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138 6 Biotecnologa con protozoos

especies de Trypanosoma son los agentes causantes

1. Introduccin

de la enfermedad del sueo y la enfermedad de Chagas.


Ellos

Un
gran nmero de
sustancias
producidas
biotecnolgicamente se derivan de microorganismos de
origen bacteriano y fngico. Ellos
incluir enzimas, vitaminas, biopolmeros, antibiticos y
otros compuestos de comercial
pertinencia. cepas altamente productiva de estos
microorganismos, que han sido genticamente mejoradas
durante dcadas, estn disponibles. Panadera'

formar una minora en comparacin con el nmero


estimado de alrededor de 65.000 especies de protistas.
Los protistas, que comprende los protozoos y
la protophyta (microalgas) son un grupo muy diverso de
eucariotas unicelulares que
han conquistado una gran variedad de hbitats
desde el mar y lagos para el suelo y los desiertos y tienen

Levadura Saccharomyces cerevisiae y Escherich

adaptado un correspondiente variedad de alimentacin

ia COU son probablemente la mejor investigado

y sobrevivir estrategias. Por qu entonces, tener la

microorganismos utilizados en la biotecnologa y

protistas sido tan mal explotados de la biotecnologa?


Una respuesta es, que el hetertrofos

sus genomas fueron de los primeros secuenciado


queridos. Ambos son GRAS (generalmente reconocidos
como

protistas, debido a sus estrategias de alimentacin


especializadas son difciles de cultivar. Sin embargo,
como se

seguro) especies y se utilizan como los caballos de


trabajo

se muestra ms adelante este dificultades pueden ser


superadas.

en la produccin de protenas heterlogas.

Pero incluso aquellas especies que pueden cultivarse

Sin embargo, en pruebas de deteccin de nuevos


compuestos

fcilmente, como los ciliados del gnero Tetrahymena,


amebas, flagelados euglenoid, y

estas especies bien conocidas pueden no ofrecer


demasiado

dinoflagelados han convertido recientemente

muchas noticias. Los nuevos organismos de la


biotecnologa
ofrecer la posibilidad de detectar nuevos productos.
El papel de los protozoos en biotecnologa tiene
en gran medida ignorado. Sabemos que los protozoos
juegan un papel importante en el tratamiento de las
aguas residuales comunales e industriales y algunos
como
parsitos del hombre. tropica la malaria, causada por

utilizado en la biotecnologa. Trabajar con uno de


los protistas mejor estudiados, Tetrahymena thermophila,
T. CECH detectaron ribozimas y fue
galardonado con el Premio Nobel de Medicina y
Fisiologa en 1989 por sus estudios sobre cataltica
ARN (Cech, 1990). Otro hito es la
deteccin de Tetrahymena telomerasa por E.
BLACKBURN (1992). Esta enzima crea la

apicomplejo el Plasmodium falciparum, es

extremos de los cromosomas, o telmeros de la nueva


macronucleus en desarrollo despus de la conjugacin

matando a ms de dos millones de personas por ao.

(La forma sexual de la reproduccin en ciliadas

protistas). Tetrahymena necesita muchos telmeros,

Dictyostelium). En la parte superior del rbol hay una

y por lo tanto, tiene una abundancia de la enzima, que


normalmente es poco frecuente en otras clulas. la
biotecnologa protista est en su comienzo; va a

sbita radiacin explosiva del grupo corona

florecer si ms investigacin se invierte en este nuevo

orden de ramificacin precisa.

campo (Kiy, 1998).

No es el grupo monofiltico de la Alveolata que


comprende el

2 Los protistas - una


Visin de conjunto
Los protistas son organismos unicelulares, cuyos
antepasados fueron los primeros eucariotas en la tierra.
Se levantaron de la asociacin simbitica de varias
procariotas hace unos dos millones de aos.
Los estudios sobre la secuenciacin comparativa de la
pequea subunidad ribosomal RNA demuestran la
tremenda diversidad gentica de los protistas recientes.
Ya que comprenden especies con modos auttrofas y
hetertrofas de vida que

