormente se


prepararon alcuotas de 25g las cuales fueron almacenadas en frascos de vidrio.

Se realiz una prueba de homogenidad y se obtuvo una variacin entre el


13% y 22% de los diferentes compuestos. El agua contenida del material
liofilizado como determinacin de secado a peso constante de 105C de un
7.8%. Sin embargo el contenido de la mezcla puede cambiar con la humedad
ambiental y el tiempo.

36

Estos materiales son muy tiles para saber la presicin que tiene una
tcnica, ya sea la que se este realizando o cuando se quiere probar una nueva.
Por lo tanto los extractos y son comparados con los resultados de
referencia.

ANALITO

CONCENTRACIN (ppb)

DESV. ESTNDAR

HCB

0.32

+- 0.12

LINDAN0

3.2

+- 3.5

pp DDE

4.7

+- 3.4

pp DDD

0.81

+-0.76

pp. DDT

3.2

+-3.5

4LDRIN

0.7

+-.05

4LFA HCH

15

HEPTACLORO.

2.4

Aparte de este estndar de referencia, se cont con un Kit de 20


plaguicidas, el Z-004 del Accustandard, el cual cuenta con 10 mg de cada
compuesto con un 99% de pureza, a excepcin del toxafeno que es grado tcnico.
En este Kit venan el aldrn, lindano, ppDDT,

ppDDD,

ppDDE,

de los cuales se

inyectaron al cromatgrafo primero uno por uno para ver cada tiempo de retencin
por separado, posteriormente se hicieron mezclas de aproximadamente 8
compuestos ;; esto es debido a que el clordano y el toxafeno ocupan mucho
espacio en el cromatograma e interfiere con los otros compuestos. El peso de
estos analitos se realiz en una microbalanza con precisin +0.000001g,

ubicada

en el Instituto de Investigaciones Biomdicas. Esto fue con extremo cuidado, con


la debida precaucin de usar mascarilla de carbn activado, guantes de latex, sin
tocar absolutamente nada de los analitos con la piel, pelo etc. ya que no se debe
olvidar que son carcinognicos, mutagnicos y la simple presencia en condiciones
propicias puede desarrollar la enfermedad.

37

Se pesaron aproximadamente de 0.0007g

- O.OOlg de cada analito y se

afor en los matraces de IOmL. Posteriormente se hicieron diluciones para que se


tuvieran concentraciones de 0.5, 1,5,10 ~15, partes por billn.

Los estndares y los analitos de la curva de calibracin fueron diludos en


MTBE (Metil Terbutil Eter) en frascos de 10 mL, esto fue para trabajar con el
mismo solvente del estracto final de las muestras o en otras palabras, para tratar
de igualar matrices.

4.5.4. Extraccin de plaguicidas organoclorados en sedimento.

El sedimento fue extrado por soxhlet y por microondas, la tcnica fue muy
similar, slo que se realiz una maceracin en mortero con mazo y liofilizacin en
el caso del soxhlet utilizndose 50 gramos como muestra. Se realiz tambin un
blanco (sulfato de sodio anhidro) con estndar interno para ambos casos. Esta
tcnica para evaluar plaguicidas organoclorados en sedimento fue segn
GERG(1992), ASTM, (1991),

E.P.A. (1990) y en soxhlet. Para la extraccin con

microondas segn Onuska et al (1993). Estos autores mostraron que un proceso


de extraccin en perodos de 30 segundos repetido en una secuencia de 5 veces
provee generalmente mejor recuperacin que 8 horas de extraccin por equipo
soxhlet.

..

4.5.5.Extraccin de plaguicidas organoclorados en agua.

El agua fue tratada como lo marca el Mtodo 508 de la EPA,(1990)

y en

Mtodos Normalizados, (1989).

Se coloc en un embudo de separacin por duplicado de 600 mL y se


realizaron 3 extracciones con 25ml de diclorometano, juntando un volumen final

38

de 75mL el cual fue concentrado en Kuderna danish hasta 2ml. Despus fue
secado y purificado respectivamente con sulfato de sodio anhidro y florisil activado
y desactivado, eluyndolo con IOOml de hexano y luego fue reconcentrado en
Kuderna danish hasta 5ml y secado con nitrgeno hasta sequedad. Se le adicion
1 mL de Metil Terbutil Eter y posteriormente se inyect al cromatgrafo de gases.

4.5. Cromatografa de gases.

La Cromatografa de gases es una separacin fsica entre dos o ms


compuestos, basada en su distribucin diferencial entre dos fases, una de las
cuales es estacionaria (columna) y la otra es mvil (gas).

Para el anlisis de plaguicidas organoclorados, la EPA (1991), recomienda


utilizar como fase estacionaria una columna capilar ultra 2 de 25 metros de
longitud con 0.32mm de dimetro interno y 0.52pm de grosor de capa de 5% fenil
metil silicn. Las muestras fueron analizadas en un cromatgrafo de gases
Hewlett Packard 5890 Series ll equipado con un detector de Captura de
Electrones, con fuente de poder Nquel 63 acoplado a una computadora Vectra
486 con un software llamado chemstation.

Para organofosforados se utiliz el

detector de flama (FID) ste detecta plaguicidas organofosforados del orden de


ppm porque el detector nitrgeno-fsforo (NP) no lo contena el equipo.

