ManualBiologia Laboratorio

Manual de laboratorio
de biologa
Coleccin Textos Universitarios
Manual de laboratorio
de biologa
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
UNIVERSIDAD DE LOS ANDES

Autoridades Universitarias
Rector
Mario Bonucci Rossini

Vicerrector Acadmico
Manuel Dagert
Vicerrector Administrativo
Manuel Aranguren
Secretaria
Jos Mara Anderez
COLECCIN
Textos Universitarios
Publicaciones
del Vicerrectorado
Acadmico
Manual de laboratorio de biologa
Primera edicin, 2009
Universidad de Los Andes
Vicerrectorado Acadmico
CODEPRE
Bernardo Chataing / Elsa Nieves

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VICERRECTORADO
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Director
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HECHO EL DEPSITO DE LEY
Depsito Legal: LF 23720085741415

ISBN: 978-980-11-1151
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Los trabajos publicados en la
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han sido rigurosamente
seleccionados y arbitrados
por especialistas en las
diferentes disciplinas.
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PREFACIO
Los avances en la investigacin biolgica abren nuevos caminos a la enseanza y la comprensin de las ciencias biolgicas que representan un gran reto, con nuevos
desafos. Estos cambios y nuevos conocimientos de la biologa nos han dado la oportunidad de brindar nuestro esfuerzo por presentar una serie de trabajos de laboratorio sencillos, fciles de realizar, dinmicos y de bajo costo que se adaptan a los tiempos de hoy.
El presente Manual de laboratorio de biologa ha sido diseado para facilitar
el aprendizaje a los estudiantes que se inician en el campo del estudio del fascinante
mundo de las ciencias biolgicas. El Manual ha sido preparado teniendo en cuenta el
perfil de un investigador, utilizando el mtodo cientfico como su eje fundamental, para facilitar el aprendizaje de los conceptos ms generales de las ciencias biolgicas que
complementan la programacin terica en Biologa que recibe el estudiante. Con este
manual se pretende establecer un contacto directo con los fenmenos biolgicos y las
actividades de investigacin cientfica, de tal manera que podamos preparar profesionales calificados y con una formacin integral en el conocimiento biolgico.
En el Manual se incluyen aspectos bsicos para la realizacin de los trabajos
prcticos como el uso adecuado de un instrumental bsico, el microscopio, la balanza,
el pHmetro, el espectrofotmetro, entre otros; los fundamentos bsicos de las tcnicas
utilizadas en los procesos biolgicos as como actividades de desarrollo cientfico, normas de bioseguridad y actividades de campo.
Para que el estudiante por s mismo evale su aprendizaje, se han introducido
conceptos bsicos, literatura apropiada, ejercicios y cuestionarios de autoevaluacin en
cada una de las prcticas.
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A
Objetivo
Este manual de prcticas tiene como objetivo introducir al estudiante universitario en la observacin directa de los fenmenos biolgicos, a travs del mtodo cientfico y consolidar los conocimientos de la teora de un curso introductorio de Biologa
General, de tal manera que sea capaz de aplicar conceptos y relacionarlos, adems de
facilitar la integracin del conocimiento y despertar el inters del estudiante en esta
ciencia.
Instrucciones generales
El Manual de laboratorio de biologa es un auxiliar didctico al estudio de las
Ciencias de la vida. Se ha planificado, de tal manera, que el estudiante reciba una informacin sobre la naturaleza del fenmeno vida, los organismos vivos y el mtodo cientfico, de una manera general, lo cual le permite integrar los conocimientos de
la Biologa bsica que ha adquirido en los cursos previos, as como sentar las bases de
los conocimientos que ir adquiriendo en los cursos ms avanzados.
La biologa, actualmente, tiene un amplio espectro de accin y est involucrada en una serie de actividades que de una u otra forma, inciden en el comportamiento
del individuo y en su entorno. Ya no podemos hablar de la biologa como una ciencia
que se divide en reas conexas a travs del fenmeno vida, sino que tambin involucra un cambio radical en la forma de pensar y actuar de los individuos y su relacin con
temas sociales como la sobrepoblacin, la contaminacin, la biotica, etc. Inicialmente,
y hasta cerca de la tercera parte del siglo XX, se mantuvo una divisin de la biologa en
reas como la botnica y la zoologa, la ecologa, la bioqumica y la biofsica, la evolucin, la gentica y la fisiologa. Esta divisin, aun cuando se present con fines prcticos, ha sido desbordada por el desarrollo que se ha logrado en la biologa, lo cual ha ampliado de tal manera sus fronteras que ahora incluye campos tan diversos como la
ciberntica, la ingeniera y la manipulacin gentica; la produccin de organismos artificiales a travs de manipulaciones de clulas, como en el estudio de clulas madres; su
Objetivo e instrucciones
impacto en la medicina y en la produccin de productos medicinales y de uso industrial; en el medio ambiente y en la agricultura, en la que se estn produciendo especies
manipuladas por el hombre, como en el caso de los productos transgnicos de consumo
humano y animal que han llevado a una controversia en la sociedad que no se conoca
desde los tiempos de la presentacin de la teora evolucionista de Darwin. En este aspecto, la biologa ha pasado a constituir una herramienta del conocimiento necesaria para poder resolver algunos de los mltiples problemas sociales que aquejan a la sociedad
moderna.
En este manual presentamos un conjunto de prcticas que representan modelos de estudio en cada una de las reas clsicas de la biologa con la finalidad de que
permitan al estudiante tener una idea ms integradora de los procesos biolgicos fundamentales.
Temas
Tres pilares fundamentales constituyen los temas del Manual de laboratorio de
biologa: introduccin al mtodo cientfico, la vida como un fenmeno fisicoqumico y
los fenmenos biolgicos fundamentales.
Normas para el trabajo en el laboratorio
El laboratorio es un lugar de trabajo en el que se realizan los experimentos diseados previamente para contrastar una hiptesis por medio de resultados observables
cualitativamente o cuantitativamente. Es por ello, que debe ser un lugar agradable que
invite a pensar y a reflexionar sobre el problema por resolver o por observar, y para esto, debemos mantenerlo limpio, cuidar los instrumentos y colocar cada cosa en su lugar, as como mantener y poner en prctica las medidas de seguridad personal, tales como el uso de la bata de laboratorio.
Autoevaluacin
En cada prctica de laboratorio el estudiante tiene la oportunidad de evaluar
su dominio del tema.
Glosario
El aprendizaje se facilita por la identificacin de trminos clave y sus definiciones, por medio de ejercicios y cuestionarios.
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Introduccin al mtodo cientfico
Introduccin
Objetivos
Conocimientos necesarios
Experimental
Ejercicios y autoevaluacin
Bibliografa
prctica
Introduccin
La ciencia es la actividad humana que racionaliza la comunicacin del hombre con el universo. Su avance se sustenta, paradjicamente, en la negacin del conocimiento prevaleciente y tomando como vlido un nuevo conocimiento. Este raciocinio
comprende desde la indagacin emprica y la simple lgica deductiva hasta la investigacin dirigida, utilizando equipos, tcnicas, anlisis, etc. El conocimiento cientfico se
enriquece sobre la base de la refutacin de las tesis existentes tomadas como verdades,
exponiendo sus errores, limitaciones o, simplemente, su falsedad, cuando sus conclusiones no resisten las evidencias expuestas por la estricta aplicacin del mtodo cientfico. Este consiste en el proceso de observar, cuantificar, valorar y juzgar nuestro entorno, de modo objetivo, con el propsito concreto de aprenderlo y entenderlo, mejorando
o negando afirmaciones previas.
Objetivos
Analizar el mtodo cientfico y sus alcances, analizar las tcnicas de investigacin y examinar algunos problemas en la investigacin cientfica actual. Relacionar la
investigacin con la sociedad.
Los siguientes trminos: ciencia, la biologa como ciencia, reas de la biologa,
metodologa de la investigacin cientfica, perspectivas del bilogo en Venezuela.
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PRCTICA1
Experimental
A) Resolver y discutir los siguientes ejercicios
1 Cul es la relacin entre una hiptesis y un experimento?

2 Cul es la diferencia entre estas dos frases?
- Juan es pesado.
- Juan pesa 80 Kg.
- Cul de las dos es de mayor utilidad para un trabajo cientfico?
3 Hay diferentes formas mediante las cuales pueden ser clasificadas las propie-
dades de un objeto. Una de ellas es en estructuras y funciones.

Diga si las siguientes propiedades son estructurales o funcionales:
a) pelota de goma
b) misil cilndrico
c) catalizador
d) computador
e) termmetro
f) tomo de hidrgeno.
4 Cul o cules de las siguientes caractersticas se adaptan al pensamiento cien-
tfico?:
a) subjetividad
b) objetividad
c) especulacin
d) formal
e) experimentacin.
5 Para dar validez a sus experimentos, un cientfico quera probar la efectivi-
dad de una vacuna. Se fue a una poblacin que estaba compuesta por 50% de nativos y
50% de no nativos. Se supona que la vacuna podra prevenir cierta enfermedad a la
cual eran susceptibles. Cul de las siguientes pruebas debi hacer el cientfico para probar el suero de una manera vlida?
a) Vacunar a los nativos, pero no a los otros habitantes y observar los
resultados.
b) Vacunar a los otros habitantes y no a los nativos y observar los
resultados.
c) Aplicar la vacuna a los nativos y una solucin de sal inocua a los otros
habitantes y observar los resultados.
d) Aplicar la vacuna a la mitad de los nativos y a la mitad de los otros
habitantes y darles a las respectivas mitades una solucin de sal
inocua.
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1 Bernardo Chataing Elsa Nieves
e) Ud. no puede llevar a cabo un experimento controlado vlido con seres
humanos porque estos son muy complejos.

6 Un bilogo encuentra que al remover el rgano A, una glndula endocrina
de un mamfero adulto, causa que los rganos B y C dejen de funcionar. El rgano B es

tambin una glndula endocrina. Las tres explicaciones posibles para este hecho, que se
han representado en el diagrama a continuacin con el smbolo A
B, que quiere decir A es necesario para B, son las siguientes:
B
A
C
a) Disee un experimento o experimentos que ponga a prueba estas
posibilidades y que nos permitan distinguir entre ellas.

b) Cul o cules son variables dependientes y cul o cules son las
variables independientes?
7 Explique por qu la siguiente hiptesis es inaceptable para un cientfico: la
vida se origin en otro planeta en algn punto del universo y lleg a la Tierra hace millones de aos dentro de un meteoro.
8 De las siguientes observaciones obtenidas de un experimento sobre la nutri-
cin mineral en plantas, trate de llegar a una conclusin con respecto al factor o factores necesarios para el desarrollo de clorofila en las plantas verdes.
Observacin # 1: Las plantas que crecieron en terreno que contena cloruro, pero sin magnesio y suficiente luz, se pusieron verdes.
Observacin # 2: Las plantas que crecieron en un terreno que contena cloruro, pero sin
magnesio y que fueron expuestas a la luz, permanecieron descoloridas.
Observacin # 3: Las plantas crecidas en terreno que contena cloruro y magnesio, pero
que se mantuvieron en la obscuridad, permanecieron descoloridas.
Observacin # 4: Las plantas desarrolladas en terreno que contena magnesio pero no contena cloruro y fueron expuestas a la luz, se pusieron verdes.
Observacin # 5: Las plantas desarrolladas en terreno que contena cloruro pero no magnesio, y que se mantuvieron en la oscuridad, permanecieron descoloridas.
Observacin # 6: Las plantas que crecieron en terreno que no contena ni magnesio ni cloruro pero fueron expuestas a la luz, permanecieron descoloridas.
Observacin # 7: Las plantas que crecieron en terreno que contena magnesio pero no contena cloruro y se mantuvieron en la oscuridad, permanecieron descoloridas.
Observacin # 8: Las plantas que crecieron en terreno que no contena ni cloruro ni magnesio y que permanecieron en la oscuridad, permanecieron descoloridas.
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PRCTICA1
Conclusin:
El (los) factor(es) que inciden en el desarrollo de la clorofila, como puede juzgarse de los experimentos anteriores es (son)...
9 El impacto ambiental resultante del turismo practicado en reas protegidas,
que crea situaciones cuyas consecuencias son desastrosas para la naturaleza y, por eso,
debe ser controlado, a fin de evitar un mal mayor.
Todas las alternativas presentan situaciones de este tipo excepto, por ejemplo:
a) La introduccin de animales exticos que no compiten con especies
nativas.
b) La coleccin de animales, plantas y rocas que no daan los atractivos
naturales.
c) La pesca con caa que no amenaza con la extincin de especies de
peces.
10 Cuales son los pasos del mtodo cientfico?
B) Examine algunos problemas cientficos

1 El estudiante recibir el siguiente material: tesis, monografa, seminario, libros, artculos cientficos.
Formar grupos de discusin para:
a) Estudiar las caractersticas de los materiales recibidos y sus diferencias.
b) Realizar la ficha bibliogrfica respectiva.
c) Plantear un problema y utilizando el mtodo cientfico esquematizar
los pasos.
d) Leer un artculo cientfico y realizar un resumen:
Roche M. Nueva tendencia de la investigacin cientfica venezolana. En: Pfaur J, Fuenmayor F, editores. Deambular por la ciencia. Mrida: Publicaciones Facultad de Ciencias. Universidad de Los Andes; 1999. p. 137-138.
Los ejercicios del presente tema se encuentran en la pgina WEB el placer de
aprender ciencias del Centro SOLCYT de la Facultad de Ciencias. ULA y en http://webdelprofesor.ula.ve/ciencias/chataing. En esta ltima web puede encontrar un variado
nmero de enlaces que le permitirn tener acceso a muchos tpicos de la biologa.
1. Cules son las dimensiones ticas de la ciencia?
2. Cmo explicara el mtodo cientfico?
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1 Bernardo Chataing Elsa Nieves
3. Qu se entiende por un experimento controlado?

4. Defina hiptesis.
Bibliografa
Baker JJ, Allen GE. Biologa e investigacin cientfica. Mxico: Fondo Educativo Interamericano S.A;
1970.
Polit DF, Hungler BP. Investigacin Cientfica. En: Ciencias de la Salud. Mxico: Mc Graw-Hill Interamericana; 1997.
Tamayo-Tamayo M. El proceso de la investigacin cientfica. Mxico: Editorial Limusa; 1999.

