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CICLO ESTRAL EN RUMIANTES

Jos F Cox
Laboratorio de Reproduccin Animal
2011
Introduccin
El ciclo de vida reproductivo de los individuos experimenta una evolucin que
puede ser caracterizada en cuatro fases: una fase preparatoria que ocurre durante
la vida embrionaria y fetal en la que se produce la gnesis y diferenciacin de las
estructuras y que controlarn la funcin reproductiva futura; una fase puberal en la
que se ajustan los mecanismos que controlaran la funcin del eje hipotlamohipofisiario-gonadal y conducirn a la funcin sexual plena; una fase en la cual
existe un potencial reproductivo efectivo, caracterizado por ciclos sexuales
sucesivos, en caprinos y ovinos concentrados en estaciones reproductivas
definidas; y una fase final de senescencia reproductiva en la cual se pierde el
potencial natural de reproduccin. Este ltimo periodo no es importante en
animales de produccin porque adems de no experimentar deplecin completa
de su reserva gonadal, la eficiencia econmica demandada por los planteles
comerciales conduce a la eliminacin de los individuos bastante antes de
terminado su ciclo vital.
Se denomina ciclo estral a la secuencia de cambios estructurales, funcionales y
conductuales que se producen en la funcin reproductiva de las hembras entre un
periodo de estro y el siguiente. Se utiliza como referencia de la funcin genital al
estro o calor, debido a que es la nica manifestacin objetiva, captable
externamente, de que se estn produciendo los cambios cclicos que caracterizan
a la reproduccin de las hembras.
1. Conceptos Generales
La funcin reproductiva de las hembras se expresa de manera variable entre las
especies, por lo que es conceptualmente conveniente establecer algunas
definiciones. De acuerdo a la frecuencia de presentacin de calores, las especies
pueden clasificarse como monostricas, bistricas o polistricas cuando estas
presentan uno, dos o mas estros en el ao. En general la estrategia reproductiva
de los individuos ha evolucionado en ntima relacin con el medio ambiente en el
cual se desenvuelven, puesto que este ltimo define las oportunidades de
supervivencia de las madres y de sus cras. En este sentido las tasas
reproductivas son muy elevadas en especies que estn o fueron sometidas en su
evolucin a una fuerte presin por depredadores, o las estaciones reproductivas
han evolucionado hacia pocas en que los partos se produzcan en condiciones
ptimas desde la perspectiva nutricional. Por lo general, las especies silvestres
tienden a tener un nmero de estros reducidos para ajustar su estacin de encaste
a una temporada de partos favorable, mientras en el extremo opuesto, los

animales de produccin son todos polistricos, sin embargo mientras son


sometidos a mas presin de produccin, la funcin reproductiva de estos puede
ser fcilmente alterable por influencia ambiental, tpicamente por los planos de
alimentacin por ejemplo.
Las especies polistricas son clasificadas adems por la distribucin de los estros
en el ao. As por ejemplo, las polistricas estacionales (oveja, cabra, yegua)
presentan estros restringidos a una poca del ao, mientras que las polistricas
continuas presentan estros a lo largo del ao (vaca, cerda).
Con relacin al tipo de ovulacin, las especies pueden ser clasificadas
respectivamente en ovuladores espontneos (animales de produccin), cuya
ovulacin se produce espontneamente desencadenada por estmulos endocrinos
(LH y FSH) en respuesta a la produccin de estradiol asociado al desarrollo
folicular, y en ovuladores inducidos por la cpula (coneja, gata, camlidos, etc.),
cuando la ovulacin es desencadenada tambin por factores endocrinos pero en
respuesta a seales elctricas (o probablemente seales endocrinas derivadas del
plasma seminal como se ha visto recientemente en camlidos) derivadas de la
cpula. Mientras que con relacin a la tasa de partos, las especies pueden
clasificarse en montocas (vaca, yegua), naturalmente precedidas por ovulaciones
simples, y en especies poltocas (coneja, cerda).
El ciclo estral mismo puede ser dividido de acuerdo a un nmero de criterios. De
acuerdo a la estructura ovrica que funcionalmente est predominando en sus
acciones en el tracto genital, el ciclo puede dividirse en fase folicular (o
estrognica), cuando el control del ciclo est ejercido por el estradiol de folculos
en fases finales de desarrollo; y en fase luteal (o progestacional), cuando el ciclo
est controlado por el cuerpo luteo a travs de la progesterona liberada.
Finalmente, el ciclo puede ser dividido en funcin del estro, lo cual tiene una
importancia ms clnica a la hora de interpretar los hallazgos ginecolgicos
asociados al ciclo. As, el estro es el punto de referencia, por ser un periodo
explicito de receptividad sexual, que tiene como lmites la primera aceptacin o el
primer rechazo de montas; el metaestro, un periodo de transicin hacia la fase
luteal plena, que se inicia con el rechazo de nuevas montas y la presencia de un
cuerpo luteo funcional (marcado por niveles de progesterona > 1,0 ng/ml de
plasma); el diestro, caracterizado por un cuerpo luteo funcional, que tiene como
lmites los niveles de progesterona activos ya mencionado y la lutelisis (marcado
con la cada en los niveles de progesterona y el trmino de la fase luteal). El
proestro, es la fase de desarrollo folicular rpido que precede al estro, y aunque
los niveles de estradiol son crecientes, an no son suficientes para desencadenar
la receptividad sexual, y an se produce rechazos a la monta. En este contexto, se
utiliza el concepto de anestro para representar la ausencia de conducta estral, lo
cual puede ser fisiolgico (gestacin, lactancia, fotoperiodo), patolgico (quistes
ovricos, hipoplasia, cuerpos luteos persistentes) o de manejo (restricciones
nutricionales, fallas en la observacin de conducta, etc).

En el Cuadro 1 se ejemplifica con los rumiantes de produccin la clasificacin


reproductiva mencionada.
Cuadro 1. Clasificacin reproductiva en rumiantes de produccin.
Especies
Parmetros
Bovinos
Ovinos
Caprinos
Frecuencia y distribucin de
Polistrica
Polistrica
Polistrica
los estros
contnua
estacional
estacional
Estacin reproductiva
Contnua
Febrero-Julio
Marzp-Agosto
Tipo de ovulacin
Espontnea
Espontnea
Espontnea
Tasa de partos
Montoca
Poltoca (1-3)
Poltoca (1-3)
Duracin del ciclo estral
18-24 das
14-19 das
18-24 das
Fase folicular:
Proestro
3-4 das
2-3 das
2-3 das
Estro
6-24 hrs
12-36 hrs
12-48 hrs
Momento de ovulacin
24-40 hrs desde el 24-40 hrs desde el 24-40 hrs desde el
pique de LH
pique de LH
pique de LH

Fase luteal:
Metaestro
Diestro
Duracin de gestacin

4 das
12-15 das
280 das

3 das
8-12 das
150 das

3 das
12-16 das
150 das

2. Fase Folicular del Ciclo Estral


El patrn cclico de la funcin reproductiva de las hembras es una estrategia
reproductiva destinada a optimizar las posibilidades de reproduccin de los
individuos. En este contexto el mismo tracto genital debe cumplir funciones con
muy distintos requerimientos, la fecundacin demanda una conducta sexual y un
tracto genital que permita el depsito de gametos y el transporte al sitio de
fecundacin, que incluye la eliminacin de la contaminacin microbiana asociada,
y la gestacin del cigoto demanda un tracto genital secretor, aislado y tranquilo
desde un punto de vista mecnico. La fase folicular del ciclo es la responsable de
asegurar la reunin de los gametos y la fecundacin en un ambiente metablico
que asegure la expresin del potencial de desarrollo del cigoto.
Modificaciones Endocrinas
Las hormonas ms importantes que intervienen regulando directamente el ciclo
estral son la GnRH hipotalmica, la FSH y LH hipofisiarias, las hormonas
gonadales estradiol, progesterona e inhibina y la prostaglandina F2 uterina. Sin
embargo hormonas del eje metablico (GH e insulina) intervienen activamente
para modular la eficiencia de este proceso.
En la Figura 1 se muestran los perfiles endocrinos de las hormonas asociadas al
ciclo estral. El inicio de la fase folicular est dada por un aumento en la frecuencia
de pulsos del centro generador de pulsos de GnRH hipotalmico que controla la
liberacin tnica de LH que a su vez controla las fases finales del desarrollo
folicular que antecede a la ovulacin. El aumento de la frecuencia de pulsos es

consecuencia de una reduccin en la sensibilidad del centro generador de pulsos


a la retroalimentacin inhibitoria ejercida por estradiol en animales que inician la
ciclicidad reproductiva (pubertad, gestacin, lactancia, estacionalidad reproductiva,
subnutricin); o por un cese en el efecto inhibitorio ejercido por la progesterona en
este mismo centro debido a la lutelisis cclica en animales que estn ciclando
regularmente.

