Manual de Evaluación II

UNIVERSIDADNACIONALAUTNOMADE MXICO
FACULTADDE ESTUDIOSSUPERIORESZARAGOZA
AUTORES
Mara Teresa Griselda Fuentes Lara
Esperanza Jimnez Castaeda
Juana Rosado Prez
Estela Valencia Platas
COLABORADORES
Adrin Flores Barrera

Sandy Isabel Hernndez Ortega
Guadalupe Nlida Ortega Soto
Javier de Jess Pin Ortega De los
Santos Mendoza Karina
Sptimo Semestre
2012
Manual de Evaluacin de Frmacos y Medicamentos II
A Manera de Prlogo
Generalmente esta parte la escribe una persona reconocida en el mbito a tratar en el texto,
pero a menudo a los lectores, y sobre todo a los estudiantes, esta persona nos parece
completamente lejana o ajena a nosotros y sus palabras no llegan a tener gran influencia. Es
por esto que decidimos aclarar que tambin somos o fuimos estudiantes de la UNAM, tus
compaeros de la FES Zaragoza, que cursamos la materia justo como ests a punto de hacerlo
t.
El Manual de Prcticas de Laboratorio de Evaluacin de Frmacos y Medicamentos II que
ahora tienes en tus manos contiene un acercamiento general a la informacin que como
profesionista requerirs y es resultado de la exigencia de cientficos mejor preparados pero
con una conciencia ms responsable con el planeta
Hoy en da, los cientficos tenemos que estar al da en la legislacin nacional e
internacional y en esta se han dado grandes avances conforme al uso y manejo adecuado de
animales de experimentacin en donde destaca la Regla de las 3R (Remplazar, Reducir y
Refinar). Es por esto que en el presente manual encontrars nuevas tcnicas de
experimentacin como simuladores computacionales, manejo de organismos de rdenes
menores y lotes experimentales de menor tamao que hoy se emplean con mayor frecuencia
en la vida profesional.
En cada prctica encontrars una pequea introduccin cuya nica finalidad es guiarte en
la bsqueda de informacin. Es fundamental comprender que todo el tiempo necesitars
buscar profundizar en el tema lo mayor posible con la idea de que tu educacin depende
principalmente de ti y de lo que quieras lograr. De la misma manera recomendamos que tus
fuentes de informacin sean lo ms actuales posible ya que la ciencia es un mundo en
constante construccin y lo que es cierto hoy puede no serlo del todo maana.
Uno de los objetivos primordiales de este manual es que realices toda esa bsqueda de
informacin antes de la actividad en el laboratorio para que no trabajes a ciegas, por lo cual
se proponen una serie de cuestionarios que junto con la introduccin te guiarn en la
informacin bsica que debes conocer del tema.
Con toda la nueva filosofa de trabajo y una serie de pensamientos de personajes clebres al
inicio de cada prctica se pretende que el estudiante genere una educacin universal y
responsable haciendo honor al lema de la UNAM de Jos Vasconcelos POR MI RAZA
HABLAR EL ESPRITU recordando que los estudiantes de hoy sern los profesionistas del
maana que moldearn al pas y a la sociedad.
Sabemos que la carrera es pesada pero, aunque no lo creas, la humanidad depende de ti as que no te
rindas.
TUS COMPAEROS
FES Zaragoza, UNAM
Mxico 2012
Introduccin
En la presente edicin del Manual de Prcticas de Laboratorio de Evaluacin
de Frmacos y Medicamentos II de la carrera de QUMICA FARMACUTICO
BIOLGICA, se ha tratado de mantener los criterios que en un inicio tuvieron los
profesores del modulo, respetando su valioso trabajo, pero a su vez, se implementaron
algunos cambios que, a nuestro criterio, van de acuerdo a la actualidad, sin que con
ello el alumno se pierda en un mar de informacin.
El principal objetivo de este manual, fue el crear una gua que constituyera una
herramienta eficaz para el aprendizaje, para lo cual, se tuvo el cuidado de que en cada
prctica se incluyeran los siguientes puntos:
Introduccin: Que sustenta los principios bsicos de cada prctica.

Objetivos: Proporcionan directrices a los estudiantes sobre lo que deberan
saber para desarrollar adecuadamente las prcticas.
Metodologa: Clara y precisa que facilita las actividades a realizar.
Figuras, Esquemas y Tablas: Que dan un diseo ms didctico y sencillo.
Cuestionario: Cuya funcin es indicadora del grado de conocimiento
adquiridos previos a la prctica.
Referencias: til como gua para la bsqueda de informacin adicional.
Anexos: Contienen suplementos de los simuladores computacionales as como
el tratamiento de los datos obtenidos.
Se ha procurado que todo el manual tenga el mismo formato para un mejor uso
del mismo, por todo lo anterior, desde nuestro punto de vista, el manual cumple
con su cometido, ser un texto bsico para estudiantes.
LOS AUTORES
FES Zaragoza, UNAM
Mxico 2012
Prctica No.1
Valoracin del Efecto Analgsico

Introduccin
Al considerar que el trmino Analgesia proviene de los vocablos griegos, An que significa sin
y LGESIS dolor, es fcil deducir que un analgsico es cualquier frmaco que administrado de
manera adecuada disminuye o calma la Sensacin de Dolor.
En general, los analgsicos se pueden dividir en dos grandes categoras, segn su naturaleza
qumica, los opioides y los no opioides (o no esteroideos). Los opioides son de exclusiva
prescripcin mdica y su uso es ms frecuente en el paciente hospitalizado, un ejemplo es la
morfina. El nico de stos que puede ser parte del botiqun es la codena. Dicha sustancia es
muy efectiva en dolores agudos de los huesos y las articulaciones, sobre todo despus de
una ciruga.
Los analgsicos no esteroideos comprenden una amplia lista de sustancias. Estos son los
calmantes adecuados para el botiqun por su utilidad en diversos tipos de dolor y la seguridad
con que pueden ser usados a las dosis recomendadas. El prototipo de stos es la aspirina, este
grupo tambin recibe el nombre de Analgsicos Antiinflamatorios No Esteroideos (AINES).
Tabla 1.1 Ejemplos de AINES

DERIVADOS DE:
EJEMPLOS
cido Salicilico
p-aminofenol
cido actico
cido propionico
Fenamatos
cido acetil-salicilico (aspirina).

Acetaminofn.
Indometacina, ketorolaco y diclofenaco.
Ibuprofeno, naproxn y oxaprozina.
cido mefenmico y cido meclofenmico
Piroxicam, fenilbutazona y dipirona
cidos enlicos
Alcanonas
Nabumetona
La mayora de los AINES, son frmacos que tienen otras propiedades como antiinflamatorios
y/o antipirticos (reducen la fiebre).
Los analgsicos Opioides incluyen los derivados de los alcaloides, ya sean naturales o
sintticos. El prototipo de estos es la Morfina, obtenida a partir de la amapola, tambin se
encuentra la Metadona, Meperidina y Propoxifeno (analgsico dbil).

Definicin del Dolor
Para poder entender cmo es que actan estos frmacos, es necesario tener una idea
de lo significa el Dolor, aunque es muy difcil hacerlo, pues es subjetivo.
La definicin ms comnmente aceptada del dolor es la proporcionada por la
Asociacin Internacional para el Estudio del Dolor (Internacional Association for the Study of
Pain, IASP):
"El dolor es una experiencia sensorial y emocional no placentera relacionada con dao
potencial o real del tejido, o descripta en trminos de tal dao. El dolor siempre es subjetivo".
La cuestin de que el dolor siempre es subjetivo es muy importante y enfatiza que el
dolor es una experiencia somatopsquica. Aristteles se refiri a esto cuando describi al dolor
como una "pasin del alma". Esto enfatiza que una variedad de factores diversos pueden
causar o agravar el dolor, lo cual debe considerarse en la evaluacin y tratamiento. Una
definicin clnica ms prctica es:
"El dolor es lo que el paciente dice que es. Es lo que el paciente describe y no lo que los dems
piensan que debe ser. Por lo que el dolor es una respuesta del organismo ante el dao, leve o
severo y se convierte as en un signo de alerta.
La sensacin se desencadena cuando, se producen ciertas sustancias llamadas
Prostaglandinas estas sustancias a su vez generan la accin de enzimas que actan sobre
otros componentes de las clulas. Una de las enzimas que favorece la produccin de
prostaglandinas es la llamada Ciclooxigenasa, de las cuales existe la I y la II. La primera se
encuentra en todos los tejidos mientras que la segunda solo est en el rion y en los sitios en
que ocurre inflamacin y dolor es a este nivel donde actan los AINES.
Accin de los Analgsicos
Los analgsicos bloquean la produccin de las prostaglandinas necesarias para
desencadenar la sensacin del dolor, gracias a que inhiben la accin de las enzimas
denominadas ciclooxigenasas Por eso mismo, los analgsicos tienen tambin propiedades
antiinflamatorias y antipirticas (controlan la fiebre). El Acetaminofn es el nico cuya forma
de accin no afecta las prostaglandinas.
El otro mecanismo de accin es mediante la fijacin a los receptores opiceos
produciendo analgesia; a nivel del SNC bloqueando y modulando las seales dolorosas a los
cordones espinales y cerebro, esta accin es caracterstica del el D-Propoxifeno
(dextropropoxifeno)
Objetivo
Observar y valorar el efecto analgsico del Tramadol en ratn, administrado en dosis
variadas por va intraperitoneal (I.P.) valorando el efecto a diferentes tiempos.
Material, Equipo y Reactivos
MATERIAL BIOLGICO
Cinco ratones adultos (20-30gramos)
MATERIAL Y EQUIPO
Una pinza de mosco con mango de hule (tipo caimn)
Dos jeringas de 1 mL (tipo insulina)
Una balanza granataria con canastilla para pesar animales.
Un reloj
REACTIVOS
Analgsico (Tramadol)
Solucin salina
Metodologa
El mtodo que se utilizar, se basa en producir dolor experimentalmente en
los animales de laboratorio, y medir el tiempo en que tarda en aparecer una conducta o
sntoma indicativo del dolor. Este procedimiento se lleva a cabo en ausencia y en
presencia del analgsico.
Los mecanismos para producir dolor son fsicos (se aplica una pinza sobre la cola
del animal, se coloca al animal sobre una placa caliente o bien se sumerge la cola en agua
a 50 C), y qumicos (se inyecta un agente qumico al animal).
Procedimiento 1
1. Colocar la pinza de mosco (o caimn) a 1 cm de la base de la cola del ratn.
Imagen1.
Forma correcta de
colocar el caimn en
la base de la coladel
ratn
2. La respuesta positiva al dolor se caracteriza por vocalizacin y/o movimientos para