con una gran cantidad de incertidumbre con respecto a la

Apicomplexa (la antigua Sporozoa que contiene el


parsito de la malaria Plasmodium), la
dinoflagelados (Dinozoa), y los ciliados (Ciliophora) que
contiene los ciliados de agua dulce
Paramecium y Tetrahymena. Otro miembro del grupo de
la corona es el "Cromista",
que comprenden el cryptomonads, las algas calcreas, y
las algas con el heterokontophyta
crisofitas, diatomeas y algas marrones. Todas
miembros de la "Cromista" poseen mastigonema
tubulares tripartitas sobre sus flagelos. los
moldes de limo netos (Labyrinthula) y la planta

se han clasificado en microalgas (proto

oomicetos patgenos (Phytophthora) son

Phyta) y protozoos, una antigua divisin. Protistas


parecen caer en tres grupos principales, como se ilustra
en la Fig. 1 (BARDELE, 1997). El grupo temprano
carece de mitocondrias y est representado por el
Microspora,
Giardia,
cierta
amoeboflagellates,
tricomonas, y

relacionados con las algas heterokontophyta. En


conclusin:

polymastigotes. Es una cuestin de debate

un cierto nivel de organizacin, a saber, la de una

si los miembros de este grupo han perdido

eucariota unicelular.

sus mitocondrias o no los posean.

3 productos obtenidos a partir

La deteccin de las chaperonas mitocondrial favorece a


la primera posibilidad. El grupo de medio contiene el
Euglenozoa, que comprenden el Kinetoplastida, as
como hetertrofos y

protistas

no hay taxn monofiltico "Protista" y


protistas por lo tanto deben ser definidas como
eucariotas de

3.1 Los bioensayos


Tres bioensayos, todo ello utilizando el ciliado Tetra

euglenoids verdes. Este grupo contiene, adems, la gran


mayora de la paraphyletic

hymena (Fig. 2) como un organismo de prueba han sido

rizpodos y los moldes de limo (y Physarum

reportado. PORRINI y Testolin (1984) desarrollaron un


ensayo para probar el valor nutricional de

productos crnicos con Tetrahymena, como este ciliado

protistas hetertrofos han desarrollado especial

se sabe que tiene demandas muy similares en


aminocidos esenciales como el hombre. Los resultados
con Tetrahymena se obtuvieron ms rpido que con los
ensayos con ratas o ratones como organismos de ensayo.

orgnulos de defensa contra sus depredadores.

HUBER et al. (1990) present una Tetrahymena

en la superficie celular donde se convierten en dis

ensayo de inhibicin de crecimiento para la prueba de


toxicidad de

cobrado en el momento encuentro con un depredador.


Blepharismin es un compuesto de los grnulos de
pigmento de la ciliado Blepharisma japonicum y

productos qumicos ambientales. El ensayo demostr

Muchas de estas vesculas de ncleo denso estn


atracados

dar mejores resultados que el "lodo activado

se ha demostrado que inhibe el crecimiento de bacterias


gram-positivas, por ejemplo, de resistente a la meticilina

ensayo de respiracin "recomendado por la OCDE

cepas de Staphylococcus aureus (PANT et al.,

(Y0sHI0KA et al., 1986). Pauli y BERGER

1997). La estructura qumica de blepharismin

(1996) desarrollaron una respuesta chemosensory

se relaciona con stentorin, un compuesto obtenido

ensayo para monitorizar la toxicidad de la contaminacin


qumica de los ambientes acuticos. La prueba se basa

a partir de vesculas de colores del protista ciliado

en las exposiciones Tetrahymena reaccin de evitacin


cuando la clula se encuentra con un desfavorable
ambiente. En comparacin con el estndar

Stentor coeruleus. Stentorin y blepharismin


(. Las figuras 4 y 5) pueden llegar a ser utilizado como
fototeraputica debido a su relacin qumica para

ensayos de toxicidad acutica utilizando peces, Daphnia,


y

hipericina. un compuesto de anti- altamente especfica

algas, la prueba de comportamiento es muy sensible,

111V actividad (Tao et ai, 1993; Maeda y ai,

ms rpido y menos caro (Fig. 3). Recientemente, un


microensayo de inhibicin del crecimiento utilizando
Tetrahymena thermophila como un organismo de prueba
tiene