9
3

5
7
4

2
Figura 1. Perfiles plasmticos de estradiol, progesterona, FSH y LH en vacas
durante la fase folicular del ciclo estral. Al integrar ambas curvas se puede
observar que la cada en los niveles de progesterona (1) genera un alza en los
niveles basales de LH (2), seguida de un incremento de estradiol (3) debido al
desarrollo folicular subsiguiente. El aumento de estradiol e inhibina asociado al
desarrollo folicular genera una cada en los niveles de FSH (4) y cuando el
estradiol alcanza niveles umbrales, se produce la activacin del centro cclico de
liberacin de LH y FSH (5) que conduce a la ovulacin. La subsiguiente cada de
estradiol e inhibina (6) genera un alza post ovulatoria de FSH (7) y un nuevo
reclutamiento folicular (8). El alza de progesterona final (9) se debe al desarrollo
del cuerpo luteo post ovulatorio.
De acuerdo a la hiptesis que explica la sntesis de estradiol, el aumento en la
frecuencia de pulsos de LH basal genera un aumento en la produccin de
andrgenos tecales (androstenediona y testosterona) que fluye hacia el
compartimiento granuloso para su aromatizacin a estradiol, en virtud de
aromatasas controladas por FSH, que slo se une al compartimiento granuloso. El
alza de estradiol genera una estimulacin del desarrollo folicular, una inhibicin en

la liberacin de FSH (asociado a inhibina que tambin aumenta su concentracin)


que conduce a la seleccin y dominancia folicular, y eventualmente el alza de
estradiol tambin genera la activacin del pique preovulatorio de gonodatrofinas
(FSH y LH) que desencadenan los cambios metablicos intrafoliculares (incluidas
el cese de la produccin de estrgenos e inhibina) que conducen a la ovulacin.
Adems de las acciones con efecto ovrico, las acciones del estradiol se
expresarn gradualmente sobre la conducta sexual y el tracto genital tubular. En
trminos cuantitativos, la frecuencia de pulsos de LH aumenta de 1 pulso cada 4-6
hrs, propio de la fase luteal o del anestro, hasta 1 pulso cada 45-60 min, como se
observa en la fase folicular. A su vez los niveles de estradiol aumentan de 1-3
pg/ml a inicios de la fase folicular a niveles mximos de 7-10 pg/ml. En el pique de
LH y FSH se produce un aumento en la frecuencia de pulsos a mas del doble y
una amplitud de los pulsos en mas de 25 veces. El pique preovulatorio est muy
cercano al estro en bovinos y unas 6-10 hrs en ovinos y caprinos y precede a la
ovulacin en unas 24-40 hrs. El estradiol y la inhibina folicular asociados al
crecimiento de los folculos ovulatorios reducen la liberacin de FSH hipofisiaria, lo
cual se traduce en una caida entre un 20-50% de los niveles perifricos de la
hormona. Los niveles de FSH aumentan 30-48 hrs despus de la ovulacin
producto del cese de la inhibicin ejercida por el estradiol e inhibina por los
cambios que experimenta el folculo y se traduce en el reclutamiento folicular para
la primera onda de desarrollo (folculos > 3 mm en ovejasy cabras y > 5 mm en
vacas). En la Figura 2 se muestra un esquema que integra el desarrollo folicular
con los cambios endocrinos asociados al ciclo.
Modificaciones Genitales y Conductuales
La fase folicular est asociada a los eventos que condicionan el tracto genital para
la fecundacin, controladas por los efectos integradores del estradiol. Las
acciones extraovricas del estradiol se producen debido a que los rganos y
tejidos involucrados tienen receptores que permiten captar estradiol circulante en
el plasma sanguneo. El aumento gradual en las concentraciones de estradiol, en
ausencia de progesterona, se caracteriza por un incremento gradual en el efecto
de esta hormona en el tracto genital y en forma menos evidente en la motivacin
sexual. En este ltimo caso, la receptividad sexual a la monta se presenta algo
abruptamente en los rumiantes de produccin.
Una de las acciones mas importantes del estradiol es el aumento en el flujo
sanguneo en el tracto genital tubular. Esto se produce por vasodilatacin inducida
por una reduccin en la afinidad de los receptores adrenrgicos ubicados en la
pared vascular. Como consecuencia, se produce una hiperemia creciente en los
genitales externos e internos y un edema de los tejidos asociado al aumento en la
presin sangunea capilar, cuya magnitud es tambin creciente.
A nivel oviductal, el estradiol produce ingurgitacin vascular a nivel de la fimbria y
aumenta la ciliacin y actividad ciliar, lo cual permite erectar la fimbria y asociarla
fsicamente con la pared ovrica, preparndola as para captar el oocito rodeado
por las clulas de la corona radiada al momento de la ovulacin. La actividad

epitelial tanto ciliar como secretora se encuentra estimulada durante la fase


folicular, como tambin la actividad contrctil de la musculatura lisa de la pared,
especialmente en el istmo que presenta una gruesa pared muscular. El lumen del
istmo se obstruye por un aumento en el edema tisular, del tono muscular y por la
descamacin epitelial y por el viscoso mucus secretado por el epitelio. De hecho,
este conjunto de eventos permite que los espermatozoides sean retenidos en los
primeros milmetros del istmo hasta que las modificaciones metablicas
periovulatorias inducen un aumento en la patencia del lumen y permiten que los
espermatozoides capacitados empiecen a migrar hacia la ampula. El ambiente
bioqumico promueve la capacitacin espermtica al estar aumentadas molculas
que han mostrado intervenir en ese proceso como glicosaminoglicanos (heparina,
heparn), albmina srica y lipoprotenas de alta densidad (aceptores lipdicos).

Onda Folicular

Progesterona
Estradiol

FSH
LH

LH

E2

Figura 2. Perfiles endocrinos de FSH, LH, estradiol y progesterona en el ciclo


estral y su asociacin con las ondas de desarrollo folicular. En la base se observa
la relacin existente entre la liberacin de LH y estradiol precediendo al pique de
gonodatrofinas, durante la fase luteal y durante la fase folicular temprana.

A nivel uterino, la estrogenizacin se caracteriza en trminos generales por lo


mismo antes descrito: un aumento en la actividad ciliar y de la secrecin epitelial,
un aumento en el flujo sanguneo y en las defensas orgnicas para hacer frente a
la contaminacin asociada a la cpula y a la eyaculacin, bsicamente un
aumento de leucocitos neutrfilos y de la actividad fagocitaria de los mismos, del
flujo epitelial y de la actividad contrctil del miometrio.
La actividad de la musculatura lisa del tero est aumentada (Figura 3) gracias a
varias acciones directas e indirectas del estradiol: (a) reduce el umbral de
excitacin de las fibras musculares gracias a modificaciones electroqumicas
inducidas en parte por el edema de los tejidos; (b) facilita un aumento en el
nmero de uniones comunicantes (uniones gap) entre las fibras musculares
facilitando la conductividad de los impulsos elctricos y por lo mismo la
contraccin organizada de la musculatura lisa; y (c) estimula la disponibilidad de
prostaglandina F2 al estimular la enzima fosfolipasa A2 (parece no ser muy
relevante) y promueve la sntesis de receptores para oxitocina, ambas hormonas
son capaces de desencadenas contracciones musculares en el miometrio. La
actividad muscular se traduce en un aumento en la frecuencia de contraccin. Las
ondas de contraccin se dirigen temprano en el estro desde el cuerpo del tero
hacia el extremo oviductal, y tarde en el estro desde el oviducto hacia la base del
tero. Esto se debe a la presencia de clulas miometriales que actan como
marcapasos, que tienen un umbral de excitacin mas bajo de manera que son
mas activas, y se ubican en ambos extremos del genital donde se activan
secuencialmente.

Figura 3. Actividad contrctil del miometrio durante el ciclo estral en rumiantes. En


oscuro la actividad miometrial que se muestra mas intensa cuando los perfiles
endocrinos de estradiol son elevados e inhibida en presencia de niveles elevados
de progesterona.

A nivel del crvix, la actividad muscular y secretora epitelial est aumentada lo


cual se traduce en un flujo creciente de un mucus cristalino y elstico, similar a la
clara de huevo, que a inicios del estro fluye a travs de la vulva. En rumiantes
chicos el flujo es bastante menor y se mezcla en el transcurso del estro con un
incremento de leucocitos de manera que tiende a ponerse mas opaco. El lumen
cervical se abre gracias a que el edema de la pared desorganiza los paquetes de
colgeno y adems se favorece la actividad colagenoltica. Adicionalmente, la
hiperemia aumenta gradualmente y la pared se observa rosada y vascularizada
adems de hmeda (Figura 4).

Figura 4. Estructura del crvix bajo influencia estrognica. La actividad epitelial


est aumentada y la secrecin de un mucus mas hidratado es intensa. El crvix
esta abierto y hmedo producto del transudado existente en esta etapa del ciclo.
La vagina est hipermica y hmeda debido a la presencia de transudados
canalizados a travs de poros intercelulares. El epitelio estratisficado presenta un
elevado grado de queratinizacin y existen puentes intercelulares que actan
como refuerzo para soportar la friccin mecnica asociada a la cpula (Figura 5).
Los genitales externos se observan edematizados e hipermicos en las tres
especies producto de la accin del estradiol en el flujo sanguneo. Existe
finalmente evidencia de produccin de feromonas posibles de ser captadas en el
flujo vaginal. Estas molculas contribuyen a la identificacin de hembras en estros
y por lo mismo, promueven la actividad de monta. As, machos con experiencia en

actividad de monta natural, montan fcilmente hembras en estros fijadas en bretes


de monta, sin embargo rechazan las hembras que no estn en estro.
Al examen clnico-ginecolgico en bovinos, la fase folicular temprana (proestro) se
caracterizar por una regresin estructural del cuerpo luteo, mas o menos
manifiesta, por una pared uterina que responde contrayndose a la manipulacin
transrectal y por un aumento gradual de la hiperemia genital y del flujo cervical.
Conductualmente las hembras tienden a intranquilizarse y a ponerse mas activas
sexualmente, de hecho empiezan a participar en los grupos sexualmente activos
que caracteriza la conducta estral del bovino, an cuando no se dejan montar. La
fase folicular tarda (estro) es mas notoria. El ovario presenta un cuerpo luteo duro,
de unos 0,8 cm de dimetro y un folculo tamao ovulatorio (1,0-1,8 cms); el
aparato genital presenta una estrogenizacin mas marcada, por lo que el tono
uterino es mas marcado al sumarse a la actividad muscular espontnea el edema
de la pared. El crvix est abierto y el flujo cervical es abundante y fluye o se
puede hacer fluir a travs de la vagina presionando el techo del rgano. La
hiperemia cervical y la hiperemia y edema de los genitales externos son
marcadas. Finalmente, la conducta estral puede estar asociada a signos de monta
en la grupa (erosiones y pelo erizado).

