CONTROL NEUROENDOCRINO DE LA REPRODUCCIN

EN RUMIANTES
2012
Introduccin
La reproduccin en rumiantes est controlado por el eje hipotlamo-hipofisiariogonadal (eje reproductivo). Este es un eje funcional de tipo neuroendocrino que se
encuentra integrado en forma estrecha y en la que interactan 6 hormonas principales
(GnRH, FSH, LH, estradiol, progesterona y testosterona en machos) y un nmero de
hormonas y factores reguladores que modulan la accin de estas hormonas y que en
conjunto definen el potencial de reproduccin de los individuos (leptina, ghrelina,
oxitocina, inhibina, GH, insulina, factores de crecimiento, glucosa, etc.).
La hormona central en la operacin del eje reproductivo es la GnRH, debido a que su
patrn de secrecin (frecuencia y amplitud de los pulsos) es el efector que determina el
patrn de secrecin de LH y FSH hipofisiaria. La subsiguiente exposicin gonadal a ese
patrn de secrecin de gonadotropinas, determina a su vez la funcin gonadal, en el
caso del ovario las fases finales del desarrollo folicular, la ovulacin y la formacin del
cuerpo lteo, y la esteroidognesis asociada, y en el testculo, la espermatognesis y la
secrecin de testosterona. La GnRH es secretada por neuronas localizadas en el
hipotlamo y cuyos axones terminan en la eminencia media, adyacentes a un sistema
portal que comunica con la hipfisis anterior. La GnRH viaja por medio de la
circulacin portal hacia los gonadotrofos hipofisiarios para ejercer su funcin
regulatoria. A su vez, las neuronas secretoras de GnRH estn recibiendo continuamente
el influjo de molculas neuromoduladoras (neuropptidos, neurotransmisores, etc.)
provenientes principalmente de terminales axonmicos de otro grupo de neuronas, que
actan como sensores de informacin perifrica de tipo neural, metablica y endocrina,
conformando una red muy compleja. Estas ltimas integran la informacin y la traducen
en la forma de seales excitatorias o inhibitorias que definen la actividad de las
neuronas GnRH y por lo mismo la liberacin de gonadotropinas desde la hipfisis. A
su vez, la LH y FSH son secretadas a la circulacin general y actan a nivel gonadal
controlando la produccin de las hormonas esteroidales gonadales, principalmente
estradiol, progesterona y testosterona, que regulan la funcin sexual de los animales.
Finalmente, los esteroides gonadales son los principales reguladores de la funcin del
hipotlamo, controlando el patrn de secrecin de GnRH, mientras que el estradiol en
conjunto con la inhibina, afectan la secrecin de FSH hipofisiaria.
En este captulo se revisar de manera concisa la funcin neuroendocrina que controla
el eje reproductivo en rumiantes, el efecto modulador del metabolismo energtico y el
control endocrino de la pubertad como marcador de la madurez operativa de este eje. En
el captulo de ciclo estral, se integrar la funcin endocrina con las funciones
reproductivas que definen la fertilidad de las hembras y se analizarn factores que
afectando la funcin del eje reproductivo afectan la fertilidad y prolificidad en
rumiantes.
1. GnRH. Produccin y Regulacin de su Secrecin
La GnRH (sigla en ingls para hormona liberadora de gonadotropinas; Figura 1) es un
decapptido producido por neuronas neurosecretoras del hipotlamo, en respuesta a la

accin de molculas neuromoduladoras que contactan a los neurotrofos mediante sus

terminales axonmicos o que acceden va paracrina o endocrina a la neurona. Su
secuencia aminoacdica es idntica en la mayora de los mamferos y es la GnRH tipo I
(tipos I, II y III) la que controla la funcin de los gonadotropos hipofisiarios.
Figura 1. Forma de una molcula de
GnRH. Generando modificaciones en
la estructura aminoacdica, se
producen cambios en la funcionalidad
de la molcula (agonistas y
antagonistas de GnRH).