Existen dos formas de mover los analitos desde el inyector hacia el


detector, una utilizando un gas acarreador y la otra variando la temperatura.
Gracias al uso de estos equipos, esto es bastante controlable, por lo que los
tiempos de retencin varan en 0.001 minutos. Como gas acarreador se utiliz
helio grado cromatogrfico (27mL/min). Con un flujo de 27ml/min. La volatilidad

39

de la muestra es muy importante, tambin que el extracto se encuentre limpio de


impurezas que puedan interferir en la identificacin. Se requiere entrenamiento y
experiencia para ,el manejo del equipo. Los compuestos con muy alto peso
molecular >600 UMAS, no pueden ser analizados, esto es debido a la longitud de
la columna y por la temperatura mxima que sta soporta.

La temperatura es muy importante, porque provoca que se genere una


volatilizacin de los compuestos al entrar por el inyector, el cual estuvo a una
temperatura de 320C. Es en esa parte donde se introdujo un microlitro ( IpL) de
estndar (y/o muestra) y en ese microlitro es en donde se encuentran los analitos.
Al entrar al puerto de inyeccin se volatilizan y se separan los compuestos,
mismos que son arrastrados a travs de la columna ; primero los ms voltiles y
los de ms alto peso molecular o mayor nmero de enlaces fueron mas lentos, en

entrar a la columna y por lo tanto llegaran despus para ser detectados y generar
una seal cualificable y cuantificable.

En la columna tambin debe existir una afinidad entre la fase y la matriz


que deber ser relacionada con la polaridad de los compuestos para que se
puedan separar cuando ciertos compuestos tienen alta polaridad, estos no son
voltiles, por lo que no se pueden analizar al igual que algunas sales.

La polaridad en cromatografa es muy importante ya que los compuestos


orgnicos que pasan por el grosor de capa de la columna deben ser no polares a
ste, es decir que no exista posibilidad de adsorberse en las paredes de la
columna y que pueda entorpecer la exactitud en la deteccin. El solvente en el
que se recomienda mantener el extracto final es el MTBE (Metil terbutil ter),
como sugiere la EPA (1990),

Mtodo 508, aunque tambin puede ser el

isooctano, o en su defecto el hexano.

Se buscan solventes que sean no polares a la columna, que tengan un


punto de ebullicin bajo, que salgan al principio del cromatograma sin generar una

40

seal grande (compuestos clorados para captura de electrones), es decir que el


detector de captura no los vea, como es el caso del MTBE.

El inyector, el detector y la columna se encuentran dentro de un horno, el


cual tiene un termostato calibrado de tal manera que puede subir gradualmente
como se le indique la temperatura del horno y al mismo tiempo mantener a una
temperatura constante el inyector y el detector, 20-30C ms elevada que la
temperatura mxima de la rampa diseada para el cromatograma.

Para el presente estudio, se


temperatura de 8OC,

inyect un microlitro iniciando con una

la cual subi 30C por minuto hasta alcanzar 190C

posteriormente subi 6C por minuto hasta alcanzar 300C y ah se quedo por 5


minutos. En total la corrida dur por lo tanto 25 minutos aproximadamente. Los
plaguicidas organoclorados salen desde el minuto 8 hasta el minuto 22.

Para darle mantenimiento al detector, se recomienda subir la temperatura a


unos 300C sin cerrar el gas acarreador (helio) y el gas auxiliar (nitrgeno) y
dejarlo as de 4 a 12 horas, si ste no presenta la seal del equipo baja, digamos
menor de 30 unidades (meV), se deber seguir calentando e inyectando solventes
como hexano, o metanol. La acetona no se recomienda porque acta con la capa
de S%fenil

metil slicon, y se diluyen los silanos o xilanos de la misma fase

estacionara y son detectados.

Para dar mantenimiento a las columnas se recomienda una vez


desconectadas del inyector y detector,

llenar los metros de la misma con

cloroformo y dejarla en reposo durante uno o dos das. Posteriormente se recoge


con gas y en un recipiente se recupera el cloroformo y se somete a un
calentamiento con 230C por 4 o 6 horas.

41

5. RESULTADOS
5.1. Patrones de plaguicidas organoclorados estndares.
En la Fig.1 se presenta la mezcla de estndares de once plaguicidas
organoclorados. stos fueron comprados al Accustandard. La mezcla se diluy
con MTBE para obtener concentraciones del orden de 15 ppb. Las Condiciones
del cromatgrafo se mantuvieron con las mismas caractersticas que las descritas
en Materiales y Mtodos.

8000 -

7000
l6000 $

10

15

20

25

Tiempo de retencin (minutos)

Fig. 1 Cromatograma de estndares con once plaguicidas organoclorados.


Cromatografa : Detector de Captura de Electrones temp. Iny. 32OC,

Temp.

Detector 33OC, Inicio 80C 1 min. Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de
6C por minuto hasta 300C.

42

5.2. Patrones de plaguicidas organofosforados estndares.


En la Fig. 2 se presenta la mezcla de 3 plaguicidas organofosforados. Marca
Accustandard. Ca mezcla se diluy con MTBE para tener concentracciones de
ISppm.

1.0 e 4
3

l
5

1'0

/
15

20

25

$0

Tiempo de retencin (minutos)

Figura 2. Cromatograma de la mezcla de estndares de tres plaguicidas


organofosforados. Detector de Flama (FID) Temperatura del Inyector 280C
Temperatura del Detector 280C Temperatura inicial 50C 1 minuto, y sube a 8 C
por minuto hasta 270C.