Chataing B. Introduccin a la bioqumica celular, Vol. 1. Mrida: Consejo de Publicaciones de la Universidad de Los Andes; 1995.
Roche M. Nueva tendencia de la investigacin cientfica venezolana. En Pfaur J, Fuenmayor F, editores. Deambular por la ciencia. Mrida: Publicaciones Facultad de Ciencias. Universidad de Los
Andes; 1999. p. 137-138.
A N O TA C I O N E S
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Macromolculas y preparacin de soluciones
Introduccin
Objetivos
Experimental
Bibliografa
prctica
Introduccin
Como todo en nuestro planeta, los seres vivos estn compuestos por tomos y
molculas. En los seres vivos estos elementos bsicos estn organizados de una manera
muy especfica formando polmeros o agregados de alto peso molecular, como son los
polisacridos, las protenas, los cidos nucleicos y los lpidos que aun cuando no forman polmeros se asocian entre s. Los tomos y las molculas tambin interactan unos
con otros, en una forma muy precisa de manera que mantienen el flujo de energa necesario para la vida. Gran parte de la biologa moderna se enfoca en la biologa molecular:
esto es, la qumica y fsica de las molculas que constituyen a los seres vivos. Para entender los procesos que rigen la vida es necesario conocer algunos principios bsicos de
la fisicoqumica.
Objetivos
Los organismos vivos realizan diferentes tipos de trabajo biolgico (mecnico,
elctrico, visual, transporte, etc.) que depende de las particularidades de cada organismo. Este trabajo biolgico se realiza en la mayora de los casos manteniendo sus molculas en un medio acuoso, formando soluciones. De hecho, para realizar los experimentos biolgicos es necesario preparar soluciones, la mayora de ellas muy especficas para
cada tipo de experimentos que se realiza. Por ejemplo, es conocido que muchas enzimas funcionan solamente en una determinada solucin, la cual debe contener, no solamente algunos de los factores esenciales para su actividad, sino que los mismos, deben
estar en cantidades definidas. Es por ello, que se requiere un conocimiento de las unidades de concentracin para preparar soluciones y de los mtodos ms simples para llevar a cabo este proceso en el laboratorio. As, el principal objetivo de esta prctica es introducir al estudiante en la preparacin de soluciones de concentraciones conocidas.
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PRCTICA2
Para ello se debe:
Ubicar el fenmeno vida como un sistema fisicoqumico, familiarizarse

con los componentes ms simples que constituyen la materia viva como lo
son los tomos y las molculas que participan en la formacin y en los
procesos metablicos de los seres vivos.
Conocer las diferentes formas de expresar concentraciones de soluciones.
Introducir al estudiante en los principios bsicos de la instrumentacin
cientfica.
Definir y usar trminos fsico-qumicos.
Macromolculas biolgicas.
Preparacin de soluciones.
Bioseguridad en el laboratorio.
Experimental
A) Lea el siguiente texto y disctalo con el profesor y sus compaeros:
1 NORMAS
DE TRABAJO EN EL LABORATORIO
1.1 DE LAS REAS DEL LABORATORIO

a) En el laboratorio hay reas exclusivas para trabajar con parsitos y
animales infectados y reas para labores rutinarias. NUNCA TRABAJE

LOS PARSITOS Y ANIMALES INFECTADOS FUERA DE LAS REAS ESTABLECIDAS. Utilice en las reas contaminantes papel para delimitar el rea de trabajo y lmpiela cuidadosamente una vez finalizada
su experiencia.
b) NO TRANSITE CON MATERIAL CONTAMINANTE A TRAVES DEL
LABORATORIO. TRATE DE MANTENER TODO EL EQUIPO Y EL MATERIAL NECESARIO EN EL AREA DE TRABAJO ANTES DE COMENZAR.
c) NO COMA NI BEBA dentro de las reas del laboratorio. Utilice las oficinas o el saln de docencia para ello. Recuerde que cualquier alimento
o bebida dentro del laboratorio pudiera contaminarse o contaminar el
rea poniendo en peligro su salud.
d) Si tiene visitas, utilice el saln de docencia o atindalas fuera del laboratorio. De esta manera no interrumpe las labores de otras personas que
trabajan en el mismo.
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1.2
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
REACTIVOS
a) Los reactivos del laboratorio deben permanecer en su lugar respectivo.
Si necesita de un reactivo tome la cantidad que necesite del envase SIN

INTRODUCIR SUSTANCIAS O UTILIZAR LAS ESPTULAS, QUE NO
HAYAN SIDO PREVIAMENTE LIMPIADAS, DENTRO DEL MISMO. Al
finalizar coloque el envase en su sitio respectivo. NO DEVUELVA MATERIAL QUE HA SIDO SACADO DEL ENVASE AL MISMO, SI NO EST SEGURO DE QUE NO SE ENCUENTRA CONTAMINADO O MEZCLADO CON OTRAS SUSTANCIAS.
b) En el caso de que se acabe un reactivo, reprtelo inmediatamente para
solicitarlo.
c) Los reactivos en la cava deben ser sacados, utilizados inmediatamente y
retornados a la misma en el menor tiempo posible. En el caso de los reactivos almacenados a -20 oC, espere que el frasco alcance la temperatura ambiente antes de abrir y pesar la cantidad requerida.
d) No guarde reactivos ni soluciones en matraces aforados u otro material
de vidrio de uso cotidiano en el laboratorio como es el caso de cilindros, fiolas, etc. Guarde sus reactivos en botellas.
1.3
EQUIPOS
a) Los equipos deben ser mantenidos completamente limpios despus de
haber sido utilizados

b) Si no sabe como opera un equipo, solicite el catlogo de funcionamiento o que se le ensee a operarlo.
La balanza:
Esta debe estar completamente limpia antes de pesar cualquier sustancia y una
vez utilizada debe tener cuidado de mantenerla en condiciones excelentes de limpieza.
NUNCA QUITE DE LA BALANZA LA SUSTANCIA PESADA SI ANTES LA BALANZA
NO HA SIDO APAGADA. No deje derramar lquidos o sustancias corrosivas sobre la balanza.
Las centrfugas:
- Es recomendable secar las centrfugas refrigeradas despus de una hora de haber sido utilizadas.
- Los rotores y tubos de centrfuga deben ser lavados con agua destilada despus de su uso. No utilice solventes orgnicos en los tubos de centrfuga para lavarlos
o realizar centrifugaciones si antes no ha consultado la resistencia del tipo de tubo a dicho solvente.
- Chequee la velocidad mxima permitida para el rotor que va a utilizar. As
mismo, chequee el modelo de centrfuga en el cual es posible utilizar el rotor.
El espectrmetro:
- Estos equipos son muy delicados por lo cual es conveniente leer las instrucciones de uso antes de ser utilizados.
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PRCTICA2
1.4 MATERIAL DE VIDRIO FUNGIBLE

a) El material de vidrio y los fungibles deben ser colocados en su sitio
despus de haber sido utilizados. Lave el material de vidrio cuidadosamente y enjuguelo al menos tres veces con agua destilada.
b) Si utiliz material de vidrio con sustancias u organismos contaminantes, debe ASEGURARSE DE LAVARLO PREVIAMENTE CON CLORO o
con hipoclorito de sodio u otro producto desinfectante antes de colocarlo en el fregadero. Trate de utilizar guantes al lavar el material.
c) No utilice material de vidrio roto y cuando se rompa algn material, seprelo del resto y reprtelo.
B) Realice los clculos bsicos y discuta los aspectos de
instrumentacin cientfica
1 Repasar clculos bsicos:
a) Diluciones seriadas:
Si tienes una solucin de cloruro de sodio (NaCl) al 10% y quieres una

solucin 1.000.000 de veces ms diluida. Cmo procedes?
b) Porcentaje:
- Deseas preparar 30 ml de formol al 70%. Cmo procedes?
- Como procedes para preparar 100 cc de glucosa al 1%?
2 Manejo, cuidados y recomendaciones en el uso de la instrumentacin cientfica:
- Cristalera: pipetas, cilindros graduados, vasos precipitados, etc.
- pHmetro
- balanza
- agitador magntico
- reactivos
- destilador
- autoclave
C) Preparacin de soluciones
Siguiendo las instrucciones del profesor, prepare las siguientes soluciones:

1. 50 ml de una solucin de alcohol 70%. (v/v) en agua.
2. 10 ml de una solucin de formol al 5%.
3. Solucin salina isotnica (SSI) (0,15 M NaCl)
NaCl (8,5 g)
H2O destilada (1000 ml)
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Bernardo Chataing
Elsa Nieves
Disuelva la sal en un cierto volumen de agua y lleve luego a su volumen final

con el resto del agua. Distribuir a razn de 100 ml por cada botella de 250 ml, autoclavar a 15 lbs, 250 F por 15 minutos.
Cada grupo preparar 100 ml
4. Solucin salina fosfatada (SSF) (0,15 M, pH 7,2)
NaCl (8,00 g)
KCl (0,20 g)
Na2HPO4 (fosfato bsico de sodio) (1,15 g)
KH2PO4 (fosfato cido de potasio) (0,20 g)
H2O destilada hasta (1000 ml)
Disolver la sal en un cierto volumen de agua y llevar luego a volumen final con
el resto del agua. Ajustar el pH requerido, autoclavar.
Cada grupo preparar 100 ml.
5. Solucin de Carnoy (30 ml)
Alcohol absoluto (6 partes)

Acido actico glacial (1 parte)
Cloroformo (3 partes)
Cada grupo preparar 30 ml
1. Cules son las normas y hbitos que deben ser adoptados en un
laboratorio?
2. Qu distingue a un soluto de un solvente?
3. Cules son los cuidados y recomendaciones en el uso de la:
- cristalera,
- pHmetro,
- balanza?
4. Al pesar un reactivo, qu cuidados hay que tomar en cuenta?
Bibliografa
Donald V. Bioqumica. Manual de soluciones. Espaa: Ediciones Omega; 1993.
Nelson DL, Cox MM. Lehninger AL. Principios de bioqumica. Espaa: Ediciones Omega; 2001
Chataing B. Preparacin de soluciones. Temas de tcnicas disponible en URL:
webdelprofesor.ula.ve/ciencias/chataing.
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El microscopio y sus caractersticas
Introduccin
Objetivos
Experimental
Autoevaluacin
Fotografas
Bibliografa
prctica
Introduccin
La complejidad real de nuestro medio ambiente no fue apreciada hasta que el
uso del microscopio revel la existencia de los microorganismos. El hombre en su intensa bsqueda del conocimiento del mundo que lo rodea, ha construido una serie de
instrumentos para ampliar su campo de observacin. El microscopio es un instrumento de gran ayuda para el bilogo, que cada da ampla su campo de accin, obviando en
cierta manera la limitacin de los sentidos.
Objetivos
El estudiante debe ser capaz de identificar las partes del microscopio ptico
y usarlo adecuadamente.
Reconocer la importancia del microscopio en el trabajo del bilogo y reconocer los diferentes tipos de microscopios.
Lea el siguiente texto:
Cuidados que requiere el microscopio ptico:
Existen distintos modelos de microscopio que se adaptan a diferentes aplicaciones. Todos ellos constan de tres partes:
Sistema mecnico
Sistema ptico
Sistema de iluminacin
23
PRCTICA3
Como todo instrumento, debe tratarse con cuidado para que se conserve en
buen estado. En el caso de la manipulacin del microscopio ten siempre presente las siguientes precauciones:
Debe trasladarlo agarrndolo por el asa con una mano y apoyando el pie del
microscopio sobre la palma de la otra mano. As evitar que las lentes, tubo y
espejo puedan salirse de su sitio.
2. Evite por todos los medios la cada de cualquiera de las lentes, porque esto las
inutiliza.
3. Bajo ninguna circunstancia debe sacar los objetivos del revlver.
4. Todas las partes movibles del microscopio funcionan suave y fcilmente. Si esto no ocurre comunqueselo de inmediato a su profesor.
5. Nunca debes tocar con los dedos la superficie de las lentes.
6. La limpieza de las lentes slo debe hacerse con papel especial para lentes;
cualquier otro material puede dejarle pelusas o producir rayas en los vidrios.
7. Si las lentes tienen grasa, use el papel para lentes ligeramente humedecido con
xilol e inmediatamente seque con otro papel del mismo tipo. Jams use alcohol, ni xilol en exceso, pues disuelven el cemento que pega las lentes.
8. Si involuntariamente se mojan las lentes, lmpielas inmediatamente con papel
para lentes.
9. La platina tambin debe mantenerse seca y limpia. Si por cualquier circunstancia se moja, squela de inmediato con un pao limpio y suave.
10. Retire el porta-objetos al finalizar el trabajo y guarde el microscopio en su caja
o cbrelo con su funda.
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Manejo del microscopio

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Identifique el objetivo de menor aumento y colquelo en su sitio girando el revlver. Haciendo uso del tornillo macromtrico, baja la platina con lentitud.
Mueva el condensador hacia arriba, hasta unos pocos milmetros por debajo de
la platina, abra completamente el diafragma y mire por el ocular hasta lograr
que el campo est brillante y uniformemente iluminado.
Coloque la preparacin sobre la platina,
Mire por el ocular y con el tornillo macromtrico suba lentamente hasta que
aparezca la imagen del objeto.
Utilizando el tornillo micromtrico, focalice la imagen hasta que sta sea ntida.
Despus de haber enfocado con el objetivo de menor aumento, gire el revlver
y coloca en posicin el objetivo de mediano aumento.
Focalice la imagen hasta ser ntida, utilizando el tornillo micromtrico.
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
Para utilizar el objetivo de 100X, debe girar el revlver y dejar despejada la preparacin sin objetivo, colocar una gota de aceite de inmersin, girar el revlver
de nuevo y colocar el objetivo de 100X.
9. Focalice la imagen, utilizando el tornillo micromtrico.
10. Gire el revlver, retire la preparacin.
11. Limpie el objetivo de 100X con papel especial.
12. Guarde el microscopio o colquele la funda.
8.
Experimental
A) Aspectos bsicos del microscopio
a. Siguiendo las instrucciones del profesor, y con la ayuda de los libros, estudiar
y reconocer las diferentes partes del microscopio ptico (mecnica y ptica) y sus funciones. Discutir los siguientes aspectos: cuidados y limpieza del microscopio ptico,
monocular, binocular, trionocular, lmite de resolucin (LR), enfoque, tipos de objetivos,
objetivo de inmersin, revlver, condensador, tornillo macromtrico, tornillo micromtrico, platina, aumento, abertura numrica (AN), ndice de refraccin.
b. Investigar y discutir las potencialidades del microscopio y la tecnologa innovadora: microscopios de multiobservacin, gama modular de iluminaciones, epiluminacin, filtros, sistema de microfotografa y vdeo, sistema de cmara clara, sistema para documentar y archivar imgenes, microscopio con cmara de incubacin, con
micromanipuladores, sistema de microscopio controlado por computadora para microinyeccin y microfluorometra. Tipos de microscopios: microscopio invertido (Figura 2), microscopio estereoscpico de fluorescencia (Figura 3), microscopio estereoscpico (Figura 4), microscopio con campo oscuro, con campo claro, con contraste de fases,
contraste interferencial, con polarizacin, de fluorescencia, microscopio electrnico de
transmisin, electrnico de barrido, confocal, microscopa digital y acceso a los parmetros de medicin. Aplicacin y diferencias (Figura 1).
25
PRCTICA3
b.
a.
c.
e.
Figura 1. Fotografas adaptadas de los catlogos de microscopios Zeiss
a) Clulas endoteliales de la arteria pulmonar; b) clulas epiteliales Hep-2; c) clulas epiteliales Hep2;
d) hgado de rata; e) cromosomas; f) clulas proliferantes.
26
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
B) Adquirir prctica en el uso del microscopio

a) Siguiendo las instrucciones, ajuste el sistema de iluminacin de Kohler del mi-
1.
2.
3.
4.
5.
croscopio:
Mirando por el ocular del microscopio, mueva cuidadosamente el condensador hacia abajo
Abra completamente el diafragma hasta que el campo est completamente iluminado.
Ajuste la abertura del diafragma hasta que el campo quede concntrico y reduzca la abertura hasta que el campo quede reducido aproximadamente a sus
3/4 partes.
Focalice hasta ser ntida la imagen, subiendo o bajando el condensador.
Abra el diafragma hasta iluminar uniformemente el campo.
Nota: en los microscopios que poseen condensador, si la abertura del diafragma no es concntrica con el campo es porque el condensador est fuera del centro. Si el
condensador no tiene movimientos laterales, colocarlo en el centro es problema que debe resolver un tcnico.
b) Siguiendo las instrucciones del profesor y el manual del manejo del microsco-
pio, observe las diferentes muestras (fresca in vivo con y sin colorantes, muestras fijadas y coloreadas), enfquelas a diferentes aumentos (10X, 40X y 100X)
y describa las diferencias.
c) Procedimientos de tincin y su aplicacin como tcnicas microscpicas. Siguiendo las instrucciones del profesor: prepare un colorante vital (azul de metileno: 1 parte del colorante por 10.000 partes de alcohol absoluto) y utilcelo
para colorear las muestras.
Lmites de resolucin
Ojo humano .............................. 0,2 mm

Microscopio ptico .................. 0,2 m
Microscopio electrnico .......... 0,2 nm
m= 10-3 mm
nm= 10-6 mm
Autoevaluacin
1. Identifique las partes de los microscopios en las Figuras 2,3 y 4.
2. Maneja apropiadamente el microscopio con pequeo y mediano aumento?
3. Cules son los cuidados que debemos tener con el microscopio ptico?
4. Qu procedimiento seguira usted para el uso del objetivo de mayor aumento?
5. Cmo ajustara la luz para obtener una buena imagen?
27
PRCTICA3
6. Cmo se determina el grado de aumento con que se observa un objeto al mi-
croscopio?
7. Cul es la diferencia entre aumento y resolucin?
8. Cules son los datos que aparecen en un objetivo?
9. Cmo se determina el lmite de resolucin?
10. Cmo determina el lmite de resolucin para objetivo de 100X con N.A.=0,75
y otro de N.A.= 1,4; cul sera mejor? K= 0,61 y = 550 nm.
Figura 2. Microscopio ptico invertido
28
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
Figura 3. Microscopio de fluorescencia
29
PRCTICA3
Figura 4. Microscopio estereoscpico
Bibliografa
Coopers GM. La clula. Espaa: Marban Libros; 2004.
Salomn EP, Berg LR, Martin DW. Biologa. Mxico: McGraw-Hill Interamericana; 1999.
Soto TS, Durn FT. Parasitologa: Manual de trabajos prcticos. Venezuela: Editorial de la Universidad del Zulia; 1996.
30
La clula
Introduccin
Objetivos
Experimental
Autoevaluacin
Bibliografa
prctica
Introduccin
La idea de que las clulas son las unidades fundamentales de los organismos
vivos es parte de la teora celular. La mayor parte de las clulas son microscpicas, pero su tamao y forma varan en un rango muy amplio, lo cual se relaciona con las funciones que stas realizan.
Los organismos pueden clasificarse en dos grupos fundamentalmente diferentes, segn la estructura y complejidad de sus clulas en eucariotes y procariotes. Aunque las plantas y animales son eucariotes, las clulas vegetales difieren de las clulas
animales en varios aspectos.
Objetivos
Evidenciar las diferencias entre las clulas procariotas y las eucariotas.

