PROGRAMME DES SCIENCES DE LA NATURE

PROFIL DES SCIENCES DE LA SANT : COURS OPTIONNEL

TRIMESTRE HIVER 2010

Laboratoires 2, 3 et 4 : Enqute bactriologique

Microbiologie : exprimentation et recherche
101- GCD- HY
2-3-3

http://www.fundp.ac.be/sciences/biologie/bio2001/bioscope/1928_flemming/flemming.html 2009-01-09
Huguette Thibeault
A-2226
: 514-875-4445 poste 255
hthibeault@cegepsth.qc.ca

Enqute bactriologique
Mthodologie

Cette enqute bactriologique se droulera sur quatre sances. Elle vous permettra de vous
familiariser avec le travail de diagnostic bactriologique et surtout de caractriser quatre inconnus afin
de dmasquer lequel de ces inconnus proviendrait du Ruisseau Plein Champ proximit du collge
(En rfrence au laboratoire cologie des eaux douces du cours de biologie101-NYA-05).

Vous aurez rechercher ce qui caractrise le pouvoir pathogne de certaines souches appartenant au
mme genre et la mme espce que le suspect dtect dans cette eau douce.

Ces quatre sances de laboratoire vous prpareront un MICROSTAGE en milieu de recherche. Des
attitudes et habilets en laboratoire seront acquises progressivement.

Chaque sance de laboratoire sera prcde ou suivie de lectures cibles dans le volume de rfrence
obligatoire (voir le Plan de cours) et des sites Internet (des ajouts seront faits en cours de trimestre)
tels que : (Suite en ANNEXE)

http://www.microbes-edu.org/

http://www.gch.ulaval.ca/agarnier/bcm20329/bcm2b.htm

http://fr.wikipedia.org/wiki/Bact%C3%A9riologie_m%C3%A9dicale

http://www.hc-sc.gc.ca/ewh-semt/pubs/water-eau/pathogens-pathogenes/guideline-recommandationfra.php#23

http://www.phac-aspc.gc.ca/msds-ftss/index-fra.php

http://www.phac-aspc.gc.ca/publicat/ccdr-rmtc/04vol30/rm3015fa.html

Vous aurez rsumer schmatiquement, sur une page, les tapes raliser un PR-LAB et le
remettre (papier ou version lectronique sur demande) ou le prsenter en dbut de laboratoire.
dfaut de le prsenter, vous vous verrez refuser laccs au laboratoire. Cela constitue une valuation
formative. La mention PR-LAB sera faite pour chacune des sances.

Les mesures de scurit au laboratoire de microbiologie devront tre respectes car elles visent
principalement vous protger de certains risques : contamination, brlures et coupure, entre autres.

(voir le Plan de cours).

http://www.fundp.ac.be/universite/services/sippt/pictos/avert_bio

De plus, nous visons le respect pour des autres utilisateurs du laboratoire et que vous vitiez de
contaminer vos chantillons ainsi que vos proches.

Le port dun sarrau (sarraus lous en chimie non autoriss) et les cheveux attachs sont essentiels
car nous travaillons maintes reprises avec des microorganismes vivants et une flamme afin de
striliser nos instruments.
ces mesures, sajouteront des consignes de lavage aseptique des mains et de dsinfection des
surfaces de travail ainsi que le transport scuritaire (sac de plastique rserv cet effet) et la
dsinfection de son sarrau.
Votre sens des responsabilits se traduira par le respect des consignes de scurit et un
comportement professionnel lgard de vos coquipiers, de la technicienne et de professeure.

Toutes les observations (macroscopiques et microscopiques) et rsultats aux tests microbiologiques

devront tre consignes dans un ou plusieurs tableaux de rsultats (PR-LAB) que vous regrouperez
dans un cahier de laboratoire ou cartable.

Lanalyse et la discussion se feront en groupe principalement. Des mini-tests formatifs sur le portail
vous permettront de vrifier votre comprhension des manipulations et concepts sous-jacents aux
techniques utilises.