Figura 5. Imgenes de microscopa de barrido e histolgica que muestran la


superficie y la pared vaginal durante la fase folicular. La superficie se observa
queratinizada y reforzada en preparacin a la actividad de monta.
El comportamiento sexual de la hembra depende del balance endocrino existente.
La conducta estral es causada por un aumento en los niveles sanguneos de
estradiol en un ambiente de progesterona basal (< 1ng/ml) y de confort relativo de
la hembra. La seal fisiolgica que inicia la motivacin sexual es el alza en la
concentracin de estradiol en el plasma que precede al estro en unas 24-48 hrs.
El estradiol se acumula en los tejidos blancos del SNC y activa circuitos
hormonales pre-existentes, de manera que estmulos sensitivos especficos o
inespecficos que actan sobre los rganos de los sentidos son ahora procesados

en el contexto del apareamiento, y por lo mismo, estas seales generan


respuestas motoras adecuadas.
An cuando hay diferencias entre especies en la expresin de la motivacin
sexual, el patrn se mantiene y la cadena conductual tpica que culminar con la
cpula se inicia con la bsqueda mutua de la pareja, el establecimiento de un
cortejo mas o menos prolongado (tiende a ser mas prolongado en machos con
lbido reducida) y termina con el apareamiento. Es precisamente el contexto
biolgico en que deben ser interpretados los signos estrales en rumiantes.
Conducta estral en rumiantes
La conducta estral ha sido estudiada mas en detalles en el bovino por la
importancia econmica que tiene. Conductualmente, el signo determinante de la
etapa es la tolerancia de la hembra para ser montada por el macho, hembras
celadoras o otras hembras, esto ltimo mas propio en las vacas. En el Cuadro 2
se describe comparativamente la conducta estral en rumiantes de produccin.
Estrategias especficas para la deteccin de calores en programas de produccin
sern discutidas en un captulo especial.
Cuadro 2. Caractersticas conductuales a ser utilizadas en programas de
deteccin de estros en rumiantes.
Parmetros considerados
Duracin del estro (horas)
% de hembras con progesterona basal al momento
de ser montadas
Movimiento lateral de la cola
Llama la atencin de machos o celadores. Muge,
cabecea e intenta montar.
Inters activo por los celadores, interacta con
grupo sexualmente activo
Quietud al intento de monta por machos o celadores
Monta a otras hembras
Es montada por otras hembras
% de hembras con expresin similar de conducta

Bovinos
6-24

Especies
Ovinos
12-40

Caprinos
12-60

100%
No
Casi
siempre
Casi
siempre
Siempre
Casi
siempre
Casi
siempre
Frecuente

100%
Siempre
Poco
frecuente
Casi
siempre
Siempre
Casi
nunca
Casi
nunca
Frecuente

100%
Siempre
Casi
siempre
Casi
siempre
Siempre
Casi
siempre
Poco
frecuente
Frecuente

3. Fase Luteal del Ciclo Estral


La fase luteal es la responsable de generar las condiciones ambientales y
metablicas para optimizar las posibilidades de desarrollo del cigoto. Incluye la
estimulacin de actividad glandular endometrial intensa, la supresin de la
actividad miometrial organizada, la inhibicin de las posibilidades de
contaminacin microbiana y la supresin de la actividad sexual cclica mientras el
cigoto no de seales de alteracin, lo cual pondra en marcha la activacin de un
nuevo ciclo. El embrin es capaz de mantener la actividad sexual suspendida

mediante la secrecin activa de molculas que inhiben la presentacin de nuevos


ciclos estrales.
Modificaciones endocrinas
La fase luteal se inicia a continuacin de la ovulacin. La caracterstica
predominante es la evolucin de la secrecin de progesterona por el cuerpo luteo
resultante o los propios de la tasa ovulatoria del ciclo. La progesterona sigue una
curva en el plasma que es bastante caracterstica. Los niveles perifricos
empiezan a ser detectables a partir del da 4 en bovinos y el da 3 en ovinos y
caprinos y ascienden gradualmente hasta alcanzar un nivel mximo entre los das
8-10 en los rumiantes y posteriormente se mantienen hasta la regresin luteal
cclica que en los individuos no gestantes se produce a los 17-19 das en bovinos
y caprinos y a los12-14 das en ovinos. Si la gestacin es exitosa, los niveles de
progesterona se mantienen o crecen mas an gracias a la secrecin de sustancias
luteotrficas por parte de los embriones en desarrollo. En la Figura 6 se muestran
los perfiles de progesterona, estradiol, LH y prostaglandina F2 asociados a la
fase luteal en rumiantes.
P4
LH

E2

PGF2

Figura 6. Esquema que muestra los perfiles endocrinos de progesterona (P4), estradiol
(E2), LH y prostaglandina F2 (PGF2) en rumiantes. La curva de progesterona sigue el
desarrollo luteal y en individuos con ovulaciones dobles, las concentraciones son
significativamente superiores (pero con curvas equivalentes). Las ovulaciones triples no
generan aumentos adicionales en la concentracin de progesterona circulante, porque la
masa luteal total no se modifica en forma significativa.

La progesterona inhibe la liberacin tnica y cclica de LH aunque no tiene efectos


sobre la liberacin de FSH. Cuando los niveles de progesterona son
biolgicamente activos (> 1ng/ml plasma), la frecuencia de pulsos de LH est
reducida, lo cual impide que se produzca suficiente sustrato andrognico para la
sntesis de estradiol requerido para el desarrollo folicular y para culminar las fases
de este desarrollo, por lo que los folculos crecen mas lentamente y los
dominantes son siempre mas pequeos. Como no tiene efectos sobre la liberacin
de FSH, la dinmica folicular se preserva durante la fase luteal del ciclo. La fase
luteal culmina con la regresin cclica del cuerpo luteo inducida por la
prostaglandina F2 endometrial. Alternativamente la ciclicidad reproductiva se

detiene cuando las gestaciones son exitosas, porque el cuerpo luteo no regresa, o
se detiene cuando a pesar de regresar el cuerpo luteo, no se vuelve a producir
ovulacin, debido a una frecuencia de pulsos de LH insuficiente para sostener el
desarrollo folicular subsiguiente a la cada en los niveles de progesterona.
Formacin y estructura del cuerpo luteo
El cuerpo luteo es una glndula derivada del folculo ovulatorio. La descarga
preovulatoria de gonodatrofinas produce la luteinizacin del folculo que
comprende dos grandes grupos de eventos: (a) el trmino de la proliferacin y una
rpida hipertrofia y diferenciacin celular hacia las clulas luteales; y (b) el rpido
establecimiento de una red microvascular en el inicialmente avascular
compartimiento granuloso, que soportar la funcin glandular. La descarga
preovulatoria de LH genera la ruptura de la lmina basal que separa el
compartimiento granuloso del tecal y que permite la invasin del compartimiento
granuloso por clulas tecales, endoteliales, etc., y adems, produce la mezcla y
diferenciacin de las clulas granulosas y tecales a clulas luteales,
funcionalmente diferentes. Las clulas granulosas dan origen a las clulas luteales
grandes o granuloso-lutenicas, y las tecales a las clulas luteales chicas o tecolutenicas, las cuales difieren morfolgica y funcionalmente (Cuadros 3 y 4 y Figura
7).
Cuadro 3. Caractersticas morfolgicas de las clulas del cuerpo luteo en la mitad
de la fase luteal en rumiantes.
Tipo celular
Cls luteales grandes
Cls luteales chicas
Cls endoteliales
Fibroblastos

Especie
Bovinos
Ovinos
Bovinos
Ovinos
Bovinos
Ovinos
Bovinos
Ovinos

Parmetros morfolgicos
Tamao
% del
volumen
m
38
40
26-31
33-38
17
28
16-18
18-23
11
13
10-11
9
15
6
12-15
9

% de cls
luteales
3,5
8-14
27
23-26
52
46-48
10
14-22

Cuadro 4. Caractersticas funcionales de las clulas luteales en rumiantes.