Observar diferencias entre la clula vegetal y la clula animal.
Reconocer diferentes formas, tamaos y estructuras celulares.
La clula. Estructura, tipos y teora celular.
31
PRCTICA4
La clula
a. Elodea
b. Euglena
c. Sangre
d. Eritrocitos
e. Eritrocitos y linfocitos
Figura 1. Fotografas adaptadas de los catlogos de los microscopios Zeiss
32
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
Experimental
A) Complejidad celular. Las clulas eucariticas y las procariticas.
Bacterias y otros microorganismos

1 Clulas procariticas:
a) Tome una muestra con un hisopo estril de la mucosa bucal o de los o-
dos o nariz.
b) Realice un frotis en una lmina portaobjeto limpia.
c) Deje secar, fije la muestra cubriendo la lmina con varias gotas de meta-
nol durante 1 minuto.

d) Coloree la muestra utilizando el mtodo de GRAM.
e) Una vez coloreada y seca la muestra, observe al microscopio, primero a
bajo aumento, luego a mediano aumento y posteriormente con aumento
de 100X (inmersin).
Mtodo de GRAM
a) Fijar la muestra en la lmina portaobjeto con un mechero
b) Cubra el extendido fijado con violeta de genciana por 1 minuto.
c) Lave abundantemente con agua destilada.
d) Cubra con lugol durante 1 minuto.
e) Lave con alcohol hasta que no salga ms colorante (o con una mezcla
f)
g)
h)
i)
j)
de alcohol-acetona 1:1 v/v).

Coloque la lmina en una solucin de safranina durante 1/2 minuto.
Lave abundantemente con agua.
Deje secar.
Observe al microscopio (con poco aumento y luego con el objetivo
100X).
Si aparecen bacterias coloreadas de morado son Gram positivas y si
aparecen de color rojo son Gram negativas.
Mtodo de Wright
El mtodo permite apreciar con bastante claridad las clulas sanguneas. Para
ello se procede de la siguiente manera:
a) Coloque una muestra de sangre en un portaobjeto y extindala utilizando otro portaobjeto.
b) Caliente la muestra sobre un mechero para fijarla
c) Coloque la lmina en solucin de Wright durante 1 minuto.
d) Agregue agua destilada a la lmina y deje en sta durante 1,5 minutos.
e) Lave la placa con abundante agua.
33
PRCTICA4
La clula
2 Clulas eucariticas:
a) Coloque una o dos gotas de agua estancada (acuario) en cada una de las
lminas limpias y djelas secar.

b) Fjelas con varias gotas de metanol hasta cubrir la muestra. Deje durante 1 min.
c) Coloree una lmina con azul de metileno por 10 min. y la otra con
Giemsa por 20 min.
d) Observe las lminas secas con bajo y alto aumento.
3 Organismos unicelulares:
a) Observar las lminas coloreadas entregadas por el profesor de: bacteria
(procariota), Leishmania (eucariota) u otro organismo unicelular.

B) Diferencias entre las clulas vegetales y animales
1 Clula vegetal:
a) Coloque una gota de agua destilada en una lmina porta objeto y monte
b)
c)
d)
e)
f)
una hoja de elodea o de musgo cubrindola con una laminilla cubre

objeto.
Observe al microscopio con el ocular de 10X y 40X.
Observe la estructura vegetal, particularmente los cloroplastos caractersticos de las clulas vegetales.
Realice pequeos cortes finos de material vegetal: races, hojas, grama,
raspado de papa, cebolla, plantas de jardn, etc.
Mntelos en unas gotas de solucin fisiolgica y cbralos con una laminilla.
Observe al microscopio las estructuras vegetales: cloroplasto, la pared
celular y la membrana celular.
1 Clula animal:
a) Realice la diseccin de un insecto: grillo, cucaracha, etc. o lombriz de
b)
c)
d)
e)
34
tierra, larva, etc. y extraiga el tubo digestivo.

Prepare cortes finos y mntelos en unas gotas de solucin fisiolgica y
cbralos con una laminilla.
Observe al microscopio las clulas animales.
Observar las lminas coloreadas entregadas por el profesor de cortes
coloreados de hgado y bazo.
Con la ayuda de los libros identifique las estructuras.
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
C) Estructura y funciones de la clula.
Formas, tamao, cilios, flagelos, cloroplastos, vacuolas

1 Protozoarios de vida libre:
a) Coloque una o dos gotas de agua estancada (acuario) en una lmina
b)
c)
d)
e)
f)
limpia.
Cbrala con una laminilla.
Observe al microscopio con aumento de 10X y 40X.
Observe los microorganismos que presentan movimiento. Tome nota de
las diversas estructuras que utilizan para su desplazamiento. Tipos celulares, tamaos, membrana celular, cilios, flagelos, cloroplasto, vacuolas, ncleo, etc.
Prepare una muestra con colorante vital. Observe.
Trate de identificar las formas vivientes que observa con ayuda de las
ilustraciones, claves y textos de consulta.
2 Tipos sanguneos:
a) Limpie el dedo anular con algodn empapado en alcohol.
b) Voluntariamente se tomarn muestras de sangre con la ayuda de unas
c)
d)
e)
f)
lancetas desechables. Pinche el dedo y coloque la gota de sangre en un

extremo de los porta objetos limpios.
Se prepararn frotis finos: extienda la gota de sangre con el borde de
otro porta objeto formando un ngulo de 45, deslice suavemente hasta
el otro extremo de la lmina y deje secar el frotis.
Fije el frotis con metanol por 1 minuto.
Coloree con reactivo de Giemsa al 10% por 20 min.
Observe con inmersin los diferentes tipos celulares.
Mtodo de Giemsa
a) Fije la muestra con metanol por 1 minuto.
b) Prepare el Giemsa al 10% en solucin tamponada pH 7,2.
c) Cubra el extendido fijado con el colorante por 20 minutos (2 ml por l-
mina)
d) Lave con abundante agua y deje secar.
e) Observe al microscopio con aumento menor, mediano y con inmersin.
En la siguiente figura presentamos la organizacin de los organismos vivos:
35
PRCTICA4
La clula
Figura 2. Los Reinos de la naturaleza
Autoevaluacin
1. Qu es un colorante vital?
2. Por qu utiliza aceite de inmersin al observar una lmina con el objetivo de
100X?
3. Cules son los aceites de inmersin comnmente utilizados?
4. Diga 6 diferencias fundamentales entre la clula eucariota y procariota?
5. Cules seran las diferencias entre una clula vegetal y una clula animal?
Bibliografa
Coopers GM. La clula. Espaa: Marban Libros; 2004
Curtis H, Barnes NS. Biologa. 5 ed. Espaa: Editorial Mdica Panamericana; 2001
Lodish H, Berk A, Matsudaria P, Kaiser C, Krieger M, Scott M, Zipurky L, Darnell J. 5 ed. Biologa
molecular de la clula. Espaa: Editorial Panamericana; 2006.
Solomon EP, Berg LR, Martn DW. Biologa. Mxico: McGraw-Hill Internacional Editores; 2001.
36
Las reacciones qumicas en biologa y los

procesos de transferencia de energa
Introduccin
Objetivos
Experimental
Bibliografa
prctica
Introduccin
La primera Ley de la Termodinmica establece que si un sistema es sometido
a una transformacin cclica, el trabajo producido en el ambiente es igual al calor que
fluye desde el ambiente. Ello lleva a enunciar el trmino Energa del sistema y su diferencia como:
E = Q W, donde Q y W son respectivamente el calor y el trabajo.
El trabajo se define como una cantidad que fluye a travs de la frontera de un
sistema durante un cambio de estado y que puede utilizarse para elevar un cuerpo en el
entorno: W= m.g.h. Ya que m. g = Pop.A, donde Pop es la presin externa, A el rea de
un cilindro y A.h = V, podemos transformar W en una expresin del tipo W = Pop V,
donde V es la variacin de volumen durante un cambio de estado. El trabajo slo aparece cuando hay un cambio de estado. Debemos aclarar que un cuerpo no posee trabajo.
El calor se define como una cantidad que fluye a travs de la frontera de un sistema durante un cambio de estado, en virtud de una diferencia de temperatura entre el
sistema y el entorno, y que fluye de un punto de temperatura mayor a otro de temperatura menor. La cantidad de calor Q es igual al nmero de gramos de agua del entorno
que aumentan su temperatura en un grado partiendo de una temperatura especfica, bajo una presin especfica. Q = m c T. c es una constante para una sustancia y se denomina la capacidad calorfica y viene expresada en caloras/grado.gramo. La capacidad
calorfica molar es C=c/n, donde n es el nmero de moles de la sustancia. La capacidad
calorfica permite que la energa suministrada al sistema sea medida en trminos de la
elevacin de la temperatura resultante. Cuando C es grande, la transferencia de una cantidad dada de calor a un sistema lleva a una pequea elevacin en la temperatura, mientras que cuando la capacidad calorfica es pequea, la misma cantidad de calor provoca un mayor aumento de la temperatura. El calor es una propiedad que fluye cuando se
produce un cambio de estado. Un cuerpo no posee calor pero s temperatura.
37
PRCTICA5
Las reacciones qumicas en biologa...
La energa interna del sistema es una propiedad que depende del volumen y
la temperatura y puede describirse matemticamente como:
E= CvdT+
donde Cv es la capacidad calorfica determinada a volumen constante.
Para la mayora de las sustancias, E puede considerarse como un cambio de
energa en un proceso a volumen constante y E= Qv, donde este ltimo trmino es el
calor a volumen constante.
Sin embargo, para la mayora de las sustancias lquidas y slidas es conveniente medir una funcin termodinmica denominada la entalpa, representada como:
H= E + (PV)
La entalpa es el calor transferido desde el ambiente en un proceso a presin
constante. El cambio de entalpa de un sistema es, entonces,
H= Qp
La entalpa es una propiedad que depende de la temperatura y de la presin.
Ya que la mayora de los experimentos se realizan a temperatura y presin constante, es
conveniente determinar valores de entalpa en vez de valores de energa interna.
Para una reaccin, en la cual se transforman reactantes en productos, en general se produce absorcin o liberacin de calor. Este calor se denomina calor de reaccin
y es el calor tomado del ambiente en la transformacin de reactantes a T y P dadas en
productos a igual T y P. Si el sistema se encuentra ms caliente despus de la reaccin,
debe fluir calor hacia el entorno para que el sistema recupere su temperatura inicial. En
este caso se dice que la reaccin es exotrmica. Por otra parte, si el sistema se encuentra ms fro despus de la reaccin, debe fluir calor desde el ambiente para restablecer
la temperatura inicial. En este caso la reaccin es endotrmica.
Por otra parte, es til determinar en los procesos biolgicos y en los sistemas
qumicos una propiedad inherente a los mismos que refleja la energa til o aprovechable de un proceso. Esa energa til es definida como LA ENERGIA LIBRE DE GIBBS, dada por la ecuacin: G= H -TS. Esta propiedad es muy til ya que nos permite determinar el estado de equilibrio, y consecuentemente, las concentraciones en equilibrio, en
un sistema qumico. A temperatura y presin constante, el estado de equilibrio corresponde a un mnimo de energa libre. En una reaccin qumica del tipo aA + bB
cC
+ dD, el cambio de energa libre viene dado por la expresin:
G= Go + RT ln
38
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
donde G y Go son el cambio de la energa libre en las condiciones de reaccin y en

condiciones estndar (cules son esas condiciones?) respectivamente, y A, B, C y D son
las concentraciones de cada sustancia. En el equilibrio, G= 0 y
Go= RT ln Kequilibrio
Objetivos
Ilustrar el desprendimiento o la absorcin de calor del ambiente en las reacciones qumicas.
Observar reacciones endotrmicas y exotrmicas.
Observar reacciones en procesos de equilibrio
Observar reacciones de oxido-reduccin.
Conceptos necesarios
Procesos de transformacin de la energa. La primera Ley de la Termodinmica. Calor y temperatura. Entalpa. Reacciones exotrmicas y endotrmicas. Entropa y
energa libre. Reacciones exergnicas y endergnicas. Ejemplos comunes en el metabolismo de los seres vivos. El concepto de equilibrio. Reacciones de xido-reduccin.
Agentes oxidantes y agentes reductores.
Experimental
A) Tipos de reacciones
a. Coloque unos 50 ml de agua en un vaso de precipitado. Mida la temperatura
del agua. Coloque el termmetro en el mesn y mida la temperatura ambiental Son

iguales o diferentes? Agregue al agua 5 ml de H2SO4 concentrado. Mida la temperatura
cada 5 minutos. Deje reposar y mida la temperatura final. Qu observa?
b. Coloque unos 50 ml de agua en un vaso de precipitado, y al igual que en el experimento anterior, mida su temperatura. Agregue 5 g o 5 ml de una solucin 2 M de
NaOH al agua y mida la temperatura. Qu observa?
c. Coloque 10 ml de agua en un vaso de precipitado y mida su temperatura. Agregue 5 g de poliacrilamida y mida su temperatura.
d. Prepare una solucin sulfocrmica, de acuerdo al protocolo abajo indicado:
1 Preparacin de la mezcla cromosulfrica:
a) Coloque 100 g de K2Cr2 O7 (dicromato de potasio) en 1 litro de agua ca-
liente.
39
PRCTICA5
Las reacciones qumicas en biologa...
b) Disuelva, deje enfriar y agregue, colocando en un bao de hielo y lenta-
mente, 300 ml de H2SO4 concentrado.

B) Tipos de procesos
a) Coloque hielo en un vaso de precipitado y mida su temperatura. Deter-
mine la temperatura cada media hora y deje en reposo. Mida nuevamente la temperatura final.
b) Coloque 100 ml de agua en un vaso de precipitado. Mida su temperatura. Caliente el agua y mida su temperatura cada 5 minutos. Deje reposar
media hora y mida nuevamente la temperatura.
C) Procesos de equilibrio qumico
Se realizarn algunas demostraciones, dependiendo de la accesibilidad de los

reactivos en el depsito.
1 Se tienen los siguientes equilibrios:
NaCl (slido) + H2O Na+ + Cl- y

NH4Cl (slido) + H2O NH4+ + Cla) Disuelva NH4Cl en agua hasta su completa solubilizacin y agregue go-
ta a gota una solucin acuosa de cloruro de sodio. Qu observa?

b) Prepare una solucin de cloruro frrico (amarillo plido) y una solucin de tiocianato de potasio (incolora). Al mezclar ambas soluciones
se produce tiocianato frrico, de color rojizo:
Fe+3 + SCN- Fe(SCN)-2
c) Agregue a dicha solucin cloruro frrico y observe los cambios. Agre-
gue a la solucin nitrato de plata y observe los cambios.