1997). Un compuesto cyloloxic - relacionado con er

sido desarrollado por Pauli y Berger (2000).

et al., 1995). El llamado astasin es novedoso como

El ensayo se distribuye en el comercio (PROTOTOXKIT


FT Ltd., Deinze, Blgica).

que contiene un resto de carbohidrato. inhibe

Los compuestos bioactivos 3.2 Pequeo


protistas hetertrofos se cree que tienen
sin metabolismo secundario como las plantas. Por lo
tanto, la posibilidad de detectar nuevos com bioactivo
libras pueden ser menos prometedor en comparacin con
organismos auttrofas. Cuantos sean

gosterol - ha sido extrada del color de


menos flagelado euglenoid Asiasia longa (KAYA

el crecimiento de las clulas de linfoma humano y


mata 50% de las clulas a una concentracin de
10 ml ig '. Hasta el momento no ARC slo unos pocos
biocompuestos aclive de origen conocido y protista
estos pueden ser no de inmediato teraputico
valor. Sin embargo, pueden servir como lder

estructuras para el diseo de nuevos frmacos por com


la qumica combinatoria.

mal olor de aceite de pescado (ausente en aceite protisi)


y
la posibilidad de producir el aceite bajo protista

3.3 poliinsaturados de cadena larga

condiciones controladas y la calidad son en apoyo del


aceite de una sola clula. Una buena fuente para

cidos grasos

ARA y EPA es el protista flagelado verde

Los cidos grasos poliinsaturados (PUFA) Pro

Euglena gracilis. Cuando se cultiva en condiciones de


iluminacin

producida por protistas auttrofas (micro-algas) son una


fuente primaria de estos com

condiciones cada vez ms se acumula estos

libras en toda la red alimentaria hasta el hombre. cidos


poliinsaturados omega.6.fatty. por ejemplo, cido ylinolnico (OLA. cido octadecatrienoico) y

PUFAs (Ward, 1995). Otra protista,


Terrahymena thermophila contiene hasta

cido araquidnico (ARA, eicosatetraenoico)

30% OLA en sus lpidos de membrana y fosfolpidos. Ya


que no almacena OLA-petrleo en

son precursores esenciales de los cicosanoids

razonable asciende la USC comercial como

tales como prostaglandinas. lcukotricnes, tromboxanos y


prostaciclinas. Un buen OLA

fuente OLA actualmente no es lucrativo.

el

ciliado

fuente es el aceite extrado de las semillas de onagra y


grosella negra, que contiene aproximadamente

3.4 enzimas

15% de este cido graso. Sin embargo, un aumento

Las enzimas son herramientas universales en analtica

demanda
de
cidos
especialmente DHA

y bioqumica de sntesis, la biologa molecular.

grasos

omega-3-PUFAs,

(cido
docosahexacnoic)
y
EPA
(cido
eicosapentacnoic) como suplemento de alimentos para
bebs y
otros alimentos, hechos protistas marinos atractivo como
productores de PUFA. El aceite extrado de
cohnii el dinoflagelado cryptothecodiniun
contiene hasta 40% de DHA, pero no EPA. Ya que
la biomasa de este protista contiene hasta 30%
aceite, DHA a partir de este protista se ha convertido en
una importante alternativa al aceite de pescado como
hasta ahora
mayor fuente del cido graso poliinsaturado de cadena
larga DHA (Barclay et al .. 1994) .El

y muchos otros campos de la investigacin y la


produccin industrial. La exploracin de las enzimas
termorresistentes de Ihermoacidophilic
archaea muestra que la deteccin de nuevos organismos
ofrece la posibilidad de detectar nuevos enzimas. Los
protistas representan una gran diversidad
coleccin de organismos unicelulares, que viven
y sobrevivir en una gran variedad de entornos.
Slo unos pocos han sido cultivadas en cantidades
necesaria para la deteccin de nuevas enzimas, y
por lo tanto es los pocos elegidos, que se utilizan para
la produccin
probablemente

de

enzimas.

