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MATERIALES
Gasa
Guantes de ltex
Cubrebocas
Portaobjetos
Cubreobjetos
Cristal violeta
Lugol
Alcohol- cetona
Safranina
Azul de metileno
Gradilla
Cultivo bacteriano (cocos grampositivos, bacilos Gram negativos, y levaduras) en
agar y caldo.
Aceite de inmersin
Asa bacteriolgica recta y redonda.
Mecheros de gas
EQUIPO
Microscopio compuesto y Autoclave
I. PROCEDIMIENTO PARA LA TINCIN SIMPLE. Sobre un portaobjeto limpio y
seco se coloca una gota de solucin salina fisiolgica estril y mezclar con una
pequea porcin de la colonia bacteriana a observar. Dejar secar al aire libre, fijar
y adicionar una gota del colorante durante 1 min., enjuagar con agua, dejar secar y
observar al microscopio.
II. PROCEDIMIENTO PARA LA TINCIN DE GRAM.
a) Preparacin del frotis bacteriano extensin y fijacin. Sobre un portaobjeto
limpio y seco se coloca una gota de solucin salina fisiolgica estril y mezclar con
una pequea porcin de la colonia bacteriana a observar. Dejar secar al aire y fijar
a la flama del mechero. Finalmente, realizar la tincin de Gram.
b) Tincin de Gram. Una vez fijado el frote, cubrirlo con cristal violeta y dejar en
contacto sin que se seque durante 1 min. Enjuagar el portaobjetos con agua
destilada, dejar escurrir el exceso y adicionar unas gotas de lugol, dejar en
contacto durante 1 min., sin que se seque. Enjuagar el portaobjetos con agua
destilada, lavar con alcohol-acetona, enjuagar con agua destilada y retirar el
exceso. Cubrir el portaobjetos con el colorante de contraste (safranina), dejar en
contacto durante 1 min, sin que se seque. Enjuagar con agua destilada, secar
suavemente con un papel absorbente o al aire. Observar al microscopio.