2 Para el equilibrio:
CrO4 2 (amarillo) + 2H+ Cr2O7-2 (anaranjado) + H2O

a) Agregue un cido fuerte o una base como hidrxido de sodio y observe
los cambios.
3 Dado el equilibrio:
Co(H2O)6+2 (rosado) + 4Cl- CoCl4-2 (azul) + 6 H2O.

a) Qu ocurrir al agregar cloruro de amonio?
40
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
3 Dada la siguiente reaccin de xido-reduccin:
2 MnO4- + 5 C2O4-2 + 16 H+ 10 CO2 + 2 Mn+2 + 8 H2O

(color violeta)
(incoloro)
a) Realice la siguiente experiencia: coloque 1 ml de oxalato de sodio 0,1
M en un tubo de ensayo y agregue 1 ml de cido sulfrico 0,1 M, luego

agregue a la mezcla de reaccin 1 ml. de permanganato de potasio 0,1
M. Qu observa? Repita la experiencia agregando a la mezcla de reaccin anterior 0,5 ml de sulfato de manganeso 0,1 M qu observa? Repita esta misma experiencia pero colocando la mezcla de reaccin en un
bao de agua caliente.
Autoevaluacin
1. Cul es la diferencia entre calor y temperatura?
2. Son correctas las frases: tengo calor o temperatura?; hace calor?
3. Indique de sus observaciones en la vida diaria, cules experiencias podra pre-
4.
5.
6.
7.
sentar de procesos exo o endotrmicos.

Por qu razn a un organismo humano que tiene fiebre se le cubre con mantas o se le coloca en una baera con agua fra?
Por qu los beduinos y la gente que vive en los desiertos se cubre completamente, aun cuando viven en un ambiente de altas temperaturas? Explique o d
razones de este proceder
Las bombas y los proyectiles en general, liberan calor al ambiente? Esas
reacciones son endo o exergnicas?
Los organismos vivos se clasifican en poiquilotermos y homeotermos. Cul es
la razn de esta clasificacin? D ejemplos.
Bibliografa
Chataing B. Introduccin a la bioqumica celular. Vol. 2. Mrida: Consejo de Publicaciones ULA;

1998.
Curtis H, Barnes N S. Biologa. 6 ed. Espaa: Editorial Mdica Panamericana; 2001.
Lodish H, Berk A, Matsudaria P, Kaiser C, Krieger M, Scott M, Zipurky L, Darnell J. Biologa molecular de la clula. 5 ed. Espaa: Editorial Panamericana; 2006.
Chataing B. Preparacin de soluciones.Temas de Fisicoqumica disponible en URL: webdelprofesor.ula.ve/ciencias/chataing.
Solomon EP, Berg LR, Martin DW. Biologa. Mxico: McGraw-Hill Internacional Editores; 2001.
41
1.
2.
3.
4.
5.
6.
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8.
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10.
11.
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37.
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40.
41.
42.
43.
42
Las enzimas: propiedades de -amilasa
Introduccin
Objetivos
Experimental
Autoevaluacin
Bibliografa
prctica
Introduccin
Las enzimas son protenas que aceleran las velocidades de las reacciones dentro de la clula. Las enzimas se caracterizan por ser altamente especficas, tanto en la reaccin catalizada como en sus sustratos. Las enzimas poseen un centro activo en el cual
se introduce el sustrato. Se considera que entre las posibles propiedades de las enzimas
que le permiten su inmenso poder cataltico, se encuentra el hecho de que stas aceleran las velocidades de las reacciones, debido a la estabilizacin del estado de transicin.
La -amilasa cataliza la hidrlisis de los enlaces -1,4 del almidn, glucgeno y amilopectina, pero no los enlaces de la celulosa ni los enlaces 1,6 del glucgeno o el almidn, produciendo azcares reductores, principalmente maltosa con un poco de glucosa y maltotriosa:
Figura 1. Almidn
43
PRCTICA6
Figura 2. Maltosa
La enzima se encuentra en microorganismos, en plantas y en particular con

una alta actividad, en cereales en germinacin. En los organismos animales se encuentra especialmente en grnulos secretorios de las clulas de las glndulas salivales y del
pncreas, as como en las secreciones de dichos rganos.
La actividad -amilasa puede ser medida por medio de un decrecimiento de la
viscosidad de una solucin de almidn, el decrecimiento de la turbidez de una suspensin de almidn, el decrecimiento de la intensidad de la coloracin de la reaccin almidn-iodo (reactivo de Lugol, que consiste en 5 mM de yodo suspendido en una solucin
de 30 g/litro KI) y el incremento de los grupos reductores (glucosa en maltosa). Estos ltimos pueden ser determinados por el mtodo del cido 3,5-dinitrosaliclico que se reduce a cido 3-amino-5-dinitrosaliclico produciendo una coloracin que se mide en el
espectrofotmetro a 540 nm, o se puede determinar con el mtodo de Somogyi-Nelson.
cido 3.5-dinitrosaliclico
cido 3-amino-5-dinitrosaliclico
Dos mtodos semi-cuantitativos para determinar azcares, particularmente para

esta reaccin, es detectar el almidn con yodo, el cual adquiere una coloracin azul, mientras que el glucgeno y el almidn parcialmente hidrolizado reaccionan con yodo para
producir una coloracin pardo rojiza, que disminuye a medida que transcurre la reaccin.
-amilasa muestra un pH ptimo de 6,9. La enzima es activada por iones cloruro en una concentracin de 10 mM y el in calcio se une fuertemente a la enzima de
tal forma que puede ser removido nicamente por dilisis o con EDTA.
44
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
Objetivos
Realizar curvas de calibracin (en el presente caso se utilizar la curva de calibracin de la cantidad de la glucosa) para determinar la concentracin de un determinado metabolito que absorbe luz a una determinada longitud de onda, por lo cual se
puede determinar la densidad ptica o su absorbancia.
Detectar la concentracin adecuada de -amilasa para el ensayo cintico (la actividad en funcin de la concentracin de enzima, a una concentracin de sustrato y
tiempo fijos).
Detectar la reaccin de hidrlisis del almidn producida por la -amilasa presente en pastillas comerciales de Festal.
Determinar el efecto del pH y la temperatura sobre la reaccin enzimtica.
Concepto de enzimas. Propiedades de las enzimas. Efectos del pH y la temperatura sobre la actividad enzimtica. Mtodos fsicos y qumicos para la deteccin del
cambio de concentracin de un metabolito. La Ley de Beer y el uso del espectrofotmetro para determinar la velocidad de una reaccin enzimtica.
Experimental
A) Preparacin de los reactivos*
1 Preparacin del cido 3,5 dinitrosaliclico (DNS):

a) Disuelva, con calentamiento, 2,5 g de cido dinitrosaliclico en 50 ml de
hidrxido de sodio 2N.

b) Disuelva 75 g de tartrato de sodio y potasio en 100 ml de agua.
c) Mezcle las soluciones 1 y 2 y complete el volumen hasta 250 ml con
agua destilada.
2 Preparacin de cloruro de sodio (NaCl) 0,9 % (w/v):
a) Pese 0,9 g de NaCl y disuelva en 100 ml de agua destilada.
3 Preparacin de NaOH (hidrxido de sodio) 2N:
a) Pese 8 g de NaOH y disuelva en 100 ml de agua destilada.
4 Preparacin del buffer fosfato 20 mM y 10 mM en NaCl (pH 6,9):
a) Mezcle 1,97 g de Na2HPO4.2H2O con 1,23 g de KH2PO4 en 800 ml de
agua destilada. Agregue a la solucin 65 ml de NaCl 0,9% (w/v). Mida
el pH y ajuste a 6,9 con NaOH 0,1 N. Complete el volumen a 1 litro con
agua destilada.
*El mtodo de eleccin depender de las facilidades del depsito de reactivos.
45
PRCTICA6
5 Preparacin de solucin de glucosa estndar (1 mg/ml):

a) Pese 0,1 g de glucosa y disuelva en 10 ml de agua. Tome 1 ml de la so-
lucin y diluya a 10 ml con agua destilada.

6 Preparacin de la solucin de almidn [0,1% (w/v)]:
a) Pese 0,1 g de almidn y disuelva en 100 ml de buffer fosfato, pH 6,9.
7 Preparacin de la -amilasa:
a) Tome una pastilla de Festal, la cual contiene 5000 U de amilasa y muela a un polvo fino en un mortero. Agregue 20 ml de buffer fosfato (pH
6,9) y mantenga en hielo.
B) Mtodo alternativo con el reactivo de Somogyi-Nelson
En este mtodo se calienta el azcar en una solucin alcalina de tartrato de cobre, producindose xido cuproso, que al reaccionar con arsenomolibdato da azul de
molibdeno, con un color azul que puede medirse en el espectrofotmetro a 510 nm.
a. Solucin alcalina de tartrato de cobre: se disuelven 4 g de CuSO4, 5 H2O, 24 g
de Na2CO3 anhidro, 16 g de tartrato de sodio y potasio (sal de Rochelle) y 180 g de
Na2SO4 anhidro y se completa a 1 litro con agua destilada
b. Obtenga reactivo de arsenomolibdato comercial.
En el procedimiento se coloca en un tubo 1,5 ml de agua y 0,1 ml de muestra
conteniendo 50-100 g de azcar y se mezcla vigorosamente. Se le aade a la mezcla
0,2 ml de Ba(OH)2 y 0,2 ml de sulfato de zinc acuoso, mezcle y centrifugue. Tome 1 ml
de sobrenadante y agregue 1 ml de reactivo alcalino de cobre. Caliente en un bao hirviendo durante 15 minutos. Deje enfriar y agregue 1 ml de reactivo arsenomolibdato. Diluya el color azul con agua hasta 10 ml y mida la absorbancia a 510 nm.
C) Procedimientos experimentales
1 Curva de calibracin de la glucosa:

a) Prepare 10 tubos de ensayo y agrgueles glucosa (1 mg/ml) en las si-
guientes cantidades: 0,0; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9 y 1.0 ml.
Complete a un volumen de 2,5 ml con buffer fosfato. Incube 5 minutos
y agregue a cada tubo 1 ml de DNS. Ebulla las muestras durante 5 minutos. Deje enfriar y mida la absorbancia a 546 nm.
b) Grafique Absorbancia versus mg de glucosa.
2 Determinacin de la concentracin ptima de enzima:
Al igual que en el experimento anterior prepare diferentes tubos con las siguientes cantidades de reactivos:
a) 1 ml de almidn (0,1%).
b) Cantidades variables de enzima (desde 0; 0,025; 0,050; 0,075; 0,075;
0,1; 0,15 y 0,2 ml). Complete la cantidad de enzima hasta 2,5 ml agre-
46
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
gando buffer fosfato. Incube durante 5 minutos y detenga la reaccin

agregando 1 ml de DNS. Ebulla las muestras durante 5 minutos, complete el volumen hasta 5 ml con 1,5 ml de agua destilada y mida la absorbancia a 546 nm.
c) Grafique la absorbancia versus la cantidad de enzima (g o mg). Elija la
concentracin de enzima ms recomendable para el ensayo cintico.
3 Determinacin de la velocidad de reaccin:
a) Incube en diferentes tubos de ensayo 1 ml de almidn; la cantidad de
enzima determinada en el ensayo anterior y el volumen de buffer fosfato necesario para completar (enzima+ buffer) la cantidad de 1.5 ml. Incube las muestras a tiempos variables de 15, 30, 45, 60 segundos y 1,5;
2, 3, 4 y 5 minutos. Pare la reaccin a cada perodo de tiempo agregando 1 ml de DNS. Ebulla 5 minutos. Complete el volumen con 2 ml de
agua destilada (volumen total 5 ml) y mida la absorbancia a 546 nm.
Grafique absorbancia versus tiempo y determine la pendiente inicial
(velocidad inicial) de la reaccin.
Nota: el blanco de las reacciones y ensayos es el sistema completo con almidn sin enzima.
4 Determinacin del efecto del pH en la actividad enzimtica:

a) Para la determinacin de pH se elige la concentracin de enzima ade-
cuada (determinada en el experimento b); la misma cantidad de almidn y DNS y la misma cantidad de buffer, excepto que este ltimo se
prepara a diferentes pH (4,5; 5; 6,9; 7 y 8).
5 Determinacin de la energa de activacin de Arrhenius:
La velocidad de una reaccin catalizada por una enzima aumenta con la temperatura hasta llegar a ciertas temperaturas en las cuales la enzima se desnaturaliza y
por consiguiente, pierde su actividad. Existe una temperatura ptima a la cual la enzima presenta su mxima actividad.
La ecuacin de Arrhenius: ln k = Ea/RT permite determinar la energa de activacin Ea, si se realizan ensayos cinticos a diferentes temperaturas. Para ello se procede de la manera siguiente:
a) Prepare tubos de ensayo conteniendo almidn (1 ml ) y el buffer fosfato
a pH 6,9 (al igual que en el experimento anterior). Incube a la temperatura deseada en un bao de Mara (hielo, temperatura ambiente, 30, 40
y 50 oC).
b) Agregue la enzima (volumen ptimo determinado en la parte b) y complete el volumen de enzima con buffer fosfato a pH 6,9 de tal manera
que el volumen de enzima ms buffer sea de 1 ml. Incube 5 minutos y
agregue 1 ml de DNS. Ebulla 5 minutos, agregue 2 ml de agua destilada
47
PRCTICA6
y mida la absorbancia a 546 nm. Determine la velocidad inicial y grafique la constante de velocidad versus el inverso de la temperatura (oK).
La pendiente del grfico es Ea/R.
Nota: Las mismas experiencias pueden realizarse en forma cualitativa (o cuantitativa) utilizando reactivo de Lugol en vez del cido dinitrosaliclico y se detiene la reaccin incubando los tubos 5 minutos en agua hirviendo.
6 Experiencia con el reactivo de Lugol:

a) Prepare ocho tubos de ensayo y agregue la mezcla de reaccin indicada
en la Tabla 1 a cada uno de los tubos.

Tabla 1
CONTENIDO
VOLUMEN (ML)
Almidn (5 g/l)
2,5
Buffer fosfato 0,1 M (pH 6,7)
1,0
NaCl (10 g/l)
0,5
a) Deje incubar los tubos 10 minutos y a 7 de los tubos agregue 0,3 ml de
la solucin de la enzima (1 pastilla disuelta en 20 ml de buffer fosfato).