43

5.3. Cromatograma del blanco de muestra para la calibracin del equipo.


En el Laboratorio de Fisicoqumica Marina del ICMYL-UNAM, se extrajo de
acuerdo a la tcnica. Presenta el cromatograma obtenido de una extraccin que
se efectu coti sulfato de sodio anhidro con el objeto de tratar de encontrar
impurezas, ya sea en la columna 0 en los solventes 0 material en general
utilizados.

1.1 e41 .O e4-

8000 .8
2
7000 6000 0

10

15

20

25

Tiempo de retencin (Minutos)

Figura 3. Cromatograma del anlisis de un blanco de muestra y solventes.


Detector de Captura de Electrones temp. lny. 320X, Temp. Detector 33OC, Inicio
80C 1 min. Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por minuto hasta
300C.

44

5.4. La Fig. 4 muestra un Cromatograma de Camarn. En el Laboratorio de


Nutricin de la Facultad de veterinaria UNAM se extrajo de camarn entero
hmedo utilizando como solvente el ter de petrleo y se concentr el extracto
con aire. Posferiormente se sec con sulfato de sodio anhidro, se purific con
florisil y se reconcentr con aire. Finalmente se inyect el producto disuelto en
MTBE.

1.0 e4
.z

9000
8000

7000
6000 0

/
55
/

10

11 55

I
I

20
20

/
2255

Tiempo de Retencin (Minutos)

Figura 4. Cromatograma de la Tcnica 1.


Detector de Captura de Electrones. Temp. Iny. 32OC,

Temp. Detector 33OC,

Rampa : Inicio 80C 1 min. Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por
minuto hasta 300C.

45

54.1. En el Instituto de Fisiologa Celular-lJNAM se extrajo de camarn entero


secado en estufa a una temperatura menor de 60Cm

macerado con ayuda de

nitrgeno Iquid; y la extracin se realiz con una mezcla de cloroformo-metanol.


La concentracinfue con gas nitrgeno (Grado Cromatogrfico), el secado con
sulfato de sodio anhidro y la purificacin con florisil, la reconcentracin tambin
fue con gas nitrgeno. (Tcnica 2).

::
n

1.1 e41.0 e4I


*d
9000 -

8000--

6000
10

15

i0

25

Tiempo de Retencin (Minutos)

Figura 5. Cromatograma de la tcnica 2.


Detector de Captura de Electrones. Temp. Iny. 32OC,

Temp. Detector 33OC,

Rampa : Inicio 80C 1 min. Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por
minuto hasta 300C.

46

5.4.2. En el Laboratorio de Fisicoqumica Marina ICMyL-UNAM se extrajeron


plaguicidas organoclorados del msculo de camarn liofilizado del Material de
Referencia Estndar (MRE) con equipo Soxhlet. La extraccin utilizo como
solvente cloruro de metileno, y se concentr con Kuderna-Danish . El secado y la
purificacin se llevaron a cabo como en la tcnica 2. La reconcentracin con
kuderna danish y gas nitrgeno y la elucin de los analitos con MTBE.

1
1.1 e41.0 e49000 2
8000--

10

15

20

Tiempo de Retencin (Minutos)

Figura 6. Cromatograma de muestra de control MRE procesada con la tcnica 3


Detector de Captura de Electrones. Temp. Iny. 32OC,

Temp. Detector 33OC,

Rampa : Inicio 80C 1 min. Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por
minuto hasta 300C.

47

5.4.3. De igual forma en ste mismo Laboratorio se extrajo de msculo de


\
camarn liofilizado del Material de Referencia Estndar con horno de
microondas. La extraccin utiliz como solvente acetona :hexano 1 :l, y se
concentr con equipo rotavapor. El secado y la purificacin se llevaron a cabo
como en la tcnica No. 2, la reconcentracin con rotavapor y gas nitrgeno y la
elucin de los analitos se llev a cabo con MTBE.

1.1 e4

l.Oe4 1
9000-1

1 I

II

i 18

8000

6000 4
0

ii

10

1'5

20
..

25

Figura 7. Cromatograma de la muestra de control SRM analizada por la tcnica 4.


Detector de Captura de Electrones. Temp. Iny. 32OC,

Temp. Detector 33OC,

Rampa : Inicio 80C 1 min. Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por
minuto hasta 300C.

48

54.4. Asimismo se extrajo de msculo de camarn liofilizado del Laboratorio de


Ciencias Marinas UAG en Barra de Navidad, Jal., con equipo soxhlet. La
extraccin utiliz como solvente el cloruro de metileno y se concentro y
reconcentr con kuderna danish, el secado y la purificacin de acuerdo a la
tcnica 2, la reconcentracin con kuderna danish y gas nitrgeno y la elucin de
los analitos se llev a cabo con metil terbutil ter.

1 .Oe
9000
6000-JIL
7000
6

Tiempo de Retencin (minutos)


Figura 8. Cromatograma de muestras de camarn del Labratorio de Ciencias
Marinas UAG procesadas. Condiciones Cromatogrficas : Detector de Captura de
Electrones. Temp. Iny. 32OC, Temp. Detector 33OC, Rampa : Inicio 80C 1 min.
Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por minuto hasta 300C.

49

54.5. Tambin se extrajo msculo de camarn

liofilizado de Isla Navidad, Col.,

UAG, con equipo soxhlet. El liofilizado se trat con cloruro de metileno, y se


concentr con equipo kudema danish . El secado y la purificacin se llevaron a
cabo como en la tcnica 2, la reconcentracin con kuderna danish y gas
nitrgeno y la elucin de los analitos con MTBE.