Propiedades
Produccin endocrina
Produccin autnoma de progesterona
Produccin por estmulo de LH
Receptores para prostaglandina F2
Receptores para oxitocina
Calcio libre intracelular
Calcio libre inducido por PGF2

Clulas luteales
grandes
Progesterona
Oxitocina
Muy grande
(>10-20x/cl)
Poco o nada
Alto nmero
Poco
Muy poco
3-10 veces

Clulas luteales
pequeas
Progesterona
Menor cantidad
hasta 20 veces
Muy pocos
Alto nmero
Muy poco
Muy poco cambio

La vascularizacin del cuerpo luteo se debe a la actividad de factores de


crecimiento que son producidos localmente en respuesta al pique de LH. El Factor
de Crecimiento tipo Fibroblasto (FGF2) y el Factor de Crecimiento Vascular
Endotelial (VEGF) actuando especficamente en clulas endoteliales, promueve la
proliferacin, migracin, formacin tubular y permeabilidad vascular. Su actividad
es promovida transcripcionalmente por el pick de LH actuando en asociacin con
IGF I y II que actuaran modulando este efecto. Las angiopoietinas (Angs) son
protenas que son crticas para el crecimiento, maduracin (o degeneracin) y
estabilizacin vascular y actan en asociacin con el VEGF. En los ltimos aos
ha quedado de manifiesto que la produccin de factores angiognicos es
fundamental para el desarrollo y mantencin de la red microvascular del cuerpo
luteo.
Inicialmente la cavidad del folculo se llena rpidamente de sangre y el cogulo
que se forma termina obliterndola y junto a fragmentos de matrix extracelular
sirve de esqueleto para los movimientos celulares subsiguientes. En esta primera
etapa el cuerpo luteo recibe el nombre de cuerpo luteo hemorrgico y se muestra
en la Figura 7.

Figura 7. Imgenes de cuerpo luteo hemorrgico (en el crculo) y de la estructura


luteal que incluye clulas luteales grandes (GL), chicas (TL) y endoteliales (bv).
El cuerpo luteo sigue creciendo bsicamente por hipertrofia celular. Lo cual se
expresa por la curva de aumento en la produccin de progesterona y en su
tamao mximo adquiere unos 2 cm de dimetro en vacas y 1 cm en ovejas y
cabras. El punto de ovulacin inicialmente se proyecta como una corcho de
champaa y gradualmente va siendo incorporado a la masa luteal, de manera que
frecuentemente los cuerpos luteos de finales de la fase luteal no presentan esta
proyeccin (Figura 8).
Regulacin de la funcin luteal
a) Regulacin luteotrfica.

El cuerpo luteo tiene una gran actividad secretora. Su actividad es regulada por
molculas luteotrficas que arriban por medio de la irrigacin ovrica que durante
la fase de predominio progestacional aumenta significativamente (en ovinos, de 1
ml aumenta a unos 11 ml/min/gr de tejido). La sangre que llega al cuerpo luteo
equivale al 90% de la sangre que llega al ovario. De hecho, ms de un 50% de las
clulas luteales son endoteliales y casi todas las clulas luteales estn adyacentes
a uno o mas capilares. De hecho, en el pasado, la remocin manual del cuerpo
luteo (enucleacin) gener con frecuencia hemorragias luteales incluso fatales en
bovinos.

Figura 8. Imgenes de cuerpos luteos en diferentes estados de desarrollo. Las flechas


indican la evolucin del punto de ovulacin desde el inicio de la fase luteal hasta una fase
avanzada.

La regulacin luteotrfica del cuerpo luteo no est completamente clara. Se sabe


que las principales hormonas luteotrfica son la LH y la GH, que la hipofisectoma
y la inmunoneutralizacin de cada una de ellas es capaz de reducir la produccin
de progesterona y el tamao del cuerpo luteo. Tambin se sabe que la
administracin de LH genera un aumento transitorio en la liberacin de
progesterona por parte de las clulas luteales pequeas y no tiene efecto en las
clulas luteales grandes. Es probable que las prostaglandinas de las series E2 e I2
y el IGF-I contribuyan a mantener la funcin luteal en rumiantes. De hecho, la IGFI puede ser el mecanismo que media las acciones de la GH en el ovario.
Los productos de sntesis del cuerpo luteo son la progesterona y adems la
oxitocina (la relaxina parece no ser producida en cuerpos luteos de rumiantes
como lo es en mujeres, cerdas y roedores). La produccin de progesterona basal
es 10-40 veces ms alta en clulas luteales grandes que en las chicas y
representa algo menos del 80% de la progesterona secretada por un cuerpo luteo
maduro. La progesterona es producida a partir de colesterol derivado de

lipoproteinas de alta y baja densidad y de depsitos intracelulares almacenados en


la forma de steres. El colesterol es liberado por esterasas y transportado por el
citoplasma hacia la mitocondria donde la enzima citocromo P450scc lo
transforman en pregnenolona. La pregnenolona es transportada el retculo
endoplsmico liso para ser transformado a progesterona por el complejo
enzimtico 3-hidroxiesteroideshidrogenasa (3-HSD). El citoesqueleto, proteinas
transportadoras (SBP) y la proteina StAR (Steroid Acute Regulatory Protein) son
relevantes para el metabolismo del colesterol a progesterona porque median el
transporte del colesterol a la mitocondria los primeros y de la membrana externa a
la interna la proteina StAR, de manera que el colesterol pueda ser metabolizado a
pregnenolona (Figura 9). El movimiento de colesterol a la mitocondria parece ser
el componente limitante en la produccin de progesterona y como se ver ms
adelante, constituye el lugar donde la prostaglandina F2 (PGF2) bloquea la
sntesis de progesterona en la regresin luteal funcional.

Figura 9. Sntesis de progesterona por las clulas luteales. El colesterol usado en la


sntesis de esta hormona puede derivar de lipoprotenas desde la circulacin (1,2) o de
depsitos de colesterol intracelular (3). El citoesqueleto y la proteina StAR median el
transporte de colesterol hacia la mitocondria (4) donde es utilizado para la sntesis de
pregenolona (5). Esta ltima es sustrato de la dehidrogenasa que sintetiza progesterona
en el retculo endoplsmico liso (6). La progesterona libre difunde hacia la circulacin (7).

La LH estimula la produccin de progesterona porque promueve y mantiene


receptores para lipoprotena en la membrana de las clulas luteales, facilita el
transporte de colesterol a las mitocondrias, y promueve la transcripcin y mantiene
la actividad de protenas y enzimas claves en el metabolismo esteroidal tales
como la protena StAR y la 3-HSD. La GH se une a receptores en clulas luteales

grandes y parece ser requerida para la sntesis de progesterona y oxitocina, pero


los mecanismos an deben ser aclarados.
La progesterona difunde a travs de la membrana plasmtica de las clulas
luteales y es transportada en el plasma por protenas (SBP). La progesterona libre
atraviesa la membrana plasmtica de las clulas blanco y se une a receptores
citoplasmticos formando un complejo que es translocado a la cromatina nuclear
donde modifica la sntesis de protenas relevantes.
La oxitocina es un nonapptido producido por las clulas luteales grandes, bajo
control de mRNA que se acumul en las clulas granulsicas precediendo a la
ovulacin y durante la fase luteal temprana (hasta el da 3 en ovinos y bovinos). La
oxitocina se sintetiza como prohormona junto a su proteina transportadora
(neurofisina) y se almacena en grnulos que son liberados por exocitosis en
respuesta a estmulos secretogogos inducidos por PGF2. Se ha demostrado que
la produccin mxima de oxitocina se produce entre los das 8-12 de la fase luteal
y la liberacin se produce hacia finales del ciclo donde tiene un rol central en la
lutelisis ciclica, al ser un efectivo liberador de PGF2 endometrial. Finalmente, la
relaxina es una protena cuya presencia no ha sido demostrada en cuerpos luteos
de rumiantes, aunque s en cerdas gestantes (es exclusivamente placentaria en
yeguas) y sus efectos estn relacionados con el parto.
b) Regulacin luteoltica.
Se denomina lutelisis a la regresin funcional (cada en la secrecin de
progesterona) y estructural (reduccin de tamao) del cuerpo lteo. Esto ocurre
naturalmente en vacas y ovejas no gestantes entre los das 16-19 y 12-15 del ciclo
estral respectivamente. La lutelisis se caracteriza por una aguda cada en los
niveles plasmticos de progesterona, que llega a niveles basales entre 1-3 das, y
una ms lenta regresin estructural del cuerpo lteo, caracterizada por cambios
degenerativos tpicos tales como reduccin en la irrigacin, proliferacin de tejido
conectivo, aumento en la desorganizacin celular y degeneracin y fagositosis de
las clulas luteales.
La lutelisis es producida por PGF2 endometrial, la que en rumiantes es
transferida al ovario por mecanismos locales que incluye uno de contracorriente
derivado de la estrecha asociacin fsica de las paredes de la vena tero-ovrica
(tributaria uterina de la vena ovrica) y la arteria ovrica. La gradiente de
concentracin existente entre ambos vasos permite el paso de la molcula
directamente a la arteria ovrica que irriga bsicamente al cuerpo lteo.
Control de la liberacin de PGF2 endometrial.
Las prostaglandinas de la serie 2, son cidos grasos no saturados de 20 tomos
de carbono, que provienen del cido araquidnico obtenido de la hidrlisis de
fosfolpidos presentes en depsitos almacenados en las membranas plasmticas

de muchos tipos celulares, incluidas las endometriales. Las prostaglandinas son


sintetizadas a diferentes tipos de prostanoides dependiendo de las isomerasas y
reductasas predominantes en los tipos celulares. Se estima que la activacin de
fosfolipasa A2 (PLA2), que hidroliza fosfolpidos a cido araquidnico y la
Prostaglandina Sintetasa (PTGS; antes llamada ciclooxigenasa-2, COX-2) que
metaboliza el cido araquidnico a endoperxidos de la serie 2, constituyen las
enzimas limitantes en la produccin de prostanoides de la serie 2 (Figura 10). La
fuente de la prostaglandina F2 que generar la lutelisis cclica son las clulas
del epitelio endometrial y las del epitelio de los conductos superficiales de las
glndulas endometriales, porque expresan los receptores para oxitocina y son las
nicas capaces de expresar la enzima PTGS.
Fosfolpdos
Fosfolipasa A2
Acido Araquidnico
Prostaglandina G/H Sintetasa
(PGTS)
Prostaglandina endoperxido H2
PGH2
Hidroperoxidasa
Endoperxido
Prostaciclina sintetasa
PGI2
Tromboxano A2 isomerasa

TXA2

Endoperxido E isomerasa
PGE2
Endoperxido D isomerasa
PGD2
Endoperxido F reductasa
(PGF Sintetasa-PGFS)

PGF2

Figura 10. Metabolismo del cido araquidnico mediante la va metablica de la ciclooxigenasa. Las enzimas limitantes del metabolismo estn descritas en negritas. La
oxitocina y el estradiol son capaces de estimular la sntesis de PGF2 estimulando la
enzima fosfolipasa A2. La progesterona sensibiliza la actividad sinttica de
prostaglandinas mediante la acumulacin de lpidos precursores.