Al octavo tubo agregue 0,3 ml de agua en vez de enzima.
b) Incube los tubos durante 0, 5, 10, 15, 20, 25, 30 y 35 minutos y detenga
la reaccin colocando los tubos en agua hirviendo.
c) Deje enfriar los tubos y a cada uno agregue 5 gotas [100-200 uL de reactivo] de Lugol. Observe los efectos o mida la absorbancia de cada tubo
a la longitud de onda seleccionada
Autoevaluacin
1. Qu es un azcar reductor?
2. Cul es la reaccin que cataliza la -amilasa?, y la -amilasa?
3. Cul es la estructura del almidn? Cul es la estructura de la maltosa?
4. Qu es un enlace glicosdico ? y un enlace glicosdico ?
5. Cules son las caractersticas esenciales de una enzima?
6. Por qu la actividad enzimtica vara con el pH?
7. Qu se entiende por desnaturalizacin de una protena?
8. Para qu realiza una curva de calibracin con glucosa?
48
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
Bibliografa
Philip N. Fsica biolgica, energa, informacin y vida. Espaa: Editorial Reverte; 2005.
Solomon EP, Berg LR, Martin DW. Biologa. Mxico: McGraw-Hill Internacional Editores; 2001.
Plummer DT. Introduccin a la bioqumica prctica. 2 ed. Colombia: McGraw Hill Latinoamericana
S.A.; 1981.
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La fotosntesis
Introduccin
Objetivos
Experimental
Bibliografa
prctica
Introduccin
En este tema consideraremos cmo la energa luminosa, el origen primordial
de toda la energa bioqumica, es absorbida por las clulas fotosintticas para convertirla en energa qumica, la cual a su vez es utilizada para reducir el dixido de carbono y
formar la glucosa.
El trmino fotosntesis usualmente se refiere al proceso total mediante el cual
la glucosa es formada a partir de CO2 y H2O, a expensas de la energa solar. Sin embargo, la luz es directamente requerida nicamente en las primeras etapas de la fotosntesis, en las cuales la energa luminosa capturada es convertida en energa qumica. Esas
primeras reacciones se denominan las reacciones luminosas. Las reacciones remanentes, en las que se forma la glucosa a partir de CO2, en presencia de energa qumica, pueden proceder en la oscuridad o la ausencia de luz y se denominan las reacciones en la
oscuridad (el ciclo de Calvin).
Las reacciones luminosas son nicas en las clulas fotosintticas, mientras que
la mayora de las reacciones en la oscuridad tambin ocurren en clulas heterotrficas.
Los organismos fototrficos atrapan la energa luminosa y la convierten en su
equivalente qumico, mediante un proceso denominado la fotosntesis. En este proceso
ocurren reacciones que requieren de la presencia de la luz, en las cuales se forma ATP
(fotofosforilacin) y NADPH (fotorreduccin). Tanto el ATP y el NADPH producido se
utilizan para la biosntesis de glucosa, a partir de CO2 y H2O, mediante ciclo de Calvin.
Las molculas de pigmentos del aparato especializado en atrapar la energa luminosa se ensamblan en arreglos que absorben la energa en centros fotosintticos denominados fotosistemas. En clulas fototrficas eucariticas, el aparato que atrapa la luz
es localizado en la membrana interna de los sacos tilacoides.
1. El mecanismo de la fotosntesis es complejo y requiere de muchas macromol-
culas y pequeas molculas, tales como protenas transportadoras de electrones, ATPasas y pigmentos fotosintticos. La energa luminosa es atrapada, co-
51
PRCTICA7
La fotosntesis
mo primer paso para la fotosntesis, por molculas fotorreceptoras (que atrapan

o reciben la luz) llamadas clorofilas y otros pigmentos fotosensitivos (Figura 1)
Figura 1. Estructura de pigmentos fotosintticos
2. Los organismos fototrficos contienen pigmentos que absorben la energa de
los fotones. Entre estos pigmentos se encuentran las clorofilas. Al igual que el
ojo, la clorofila es selectiva en cuanto a la longitud de onda de la luz que absorbe (Figura 2).
1 x 104
1x107
RADIO
ROJO
1x108
TV
RADAR
103m
1010m
ANARANJADO
1x109
1x1012
4x1014
8x1014
MICRO
INFRA
VISIBLE
ULTRA
ONDAS
ROJO
1m
1 cm
AMARILLO
10-3cm
VERDE
1x1019
RAYOS
RAYOS
VIOLETA
5x102nm
102nm
10-1nm
AZUL
VIOLETA
UV
760nm
600nm 500nm
380nm
E= 41 kcal/mo
48 kcal/mol 57 kcal/mol
72 kcal/mol
Figura 2. El espectro electromagntico
52
1x1016
1x1024
10-5 nm
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
3. La clorofila absorbe la mayor parte de la luz azul y la violeta y tambin algo de
la roja. La clorofila permite que la luz de longitudes de onda que producen

otros colores pase a travs de ella y sea transmitida. El hecho de que la planta
sea verde muestra que la clorofila transmite las longitudes de onda que causan
este color (no lo absorbe) [Figura 3].
Figura 3. Espectros de absorcin de algunos pigmentos fotosintticos
4. La fotosntesis en las plantas verdes ocurre en organelas especializados deno-
minados cloroplastos.
5. Los pigmentos fotosensitivos (clorofilas, carotenoides y otros) se organizan en
estructuras especializadas para atrapar la luz. Estas estructuras, en fototrofos

eucariticos, dentro de los cloroplastos, reciben el nombre de fotosistemas.
6. Aparte de los pigmentos fotosensitivos, las membranas sensitivas a la luz en
los organismos fototrficos contienen sistemas de transporte de electrones en
los cuales ocurren las reacciones de xido-reduccin. Los componentes de tales sistemas incluyen: plastoquinona, 2 tipos de citocromo b, citocromo f, citocromo c, plastocianina, una protena que contiene cobre, y ferredoxina, una
53
PRCTICA7
La fotosntesis
protena rica en hierro. La ferredoxina parece ser el transportador de electrones ms electronegativo que se conoce en relacin con las reacciones de xido-reduccin.
Las clulas fototrficas eucariticas contienen 2 fotosistemas.
El oxgeno liberado en la fotosntesis proviene del agua.
La glucosa es el producto primario de la fotosntesis. El ATP y el NADPH generados en el transporte de los electrones se utiliza para la biosntesis de la glucosa, a partir de CO2 y H2O.
El balance de masa o la ecuacin para el proceso de transporte de electrones
es:
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10.
4 h (energa luminosa) + H2O + 2ADP + 2Pi + NADP+ > 2 ATP + NADPH + 1/2O2 + 2H+
Y la ecuacin para el proceso de la transformacin de CO2 en glucosa es:

6CO2 + 12NADPH + 12H+ + 18ATP -> C6H12O6 + 12 NADP+ + 18 ADP + 18Pi +6H2O
El proceso total, combinando ambas ecuaciones, lleva a la expresin:

6 H2O + 6CO2 + energa luminosa > C6H12O6 + 6O2 G= -686 kcal/mol
Las clulas fotosintticas tambin pueden contener otros pigmentos como los
carotenoides y las pficobilinas, que sirven como receptores suplementarios de luz para
aquellas porciones del espectro visible que no son cubiertas por las clorofilas. Cada molcula diferente de clorofila absorbe en una regin determinada del espectro (Figura 1).
La clorofila a absorbe alrededor de 663 nm, pero dentro del cloroplasto absorbe a 678
nm, mientras que la clorofila b absorbe alrededor de 635 nm.
Objetivos
Detectar la existencia de pigmentos fotosensitivos en las hojas de las plantas.

Demostrar la produccin de almidn en el proceso de fotosntesis.
Fotosntesis, pigmentos fotosensitivos, ciclo de Calvin, reacciones luminosas,
energa luminosa, espectro electromagntico.
Experimental
A) Aislamiento de molculas de clorofila y pigmentos fotosensitivos
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Bernardo Chataing
Elsa Nieves
a. Lave con agua las hojas de espinaca o elodea, djelas escurrir y pese unos 5 g
de hojas.
b. Corte las hojas en pequeos trozos y agregue 5 ml de metanol. Triture las hojas en un mortero para extraer el jugo. Filtre, usando papel Whatman N 1, y recoja la
solucin obtenida en un vaso de precipitado. Agrguele a las hojas 5 ml de una solucin
de acetona en agua 80% v/v. Enjuague la solucin con 5 ml de solucin acuosa de acetona y mida la absorbancia de la muestra en un espectrofotmetro, desde 340 a 700 nm
con intervalos de 10 nm. Utilice la solucin acuosa de acetona como blanco.
B) Aislamiento de clorofilas a y b
[Diehls-Jones SM. The chlorophylls. J. Chem. Educ. 1984; 61: 454-455]

a. En un mortero, triture 5 g de hojas de espinaca en 10 ml de metanol.
b. Decante el metanol y seque bien las hojas.
c. Repita la trituracin de las hojas en 5 ml de metanol y 7 ml de ter de petrleo
(el ter de petrleo es una mezcla de pentano y hexano)

d. Filtre la mezcla en un embudo al cual se le ha colocado un tapn de lana de
vidrio y recoja el filtrado en un embudo de separacin.
e. Repita la trituracin de las hojas con 5 ml de metanol y 10 ml de ter de petrleo y filtre nuevamente.
f. Remueva la fase inferior de metanol en un embudo de separacin y decntela.
g. Agregue 50 ml de agua destilada a la solucin de ter de petrleo en el embudo de separacin. Remueva la fase acuosa y seque con Na2SO4.
h. Decante el extracto resultante y caliente la solucin en una plancha de calentamiento hasta obtener 5 ml de extracto. Enfre y tape el frasco. Guarde en la nevera.
i. Mida la absorbancia desde 350 hasta 750 nm. Utilice el solvente como blanco.
C) Produccin de almidn durante la fotosntesis
a. Tome hojas de espinaca o elodea y cubra la mitad de cada una con papel alu-
minio. Exponga la hoja (con la mitad descubierta y la otra mitad tapada) a un bombillo
de 100 w por 1 hora.
b. Corte la hoja en pequeos pedazos y una porcin de hojas en la oscuridad y
otra en hojas iluminadas con el bombillo colquelas en cpsulas de Petri que contienen
yodo o reactivo de Lugol. Compare la forma en la cual se han coloreado las hojas.
c. Otra porcin de las hojas, tanto las que estuvieron en la oscuridad como las que
fueron irradiadas por un bombillo, colquelas en un beaker con alcohol caliente sobre
una plancha de calentamiento. Lave nuevamente con alcohol y saque las hojas. Coloque
las hojas en una cpsula de Petri con yodo y observe los cambios.
55
PRCTICA7
La fotosntesis
Autoevaluacin
1. Todos los organismos fototrficos poseen cloroplastos?
2. Describa las caractersticas estructurales y funcionales de los cloroplastos.
3. Las flores poseen los mismos pigmentos y en las mismas cantidades que las
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7.
hojas?
De dnde proviene el oxgeno generado en la fotosntesis?
Las plantas respiran? Si es as, es un proceso simultneo con el de la fotosntesis o separado temporalmente?
De donde proviene el azcar producido durante la fotosntesis?
Por qu colorean las hojas con yodo?
Bibliografa
Plummer DT. Introduccin a la bioqumica prctica. Bogot: McGraw Hill Interamericana S.A.; 1981.
Chataing B. Introduccin a la bioqumica celular. Vol. II. Mrida: Consejo de Publicaciones ULA;
1998.
Diehls-Jones SM. The chlorophylls. J. Chem. Educ. 1984; 61: 454-455.
Izco J. Botnica. 2 Ed. Espaa: Editorial Mc GrawHill; 2004.
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56
prctica
Fermentacin y respiracin
Introduccin
Objetivos
Experimental
Autoevaluacin
Bibliografa
Introduccin
A) Organismos anaerbicos, aerbicos y facultativos
Existe un grupo de organismos eucariticos y procariticos que son estrictamente aerbicos, los cuales pueden metabolizar y crecer nicamente en la presencia del
oxgeno atmosfrico.
Un segundo grupo de organismos son los estrictamente anaerbicos, que metabolizan y crecen en la ausencia de oxgeno libre. Adems, tales organismos requieren
de la exclusin de oxgeno, que de otra forma puede ser letal.
Un tercer tipo de organismos lo forman los facultativos, que son capaces de
transformar su maquinaria metablica de un modo aerbico (respiratorio) a un modo
anaerbico (fermentativo), dependiendo del ambiente en el cual ellos se encuentran.
Entre los organismos estrictamente aerbicos se encuentran los organismos
procariticos streptomycetos y la mayora de los hongos filamentosos eucariticos (asociados con la produccin de quesos y alimentos fermentados).
Entre los organismos estrictamente anaerbicos, tenemos los miembros del gnero bacterial Clostridium, de los cuales, C. botulinum, el productor de la toxina del botulismo, es un ejemplo notorio. Otro ejemplo, lo constituye la bacteria del suelo, Perfringens welchii.
Por otra parte, la levadura, que puede tanto respirar como fermentar ciertos
sustratos, representa un tipo de organismo facultativo. Las clulas del tejido muscular,
dependiendo de la cantidad accesible de oxgeno, representan otro ejemplo de una clula facultativa. Algunos ejemplos de organismos aerbicos, anaerbicos y facultativos
son presentados en la Tabla 1.
57
PRCTICA8
Tabla 1: Organismos aerbicos, anaerbicos y facultativos
ORGANISMOS
ANAERBICOS OBLIGADOS
Clostridia (C. botulinum, P. Welchii )
ORGANISMOS
AERBICOS OBLIGADOS
Streptomycetos
Hongos filamentosos
Bacilos que forman esporas
Bacilo de la tuberculosis
ORGANISMOS FACULTATIVOS
ORGANISMOS AEROTOLERANTES ANAERBICOS
Levaduras
Algunas de las bacterias
Enterobacteria
(Tripanosomas)
El metabolismo anaerbico es menos eficiente que la respiracin, debido a que

la fermentacin no explota toda la energa en el sustrato orgnico para producir ATP y
para sintetizar las sustancias de la clula. Algunos sustratos potenciales son excretados
de la clula en la forma de productos de degradacin que pueden ser posteriormente
oxidados a CO2 y H2O. Los productos de la fermentacin, como el etanol liberado por
la fermentacin en la levadura, no pueden ser posteriormente procesados anaerbicamente por el organismo que lo manufactura.
B) La fermentacin y la respiracin
La gluclisis (Gluco: azcar; lisis: rompimiento) es la secuencia de reacciones

que convierten a la glucosa en piruvato, con la concomitante formacin de ATP.
La secuencia de reacciones desde la glucosa al piruvato es muy similar en todos los organismos y en todas las especies de clulas. En los organismos aerbicos, la
gluclisis es el preludio del cido ctrico y de la cadena de transporte de electrones. En
condiciones aerbicas, el piruvato en la mitocondria es oxidado completamente a CO2
y H2O. El aceptor final de electrones es el oxgeno.
En contraste, en los organismos anaerbicos y facultativos (en presencia de una
baja concentracin de oxgeno), el destino del piruvato es variable, dependiendo del organismo (Tabla 2)
Tabla 2: Organismos que realizan diferentes tipos de fermentaciones
FERMENTACIN
ALCOHLICA
FERMENTACIN
HOMOLCTICA
Fermentacin alcohlica: levaduras
Lactobacillus casei
Fermentacin butrica: Clostridium
Streptococcus cremoris
Fermentacin propinica: Propionibacterias
Streptococci patgenos
FERMENTACIN HETEROLCTICA (FRMICA)

