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Biossegurana:

reviso.
ARTIGO
DEuma
REVISO

BIOSSEGURANA: UMA REVISO


P.M.M. Penna1*, C.F. Aquino2, D.D. Castanheira2, I.V. Brandi3, A.S.R. Cangussu2,
E. Macedo Sobrinho2, R.S. Sari2, M.P. da Silva4**, .S.M. Miguel5
Universidade Estadual de Montes Claros, CP 126, CEP 39401-089, Montes Claros, MG, Brasil. E-mail:
pmmpenna@gmail.com
1

RESUMO
A biossegurana o conjunto de aes voltadas para a preveno, minimizao ou eliminao de riscos que possam comprometer a sade do homem e dos animais e o meio ambiente. Os
primeiros debates sobre a biossegurana tiveram incio na dcada de 1970, devido a preocupaes
com a segurana nos espaos laboratoriais e com as consequncias que os constantes avanos
tecnolgicos na rea de engenharia gentica poderiam significar para o homem, bem como para
os sistemas ecolgicos. No Brasil, a regulamentao para atividades relacionadas a essas reas
teve incio em 1995, com a criao da Comisso Tcnica Nacional de Biossegurana. Suas funes
so fiscalizar a manipulao de organismos geneticamente modificados (OGM) e certificar a
segurana dos espaos laboratoriais. Este trabalho tem como finalidade disseminar os conceitos
de biossegurana e proporcionar informaes que auxiliaro na segurana do homem e do meio
ambiente em aspectos relacionados s atividades de pesquisa, produo, ensino, desenvolvimento
tecnolgico e prestao de servios.
PALAVRAS-CHAVE: Riscos, meio ambiente, OGMs.
ABSTRACT
BIOSAFETY: A REVIEW. Biosafety is a set of actions directed to the prevention, minimization or
elimination of risks that could jeopardize the humans and animals health and of the environment.
The first debates about biosafety were held in the early 1970s due to the outbreak of transmissible
diseases and to the concern to the safety in laboratory arenas. In Brazil, the regulations to activities
related to these areas began in 1995 with the formation of the National Technical Biosafety whose
functions are the inspection of the manipulated Genetically Modified Organisms (GMO) and of
the laboratory arena safety. This review describes the biosafety concepts and their applicability
known in order to improve the human safety as well as the environment in related issues to the
research activities, production, teaching, technological development and given service.
KEY WORDS: Risks, environment, Genetically Modified Organisms.

INTRODUO
Biossegurana o conjunto de aes voltadas
para a preveno, minimizao ou eliminao dos
riscos inerentes s atividades de pesquisa, produo,
ensino, desenvolvimento tecnolgico e prestao de
servios. Estes riscos podem comprometer a sade do
homem e animais, o meio ambiente ou a qualidade
dos trabalhos desenvolvidos (Teixeira; Valle, 1996).
H ainda outros conceitos para a biossegurana, como

o que est relacionado preveno de acidentes em


ambientes ocupacionais, incluindo o conjunto de
medidas tcnicas, administrativas, educacionais,
mdicas e psicolgicas (Costa, 1996). O tema abrange
ainda a segurana no uso de tcnicas de engenharia
gentica e as possibilidades de controles capazes de
definir segurana e risco para o ambiente e para a
sade humana, associados liberao no ambiente
dos organismos geneticamente modificados (OGMs)
(Albuquerque, 2001).

Valle S.A. Montes Claros, MG, Brasil.


Universidade Federal de Minas Gerais, Instituto de Cincias Agrrias, Montes Claros, MG, Brasil.
4
Universidade Federal de Viosa, Programa de Ps-Graduao em Microbiologia Agrcola, Viosa, Brasil.
5
Universidade Federal do Rio de Janeiro, Centro de Cincias da Sade, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
*Programa de Ps-Graduao em Cincias Biolgicas, Universidade Estadual de Montes.
**Programa de Ps-Graduao em Microbiologia Agrcola, Universidade Federal de Viosa.
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P.M.M. Penna et al.

