Inmunologa General

Unidad 4
Inmunidad Innata
Dr. Enrique Ortega Soto
Departamento de Inmunologa, IIBiomedicas
5622-38-34
ortsoto@unam.mx

Qu activa al sistema inmune ?

Burnet y otros (1959-1960s): lo que sea reconocido por un
receptor antignico de una clona.
Modelo de 2 seales (Bretscher y Cohn, 1970).
Coestimulacin (Lafferty y Cunningham, 1975).
Seales antgeno-especficas y seales policlonales (LPS) en la
activacin de linfocitos B (Coutinho y Moller, 1974)
Descubrimiento de clulas dendrticas y su potente capacidad
inmunoestimuladora (Steinman y Cohn, 1973)
Activacin de macrfagos y neutrfilos por componentes
microbianos (Cohn y cols 1970s)
Janeway (1989):

Janeway (1989):
La coestimulacin es inducible
La seal coestimuladora es inducible por
productos microbianos con estructuras
conservadas
Las estructuras microbianas conservadas son
detectadas por medio de receptores
codificados en la lnea germinal
PAMPS Patrones moleculares asociados a
patgenos
PRRs Receptores de reconocimiento de
patrones moleculares

Janeway y otros:
Busqueda de receptores (membranales) de
reconocimiento de patrones con capacidad de
inducir capacidades de coestimulacin
Probablemente con capacidad de reconocer
lpidos y carbohidratos
La porcin citoplasmtica conectada a la
estimulacin de NF-kB.
En 1994 se identifican clonas que codifican
receptores con dominio TIR y homologa a
receptores Toll de Drosophil

La inmunidad innata es la primera lnea de defensa que

previene la infeccin y/o, en muchos casos, la elimina.

Los mecanismos efectores usados en la inmunidad innata

son utilizados tambin por la respuesta inmune adaptativa.

La inmunidad innata ESTIMULA la respuesta inmune

adaptativa y la modula
Una diferencia fundamental entre los mecanismos que se

consideran parte de la inmunidad innata y los de la

inmunidad adaptativa, es el tipo de receptor que reconoce al
agente infeccioso para iniciar la respuesta.

Algunas caractersticas de la Inmunidad

Innata
Los vertebrados son los nicos seres vivos con inmunidad
adaptativa. Las dems especies se las arreglan con inmunidad
innata.
Los receptores de la inmunidad innata estn codificados en
lnea germinal (no requieren rearreglos).
No estan distribuidos clonalmente (todas las clulas de una
clase son identicas.
Reconocimiento de patrones moleculares.
La inmunidad innata determina y regula la respuesta
adaptativa: Tolerancia vs inmunogenicidad

 Los receptores de la inmunidad innata pertenecen a distintas familias de

protenas, mientras que los de la inmunidad adaptativa estn todos
estructuralmente relacionados, lo que indica un origen evolutivo comn.
El repertorio de receptores de la inmunidad adaptativa se genera durante
el desarrollo de un individuo, mientras que el repertorio de receptores de
la inmunidad innata se ha venido desarrollando durante el desarrollo
evolutivo de las especies.
A diferencia de los receptores de linfocitos, los receptores involucrados en
la respuesta innata estn codificados en la lnea germinal (no se generan
mediante rearreglos), no estn distribudos clonalmente (cada tipo celular
expresa los mismos receptores con idntica especificidad), y su diversidad
es muy limitada

Los componentes de la inmunidad innata reconocen estructuras

caractersticas de grupos de microorganismos (PAMPs patrones
moleculares asociados a patgenos), que generalmente son esenciales
para el patgeno (por tanto poco probable de sufrir mutaciones) y que no
estn presentes en clulas de mamferos (por la necesidad de mantener la
tolerancia a lo propio).