Enterobacterias
58
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
As, la levadura fermenta una hexosa, como la glucosa o fructosa, dando origen a dos molculas de etanol y dos molculas de CO2 (fermentacin alcohlica); el
msculo en presencia de bajas concentraciones de oxgeno puede transformar el piruvato en lactato (fermentacin lctica).
La bacteria Clostridium acetobutylicum produce butanol y acetona. Una lista
de productos industriales obtenidos de microorganismos y de clulas cultivadas de mamferos es mostrada en la Tabla 3.
Tabla 3: Productos producidos por diferentes microorganismos
ORGANISMO
TIPO
PRODUCTO
Saccharomyces cerevisiae
levadura
vino de levadura, sake
Saccharomyces carisbergensis
levadura
cerveza
Saccharomyces rouxii
levadura
salsa de soya
Streptococcus thermophils
bacteria
yogurt
Propionibacterium shermanii
bacteria
queso suizo
Gluconobacteria suboxidans
bacteria
vinagre
Penicillium camembertii
moho
queso camembert y brie
Saccharomyces cerevisiae
levadura
etanol (de Glucosa)
Clostridium acetobutylicum
bacteria
acetona y butanol
Aspergillus niger
moho
cido ctrico
Xanthomonas campestrys
bacteria
polisacridos
Corynebacterium glutamicum
bacteria
L-lisina, cido 5
Guanlico, cido 5
inosnico.
Saccaromycopsis lipolytica
levadura
protena microbial de
Eremothecium ashbyi
levadura
Riboflavina
Pseudomonas denitrificans
bacteria
vitamina B12
Propionibacterium
bacteria
vitamina B12
Leuconostoc mesenteroides
bacteria
dextranos
alcanos del petrleo
Penicillum chrysogenum
moho
penicilinas
Bacillus brevis
bacteria
gramicidin S
Blakeslea trispora
moho
beta-caroteno
Bacillus popiliae
bacteria
bioinsecticidas
Hibridomas
inmunoglobulinas y anticuerpos
monoclonales
Lneas de clulas de mamferos
interfern
Dentro de condiciones aerbicas, el piruvato obtenido en el proceso de gluclisis es transformado completamente a dixido de carbono y agua, como lo indicamos
anteriormente, y la energa liberada en el proceso es utilizada para formar ATP a partir
de ADP y Pi, va el ciclo del cido ctrico, la cadena de transporte de electrones y la oxidacin fosforilativa. El centro de este proceso es la repetida reduccin de cofactores
59
PRCTICA8
transportadores de electrones, tales como NAD+, con la concomitante oxidacin de los

carbonos de los carbohidratos a CO2 , seguido por la reoxidacin de los cofactores reducidos a expensas del oxgeno.
En la respiracin anaerbica, el aceptor final de electrones no es el oxgeno (Tabla 4) y la fosforilacin a nivel de sustrato permite la regeneracin de ATP.
Los productos reducidos son orgenes potenciales de energa y de nutrientes
para otros organismos.
Tabla 4: Aceptores de electrones en la respiracin anaerbica
TIPO
DE RESPIRACIN
ACEPTOR
DE ELECTRONES
PRODUCTO
REDUCIDO
Respiracin de azufre
Azufre (S)
Sulfuro (S=)
Respiracin de sulfato
Sulfato (SO4-2)
Sulfuro
Respiracin de carbonato
CO2
Acetato(CH3COO-)
(bacteria acetognica)
Respiracin de carbonato*
Metano (CH4)
Nitrito (NO -)
Respiracin de hierro
Nitrato(NO3-)
Frrico (Fe+3)
Ferroso (Fe+2)
Compuestos orgnicos
Fumarato, glicina
Succinato, acetato
Respiracin de nitrato
* En bacteria metanognica
Adaptado de Smith C, Wood EJ. Energy in biological systems Hong Kong: Chapman & Hall; 1991.
Antes de continuar, diremos que la fermentacin es un proceso generador de

ATP, en el cual los compuestos orgnicos (metabolitos) actan como donante y aceptor
de electrones. En este proceso no hay aceptor externo de electrones y la formacin de
ATP se logra por medio de fosforilacin a nivel de sustrato. En este proceso, las molculas de alimento son degradadas formando dos especies de productos: uno es la forma
reducida del carbono, tal como etanol, lactato o succinato, y el otro es una forma oxidada del carbono, usualmente dixido de carbono.
En el proceso de la fermentacin no se involucra a un aceptor externo de electrones. En la fermentacin no hay oxidacin neta del sustrato. Tal proceso produce energa al romper el sustrato en dos fragmentos, de tal forma que los electrones son transferidos de un fragmento a otro, con un G
lo suficientemente negativo como para
producir la formacin de ATP. Las fermentaciones son frecuentemente nombradas de
acuerdo con el producto final. En la levadura, el camino glicoltico culmina en la fermentacin alcohlica, debido a que el producto final es etanol. El acetaldehdo intermediario en el proceso sirve ambas funciones de donante y aceptor de electrones.
60
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
C) Indicadores cido-base
Existen colorantes cuyo color depende de la concentracin de H3O+. Esos indicadores por s mismos son cidos o bases dbiles cuyo par conjugado presenta un color diferente.
Por ejemplo, rojo de fenol se ioniza como:
HIn + H2O
si
[In-]
= 0,1
[HIn]
[In-]
= 1,0
[HIn]
[In-]
= 10
[HIn]
H3O+ + In-
KI =
[H3O+][HIn]
[HIn]
Solucin roja
Solucin anaranjada
Solucin amarilla
Otros colorantes son:

COLORANTE
P H ( INTERVALO )
CAMBIO
Timol azul
1,2 - 2,8
Rojo - Amarillo
Anaranjado de metilo
2,1 - 4,4
Anaranjado - Amarillo
Rojo de metilo
4,2 - 6,3
Rojo - Amarillo
Azul de bromotimol
6,0 - 7,6
Amarillo - Azul
Rojo de cresol
7,2 - 8,8
Incoloro - Rojo
Fenolftalena
8,3 - 10,0
Incoloro - Rojo
Amarillo de alizarina
10,1 - 12,0
Amarillo - Rojo
DE COLOR
Objetivos
Detectar la produccin de CO2 en la fermentacin alcohlica de la levadura.

Detectar la presencia de piruvato y acetaldehdo durante la fermentacin de la
glucosa por levaduras.
Respiracin aerbica y anaerbica, fermentacin, gluclisis, ciclo de Krebs, cadena de la oxidacin fosforilativa, ATPasas, gradiente de protones.
61
PRCTICA8
Experimental
A) Deteccin de CO2 durante la fermentacin alcohlica de la levadura.
La levadura Saccharomyces cereviceae en presencia de glucosa transforma este sustrato en etanol y CO2 de acuerdo con la reaccin:
Glucosa + O2
CO2 + CH3CH2OH
La deteccin de la presencia de CO2 puede realizarse recogiendo el gas sobre

agua en un tubo de ensayo que contenga un indicador cido-base como el rojo de fenol
(Por qu se puede detectar de esta forma el dixido de carbono?).
Ejercicio:
Escriba la ecuacin qumica mediante la cual se puede determinar
CO2 con el rojo de fenol.
Procedimiento
1 En 4 generadores de gases, sellados con papel parafilm, como los ilustrados
en la Figura 1, agregue las siguientes soluciones en las proporciones sealadas: 10 ml

de solucin que contenga levaduras en agua (20 g/100ml) y 10 ml de glucosa 10 mM:
a) glucosa + ( agua tibia + levaduras vivas)*
b) (agua tibia + levaduras lisadas) + glucosa
c) agua tibia (sin levaduras) + glucosa
d) (agua tibia + levaduras vivas) +10 ml de agua tibia.
Las levaduras se encuentran suspendidas en agua, por lo cual los 10 ml son de
levadura en agua tibia.
2 Espere unos 15 a 30 minutos y quite el papel parafilm de la boca de los ge-
neradores de gases y coloque la punta de los mismos en tubos de ensayo que contienen
agua con el rojo de fenol (coloque una pequea cantidad de colorante de aproximadamente 2 ml) y observe lo que sucede Por qu cambia de color el colorante? Escriba la
ecuacin del proceso que Ud. cree est ocurriendo.
62
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
Figura 1. Diseo experimental
A) Deteccin de piruvato y acetaldehdo durante la fermentacin

de glucosa por levadura
Plumier DT. Introduccin a la bioqumica prctica. 2 ed. Colombia: Mc Graw Hill Interamericana S. A.; 1981).
(LA PRESENTE SECCIN SE REALIZAR SI HAY LOS REACTIVOS Y LAS CONDICIONES

APROPIADAS EN EL LABORATORIO).
En dos tubos de ensayo (A y B) pipetee 5 ml de la solucin de glucosa (1 g/10

ml); al tubo A agregue 5 ml de suspensin de levaduras en solucin ligeramente alcalina de Na2HPO4 (2 g/10 ml de levaduras en Na2HPO4 pH ~ 8.0); y al tubo B aada 5 ml
de suspensin de levaduras en solucin cida de KH2PO4 (2 g/10 ml de levaduras en solucin de KH2PO4, pH ~5). Coloque los tubos en un bao de agua a 37 oC durante 1 h,
luego aada a cada tubo 2 ml de solucin de cido tricloroactico, mezcle vigorosamente y centrifugue durante 10 min a 2500 g. Separe el sobrenadante y selo para la determinacin del piruvato.
Determinacin de piruvato con nitroprusiato de sodio:
En un tubo de ensayo agregue 2 ml del sobrenadante hervido previamente en

1 g de sulfato de amonio slido. Agregue 1 ml de nitroprusiato de sodio (0.50 g/ 10 ml),
mezcle vigorosamente y deje deslizar cuidadosamente, por las paredes del tubo, amonaco concentrado hasta que se formen dos capas. Si hay piruvato, se forma un anillo
verde o azul en la interfase de los dos lquidos. La formacin de un anillo rosado transitorio en la interfase indica la presencia de grupos tioles y con frecuencia se observa
antes de la coloracin azul o verdosa caracterstica de la reaccin con piruvato.
63
PRCTICA8
Determinacin de piruvato con 2,4-dinitrofenilhidrazina:
Otro mtodo de determinar piruvato es con 2,4 dinitrofenilhidrazina. Para ello

se agrega 1 ml de una solucin saturada de 2,4-dinitrofenilhidrazina (solucin saturada
en HCl 2M) a 2 ml de sobrenadante, se mezcla fuertemente y se colocan dos o tres gotas de la mezcla en un tubo de ensayo, se le agrega 1 ml de hidrxido de sodio (5 g/100
ml) y se diluye con agua hasta 5 ml. La formacin de un color rojo indica la presencia
de piruvato.
Determinacin de acetaldehdo
En dos tubos marcados C y D, pipetee 5 ml de la solucin de glucosa (5 g/ 1

ml.), agregue a ambos tubos 5 ml de la suspensin de levadura en agua (20 g/100 ml de
agua). Al tubo D aada 0,5 g de sulfito de sodio. Mezcle vigorosamente e incube los tubos a 37 C durante 1 h. Centrifugue y separe los sobrenadantes. Mezcle 2 ml de sobrenadante con 2 ml de solucin fresca de nitroprusiato de sodio (0,50 g/10 ml) y 2 ml de
piperidina acuosa (30 g/l en solucin acuosa) y agite. Si hay acetaldehdo presente, se
observar una coloracin azul.
Autoevaluacin
1. Qu son organismos aerbicos, anaerbicos y facultativos? D ejemplos de ca-
2.
3.
4.
5.
6.
7.
da uno de ellos.
Qu es una fermentacin? Qu es la respiracin?
Puede haber respiracin anaerbica? Si la hay, en qu se diferencia de la fermentacin?
En cules etapas del proceso respiratorio se genera CO2?
En cules etapas del proceso fermentativo se genera CO2?
Por qu en la determinacin de acetaldehdo agrega sulfito de sodio a uno de
los tubos?
La ecuacin general del proceso de la respiracin es la siguiente:
C6H12O6 + 6O2
6CO2 + 6 H2O.
a) Esta reaccin es endergnica o exergnica?

b) Existen sustancias que se hidratan con facilidad, por lo cual se utilizan
como desecantes. Por ejemplo, sulfato de sodio, sulfato de magnesio,

cloruro de calcio, carbonato de potasio, hidrxido de potasio. Con base
en la ecuacin dada y las experiencias que ha realizado en el laboratorio disee un experimento en el cual pudiera demostrar la eficiencia o
rendimiento (% de glucosa consumida con respecto a la cantidad de
CO2 producido ) de la respiracin. Qu reactivos o tcnicas utilizara para detectar cada componente de la reaccin?
64
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
Bibliografa
Curtis H, Barnes N S. Biologa. 6 ed. Espaa: Editorial Mdica Panamericana.;2001.

Chataing B. Introduccin a la bioqumica celular. Vol. II. Mrida, Venezuela: Consejo de Publicaciones ULA; 1998.
Philip N. Fsica biolgica, energa, informacin y vida. Espaa: Editorial Reverte; 2005.
Smith C, Wood EJ. Energy in biological systems Hong Kong: Chapman & Hall; 1991.
Plummer DT. Introduccin a la bioqumica prctica. 2 ed. Colombia: Mc Graw Hill Interamericana
S.A.; 1981.
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Divisin celular y regulacin trmica
Introduccin
Objetivos
Experimental
Bibliografa
prctica
Introduccin
A) La reproduccin celular
La idea de que los hijos se parecen a los padres es tan antigua como la propia
humanidad. La herencia biolgica ha sido quizs el factor ms relevante en moldear la
evolucin social de la humanidad. Qu entendemos realmente por herencia? Cul es
la fuente de este gran poder? Qu es lo que se transfiere de generacin en generacin?
La manera como la vida se perpeta de generacin en generacin, y cmo el macho y la
hembra contribuyen en las caractersticas de su descendencia, son preguntas fundamentales de las ciencias biolgicas. Nuestra historia empieza con algo, al parecer simple, la
reproduccin de una clula. Las clulas se reproducen mediante un proceso de duplicacin de sus contenidos, conocido como divisin celular. Este ciclo de divisin celular es fundamental para que todos los seres vivos sean reproducibles. En organismos
unicelulares, tales como bacterias, levaduras, protozoarios, cada divisin celular produce un organismo adicional. En especies pluricelulares, son necesarios diversos ciclos de
divisin celular. La divisin celular es necesaria, inclusive en el individuo adulto para
sustituir las clulas que son daadas.
La duracin del ciclo celular vara grandemente de un tipo de clula a otra.
As, los embriones de la mosca tienen los ciclos celulares ms cortos, cada uno de 8 minutos, mientras que la clula heptica de mamferos puede tener ciclos celulares superiores a los 12 meses. El ciclo celular es tradicionalmente dividido en fases distintas
(profase, metafase, anafase, telofase). Los procesos fcilmente visibles de divisin nuclear (mitosis), que son llamados de fase M, tpicamente ocupan una pequea fraccin del
ciclo celular. La otra parte ms larga del ciclo es llamada de interfase. Una clula crece
tomando materiales de su ambiente y utiliza estos materiales en la sntesis de nuevas
molculas estructurales y funcionales. Las nuevas clulas hijas son estructuralmente y
funcionalmente casi idnticas entre s como lo son de su clula progenitora.
67
PRCTICA9
Ciclo celular
Mitosis
Meiosis
Cromosoma
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Meiosis
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
La distribucin de la informacin hereditaria en las clulas procariotas es relativamente sencilla. El material hereditario (ADN) se duplica antes de la divisin celular, la membrana plasmtica se invagina y la clula se segmenta en dos, separando los
dos citoplasmas y las rplicas exactas de la clula inicial.
En los organismos unicelulares, la mitosis es un proceso clave para la reproduccin. La mitosis tambin juega un papel importante en la reproduccin de ciertos
organismos pluricelulares, que pueden formar nuevos individuos que se separan y se
vuelven independientes. Este tipo de reproduccin mediante la mitosis recibe el nombre de reproduccin asexual. Por otra parte, la inmensa mayora de los organismos eucariotas se reproducen sexualmente. La reproduccin sexual generalmente obliga a que
haya dos progenitores y siempre implica acciones de fecundacin y de meiosis. Todos
los individuos con reproduccin sexual, forman gametos y estos al fusionarse dan origen a un huevo con igual carga cromosmica que los progenitores. La meiosis es un tipo especial de divisin nuclear y celular que se cree, evolucion de la mitosis, y utiliza
bsicamente los mismos mecanismos celulares.
B) La regulacin trmica
Una de las ventajas de los seres pluricelulares es su mayor capacidad homeosttica: el mantenimiento de unas constantes fisiolgicas internas en unos niveles poco
variables, en los que las clulas pueden vivir y funcionar con normalidad. En los animales hay un gran nmero de actividades que contribuyen a la homestasis. Entre algunos ejemplos especficos tenemos la regulacin de la composicin qumica de los lquidos internos, los niveles de azcar en la sangre, la captacin y distribucin del oxgeno
entre las clulas y la eliminacin del dixido de carbono en el cuerpo. En esta prctica
examinaremos una de las funciones homeostticas ms notable, como es la regulacin
de la temperatura corporal.
Objetivos
Observar el proceso de divisin celular.
Diferenciar clulas que estn en divisin de las que no lo estn.
Analizar la importancia de la meiosis para los organismos que tienen reproduccin sexual.
Explicar el mecanismo de termorregulacin del cuerpo humano.
Relacionar organismos homeotermos con organismos poiquilotermos frente a
variaciones de la temperatura del ambiente.
69
PRCTICA9
Teora celular, meiosis, mitosis y mecanismos homeostticos.
Experimental
A) La divisin celular
Material:
Levadura en polvo
Glucosa o melaza
Fiolas de 300 ml
H2O tibia
Procedimiento:
1. Prepare dos fiolas. Disuelva en cada una 1 gr. de melaza en 100 ml. de agua
tibia. Aada 1 gr. de la levadura en polvo en cada una, agite y tape el recipiente.
2. Coloque un cultivo a 37 oC por 48 horas, y el otro cultivo durante 1 hora de
incubacin.
3. Al cabo de ese tiempo saque una pequea muestra (gota) del cultivo y colquela sobre una lmina portaobjetos, extienda bien el lquido, de manera que forme una
pelcula fina.
4. Coloque encima un cubre objeto y observe al microscopio con bajo y mediano aumento.
5. Repita la operacin con el otro cultivo, observe, compare y discuta.
Observacin:
Ver unas clulas, que son levaduras, muchas de las cuales presentan una especie de gemas que salen de ellas y que crecern mientras dura su observacin. Las
levaduras son hongos que estn formados por una sola clula, cuando encuentran suficiente alimento crecen, entonces nuevas levaduras se formarn brotando como unas
gemas de las clulas ya desarrolladas, permaneciendo unidas en muchos casos a las
clulas madres (gemacin).
B) Fases de la mitosis
Material:
Bulbos de cebollas, de ajo, semillas con raicillas recin formadas (material