A biossegurana envolve a anlise dos riscos


a que os profissionais de sade e de laboratrios
esto constantemente expostos em suas atividades
e ambientes de trabalho. A avaliao de tais riscos
engloba vrios aspectos, sejam relacionados aos
procedimentos adotados, as chamadas boas prticas em laboratrio (BPLs), aos agentes biolgicos
manipulados, infraestrutura dos laboratrios ou
informacionais, como a qualificao das equipes
(Brasil, 2006b).
O corrente interesse em biossegurana
manifestado no crescente nmero de regulamentaes nacionais e internacionais para controle
dos procedimentos de biotecnologia. A biossegurana tem vrias normas que preconizam a
diminuio da exposio de trabalhadores a
riscos e a preveno de contaminao ambiental
(H ambleton et al., 1992). As novas tecnologias de
biossegurana e guias associados tm melhorado
significativamente a segurana em ambientes
laboratoriais, principalmente no que diz respeito
ao manuseio de materiais microbiolgicos. Os
guias de biossegurana so uma combinao
de controle de engenharia, polticas de gerenciamento, prticas e procedimentos de trabalho,
tanto quanto intervenes mdicas (Coico; L unn,
2005). Cabe salientar que os princpios, guias e
recomendaes so basicamente os mesmos para
patgenos naturais e geneticamente modificados
(K imman et al., 2008).
Segundo Santana (1996), a experincia internacional e certos princpios de regulamentao aceitos
em outros pases so uma referncia para a definio
de regras no Brasil, propiciando a adoo de novos procedimentos de avaliao e gerenciamento
de riscos ligados s biotecnologias avanadas. As
concluses dos primeiros trabalhos internacionais
merecem ateno, principalmente por j reconhecerem a viso de que o risco da aplicao das novas
tecnologias est relacionado s caractersticas dos
produtos em questo e no ao uso da modificao
gentica por si s.
Apesar das medidas de conteno e guias,
infeces de laboratrio usualmente envolvendo
organismos no geneticamente modificados
ocorrem comumente, sugerindo que as regras
de biossegurana nem sempre so eficientes ou
aplicadas corretamente. H necessidade, portanto,
de um maior nmero de trabalhos informativos
acerca do tema ( Kimman et al., 2008). Este trabalho
tem como finalidade disseminar os conceitos de
biossegurana, suas regras e sua aplicabilidade, de
forma clara e objetiva, de modo a contribuir para
o aumento das prticas preventivas relacionadas
aos riscos inerentes s atividades de pesquisa,
produo, ensino, desenvolvimento tecnolgico e
prestao de servios.

REVISO DA LITERATURA
Histrico
O conceito de biossegurana comeou a ser mais
fortemente construdo no incio da dcada de 1970,
aps o surgimento da engenharia gentica. O procedimento pioneiro utilizando tcnicas de engenharia
gentica foi a transferncia e expresso do gene da
insulina para a bactria Escherichia coli. Essa primeira
experincia, em 1973, provocou forte reao da
comunidade mundial de cincia, culminando com
a Conferncia de Asilomar, na Califrnia em 1974.
Nesta conferncia foram tratadas questes acerca dos
riscos das tcnicas de engenharia gentica e sobre a
segurana dos espaos laboratoriais (Albuquerque,
2001; Borm , 2001). Foi sugerido tambm que a
conteno deveria ser uma considerao essencial
no programa experimental e que a eficincia da
conteno deveria estar ligada ao risco estimado (
Kimman et al., 2008). Do ponto de vista prtico, foi a
partir da Conferncia de Asilomar que se originaram
as normas de biossegurana do National Institute of
Health (NIH), dos EUA. Seu mrito, portanto, foi o
de alertar a comunidade cientfica, principalmente
quanto s questes de biossegurana inerentes
tecnologia de DNA recombinante. A partir de ento,
a maioria dos pases centrais viu-se diante da necessidade de estabelecer legislaes e regulamentaes
para as atividades que envolvessem a engenharia
gentica (Almeida; Valle, 1999).
Na dcada de 1980 a Organizao Mundial de
Sade conceituou a biossegurana como prticas
de preveno para o trabalho em laboratrio com
agentes patognicos, e, alm disto, classificou os
riscos como biolgicos, qumicos, fsicos, radioativos
e ergonmicos. Na dcada seguinte, observou-se a
incluso de temas como tica em pesquisa, meio ambiente, animais e processos envolvendo tecnologia de
DNA recombinante em programas de biossegurana
(Costa; Costa, 2002).
No Brasil, desde a instituio das escolas mdicas
e da cincia experimental, no sculo XIX, vm sendo
elaboradas noes sobre os benefcios e riscos inerentes realizao do trabalho cientfico, em especial
nos ambientes laboratoriais (Almeida; Albuquerque
, 2000). No entanto, a biossegurana no pas s se
estruturou, como rea especfica, nas dcadas de
1970 e 1980, em decorrncia do grande nmero de
relatos de graves infeces ocorridas em laboratrios,
e tambm de uma maior preocupao em relao s
consequncias que a manipulao experimental de
animais, plantas e micro-organismos poderia trazer
ao homem e ao meio ambiente (Shatzmayr, 2001).
Com os constantes avanos tecnolgicos na rea
de engenharia gentica e OGMs houve a necessidade
de uma regulamentao para atividades relaciona-

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Biossegurana: uma reviso.