La PGF2 responsable de la lutelisis cclica, es liberada por oxitocina luteal que


se une a receptores endometriales de oxitocina y activa la fosfolipasa C (va
proteina G) que libera inositol trifosfato, como segundo mensajero, el cual libera
calcio de los depsitos en el retculo endoplsmico que finalmente activan la PLA2.
Complementariamente, la fosfolipasa C tambin libera diacilglicerol el cual
mediante la activacin de protena kinasa C (PKC) a su vez activa tanto la PLA2
como a la PGTS. Los endoperxidos resultantes son reducidos a PGF2 mediante
la PGF sintetasa. La PGF2 es liberada a la circulacin sistmica y rpidamente

inactivada en la circulacin pulmonar (ms del 90% es inactivada por el pasaje en


la circulacin pulmonar). Debido a su corta vida media (< de 5 min) y a que son
sintetizadas en las membranas celulares a medida que son requeridas y a que no
son almacenadas, se piensa que las prostaglandinas tienen una accin
preferentemente local. La progesterona promueve la acumulacin de fosfolpidos
en las membranas pero inhibe transitoriamente la sntesis de receptores para
oxitocina y estradiol en el endometrio.
No est claro el mecanismo de accin por el cual la PGF2 produce la lutelisis
cclica, y lo mas probable es que no sea un mecanismo nico. La lutelisis
funcional es muy rpida y opera por mecanismos diferentes a la lutelisis
estructural. De hecho es posible inducir una cada en la progesterona sin generar
regresin estructural usando dosis subluteolticas de PGF2. Se ha observado que
la PGF2 altera rpidamente el transporte de colesterol a la mitocondria mediante
alteraciones del citoesqueleto y la inhibicin de la actividad de la protena StAR
(ver Figura 9). Tambin se postula que estas acciones pueden ser mediadas por
pptidos vasoactivos (endotelina-1; angiotensina II), por la supresin de factores
de crecimiento angiognicos que mantenan la estabilidad vascular y cuya
supresin por PGF2 genera desestabilizacin y colapso vascular rpido (FGF2 y
VEGF), citoquinas como el TNF cuya secrecin es estimulada, etc.
La lutelisis estructural parece ser producida por un proceso de apoptosis activado
por un aumento en la disponibilidad de calcio intracelular (por liberacin de calcio
de depsitos intracelulares y apertura de canales de calcio), por la hipoxia por el
colapso vascular y liberacin de citoquinas inducidos TNF y pptidos vasoactivos
estimulados por la PGF2.
Control de la lutelisis cclica
La lutelisis cclica se produce por la secrecin de 4-5 pulsos/da de PGF2
endometrial liberado por pulsos asociados de oxitocina de origen luteal (Figura
11). Si bien la capacidad de las clulas luteales de secretar oxitocina se estableci
temprano en la fase luteal, la oxitocina es inefectiva para secretar PGF2 debido a
que la sntesis de receptores uterinos es efectivamente suprimida por
progesterona. Mediante modelos de animales ovariectomizados asociados al
reemplazo de hormonas esteroidales en concentraciones propias de la fase luteal
e inmuno-neutralizacin pasiva, se pudo observar que la capacidad de la
progesterona de mantener suprimida la sntesis de receptores para oxitocina
decae a finales de la fase luteal y por lo mismo a medida que aumenta la
capacidad uterina de responder a oxitocina, se establecen pulsos inicialmente
discretos de PGF2 seguida de liberacin de oxitocina luteal, seguida de
descargas ms masivas a medida que la produccin de progesterona decae y
aumenta la capacidad del estradiol para inducir receptores para oxitocina. El
estradiol parece tener un rol relevante en el establecimiento de la
retroalimentacin positiva entre la oxitocina y PGF2 debido a que se ha

observado que la eliminacin de folculos ovricos retarda la regresin luteal. El


estradiol puede participar controlando la sntesis de receptores para oxitocina.

Figura 11. Perfiles endocrinos de oxitocina (linea punteada) y PGF2 (lnea contnua)
asociados a la lutelisis cclica en rumiantes. El trmino de la actividad inhibitoria de la
progesterona sobre la sntesis de receptores para oxitocina a nivel endometrial genera un
aumento en la sensibilidad endometrial para las acciones de este poliptido. Niveles
circulantes de oxitocina genera liberacin de PGF2 endometrial que al acceder al ovario
produce una liberacin de oxitocina que amplifica el efecto anterior y establece una
retroalimentacin positiva que luego de un nmero de pulsos de ambas hormonas
resultan en la lutelsis. El trmino en la liberacin de PGF2 se debe a una reduccin en
la actividad de las enzimas responsables de su sntesis (PTGS).

Preservacin del cuerpo lteo de gestacin


Cuando la fecundacin es exitosa, el cuerpo lteo de gestacin debe ser protegido
de la lutelisis cclica. El cuerpo luteo debe ser mantenido porque es la nica
fuente de progesterona en el tercio inicial de gestacin y en algunas especies (ej.
vaca, cabra, cerda) es requerido en toda la gestacin por ser la fuente principal de
la hormona. Se denomina reconocimiento materno de la gestacin al proceso
fisiolgico por el cual el concepto seala su presencia al sistema materno y
prolonga la vida media del cuerpo luteo. La modificacin del patrn de secrecin
de progesterona por los animales gestantes se expresa por el retardo en el reinicio
del ciclo estral que caracteriza a los animales no gestantes.
Mediante un modelo de transferencia o remocin de embriones o sus
homogenados desde el tero en momentos definidos de la fase luteal, se pudo
apreciar que la presencia de un embrin entre los das 15-18 en vacas, 11-12 en
ovejas y un mnimo de 4 embriones entre los das 11 y 12 en cerdas, poda

proteger el cuerpo lteo de la lutelisis cclica. En rumiantes se ha observado que


an cuando la produccin basal de PGF2 no se modifica e incluso aumenta, no
se observa la liberacin masiva tpica de los animales no gestantes (Figura 12). La
presencia de los embriones atena la produccin de PGF2 endometrial,
impidiendo su liberacin al torrente sanguneo y por lo mismo su acceso al ovario.
El embrin seala su presencia mediante la produccin de interferon tau (IFN-)
entre los das 15-24 en vacas y cabras y 12-17 en ovejas. El IFN- ha mostrado
ser producido por clulas mononucleares del trofoectordermo del embrin en
elongacin y ha mostrado reducir la sntesis de PGF2 endometrial inhibiendo la
expresin de genes que codifican para la sntesis de receptores a oxitocina y
estradiol, como para la produccin de la PTGS requerida para la sntesis de
prostaglandina F2 (Figura 13). Finalmente, el IFN- ha mostrado estimular la
expresin de genes en el cuerpo luteo que aumentan la resistencia del cuerpo
luteo a la accin luteoltica de PGF2.
a

Figura 12. Perfiles endocrinos de progesterona y PGF2 en animales no gestantes (a) y


gestantes (b). La liberacin de PGF2 se modifica en animales gestantes y no se observa
la liberacin que genera la lutelisis en animales no gestantes (cada en los niveles de
progesterona en la curva a).

La capacidad del embrin de suprimir la sntesis endometrial de PGF2 va a


depender de la capacidad del mismo embrin de producir IFN-. As, se ha
observado que embriones con desarrollo retardado o de pobre calidad, producen
menos interfern y presentan menor capacidad de mantener la gestacin que
embriones normales. Asimismo, se ha observado una correlacin altamente
positiva entre la produccin de progesterona temprano despus del estro (da 6-8)
y el tamao del embrin y de su capacidad de producir interfern en el da 18-20
del ciclo. Es importante considerar que un gran porcentaje de embriones se pierde
antes del da 24 del ciclo estral, y que un porcentaje de los mismos se pierde por
defectos en la capacidad de producir IFN- o en la capacidad del endometrio de
responder a la molcula. Con relacin a esto mismo, se ha mostrado que la
alimentacin con cidos grasos ricos en cido linoleico, el cual redirige la sntesis
de endoperxidos a epoxiderivados, pueden reducir la capacidad del tero de
producir PGF2 y con ello puede mejorar la preservacin del cuerpo lteo de
gestacin y la supervivencia del embrin.

Figura 13. Esquema que describe la produccin de IFN- por parte del blastocisto en
elongacin y su accin de en el endometrio uterino.