alcanzar o morder la pinza, en un lapso de 10 segundos. En caso contrario, deseche al
anormal y tome otro.
3. Enseguida pese y numere a cada ratn.
4. Administre a cada ratn por I.P. la dosis
del frmaco (asignada aleatoriamente) de
acuerdo a la siguiente tabla:
Tabla 1.2 Dosis de Administracin
RATN
Dosis (mg/Kg)
120
90
60
30
4
5 Control
0.1 mL Solucin Salina/ 10g
Preparar soluciones a partir de la solucin

madre de 25 mg/mL.Tomando en cuenta
que 1mL de solucin tiene 100 unidades.
5. Una vez administrado el frmaco, mida el tiempo.
Manual de Evaluacin de Frmacos y

6. Aplique nuevamente la pinza arterial de la manera antes descrita, a los
50', 60', 70', y 90', y evale la respuesta de cada ratn.
7. Si muerde la pinza (positivo al dolor) no existe analgesia.
8. Si no muerde la pinza (negativo al dolor) existe analgesia.
9. Anote sus resultados en la siguiente tabla:
Tabla 1.3 Resultados por
Equipo
RATN
DOSIS MG/KG
VALORACIN DEL EFECTO

50'
60'
70'
90'
1
2
3
4
5
10. Los resultados de todos los equipos se anotarn en la tabla 1.4.

Tabla 1.4 Resultados por Grupo
DOSIS MG/KG
LOG Dosis
% RESPUESTA
Animales (sin dolor)

Animales Probados
50'
60'
70'
90'
50'
60'
70'
90'
120
90
50
30
11. Con los resultados obtenidos construya una curva de tiempo vs efecto para cada
dosis.
12. Si los resultados lo permiten, calcule la dosis efectiva media (DE50) con el tiempo de
efecto mxime
Procedimiento 2
Imagen 3
Existe una variante del mtodo 1, que consiste en lo siguiente:

1. Calentar aproximadamente 100 mL de agua a 50 C.
2. Colocar un ratn dentro de un cono (o algo parecido), de
tal manera que la cola salga del mismo.
Ratn en
cono con
cola
saliente

3.
Introducir la mitad de la cola por 10 segundos en el agua.
4.
La respuesta positiva al dolor se caracteriza por vocalizacin
y/o movimientos bruscos para extraer la cola del agua o salir del
cono. En caso contrario, deseche al animal y tome otro.
5.
Enseguida pese y numere a cada ratn.
6.
Administre a cada ratn por va I.P. la dosis del frmaco
(asignada aleatoriamente) de acuerdo a la tabla 1.2.

7.
Una vez administrado el frmaco, mida el tiempo.
8.
Repita los pasos del 1 al 3 a los 15', 30', 60', y 90',
9.
Evale la respuesta de cada ratn.
10. Si su actitud no es agresiva, es decir, si no le afecta el agua

caliente, existe analgesia.
11. Anote sus resultados en la tabla 1.3.
12. Los resultados de todos los equipos se anotarn en al tabla
1.4.
13. Con los resultados obtenidos construya una curva de tiempo vs efecto para cada dosis.
14. Si los resultados lo permiten, calcule la dosis efectiva media (DE50) con el tiempo de
efecto mximo.
Cuestionario
1. Describa el papel que juegan las prostaglandinas en el dolor.
2. Cul es el mecanismo de accin analgsica de la aspirina, naproxeno y piroxicam?
3. Cul es el mecanismo de accin del Tramadol?
4.
Qu funcin tienen las Ciclo-oxigenasas 1 y 2, y como afectan al organismo?
5.
Cules son las teoras del dolor y que dice cada una de ellas?
6. Cul es la norma oficial mexicana que aborda el manejo y sacrificio correcto de los
animales empleados en el laboratorio?
7. Realice una gua de manejo y sacrificio para ratas, ratones, conejos y ranas.
Referencias
1. Goodman L.S.& Gilman A. 1996. The Pharmacological Basis of Therapeutics. 9a.
edicin. McGraw Hill. U.S.A.
2. Barastegui, AC, Esquemas y Prcticas de Farmacologa. Espaxs, Espaa 1976.
3. Bertrand G. Katzung, Farmacologa Bsica y Clnica, 8a ed. Manual Moderno, Mxico
2002.
4. NOM-062-Z00-1999 Especificaciones Tcnicas para la Produccin, Cuidado y Uso
de los Animales de Laboratorio.
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Prctica No.2
Bloqueadores de la Placa
Neuromuscular

Introduccin
Durante el siglo XVI los exploradores europeos encontraron que los nativos de la
Cuenca del Amazonas usaban un veneno en la punta de sus flechas que produca
la muerte.
Despus de muchas investigaciones se encontr que el curare es el extracto crudo
activo de varias especies de plantas cuyo principio activo es la D-tubocurarina.
El msculo esqueltico voluntario est inervado por neuronas motoras cuyos
axones son capaces de conducir potenciales de accin a altas velocidades. Al rea del
msculo que yace junto a la terminacin axnica se le conoce como placa motora y a la
sinpsis qumica que existe entre ambas como unin neuromuscular.
Los frmacos que actan en la unin neuromuscular pertenecen a dos grupos:
PRESTNPTICOS:
Frmacos que inhiben la sntesis de acetilcolina por ejemplo hemicolinio.
Frmacos que inhiben el almacenamiento de la acetilcolina en las vesculas por

ejemplo el AH5183.
Frmacos que inhiben la liberacin de acetilcolina por ejemplo la estreptomicina.

POSTSINPTICOS
Frmacos no despolarizantes. Antagonistas competitivos de los receptores

nicotnicos de la acetilcolina. Ejemplo la D-tubocurarina'
Frmacos despolarizantes. Activan los receptores nicotnicos produciendo una

despolarizacin inicial, pero bloquean la accin subsecuente de los receptores.
Ejemplo la succinilcolina.
Estructura de la Succinilcolina
Objetivo
Demostrar experimentalmente el efecto de la succinilcolina
neuromuscular de ratones balb/c.
Material, Equipo y Reactivos.
MATERIAL BIOLGICO
4 ratones balb/c.
MATERIAL Y EQUIPO
12
2 cajas para ratones.

1 rejilla para caja de ratones
4 jeringas de 1mL
Vaso de precipitados de 1L
en la unin
Reactivos
Solucin de succinilcolina
5mg/ml
Solucion salina
1. Por medio del peso del ratn y la concentracin

de la solucin de succinilcolina hacer el ajuste
para administrar al ratn 1 una dosis de 0.7
mg/kg va intramuscular, preferentemente en
una de las patas delanteras.
2. Inmediatamente despus de repetir la prueba
de escalada y registrar el tiempo que tarda el
ratn en caer por no poderse sujetar
correctamente.