Algunos PAMPS y sus respectivos PRRs:

Patrn molecular

Microorganismo

PRR

Respuesta

dsRNA

Virus

Cinasa activada por

dsRNA

Produccin IFN

LPS

Pared bacterias

LPB/CD14/receptor
Toll (TLR 4)

CpG no metilado

DNA bacterias

TLR 9

Activacin cels.
dendrticas y
macrfagos

n-formil-prot

Protenas
bacterianas

Receptor de
nFMLP

Glicanos ricos en
manosa

Glicolpidos y
glicopoteinas
bacterianas

Receptor de manosa Opsonizacin

Fijacin de
complemento

Activacin
macrfagos y
neutrfilos

Dentro de los receptores de reconocimiento de patrones hay molculas solubles,

receptores de membrana, y receptores intracelulares

Toll-like receptors (TLRs)

En los 1980s se decubrio en Drosophila un gen que se llamo
Toll, cuyos defectos producen un fenotipo en el cual no se
desarrolla el eje dorsoventral durante el desarrollo
embrionario. Este gene forma parte del grupo de genes
dorsal.
En 1995 se describio que mutaciones en este grupo de genes
funcionan en la inmunidad a hongos y bacterias en Drosophila
En 1997 se describieron TLRs en mamiferos
En 1998 se describio que TLR4 induce la expresion de
moleculas coestimuladoras y que la respuesta
inmunoestimuladora a LPS o la respuesta endotoxica requiere
de TLR 4

TLRs and their ligands

Takeda, K. et al. Int. Immunol. 2005 17:1-14; doi:10.1093/intimm/dxh186

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Los TLRs activan dos vias de transduccin de seales: una dependiente de

MyD88 y otra dependiente de TRIF (e independiente de MyD88)

Estructura cristalografica de TLRs con sus ligandos.

El ligando induce homo- o hetero-dimerizacin

Annual Reviews

Modelo de MyDosoma. Complejos moleculares que inician la sealizacin.

La agregacin de IRAKs promueve la activacin de su actividad cataltica

Annual Reviews

Los receptores tipo Toll reconocen ligandos muy diversos derivados de

microorganismos patgenos.

Los receptores Toll de insectos son activados por un ligando proteco endgeno,
que es generado de modo indirecto por el estmulo microbiano.

Los receptores Toll de vertebrados unen directamente al ligando microbiano.

El mecanismo de sealizacin por Toll y TLRs involucra la dimerizacin de dos
receptores inducida por el ligando.
La unin del ligando probablemente induce cambios conformacionales que facilitan
las interacciones receptor-receptor.
La asociacin de los dominios TIR de los receptores activados produce un andamiaje
que puede unir especficamente proteinas adaptadoras que participan en la
sealizacin: MyD88, TIRAP (Mal), TRIF y TRAM. Diferentes combinaciones de
adaptadoras pueden inducir sealizacin distinta.
El resultado de la sealizacin por TLR4 (y otros TLRs) puede ser modificado por
interacciones (crosstalk) con otras vias de sealizacin..
Estas interacciones pueden determinar el perfil de citocinas producido por la clula y
de esta manera regular el tipo de respuesta adaptativa que ser generada.

NOD like receptors (NLRs) y

RIG like receptors (RLRs)

Sensores intracelulares de bacterias , virus y de

seales de peligro, que inducen seales
proinflamatorias

Activacion
Inflamasoma
Mecanismo de activacion de los NLRs: En ausencia de ligando, los NLRs
estan en una conformacin de auto-represin. La unin de ligando cambia la
conformacin, el dominio NATCH media la oligomerizacin, y los dominios
efectores median interacciones protena-protena con moleculas efectoras

Inflamasoma: -NALP3: protena compuesta por NACHT-LRRs

(NLRs y un dominio pyrin)
-Cardinal. Protena que contiene CARD
-ASC: protena que contiene dominio de
reclutamiento y activacin de caspasas
-Caspasa 1