1.6e
1.5e
1.4e
1.3e
1.2e
l.le
1 .Oe
9

0
,_

Sig.

in

C:\HPCHEM\l\DATA\JUDITHO3.D

Figura 9. Cromatograma de muestras de camaron procedentes de Isla Navidad,


Col, utilizando la Tcnica No. 3.

Condiciones cromatogrfcas : Detector de

Captura de Electrones. Temp. Iny. 32OC, Temp. Detector 33OC, Rampa : Inicio
80C 1 min. Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por minuto hasta

300C.

5.4.6. En el Laboratorio de Fisicoqumica Marina ICMyL UNAM se extrajo de


msculo de camarn liofilizado del Lab. de Ciencias Marinas, Barra de Navidad,
Jal. UAG con horno de microondas. La extraccin utiliz como solvente
acetona-hexano 1 :l , y se concentr con rotavapor. El secado y la purificacin
como en la tcnica 2. Reconcentracin con rotavapor y gas nitrgeno y la
elucin de los analitos con MTBE.

1.1

e4-

10.

I
15

1
20

Tiempo de retench (Minutos)

Fig. 10 Cromatograma de muestras de camaron del Lab. de Ciencias Marinas


UAG. Procesadas con la tcnica 4. Condiciones Cromatogrficas : Detector de
Captura de Electrones. Temp. Iny. 32OC, Temp. Detector 33OC, Rampa : Inicio
80C 1 min. Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por minuto hasta
300C.

51

5.4.7. Aqu mismo se extrajo msculo de camarn liofilizado de Isla Navidad Col.,
UAG. Se llev la extraccin con horno de microondas utilizando como solvente
acetona-hexano 1 :l , y se concentr con rotavapor y gas nitrgeno y la elucion de
los analitos se llev a cabo con MTBE.

Sio2;.

in

C :lHP C HEWI\ ~\,DATA~\JUDITHO~

.D

Figura ll. Cromatograma de muestras de camarn de Isla Navidad, Col.,


utilizando la tcnica 4. Condiciones cromatogrficas : Detector de Captura de
Electrones. Temp. Iny. 320X, Temp. Detector 330X, Rampa : Inicio 80C 1 min.
Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por minuto hasta 300C.

52

5.4.8. En el Laboratorio de Fisicoqumica Marina ICMyL- UNAM se extrajo la


fraccin soluble con cloruro de metileno de una muestra de agua marina como lo
indica el mtodo 508 de la EPA (1991). Se concentr con equipo kuderna danish.
El secado y la purificacin

se llevaron a cabo como en la tcnica 2, la

reconcentracin con kuderna danish , y la elucin

de los analitos se llev a cabo

con MTBE. Se presenta a continuacin el cromatograma obtenido de la muestra


de agua marina de los estanques de cultivo de camarn en el Laboratorio de
Ciencias Marina,. Barra de Navidad, Jal. UAG.

1.1 e4

1.0 e4
9000
.i$

8000

7000

6000

10

15

2 0

2 5

Tiempo de retencin (minutos)

Figura 12. Cromatograma del anlisis de agua marina de los estanques de cultivo
de camarn en el Laboratorio de Ciencias Marinas, Barra de Navidad, Jal.
Detector de Captura de Electrones. Temp. Iny. 32OC,

Temp. Detector 33OC,

Rampa : Inicio 80C 1 min. Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por
minuto hasta 300C.

53
5.6. Cromatograma del sedimento.
En el Laboratorio de Fisicoqumica Marina del ICMyL UNAM. Se extrajo de
acuerdo a la Tcnica 3. Se presenta a continuacin el cromatograma obtrenido de
muestra de sedimento de la Laguna de Barra de Navidad, Jal.

30001

1 0

1 6

2 0

Tiempo de Retencin (Minuh)

Esi=.

C:\HPCHEM\l\DATA\JUDITHO8.D

Figura 13 Cromatograma del anlisis de sedimento marino de la Laguna de Barra


de Navidad, Jal.,

Condiciones cromatogrficas : Detector de Captura de

Electrones. Temp. Iny. 32OC, Temp. Detector 33OC, Rampa : Inicio 80C 1 min.
Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por minuto hasta 300C.

54

5.7. Cromatograma de alimento para camarn.


En el Laboratorio de Fisicoqumica Marina del ICMyL-UNAM se extrajo de acuerdo
a la tcnica 4. Se presenta a continuacin el cromatograma obtenido de muestra
de alimento comercial para camarn suministrado a camarones adultos en el
Laboratorio de Ciencias Marinas UAG. Barra de Navidad, Jal.

c3
c-2
0
.-LL --,---- C--

C?OOO
---T--(---.~---+.---~-----l-eooo i
0
5
10
1 5
SC
35
Timpa de Rst*cion (Mnutorl

Figura 14. Cromatograma del anlisis de alimento comercial para camarn adulto,
analizado segn la tcnica 4. Condiciones Cromatogrficas : Detector de Captura
de Electrones. Temp. Iny. 32OC,

Temp. Detector 33OC, Rampa : Inicio 80C 1

min. Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por minuto hasta 300C.