10- Sucedido lo anterior repetir la prueba de nado y registrar el tiempo que tarda el ratn en
no poder nadar ms.
11- Repetir la prueba de escalada y de nado hasta que el efecto pas y registrar el tiempo
transcurrido.
12- Continuar de la misma forma con los ratones 2 a 4 uno tras otro (No realizar las
pruebas simultneamente) administrando dosis de 0.9 mg/Kg y 1.1 mg/Kg a los
ratones 2 y 3. Al ratn 4 se le administra 0.1 mL/g de peso de solucin salina (Control).
13- Reportar los resultados en la siguiente tabla:
Ratn
Dosis (mg/kg)
Tiempo de latencia
Tiempo de
recuperacin
1
2
3
Control
Cuestionario
1. Haga un esquema de la placa neuromuscular.
2. Cmo se clasifican los frmacos que actan en la unin neuromuscular? Indique
cada grupo.
3. Describa el mecanismo de accin d la succinilcolina.
4. Menciona el perfil farmacocintico de la succinilcolina.
5. Usos clnicos y efectos adversos de la succinilcolina.
6. lnvestiga las interacciones farmacolgicas de la succinilcolina.
7.Qu pasa al estimular directamente el msculo? Por qu?
Referencias
1. Goodman, L.S. & Gilman A. 1996. The Pharmacological Basis of Therapeutics. 9a.
edition. McGraw HiII. U.S.A.
2. Flores J. 2000. Farmacologa Humana. Masson Barcelona.
3. Rang H, Dale M. y Ritter J. 2000. Farmacologa. 4a. edicin., Harcourt. Espaa
4 . Taylor M. y Reide P. 1999. Harcourt. Espaa.
5. Velasc A. 2003. Farmacologa. McGraw Hill. Espaa.
14

PrcticaNo. 3
AnestsicosLocales

Introduccin.Los anestsicos locales son frmacos que previenen o alivian el dolor al
interrumpir la conduccin nerviosa. Cuando se aplica de manera local en el tejido
nervioso en concentraciones apropiadas, actan en cualquier parte del sistema nervioso
en cualquier tipo de fibra nerviosa. Este grupo de frmacos no produce inconciencia y su
sitio de accin es la membrana celular de las clulas excitables, como la membrana
nerviosa. El uso efectivo y seguro de los anestsicos locales requiere no solo que los
frmacos bloqueen la conduccin de algunos nervios, sino tambin que esta accin
sea rpida y totalmente reversible y que no tenga efectos txico sistmicos mayores.
Mecanismo de accin: El aspecto singularmente mas importante de las acciones de los
anestsicos locales es la reduccin del aumento transitorio de la permeabilidad al sodio
asociada con la fase de ascenso es decir la despolarizacin- del potencial de accin.
Esta reduccin de la permeabilidad al sodio se debe a los efectos de los frmacos sobre los
canales de la membrana del sodio sensibles al voltaje.
Los anestsicos locales son aminas de pKa que varia entre 8 y 9. Por lo tanto puede existir
en solucin como la especie cargada (catinica) o no cargada, y el pH depender del
medio, Fig. 3.1. La lidocana (xilocana) y la procana (novocana) se consideran agentes
prototipo de los anestsicos locales. La lidocana introducida en 1948, actualmente es uno
de los anestsicos locales ms ampliamente utilizados. La estructura se muestra en la Fig.
3.1. se utiliza como anestsico local en procedimientos odontolgicos, en el tratamiento
de disritmias ventriculares (especialmente cuando estas se presentan ene le infarto de
miocardio o en ciruga cardiaca), atenuacin de la respuesta vaspresora (presin arterial
sistmica/presin intracraneana) en la intubacin y en la atenuacin de las
fasciculaciones provocadas por succinilcolina.
Fig. 3.1.
Estructura qumica de un anestsico local
FARMACOCINETICA DE LA LIDOCANA: inicio, rpido: duracin, moderada (60-120 min); T1/2 1.6 h; Vd de
91 L; depuracin, 91 L/min; unin a protena del 65%. Efecto: antiarrtmico. Sedacin, bloqueo nervioso;
disminuye la conduccin de los canales de sodio. Su eliminacin es por metabolismo heptico produciendo
metabolitos activos y txicos; eliminacin renal (10% sin metabolizar). Toxicidad: los efectos adversos de
la lidocana que se observan al aumentar la dosis consisten en vrtigo, convulsiones, desorientacin,
bloqueo cardiaco o hipotensin arterial. Concentracin srica teraputica = 1.5 mg/L
16

Objetivos
Por medio del uso de un programa de simulacin que el alumno aprenda el efecto de los
anestsicos locales al aplicar un estimulo nervioso.
Demostrar el bloqueo del impulso nervioso por la accin de un anestsico local, al aplicar un
estmulo en una preparacin citico-gastrocnemio por medio del uso de un programa de
simulacin.
Que el alumno de manera practica conozca el efecto de los anestsicos locales al aplicar un
estimulo nervioso (qumico, fsico o trmico).

PARTE1 (1 Sesin)
MATERIAL BIOLGICO
NO
MATERIAL Y EQUIPO
Computadora personal con simulador instalado
REACTIVOS
NO
PARTE2 (2 Sesin)
MATERIAL BIOLGICO
Lombrices de tierra.
MATERIAL Y EQUIPO
Termometro
Mechero
Tripie
Vaso de precipitados de 600ml
Aguja
REACTIVOS
Lidocana 2%
Acido clorhdrico 0.1 N
Metodologa
Mtodo 1: Uso del Simulador
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1.
1.1-
DETERMINACION DEL ESTIMULO UMBRAL

Seleccionar Fisiologa del impulso nervioso.
Seleccionar en men EXPERIMENTO: Inhibir efecto nervioso.
Fijar el voltaje a 1.0 V.
Pulsar ESTIMULAR.
Aumentar el voltaje en 0.5 V hasta obtener respuesta.
Guardar el valor umbral.
2.
INHIBICIN CON LIDOCAINA

2.1Borrar grfica anterior.
Seleccionar gotero con lidocana.
Aplicar lidocana entre los electrodos.
Pulsar ESTIMULAR y guardar.
Presionar el botn LAVAR.
Presionar ESTIMULAR y guardar.
1.21.31.41.51.6-
2.22.32.42.52.6-
REPETIR EL MISMO PROCEDIMIENTO EN EL SIMULADOR CON EL CURARE Y EL ETHER,

REGISTRAR Y OBSERVAR LOS CAMBIOS QUE SE EFECTUAN AL ADICIONAR CADA
SOLUCION.
Mtodo 2: Uso de lombrices de tierra.
3.
EFECTO DE LA LIDOCANA EN LOMBRIZ DE TIERRA.
3.1- ESTMULO QUIMICO.

3.1.1- Tomar tres lombrices y colocarlas en una caja Petri.
3.1.2- Colocarles tres gotas de HCL 1.0N en la cola de la lombriz (zona ms anillada), observar la
reaccin de la lombriz.
3.1.3- Despus de haber observado la reaccin de la lombriz colocarle unas gotas de lidocana dejar
reaccionar aproximadamente 5 min.
3.1.4- Pasados los 5 min de efecto de la lidocana adicionar nuevamente unas gotas de HCl 0.1 N
observar y registrar los resultados.
3.2ESTMULO TRMICO.
3.2.1- Calentar agua a 40C.
3.2.2- Colocar tres lombrices en una caja Petri.
3.2.3- Dejar caer de manera continua y con ayuda de una pipeta pasteur agua previamente calentada
a 40 C y observar si reaccionan, de no ser as intentarlo con otras lombrices hasta ver que reaccionen.
3.2.4- Seguir calentando el agua hasta los 50 C.
3.2.5- Colocar unas gotas de lidocana e la cola de las lombrices dejar 5 min a que haga el efecto
anestsico.
3.2.6- Pasados los 5 min verter de manera contante un poco de agua previamente calentada a
50 C.
3.2.7- Observar si reaccionan o no y registrarlo.
18

3.3ESTMULO FSICO.
3.3.1- Colocar tres lombrices en una caja Petri.
3.3.2- Picar la cola de la lombriz (la zona ms anillada y mvil) con una aguja, observar la
reaccin de la lombriz.
3.3.3- Adicionar unas gotas de lidocana y dejar hacer efecto por un aproximado de 5 min.
3.3.4- Tras pasar los 5 min volver a picar la cola de la lombriz con la misma aguja observar
y registrar si hubo o no reaccin.
Cuestionario
1. Mencione brevemente el mecanismo de accin de un anestsico local.
2. La estructura qumica de un anestsico local consta de:
3. En la preparacin citico-gastrocnemio, menciona el sitio de accin del anestsico
local.
4. Que se observa al colocar los electrodos directamente en el msculo?
5. Usos clnicos de los anestsicos locales.
6. Por qu se tiene que descerebrar y desmedular a la rana en la preparacin
citico-gastrocnemio?
7. Defina Umbral de excitacion
8. Al aadir un vasoconstrictor, como la adrenalina a un anestsico loca, la absorcin
aumenta o disminuye.
Referencias
1. William Catterall y Kenneth Mackie. Anestsicos locales. In Goodman and Gilman,
las bases farmacolgicas de la teraputica, 9th ed. (Ardian JUL, Limbird LE,
Molinoff PB, Rudon RW Eds). Ed. McGrawn-Hill. Inc., New York 1996.
2. Cedric M. Anestsia local y anestsicos locales. In farmacologa, 1. Ed. (Smith,
CM., Reynard, AM Eds). Buenso Aires, Argentina, 1993, pp. 219-230
3. Mary J, Myce, Sheldon B, Gertner, Maria Mena Perper. In farmacology,
Lippincotts illustrated Reviews. (Harvey RA., Champe PC Eds) J.B. Lippincott
Company, 1992.
19
PrcticaNo. 4
Anestsicos Generales