Lvaluation sommative sera individuelle lors de lexamen de laboratoire en fin de trimestre. Des
tableaux synthses seront autoriss lors de lexamen de laboratoire CUMULATIF lpreuve
terminale de cours ( .T.C.) . RF : Plan de cours.
Rappel : Pnalit maximale de 10% rserve au respect
des consignes de scurit et du comportement professionnel en laboratoire.

http://3.bp.blogspot.com/_5Dvdo6a5iBU/SvmeiGl78NI/AAAAAAAAGUc/fCnAScM_zj0/s400/PERE+N
OEL+H1N1.jpg
2009-12-15

Colonies bactrienne et fongiques correspondant des doigts lavs

http://www.afblum.be/bioafb/clasetre/clasetre.htm

NOTE : Vous retrouverez en Annexe ( voir page 18 et suivantes):

une liste dtaille dobjectifs terminaux pour lensemble de lenqute qui
seront valus lexamen de laboratoire cumulatif en fin de trimestre;
des ressources Internet qui vous aideront prparer vos laboratoires

Labo 2 : Enqute bactriologique- 1re sance

A. Objectifs :
1. Appliquer la mthode hypothtico-dductive en recherche exprimentale la mise en
situation de la page prcdente;
2. Effectuer un lavage aseptique des mains rigoureux et une dsinfection adquate de la surface
de travail avant et aprs la sance de laboratoire;
3. Expliquer en termes de flore ou microflore transitoire et rsidante, les tapes dun lavage de
mains rigoureux avant et aprs la sance de laboratoire;
4. Utiliser des techniques aseptiques de prlvement en milieu liquide et densemencement sur
milieu solide; Voir chapitre 6 de Tortora.
5. Distinguer des milieux de culture en termes de compositions chimiques et fonctions : milieu
complexe, milieu enrichi, milieu slectif et diffrentiel; Voir chapitre 5.
6. Qualifier les quatre milieux fournis (glose nutritive, au sang, additionne de NaCl 6,5 %,
MacConkey de : complexe, enrichi ou slectif et diffrentiel; Voir chapitre 6 du volume,
autour de la page 184.
7. Distinguer les termes : colonie (p. 169 et 184), cellule procaryote (chapitre 4), culture pure
(p.184-185) (consultez le glossaire !);
8. Associer des caractristiques mtaboliques et morphologiques des colonies et cellules
bactriennes inconnues aux conditions de croissance slectionnes;
9. laide des gloses en dmonstration au laboratoire, votre volume de rfrence et
dInternet, entre autres, (copier le nom latin dans la bote de recherche), recueillir des
donnes thoriques pertinentes concernant les tmoins bactriens suivants) :
Bacillus cereus

Serratia marcescens

Clostridium sporogenes

Staphylococcus aureus

Escherichia coli

Staphylococcus albus (epidermidis)

Micrococcus luteus

Enterocccus faecalis (Streptococcus

Pseudomonas aeruginosa

faecalis )

Vibrio cholerae

10. Distinguer coliformes et entrocoques.

http://www.inspq.qc.ca/pdf/publications/198-CartableEau/Enterocoques.pdf

B. Contexte thorique : PR-LAB

La mthode hypothtico-dductive en recherche exprimentale fournit une dmarche souvent
utilise en microbiologie. Rpondre aux questions suivantes afin den saisir les tapes. (Il y en a
qui ont dj des rponses par contre vous aurez dfinir les termes souligns .Voir votre volume de rfrence et
autres ressources ( 101-NYA-05, Internet)

1. Quel est le problme que vous avez rsoudre dans cette enqute?
Caractriser quatre inconnus : conditions de culture sur glose varies
Dmasquer lequel de ces inconnus proviendrait du Ruisseau Plein Champ
proximit du collge : coliformes fcaux/ entrobactries
Caractriser le pouvoir pathogne de certaines souches appartenant au mme genre
et la mme espce que le suspect dtect dans cette eau douce.
Comparer Vibrio cholerae, agent responsable du cholra.
2. Quelle hypothse formulez-vous suite vos recherches thoriques?
Suspects : Des coliformes fcaux (entrobactries) sont souvent responsables de la
contamination de leau. Les cyanobactries sont aussi une source proccupante de
contamination de leau.
3. Quelles sont les informations ncessaires pour tester votre hypothse?
Forme cellulaire : frottis, coloration simple : btonnet, coque, groupement, spore
bactrienne
Gram : coloration diffrentielle
Culture sur glose : forme de colonie, profil, grosseur, contour, hmolyse
4. Quelles informations (indices) allez-vous recueillir en ensemenant vos inconnus sur les
diffrents milieux fournis?
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5. Pourquoi vous fournit-on des tmoins sur glose?
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6. Quelle est limportance de la morphologie des colonies dans le diagnostic bactriologique?