das a essas reas. Em 1995 foi criada a Comisso


Tcnica Nacional de Biossegurana (CTNBio) para
estabelecer normas s atividades que envolvam
construo, cultivo, manipulao, uso, transporte, armazenamento, comercializao, consumo, liberao
e descarte relacionados a OGMs em todo o territrio
brasileiro (Scholze, 1999). Tais normas, alm de
tratarem da minimizao dos riscos em relao aos
OGMs (Brasil, 1995), envolvem os organismos no
geneticamente modificados e suas relaes com a
promoo de sade no ambiente de trabalho, no meio
ambiente e na comunidade (Garcia; Zanetti-Ramos,
2004). Operacionalmente vinculada ao Ministrio
da Cincia e Tecnologia, a CTNBio composta por
membros titulares e suplentes, das reas humana,
animal, vegetal e ambiental (Scholze, 1999).
Para educar e promover a conscincia em biossegurana, membros selecionados da CTNBio visitam instituies pblicas e privadas uma ou duas
vezes ao ano. Durante essas visitas, os membros
apresentam seminrios e discutem, com a equipe
tcnica das instituies, artigos atuais em biossegurana, problemas relacionados aplicao de guias
e outros assuntos relevantes (Fontes, 2003).
Em 19 de fevereiro de 2002 foi criada a Comisso de
Biossegurana em Sade (CBS) no mbito do Ministrio da Sade. A CBS trabalha com o objetivo de definir
estratgias de atuao, avaliao e acompanhamento
das aes de biossegurana, procurando sempre o
melhor entendimento entre o Ministrio da Sade e
as instituies que lidam com o tema (Brasil , 2006b).
Manipulao de agentes biolgicos
A partir dos anos 1980 o nmero de guias e
regulaes que afeta a segurana para operao em
laboratrios clnicos, de pesquisa e industriais, nos
quais agentes infecciosos so manipulados, aumentou dramaticamente. Esses guias e regulaes afetam
todos os aspectos da operao do laboratrio, como
a licena para se trabalhar com diversos agentes
infectantes, descarte do lixo contaminado e tambm
a preveno contra a exposio dos manipuladores
aos patgenos. A preveno contra infeces em
laboratrios e unidades de sade deve ser feita de
modo a garantir que os riscos ocupacionais e as consequncias de uma infeco sejam compreendidos
por todos os envolvidos (Sewell, 1995).
Segundo Waissman; Castro (1996), os agentes biolgicos apresentam um risco real ou potencial para
o homem e para o meio ambiente, por esta razo,
fundamental montar uma estrutura laboratorial que
se adapte preveno de tais riscos.
As manipulaes de agentes microbianos muitas
vezes patognicos pelos trabalhadores de laboratrio
fazem da natureza do seu trabalho um perigo ocupacional. Uma melhor compreenso dos riscos as-

sociados a manipulaes desses agentes que podem


ser transmitidos por diversas rotas tem facilitado a
aplicao de prticas de biossegurana apropriadas
(Coico; Lunn , 2005).
As infeces mais comumente adquiridas pelos
profissionais em laboratrio so provenientes de agentes bacterianos, no entanto, agentes patognicos pertencentes a todas as categorias de micro-organismos
tambm podem causar infeces (Coico; Lunn, 2005).
Para minimizar os riscos inerentes manipulao
dos agentes microbiolgicos importante conhecer as
suas caractersticas peculiares, dentre as quais se destacam o grau de patogenicidade, o poder de invaso,
a resistncia a processos de esterilizao, a virulncia
e a capacidade mutagnica (Teixeira; Valle, 1996).
Os agentes biolgicos que afetam o homem, os animais e as plantas foram classificados pelo Ministrio
da Sade por meio da Comisso de Biossegurana em
Sade (CBS). Os critrios de classificao tm como
base diversos aspectos, tais como: virulncia, modo
de transmisso, estabilidade do agente, concentrao e volume, origem do material potencialmente
infeccioso, disponibilidade de medidas profilticas
eficazes, disponibilidade de tratamento eficaz, dose
infectante, tipo de ensaio e fatores referentes ao trabalhador. Os agentes biolgicos foram classificados
em classes de 1 a 4, incluindo tambm a classe de
risco especial (Brasil, 2006a).
Classe de risco 1
Agentes biolgicos que oferecem baixo risco individual e para a coletividade, descritos na literatura
como no patognicos para as pessoas ou animais
adultos sadios. Exemplos: Lactobacillus sp., Bacillus
(Brasil, 2006a).
Classe de risco 2
Agentes biolgicos que oferecem moderado risco
individual e limitado risco para a comunidade, que
provocam infeces no homem ou nos animais, cujo
potencial de propagao na comunidade e de disseminao no meio ambiente seja limitado, e para
os quais existem medidas teraputicas e profilticas
eficazes (Brasil , 2006a. Alguns exemplos esto descritos na Tabela 1.
Classe de risco 3
Agentes biolgicos que oferecem alto risco
individual e moderado risco para a comunidade,
que possuem capacidade de transmisso por via
respiratria e que causam patologias humanas
ou animais, potencialmente letais, para as quais
existem usualmente medidas de tratamento e/ou
de preveno. Representam risco se disseminados
na comunidade e no meio ambiente, podendo se
propagar de pessoa a pessoa (Brasil , 2006a). Alguns
exemplos esto descritos na Tabela 1.

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Fonte: Brasil (2006b).

Classe de risco
1

Arenavirus agentes de febres hemorrgicas (Guanarito, Junin, Machupo


e Sabi); encefalites transmitidas por
carrapatos; Filovirus (vrus Marburg,
Ebola e outros relacionados); Herpesvirus do macaco (vrus B); vrus da
febre catarral maligna de bovinos e
cervos; vrus da doena hemorrgica
de coelhos.

Febre Amarela no vacinal; prons


incluindo agentes de encefalopatias espongiformes transmis-sveis:
encefalopatia espongiforme bovina
(BSE), Retrovirus, incluindo os vrus
da imunodeficincia humana (HIV-1
e HIV-2), vrus linfotrpico da clula
T humana (HTLV-1 e HTLV-2) e
vrus da imunodeficincia de smios
(SIV); Lyssavirus.