55

6. DISCUSIN

El cromatograma 1 donde se muestran los estndares de plaguicidas


organoclorados nos indica que se encuentran en una elevada pureza, algo muy
importante es el factor de respuesta el cual es proporcional al nmero de cloros
presentes en cada molcula. Los tiempos de retencin son los que nos van a
permitir realizar comparaciones con los siguientes resultados.

El cromatograma 2 nos muestra los 3 plaguicidas organofosforados que


fueron observados en el detector de ionizacion

de flama (FID), stos fueron

detectados en concentraciones de 20 ppm para paraquat, y encontramos una


mejor respuesta en el caso del malatin y etil paratin con 6 y ll ppm
respectivamente.

El blanco (cromatograma 3) se realiz nicamente para revisar que todo el


material tanto de cristalera, como reactivos, columna y cromatgrafo estuvieran
en ptimas condiciones de uso.

Debido a que no se contaba con una tcnica exprimental para la


extraccin y determinacin de plaguicidas en el Laboratorio de Fisicoqumica
Marina, se busc la posibilidad de trabajar en el laboratorio de nutricin de la
facultad de Veterinaria, UNAM. En ste laboaratorio se han montado tcnicas
para la determinacin de espcies de origen terrestre o marino, sin embargo
nunca se haba efectuado en camarones peneidos lo cual fue muy buen
comienzo. Tambin se tuvo la posibilidad de efectuarlo en el Laboratorio de la
Dra. Chagolla del Instituto de Fisiologa Celular y se efectu la tcnica que ellos
nombran Foltch para la extraccin de compuestos orgnicos (cidos grasos) a
partir de partes de animal.

Se prob una tercera tcnica la cual estaba aplicada nicamente a


sedimentos y consultando con el Laboratorio de Qumica Marina Ambiental de la

56

Universidad de Texas A&M en la que por medio de equipo soxhlet y gracias a que
se consigui una liofilizadora en el Instituto de Investigaciones Biomdica, se
liofiliz el tejido de los camarones y se tuvo una materia prima diferente, ya
pulverizada, la cual permiti una homogenizacin del tejido mejor para la
extraccin de los analitos. Cabe mencionar que las pruebas de textura y de
apariencia coinciden con el Iiofilizado del msculo y el estndar de referencia.

Al final de estas 3 tcnicas, un seminario de Extraccin de compuestos


orgnicos por microondas impartido por personal de Equipos Falcn, fue el
catalizador para realizar una tuerta prueba, ya que este equipo fue prestado por
aproximadamente 6 meses al Laboratorio de Fisicoqumica Marina y requera el
material liofilizado lo cual ya estaba listo. En la extraccin se gast mucho menos
material, menos solventes a pesar de que logramos hacer varias rplicas.

La Tcnica utilizada en la Facultad de Veterinaria UNAM, fue aceptable,


aunque la cantidad de camarn requerida fue mnima (un Camarn entero 25g
peso hmedo), sin embargo la cantidad utilizada de solventes grado reactivo fue
alta y susceptible a la contaminacion al efectuar el secado del extracto con aire as
como la reconcentracin. El equipo present buena resolucin solo que gener
una variacin en la lnea base producto del sangrado de la columna el cual pudo
deberse al tipo de solvente (eter de petrleo grado analtico). El sangrado de la
columna que presenta el cromatograma se detect a una temperatura de 100 f
30C ya que esta es la temperatura en los primeros minutos del cromatograma.
Este detalle no se observ en el Laboratorio del Instituto de Fisiologa Celular, en
donde aparte de utilizar reactivos con la pureza requerida, la concentracin se
realiz con nitrgeno. Se puede decir que fue la tcnica ms costosa por el
exceso de reactivo para poca muestra. La duracin fue de 48 horas, el

USO

de

Nitrgeno lquido, los solventes y el gas nitrgeno utilizado en las concentraciones


increment an ms el costo.

La extraccin por equipo soxhlet fue buena, buena resolucin, los picos se
separaron bien, pero se utiliz un 300% ms de reactivo comparndola con la
tcnica

microondas,

adems del tierno que fue largo unas 18 horas.

Comparndola con la tcnica 4 de soxhlet se puede utilizar ms muestra, que en


la tcnica 4 de microondas.

La extraccion por microondas de las muestras de camarn analizadas por


la tcnica 4 de microondas comparadas con las analizadas por las otras tcnicas
result excelente en cuanto a recuperacin, ahorro de solventes y de tiempo. Las
muestras de agua y la de sedimento no presentaron plaguicidas organoclorados
por lo menos en los lmites mnimos permisibles del equipo y estndares con que
se trabajaron. Se consiguieron los estndares de los plagucdas que se tena
conocimiento, que existan en la regin y se inyectaron. No se detect la
presencia de Malatin, clordano, paratin , y paraquat, tanto en organismos, como
en agua y sedimento. Si se hubiese encontrado en almenos una de las matrices
antes mencionadas, se cuestionara la posible ausencia en las dems.

En los cromatogramas de camarn del 6-14 existen picos que no fueron


identificados los cuales pueden corresponder a compuestos orgnicos del mismo
camarn y/o del alimento como cidos grasos u otros plaguicidas de los que no se
tuvo estndar hasta ese momento.

Para eliminar cualquier duda de la veracidad de los resultados presentdos


en este trabajo, se efectuaron 10 anlisis de un estndar de referencia certificado
por Standard Referente Material MA-A.3/OC que se consigu en el Laboratorio
Internacional de Radioactividad Marina de la IAEA (Internatonal Afomic Energy
Agency) y que consisti en msculo de camarn liofilizado y contaminado con 8
analitos, los cuales se muestran en la Tabla 1 en Material y Metodos.