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7. Pourquoi incube-t-on les gloses au sang en conditions arobies et anarobies?
Cela nous permet de les classifier en fonction de leur mtabolisme nergtique :
o arobie strict ex. : Pseudomonas sp.
o anarobie strict ex. : Clostridium sp.
o arobie facultative ex. : E. coli
Ce classement fait rfrence aux types respiratoires des microorganismes soit la faon
dextraire de lnergie des molcules telle que le glucose en prsence ou non de loxygne
(dernier accepteur dlectrons) afin de produire leurs ATP. Ils effectuent soient la
respiration cellulaire arobie (Rf : 101-NYA-05 : glycolyse, Krebs, ), la respiration
cellulaire anarobie (sera dtaille ultrieurement) ou la fermentation (ex. : production
dacide lactique, thanol) Cest une question denzymes!
Pour en savoir plus :
http://www.ac-grenoble.fr/disciplines/sti/biotec/pages/microbiologie/cours_metabolisme.htm
Notez que certains microorganismes rputs avoir un type respiratoire peuvent dans des
conditions stressantes sadapter et adopter dautres types respiratoires Ex. : Pseudomonas sp.
est de type arobie strict, mais dans les voies respiratoires envahies de mucus pais de
patients ayant la fibrose kystique, il devient anarobie.
8. Comment obtenir des colonies isoles partir dune culture pure en bouillon?
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9. Quel milieu de culture permettra la dtection de zone dhmolyse et comment relier cette
activit biochimique au pouvoir pathogne de certaines bactries?
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Pourquoi incube-t-on les gloses 24 heures ? et 37 C ?
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C : Matriel et mthodes
Au dbut du laboratoire et la fin des manipulations, procder la dsinfection
de la surface de travail et procder au lavage de mains.
PR-LAB : Rsumez schmatiquement, sur une page, les tapes suivantes raliser et
prsenter en dbut de laboratoire.
1. Apporter son poste de travail, dans un porte-prouvettes : 4 bouillons (cultures pures)
dsigns par une lettre correspondant un inconnu : _____ _____ _ B _ _ G _
2. Identifier chaque glose en inscrivant vos initiales, la date et le type de milieu :
2.1 : Conditions arobies :

Gloses non subdivises en secteurs :

- Quatre gloses nutritives (NUT) : un seul inconnu par glose donc une lettre par
glose;
- Quatre gloses SANG (additionnes de sang) identifier (Sang+Arobie)

Gloses subdivises en 2 secteurs : un secteur par inconnu

- Deux gloses Mac Conkey (Mac)
- Deux gloses additionnes de NaCl 6,5 % (NaCl 6,5 %)

2.2 : Conditions anarobies (ANA) :

Glose subdivise en 4 secteurs : un secteur par inconnu

- Une glose additionne de sang identifier (Sang+ANA)

3. Prlever aseptiquement une anse de chaque inconnu en bouillon (dmonstration par la

professeure) avec un manche de Koch strilis la flamme.

Ensemencer aseptiquement les gloses pr-identifies (dmonstration par la professeure) par la

technique de stries.

Voir : http://www.gch.ulaval.ca/agarnier/bcm20329/bcm2b.htm

4. Incuber 24 hres, 37 C:
conditions arobies : les gloses NUT, Sang+Arobie, NaCl 6,5 % et Mac
conditions anarobies : une glose (Sang+ ANA)
5. Lecture des rsultats la semaine prochaine.
6. Dsinfecter votre surface de travail;
7. Laver vos mains et ranger votre sarrau dans un sac de plastique pour dsinfection la
maison.