preparado con una semana de anticipacin).
Solucin de HCl 1 N.
Acido actico al 45%.
70
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
Solucin de Carnoy (6 partes de alcohol absoluto, 1 parte de cido actico glacial y 3 partes de cloroformo)
Solucin de acetocarmn, saturada, filtrada y madurada con 2 gotas de cloruro frrico al 29% por cada 100 ml de solucin al momento de utilizar (hervir 0,5 g de
Carmn en 100 ml de 45% cido actico durante 3 minutos, deje enfriar y filtre. Para teir cromosomas se diluye una parte de la solucin con 2 partes de cido actico al 45%
y se aaden 2 gotas de cloruro frrico al 29%).
Procedimiento:
1. Con un bistur haga cortes transversales finos de las races seleccionadas a
diferentes tiempos (48, 4 y 1 hora). Cuide que el corte quede lo ms fino posible.
2. Coloque el corte en el portaobjeto y aada una gota de solucin de cido actico al 45% por 10 min (permite fijar la muestra: la estructura celular con todo sus elementos dispuestos en la forma que estaban en condiciones naturales).
3. Retire el lquido y aada una gota de HCl 1 N por 1 1/2 min (ayuda a disolver sustancias ppticas de la laminilla media). Maceracin.
4. Retire el lquido y lvelas con una gota de agua destilada.
5. Coloca una gota de Carnoy por 3 min.
6. Retire el lquido y aada una gota de colorante acetocarmn por 5 min.
7. Retire el lquido y coloque un cubre objeto, presione con suavidad y seque
el exceso de colorante con papel absorbente.
8. Presione nuevamente con cuidado.
9. Observe la preparaciones al microscopio, primero con pequeo aumento y
luego con aumento mediano. Observe los diferentes aspectos de las clulas (ncleo con
aspecto granular o con los cromosomas teidos, que pueden verse con nitidez) y trate
de identificar las diferentes fases de la mitosis.
10. Para preservar las preparaciones, seque los bordes del cubreobjeto y con un
pincel fino coloque parafina, esperma o esmalte de uas. Tambin puede sellar con otro
sellador disponible.
C) Divisin celular por meiosis
Material:
Hojas de helechos, flores de jardn.

Procedimiento:
Hojas de helechos:
1. Observe las hojas de los helechos por su parte interior, envs, observe los pe-
queos abultamiento de color oscuro llamadas soros.

2. Obsrvela bajo la lupa.
3. Con ayuda de bistur corte la estructura y observe las esporas producida por
la planta de helecho.
71
PRCTICA9
Flores de jardn:
1. Observe las partes de la flor y estudie con ayuda del libro los rganos que se
encuentran.
2. Identifique los estambres que en su extremo llevan una parte engrosada, denominada antena.
3. Corte el extremo de los estambres que contienen la antena, realice otro corte
a nivel de la antena, en cuyo interior existen unos granulillos que constituyen el polen.
4. Coloque los granos de polen en un porta objeto con una gota de glicerina.
Observe los granos de polen de la flor que est estudiando.
5. Discuta la importancia de la meiosis en el proceso de formacin del polen.
D) Regulacin trmica
1. Termostato natural
Material:
Termmetro clnico, alcohol y algodn

Agua fra, chocolate.
Procedimiento:
1. Un estudiante voluntario debe permanecer en reposo, sentado. Un compaero le tomar la temperatura del cuerpo con un termmetro oral y colocar un termmetro en cada mano. A los 3 min, registre la temperatura.
2. El compaero empapa un trozo de algodn en agua helada y frota la parte interna de la mueca izquierda. El estudiante voluntario describe lo que siente, mientras
el agua se va evaporando.
3. El compaero registra la temperatura ambiente, la del cuerpo y las manos.
4. Inmediatamente despus, empapa otro algodn con alcohol y moja la parte
interna de la mueca derecha.
5. Toma la temperatura ambiente, la del cuerpo y manos.
6. Observa y vers que el alcohol se ha secado mucho ms rpido que el agua.
Tu mueca izquierda se enfra mientras el agua se evapora, pero sentirs mas fra la mueca derecha.
7. Explique lo sucedido.
8. Tome agua bien fra, describa lo que siente e inmediatamente el compaero
registrar la temperatura ambiente as como tambin la temperatura de su cuerpo.
9. Compare y discuta los resultados con sus compaeros y saque conclusiones
pertinentes.
72
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
E) Control de temperatura
Material:
Dependiendo de la disponibilidad del laboratorio y tiempo, realice la siguiente experiencia,

Sapo, tortuga, hmster, ratn.
Hielo
Agua tibia 45 oC
Procedimiento:
1. Prepare un dispositivo con dos vasos de precipitado, uno dentro del otro,
dependiendo del tamao y tipo de animal a utilizar.

2. Dentro del vaso mayor coloque hielo.
3. Mida la temperatura del animal.
4. Coloque el animal dentro del vaso menor y djelo por 10 min.
5. Retire el animal e inmediatamente mida la temperatura.
6. Repita el procedimiento sustituyendo el hielo por agua caliente.
7. Discuta sus resultados.
Autoevaluacin
1. Distinga entre los siguientes trminos: haploide, diploide, meiosis, mitosis,
2.
3.
4.
5.
6.
cromosoma, endotermo, homeotermos y poiquilotermos.

Compare la metafase de la mitosis con la metafase II de la meiosis y anafase de
la mitosis con la anafase I y anafase II de la meiosis.
Compare las semejanzas y diferencias en el proceso y en consecuencias genticas de la mitosis y la meiosis.
En qu parte de nuestro cuerpo se producen la mitosis y la meiosis?
Describa qu ocurre en el cuerpo humano cuando la temperatura sube. Lo mismo cuando baja.
Investigue acerca de los mecanismos adaptativos de los poiquilotermos para
regular el medio interno.
Bibliografa
Coopers GM. La clula. Espaa: Marban Libros; 2004
Lodish H, Berk A, Matsudaria P, Kaiser C, Krieger M, Scott M, Zipurky L, Darnell J. Biologa molecular de la clula. 5 ed. Espaa: Editorial Panamericana; 2006.
Salomn EP, Berg LR, Martn DW. Biologa. Espaa: McGraw-Hill Interamericana; 1999.
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Ecosistemas
Introduccin
Objetivos
Experimental
Autoevaluacin
Bibliografa
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prctica
Introduccin
El conjunto de los componentes biticos (vivos) y abiticos (no vivos), a travs
de los cuales fluye la energa y ciclan los materiales, forma lo que se llama un sistema
ecolgico o ecosistema. Dentro del ecosistema, las distintas poblaciones interaccionan
con la porcin abitica del entorno. Tales interacciones tienen dos consecuencias: un
fluir unidireccional de energa que va desde los auttrofos (generalmente organismos fotosintetizadores) a los hetertrofos, que son los que consumen, bien sea a auttrofos o a
otros hetertrofos, y una circulacin o ciclo de materiales que se mueven desde el entorno abitico, pasan por los cuerpos de organismos vivos y retornan otra vez al entorno abitico. Este ciclado de los materiales depende de la existencia de descomponedores, organismos que descomponen los materiales orgnicos en molculas ms simples
que pueden ser usadas por los auttrofos. La prctica consiste en el estudio de una comunidad en su medio natural.
Objetivos
Estudiar algunas relaciones que se producen entre los organismos y entre stos
y el ambiente.
Determinar el flujo de energa como factor importante en la organizacin de los
ecosistemas.
Observar los diferentes niveles trficos.
Explicar por qu, en ambientes diferentes, se desarrollan comunidades distintas.
Organismos autotrficos y heterotrficos, ecosistemas y cadenas trficas.
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P R C T I C A 10
Ecosistemas
Experimental
A) Visita a bosque nublado de monte Zerpa o a cualquier otro lugar
1. Determine el tipo de paisaje (sabana, pramos, selvas, bosques, manglares,
desierto).
2. Observe la diversidad de flora y fauna en un rea de 10 m.
3. Determine el flujo de energa del ecosistema.
4. Determine los diferentes niveles trficos.
B) Pequeos ecosistemas:
1. Trate de establecer pequeos ecosistemas:
Acuticos, tronco de rbol podrido, debajo de piedra grande, etc.

2. Determine las relaciones que pueden establecerse entre los organismos
y entre stos y los factores abiticos:

a. Factores abiticos: (cuantifquelos cualitativamente)
Temperatura
Luz
Humedad
Tipo de suelo
b. Plantas presentes: (trate de clasificarlas dentro de grandes grupos)
Algas
Hongos
Lquenes
Helechos
Hierbas
Arbustos
rboles
Orqudeas
Otros grupos
c. Animales presentes: (trate de clasificarlos dentro de grandes grupos)
Invertebrados:
Anlidos
Platelmintos
Nematelmintos
Moluscos
Artrpodos
Otros grupos
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10
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
Vertebrados:
Peces
Anfibios
Reptiles
Aves
Mamferos
b. Trate de encontrar: las relaciones existentes entre los diferentes miembros de
la comunidad y entre estos y su ambiente fsico.

c. Relaciones
La vegetacin es uniforme o variada
La fauna es muy variada, dnde se refugian, qu comen, horas en las cua-
les permanecen activos

C) El papel de cada organismo en el ecosistema
Considere cada uno de los organismos indicados a continuacin y haga una lista de los efectos de cada uno en sus ecosistemas respectivos, considere, para cada organismo, cmo recibe su energa y nutrientes, a dnde va lo que produce o excreta (residuos metablicos, descendientes, cadveres) y sus efectos sobre otros organismos.
Lombriz de tierra.
Planta herbcea.
Grillo.
Pjaro.
D) Impacto ecolgico
a. Formule una hiptesis que explique lo que sucedera en la comunidad estu-
diada si cambiara un determinado factor ambiental abitico: luz, temperatura, humedad, viento.
b. Imagine un medio ambiente diferente al que estudi: Lagunillas, El Valle, y
formule la hiptesis de lo que le sucedera a alguno de los integrantes de la comunidad
estudiada.
c. Discuta un proyecto de posible explotacin racional de los recursos.
d. La vegetacin contribuye a evitar la erosin.
Autoevaluacin
1. Defina los siguientes trminos: ecosistema, comunidad, bitico, abitico, cade-
na trfica, consumidor, descomponedor, paisaje, bioma.

2. Por qu hay diversidad de ecosistemas en Venezuela y en el mundo.
77
P R C T I C A 10
Ecosistemas
3. Describa lo que le ocurre a la energa luminosa cuando incide sobre un ecosis-
tema de bosque templado, un campo de maz, laguna y sobre campo en el que

pastorea el ganado.
4. Describa lo que le ocurre a los nutrientes minerales en un ecosistema.
Bibliografa
Curtis H, Barnes NS. Biologa. Espaa: Editorial Mdica Panamericana; 2001.
Dieter H, Hergt M. Atlas de ecologa. Espaa: Alianza Editorial; 2000.
Salomon EP, Berg LR, Martn DW. Biologa. Mxico: McGraw-Hill Interamericana; 1999.
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Bernardo Chataing
Elsa Nieves
Materiales necesarios para las prcticas

Prctica 1 Introduccin al mtodo cientfico
No necesita reactivos ni instrumentacin especial.
Material llevado por el profesor: tesis, monografas, seminarios, libros, artculos cientficos
recientes.
Prctica 2
Cristalera:
Equipos:
30 pipetas
PHmetro
10 cilindros graduados 100ml
Balanza
10 vasos precipitados 500ml
Agitadores magnticos
10 vasos precipitados 100 ml
Plato de calentamiento y agitacin
30 erlenmeyer 250 ml
Destilador
10 frascos 500 ml
Autoclave
5 botellas mbar 250 ml
Campana extractora
Reactivos:
Material:
10 propipetas
Cloruro de sodio (NaCl)
10 guantes
Formol
10 tapa bocas
Alcohol
Cloruro de potasio (KCl)
Fosfato bsico de sodio (Na2HPO4)
Fosfato cido de potasio (KH2PO4)
cido actico glacial
Prctica 3
Cloroformo
Microscopio
Reactivos:
Material
biolgico:
Azul de metileno
Lminas fijadas y coloreadas: cortes de
Alcohol absoluto
tejidos, bacterias, etc.

Agua estancada
Cristalera:
10 frascos mbar 30 ml
Equipos:
1 frasco mbar 500 ml
Balanza
10 cilindros 50 ml
20 microscopios
10 microscopios estereoscpicos
Material:
Microscopio con equipo de video
Papel especial para limpieza del

microscopio
Aceite de inmersin
79
Prctica 4 La clula
Material:
Material biolgico:
Hisopo estril
Lminas coloreadas de bacteria (Procario-
Porta objeto
ta) y Leishmania (Eucariota) u otro orga-
Cubre objetos
nismo unicelular
Papel especial de limpieza de microscopio
Lminas de cortes coloreados de hgado y
Bistur
bazo
Hojas de bistur
Agua estancada
Lancetas desechables
Hoja de elodea o de musgo