En cada

cromatograma se observaron los ocho analitos que la IAEA garantizaba su


presencia.

58

Adems por las mismas fechas se examinaron 38 muestras de agua y


sedimento extrados de la zona agrcola del Estado de Oaxaca utilizando la
tcnica de embudo de separacin y soxhlet respectivamente. La deteccin se
efectu con las mismas caractersticas del equipo de cromatografa que sugiere el
Departamento de Cromatografa de Gases del Laboratorio del ICMyL UNAM, que
fue el mismo aparato, que el utilizado para el presente trabajo. En diez de las 38
muestras no se encontr ningun plaguicida,

en las restantes 28 muestras se

encontr DDD, DDT, lindano, aldrn, delta-BHC, toxafeno, etilparation, heptacloro


y paraquat (Garca-Almanza, 1996).

Otro trabajo que se efectu en el mimo equipo, detect cantidades a nivel


significativo y superiores al nivel mximo permitodo por la Ley del Equilibrio
Ecolgico y Proteccin al ambiente (LEGEPA) de la Constitucin Poltica de los
Estados Unidos Mexicanos. Este trabajo se desarroll en agua y sedimento de la
presa de Valsequillo, Puebla, Mxico, detectndose el heptacloro, aldrn, dieldrn,
y el ppDDT (Vzquez et al. 1996). Los lmites de deteccin del equipo para una
muestra de 5 g son del orden de 0.01 ppb, esto se logra gracias a la sensibilidad
del detector de captura de electrones.

En cuanto a la posible fuente de contaminacin por plaguicidas puede ser


porque el Valle de Cihuatln presenta una zona platanera extensa de vegetacin,
tambin por Insecticidas caseros utilizados por los habitantes de Barra de
Navidad, as como los alimentos que llegan al lugar que se encuentren demasiado
fertilizados, al ser depositados los desperdicios al basurero municipal si no se
hace con el debido cuidado tambin pueden contaminar un rea.

Los seis meses que se encontraron los camarones en acondicionamiento y


reproduccin, si es que traan plaguicidas los pudieron haber perdido con la
ecdysis. Tambin como estos analitos son lipoflicos, tambin se pudieron haber
perdido en la ovoposicin de las hembras, ya que los huevecillos contienen
grasas.

59

En el anexo se incluyen los resultados para metales pesados realizados


para el mismo estudio, esto se hizo porque la presencia de metales pesados se
sospechaba por la cercana del Ro Marabasco y un estudio realizado por Llanger
O.S.G., 1994 trata el efecto de metales pesados Cd, Cu, Pb y Zn y agentes
quelantes EDTA y DTPA en zoea Penaeus Vannamei.

Tambin Meyer-Willerer

(comuniciacin personal, 1996) observ, que cuando no se aplicaba el EDTA,


dejaban de reproducirse los camarones. Entre los resultados destaca el Cadmio
en los tres tipos de camarones encontrando concentraciones de hasta 13 ppm en
lo que son cabezas, y msculo, el cual es un valor que rebasa ampliamente el
lmite mximo permitido. Tambin en el alimento se encontr la presencia de Cu,
Zn, Cr, Pb y Cd. La tcnica incluye absorcin atmica por ionizacin de flama y
digestin de las muestras por microondas.

La extraccin de plaguicidas se evalu de varias maneras.

1. Inyectando estndar interno a la muestra de tejido de camarn liofilizado y al


trmino del proceso en la inyeccin, se observ el porcentaje de recuperacin
superior al 90% (93%) en el caso de la extraccin por microondas.

2. Inyectando estndar interno a la muestra de tejido de camarn liofilizado y al


trmino del proceso en la inyeccin se obtuvo un porcentaje de recuperacin del
87% con el equipo soxhlet.

3. El caso del estndar de referencia, en la extracin por microondas por


triplicado, se obruvieron excelentes concentraciones mediante una curva de
calibracin realizada con los mismos estndares por seprarado y la desviacin
estndr fue menor en todos los casos que la requerida en la etiqueta del estndar
de referencia.

60

7. CONCLUSIONES.

0 No se encontraron ninguno de los siguientes plaguicidas tales como aldrin,


lindano, dieldrin, DDT, DDE, y DDD en el msculo y en la cabeza del camarn
cultivados tanto en Isla Navidad como en el Laboratorio de Ciencias Marinas,
condicion que puede deberse a que los camarones estuvieron seis meses en
condiciones controladas.

~3 El agua donde permanecieron los camarones del Laboratorio de Ciencias


Marinas UAG fue tratada con EDTA y con filtros ultravioleta antes de la llegada
al tanque aunque fue tratada, no mostr contaminacin por plaguicidas.

Q El sedimento tampoco fue encontrado con plaguicidas y ste nos indicara la


posible acumulacin respecto al tiempo.

3 El alimento no present contaminacin por plaguicidas lo cual nos indica que

SU

consumo tampoco sera txico en ese sentido.

~3 La mejor tcnica de extraccin fue con el uso de microondas, aunque la compra


del equipo es costosa, permite garantizar la extraccin en corto tiempo y con
pocos consumibles,

la tcnica de soxhlet tambin result buena, solo que

porque implica mayor tiempo y tres veces mas reactivos y consumibles que en
la anterior.