Modificaciones genitales y conductuales en la Fase Luteal


Un nmero de modificaciones se producen en la funcin del tracto genital tubular y
en la conducta de las hembras que puede ser utilizado clnicamente. La
progesterona reduce el flujo sanguneo (aumenta la sensibilidad de la pared
vascular a la accin adrenrgica) por lo que desaparece la hiperemia, la
transudacin y el edema de los tejidos. As, las mucosas se tornan plidas y secas
y desaparece la tumefaccin de los labios vulvares. La inhibicin miometrial se
produce por aumento del umbral de excitacin de las fibras musculares, inhibicin
de la conductividad de los potenciales de accin por reduccin de las uniones
comunicantes entre las fibras musculares, inhibicin de la liberacin de PGF2 y
de receptores para estradiol y oxitocina a nivel miometrial. Finalmente, al reducirse
el edema tisular y la secrecin epitelial, la progesterona contribuye al
reordenamiento de la pared del crvix que culmina con la oclusin del lumen y el
adosamiento de las paredes vaginales.

La hemorragia metaestral es la contaminacin del mucus cervical con sangre


proveniente de la ruptura de capilares a consecuencia del descenso brusco de los
niveles de estradiol subsiguiente al pique preovulatorio de gonodatrofinas. El flujo
contaminado con sangre se evidencia 2-3 das despus del estro. La hemorragia
es muy leve y no tiene ninguna asociacin con la fertilidad de las hembras, sin
embargo puede ser considerado como un indicador de que el estro y la ovulacin
se produjo algunos das antes, y que por lo mismo una inseminacin en ese
momento presenta una fertilidad mnima.
La progesterona produce una inhibicin de la receptividad sexual, de manera que
la motivacin sexual tpica de la fase folicular desaparece. As, las acciones de
cortejo iniciadas por el macho u otra hembra son rehusadas, lo que se expresa
con acciones de escape. Existe un 5-7% de vacas que an estando preadas
expresan conducta estral, es decir aceptan la monta. Esto se presenta entre los
120 y 240 das de gestacin y no est asociada a ninguna modificacin en los
perfiles de estradiol, por lo que parecen ser respuestas independientes de los
esteroides ovricos, aunque pudiese estar asociado a los regmenes de
alimentacin.
Clnicamente es posible caracterizar la fase luteal temprana (metaestro) como una
etapa de transicin hacia el diestro, en que temprano el tono uterino se parece
mucho al del estro (tono muy elevado) pero el animal no se deja montar, no hay
evidencia de cuerpo luteo y con frecuencia (80% en vaquillas y 60% en vacas) se
observa hemorragia metaestral. En fase diestral, el ovario presenta un cuerpo
luteo notorio y un tero con tono muscular reducido (relajado), un crvix cerrado y
mucosas genitales plidas y secas.
4. Factores Ambientales que Influyen en la Presentacin del Ciclo Estral
Superpuesto al control endgeno de la ciclicidad reproductiva en rumiantes existe
una variedad de seales ambientales que son capaces de modular la funcin del
eje hipotlamo-hipofisiario-gonadal y definir la aptitud reproductiva de las hembras.
Entre los mas conocidos son el efecto del fotoperiodo en rumiantes chicos (ovejas
y cabras), la respuesta a feromonas (efecto macho y efecto hembra en ovinos y
caprinos en anestro) y el efecto de la nutricin en todas las especies. El
conocimiento de los mecanismos por los cuales estos factores afectan el eje
reproductivo ha ido adquiriendo importancia creciente a medida que el mercado de
productos alimentarios presiona por el uso de procesos productivos denominados
limpios, verdes y ticos (LVE) en el sentido del mnimo uso de hormonas no
naturales (limpios), proteccin mediambiental (verdes) y protegiendo el bienestar
animal (ticos).
Fotoperiodo
Los caprinos y ovinos presentan una estacionalidad en su reproduccin que se
activa durante Otoo-Invierno y se suprime en Primavera-Verano. Este ritmo
circanual de actividad neuroendocrina es intrnseco en estas especies y su inicio y
trmino es sincronizado por el fotoperiodo, aunque una refractariedad observada a
la estimulacin/inhibicin ejercida por la mantencin prolongada de un fotoperiodo

definido podra tener un rol. Biolgicamente es un sistema que evolucion para


que asegurar que los partos se produzcan en un periodo de abundancia de
alimento para asegurar la vida de las cras. Que la presentacin de ciclicidad
reproductiva durante el ao es controlada por el fotoperiodo fue descrito por
Marshall en 1937 y el ao 1977 se demostr que la base de las modificaciones
funcionales se deban a un cambio en la sensibilidad del centro tnico de
liberacin de LH a los niveles circulantes de estradiol (Logan, Karsh y Foster,
1977). Durante el anestro, el estradiol suprime la secrecin tnica de LH, mientras
que durante la estacin reproductiva el estradiol es incapaz de modificar la
frecuencia y altera slo levemente la amplitud de los pulsos de LH, por lo que la
concentracin de LH que accede a los folculos casi no se modifica. As, la poca
de anestro se caracteriza por la falta de desarrollo folicular a trmino, conducta
estral y ovulaciones debido a la disminucin de la frecuencia de secrecin pulstil
de GnRH y LH a 1 pulso en un periodo de 8-12 horas comparado con el pulso
cada hora o menos que caracteriza la fase folicular del ciclo estral (Goodman e
Inskeep, 2006).
El fotoperodo determina que los ovinos y caprinos entren a su ritmo circanual
reproductivo y determina su longitud. En los mamferos estacionales, adems del
ritmo circadiano (con un perodo de ejecucin de unas 24 h), es probable que un
ritmo circanual endgeno genere la alternancia de perodos de actividad sexual y
perodos de reposo sexual durante el ao. Estos perodos alternados pueden ser
observados experimentalmente cuando los animales se mantienen bajo regmenes
de fotoperodo artificial constante, al menos durante dos aos consecutivos
(Jansen y Jackson 1993; Malpaux et al. 2001; Malpaux 2006). Este ritmo
endgeno se mide en el tiempo y las ovejas y cabras perciben los cambios
externos en el fotoperodo a travs de modificaciones en los patrones de liberacin
de melatonina (MEL) desde la glndula pineal como se ver mas adelante (Barrell
et al. 2000). La duracin de la estacin reproductiva varia entre especies y entre
razas dentro de las especies, y la estacin es activada en las ovejas y cabras por
una reduccin de las horas de luz da (Chemineau et al., 2008).
La informacin de las horas de luz es recibida por fotorreceptores ubicados en la
retina y el estmulo neural desencadenado es enviado, va un tracto monosinptico
conocido como el tracto retino-hipotalmico, hasta el ncleo supraquiasmtico y
conducido a la glndula pineal a travs del ncleo paraventricular y ganglio
cervical superior. La glndula pineal traduce la seal neural en una seal
endocrina: los patrones endocrinos y cefalorraqudeos de MEL (Stehl et al., 2001;
Simonneaux and Ribelayga, 2003). La MEL es sintetizada por la glndula pineal
durante la noche debido a que enzimas crticas en el metabolismo de la MEL
desde el triptofano son activadas por norepinefrina durante la noche (revisado por
Malpaux, 2006). Se cree que la melatonina es entregada al cerebro a travs del
lquido cefalorraqudeo, y a tejidos perifricos por la circulacin. Las variaciones en
el patrn de produccin de melatonina es traducida como inductiva o supresiva a
nivel hipotalmico por mecanismos an no esclarecidos, aunque se estima que
carece de efectos directos sobre las neuronas GnRH (revisado por Revel et al.,
2006). Se ha observado que la MEL contiene sitios de unin en la pars tuberalis

de la adenohipfisis, pero reciente evidencia ha mostrado que tambin tiene sitios


de unin en concentraciones fisiolgicas en el hipotlamo medio basal (MBH;
Lincoln y Maeda, 1992; Malpaux et al., 1993; Malpaux, 2006).
Estas observaciones sugieren que la accin de la MEL en el control de GnRH es
mediado por una red de interneuronas (Malpaux et al., 2001). Evidencia
inequvoca sugiere la participacin de la protena kisspeptina (KISS) y del sistema
KiSS-1/GPR54 en el control de la reproduccin relacionado con el fotoperodo
debido a que GPR54 es esencial para la funcin del eje de reproductivo y las
clulas de KiSS-1 residen en la MBH, precisamente donde se localizan los sitios
de destino para ejercer su accin de la MEL (Revel et al., 2006; Smith, 2008). Se
ha demostrado que la KISS estimula la secrecin de GnRH en las neuronas del
ncleo arcuato en el MBH y todas las neuronas KISS presentan receptores para
estradiol (ER; Franceshini et al., 2006); las neuronas KISS presentan cambios en
la concentracin de los pptidos y en los niveles de mRNA en forma estacional, en
una manera consistente con el patrn de estimulacin e inactivacin de la
actividad reproductiva, y los efectos pueden ser simulados por la administracin
crnica de estradiol en ovejas enteras u ovariectomizadas tratadas con estradiol
(Clarke et al., 2009); y la funcin reproductiva de ovejas en la estacin de anestro
puede ser restaurada con la administracin intramuscular de KISS (Caraty et al.,
2007).
Sobre esta base se sugiere que durante la temporada de anestro la menor
secrecin de MEL provoca un aumento en la sensibilidad hipotalmica al efecto de
retroalimentacin negativa del estradiol (E2), y este a su vez inhibe la produccin y
liberacin de KISS en terminales que contactan a las neuronas GnRH reduciendo
la liberacin pulstil de GnRH/LH, el desarrollo folicular a trmino, el estro y la
ovulacin (Clarke et al., 2009). Mientras que durante la poca reproductiva, el
aumento en la duracin de secrecin de MEL induce el incremento en la secrecin
pulstil de GnRH y restablece los ciclos estrales y ovulacin (Malpaux et al., 2002;
Clarke et al., 2009).
El mecanismo por el cual la melatonina afecta las sensibilidad del centro tnico a
los niveles plasmticos de estradiol est bajo investigacin. Sin embargo se sabe
que el estradiol acta sobre un grupo especfico de neuronas dopaminrgicas
(neuronas A15, ubicada en la base del cerebro inmediatamente posterior al
quiasma ptico). Estas neuronas son estimuladas indirectamente por el estradiol
slo durante el periodo de anestro estacional, pero no durante la estacin
reproductiva, y son necesarias para que el estradiol pueda ejercer el efecto
inhibitorio que le caracteriza en este periodo (Goodman e Inskeep, 2006; Clarke et
al., 2009). Nucleos de neuronas reactivas a estradiol (con receptores ER-)
ubicadas en las rea ventromedial y supra quiasmticas conectan a estas
neuronas e intermedian las acciones del esteroide. Actualmente no se conoce
como la melatonina activa e inactiva a este grupo de neuronas.