Races, hojas, grama, raspado de papa,
Reactivos:
cebolla, plantas de jardn, etc.
Metanol
Grillo, cucaracha, etc. o lombriz de tierra,
Solucin salina (ya preparadas en otras
larva, etc. y extraiga el tubo digestivo
prcticas)
Solucin tamponada pH 7,2 (ya prepara-
das en otras prcticas)
Equipos:
20 microscopios
Aceite de inmersin
Azul de metileno
Giemsa
Violeta de genciana
Alcohol
Lugol
Prctica 5 Las reacciones qumicas en biologa
Materiales
y equipos:
Reactivos esenciales:
Vasos de precipitado de 100, 250 ml y 1
H2SO4 concentrado
litro de capacidad
NaOH 2 N
Termmetros
Poliacrilamida
Baos de Mara
K2Cr2O7
Goteros
NaCl
Pipetas Pasteur tallo corto
NH4Cl
Tubos de ensayo
FeCl3
Hielo
KSCN
Mecheros, soportes y rejillas
AgNO3
Pinzas de madera
K2Cr2O4
CoCl2.6H2O
Na2CoCl4
80
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
Prctica 6 Las enzimas
Materiales y equipos:
Reactivos esenciales:
Vasos de precipitado de 250 y 500 ml. de
cido 3,5- dinitrosaliclico
capacidad
Hidrxido de sodio
Cilindros de 10, 50 y 100 ml de capacidad
Tartrato de sodio y potasio
Matraz aforado de 100, 250 y 1 litro
NaCl
Termmetro
Na2HPO4.2H2O
Bao de Mara
KH2PO4
Cava para hielo
Glucosa
Espectrofotmetro visible
Maltosa
Agitador
Almidn hidrosoluble
Vortex
Festal
Plancha de calentamiento
Tartrato de cobre
Pipetas Pasteur y chupn
Carbonato de sodio anhidro
Tubos de ensayo
Sulfato de sodio anhidro
Pinzas de madera
Hidrxido de Bario
PH metro
Sulfato de zinc
Prctica 7 La fotosntesis
Plancha de calentamiento
Hojas de elodea o espinaca (este material
Papel de aluminio
lo debe suministrar el alumno)
Bombillo de 100 w
Tijeras
Cpsulas de Petri
Mortero
Vasos de precipitado
Filtros
Embudos de filtracin y soportes
Reactivos esenciales
Papel de filtro Whatman # 1
Metanol
Espectrofotmetro
Acetona
Tubos de ensayo
ter de petrleo
Embudos de separacin
Yodo
Prctica 8 La fermentacin y la respiracin
Marcadores
Generadores de gases, tapones de goma
Tirro
Papel parafilm
Vasos de precipitado
Tubos de vidrio
Mecheros y soportes
Tubos de ensayo
Pinzas
Pipetas Pasteur y su chupn
PH metro
Bao de agua
Centrfuga de mesa
81
Reactivos:
Levaduras
HCl
Glucosa
Sulfato de amonio
Rojo de fenol
Nitroprusiato de sodio
Na2HPO4
2,4 dinitrofenil hidrazina
NaOH
Sulfito de sodio
KH2PO4
Piperidina
Prctica 9 Divisin celular y regulacin trmica
El estudiante debe preparar el material
Solucin de acetocarmn saturada
una semana antes:
Solucin de Carnoy (preparada en prcti-
Bulbos de cebollas, de ajo, semillas con
cas anteriores)
raicillas recin formadas (material prepa-
Cloruro frrico
rado con una semana de anticipacin)
cido actico
Levadura en polvo
lcohol
Glucosa o melaza
Sapo, tortuga, hmster, ratn
Material:
Lminas de cortes de raz de cebolla
Hielo
Hojas de helechos, flores de jardn
Mechero
Trpode con gradilla
Cristalera:
Papel de filtro
10 fiolas de 300 ml
Termmetro clnico
10 mecheros
Algodn
10 embudos
Balanza
5 vasos precipitado 1lt
Agua fra
5 vasos precipitado 500 ml
Chocolate
Lminas
Bistur
Cubre objetos
Pincel
Esmalte de uas
Reactivos:
Solucin de HCl 1 N
Equipos:
cido actico al 45%
Microscopios
de cloroformo
Microscopios estereoscpicos
Prctica 10 Ecosistemas
Actividad:
Visita a un bosque nublado o cualquier

otro lugar con un ecosistema caracterstico, dependiendo del sitio, se puede requerir transporte.
82
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
Glosario
cido. Sustancia capaz de ceder protones a una sustancia aceptora de los mismos.
Almidn. Polmero de glucosa con enlaces (1
Aminocido. Unidad monomrica de las protenas que consta de un tomo de car-
4 ) ramificaciones (1
6)
que es la principal reserva de carbohidratos en las plantas.

bono unido a un grupo -carboxlico, a un grupo -amino, a un tomo de hidrgeno, y a una cadena lateral especfica que determina sus caractersticas.
Anafase. Fase de la mitosis durante la cual las cromtidas hermanas se separan y mi-
Aparato de Golgi. Organela citoplasmtico implicado en el procesamiento y distri-
gran a polos opuestos del huso.

bucin de protenas y lpidos.
Auttrofo. Organismo que sintetiza compuestos orgnicos complejos a partir de materias primas inorgnicas simples. Tambin llamado productor o productor primario.
C
Cadena trfica. Relaciones alimentarias entre organismos que se encuentran en un

ecosistema.
Calor. Cantidad total de energa cintica en una muestra de una sustancia. Es la energa transmitida por una diferencia de temperatura entre un sistema y sus alrededores. El calor es una forma de incrementar la energa interna porque estimula el movimiento molecular.
Clulas eucariotas. Clulas que presentan una envoltura nuclear, organelas citoplasmticos y un citoesqueleto.
Clulas procariotas. Clulas que carecen de envoltura nuclear, de organelas citoplasmticos y de citoesqueleto.
Celulosa. Principal componente estructural de la pared celular vegetal, polmero lineal de glucosa unido mediante enlaces glicosdicos (1>4).
Centrolo. Estructura cilndrica consistente en nueve tripletes de microtbulos en

los centrosomas de la mayora de las clulas animales.
Cilio. Proyeccin de la membrana plasmtica, constituida por microtbulos, que

mueve a la clula a travs de fluidos o al fluido sobre la clula.
Clorofila. Principal pigmento fotosinttico de clulas vegetales.
Cloroplasto. Organela limitada por una doble membrana, en el cual ocurre la fotosntesis en los organismos eucariotas
Cromatina. Complejo fibroso de ADN eucariota y protenas histonas.
83
Glosario
Ecologa. El estudio de las interacciones de los organismos con su ambiente fsico y

entre s, y los resultados de esas interacciones.
Ecosistema. Los organismos de una comunidad y los factores abiticos asociados

con los que estn en interaccin.
Energa potencial. Es la energa que posee un cuerpo en virtud de su posicin en un

campo de fuerzas.
Energa. Capacidad de realizar trabajo, puede expresarse en kilojoules o kilocaloras.
Enlaces de alta energa. Enlaces qumicos que liberan una gran cantidad de energa
libre cuando se rompen.
Entalpa o contenido de calor. El calor retirado del ambiente en una transformacin

realizada a presin constante.
Entropa. Medida de la aleatoriedad o desorden de un sistema.
Envoltura nuclear. Barrera que separa el ncleo del citoplasma, compuesta de una
membrana interna y otra externa, una lmina nuclear, y complejos de poros nucleares.
Enzimas. Protenas que catalizan reacciones biolgicas.
Eritrocitos. Glbulos rojos sanguneos.
Exergnico. Proceso o reaccin qumica que libera energa libre.

F
Fermentacin. Proceso anaerobio por medio de cual se produce ATP en una serie de
reacciones redox en las que compuestos orgnicos actan como donadores y aceptores de electrones.
Flagelo. Estructura filamentosa que se encuentra en los eucariotas y se utiliza en la

locomocin y la alimentacin, tiene una estructura interna de 9 pares de microtbulos que rodean a dos microtbulos centrales.
Fotosntesis. Proceso mediante el cual las clulas aprovechan la energa de la luz solar y sintetizan glucosa a partir de CO2 y agua.
G
Gluclisis. Primera fase de la respiracin celular, literalmente rotura de azcar.

Conversin metablica de glucosa en piruvato, acompaada de la produccin de
ATP.
H
Hbitat. Lugar en el que pueden encontrase habitualmente los individuos de una especie determinada.
Hetertrofo. Organismo que debe alimentarse de sustancias orgnicas sintetizadas

por otros organismos para obtener energa.
84
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
Hiptesis. Suposicin que puede someterse a prueba acerca de la naturaleza de una

observacin o relacin.
L
Longitud de onda. Distancia de una cresta de onda a la siguiente, la energa de la radiacin electromagntica es inversamente proporcional a su longitud de onda.
M
Meiosis. Divisin de clulas diploides en una progenie haploide, consistente en dos

rondas secuenciales de divisin nuclear y celular.
Mtodo deductivo. Enfoque que pone de relieve el uso del razonamiento deductivo
para probar hiptesis
Mtodo inductivo. Enfoque que pone de relieve el uso del razonamiento inductivo
para descubrir nuevos principios generales.
Microscopa de fluorescencia. Tipo de microscopa en donde las molculas son detectadas con base en la emisin de luz fluorescente.
Microscopio electrnico. Microscopio capaz de producir imgenes de alta resolucin y muy ampliadas mediante un haz de electrones. Los microscopios electrnicos de transmisin producen imgenes de cortes delgados; los microscopios electrnicos de barrido producen imgenes de superficies.
Mitosis. Proceso de divisin nuclear que da origen a clulas hijas con igual carga
cromosmica.
Molcula. Partcula ms pequea de un compuesto.

N
Neurona. Clula nerviosa, clula conductora del sistema nervioso que tpicamente
consta de cuerpo celular, dendritas y un axn.
Nivel trfico. Cada organismo en un ecosistema se asigna a un nivel trfico con base en su fuente primaria de nutricin.
Ncleo. Es un organelo de las clulas eucariotas que contiene el material gentico.

O
Oxidacin. Proceso mediante el cual una sustancia cede electrones a otra sustancia
aceptora de los mismos.
P
Pared celular. Estructura producida por la clula que rodea la membrana celular de
las plantas, algas, hongos y procariotas.
85
Glosario
Pigmento. Sustancia que absorbe selectivamente luz de diferentes longitudes de onda.
Polisacrido. Carbohidrato consistente de muchas subunidades de monosacrido,

ya sean estos similares (almidn, glucgeno, celulosa) o diferentes.
Procariota. Clula que carece de ncleo y organelas limitadas por membrana.
Profase. Etapa temprana de la divisin nuclear caracterizada por condensacin de

los cromosomas hacia el ecuador del huso.
Protena. Compuesto orgnico constituido por una o ms cadenas polipeptdicas,

cada una formada por aminocidos enlazados a travs de enlaces peptdicos.
R
Reaccin endergnica. Reaccin no espontnea, la que requiere un aporte neto de

energa libre.
Reaccin exergnica. Reaccin caracterizada por la liberacin de energa libre.
Reaccin qumica. Interaccin entre tomos, iones o molculas que da por resultado la formacin de nuevas combinaciones de tomos o molculas. Una reaccin qumica representa un rearreglo de tomos.
Reacciones fotodependientes. Reacciones de la fotosntesis en las cuales la energa

lumnica absorbida por la clorofila es utilizada para sintetizar ATP y por lo comn
NADPH.
Reactivo. Sustancia que participa en una reaccin qumica.
Respiracin celular. Es el proceso por el cual las clulas generan ATP a travs de
una serie de reacciones redox en las que el aceptor final de electrones es un compuesto inorgnico. En la respiracin celular aerbica el aceptor final de electrones es
oxgeno molecular, mientras que en la respiracin celular anaerobia, el aceptor final
es una molcula inorgnica distinta al oxgeno.
S
Solucin. Mezcla homognea, a nivel molecular, de dos o ms sustancias.
Soluto. Sustancia disuelta que se encuentra formando una solucin en menor concentracin.
Solvente. Sustancia capaz de disolver otras sustancias. Se considera la sustancia en

mayor concentracin en la formacin de soluciones. En el caso de soluciones acuosas, el agua se considera el solvente.
Sustrato. Sustancia especfica sobre la cual acta una enzima. Representa el reactivo en una reaccin catalizada por una enzima.
T
Tejido. Grupo de clulas similares organizadas en una unidad estructural y funcional.
86
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
Temperatura. Energa cintica promedio de las partculas en una muestra de una sustancia. El concepto de temperatura se introdujo inicialmente como un resultado de la observacin de que todos los cuerpos tienden gradualmente a un estado de equilibrio trmico.
Teora. Principio ampliamente aceptado y apoyado por un gran cuerpo de observaciones

y experimentos. Una buena teora relaciona hechos que parecen no estar relacionados, predice nuevos hechos y sugiere nuevas relaciones.
Termodinmica. Estudio de las transformaciones de la energa.
Trabajo. Es una manera de transferir energa. El trabajo aparece nicamente durante un

cambio de estado y se manifiesta por un efecto en el ambiente (levantar o bajar un peso).
El trabajo implica un movimiento organizado
V
Vacuola. Organela limitada por una membrana llena de lquido, situada en el citoplasma
de una clula.
Virus. Partcula compuesta de cido nucleico y cubierta proteica, capaz de infectar clulas
vivas.
87
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http://www.cienciahoy.org (pgina para acceder a los artculos de la revista Ciencia Hoy).
http://www.nature.com
http://www.amnh.org
http://www.literatur http://www.e.org
http://www.coby.edu/biology/B1398/senses.html
89
ndice
7 Prefacio
9 Objetivo
9 Instrucciones generales
1 prctica
11 Introduccin al mtodo cientfico
2 prctica
17 Macromolculas y preparacin de soluciones
3 prctica
23 El microscopio y sus caractersticas
4 prctica
31 La clula
5 prctica
37 Las reacciones qumicas en biologa y los
procesos de transferencia de energa
6 prctica
43 Las enzimas: propiedades de -amilasa
7 prctica
51 La fotosntesis
8 prctica
57 Fermentacin y respiracin
9 prctica
67 Divisin celular y regulacin trmica
10 prctica
75 Ecosistemas
79 Materiales necesarios para las prcticas
83 Glosario
88 Bibliografa general
91
La presente edicin de 500 ejemplares

se termin de imprimir
el mes de abril de 2009
en el Centro Editorial Litorama C.A
Mrida-Venezuela
Informacin tcnica:
Programas: QuarkXpress Passport 7.0 y Adobe Ilustrator CS3
Impresin: papel Saima antique y cartulina Sulfato
Fuentes tipogrficas: Melior, Arial Rounded Bold y Helvticas

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Coleccin Textos Universitarios

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Mario Bonucci Rossini

Jos Mara Anderez

Bernardo Chataing / Elsa Nieves

Luis Ricardo Dvila

Fredy Parra Jahn

Centro Editorial Litorama, C.A.

Mara del Carmen Araque

HECHO EL DEPSITO DE LEY

Depsito Legal: LF 23720085741415

Coleccin Textos Universitarios

han sido rigurosamente

UNIVERSIDAD DE LOS ANDES

Primera edicin digital 2011

Los trabajos publicados en esta Coleccin han

Introduccin al mtodo cientfico

Introduccin al mtodo cientfico

1 Cul es la relacin entre una hiptesis y un experimento?

dades de un objeto. Una de ellas es en estructuras y funciones.

5 Para dar validez a sus experimentos, un cientfico quera probar la efectivi-

1 Bernardo Chataing Elsa Nieves

e) Ud. no puede llevar a cabo un experimento controlado vlido con seres

humanos porque estos son muy complejos.

de un mamfero adulto, causa que los rganos B y C dejen de funcionar. El rgano B es

posibilidades y que nos permitan distinguir entre ellas.

Introduccin al mtodo cientfico

B) Examine algunos problemas cientficos

1 Bernardo Chataing Elsa Nieves

3. Qu se entiende por un experimento controlado?

Tamayo-Tamayo M. El proceso de la investigacin cientfica. Mxico: Editorial Limusa; 1999.

Macromolculas y preparacin de soluciones

Macromolculas y preparacin de soluciones

Para ello se debe:

Ubicar el fenmeno vida como un sistema fisicoqumico, familiarizarse

1.1 DE LAS REAS DEL LABORATORIO

animales infectados y reas para labores rutinarias. NUNCA TRABAJE

a) Los reactivos del laboratorio deben permanecer en su lugar respectivo.

Si necesita de un reactivo tome la cantidad que necesite del envase SIN

a) Los equipos deben ser mantenidos completamente limpios despus de

haber sido utilizados

Macromolculas y preparacin de soluciones

1.4 MATERIAL DE VIDRIO FUNGIBLE

B) Realice los clculos bsicos y discuta los aspectos de

Si tienes una solucin de cloruro de sodio (NaCl) al 10% y quieres una

Siguiendo las instrucciones del profesor, prepare las siguientes soluciones:

Disuelva la sal en un cierto volumen de agua y lleve luego a su volumen final

Alcohol absoluto (6 partes)

Donald V. Bioqumica. Manual de soluciones. Espaa: Ediciones Omega; 1993.

Chataing B. Preparacin de soluciones. Temas de tcnicas disponible en URL:

El microscopio y sus caractersticas

El microscopio y sus caractersticas

Manejo del microscopio

El microscopio y sus caractersticas

Figura 1. Fotografas adaptadas de los catlogos de microscopios Zeiss

B) Adquirir prctica en el uso del microscopio

Ojo humano .............................. 0,2 mm

El microscopio y sus caractersticas

6. Cmo se determina el grado de aumento con que se observa un objeto al mi-

y otro de N.A.= 1,4; cul sera mejor? K= 0,61 y = 550 nm.

Figura 2. Microscopio ptico invertido

Figura 3. Microscopio de fluorescencia

y otro de N.A.= 1,4; cul sera mejor? K= 0,61 y = 550 nm.