Introduccin
La definicin de anestesia general ha sufrido pocas modificaciones desde su descubrimiento
en 1845, con las experiencias de Wells con xido nitroso y de Morton en 1846 con ter.
Clsicamente, se la ha definido como una depresin descendente y controlada de las
funciones del SNC inducidas farmacolgicamente. Otra forma ms prctica de definir la
anestesia general es en funcin de los objetivos que persigue, como un estado reversible de
depresin del SNC, caracterizado por prdida de la conciencia (hipnosis), de la sensibilidad
(analgesia), de la actividad refleja (proteccin neurovegetativa) y de la motilidad (relajacin
muscular).
En la actualidad se habla de estado anestsico, que se define como el resultado de la
accin combinada y dinmica de diversos efectos farmacolgicos que pueden aparecer por la
activacin de diversos grupos de receptores, dando lugar a hipnosis, analgesia, bloqueo de
la unin neuromuscular, amnesia y bloqueo de la respuesta vegetativa al estrs. Dinamismo
(cambio de las necesidades de efecto farmacolgico) y sinergia (potenciacin de los efectos)
son dos aspectos fundamentales en la combinacin necesaria para mantener este estado
anestsico.
Al obtener mayor informacin sobre el mecanismo de accin de los anestsicos generales,
se han diferenciando dos componentes fundamentales en la representacin grfica del
concepto de anestesia moderna. Un componente sera el cortical, que integrara
inconsciencia y amnesia, y el segundo o subcortical, que correspondera a la antinocicepcin
(analgesia) y la estabilidad motora y autnoma (relajacin muscular y proteccin neuro
vegetativa).
A pesar de las investigaciones realizadas, an no est claro el mecanismo de accin
de los anestsicos generales. Se ha considerado que los agentes anestsicos
generales eran frmacos de accin inespecfica que modificaban las propiedades
fisicoqumicas de la membrana neuronal.
Meyer y Overton postularon la teora de un lugar de accin lipofilo y relacionaron la
potencia del anestsico con su solubilidad lipdica.
En la actualidad se piensa que los anestsicos generales ejercen su efecto en la
transmisin sinptica y no en la conduccin axonal. Actuaran fundamentalmente
sobre protenas y no sobre lpidos, de forma que los estudios que se realizan en la
actualidad se dirigen a los mecanismos moleculares de la anestesia.
Una serie de receptores, canales de iones (Ca2+, K+) dependiente de voltaje, canales
de iones dependientes de ligando (GABA, NMDA) y neurotransmisores se han
considerado lugares especficos en los que actuaran los anestsicos generales.
Coeficiente de particin sangre/gas. El agente inhalatorio pasa desde el alvolo a la
sangre para luego llegar al cerebro. Este coeficiente informa de la solubilidad en sangre
(agua) del frmaco y es, por lo tanto, inversamente proporcional a la rapidez de su accin.
Coeficiente de particin aceite/gas. El tejido cerebral es rico en lpidos. Cuanto ms
liposoluble sea el agente, ms se retendr en el SNC. Por lo tanto, es un ndice directamente
proporcional a la potencia del agente anestsico.
21
Etapas de la anestesia
Perodo I: induccin-analgesia. Abarca desde el inicio de la anestesia hasta la prdida de
conciencia. Se comprueba la ausencia de respuesta a las rdenes verbales, no hay prdida de
respuesta al dolor, aunque el grado de analgesia depende del tipo de anestsico empleado.
Perodo II: excitacin o delirio. La respiracin es irregular, hay retencin de la respiracin,
posibilidad de laringospasmo y secreciones. El ritmo cardaco aumenta e incluso puede haber
arritmias. La respuesta a estmulos fsicos est aumentada. Es el periodo de mayor peligro para el
paciente porque pueden aparecer complicaciones, como obstruccin de las vas respiratorias
superiores por relajacin de la musculatura de la faringe, laringospasmo, regurgitacin o aspiracin
del contenido gstrico, acumulacin excesiva de secreciones e hipotensin secundaria a una
depresin miocrdica o a vasodilatacin perifrica.
Los dos primeros perodos constituyen la induccin, que se caracteriza por la prdida rpida de
la conciencia y el paso al plano superficial de la anestesia quirrgica.
Perodo III: anestesia quirrgica propiamente dicha: En este periodo, que incluye cuatro planos, la
respuesta somtica a los estmulos disminuye progresivamente hasta ser nula en la anestesia
profunda. Al principio, el ritmo cardaco y la frecuencia respiratoria son regulares, pero sta va
deprimindose hasta presentar apnea. La frecuencia cardaca se mantiene estable en cuanto al ritmo,
pero se inicia un ligero descenso de la presin arterial; se produce relajacin muscular.
Perodo IV: parlisis bulbar. Se produce por depresin de los centros bulbares hasta el paro
respiratorio, coma y muerte. Esta situacin puede ocurrir por un accidente anestsico al profundizar
la anestesia.
Tipos de anestesia general
Segn el tipo de frmaco empleado para garantizar la hipnosis, se distinguen los siguientes tipos de
anestesia:
Monoanestesia. Se empleaba un solo frmaco. Este tipo era caracterstico en las anestesias
con ter y cloroformo.
Anestesia general balanceada. Generalmente se utiliza un inductor hipntico intravenoso,
se mantiene con un agente inhalatorio y se combinan con opioides y relajantes musculares.
Anestesia intravenosa total. Se emplea propofol como inductor y en perfusin para el
mantenimiento de la hipnosis. Se prescinde por completo de los inhalatorios y se emplean
analgsicos y relajantes musculares.
Anestesia con induccin y mantenimiento inhalatorio total. Se emplea un agente inhalatorio
para la induccin anestsica (generalmente sevoflurano) y se mantiene la hipnosis con l. No
se utiliza propofol ni otros hipnticos intravenosos. Se combina con analgsicos centrales y
relajantes musculares.
Neuroleptoanestesia. Se empleaban neurolepticos (deshidrobenzoperidol) asociados a
opiceos. Mayor efecto antiemtico, despertar ms lento. En desuso.
22
Anestesia analgsica. Se basa en el efecto hipntico colateral de los opioides cuando

se emplean en dosis muy altas. Muy empleada en ciruga cardaca.
Manual de Evaluacin
23
6. A la pecera con halotano agregar otros 0.25 ml de este ANESTESICO y
colocar al otro camarn.

7. Realizar el mismo procedimiento que con el primer camarn.
Cuestionario
1. Cul es el mecanismo de accin de los anestsicos generales?
2. Mencione las etapas de la anestesia general.
3. Qu otros frmacos adems del halotano existen como anestsicos
generales?
4. Qu otras sustancias se administran en conjunto con los anestsicos
generales y cmo funcionan?
5. A qu se refiere el CAM de un anestsico general y que representa?
6. Qu es el coeficiente de particin?
Referencias
1. Goodman & Gillman's, Las bases Farmacolgicas de La teraputica, 10 a
ed., Me. Graw Hill, Mxico 2003

2. BertrandG. Katzung, Farmacologa Basica y Clnica, 8a ed., Manual Moderno,
Mxico 2002
3. C. Barastegui Almagro. Esquemas y Prcticas de Farmacologa. Editorial
Espax, 1976, Barcelona, Espaa.
24
PrcticaNo. 5
Valoracin del Efecto