8. Se prparer un ou plusieurs tableaux de rsultats selon les rgles usuelles en sciences.

Labo 3 : Enqute bactriologique 2ime sance

A. Objectifs :
1. Procder la lecture des rsultats de la semaine prcdente et consigner dans des
tableaux prpars lavance (item 10 du PR-LAB de la sance prcdente);
2. Apposer une lgende chaque tableau soit un code (+++, ++, +, -) reprsentant la
croissance relative de chaque inconnu par rapport aux autres inconnus en fonction du
milieu de culture et des conditions de croissance;
Lgende :
+++ : forte croissance
++ : moyenne croissance
+ : faible croissance
- : aucune croissance
3. Dcrire la morphologie macroscopique des colonies isoles partir des ensemencements
effectus la semaine dernire et comparer aux tmoins sur glose.

http://www.gch.ulaval.ca/agarnier/bcm20329/bcm2b.htm

4.

partir des rsultats de la morphologie des colonies, identifier le ou les milieux de

culture slectifs et diffrentiels;

5. Effectuer une coloration diffrentielle - Coloration de Gram

6. Dcrire la morphologie microscopique des bactries en termes de : forme (coques,

bacilles ou autre), de groupement ou non, type de groupement et de raction au Gram
(Gram + ou Gram -), prsence ou non de spores. Comparer aux donnes thoriques des
tmoins.

7. Ensemencer aseptiquement deux bouillons NUT pr-identifis B et G, initiales et date, en

prvision du test Antibiogramme (premire partie de la prochaine sance).

B. Contexte thorique
Les informations extraites du volume de rfrence et les caractristiques trouver sur les
tmoins permettront dinterprter les rsultats et dexpliquer pourquoi seulement certaines
bactries seront ensemences ou conserves lors de ce 2ime laboratoire.

C. Matriel et mthodes
Au dbut du laboratoire et la fin des manipulations, procder la dsinfection
de la surface de travail et procder au lavage de mains.

PR-LAB : Rsumer schmatiquement, sur une page, les tapes suivantes.( Voir exemple
page 12)
1. Consigner toutes vos observations dans des tableaux que vous avez prpars.
2. Observer les colonies formes pour chaque inconnu et les dcrire en termes de taille,
forme, lvation et bord de la colonie et autres caractristiques, sil y a lieu;
3. Observer et comparer la croissance en conditions arobies et anarobies;
4. Observer la prsence ou non dune zone dhmolyse sur glose au sang;
5. Comparer et caractriser les types de zones dhmolyse lorsque prsentes;
6. Observer et comparer la croissance en prsence de NaCl 6,5 %;
7. Observer et comparer la croissance sur Mac Conkey;
8. Observer et comparer la croissance sur glose nutritive (NUT);
9. Effectuer un frottis pour chaque inconnu en se rfrant la technique en Annexe;
10. Effectuer une coloration GRAM pour chaque inconnu en se rfrant la technique en
Annexe;
11. Observer 400 X et 1000X (avec huile immersion pour le 1000X);
12. Dessiner et dcrire la morphologie microscopique des bactries en termes de :
-

forme (coques, bacilles, );

groupement (solitaire, type de groupement, );
raction au Gram (Gram + ou Gram -);
prsence ou non de spores;
autre sil y a lieu.

13. Prlever une deux colonies de linconnu B sur la glose au sang incube en conditions
arobies et ensemencer aseptiquement un bouillon NUT pr-identifi B, initiales et date.
Incuber 24 hres, 37C;

14. Prlever une deux colonies de linconnu G sur la glose au sang incube en conditions
arobies et ensemencer aseptiquement un bouillon NUT pr-identifi G, initiales et date.
Incuber 24 hres, 37C;
15. Conserver votre glose Mac Conkey pour la semaine prochaine.
16. Disposer tout le matriel contamin lendroit dsign par le professeur.

Exemples de schmatisation :
1. Observer les colonies

2. Faire un frottis et
colorer

3. Ensemencer dans un
bouillon
4. Incuber 24 heures
37 C
et rfrigrer
Lecture la semaine
prochaine

http://www.scribd.com/doc/4986249/Manuel-de-travaux-pratiques-de-microbiologie
2009-12-15

Labo 4 : Enqute bactriologique - 3ime sance

A. Objectifs :
1. Utiliser des mthodes rapides de dtection de bactries Gram - : API 20E et Hygicult EB
(voir annexe);
2. Raliser un Antibiogramme (diffusion en glose), un test de sensibilit aux antibiotiques,
laide une mthode de diffusion ou mthode des disques (pages 621 et 624 de votre
volume);
3. Associer lefficacit de certains antibiotiques (ATB) un Gram;
4. Associer certains ATB leur mode daction (Tableau 20.3 aux pages 609 et 610 du
volume)
5. Associer la glose Mac Conkey la slection de bactries Gram-;