Adenovirus humanos, caninos e de


aves; Dengue tipos 1, 2, 3 e 4; Febre
Amarela vacinal; Hantavirus; Hepacivirus; Herpesvirus; Papilloma-virus;
Parvovirus; Adenovirus 1 avirio;
Adenovirus 7; Simian virus 40; Polyoma vrus; Vrus do Sarcoma Murino
e Felino.

Aspergillus flavus; A. fumigatus; Blastomyces dermatitidis; Candida albicans;


C. tropicalis; Penicillium marneffei;
Aphanoascus fulvescens; Cladosporium
cladosporioides.

Acanthamoeba castellani; Ancylostoma


(humano e animal); A. duodenale;
Ascaris sp.; A. suum; Cryptosporidium
sp.; Echinococcus sp.; Enterobius sp.;
Giardia sp.; Leishmania sp.; Shistosoma
sp.; Strongyloides sp.; Taenia saginata
e solium; Toxoplasma sp.; Trichuris
trichiura; Trypanosoma sp.; Wuchereria
bancrofti.
Coccidioides immitis, culturas esporuladas; Histoplasma capsulatum, todos
os tipos, inclusive a variedade duboisii
e variedade capsulatum.

Vrus

Fungos

Parasitas

Bacillus anthracis; Bartonella, exceto os


listados na classe de risco 2; Brucella
sp.; Chlamydia psittaci (cepas avirias);
Clostridium botulinum; Escherichia coli,
cepas verotoxignicas como 0157:H7
ou O103; Francisella tularensis (tipo
A); Mycobacterium bovis, exceto a
cepa BCG; M. tuberculosis; Pasteurella
multocida tipo B, amostra buffalo e
outras cepas virulentas; Rickettsia
akari; R. rickettsii.
Cowdria ruminatium
Theileria annulata; T. bovis; T. hirci; T.
parva e agentes relacionados

Bactrias
Lactobacillus sp., Bacillus sp.
Actinomadura madurae; Bartonella bacilliformis; B. henselae; B. quintana; B.
vinsonii; Campylobacter sp.; Chlamydia
pneumoniae; C. trachomatis; Enterobacter aerogenes; E. cloacae; Helicobacter
pylori; Leptospira; Mycobacterium sp.;
Mycoplasma caviae; M. hominis; M.
pneumoniae; Salmonella sp.; Shigella
sp.; Staphylococcus aureus; Streptococcus sp.

Tabela 1 Micro-organismos e suas respectivas classes de risco.

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Classe de risco 4
Agentes biolgicos que oferecem alto risco
individual e para a comunidade, com grande
poder de transmissibilidade por via respiratria
ou de transmisso desconhecida. Nem sempre est
disponvel um tratamento eficaz ou medidas de
preveno contra esses agentes. Causam doenas
humanas e animais de alta gravidade, com alta
capacidade de disseminao na comunidade e no
meio ambiente. Esta classe inclui principalmente
os vrus (Brasil , 2006a). Alguns exemplos esto
descritos na Tabela 1.
Classe de risco especial
Agentes biolgicos que oferecem alto risco de causar doena animal grave e de disseminao no meio
ambiente de doena animal no existente no pas e
que, embora no sejam obrigatoriamente patgenos
de importncia para o homem, podem gerar graves
perdas econmicas e/ou na produo de alimentos.
Alguns exemplos: Vrus da clera suna, Vrus da
doena de Borna, Vrus da doena de New Castle
(amostras asiticas), Vrus da doena de Teschen,
Vrus da doena de Wesselbron, Vrus da influenza
A aviria (amostras de epizootias), Vrus da peste
aviria, Vrus da peste bovina (Brasil , 2006a).
Medidas de conteno e nveis de biossegurana
dos laboratrios
necessrio que todo laboratrio fornea barreiras de conteno e um programa de segurana
cujo objetivo seja a proteo dos profissionais de
laboratrio e outros que atuem na rea, bem como a

proteo do meio ambiente, eficincia das operaes


laboratoriais e garantia do controle de qualidade do
trabalho executado (Silva, 1996).
Alm das tcnicas microbiolgicas de segurana,
as barreiras primrias (equipamentos de segurana
e equipamentos de proteo individual e coletiva) e
barreiras secundrias (facilidades de salvaguardas)
so agora consideradas como elementos vitais de
medidas de conteno ( Kimman et al., 2008).
Os equipamentos de proteo individual, conhecidos como EPIs (Tabela 2), so utilizados para
minimizar a exposio aos riscos ocupacionais e
evitar possveis acidentes no laboratrio. Os equipamentos de proteo coletiva (EPCs) so utilizados
com a finalidade de minimizar a exposio dos
trabalhadores aos riscos e, em casos de acidentes,
reduzir suas consequncias. Exemplos: lava-olhos,
chuveiro, extintor e cabines de proteo biolgica
(Teixeira; Valle , 1996).
As barreiras secundrias dizem respeito construo do laboratrio, localizao e instalaes
fsicas. As instalaes fsicas so importantes para
proporcionar uma barreira de proteo para pessoas
dentro e principalmente fora do laboratrio, bem
como para o meio ambiente. Os tipos de barreiras
secundrias dependero do risco de transmisso
dos agentes especficos manipulados no laboratrio.
So alguns exemplos de barreiras secundrias: a
localizao distante do acesso pblico, a presena de
sistemas de ventilao especializados em assegurar
o fluxo de ar unidirecionado, sistemas de tratamento
de ar para a descontaminao ou remoo do ar
liberado e cmaras pressurizadas como entradas de
laboratrio (Brasil , 2006c).