Sobre esta base, el modelo de accin del fotoperiodo en la reproduccin es el


siguiente: durante la estacin reproductiva el estradiol no ejerce un efecto
inhibitorio significativo sobre el centro tnico de liberacin de GnRH, de manera
que la ciclicidad reproductiva slo es ejercida por los niveles circulantes de
progesterona luteal. Al regresar el cuerpo luteo caen los niveles de progesterona y
por lo mismo aumenta la frecuencia de pulsos de GnRH y LH que llevan el
desarrollo folicular a trmino, al estro y a la ovulacin. Cuando se sale de la
estacin reproductiva, se activan el grupo de neuronas A15, de manera que al
regresar el cuerpo luteo, aumenta la frecuencia de pulsos de LH y la concentracin
de estradiol. El aumento de estradiol activa la inhibicin del centro tnico de
liberacin de GnRH, no se produce el periodo de 48 h de aumento en la frecuencia
de pulsos de LH y el desarrollo folicular no se completa y no hay ovulacin. La
fase anovulatoria se mantiene presente hasta que este grupo de neuronas se
vuelve a inactivar y se reduce nuevamente la sensibilidad del centro generador de
pulsos a la inhibicin por estradiol. La frecuencia de pulsos de GnRH y LH
aumentan y el desarrollo folicular nuevamente conduce a una ovulacin.
Las razas y el manejo de la estacionalidad reproductiva en ovinos y caprinos
El manejo de la estacionalidad reproductiva tiene por objetivo aumentar la
produccin de corderos para aprovechar el corto periodo gestcional (en sistemas
de produccin de carne) y para producir leche en periodos en que por los partos
naturales existe poca disponibilidad de leche (sistemas de produccin de leche).
En trminos generales se ha observado que razas con estacionalidad reproductiva
prolongada (ovinos: Merinos, Dorset, Finnsheep, Katahdin, Dorper y otras de pelo,
etc; caprinos: Nubian, Espaola, criolla, etc.) responden mas eficientemente que
razas de temporada mas restringida (ovinos: Texel, Southdown, Romney) o
intermedias (Corriedale, Suffolk, Highlander), en trminos de presentacin de
calores y tasas de concepcin (Scott, 1977; Cox, 2009). Otro principio a considerar
es que protocolos asociados a bioestimulacin y uso de hormonas actan mejor
en las fases de transicin (periodo de unas 3 semanas en que empiezan a
desaparecer/aparecer las ovulaciones en el rebao) hacia y desde que en el
anestro profundo (cuando no hay ovulaciones en el rebao; OCallaghan, 1999).
Los procedimientos utilizados para controlar el encaste son: (a) el uso de
regmenes de luz artificiales (y/o regmenes que incluyan melatonina); (b) uso de
bioestimulacin (efecto macho/hembra); y el uso de hormonas que estimulen el
desarrollo folicular, estro y ovulacin.
En el primer caso lo que se busca es ajustar la exposicin a la luz de manera de
establecer fotoperiodos estimulatorios mediante galpones oscuros (< de 20 lux) en
los que se administra un protocolo de luz, que por lo general demandan una
infraestructura de alto costo y por lo mismo son poco utilizados. Mas
frecuentemente se usan galpones abiertos en que se suplementa luz (200-500
lux). En estos esquemas, la suplementacin se efecta por 60-70 das despus
del solsticio de Invierno (Julio) de manera de adelantar el periodo de anestro y
permitir que se resetee el ciclo circanual de reproduccin. Al terminar la

suplementacin de luz, se administra melatonina y/o el efecto macho, para


sincronizar la reactivacin de la reproduccin en el rebao. La MEL por si solo no
es efectiva en desencadenar la reproduccin fuera de temporada, por lo que debe
asociarse a tratamientos de luz u hormonales (progesterona + eCG) para obtener
tasas de fertilidad razonables. En otros casos se usa bioestimulacin y la
sincronizacin de estros fuera de temporada mediante hormonas. Ambos temas
sern abordados con mas profundidad mas adelante en este curso.
Interaccin Social y Feromonas (Efectos Macho y Hembra)
Otra influencia ambiental que tiene su mayor expresin en ovinos y caprinos en
anestro estacional, lactacional y probablemente prepuberal son las mediadas por
feromonas y por la interaccin social. El caso mas evidente es la induccin de
ovulacin en hembras en anestro por la introduccin en el grupo de un macho, el
denominado efecto macho.
El efecto macho se expresa en las hembras (ovejas y cabras) por un aumento en
la frecuencia de pulsos de LH dentro de 10-20 minutos de introducido un macho
novedoso para el grupo de hembras (al menos 3 semanas separado fsica y
visualmente del rebao; Figura 14). El efecto parece ser mediado por feromonas
producidas por las glndulas sudorparas bajo influencia andrognica, que son
captadas por receptores ubicados en la mucosa olfatoria y en el Organo Vomero
Nasal los que conducen los estmulos nerviosos al Bulbo Olfatorio Principal y
Accesorio respectivamente que conducen las seales a la Amgdala y
directamente al centro tnico de liberacin de LH. Aunque la influencia de
feromonas ha sido demostrada, claramente se necesita un conjunto de estmulos
provenientes del macho para desencadenas una respuesta mxima, cuya
importancia relativa se ha demostrado en estudios con hembras ansmicas. Se
piensa que estmulos olfatorios, visuales, tctiles y auditivos que incluyen el nivel
de intensidad de los mismos son contribuyentes a respuestas ovulatorias
adecuadas. El mecanismo de accin para obviar la inhibicin ovrica del centro
generador de pulsos de GnRH no se conoce, pero es interesante que el efecto se
expresa en hembras en anestro y ovariectomizadas pero tratadas con estradiol.
Las hembras ovariectomizadas sin tratamiento estrognico no responden con
cambios en la frecuencia de pulsos de LH.

Machos Presentes

Figura 14. Perfiles de LH en ovejas en anestro asociado al contacto con machos


enteros.
El aumento en la frecuencia de pulsos de LH genera un pique preovulatorio de
gonodatrofinas entre 50-65 hrs (rangos: 30-72 hrs) desde la entrada de los
machos y ovulaciones silentes unas 22-26 hrs despus en las hembras reactivas.
La ovulaciones silentes pueden ser seguidas por fases luteales regulares (50%) o
cortas (insuficientes; 50%), en este ltimo grupo, se puede presentar una nueva
ovulacin silente unos 6-7 das despus, o puede ser seguido por una fase luteal
normal y ovulaciones asociadas a conducta estral 18 das despus. La regresin
luteal es causada por prostaglandina endometrial y la liberacin prematura se
debera a la ausencia de la supresin oportuna de receptores a oxitocina por
progesterona luteal. La administracin de progesterona por al menos 36 horas
previo a la introduccin de los machos genera ovulaciones asociadas a fases
luteales normales y se necesitan un pretratamiento de progesterona de unos 10
das para que las ovulaciones estn asociadas a conducta estral. En ausencia de
pretratamientos con progesterona, la presentacin de estros se presenta en un
rango de 10 das, con peaks de presentacin entre los 18-24 das de introducido
los machos.
El efecto hembra se refiere a la respuesta endocrina que experimentan los
machos al ser expuestos a hembras, especialmente en estro. En forma anloga al
efecto macho, la presencia de una hembra en estro genera un rpido incremento
en los niveles de LH y testosterona en los machos (Figura 15). La importancia
funcional del efecto hembra an debe ser esclarecido, sin embargo la exposicin
de machos sexualmente maduros a hembras en estro mejora las capacidades de
los machos para desencadenar respuestas ovulatorias en hembras en anestro y
por lo mismo se usa como norma de manejo asociado al uso productivo del efecto
macho.