~3 La tcnica a base de microondas tambin result ser la mas adecuada cuando


se trata de tejidos deshidratados de organimos porque al trabajar con tejido de
camarn liofilizado podemos contar con una mayor cantidad de muestra de
peso relativamente bajo.

61

0 Esta tcnica de microondas no se recomiendo tanto para sedimentos porque el


peso de la muestra no debe exceder de 5 gramos, (recomendable 1 gramo),
esto resulta til para organismos porque al ser liofilizados reducen hasta una
quinta parte su peso original y para lograr una buena homogenizacin del
sedimento entre ms muestra se tenga es ms representativo el resultado.

0 La tcnica utilizada en la facultad de veterinaria es buena, pero es mejor


trabajar con columnas capilares que empacadas y con reactivos grado
plaguicida.

@ La tcnica del Instituto de Fisiologa Celular, en cuanto a timpo dura varios


dias, y los reactivos se necesitan en mayor cantdidad que en la tcnica del
soxhlet, dur varios das la extraccin por lo que resulta incomparable con la
tcnica por microondas, adems de que requiere de la utilizacin de gas
nitrgeno, y nitrgeno lquido, y el cual resulta an ms costoso y de operacin
delicada.

@ Los picos que se observan y no son reconocidos pueden ser otros plaguicidas
de los que no se tuvo el estndar para su identificacin, as como tambin
pueden ser compuestos orgnicos del mismo camarn.

~3 Es necesario dar seguimiento a estudios en cuanto a los compuestos


organofosforados, porque estos son menos persistentes pero mucho ms
txicos.

62

8. RECOMENDACIONES.
Q Dar seguimiento realizando estudios sobre plaguicidas (qumica analtica
ambiental) en esa regin y en la zona agrcola de los Estados de Jalisco y
Colima ya que si contina la construccin de granjas para acuacultura se
puede asegurar la comercializacion del producto con miras a exportacin si se
encuentra exenta de contaminacin.

Q Efectuar una vigilancia constante para evitar que se sigan usando plaguicidas
prohibidos.

0 Proporcionar campaas de informacin a los usuarios de plaguicidas para que


adquieran los conocimientos para un manejo y uso seguro de los plaguicidas.

0 Evitar que se reutilicen los envases de plaguicidas, porque esto ocasiona desde
leves infecciones hasta envenenamientos a las personas que los operan.

Fs Utilizar aparte de FID y ECD el detector de Nitrgeno-Fsforo

NP para

identificar minimas concentraciones de organofosforados y carbamatos.

~3 Analizar en estudios similares los extractos en un espectrofotmetro de masas


para asegurar la presencia de los plaguicidas organoclorados.

~3 Proponer normas para algunos plaguicidas que se siguen utilizando en Mxico


y que ya son prohibidos en otros pases por ser carcinognicos, teratognicos,
mutagncos entre otros.

63

Q Efectuar una vigilancia constante para evitar que se sigan usando plaguicidas
prohibidos.

Q Proporcionar campaas de informacin a los usuarios de plaguicidas para que


adquieran los conocimientos para un manejo y uso seguro de los plaguicidas.

0 Evitar que se reutilicen los envases de plaguicidas, porque esto ocasiona desde
leves infecciones hasta envenenamientos a las personas que los operan.

Q Utilizar aparte de FID y ECD el detector de Nitrgeno Fosforo, para identificar


mnimas concentraciones de organofosforados y carbamatos.

@ Analizar en estudios similares los extractos en un espectrofotmetro de masas


para asegurar la presencia de los plaguicidas organoclorados.

@ Proponer normas para algunos plaguicidas que se siguen utilizando en Mxico


y que ya son prohibidos en otros pases por ser cancergenos, teratognicos
mutagnicos, entre otros.

64

9. LITERATURA CITADA :

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ANEXO

73

Fig. 15. Cobre determinado en cabeza y msculo de camarn de diferentes


fuentes y en alimento para camarn.

El cobre es un in que probablemente no provoc la reabsorcin de la hueva de


camarones hembra en el LCM de la UAGuadalajara, Barra de Navidad, Jal., en el
ao de 1995 al entrar al estado IV de maduracin. La cantidad de cobre reportada
para langostino bajo condiciones normales BS entre 0.1 y 167 mg/Kg de peso
hmedo con una media de 20.4 mg/Kg (Sikorski E.E. 1994. Tecnologa de los
productos del mar: recursos, composicin nutritiva y conservacin. Ed. Acribia,
Espaa, tabla 13, pgina 67).

74

14
12
10
8
6
4
2
0

Fig. 16. Cadmio determinado en cabeza y msculo de camarn de diferentes


fuentes y en alimento para camarn.
.
El cadmio puede ser el in que provoc la reabsorcin de la hueva de camarones
hembra en el LCM de la UAGuadalajara, Barra de Navidad, Jal., en el ao de 1995
al entrar al estado IV de maduracin. La adicin de ll mg/L de sal disdica del
cido etilen-diamin-tetraactico ( Na2 l EDTA) neutralizaba este efecto. La cantidad
de cadmio reportada para langostino bajo condiciones normales es entre 0.0 y 0.2
mg/Kg de peso hmedo (Sikorski E.E. 1994. Tecnologa de los productos del mar:
recursos, composicin nutritiva y conservacin. Ed. Acribia, Espaa, tabla 13,
pgina 67).