Tabela 2 - Equipamentos de proteo individual, risco evitado e caractersticas de proteo.


Equipamento
Jalecos e aventais de pano
Aventais plsticos
Calado

Risco evitado
Contaminao do vesturio
Contaminao do vesturio
Impactos e salpicos

culos de proteo

Impactos e salpicos

culos de segurana

Impactos

Viseira de proteo facial

Impactos e salpicos

Aparelhos e mscaras de respirao

Inalao de aerossis

Luvas

Contato direto com micro-organismos e cortes

Caractersticas de proteo
- Cobrem o vesturio pessoal
- Impermeveis
- Fechados frente
- Lentes resistentes a impactos.
- Protees laterais
- Lentes resistentes a impactos
- Protees laterais
- Proteo total da face
- Fcil de tirar em caso de acidente
- H diversos modelos: descartvel,
completa ou meia mscara purificadora
de ar, de capuz com ar filtrado presso e
com abastecimento de ar
-

Em ltex, vinilo ou nitrilo microbiologicamente aprovados, descartveis

Fonte: World Health Organization (2004).


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Malha de ao

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Estudos sobre infeces adquiridas em laboratrio


concluram que a rota primria de transmisso dos
agentes causadores foi por aerossol ( Kimman et al.,
2008). Aerossis so partculas ultrapequenas de
lquido ou solues dispersas em gs que podem
conter agentes infectantes, apresentando riscos se
inaladas, ingeridas e/ou entrarem em contato com
pele e mucosas. Numerosos procedimentos de laboratrio podem gerar os aerossis, como a pipetagem
realizada com rapidez, a abertura brusca de culturas
liofilizadas, a centrifugao de tubos mal vedados,
a variao abrupta de presso ou temperatura de
uma soluo, dentre outros (Universidade Federal
da Bahia, 2001). Com a finalidade de minimizar os
riscos relacionados aos aerossis, foi desenvolvido
o aparelho de fluxo laminar (Kimman et al., 2008).
O fluxo laminar, ou cabine de segurana biolgica
(CSB), o dispositivo principal utilizado para proporcionar a conteno de borrifos e aerossis infecciosos provocados por inmeros procedimentos
microbiolgicos (Brasil , 2006c). Os equipamentos
utilizados em laboratrio podem oferecer diversos
tipos de proteo aos usurios e ao meio ambiente
(Teixeira; Valle , 1996), conforme a Tabela 3.
Os laboratrios so divididos respeitando os
nveis de biossegurana (NB) em que se enquadram,
denominados NB-1, NB-2, NB-3 e NB-4. Tais nveis
esto relacionados aos requisitos crescentes de segurana para o manuseio dos agentes biolgicos,
terminando no maior grau de conteno e de complexidade do nvel de proteo. O NB exigido para
um ensaio ser determinado pelo agente biolgico
de maior classe de risco envolvido no ensaio.

As classificaes so as seguintes (B rasil ,


2006a)
Nvel de Biossegurana 1 (NB-1)
o nvel necessrio ao trabalho que envolva
agentes biolgicos da classe de risco 1. Representa um nvel bsico de conteno, que se fundamenta na aplicao das BPLs, na utilizao de
equipamentos de proteo e na adequao das
instalaes. O trabalho conduzido, em geral,
em bancada.
Nvel de Biossegurana 2 (NB-2)
o nvel exigido para o trabalho com agentes biolgicos da classe de risco 2. O acesso ao laboratrio
deve ser restrito a profissionais da rea, mediante
autorizao do profissional responsvel.
Nvel de Biossegurana 3 (NB-3)
Este nvel aplicvel aos locais onde forem desenvolvidos trabalhos com agentes biolgicos da
classe de risco 3.
Nvel de Biossegurana 4 (NB-4)
Este nvel necessrio a trabalhos que envolvam
agentes biolgicos da classe de risco 4 e agentes biolgicos especiais. Nesse tipo de laboratrio o acesso
dos profissionais deve ser controlado por sistema de
segurana rigoroso.
Na Tabela 4 observa-se um resumo dos requisitos
bsicos exigidos em cada nvel de biossegurana
laboratorial, incluindo estrutura, equipamentos e
prticas.

Tabela 3 - Tipos de equipamentos de conteno e suas aplicaes.


Tipo

Aplicao

Caixas de animais

Conteno de aerossol parcial ou total, providencia proteo de contaminao


cruzada e do meio ambiente

Autoclaves

Esterilizao por calor mido

Cabine de proteo biolgica


- classe I

Proteo para o operador e o ambiente. No h proteo para o experimento.

- classe II

Proteo do operador, do meio ambiente e do experimento ou produto.

