Lavar, preparar y envolver correctamente el material que se someter a esterilizacin.

Seleccionar los mtodos de esterilizacin adecuados para las diversas necesidades del
laboratorio de microbiologa.
Comprobar la efectividad del proceso de esterilizacin.
Elaborar adecuadamente los medios de cultivo deshidratados y por componentes.
Envasar los medios de cultivo de manera adecuada en los diferentes recipientes de
acuerdo al uso que se les dar.
Relacionar la composicin de los diversos medios de cultivo con sus caractersticas y
aplicaciones.
a) Esterilizacin por calor
:El calor es el mtodo de eleccin para esterilizar el material delaboratorio
resistente a las altas temperaturas. La temperaturay el tiempo requeridos para
esterilizar un material dependende que se est utilizando calor seco o calor
hmedo.Esterilizacin con calor seco: La accin bactericida del calor seco se
debe a la oxidacin fsica de un procedimiento lento ocoagulacin de la
protena bacteriana por quemadura. Enausencia de humedad se necesita una
temperatura ms alta,ya que en esta forma los microbios son destruidos al
absorber el calor. Pueden ser dos tipos:
Directa: flameado o incineracin ms utilizada enlaboratorios y en algunos
hospitales pequeos.
Indirecto: aire caliente u horno de Pasteur contemperatura de 160C a 180C
por 1 a 2 horas siendoel ms eficaz y seguro el elctrico.Ventajas:
El aire caliente penetra ciertos materiales que no sepueden esterilizar en el
autoclave
Puede utilizarse en laboratorios para la esterilizacin deartculos de vidrio
El calor seco da proteccin en esterilizacin deinstrumentos delicados con
punta o filo al que daarael vapor
El acero no se corroe o decoloraDesventajas:
Se requiere ms tiempo de accin, porque el airepenetra con lentitud y
uniformidad
El tiempo y la temperatura varan segn el tipo dematerial
La sobre exposicin puede daar algn producto
Destruye telas o material de caucho

Vapor a presin: conocido como autoclave, que posee todos los requisitos
indispensables comogrados de temperatura y tiempo de exposicin, que junto
con el tamao del autoclave y el flujo delvapor, la densidad y el tamao de la
carga en la cmara aumentan la tasa se muerte de losmicroorganismos, en una
temperatura de 121C 132C durante 15 minutos o ms.Ventajas:
Es ms fcil segura y eficaz
El uso del vapor es el procedimiento ms rpido, el ciclo total de tiempo es ms
corto
Es ms barato y de obtencin ms fcil
La mayora de las autoclaves poseen controles automticos y dispositivos de
controlDesventajas:
Se requiere mucho cuidado en la preparacin y confeccin de bultos, en la
carga y manejo delautoclave, as como el secado de los artculos
Los artculos a esterilizar deben estar limpios, sin grasa ni aceite
El vapor tiene que estar en contact directo con todas las partes de los
artculos
Los ciclos de tiempo se ajustan segn el tipo de material y tamao de la carga
El vapor puede no ser puroLa cmara presurizada utilizada normalmente en el
laboratorio es el
autoclave.

En muchos aspectos unaautoclave se parece a una olla de presin casera. De

hecho, en algunos pequeos laboratorios demicrobiologa se utilizan estas ollas
en lugar de autoclaves. Ambos son recipientes de metal con
paredessuficientemente fuertes para resistir la presin de vapor.Las autoclaves
son grandes cmaras de acero inoxidable que funcionan automticamente. Los
objetosdeben ser colocados de manera que el vapor de agua entre en contacto
con todas las partes de cada unode ellos, y el aire no quede atrapado en su
interior. El aire que no es reemplazado por vapor crea unabolsa seca, donde la
esterilizacin no ser efectiva

Filtracin:
Las clulas microbianas pueden retirarse de los lquidos o gases por filtracin.
La filtracin eslenta y cara (debe usarse un filtro nuevo cada vez); por esta

razn, se utiliza slo para los lquidostermolbiles, que no se pueden esterilizar

en el autoclave. Los slidos termolbiles tambin se puedenesterilizar por
filtracin, si previamente se disuelven en un lquido. Tcnicamente, la filtracin
no esterilizaporque los virus pueden pasar a travs de los filtros, pero el
proceso es suficiente para la mayora de losestudios de rutina que se llevan a
cabo en el laboratorio.Los filtros utilizados se denominan
filtros de membrana.
Estas membranas estn compuestas denitrocelulosa, con un poro de dimetro
constante. La nitrocelulosa es un derivado qumico de la celulosa,que tambin
se utiliza como explosivo. El dimetro de poro es aproximadamente 0,45 m;
este tamao eslo suficientemente pequeo como para eliminar todos los
microorganismos, con excepcin de los virus yalgunas bacterias muy
pequeas. Un lquido se filtra hacindolo pasar a travs de un filtro de
membranaacoplado a un matraz especial. Para hacer pasar el lquido por el
filtro se utiliza una bomba de vaco; losmicroorganismos quedan en la
superficie de la membrana. La filtracin es el mtodo de eleccin
paraesterilizar soluciones de vitaminas, antibiticos v otros compuestos
termolbiles, que son aadidos a losmedios
INDICADORES

La mayora de estos indicadores son cintas adhesivas que se adhieren al

material a esterilizar. Estascintas estn impregnadas con una sustancia
qumica que cambia de color cuando el material ha sidosometido al proceso de
esterilizacin. Este tipo de cintas no son completamente confiables debido a
quemuchas veces slo indican que se lleg a la temperatura deseada, pero no
indican por cuanto tiempo stase mantuvo. Tambin existen cintas diseadas
de manera que el cambio de color es progresivo, estascintas son un poco ms
seguras porque permiten estimar si el tiempo de esterilizacin fue el adecuado.
Indicadores biolgicos
Son preparaciones de una poblacin especfica de esporas de
microorganismos, las cuales son altamenteresistentes a un proceso de
esterilizacin en particular.Estos indicadores se deben colocar junto con la
carga de esterilizacin, en el sitio que se considera quees ms difcil que llegue
el vapor y despus del proceso, se deben incubar durante 24 horas
encondiciones adecuadas. Si despus de este periodo hay evidencia de
crecimiento microbiano (por ejemplo cambio de color del medio de cultivo), el
proceso de esterilizacin no fue satisfactorio

CONCLUSIONES:
Por medio de esta prctica al investigar la teora y realizar la preparacin de un
medio de cultivo, se logrla elaboracin adecuada de los mismos, as como la
seleccin apropiada para el uso que se les darposteriormente a los medios del
mtodo de esterilizacin que eliminara los restos microbianos quepudiesen
haber quedado en el medio de cultivo ya que si existe alguno de estos, ya no
sera adecuadopara el uso que se le pudiera llegar a dar.Tambin se observ
(con la teora) que de acuerdo al tipo de bacteria que se requiera sembrar, ser
eltipo de medio de cultivo, esto, ya que cada bacteria requiere cierto tipo de
nutrientes para subsistir yformar sus colonias, adems de que cierto tipo de
medios de cultivo, nos pueden mostrar de acuerdo a sucomposicin ciertas
caractersticas que presentan determinado tipo de bacterias, ya sea por su pH
y queeste sea indicado por los indicadores de los medios o por que reaccione
con ciertos componentes delmedio creando colores o formas
Despus de la incubacin de las cajas de petri y los tubos de ensayo con los
medios de cultivo a 35C y durante 48 horas se observa:
El medio de control est limpio referente a colonias de bacterias o mohos.
El medio de ambiente asptico tampoco presenta produccin microbiana.