Tetrahyn.ena

es

el de ms rpido crecimiento protista y se ha demostrado

para producir altas cantidades de biomasa y contiene


una serie de enzimas vale para convertirse en explorado.
Una enzima que degrada result

purificada a partir de medio de cultivo gastado de T


thermophila (Guberman et al ,. 1999). PLA, escisiones
especficamente el enlace ster del cido graso en

efectivamente el agente gas nervioso somn

posicin sn-I de fosfolpidos. Esta enzima es

(O-1 methylpropylmethylphosphonofluoride .22-tri), a


saber diisopropylfluorophosphatase

valiosa por dos razones: en primer lugar, no est


disponible

(DFPase) se ha obtenido a partir de Tetrahymena


thermophila (Landis et al., 1986). los

en el mercado comercial y en segundo lugar su

DFPase actividad se mantuvo estable en un amplio

disponibilidad
enzimtica

intervalo de pH de pH 4 a 10 y las temperaturas de

para el anlisis y la sntesis de fosfolpidos.

25-55 C. Otra enzima, L.asparaginase. descrito por


KYRIADIS et al. (1990) se encontr que era

puesto que todos los otros phospholipascs estn en la


market.To mejorar el rendimiento de PLA, una
proyeccin

inhibir la proliferacin de clulas de cncer de mama.


Tetrahy, nena tambin se conoce para secretar una gran
nmero de cido diferente hidrolasas en el
medio de cultivo (Mller, 1972). kiv y
Tiedtke (1991) y Kiy et al. (1996) desarrollaron tcnicas
para cultivo masivo y fcil
cosecha de medio de cultivo gastado. Ellos enjaulado enTer rahyinena termia ophila en Ca-alginato
esferas huecas y ms tarde utilizar un bio-reactor
perfundido para cosechar el medio de cultivo gastado

completa

el

kit

de

herramientas

Protocolo para la deteccin de mutantes de la liberacin


las actividades ms altas de este fosfolipasa en el
medio de cultivo gastado se ha establecido. mutante
cepas de la liberacin de aproximadamente el doble de
PLA, se han obtenido actividad (Hartmann et al.,
2000). Como un ciliado Tetrahymena relacionada,
Parameciunm tetraurelia se ha demostrado que la
liberacin

(Fig. 6). Usando las condiciones de fermentacin


continua 34.760 U de fosfatasa cida y 9,944

hidrolasas cidas. por ejemplo .. grandes amounis de un


protcase cysteme al medio de cultivo. Estructura y
funcin de anlisis de la pro-tease purificada revel su
relacin con la catepsina L

U de -hexosaminidase, por ejemplo, se obtuvieron por

familia de protcases cistena (VLKEL et al.,

los das de 2 L de medio de cultivo gastado (KIV et al.

1996). Una proteasa cistena relacionada tiene tambin

1996) (Fig. 7). Los diferentes glicosidasas son de

ha obtenido a partir de Tetrahymena (KARRER et

particular inters, ya que son valiosas herramientas para


el anlisis y la sntesis estereoespecfica

al .. 1993: Suzuki et al .. 1998). El propptido

de restos de azcar de glicanos. glicoprotenas. y


glicolpidos (Kiv et al., 1995). Otro cido
hidrolasa, fosfolipasa A, ha sido recientemente

de la catepsina L inhibe selectivamente la actividad


proteoltica de la enzima madura.
Esto se puede utilizar para desarrollar mejores
inhibidores de las proteasas de la familia catepsina L
que se cree que est implicada en la progresin
de la artritis y en el crecimiento tumoral y la metstasis.

hidrolasas en el medio de cultivo. tiempos de generacin


cortos sin precedentes de 14 horas y celular

4 El cultivo de protistas en

densidades de 2.2x10 7 clulas ml correspondientes

Escala ms grande
Muchos protistas hetertrofos han desarrollado modos
particulares de la alimentacin. A menudo requieren
medios complejos o los organismos vivos alimenticios.
En el ltimo caso, los organismos alimenticios. por
ejemplo .. bacterias no patgenas o auttrofas flagelados
Al igual que las especies Dunalielia o Chiorella.
se cultivan por separado. cultivo masivo de
estos protistas. si es posible. es difcil y tedioso. Sin
embargo, se ha hecho posible para obtener cultivos en
masa de incluso estos prolists debido a