Hembras Presentes

Figura 15. perfiles endocrinos de carneros expuestos a hembras en estro. El


incremento en los niveles de LH se asocia a un aumento de los de testosterona.
Un efecto similar puede ser observado en chivos.
Un nmero de factores puede influir en la respuesta del rebao a la introduccin
de los machos. Por de pronto hay influencia de la raza. As, razas con menos
sensibilidad al fotoperiodo son mas sensibles al efecto macho; las Dorset y Merino
son muy sensibles, mientras que la Romney y la Suffolk, que son mas
estacionales, el efecto macho es muy inefectivo antes de 2-4 semanas del trmino
de la temporada de anestro. El momento en la temporada de anestro tambin
influye, siendo la estimulacin durante los periodos de transicin, especialmente
saliendo de la estacin, mas efectiva que en el anestro profundo. La madurez
sexual de los machos y el nivel de libido tambin influye. Machos enteros
sexualmente maduros y de libido alta son mas efectivos que los inmaduros o de
libido baja en la capacidad de desencadenar ovulaciones. Mientras que las
hembras adultas responden mejores tasas ovulatorias que las borregas (75% vs
25-35% respectivamente). El nivel de estmulo es mayor cuando los machos se
mantienen en contacto con las hembras y la relacin machos:hembras y el tiempo
de interaccin con el rebao pueden modular estos efectos, de manera que una
baja relacin y la mantencin de los machos en el rebao son estmulos positivos.
El efecto macho ha sido ocupado tecnolgicamente para inducir gestaciones fuera
de temporada en ovinos y caprinos como se demuestra en el Cuadro 5. De hecho
se ha utilizado en la industria ovina para adelantar la temporada de encaste y en la
caprina para obtener gestaciones fuera de temporada.

Cuadro 5. Efecto de progestgenos en la respuesta ovrica de ovejas Merino a la


introduccin de machos en Primavera.
Parmetros considerados
Progestgeno Nmero de
Tasa de
Cambio en la tasa
Ovejas
de tratamiento
ovejas
ovulacin
de ovulacin1
marcadas (%)
Control
133
1.44
--MAP, Upjohn
248
1,48
0.31a2
77,0
FGA, Intervet
250
1,58
0,41 a
87,0
Norgestomet
249
1,76
0,59b
66,0
b
Progesterona
238
1,76
0,59
55,0
1
Cambios con relacin a ovulacin espontnea en el rebao.
2
Superndices diferentes indican diferencias estadsticas significativas.
Nutricin
La supervivencia de los individuos est ntimamente ligada a la reproduccin
porque definen la supervivencia de la especie, sin embargo la reproduccin tiene
un costo energtico relevante para los individuos (maduracin sexual, cpula,
gestacin y lactancia) y por lo mismo es de importancia secundaria en periodos de
restriccin alimentaria. As, el eje hipotlamo hipofisiario gonadal tiene sensores
del estatus nutricional de los individuos y hay mltiples fases del ciclo reproductivo
que pueden comprometerse, y detener el proceso reproductivo, si el estatus
nutricional se torna deficitario.
Un elemento clave en el establecimiento de la ciclicidad reproductiva es el patrn
de secrecin de GnRH desde el centro de liberacin tnica de esta hormona. En
los animales ciclantes el centro est bajo inhibicin de progesterona, por lo que la
reanudacin del ciclo depende de la frecuencia de pulsos de GnRH una vez que
se produce la regresin luteal; si la frecuencia es de 1 o ms pulsos cada hora, la
secrecin de LH desde la hipfisis y de estradiol desde la pared folicular permitirn
un desarrollo folicular a trmino y el desencadenamiento del pique preovulatorio
de gonodatrofinas.
Los sensores del estatus metablico ms relevantes parecen ser la insulina
secretada por el pncreas, la leptina por los adipositos y la IGF-I secretada por el
hgado bajo influencia de GH. Cuando los niveles de estas hormonas son
adecuados, el centro generador de pulsos de GnRH hipotalmico opera en forma
eficiente y existe suficiente sustrato gonadotrfico y metablico para que se
sucedan en forma recurrente los estros, ovulaciones con potenciales normales de
fertilidad. Cuando se produce un balance energtico negativo (BEN), los niveles
de insulina, leptina e IGF-I caen generando, dependiendo del grado de restriccin,
reduccin en la frecuencia de pulsos de GnRH, reduccin en la sensibilidad
ovrica al efecto de las gonodatrofinas y reduccin en la produccin metablica
del tero y del embrin en desarrollo antes del reconocimiento materno de la
gestacin. En su conjunto, el BEN produce infertilidad por deficiencias en el
desarrollo folicular, maduracin oocitaria y ovulacin, por deficiencias en la
expresin de estros, transporte espermtico y fecundacin; y por deficiencias en la

produccin progesterona, de interfern y reconocimiento materno de la


gestacin. De esta manera clnicamente un BEN, puede producir anovulacin por
atresia folicular o quistes foliculares y cese en la ciclicidad reproductiva, o se
pueden presentar ciclos estrales regulares pero infertilidad por deficiencias en el
momento de ovulacin, en la fecundacin y en el soporte progestacional y
metablico del embrin en desarrollo.
Si se produce sobre-acondicionamiento (obesidad), tambin se pueden producir
problemas funcionales de la ciclicidad reproductiva por una reduccin en los
perfiles de hormonas gonadales (estradiol y progesterona) debido a un aumento
en la absorcin de los esteroides por el tejido graso asociado, entre otros efectos
colaterales.
Lactancia y Amamantamiento
La actividad ovrica post parto ha sido caracterizada en ovejas y vacas y se ha
demostrado que la primera ovulacin es influenciada principalmente por la
condicin corporal de las hembras, por el amamantamiento, por el fotoperiodo y
por el nivel de produccin de leche (actuando esta probablemente por va
metablica ya que en vacas de alta produccin de leche la particin de nutrientes
prioriza la lactancia).
Los niveles de FSH se recuperan en ovejas y vacas de leche y carne a la segunda
semana y por lo mismo se inicia en ese periodo la dinmica folicular. La secrecin
de FSH se recupera rpido porque aunque el amamantamiento inhibe la
frecuencia de pulsos de GnRH, la transcripcin de FSH- mRNA y por lo mismo la
sntesis y secrecin de esta hormona requiere de una estimulacin mnima por
GnRH. Sin embargo, la concentracin hipofisiaria de LH es sensible a la
frecuencia de pulsos de GnRH y slo se recupera a la tercera semana y tambin
la capacidad de respuesta a la estimulacin de GnRH en ovejas y vacas en buena
condicin corporal. Sin embargo la primera ovulacin se puede producir
aproximadamente a los 30 y 60 das en vacas de leche y carne en lactancia y
amamantando respectivamente (algo similar en ovinos) y puede incluso ser
retrasado de acuerdo al nivel de produccin de leche de la hembra (0-70 das en
vacas Holstein de 9-12.000 Kgs de leche por lactancia), la condicin corporal al
parto y el BEN post parto y el nmero de cras amamantando. El amamantamiento
inhibe el centro generador de pulsos de GnRH hipotalmico directamente al inicio
y potenciado por estradiol ms tarde para prolongar este efecto inhibitorio.
Aparentemente la conexin directa entre amamantamiento y actividad pulstil de
GnRH se produce en neuronas secretoras de neuropptido Y (NPY) localizadas
en el ncleo arqueado y que contactan el soma de neuronas secretoras de GnRH
a ese nivel o sus terminales localizados en la eminencia media, donde inhiben su
actividad secretora. Neuropptidos que median la accin inhibitoria de estradiol en
los neurotrofos, e incluso leptina, insulina, ghrelin (pptido producido en el
estmago) y otros que pueden modular directa e indirectamente la accin del

balance energtico sobre el centro generador de pulsos de GnRH, tambin tienen


la capacidad de afectar el intervalo a la primera ovulacin (Figura 16).
Lecturas Complementarias:
GP Adams et al. (2008). Progress in undestanding ovarian follicular dynamics.
Theriogenology 69:72-80.
LS Katz (2007). Sexual behavior of domesticated ruminants. Hormones and
Behavior 52:56-63.
M Diskin y A Evans (2011). Animal Reproduction Science 124: 147-268.
Nmero especial en ciclos reproductivos en mamferos. Incluye las siguientes
especies:
Humanos
Bovinos
Ovinos
Caprinos
Equinos
Cerdos
Caninos
Camlidos sudamericanos
SS Surez (2008). Regulation of sperm storage and movement in the mammalian
oviduct. International J Developmental Biology 52:455-462.
WV Holt y RE Lloyd (2010). Sperm storage in the vertebrate female reproductive
tract: how does it work so well? Theriogenology 73:713-722.
Informacin requerida mnima:
-

Informacin de las hormonas que participan en el eje reproductivo y sus


funciones.
Definicin de conceptos (ciclos estrales, fases del ciclo, lutelisis, etc.).
Explicacin de eventos reproductivos (mecanismo y regulacin de la
lutelisis, reconocimiento materno de gestacin, etc.).
Integracin de eventos (efecto del estradiol en la fase folicular, control de
la dinmica folicular por progesterona, efecto de GnRH/LH en folculos
antrales, secuencias endocrinas post lutelisis, relaciones endocrinas en el
eje reproductivo, etc.).

Pptidos
Reguladores
NPY
Opioides
Ghrelin

Ciclicidad

Anestro/Anovulacin

Sensores Metablicos

y Reguladores
LH

Estradiol
Leptinas
Insulina

GnRH
MUA

Estmulos Relevantes
Amamantamiento
Balance Energtico

Figura 16. El estmulo del amamantamiento modulado por el balance energtico


del animal acta directamente o a travs de la sensibilidad al efecto inhibitorio
ejercido por estradiol folicular que media la accin de sensores metablicos, para
regular en conjunto, el nivel de actividad del centro de generador de pulsos de
GnRH hipotalmico y con ello la frecuencia de pulsos de LH que controla el
desarrollo folicular a trmino y la reanudacin de la ciclicidad post parto.