Anticonvulsivante

Introduccin
El trmino epilepsia, es una enfermedad crnica que se refiere a un grupo de sndromes
del SNC, caracterizado por accesos de descargas neuronales sincrnicas sostenidas, los
cuales son sbitos, transitorios y recurrentes. Afectan los siguientes sistemas:
autonmico, psquico, sensitivo y motor, creando gran variedad de signos y sntomas. El
trmino convulsin se utiliza como sinnimo de epilepsia. La etiologa es multifactorial
(causas metablicas, defectos cerebrales congnitos, prenatales, perinatales (durante el
parto), postnatales y convulsiones provocadas por agentes qumicos).
Como ejemplos tenemos: hipoglucemia, hidrocefalia, infecciones, dao cerebral por parto
prolongado, cisticercosis y las provocadas por pentilentetrazol, etc. Son varios los mecanismos
neurofisiolgicos y bioqumicos que intervienen en la enfermedad: cambios bioqumicos
locales, isquemia, prdida de sistemas inhibitorios vulnerables, descargas sincrnicas de
otras clulas, etc.
Las crisis epilpticas se clasifican en:
1- Parciales (focales y locales)
a. Parciales simples
b. Parciales complejas
c. Parciales generalizadas de tipo secundario
2- Crisis Generalizadas Convulsivas o No Convulsivas
a. Crisis de ausencia
b. Crisis de ausencia atpicas
c. Mioclnicas
d. Clnicas
e. Tnicas
f. Tonico clnicas (Gran Mal) status epilptico
g. Atnicas
Por lo tanto, para tratar la epilepsia se debe descartar si hay un solo tipo de crisis o si se
presentan varios tipos ya que de eso depende un buen tratamiento.
Los anticonvulsivos se clasifican en varios grupos para tratar los diferentes tipos de
crisis:
1- Hidantoinas: hidantoina (Canales de Na+)
2- Iminoestilbenos: carbamazepina (Canales de Na+)
3-Barbitricos: fenobarbital (Mediadores GABA)
4- Desoxibarbitricos: primidona
5- Succimidas: etosuccimida (Canales de Ca2+)
6- Oxazolindionas: parametadiona (Canales de Na+)
7-Benzodiacepinas: diacepam (Mediadores GABA)
8-Otros grupos: cido valproico (Canales de Na+)
26

Los ms utilizados para crisis generalizada son las hidantoinas y la carbamazepina y para
las ausencias la etosuccimida. Para el estado epilptico el ms recomendable es el
Diazepam.
Estructura del Diazepam

El mecanismo de accin de los anticonvulsivos (del tipo benzodiacepinas) es disminuir
la entrada de calcio por bloqueo de los conductos de sodio (despolarizacin) y potenciar
los efectos inhibitorios debido a la estimulacin de vas GABAergicas por aumento de
descargas de abertura de los canales de cloro.
Para la valoracin de nuevos medicamentos, se utiliza el pentilentetrazol para crear crisis
convulsivas. Esto provoca hipoxia por espasmo vascular lo que ocasiona cambios
degenerativos en la corteza cerebral debido al antagonismo fisiolgico.
Objetivos
Demostrar el efecto anticonvulsivante del diazepam en las convulsiones

producidas por el pentilentetrazol,
Observar que tipo de convulsiones produce el pentilentetrazol.

MATERIAL BIOLGICO
Dos ratas Wistar
MATERIAL Y EQUIPO
Dos jeringas para insulina
REACTIVOS
Solucin de Pentilentetrazol de 65 mg/mL

Diazepam de 5 mg/mL
27

Metodologa
1. Pesar cada rata y marcarlas, una se usar para probar el efecto preventivo y en la otra el
efecto curativo del diazepam.
2. En la rata marcada como 1,administrar diazepam 2mg/kg va intraperitoneal
3. Esperar 20 minutos.
4. Aplicar una dosis de pentilentetrazol 64mg/kg va intraperitoneal.
5. Observar si se presenta algn tipo de convulsin.
6. En caso de que ocurra se anota la latencia del pentilentetrazol y tipo de convulsin.
7. Para observar el efecto curativo del diazepam, administrar a la rata marcada como 2, una
dosis de 64mg/kg de pentilentetrazol va intraperitoneal.
8. En cuanto aparezca la convulsin aplicar la dosis de diazepam 2mg/ kg va intraperitoneal.
9. Tomar el tiempo de latencia para el inicio del efecto del diazepam.
10. Realizar el sacrificio de los animales con ayuda de cloroformo.
11. Anote sus resultados en las siguientes tablas
Tabla 1: Anlisis del efecto Preventivo
1. Eq Tiempo de latencia del Pentilentatrazol
uip
o
1
2
No Convulsion
3
4
5
6
Tabla 2: Anlisis del efecto Anticonvulsivo

Equipo Tiempo de latencia del Diazepam
1
2
3
4
5
6
28
No Convulsion

CUESTIONARIO
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
Defina estado epileptico

Escriba la clasificacion de las crisis convulsivas
Escriba la clasificacin de los anticonvulsivos
Escriba y analice el mecanismo de accin de los anticonvulsivos
Cuales son los efectos adversos generals de los anticonvulsivantes?
Describa la farmacocintica del Diazepam
Cules son los efectos adversos del Diazepam?
Cules son los usos clnicos del Diazapam y del Pentilentetrazol?
Cules son las interacciones del Diazepam?
Referencias
1. Hardman, J. Limbird L. Molinof P. Ruddon R. and Goodman A. 1996. Goodman & Gilman. Las
Bases Farmacolgicas de la Teraputica. 9 Edicin. Vol. 1. Ed. McGraw Hill Interamericana.
E.U.
2. Katzung, B. 2001. Farmacologa Bsica y Clnica. 8 Edicin. Ed. Manual Moderno, Mxico.
3. Smith, C. Reynard A. 1993. Farmacologa. Ed. Mdica Panamericana. Argentina.
29
PrcticaNo. 6
Frmacos Cardiotnicos
31

Objetivo
Se alcanzar y demostrar el efecto txico de un glucsido cardiaco (digoxina)
aplicado al corazn de la pulga de agua
Se demostrarn los efectos inotrpicos positivos y cronotrpico negativos de la
digoxina aplicada al corazn de la pulga de agua
Se compararan los efectos producidos de la digoxina con otras substancias
cardiotnicas administradas a la pulga de agua
PARTE 1 (1 Sesin)
MATERIAL BIOLGICO
NO
MATERIAL Y EQUIPO
Computadora personal con simulador instalado
REACTIVOS
NO
PARTE 2 (2 Sesin)
MATERIAL BIOLGICO
Pulgas de agua (1 bolsa por grupo)

MATERIAL Y EQUIPO
Microscopio
Cronometro
1 Caja de Petri
2 Pipetas Pasteur
2 Portaobjetos
6 jeringas de 1 ml
REACTIVOS
32
Digoxina
Epinefrina
Atropina
Pilocarpina
Solucin de cloruro de sodio al 2% p/v
Solucin de cloruro de potasio al 2% p/v
Solucin de cloruro de calcio al 2% p/v
33

Contar los latidos por 15 segundos.
2.6 Evale cada substancia con una pulga diferente y registre el efecto
presentado en una tabla indicando si el efecto fue positivo o negativo.
Substancia Efecto
Digoxina
Epinefrina Atropina
Inotropismo Cronotropismo
Pilocarpina
Calcio
Sodio
Potasio
Cuestionario
1.
Qu es un cardiotnico y que un glucsido
cardioactivo, anotar ejemplos?
2.
Cul es la relacin estructura -actividad de los
glucsidos cardioactivos?
3.
Qu diferencias farmacocinticas existen entre los
digitlicos?
4.
Qu parte de la estructura del digitlico le da las
propiedades farmacocinticas?
5.
Cul es el mecanismo de accin de los
glucsidos cardioactivos y como se manifiesta en la
funcin cardiaca?
6.Cules son los efectos txicos de los glucsidos cardioactvos?
7.Cules sern los usos o indicaciones de los glucsidos
cardioactivos?
8. Haga un esquema de la anatoma de la pulga de agua, localice el corazn
e indique cuntos latidos realiza por minuto
Referencias
1.
Goodman & Gillman's, Las bases Farmacolgicas de
La teraputica, 10" ed., Mc. Graw Hill, Mxico 2003
2.
Bertrand G. Katzung, Farmacologa Bsica y Clnica,
8a ed., Manual Moderno, Mxico 2002
3.
Barastegui, AC, Esquemas y prcticas de
Farmacologa. Espaxs, Espaa 1976.
34
PrcticaNo. 7
Diurticos