Activacin de los NRLs por componentes bacterianos y derivados

del hospedero

 Regulacin de la formacin del inflamasoma de NLRP3

La activacion de las helicasas RIG-I o MDA5 involucran su asociacin mediada por

CARDs con la adaptadora CARDIF (IPS-1), la cual activa dos vias que llevan a la
activacin de NF-kB e IRF3, para inducir la sntesis de INF tipo I. Esta via sinergiza
con la de TLR 3. El IFN tipo 1 es muy importante en la respuesta antiviral

Sealizacion por Dectin 1, un receptor tipo

lectina C

Figure 2. Distinct myeloid CLRs

1. Mencione tres caractersticas de los PAMPS

2. La importancia de las clulas dendrticas
para el sistema inmune radica en que.

3. El papel de las micobacterias muertas en la

accin del adyuvante completo de Freund
es:
4. Compare la vida media de linfocitos T naive,
efector y de memoria

Componentes de la Inmunidad innata

Barreras

Epitelios
Defensinas
Linfocitos
intraepiteliales

Previenen entrada de microbios

Microbicidas (antibiticos)
LT (secrecin citocinas) (reconocen
glicolipidos asociados a CD-1),
clulas B-1 (anti- lpidos, polisacridos)

Celulas
efectoras
circulantes

Neutrfilos
Monocitos
Macrfagos
Clulas NK
Eosinofilos

Fagocitosis y eliminacin temprana de

microbios
Fagocitosis y eliminacin de microbios,
secrecin de citocinas proinflamatorias
Lisis de clulas infectadas, activacin de
macrfagos.

Proteinas
circulantes

Complemento
Lectina de unin a
manosa (colectina)
Protena C reactiva
Factores de
coagulacin

Mata microbios, opsonizacin,

Quimiotaxis y activacin de leucocitos
Opsonizacin de microbios,
activacin de complemento
Opsonizacin de microbios, activacin de
complemento
Lmite fsico a la infeccin

EPITELIOS:
Las superficies epiteliales intactas constituyen barreras fsicas entre los
microbios del medio externo y los tejidos del husped.
El epitelio produce pptidos que tienen funcin de antibitico natural,
unos de los mejor conocidos son las defensinas.
Las barreras epiteliales y las cavidades serosas contienen linfocitos T
intraepiteliales y el subconjunto B-1 de linfocitos B, respectivamente.
Estas clulas pueden reconocer y responder a microbios comunes.
Los lifocitos T intraepiteliales estn presentes en la epidermis de la
piel y en mucosas. Estos linfocitos tienen generalmente receptores
TCR , que reconocen productos microbianos unidos a molculas
CD1, y no a antgenos del MHC.

DEFENSINAS.- familia de polipptidos catinicos ricos en cistena

presentes en la piel y en los grnulos de neutrfilos que actan como
antibiticos de amplio espectro y matan a una gran variedad de
bacterias y hongos. La sntesis de defensinas se incrementa en una
respuesta inflamatoria por citocinas como IL-1 y TNF-.
Estructuralmente, se han caracterizado defensinas con tres o cuatro
puentes disulfuro (en vertebrados solo se han identificado defensinas
con 3 puentes disulfuro, en plantas e insectos hay molculas con 4)
Defensinas (29-35 aa.)
Defensinas (38-42 aa.)

Neutrofilos

Alta actividad fagoctica y microbicida. Vida media: 8-12 h

Prod. 1x1011/da (Hombre)
Grnulos azurfilos (lisosomas) y
Grnulos especficos (lisozima, colagenasa, elastasa)
Produccin de metabolitos con actividad microbicida: NO y
metabolitos reactivos de oxgeno

Granulocitos o Polimorfonucleares: Neutrfilos, Eosinfilos y Basfilos

Neutrfilos (innata)
Clulas fagocticas profesionales.
Elimina patgenos internalizados.
Grnulos en el citoplasma.
En circulacin y tejidos.
Clula ms abundante en sangre
perifrica (60%).
En homeostsis tienen una vida
media de 12 horas.
Infeccin, primer fagocito reclutado,
una vez activado sobrevive 1-2 das en
el tejido.
Ncleo multi-lobulado.
Lanzan redes de DNA con protenas
de grnulos que proveen una alta
concentracin de molculas
bactericidas alrededor de los
patgenos, NETs.