- classe III

Mxima proteo ao pessoal, meio ambiente e produto.

Misturadores

Alguns tipos do proteo contra aerossis

Centrfuga

Recipientes selados do conteno de aerossis

Exaustor de gs

Proteo pessoal e meio ambiental

Filtros HEPA

99,975 de remoo das partculas de no mnimo 0,3 m

Microincinerador

Eltrico ou a gs com brao lateral para conter respingos dos circuitos

Containers

Autoclavveis, com tampas de encaixe que podem transportar materiais infectantes


para a autoclave

Aparelhos de pipetagem

Eliminam a necessidade de pipetar com a boca

Indicadores de esterilidade
Usados para determinar a eficcia da esterilizao por calor
Fonte: Laboratory Biosafety Guidelines (1996); Brasil, 2004.
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Tabela 4 - Requisitos para os diversos nveis de segurana biolgica.


Atributo
1
N
N

Nveis de segurana biolgica


2
3
N
S
N
S

4
Isolamento do laboratrio
S
Sala selada para descontaminao
S
Ventilao:
- Aduo do ar
N
D
S
S
- Sistema de ventilao controlada
N
D
S
S
- Exaustor com filtro HEPA
N
N
S
S
Entrada com porta dupla
N
N
S
S
Sistema de portas com tranca
N
S
S
S
Cmara de vcuo
N
N
S
S
Cmara de vcuo com ducha
N
N
N
S
Antecmara
N
N
S

Antecmara com ducha


N
N
S
N
Tratamento dos efluentes
N
N
S
S
Autoclave:
- in loco
N
D
S
S
- numa sala do laboratrio
N
N
D
S
- de duas portas
N
N
D
S
Cmaras de segurana biolgica
- classe I
D
D
N
N
- classe II
N
D
S
S
- classe III
N
N
D
S
Circuito interno de imagem
N
N
D
S
Registro em autoridades sanitrias nacionais
N
N
S
S
Roupas de proteo com presso positiva e ventilao
N
N
N
S
Uso EPIs
S
S
S
S
Realizao das BPLs
S
S
S
S
Incinerao dos resduos aps esterilizao
N
N
N
S
N- Absteno de necessidade; S- Uso obrigatrio; D- Uso desejvel. Fonte: World Health Organization (2004).

Boas prticas de laboratrio


O maior problema relacionado aos riscos em
laboratrio no est nas tecnologias disponveis
para eliminar ou minimizar tais riscos e sim no
comportamento dos profissionais. indispensvel
relacionar o risco de acidentes s boas prticas
cotidianas dentro de um laboratrio. No basta
haver sistemas modernos de esterilizao do ar ou
cmaras de desinfeco das roupas de segurana,
por exemplo, se o profissional no lavar suas mos
com a frequncia adequada ou o lixo for descartado
de maneira errada (Agncia Nacional de Vigilncia
Sanitria, 2005).
As Boas Prticas de Laboratrio (BPLs) tratam
da organizao, do processo e das condies sob
as quais estudos de laboratrio so planejados,
executados, monitorados, registrados e relatados.
As BPLs tm como finalidade avaliar o potencial de
riscos e toxicidade de produtos objetivando a proteo da sade humana, animal e do meio ambiente.
Outro objetivo das BPLs promover a qualidade e
validao dos resultados de pesquisa atravs de um
sistema de qualidade aplicado a laboratrios que
desenvolvem estudos e pesquisas que necessitam

da concesso de registros para comercializao de


seus produtos e monitoramento do meio ambiente
e da sade humana (Empresa Brasileira de Pesquisa
Agropecuria, 2008).
Fazem parte de algumas das BPLs as seguintes
consideraes, de acordo com Salgado-Santos (2001)
(Tabela 5).
Com relao s matrias-primas, padres, reagentes e demais insumos, estes devem ser devidamente armazenados, avaliando-se o grau de risco,
compatibilidades, incompatibilidades (Tabela 6),
bem como as condies ideais de luz, umidade e
temperatura de armazenamento (Salgado-Santos,
2001).
Biossegurana e OGMs
Os OGMs foram desenvolvidos a partir do avano
da engenharia gentica, atravs da tcnica de DNA
recombinante. Esta tcnica possibilita o isolamento de
um gene de um dado organismo e sua transferncia
para outro organismo, transpondo barreiras de cruzamento entre as diversas espcies de organismos.
O resultado um indivduo semelhante ao utilizado
para receber a molcula de DNA recombinante,

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porm acrescido de uma nova caracterstica gentica,


proveniente de outro, que no da mesma espcie.
Esse indivduo chamado transgnico (Azevedo et al.,
2000). A criao de OGMs deu origem a discusses
cientficas, ticas, econmicas e polticas (Nodari;
Guerra, 2003).

A tcnica de transgenia pode contribuir de forma


significativa para o melhoramento gentico de plantas, visando produo de alimentos, frmacos e
outros produtos industriais. No entanto, o cultivo
de plantas transgnicas e seu consumo requerem
anlises de risco (Nodari; Guerra , 2003).