Introduccin
Los diurticos (o salurticos) son frmacos que incrementan la produccin de orina (diuresis)
y la excrecin de sodio (Na). Actan principalmente sobre el rin, inhibiendo la reabsorcin
de NaCI y agua, aumentando por tanto la excrecin urinaria de estas sustancias. Se utilizan
principalmente para el tratamiento del EDEMA.
Fisiologa De La Nefrona
Los riones controlan el volumen del fluido extracelular ajustando la excrecin de NaCI y
H20. Diariamente los riones filtran ms de 22 moles de Na +, los cuales se reabsorben por
los tbulos renales, para mantener el equilibrio.
El cuerpo mantiene la presin sangunea a expensas del volumen del fluido extracelular.
Cuando la ingesta de NaCI es mayor que su eliminacin (p.ej. en falla congestiva cardiaca
o falla renal) se desarrolla edema.
La reabsorcin de sodio se debe primeramente a la adenosin trifosfatasa (ATPasa) localizada
en la parte lateral de la membrana de las clulas epiteliales del nefrn. La bomba de Na+/K+
necesita energa para intercambiar un Na + por cada dos K+, manteniendo una baja
concentracin de Na+ y alta concentracin de K+ en el interior de la clula. En el lado de la luz
tubular, existen vas pasivas para el movimiento del Na+ electroqumico del lumen a la clula.
Esas clulas son las bases fisiolgicas de la accin diurtica.
Farmacologa De Los Diurticos.
EL primer acierto de los diurticos es la reduccin del edema por reduccin del volumen
del fluido extracelular, y para que esto ocurra, la secrecin de Na+ deber exceder a su ingesta.
En principio, los diurticos previenen la entrada de Na + a las clulas tubulares. Una vez que
el diurtico entra al fluido tubular, el sitio de la nefrona donde acta determina su efecto. Es
decir, el sitio de accin determina tambin que otros electrolitos, adems del Na+, sern
afectados.
Todos los diurticos, excepto la ESPIRONOLACTONA, ejercen sus efectos en el lado luminal
de la nefrona. Por eso deben alcanzar el fluido tubular para tener efecto. Por ejemplo, el
manitol lo hace por filtracin en los glomrulos; los dems diurticos, como estn fuertemente
enlazados a las protenas, se filtran escasamente, llegando al lumen por secrecin a travs del
tbulo proximal (va secretoria de bases y cidos orgnicos).
El bajo flujo sanguneo renal o falla renal, disminuyen la eficacia de los diurticos, as como
drogas que compiten por la bomba secretoria como el PROBENECID para las drogas cidas, o
la CIMETIDINA para drogas bsicas. Diurticos Con Accin En El Tbulo Contorneado
Proximal.
El tbulo proximal determina el grado de liberacin de Na+ y H20 a zonas ms lejanas de la
nefrona. Una amplia variedad de transportadores acoplan el paso del Na + al interior de la
clula, al movimiento de aminocidos, glucosa, fosfato, y otros solutos,
MANITOL: ES un diurtico osmtico no metabolizable y es filtrado haca el espacio tubular
incrementando la osmolalidad del fluido tubular. Esto trae como consecuencia reabsorcin
aumentada de fluido resultando en excrecin aumentada de agua acompaada de un poco
de Na+.
36

Inhibidores De La Anhidrasa Carbnica (Acetazolamida)
El bicarbonato se reabsorbe en el tbulo proximal. El in H+ es secretado al lumen en
donde se une con bicarbonato filtrado (HC03+) para formar H2C03 el cual es convertido en
H20 y C02 por accin de la anhidrasa carbnica. EL C0 2 difunde al tbulo proximal en donde
se combina con H20 para formar H2C03, el cual a su vez forma H+ y HC03+. Este ltimo
sale del tbulo hacia la sangre, mientras H+ es secretado nuevamente a la luz tubular,
resultando en reabsorcin de HC03+. Si la actividad de la anhidrasa carbnica se reduce, la
reabsorcin de HC03+ tambin disminuye y la sale al tbulo proximal en cantidades
mucho ms grandes. Aunque el Na + es el principal catin que acompaa la salida del
HC03+ del tbulo proximal, se reabsorbe ampliamente en el tbulo distal el intercambiado
por K+. Por lo tanto, la ACETOLAMIDA causa principalmente un incremento de HC03+\ K+ y
H20 urinario.
Diurticos De Asa
Actan principalmente bloqueando el co-transportador de Na+/K+/Cr en la membrana
apical de la rama ascendente del asa de Henle. Como en este sitio se concentra y
diluye la orina, los diurticos de asa disminuyen al mximo la concentracin y dilucin
urinaria. En esta parte ascendente del asa se reabsorbe Ca ++ y Mg++, proceso dependiente
de la reabsorcin normal de Na+ y CI-. Por lo tanto los diurticos de asa incrementan la
excrecin urinaria de agua, Na+, K+, Ca++ y Mg++. EJEMPLOS: Furosemida, bumetanida y
cido etacrinico.
Diurticos De Tbulo Contorneado Distal.

Tiazidas y drogas anlogas inhiben el transporte de Na+ y CI- a nivel de tbulo distal. A
comparacin de los diurticos de asa, poseen accin diurtica suave o moderada
debido a que en esta parte del glomrulo se reabsorbe menos Na+. Adems, si los rangos de
filtracin glomerular declinan, menos fluido llegar al tbulo distal y las tiazidas tendrn un
impacto mnimo sobre la excrecin de agua y Na+.
EL uso de la tiazidas incrementa la reabsorcin de fluidos y solutos en el tbulo proximal.
Se manifiesta un incremento de la absorcin de Ca++ y cido rico en el tbulo proximal.
Diurticos de Tbulos Colectores.
ESPIRONOLACTONA: ES un antagonista competitivo de la aldosterona. Bloquea la
reabsorcin de Na estimulada por aldosterona y la excrecin de K+ y H+ en tbulos distal y
colector. Tambin reduce la amoniognesis estimulada por aldosterona a lo largo del
nefrn.
37

AMILORIDE Y TRIAMTERENE: Inhiben el canal de Na+ en la membranas apicales de los tbulos
distal y colector. Debido a que en esta zona de la neurona la secrecin de K+ y H+ se explican
principalmente por los gradientes electroqumicos generados por la reabsorcin de Na+, se
reduce el transporte de K+ e H+ haca la orina.
El estudio de estos frmacos generalmente se basa en la determinacin de la diuresis
y en los electrolitos eliminados al administrar estos frmacos en animales de
experimentacin. Para ello se recomienda usar ratas o perros debido a que su patrn de
excrecin urinaria es ms regular. Los mtodos que nicamente miden diuresis son
cualitativos, como el usado en esta prctica. Existen otros mtodos para estudiar
mecanismos y sitio de accin de estos medicamentos (mtodos de aclaracin renal,
mtodos de diuresis interrumpida, mtodos de micropuncin y mtodos de microperfusin en
segmentos de la nefrona).
Objetivo
Demostrar la diuresis en ratas producida por frmacos o sustancias con propiedades
diurticas.
MATERIAL BIOLGIO
1 Rata Wistar de 150-200 gramos de peso, de preferencia del mismo sexo y edad.
MATERIAL Y EQUIPO
Jaula Metablica
Probeta Graduada
Balanza Granataria
Jeringas de 1 y 5 mL
REACTIVOS
Solucin fisiolgica (NaCI 0.9 %), que se utiliza como control negativo.
Furosemida (Control positivo)
Metodologa
Pesar e identificar a cada animal de experimentacin.
2. Al grupo control negativo (sin tratamiento) se administra 25 mL/kg de solucin salina
va I.P.
3. Al grupo control positivo (con tratamiento) se le administrar por va I.P. 25 mL/kg de
solucin salina ms una dosis de furosemida (20 mg/kg de peso).
1.
38
Se colocan las ratas en jaulas metablicas durante 2.5 horas.

Se mide el pH y el volumen de orina excretada cada 15 minutos, durante las 2.5
horas.
6. Se determina la orina acumulada durante las 2.5 horas.
7. Terminado el experimento, se retiran los animales de las jaulas metablicas.
8. Determinar y tabular: pH, densidad y volumen de cada una de las muestras.
4.
5.
CLCULOS:
Realizarlos siguientes clculos para cada animal de experimentacin:
Excrecin urinaria:
Accin Diurtica:
39

Cuestionario
El mtodo usado en este experimento permite determinar la diuresis de
diferentes frmacos,
es suficiente para evaluar el efecto diurtico? Diga que otro tipo de anlisis realizara y porqu.
2.
Qu otros mtodos existen para investigar el mecanismo de accin de los
diurticos?
3.
La eleccin de la rata como animal de experimentacin, es correcta?
Fundamente su respuesta.
4.
Esquematice el mecanismo de accin de la furosemida.
5.
Indica los factores fisicoqumicos involucrados en la accin de los diurticos en
general.
1.
Referencias
FLISER D, SCHROTER M, NEUNECK M, RITZ E. Coadminis-tration of
thiazides increases the efficacy of loop diuretics even in patients with
advanced renal faiiure. Kidney int 199;446(2):482-8.
2.
SUKI WN, STINEBAUGH BJ, FROMMER JP, EKNOYAN G. Physiology of
diuretic action. En: Seldin DN, Giebisch G. eds. The kidney: physiology and
pathophysiology. New York: Raven, 1985:2127-62.
3.
BYERS J, GOSHORN J. How to manage diuretic therapy. Am J Nurs
1995;95(2):38-43.
4.
MELILLO L. Diuretic plants in the paintings of Pompeili. Am J
Nephrol 1994;14(4- 6):4235.
VAN MEYEL JJ. Comparison of the diuretic effect and absorption of a
single dose of furosemide and free and the fixed combinations of furosemide
and triamterene in hearthy male adults. EUR J CLIN PHARMACOL
1990;39(6):595-7.
6.
KANG MJ, YOON WA, KIM ON, LEE MG. Effects of water deprivation for
48 hours on the farmacodynamics of furosemide in rats. J Clin Pharm Ther
1995;20(1): 13-21.
7.
Goodman & Gillman's, Las bases Farmacolgicas de La teraputica,
10a ed., Me. Graw Hill, Mxico 2003
8.
BertrandG. Katzung, Farmacologa Basica y Clnica, 8a ed., Manual
Moderno, Mxico 2002
9.
C. Barastegui Almagro. Esquemas y Prcticas de Farmacologa.
Editorial Espax, 1976, Barcelona, Espaa.
10.
Cairo M., Fresneda M.V., Campos D. Determinacin del efecto
diurtico de Cymbopogon citratus (DC) Stapf (Caa Santa). Rev. Cubana
Plant. Med. 1(3): 13- 17, sept.- dic. 1996.
11.
Nedi, T. ET AL Diuretic effect of the crude extraets of CARISSA EDULIS in rats.
Journal
1.
40
Prctica No 8
Servicio social.
Elabor: De Los Santos Mendoza Karina
Asesora: Jimnez Castaeda Esperanza
Determinacin Espectrofotomtrica
de sodio en orina.