utilizaron matraces

1992a, b). Los avances en la tecnologa de biorreactor


y la formulacin de medio de cultivo permiti masa
cultivo de otras especies protisi. Las amebas
Acanthamoeba castellanli y vermifonnis llartmanelIa,
por ejemplo, se cultivaron con xito en un quimiostato.
En condiciones de estado estacionario. cuando el
crecimiento raie igual la tasa de dilucin, los tiempos
de generacin de 25 y 16 h, y
densidades celulares mximas de 2.5 y 3.6 10 'celdas

las mejoras en las tcnicas de cultivo. Ki


y MAROUAROT (1995)
agitacin.

a pesos en seco de 54 g L-1 se obtuvieron como se


ilustra en las Figs. 8 y 9 (Kir y TIED'rxE.

de

desarrollado originalmente para el cultivo de la mam


las clulas del tejido Mal. a crecer los ciliados niohilis
Engelinunniella y Blepharir, na-america num en cultivos
en masa.
Las tcnicas para el cultivo de masas han sido
desarrollado. SCIIONEI-LLD et al. (1986) creci el
wfraurelia ciliado Paramecium en un 250 L del puente
areo

ml '. respectivamente, fueron obtenidos (Weekers


y VociELs, 1994). Se obtuvieron las densidades celulares
ms altas en lo que va de clulas 10H ml 'cuando
Leishmania, protistas parasitarios kinetoplastid
causando leishmaniasis. por ejemplo, Kala Azar (L.
donovani) o dolor de Oriental (L. tropica) se cultivaron
en medios axnicos (Zhang et al .. 1995).
El dinoflagelado Crypthecodinium cohnii
se cultiva a escala ms grande hasta ahora visto
entre los protistas hetertrofos. Martek

fermentador en una escala de 200 l. Obtuvieron biomasa


suficiente para la caracterizacin bioqumica de la
adenilato ciclasa de cilios utilizando una

Biosciences Corp. (Columbia, MD. EE.UU.) es

barato medio de cultivo basado en axcnic

producir un aceite unicelular que contiene alta

la leche desnatada en polvo. medios de cultivo y baratos

cantidades de poliinsaturados de cadena larga

tcnicas de fermentacin continua tienen

cido docosahexaenoico fatly cido (DHA). A

ha desarrollado para Tetrahyinena.This se hizo

el final de la carga de fermentacin de una biomasa

para explorar el potencial biotecnolgico de

40 g L- 'se obtiene (CHF.N. 1996).

el ciliado Tetrahv mena thermophila. cual

Algunos de los protistas auttrofas - a menudo se hace


referencia tambin como microalgas - puede haber

segrega altos actividades de varios lisosomal

el cultivo de este protista en una escala de 150.000 L

mencionado tambin. Los costos de los medios de


cultivo inorgnicos para protistas son auttrofas
considerablemente menor que para heterotrfica
queridos, pero los auttrofos y crecen ms lentamente
llegar a concentraciones de clulas inferiores. Muchas
especies
arco, por lo tanto, cultivada en poco profundo abierto

Dunaliella se cultiva en estanques de agua salada. Es


utilizado para la produccin de -caroteno. un
carotenoide utilizado como pigmento alimentos naturales
y suplementos de vitaminas y de alimentos saludables.
Paredes Haematococcus PLU se cultivan para producir
otro carotenoide. astaxantina. dando camarones
y el salmn su tpico color rojo anaranjado. En
salmn y el cultivo de camarn. donde lo natural
se

astaxantina

limitada

polmero de glucosa. SS-1, 3-glucano (paramylum). en


cantidades mayores que en condiciones auttrofos. (Fig.
10). (Los estudios preliminares han
muestran que las lminas hechas de apoyo paramylum
la cicatrizacin de heridas mediante la mejora de la
regeneracin

estanques en lugar de biorreactores.

alimentos
comida

de la luz, sin embargo, puede cambiar a una forma


hetertrofa de la vida. Cultivada en medio rico en
nutrientes orgnicos las clulas producen y depositan la

de los epitelios de la herida; Su et al., 1997; PORTERA


et
al., 1997.)