Granulocitos o Polimorfonucleares: Neutrfilos, Eosinfilos y Basfilos

Eosinfilos

Basfilos
0.01-0.5% en SP.
10-12 um.
Ncleo bi o tri-lobulado.
Grnulos abundantes basoflicos (azulprpura).
Participan durante la inflamacin y la
hipersensibilidad.
Eliminacin a parsitos? (a pesar de su bajo
nmero, los basfilos se encuentran
concentrados en donde hay infecciones
parasitarias)
Activacin de eosinfilos.

2-4% en sangre perifrica, sv 8-10 das.

12-15 um.
Salen de circulacin a tejidos donde
sobreviven 8-12 das sin estimulacin.
Grnulos protenas txicas bacterias, virus y
parsitos(grnulos ms txicos que los de
Neutrfilos o macrfagos para helmintos).
Eliminacin de parsitos
Grnulos acidoflicos (rosa, H&E)
Ncleo bi-lobulado.
Aumentan en enfermedades parasitarias.

Monocito/Macrfagos
Monocitos circulantes migran a tejidos y se diferencian a macrfagos.
Fagocitosis, puede llevar a cabo citotoxicidad intra y extra celular,
reparacin de tejidos, permanecen por ms tiempo en sitios de
reacciones inflamatorias.
Clulas dendrticas: Procesamiento y presentacin de antgeno para
iniciar la respuesta inmune adaptativa.

Fagocitos profesionales (inmunidad innata)

Monocito
Precursor de los macrfagos y de las
clulas dendrticas.
Circulacin 9%
Circulacin 1-3 das en condiciones
homeostticas.
En infeccin migran rpidamente a
tejidos (8-12 horas)
Inflamacin.
Clulas fagocticas de la sangre.
Eliminacin de patgenos.
Presentacin de antgeno.
Ncleo en forma de U.
Reconocimiento a patgenos por
receptores no especficos.

TEJIDOS

SANGRE

Monocito

Macrfago

Clula Dendrtica

Fagocitos profesionales (innata)

Macrfago activado residente en el pulmn

Macrfagos
Clulas fagocticas.
Eliminacin de patgenos, poseen
mecanismos bactericidas.
Residen en los tejidos.
Presentan antgenos.
Inflamacin.
Sobreviven un par de das una vez
activados. Inactivados: meses o aos.
20 um.
Pleiomorfos: su aspecto cambia con su
estado fisiolgico y activacin.
Reconocimiento de patgenos por
receptores no especficos.

Clulas dendrticas
Clulas fagocticas.
Presentadora de antgenos.
Residen en los tejidos, captura de antgeno.
Migran a rganos linfoides.
Inician la respuesta adaptativa.
Clula con prolongaciones
citoplsmicas (dendritas).
Reconocimiento de patgenos por
receptores no especfcos

Desarrollo y funcin de subtipos de monocitos en ratn

inflamacin

Predispuestos
a ser CD

Sin inflamacin

Ly6C marcador adicional de

monocitos inflamatorios

Heterogeneidad de fagocitos mononucleares en el organismo

Distintos modos de activacin de macrfagos durante la

inflamacin

Estados de activacin

Activacin de macrfagos

 Las clulas dendrticas, de las que hay varios

subtipos, tienen la propiedad de ser las nicas
clulas presentadoras de antgeno capaces de
estimular a linfocitos T naive a activarse y proliferar.
Esto parece deberse a la expresin de molculas de
coestimulacin.
Su funcin principal entonces es capturar antgeno a
travs de PRRs en la periferia, activarse y migrar a
rganos linfoides secundarios, en donde presentarn
antgeno para inducir la activacin de linfocitos T
naive los cuales proliferan y se diferencian a
linfocitos T efectores (ya sea cooperadores o
citotxicos).