75

0 99
0 98
0 j7
03 6
01 5
0 14
0 33
0 !2
0 31

Fig. If. Nquel determinado en cabeza y msculo de camarn de diferentes


fuentes y en alimento para camarn.

El nquel tambin puede ser el in que provoc la reabsorcin de la hueva de


camarones hembra en el LCM de la UAGuadalajara, Barra de Navidad, Jal., en el
ao de 1995 al entrar al estadio IV de maduracin. La adicin de Il mg/L de sal
EDTA) neutralizaba este efecto.
disdica del cido etilen-diamin-tetraactico (Na2 l
La cantidad de nquel reportada para langostino bajo condiciones normales es
entre 0.0 y 0.1 mg/Kg de peso hmedo (Sikorski E.E. 1994. Tecnologa de los
productos del mar: recursos, composicin nutritiva y conservacin. Ed. Acribia,
Espaa, tabla 13, pgina 67).

76

Fig. 18. Plomo determinado en cabeza y msculo de camarn de diferentes


fuentes y en alimento para camarn.
Ii plomo. es otro in que pudo provocar la reabsorcicjn de la hueva de camarones
hembra en el LCM de la UAGuadalajara, Barra de Navidad, Jal., en el ao de 1995
al entrar al estado IV de maduracin. La adicin de ll mg/L de sal disdica del
cido etilen-diamin-tetraactico (Na2 l EDTA) neutralizaba este efecto. La cantidad
de plomo reportada para langostino bajo condiciones normales es entre 0.3 y 11.6
mg/Kg de peso hmedo con una media de 1.6 mg/Kg (Sikorski E.E. 1994.
Tecnologa de los productos del mar: recursos, composicin nutritiva y
conservacin. Ed. Acribia, Espaa, tabla 13, pgina 67).

77

0 7

0 6

015
014
013
012

0 I1
0

Fig. 19. Cromo determinado en cabeza y msculo de camarn de diferentes


fuentes y en alimento para camarn.
El cromo es otro in que pudo provocar la reabsorcin de la hueva de camarones
hembra en el LCM de la UAGuadalajara, Barra de Navidad, Jal., en el ao de 1995
al entrar al estado IV de maduracin. La adicin de 11 mg/L de sal disdica del
cido etilen-diamin-tetraactico (Na2 l
EDTA) neutralizaba este efecto. La cantidad
de plomo reportada para langostino bajo condiciones normales es 0.1 mg/Kg de
peso hmedo (Sikorski E.E. 1994. Tecnologa de los productos del mar: recursos,
composicin nutritiva y conservacin. Ed. Acribia, Espaa, tabla 13, pgina 67).

78

SECAR LA MUESTRA A APROX.


70C LENTAMENTE
MOLER 10 g DE MUESTRA SECA
CON 15 g DE SULFATO DE SODIO ANHIDRO
COLOCAR EN DEDAL DE EXTRACCIN
Y PONER UN TAPON DE FIBRA DE VIDRIO
DIGERIR EN EQUIPO DE EXTRACCIN
SOXHLET USANDO COMO SOLVENTE
CLORURO DE METILENO
1 PURIFICAR EL EXTRACTO CON FLORISIL 1
I

CONCENTRAR EN KUDERNA DANISH


(Ver diagrama de concentracin)
I
1INYECTAR EN CROMATGRAFO DE GASES 1

Fig. 20. Extraccin de plaguicidas en muestras de sedimento y alimento. Mtodo


EPA D5369-93.

79

TOMAR EL EMBUDO DE SEPARAC!QN


I1UNA ALCUOTA
DE 40mL DE AGUA MUESTREADA
I
1 AGREGAR 24 mL DE CLORURO DE METILENO )
I

AGITAR

b+

VIGOROSAMENTE
2 o 3 MINUTOS

DURANTE

DEJAR REPOSAR HASTA VER SEPARACIN


DE FASES
(Aproximadamente 10 minutos)

1 RECUPERAR FASE ORGNICA EN 1


MATRAZ ERLENMEYER
I

INYECTAR EN CROMATGRAFO
DE GASES CON DETECTOR
DE CAPTURA DE ELECTRONES

Fig. 21. Extraccin de plaguicidas organoclorados en muestras de agua


Mtodo EPA 508.

80

UNIR TIJBO CONCENTRADOR AL


MATRAZ DE LA KUDERNA DANISH (K.D.)
ANADIR 4 PERLAS DE EBULLICIN

PONER EL EXTRACTO DE LA MUESTRA


EN EL MATRAZ DE LA K.D.

UNIR LA COLUMNA SNYDER AL MATRAZ


DE LA K.D.

INSTALAR LA K.D. EN BAO MARA


A 60 - 65C SUMERGIENDO EL TUBO
CONCENTRADOR TRES CUARTAS
PARTES DE SU LONGITUD
- - CONCENTRAR HASTA OBTENER UN VOLUMEN
APARENTE DE 2 mL

RETIRAR LA K.D. DEL BAs!O MARZA


E S P E R A R A Q U E S E ENFR/E P A R A Q U E E S C U R R A
EL CONCENTRADO DE LA COLUMNA AL CONCENTRADOR

MEDIR VOLUMEN DEL CONCENTRADO


GUARDAR EN UN VIAL CON TAPN DE TEFLN

INYECTAR EN
CROMATOGRAFO DE GASES

ALMACENAR EN CONGELADOR
A 4C

Fig. 22. Concentraciin de extractos de muestras de organismos, agua, sedimento


y alimento.