5; Transformacin de
Protistas y Expresin de
Los genes extranjeros

complementado

se alimenta a los animales de granja para obtener el color


deseado apetitoso. Cyanotech Corp. (Kailua-Kona,
Hawaii, EE.UU.) produce astaxantina

Slo unos pocos organismos estn actualmente en uso


para

(Nombre de marca: NatuRose) forma Haematococcus,


crecido a gran escala en estanques abiertos.

comprender rpido crecimiento anfitriones como


algunas especies

cruentum Porphyridium, tambin conocido como

de bacterias y levaduras, y clulas de insectos infectadas


con virus de crecimiento lento baculovirus y mamferos

alga roja unicelular, es una buena fuente para


produccin de PUFAs, especialmente araquidnico
cido (ARA). Esta y otras poliinsaturados
cidos grasos tienen un mercado creciente como
suplementos de productos de alimentacin para nios.
Los bebs necesitan especialmente estos cidos grasos
esenciales, cuando
que no se suministran con la leche materna.
El verde flagelada Euglena gracilis vive regularmente
como photoautotroph. En la ausencia

expresin de genes eucariotas extranjeros. Estas

las clulas del tejido. Mientras que las bacterias y las


levaduras huspedes
expresar genes heterlogos en altos rendimientos en
bajo costo, clulas de mamferos tienen ventajas
protenas modificadas y cuando plegadas correctamente
Se necesitan. cultivos de clulas de mamferos, sin
embargo, son caros debido a los estrictos requisitos de
crecimiento y tasas de crecimiento lento y son menos
adecuada para la produccin a gran escala de protenas
recombinantes. Los sistemas alternativos, como
complemento de los anfitriones que se utilizan

actualmente, son bienvenidos, ya que ningn sistema de


expresin universal de genes extraos existe en la
actualidad (Geisse et
al., 1996). El moho del lodo Dictyostelium discoideum
representa un sistema de expresin de la protena
alternativa. Tiene requerimientos de nutrientes simples,
crece rpidamente, y las lneas celulares estables son
disponible. Alto nmero de copias y la integracin
existen plsmidos extracromosmicos para la produccin
de protenas recombinantes. N- o 0 glicosilada protenas
modificadas despus de la traduccin o de otro tipo cosylated cuyos genes fueron dirigidos
en la va secretora - se recuperan
a partir de fluidos de cultivo gastado. Los rendimientos
de 1 mg L -, de

se utilizaron el gen diana. Este protocolo permite la


sustitucin directa del objetivo
gen por el nuevo gen, obviamente, por recombinacin
homloga (Cassidy-HANI.EY et al.,
1997; Hal y Gorovsky, 1997).
GAEnrIG y colaboradores (1999) desarrollaron una
novedoso sistema de expresin Telrahymena para genes
extraos. Explotaron un Te: rahyrnena
cepa con una mutacin en cualquiera de los dos
$-tubulina genes. La mutacin - lys350 est sustituido
por metionina - produce un aumento de la sensibilidad a
la droga paclitaxei microtuhule. Cuando un vector que
contiene un gen extrao

ha obtenido de los fluidos de cultivo (Emslie

flanqueada por las secuencias de aguas arriba y aguas


abajo del gen de la -tubulina particular, est dirigido a
este lugar por recombinacin homloga. la resultante
noquear del gen de -tubulina restaura la resistencia de
la clula a

et al .. 1995). Varios protocolos para la transformacin


tanto de la lhe macronucleus somtica

paclitaxel. Las clulas transformadas de este modo se


pueden seleccionar por su resistencia a la droga y el

y el ncleo de la lnea germinal se han desarrollado

gen extrao se expresa bajo el control de

para el ciliado Tetrahymena thermophila.

el promotor $-tubulina. El sistema ha sido

La microinyeccin y clectroporation han sido

utilizado para expresar el gen de la superficie principal

utilizado con xito como mtodos para la transformacin


tanto de la macronuclei en vegetativamente

protenas de los pescados mulufihiis parsito


lchtyophihirius ciliadas, lo que provoca 'mancha blanca "