Introduccin
Los diurticos aumentan la excrecin urinaria de agua y electrolitos y se administran para
reducir el edema asociado a la insuficiencia cardaca, el sndrome nefrtico o la cirrosis
heptica. Algunos diurticos se administran a dosis ms bajas para reducir la presin arterial
elevada.
Los diurticos de asa, o diurticos de techo alto, como la furosemida, son los ms
potentes y rpidamente producen una diuresis intensa dependiente de la dosis de duracin
relativamente corta. La furosemida por va oral produce diuresis en los 30administracin,
con el efecto diurtico mximo en 1-2 horas. La accin diurtica dura -60 minutos de l4-a 6
horas. La furosemida intravenosa produce diuresis a los 5 minutos, con el efecto diurtico
mximo en 20-60 minutos y diuresis completa en 2 horas.
Los diurticos de asa inhiben la reabsorcin desde el asa ascendente de Henle en el tbulo
renal, y son tiles sobre todo en situaciones en las que es necesaria una diuresis eficaz y rpida,
como la reduccin del edema pulmonar agudo secundario a insuficiencia ventricular izquierda.
Tambin se utilizan para tratar el edema asociado a enfermedades renales o hepticas y se
administran a dosis altas en el tratamiento de la oliguria por insuficiencia renal crnica. Los
diurticos de asa pueden ser eficaces en pacientes que no
responden a los diurticos tiacdicos.
MECANISMO DE ACCION:
Los diurticos de asa provocan la excrecin del 20-25% del sodio (Na+) filtrado por los
riones, de ah que tambin se les conozca como diurticos de alto techo. Actan
fundamentalmente sobre la rama
ascensodio (Na+) y cloruro (Cl-) desde el tbulo dente del asa de Henlerenal hacia el tejido
intersticial (reabsorcin , inhibiendo el transporte de tubular). Esto tiene un efecto adicional,
ya que al llegar ms electrlitos a la parte distal de la nefrona, tambin se reduce la
reabsorcin de agua, como consecuencia del aumento de la presin osmtica de la orina.
Los diurticos del asa inhiben el sistema co-transporte sodio-potasio-cloruro, situado en la
membrana luminal de las clulas del asa gruesa ascendente, esencial para la reabsorcin
fisiolgica de estos electrlitos. Los diurticos del asa parecen ser responsables del desarrollo
de una accin venodilatadora, aunque se ignora si sta es de tipo directo o indirecto. Se debe
a la liberacin de algn factor renal (posiblemente, prostaglandinas). El efecto venodilatador
podra contribuir significativamente al efecto diurtico de estos frmacos.
Mecanismo de accin de los diurticos de asa
42
Reduccin de la reabsorcin tubular de sodio

El siguiente mtodo sirve para determinar sodio en orina mediante la precipitacin
del
sodio del sobrenadante libre de protenas como triple sal. La disminucin resultante de la
absorbancia de la mezcla de reactivo de color -sobrenadante es proporcional al contenido
de sodio de la muestra, por lo cual al determinar el sodio excretado por una rata a la que se
le administre un diurtico de asa podremos determinar el tiempo mximo de diuresis.
Objetivo:
Determinar el tiempo mximo de diuresis, cuantificar el sodio en orina y con esto demostrar el
mecanismo de accin de los diureticos de asa.
Material
Tres pipetas de 0.5ml Una pipeta de 5ml
Doce tubos de ensayo Gradilla.
Orina de rata (Prctica 7: diurticos)
Espectrofotmetro
Centrifuga
Solucin de acetato de uranilo, 20g/100ml de agua y acetato de zinc

60g/100ml de agua con cido actico (4ml y 2ml respectivamente)etanol
(200ml).
Material biolgico
Equipo:
Reactivos:
Reactivo de color:
Reactivo precipitante:
Solucin acuosa de cido tricloroactico (TCA) al 25%
Estndar de sodio:
Cloruro de sodio, 4,091g/L en solucin de cido tricloroactico.Equivalente

a 140mmol/L.
Agua destilada.
43

Preparacin de los reactivos:
Reactivo de color (1L)
De acuerdo a las proporciones ya mencionadas pesar 50g de acetato de uranilo y
disolver en 20ml de agua en ebullicin con 0.8ml de cido actico.
Por otra parte pesar y disolver 150g de acetato de zinc en 250ml de agua en
ebullicin con 0.4ml de cido actico.
Una vez preparadas las dos disoluciones mezclar ambas y colocarlas a ebullicin
hasta que sea una disolucin transparente de color amarillo homogneo.
Enfriar la mezcla y en caso de observar algn precipitado filtrar, posteriormente la
cantidad re sultante de esta medirla en una probeta y adicionar una cantidad igual
de etanol.
Nota: En caso de que das posteriores se observe un ligero precipitado filtrar o
calentar nuevamente hasta disolverlo.
Precaucin: No se almacene en refrigeracin ni se exponga a la luz.
Reactivo precipitante (100ml)
Pesar 25g de cido tricloroactico y disolver en 100ml de agua destilada.
Estndar de sodio (20ml)
Pesar con exactitud 0.08g de Cloruro de sodio grado analtico y disolver en un
matraz volumtrico de 20ml y aforar con agua destilada.
Metodologa:
Enjuagar todo el material con poca agua destilada y secar perfectamente con
papel limpio.
De la orina recolectada de la prctica de diurticos tomar 0,5ml de cada tiempo
con una pipeta y colocarla en un tubo de ensayo
cada una
teniendo la precaucin de etiquetar correctamente, posteriormente con otra

pipeta agregar 0,5ml del reactivo precipitante y agitar vigorosamente, despus
dejar reposar por cinco minutos a temperatura ambiente. Transcurridos los
cinco minutos centrifugar por cinco minutos ms (Para precipitar protenas).
44
Por otra parte etiquetar 11 tuboscon las siguientes leyendas, RB, S, U 15, U30, U45, U1h,
U1h15, U1h30, U2h, U2h30y UC-(Reactivo blanco, estndar, muestra al minuto 15..muestra a
las 2h y media y muestra control negativo respectivamente). Al tubo RB adicionar 0,5ml de
agua destilada, al S 0.5ml del estndar de sodio y a todos los U 0,5ml de la muestra
desproteinizada quele corresponde. Ya que cada tubo tenga lo correspondiente adicionar
sin excepcina todos los tubos 2,5ml del reactivo de color y agitar vigorosamente para
homogenizar (ver tabla de abajo), realizado todo esto dejar reposar por 10 minutos a
temperatura ambiente y centrifugar a alta velocidad por 5 minutos ms.
Para obtener la cantidad de sodio en orina es necesario ajustar el espectrofotmetro con

agua destilada a 0 de absorbancia con una longitud de onda de 420nm. Luego leer el
contenido de los tres tubos ajustando entre lectura y lectura con agua.
Los resultados registrados sustituirlos en la siguiente frmula:
Mmol de Na
x 140
De los resultados obtenidos graficar la cantidad de sodio en mmol excretados, por el

tiempo en el que se tom la muestra y analizar los resultados con respecto al control
negativo.
Ejemplo de cmo se deben organizar los resultados y como graficarlos:
Tiempo
(minutos)
Absorbancia
mmol Na
Absorbancia
RB
15
0.84
120.65
30
0.816
129.09
45
0.719
137.88
60
0.822
126.98
90
0.836
122.06
120
0.837
121.7
150
0.837
121.7
Control
negativo
0.903
98.49
1.183
0.785
Cuestionario:
1.- Qu resultados se esperaran obtener al cuantificar el sodio despus de administrar un
diurtico de asa?
2.- Porqu con los diurticos de asa hay un incremento de sodio en
orina? 3.- Qu tipo de protenas se pueden encontrar en la orina?
4.- Aparte del sodio que otro tipo de electrolitos se encuentran en la orina de forma cotidiana?
Bibliografa:
46
1.
A Photometric Method For The Estimation Of Sodium And Its Application