Tabela 5 - Boas Prticas de Laboratrio relacionadas aos equipamentos, profissionais envolvidos, material e ambiente.
Equipamentos
-

Geladeiras do laboratrio devem ser usadas apenas


para armazenar amostras, solues e reagentes,
nunca para alimentos;
Uso de EPIs como luvas, jaleco, calado fechado,
culos, mscara, touca, entre outros, adequados a
cada procedimento;
Equipamentos devem ser configurados regularmente
e estar em locais apropriados.

Profissionais envolvidos
-
-
-
-

-
-
-
-

Material
-
-

Os frascos devem conter rtulos com as informaes


principais do seu contedo;
O descarte do material perfurocortante deve ser
realizado em recipiente de paredes rgidas, com
tampa e devidamente identificado;
No descarte, as agulhas usadas no devem ser
dobradas, quebradas, reutilizadas, recapeadas,
removidas das seringas ou manipuladas antes de
desprezadas. Seu descarte deve ser feito em recipiente
adequado a material perfurocortante.

proibido o preparo e o consumo de alimentos no


ambiente laboratorial;
Profissionais no devem usar maquiagem;
Pipetar com a boca imperiosamente proibido;
Profissionais devem ter ateno especial lavagem
das mos, cuidados com unhas, cabelos, barba e
roupas, a fim de evitar contaminaes cruzadas;
Devem ser utilizadas roupas adequadas s
substncias manuseadas no laboratrio;
Mos enluvadas no devem tocar reas limpas, tais
como teclados, telefones e maanetas;
Acidentes ocorridos devem ser documentados e
avaliados para correes e prevenes;
Os trabalhadores devem ser devidamente treinados
e informados.
Ambiente

-
-
-

-
-

Visitas ao ambiente laboratorial devem ser reduzidas


e desaconselhvel a presena de crianas;
No recomendado que haja plantas no interior do
laboratrio;
Os procedimentos de limpezas dos laboratrios
devem ser os mais rigorosos possveis, sendo
realizadas tcnicas de desinfeco;
O descarte de resduos deve ser feito de maneira
que no comprometa a sade dos profissionais e
do meio ambiente;
O ambiente deve ser devidamente sinalizado de
forma clara e objetiva;
A bancada de trabalho deve ser descontaminada ao
final de cada turno de trabalho e sempre que ocorrer
derramamento de agente biolgico;
Deve ser mantida uma rotina de controle de artrpodes e roedores.

Fonte: Salgado-Santos (2001).


Tabela 6 - Regras gerais sobre incompatibilidades qumicas.
Categoria

Incompatibilidade

Metais alcalinos como sdio, potssio, csio e ltio


Halogneos
cido actico, sulfito de hidrognio, anilina, hidrocarbonetos, cido sulfrico
Fonte: World Health Organization (2004).

Dixido de carbono, hidrocarbonetos clorados, gua


Amonaco, acetileno, hidrocarbonetos
Agentes oxidantes como cido crmico, cido ntrico,
perxido, permanganatos

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Biossegurana: uma reviso.

O principal aspecto considerado na avaliao dos


riscos dos transgnicos so os possveis efeitos, sobre
outros organismos, da caracterstica introduzida no
OGM, principalmente quando a caracterstica est
relacionada com a produo de uma nova protena
como, por exemplo, a protena Bt em algumas espcies. Esta protena j usada no controle biolgico por
ser nociva s pragas de lavouras e tem sido induzida
a sua produo em cultivares de milho, o chamado
milho Bt. A preocupao em relao produo desta
protena por espcies transgnicas em relao ao
prejuzo aos insetos no-alvos, quando em contato
com estas variedades por tempo prolongado. Os principais benefcios obtidos com o uso de transgnicos
na agricultura so o aumento da produtividade e da
qualidade nutricional, alm da reduo dos custos
de produo. Os riscos so relacionados ao aumento
da capacidade invasora das plantas daninhas, aos
efeitos nocivos sobre insetos no-alvo e segurana
alimentar. Acredita-se, no entanto, que no balano
risco-benefcio os riscos sejam controlveis e os benefcios sejam maiores (Borm, 2001).
Um exemplo importante de ameaa relacionada
aos OGMs decorre de sua liberao no meio ambiente
e a possvel transferncia do novo gene inserido,
chamado transgene, e sua expresso em outras espcies. A adio de um novo gentipo numa comunidade de plantas pode proporcionar vrios efeitos
indesejveis, como o deslocamento ou eliminao de
espcies no domesticadas, a exposio de espcies
a novos patgenos ou agentes txicos, a eroso da
diversidade gentica e a interrupo da reciclagem
de nutrientes e energia (Nodari; Guerra , 1999).
A ameaa espcie humana est relacionada ao
consumo de alimentos oriundos de plantas transgnicas. As consequncias podem ir desde manifestaes
de hipersensibilidade alrgica a reaes metablicas
anormais. Um exemplo especfico de risco o fato de a
maioria das plantas transgnicas de primeira gerao
conter genes de resistncia a antibiticos. Pode ocorrer de tais genes serem transferidos para bactrias
humanas, que podero adquirir a caracterstica de
resistncia ao antibitico (Nodari; Guerra , 1999).
No Brasil, OGM considerado por lei o organismo cujo material gentico tenha sido modificado
por qualquer tcnica de engenharia gentica. Esta
ltima definida como atividade de manipulao de
molculas de RNA e DNA recombinantes. Segundo
o anexo I da Lei 8.974 (Brasil , 1995), os OGMs so
classificados em Grupo I e Grupo II, sendo determinadas as seguintes caractersticas para cada grupo:
Grupo I
- Receptor ou parental: no patognico, no
apresenta agentes adventcios, histrico de utilizao
segura, sobrevivncia e multiplicao limitadas, sem
efeitos negativos para o meio ambiente.