B. Contexte thorique PR-LAB

Seulement certaines bactries ont t ensemences ou conserves lors du 2e laboratoire. Les
raisons motivant ces choix se retrouvent au chapitre 20 (p. 602 604) en ce qui concerne
lantibiorsistance et au chapitre 11 (p. 338 340) pour les Entrobactries :
1. Quest-ce quun antibiotique?
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2. Quest-ce que lantibiorsistance?
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3. Pourquoi utilise-t-on un test API?

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4. Pourquoi utilise-t-on un test Hygicult?
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5. Pourquoi fait-on un tapis bactrien sur une glose lors du test Antibiogramme?
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6. Quelle est limportance de connatre le Gram dune bactrie inconnue?
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C. Matriel et mthodes

Au dbut du laboratoire et la fin des manipulations, procder la dsinfection

de la surface de travail et procder au lavage de mains.

PR-LAB : Consultez les Annexes fournies afin de pouvoir planifier votre laboratoire et
rsumer schmatiquement, sur une page, les tapes suivantes raliser et remettre ou
prsenter en dbut de laboratoire.
1. Ensemencer selon les directives en annexe, deux inconnus sur Mac Conkey, une galerie
API par inconnu, pr-identifie (lettre de linconnu, initiales et date);
2. Ensemencer selon les directives en annexe, deux inconnus sur Mac Conkey, un test
Hygicult par inconnu pr-identifi (lettre de linconnu, initiales et date);
3. Prlever laide dun couvillon strile, un inoculum dinconnu B en bouillon, ensemenc
la semaine dernire;
4. Raliser un tapis bactrien sur glose Mller-Hinton pr-identifie (M-H, inconnu B,
initiales et date) pour la ralisation de lAntibiogramme, et laisser scher 5 minutes;
5. Prlever laide dun couvillon strile, un inoculum dinconnu G en bouillon, ensemenc
la semaine dernire;
6. Raliser un tapis bactrien sur glose Mller-Hinton pr-identifie (M-H, inconnu G,
initiales et date) pour la ralisation de lAntibiogramme, et laisser scher 5 minutes;
7. Dposer, laide dun applicateur multiple, des disques pr-imprgns dantibiotiques sur
chacun des tapis bactriens. Noter leur nom et dose afin de prparer un tableau de
rsultats.
8. Sassurer que les disques adhrent bien la surface en les pressant dlicatement avec son
manche de Koch strile et refroidi et laisser scher 5 minutes au minimum;
9. Incuber 37 C, lenvers, 24 heures;
10. Disposer du matriel contamin correctement;
11. Prparer des tableaux pour les rsultats venir la semaine prochaine. PRLAB Enqute
IV

Labo 5 : Enqute bactriologique 4 ime sance

A. Objectifs :
1. Complter le travail de diagnostic bactriologique de vos inconnus et dmasquer lequel de
ces inconnus proviendrait du Ruisseau Plein Champ proximit du collge;
2. Comparer les tests API, Hygicult et lantibiogramme en termes doutil diagnostic et de
sant publique et donner les limites de chacun des tests utiliss;
3. Associer votre inconnu certaines souches pathognes appartenant au mme genre et la
mme espce.

B. Contexte thorique
Les lectures diriges en cours thoriques et la recherche dinformations sur Internet vous
permettront de saisir linterrelation entre le monde microbien, lalimentation, lenvironnement,
la sant humaine et linconnu que vous tes sur le point de dmasquer.
C. Matriel et mthodes

Au dbut du laboratoire et la fin des manipulations, procder la dsinfection

de la surface de travail et procder au lavage de mains.
1. Consultez les annexes fournies afin de pouvoir faire les lectures de vos tests;
2. Pour chaque inconnu sur gloses M-H, mesurer le diamtre de chaque zone dinhibition en
mm et cela pour chacun des antibiotiques et interprter laide de valeurs de rfrence
fournies en annexe;
3. Pour chaque inconnu sur galerie API, lire les rsultats de chaque microtube, selon les
directives en annexe, et consigner vos rsultats sur une fiche fournie et interprter les
rsultats;
4. Pour chaque inconnu sur Hygicult, lire les rsultats de chaque ct de la bandelette, selon
les directives en annexe, les noter et interprter les rsultats;
5. Consigner vos rsultats dans des tableaux dj raliss (PR-LAB);
D. Analyse et discussion en groupe
E. Conclusion en groupe