To Serum Sodium Determinatione. C. Butterworth. J. Clin. Path, (1951),
4, 99.
2.
C.Barastegui Almagro. Esquemas y Prcticas de Farmacologa. Editorial

Espax, 1976, Barcelona, Espaa.
3.
http://ocw.uv.es/ciencias-de-la-salud/farmacologia-clinica-aplicada-a-laenfermeria/l eccion24.diureticos.pdf
PrcticaNo. 9
Efectode los Frmacos

Hipoglucemiantes

Introduccin
Una de las enfermedades ms importantes a nivel mundial, que es un serio problema de
salud publica y que ataca a toda sociedad sin importar su estado de desarrollo de la
DIABETES MELLITUS, el 8.2% de la poblacin entre los 20 y 69 aos de edad la padecen
y cerca del 30% de estos individuos afectados desconoce si es diabtico. Adems ocupa
el tercer lugar de la mortalidad.
En condiciones normales el control del metabolismo de los carbohidratos se da por un
antagonismo fisiolgico entre dos hormonas: la insulina, que disminuye la glucemia
mientras que el glucagn la aumenta. Ambas son secretadas por el pncreas en lugares
diferentes, la insulina en las clulas y el glucagn en las clulas de los islotes de
Langerhans.
La DIABETES MELLITUS TIPO I (Diabetes Juvenil), se desencadena por la destruccin
de las clulas produciendo carencia de insulina y por lo tanto hiperglucemia, por lo que,
quienes la padecen son candidatos a la administracin de insulina como terapia de
sustitucin. La Diabetes Mellitus tipo II se desencadena por factores metablicos
incluyendo una funcin deficiente de las clulas beta y la resistencia a la insulina en musculo
esqueltico, tejido adiposo e hgado, actualmente se sabe que su origen es gentico. El
tratamiento en este caso se sabe que es con el uso de hipoglucemiantes orales con
diferentes mecanismos de accin.
Secretagogos de insulina: nitaglenida, repaglinida y sulfonilureas (estimulan

a las clulas beta del pncreas para incrementar la liberacin de insulina)
Antihiperglucemiantes: inhibidores de alfa glucosidasas, (retrasan la
absorcin de los carbohidratos en la luz intestinal), las biguadinas y las
tiazolidinedionas (aumenta la sensibilidad de la insulina).
En el caso de la prctica nos enfocaremos a dar las caractersticas generales de la insulina que
es el frmaco a evaluar como hipoglucemiante.
La insulina es una protena sintetizada en las clulas beta en los islotes de Langerhans
en el pncreas y est formada por dos cadenas peptdicas (A con 21 aminocidos, B con
30) unidas por dos puentes disulfuro. Su funcin fisiolgica es promover la captacin de
glucosa por las clulas de todos lo rganos, pero los sitios especiales para el
almacenamiento de sta, es el hgado, tejido adiposo y musculo esqueltico.
Su mecanismo de accin se da cuando se une a un receptor en la membrana celular,
desencadenndose una seria de fosforilaciones incluyendo la del transporte de glucosa que al estar
fosforilado promueve la captacin de sta al interior de la celular.
Fig.7.1 Mecanismo de
accin de la insulina a
nivel celular y molecular
48

Metodologa
En este procedimiento la evaluacin del frmaco (insulina) se lleva acabo comparando el
efecto hipoglucmico en el animal experimental contra controles, un positivo (previamente
cargado de solucin glucosada) y un negativo manipulado igual que el de experimentacin y
C+, en vez de solucin glucosada se le administra el mismo volumen de solucin salina. A
ningn control se le administra insulina. Esto es con el fin de que se vea el efecto del frmaco
administrado exgenamente contra el efecto ms lento que se observar de la insulina
endgena previa estimulacin por la carga de glucosa (control (+) ) y el control (-) servir
como referencia de la concentracin de glucosa normal y para asegurar que la disminucin
de glucosa en sangre del animal experimental se debe al frmaco y no a la manipulacin.
1.- Marcar las ratas del 1 al 4. Tomar una muestra a tiempo cero antes de manipular al
animal, para obtener el valor basal de glucosa. La muestra se toma realizando una
incisin en la arteria caudal de la cola de la rata.
2.- La rata marcada ser utilizada segn la siguiente indicacin
Rata 1 (control -): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin salina.
Rata 2 (control +): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin glucosada.
Rata 3 (experimental): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin glucosada.
Rata 4 (experimental): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin
glucosada. 3.- Tomar muestra cada 10 minutos hasta los treinta minutos.
4.- Para observar la absorcin de glucosa; despus de la ltima toma administrar el
volumen correspondiente de solucin salina, insulina o matarique, dependiendo del
nmero de rata:
Rata 1: Administrar el volumen correspondiente de solucin salina va subcutnea.
Rata 2: Administrar el volumen correspondiente de solucin glucosada va subcutnea.
Rata 3: Administrar 3 unidades de insulina va subcutnea.
Rata 4: Administrar el volumen correspondiente de la infusin de matarique.
5.- Posterior a esta administracin tomar muestras cada 15 minutos hasta los 90 minutos o hasta
alcanzar el nivel basal de glucosa.
6.- La determinacin de la concentracin de glucosa se realiza por medio de tiras reactivas (ver las
instrucciones para correcta lectura del resultado), la lectura la deber realizar una sola persona. Con
los resultados obtenidos construya una grfica de concentracin de glucosa contra el tiempo.
50
Anexo
Prctica
3: Simulador
52
Anexo
Prctica
3: Simulador
53
Anexo
Prctica
3: Simulador
54
Anexo
Prctica
3: Simulador
55
Anexo
Prctica
3: Simulador
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Anexo
Prctica
3: Simulador
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Anexo
Prctica
3: Simulador
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Anexo
Prctica
3: Simulador
59
60
Anexo
Prctica
6: Simulador
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Anexo
Prctica
6: Simulador
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Anexo
Prctica
6: Simulador
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Anexo
Prctica
6: Simulador
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Anexo
Prctica
6: Simulador
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Anexo
Prctica
6: Simulador
66
Anexo
Prctica
6: Simulador
67
Anexo
Prctica
6: Simulador
68
69
Janet Edith Santamara Vquez
Anexo Pr
70

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UNIVERSIDADNACIONALAUTNOMADE MXICO

Adrin Flores Barrera

Manual de Evaluacin de Frmacos y Medicamentos II

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Introduccin: Que sustenta los principios bsicos de cada prctica.

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Tabla 1.1 Ejemplos de AINES

cido acetil-salicilico (aspirina).

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2. La respuesta positiva al dolor se caracteriza por vocalizacin y/o movimientos para

0.1 mL Solucin Salina/ 10g

Preparar soluciones a partir de la solucin

5. Una vez administrado el frmaco, mida el tiempo.

Manual de Evaluacin de Frmacos y

VALORACIN DEL EFECTO

10. Los resultados de todos los equipos se anotarn en la tabla 1.4.

Animales (sin dolor)

Existe una variante del mtodo 1, que consiste en lo siguiente:

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Introducir la mitad de la cola por 10 segundos en el agua.

La respuesta positiva al dolor se caracteriza por vocalizacin

Enseguida pese y numere a cada ratn.

Administre a cada ratn por va I.P. la dosis del frmaco

(asignada aleatoriamente) de acuerdo a la tabla 1.2.

Una vez administrado el frmaco, mida el tiempo.

Repita los pasos del 1 al 3 a los 15', 30', 60', y 90',

Evale la respuesta de cada ratn.

10. Si su actitud no es agresiva, es decir, si no le afecta el agua

Qu funcin tienen las Ciclo-oxigenasas 1 y 2, y como afectan al organismo?

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Manual de Evaluacin de Frmacos y Medicamentos II

Frmacos que inhiben la sntesis de acetilcolina por ejemplo hemicolinio.

Frmacos que inhiben el almacenamiento de la acetilcolina en las vesculas por

Frmacos que inhiben la liberacin de acetilcolina por ejemplo la estreptomicina.

Frmacos no despolarizantes. Antagonistas competitivos de los receptores

Frmacos despolarizantes. Activan los receptores nicotnicos produciendo una

2 cajas para ratones.

1. Por medio del peso del ratn y la concentracin

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Material, Equipo y Reactivos.

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DETERMINACION DEL ESTIMULO UMBRAL

INHIBICIN CON LIDOCAINA

REPETIR EL MISMO PROCEDIMIENTO EN EL SIMULADOR CON EL CURARE Y EL ETHER,

EFECTO DE LA LIDOCANA EN LOMBRIZ DE TIERRA.

3.1- ESTMULO QUIMICO.

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Anestesia analgsica. Se basa en el efecto hipntico colateral de los opioides cuando

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6. A la pecera con halotano agregar otros 0.25 ml de este ANESTESICO y

colocar al otro camarn.

ed., Me. Graw Hill, Mxico 2003

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Valoracin del Efecto

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