- Vetor/inserto: deve ser caracterizado quanto a


todos os aspectos, sendo principais os aspectos que
representem riscos ao homem e ao meio ambiente.
Deve ser desprovido de sequncias genticas nocivas,
ter tamanho limitado, no deve incrementar a estabilidade do organismo modificado no meio ambiente,
deve ser pouco mobilizvel, no deve transmitir
nenhum marcador de resistncia a organismos.
- Micro-organismo Geneticamente Modificado:
no deve ser patognico, deve oferecer a mesma
segurana que o organismo receptor ou parental,
pode ser composto por sequncias genticas de
diferentes espcies que troquem tais sequncias
mediante processos fisiolgicos conhecidos.
Grupo II
Fazem parte deste grupo os OGMs resultantes de
organismo receptor ou parental classificado como
patognico para o homem e animais, como agentes
includos nas classes de risco 2, 3, 4 ou classe de
risco especial.
De acordo com a Instruo Normativa n 1 da CTNBio, toda entidade que utilizar tcnicas e mtodos
de engenharia gentica dever criar uma Comisso
Interna de Biossegurana (CIBio), com as atribuies
de promoo de programas de educao, criao
de programas de preveno e inspees, registro e
notificao de projetos, investigao de acidentes
e tudo o que se diz respeito ao cumprimento da
regulamentao de biossegurana (Comisso Tcnica
Nacional de Biossegurana, 2006).
Atualmente, no Brasil, 292 instituies ligadas
s reas de pesquisa humana e animal possuem o
certificado de qualidade em biossegurana (CQB),
sendo credenciadas a trabalhar com produtos transgnicos; isto representa uma rede de competncias
consolidada na rea de Biotecnologia de OGMs.
Os produtos ou espcies agrcolas objetos de pesquisa transgnica no pas so: milho, soja, algodo,
fumo, batata, feijo, eucalipto, mamo, estilosante,
braquiria, cana-de-acar, alface, cenoura, trevo,
jurubeba roxa, milheto, pimento, citros, maracuj,
crisntemo, tomate, berinjela, alfavaca, alho, abboras, entre outros (Comisso Tcnica Nacional de
BiosseguranaComisso , 2002; 2009).
Para que haja a liberao no ambiente de um
OGM necessrio que se cumpram as exigncias
preconizadas pela CTNBio. O questionrio tcnico
a ser respondido composto por questes acerca do
tipo de OGM a ser liberado. Entre as questes pode-se
citar: a origem do DNA inserido e habitat e ecologia
do organismo. So exigidas tambm informaes
sobre o mapa gentico da construo, caracterizao
da modificao gentica, dados sobre estabilidade do
organismo e mecanismos de fluxo gnico (Monquero,
2005). A CTNBio exige ainda informaes sobre
plantas, micro-organismos que vivem associados a

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este OGM, micro-organismos utilizados como vacina


de uso veterinrio, micro-organismos que modificam
propriedades do solo, entre outras. Somente aps
a analise dessas informaes e dados tcnicos pela
CTNBio que o OGM poder ou no ser liberado
no ambiente (Brasil , 2000).
CONCLUSO
A biotecnologia e seus avanos, alm de suas
colaboraes nas diversas reas como a medicina,
a agricultura e a economia, inclui a presena de
riscos. A existncia de tais riscos indica a necessidade de haver normas de segurana destinadas
anlise e desenvolvimento de estratgias para
minimiz-los, principal funo da biossegurana.
A biossegurana se faz importante tanto no controle dos riscos ocupacionais quanto no controle
dos riscos de prejuzo ambiental provenientes das
novas tecnologias cientficas. Para que as aes
de biossegurana sejam efetivas necessrio
que todos os envolvidos em atividades de risco
estejam devidamente informados acerca das diretrizes atuais, bem como aptos a coloc-las em
prtica de maneira correta. No entanto, preciso
ressaltar que o fato de haver manuais e normas
de biossegurana no implica no afastamento
total dos riscos. Segundo Almeida; Valle (1999),
um acidente envolvendo tcnicas de engenharia
gentica, por exemplo, poder ocorrer e, como em
toda anlise previsionista prudente, no se pode
prever quando nem em que intensidade.
Com o objetivo de tornar acessvel a toda a
sociedade as informaes relativas ao desenvolvimento cientfico e suas implicaes, importante
que sejam discutidos aspectos no s relativos
biossegurana, mas tambm relacionados
tica, sociedade, poltica e religio, que poderiam
ser debatidos por diferentes representantes da
sociedade.
AGRADECIMENTOS
Valle S.A., pelo apoio fundamental realizao
deste trabalho.
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Recebido em 19/2/09
Aceito em 21/4/10

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