Human dendritic cells: potent antigen-presenting cells at the crossroads of

innate and adaptive immunity.
Rossi M, Young JW.

Ciclo de vida de clulas dendrticas en una infeccin

Dendritic-cell effector function.

regresar

Clulas NK (asesinas naturales)

Las clulas NK son morfolgicamente definidas como linfocitos grandes.
Constituyen del 5-15% de los leucocitos en sangre perifrica.
Su funcin principal es la citotoxicidad (no restringida por MHC) vs. Clulas
infectadas y clulas transformadas. El mecanismo de citotoxicidad es
idntico a CTLs: granzimas, perforinas, Fas. Tamabin son importantes
secretoras de citocinas como el IFN

Clulas NK (innata)
Provienen del mismo progenitor que los linfocitos T y
B.
Clulas citotxicas.
Reconocimiento por receptores no clonales y
especificos para moleculas propias, que estan
codificados en el genoma

Poseen pequeos grnulos en el citoplasma

Encargadas de eliminar clulas infectadas y anormales
(tumorales). No atacan directamente a agente
infeccioso

La citotoxicidad de las
celulas NK esta regulada
por receptores activadores
y receptores inhibidores.
Los receptores inhibidores
reconocen moleculas del
MHC, y si se encuentran a
su ligando en la superficie
de la celula blanco,
inducen la activacin de
fosfatasas que
antagonizan las seales
provenientes de receptores
activadores. El balance de
seal activadora/inhibidora
determina la citotoxicidad

Proceso de migracin de leucocitos a sitios de inflamacin

La migracion de leucocitos
a los sitios de inflamacion
ocurre de manera
secuencial, dirigida por la
expresion de molculas de
adhesion en las celulas
endoteliales

Sistema del Complemento

Distintas vias de Activacin del

Complemento
Via Clsica
antibody
dependent

Via de las
Lectinas

Via Alterna

antibody
independent

Activation of C3 and
generation of C5 convertase

activation
of C5
LYTIC ATTACK
PATHWAY

Via Clasica
Generacion de la C3-convertasa

Via Clasica
Generacion de la C3-convertasa

C4b2a is C3 convertase
C4b

Via Clasica
Generacion de la C5-convertasa

C4b2a3b is C5 convertase;
it leads into the Membrane
Attack Pathway

C4b

C3b

Via de las lectinas

C4b2a is C3 convertase; it
will lead to the generation of
C5 convertase
MASP1

MBL

Via alterna de
activacin del
complemento

Activacin espontnea de C3

C3 i

C3-activation
the amplification loop
If spontaneously-generated
C3b is not degraded

C3b

C3 b

C3-activation
the amplification loop

C3 b

C3b

C3b

C3-activation
the amplification loop

C3 b

C3b

C3b

C3b

C3-activation
the amplification loop

C3b

C3b

C3b

C3b

C3-activation
the amplification loop

C3b

C3b

C3b

C3b stabilization and

C5 activation
C3b finds an activator
(protector) membrane
This is stable C5 convertase
of the alternative pathway
C3b

C3 b

La actividad de la C5 convertasa genera C5a que

induce inflamacin y C5b que inicia la via ltica

Formacion del complejo de ataque a membrana

Complejo de ataque a membrana

Actividades biolgicas de C3a y C5a (anafilotoxinas)

Mecanismos de defensa innatos

Propiedades de los mecanismos de defensa innatos
Receptores de inmunidad innata. Codificados en lnea
germinal. Reconocimiento de patrones moleculares.
Componentes de la respuesta innata. Neutrfilos, monocitos y
macrfagos, clulas NK, LAK cells. Mecanismos efectores de la
inmunidad innata.
Migracin de leucocitos a sitios de inflamacin.