ANNEXES : Laboratoires -Enqute bactriologique

Objectifs terminaux :
Objectifs terminaux de lenqute bactriologique
101-GCD-HY
Microbiologie : recherche et exprimentation

la fin de ces 4 sances de laboratoires, vous devriez tre capable de :

1. Nommer et donner lutilit des prcautions et du matriel de microbiologie suivant :

Manche de Koch (fil boucle)

couvillon strile
Pipettes : gradues et Pasteur
Bote de Ptri lenvers lors de lincubation
Glose strile et manipulation aseptique lors de son ouverture
Gloses ensemences : Distinguer lutilit des gloses au NaCl, au sang, Mac
Conkey et nutritive, les tests Hygicult, API en termes de milieu slectif et/ou
diffrentiel
Saline physiologique et prparation de suspension bactrienne lors de lAPI et
Hygicult
Bouillons de culture striles et strilisation la flamme
Bouillons de culture ensemencs en prouvettes et strilisation la flamme
Distributeur dATB
Jarre anarobie et utilit dans la dtermination du type respiratoire mtabolisme
arobie ou anarobie
tuve ou incubateur; chambre dincubation de la galerie API et conditions de
croissance (Temprature)
Bassin dcontamination et pertinence de lutiliser
Support prouvettes et pertinence de lutiliser
Brleur gaz et pertinence de lutiliser
Sarrau et cheveux attachs et manches longues droules et mesures de scurit
Huile immersion
Nettoyeur lentilles
Calepin de papier buvard
Ractif et colorants de la coloration Gram
Lames
Dettol : agent de dsinfection contenant du phnol : rle dans le contrle de la
croissance microbienne
Savon dsinfectant et rle dans le contrle de la croissance microbienne
Disques imprgns dantibiotique et rle dans le contrle de la croissance
microbienne

2. Dcrire et caractriser les gestes associs la microbiologie :

Prlever aseptiquement
Ensemencer aseptiquement
Remettre en suspension une culture en bouillon
Faire une suspension
Humidifier un couvillon
Striliser la flamme
Incuber
Dsinfecter
Lavage aseptique des mains
Faire un tapis bactrien pour antibiogramme
mulsionner
Fixer
Colorer
Mordancer
Dcolorer
Observer 1000X
Faire une mise au point grossire
Faire une mise au point fine

3. Caractriser et utiliser, lors danalyse et interprtation de rsultats, les termes suivants :

Colonie
Culture pure
Mlange bactrien
Rgnes associs :
- Bactrie
- Levure
- Moisissure
- Protistes
Gram +
Gram associer API et Hygicult
Flore transitoire et rsidante et lavage de mains
Cellule procaryote et Rgne
Cellule eucaryote et Rgnes
Morphologie de colonies bactriennes et de moisissures : taille, profil, forme,
texture, aspect, nombre, couleurs.
Morphologie sur lame de levures : taille relativement bactrie, forme
spcifique
Morphologie sur lame de bactries : forme, groupement, prsence ou non
dendospores, Gram
Dtection dEntrobactries, de coliformes totaux et fcaux et de non
coliformes : API et Hygicult

