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Universidade Federal Fluminense

Plo Universitrio de Volta Redonda


Instituto de Cincias Exatas
Departamento de Qumica

Bioqumica experimental
Ricardo de Freitas Branco

Prtica 6
Fermentao alcolica

Amanda Miquilini
Ananda Dias
Kelly Cristina Nascimento
Melissa Brasil

Volta Redonda, 25 de fevereiro de 2016.

Sumrio
1.

Objetivos.......................................................................................................... 2

2.

Procedimento experimental...............................................................................3
2.1 Materiais e reagentes........................................................................................ 3
2.1.1 Aparelhagem................................................................................................. 3
2.2 Metodologia..................................................................................................... 3

3.

Resultados e discusso.................................................................................... 3

4.

Concluso........................................................................................................ 5

5.

Referncias bibliogrficas.................................................................................5

1. Objetivos
Obteno de etanol por fermentao alcolica.
2

2. Procedimento experimental
2.1 Materiais e reagentes
Erlenmeyer;
Pipeta de Pasteur
Suporte universal;
Garra;
Chapa de agitao;
Barra magntica;
Glicose;
Cloreto de amnio (NH4Cl);
Tampo pH 5,5;
Fermento Biolgico (Saccharomyces cerevisiae)
Rolha para Erlenmeyer
Basto de vidro

2.1.1 Aparelhagem
Balana Analtica
2.2 Metodologia
Em uma balana analtica, pesou-se, para dentro de um erlenmeyer de
125mL, aproximadamente 0,3 g de Glicose e, desta mesma forma, 0,2g de fermento
biolgico, no mesmo erlenmeyer. Em seguida, adicionou-se, utilizando-se uma
pipeta de Pasteur, 1 mL de NH4Cl, e completou-se o erlenmeyer para 100 mL com o
tampo pH 5,5.
O erlenmeyer contendo o fermento foi tampado com uma rolha e deixado
sobre a chapa de agitao. Um tubo de vidro fez a conexo com o outro erlenmeyer
contendo gua, de modo que o gs proveniente da fermentao foi borbulhado.
3. Resultados e discusso
Aps vrios minutos em processo de destilao, observou-se a formao de
bolhas no segundo erlenmeyer, indicando a obteno do produto etanol.
O etanol um produto da fermentao do acar, mais frequente entre os
microrganismos. As principais produtoras de lcool so as leveduras principalmente
linhagens de Saccharomyces cerevisae. As leveduras so, como na maioria dos
fungos, organismos aerbicos. No entanto, sob condies de anaerobiose
fermentam carboidratos etanol e gs carbnico.
A fermentao alcolica (catabolismo anaerbico) fornece energia na forma
de ATP ou outros compostos de transferncia de energia para a biossntese do
material celular e produo do etanol. Estas reaes catablicas acontecem com
uma grande diminuio na energia livre, a qual junto com a subsequente hidrlise
do ATP durante as reaes de biossntese, transporte e manuteno, resulta na
produo de calor. Um balano energtico simplificado para a equao do
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catabolismo anaerbico da glicose pela S. cerevisiae, pode ser descrito da seguinte


forma:
GLICOSE 2 CO2 + 2 ETANOL;

DG = -175 kJ/mol de glicose

Leveduras e algumas bactrias fermentam acares, produzindo duas


molculas de cido pirvico. A transformao de piruvato etanol resume-se em
duas etapas. Primeiro, o piruvato descarboxilado a acetaldedo sob ao da
piruvato descarboxilase (e cooperao da tiamina pirofosfato). O acetaldedo , em
seguida, reduzido a etanol pela lcool-desidrogenase com NADH 2.
O detalhamento desta reao est representada na figura 1, com os respectivos
valores de energia livre para cada etapa.

Figura 1: Valores da variao de energia livre para cada etapa do catabolismo anaerbico da
glicose pela S. cerevisiae

O cloreto de amnio quando adicionado ao processo de fermentao


alcolica, produz um aumento na formao de CO 2. Sais de amnio
estimulam de maneira bem definida a fermentao alcolica. O aumento
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na capacidade de fermentao est relacionado com a formao de um


complexo de acar com os sais de amnio.
Uma alternativa para medio indireta de etanol a utilizao de
nitrato de clcio no erlenmeyer que contm gua. A medio seria dada
pela produo de CO2 proveniente do ernlenmeyer contendo a levedura
que, ao entrar em contato com o nitrato de clcio, forma um precipitado de
carbonato de clcio.
Desta forma, o erlenmeyer deveria ser pesado antes e depois da
fermentao, a fim de se determinar a quantidade de CO 2. Tambm seria
necessrio verificar com um refratmetro o ngulo de refrao da glicose.
Tendo estes valores, a quantidade de etanol produzido seria determinada
por meio de comparaes, obtendo um rendimento terico.

4. Concluso
A partir do experimento realizado, observou-se a formao de etanol e CO 2 a
partir de um processo de fermentao provocada por microrganismos,
especificamente Saccharomyces cerevisiae. As leveduras fermentam na ausncia
de oxignio (anaerobiose), degradando parcialmente a glicose em etanol e dixido
de carbono.

5. Referncias bibliogrficas
http://www.scielo.br/pdf/qn/v20n5/4894.pdf;
http://www.scielo.br/pdf/qn/v29n3/29276.pdf
http://www.scielo.br/pdf/brag/v13nunico/13.pdf