BRIJNK y Navas, 1988; clulas y los esbozos


macronuclear recin formado en la conjugacin de las
clulas (Tondravi y Yao, 1986 en crecimiento;

enfermedad en econmicamente importante de agua


dulce

tanto humanos anti-trombina 111 y Schistosoma


japonicum glutathione.S.transferase tienen

Orlas et aL, 1988: GAERTIO y GoRovsKv,


1992). Ms recientemente, la biolstico de partculas
tcnica de bombardeo ha aplicado con xito para
transformar hecn (en las clulas de conjugacin) la
micronucici como roncha. Genticamente Se obtuvieron
transformantes estables, cuando las construcciones que
contienen la nueva secuencia integrados en el
secuencias no codificantes arriba y aguas abajo de

pescado. La protena de superficie es aparentemente


responsables de la inmunidad protectora y, por lo tanto,
una
candidato
para
la
produccin
de
vacunas.
Desafortunadamente Ichtyophthirius mul: ifihi slo
puede ser
crecido en asociacin con su husped, por lo que es
difcil obtener cantidades suficientes de la

protena de superficie. La expresin de la protena de la


superficie Ichryophihirius mullifihils en Terrahymena este ltimo puede ser cultivado en masa
- Hace posible la produccin a gran escala de
protena de superficie del parsito como un potencial
vacuna contra el parsito. Dado que la superficie
protena del parsito no slo se expresa en
Tesrahyniena sino tambin transportado lo la clula
superficie, se puede probar, si las clulas de Tetrahymena
transformadas se pueden utilizar como una vacuna viva
para inmunizar contra bagre cultivados

sistema de expresin puede producir pro recombinante


protenas en cantidades
nicamente con

hasta

ahora

obtenidos

E. COU y levaduras.
6. Conclusin
Protistas muestran una diversidad sin precedentes de
formas y funciones. Esta diversidad ha permitido
los protistas para colonizar todas las formas concebibles
hbitat en la tierra. La enorme diversidad de

multifihiis Ichryophlhirius.

protist formas y modos de vida pueden ser paralelas a


una igualmente diversas vas bioqumicas

No slo de vida libre, sino tambin prolists parasitarias


del hombre como Plasn, odium y Leishmania

El nmero de 65.000 especies de protistas se estima


probablemente demasiado bajo, ya que slo una pequea

se han transformado con xito (HA et al.,

nmero de protistas de la biosfera marina,

1996; Hyon, 1996). En el caso de Leishinania.

un recurso global para la biotecnologa punto da a


conocer (Cowan, 1997). Los protistas comprenden un
Pooi hasta ahora sin explotar de compuestos nuevos y
potencialmente valiosos. Las dificultades en

clulas transfectadas con el gen humano de la


supresor de tumores p53 protena produjo una
phosphorylaed forma de p53. el recombinante
protena se muestra para unirse especficamente a su

cultivo masivo de los protistas especializada en la


alimentacin. una de las razones por las que hasta ahora
han protistas

secuencia potenciadora, demostrando que tena

slo en raras ocasiones ha utilizado en la biotecnologa,


ser

han sintetizado en la conformacin biolgicamente


activa (Zhang et al., 1995). protesis patgena como
Leishmania, que son altamente adaptado

superar con la mejora de cultivo de clulas

con el metabolismo husped humano, puede convertirse


un atractivo sistema de expresin heterlogo

tcnicas adecuadas para protistas. El desarrollo de


nuevas tcnicas para utilizar diferentes protistas para la
expresin de la protena heterloga puede

para protenas humanas. Esto se acenta por el

permitir la produccin de productos de inters comercial


de protistas que resisten

hecho de que hoy en da estos kinetoplastids puede l

cultivo masivo. Un esfuerzo integrado de scicn

cultivada a altas densidades celulares de hasta 10 "


clulas L- '. Si no cepas infecciosas de Leish

listas de diferentes campos de la investigacin y la


tecnologa en general y aplicada que se necesita para
mejorar el potencial biotecnolgico sin explotar

mana funciona tan bien, entonces este hctcrologous

de los protistas.