 Bactrie arobie stricte

Bactrie anarobie stricte et intrt mdical
Bactrie anarobie facultatif
Zone dhmolyse et inteprtation
Zone dinhibition et ATB
Bactrie rsistante aux ATB et intrt mdical
Bactrie sensible aux ATB et intrt mdical
ATB large spectre et intrt mdical
ATB spectre troit et intrt mdical
API : Principes du test et liens avec mtabolisme bactrien
Hygicult : Principes du test et liens avec mtabolisme bactrien
Prsence dendospores ou non et diagnostic
4. Interprter des rsultats prsents sous formes de tableaux laide de la terminologie
spcifique la microbiologie et limmunologie
5. Dcrire des gloses contamines ou ensemences laide de la terminologie spcifique
la microbiologie.
6. Dessiner et dcrire des microorganismes sur lame laide de la terminologie spcifique
aux observations microscopiques.
7. Utiliser ses tableaux synthses denqute bactriologique afin de rpondre aux
questions dinterprtation.
8. Ordonner et commenter des tapes associes :
la coloration de GRAM
la ralisation dun frottis
la ralisation dun tapis bactrien
la ralisation dun ensemencement aseptique
la ralisation dun prlvement aseptique
au lavage aseptique de mains
9. Dcrire la dmarche de diagnostic bactriologique en lien avec la dmarche scientifique
10. Donner de faon ordonne, les tapes et milieux de culture menant lidentification du
suspect recherch;
11. Justifier limportance mdicale de cet agent potentiellement pathogne.
12. Sautovaluer quant au respect des consignes de scurit en laboratoire
Webographie : :
Rfrences Internet consultes 2009-12-03

Lavage des mains et de la paillasse (surface de travail) : Dmo et rfrences

sur le web :

http://www.msss.gouv.qc.ca/sujets/prob_sante/influenza/index.php?aid=4
http://membres.lycos.fr/bacteriolgie/F_lavage_mains.htm
http://membres.lycos.fr/bacteriolgie/G_lavage_paillasse.htm
http://www.infirmiers.com/pdf/Presentation-lavage-de-mains.pdf
http://cclin-sudest.chulyon.fr/Doc_Reco/guides/FCPRI/Hygiene_mains/Mains_choixproce
dure.pdf

Mesures de scurit en laboratoire de microbiologie :

o http://www.ccac.ca/fr/CCAC_Programs/ETCC/Module04/15.html
o http://pedagogie.cegepfxg.qc.ca/profs/aduhamel/microbiologie/Micro_Mesuress%C3%A9curit%C3%A9_p1.pps#17
o http://pedagogie.cegepfxg.qc.ca/profs/aduhamel/microbiologie/Micro_Mesuress%C3%A9curit%C3%A9_p2.pps

Techniques densemencement par stries :

o http://www.gch.ulaval.ca/agarnier/bcm20329/bcm2b.htm
o http://membres.lycos.fr/bacteriolgie/K_isolement.htm

Utilisation du microscope: Voir 101-NYA-05

Observations macroscopiques de colonies : Voir 101-NYA-05
Milieu de culture :
o http://www2.ac-lyon.fr/enseigne/biotech/microbio/milieux.html
Frottis et Coloration Gram :
o Voir 101-NYA-05
o http://www.gch.ulaval.ca/agarnier/bcm20329/bcm2b.htm
o www.dmipfmv.ulg.ac.be/bacvet/m/cours3VMB/TP/observations.doc

Observations microscopiques :
o http://www.gch.ulaval.ca/agarnier/bcm20329/bcm2b.htm
o http://www.techno-science.net/?onglet=glossaire&definition=987

API : Site internet :

Hygicult EB : Site Internet

http://pedagogie.acmontpellier.fr/Disciplines/sti/biotechn/presentations/LA_GALERIE_Api20
e.PPT#1
http://www.google.ca/search?hl=fr&q=Api+20+E&start=20&sa=N
http://pedagogie.acmontpellier.fr/Disciplines/sti/biotechn/documents/Api.pdf
http://facultyfiles.deanza.edu/gems/gilleskay/Exercise24API20E.doc

http://www.oriondiagnostica.com/product?product=10327060&group=6.0
1
http://www.oriondiagnostica.com/files/odextra/Hygiene%20testing%20bro
chures/502-07GB_Hygicult_Model_Chart.pdf

Antibiogramme : Thorie et Technique de lcouvillonnage :

o http://pedagogie.acmontpellier.fr/Disciplines/sti/biotechn/antibiogramme_par_diffusion.htm
o http://pedagogie.acmontpellier.fr/Disciplines/sti/biotechn/documents/Antibiogramme_vAFSS
APS_BTS_spl.pdf
o http://pedagogie.acmontpellier.fr/Disciplines/sti/biotechn/documents/Antibiogramme_SARMStaphylocoques.pdf

Mthodes d'analyses biologiques, microbiologiques et toxicologiques

du CEAEQ
o http://www.ceaeq.gouv.qc.ca/methodes/bio_toxico_micr