La neuronas GnRH son un grupo relativamente pequeo de neuronas (unas 1000-3000)

cuyos somas estn localizadas en reas discretas que se extienden en un trayecto
hipotalmico que va desde el quiasma ptico hasta los cuerpos mamilares por el piso del
tercer ventrculo, Fig. 2) y cuyos terminales axonmicos se localizan fundamentalmente
en la eminencia media adyacente a capilares del sistema portal hipofisiario. Las
neuronas GnRH son particulares en que reciben un nmero relativamente escaso de
sinapsis en su soma (10-15 vs 2.000-16000; 0,4% vs 6.6% de su rea de dendritas tiene
sinapsis) comparado con otras neuronas (Fig. 2).

Figura 2. (a) Ubicacin e (b) imagen de las neuronas GnRH en el hipotlamo. El 50% de las neuronas
estn en el rea preptica (POA) y el resto en el rea hipotalmica anterior (AHA) e hipotlamo medio
basal (VMN + ARC; reborde azul). En crculo verde ubicacin aproximada del centro cclico y en rojo el
centro tnico de liberacin de GnRH. En ovinos existe evidencia de que el ncleo arqueado (ARC)
participa en el reclutamiento de neuronas que generan la descarga cclica de GnRH e incluye al POA,
mientras que en ratones, lo hace el ncleo anteroventral periventricular (AVPV) y POA. POA, rea
preptica; VMN, ncleo ventro medial; ARC, ncleo arqueado; ME, eminencia media; OCh (OC),
quiasma ptico; MB, cuerpos mamilares; Pit, hipfisis.

La GnRH es producida por activacin gnica a nivel del soma y es transportada a los
terminales axonmicos en la eminencia media donde es almacenada como grnulos
(Fig.3). La produccin de pptidos se estima en 1 pg/clula y un 30% corresponde a un
pool liberable. Como los pulsos fluctan entre los 4-25 (o mas) pg/ml, es necesaria una
sincronizacin en la activacin de varias neuronas de manera de producir la exocitosis
de suficientes grnulos a la circulacin portal para generar la concentracin de GnRH
que conforma el pulso. La distribucin de las dendritas, su capacidad de generar
autnomamente potenciales de accin y la demostracin de sinapsis compartidas, son
algunos ejemplos del rol activo que tiene esta red neuronal.

Figura 3. Grnulos de GnRH

acumulados en terminales
axonmicas en la eminencia media
en ratones. Son liberados en
respuesta a potenciales de accin
en respuesta a estmulos
excitatorios aferentes.

An cuando lneas celulares in vitro muestran que las neuronas GnRH presentan un
patrn oscilatorio espontneo de secrecin, ste no es coincidente con el patrn in vivo
observado de muestreos directos de la circulacin portal y de LH hipofisiaria. La
existencia de patrones de secrecin superimpuestos sobre la actividad espontnea de las
neuronas GnRH exhibidas in vitro, indica que la secrecin de GnRH es controlada
externamente por seales neuromoduladoras aferentes que actan directa o
indirectamente sobre las neuronas imponiendo un patrn de secrecin definido.
Control de la secrecin tnica y cclica de GnRH
Se han observado dos tipos de patrones de secrecin, uno es de baja frecuencia y
amplitud, que se denomina secrecin basal o tnica y que se traduce en una secrecin
pulstil continua y en baja concentracin de LH, y el otro es de alta frecuencia y
amplitud, aunque de unas pocas horas de duracin (aproximadamente 8-12 horas en la
oveja), denominado patrn cclico y que se traduce en una descarga de LH de gran
magnitud (50-100 veces de niveles basales) y en una de FSH menos significativa.
En ovinos y ratones, el control del patrn basal/tnico de secrecin de GnRH (centro
tnico; generador de pulsos) ha mostrado residir en un grupo de neuronas que colocalizan en sus terminales los neuropptidos kisspeptina, neurokinina B y dinorfina,
presentan adems receptores para estradiol y progesterona en hembras y testosterona en
los machos, conectan directamente con neuronas GnRH del POA y probablemente con
los terminales axonmicos de las neuronas GnRH en la eminencia media y se localizan
en el ncleo Arqueado (ARC) en el hipotlamo medio basal (MBH). Se denominan
neuronas KNDy y presentan dimorfismo sexual, dado que son mas numerosas en
hembras que en machos. Se ha observado que el rea de ubicacin es bastante
conservada en mamferos, porque adems de la oveja y cabra, estas neuronas se ubican
en el ARC en roedores y primates.
El control del patrn de secrecin cclica parece depender en ovinos de neuronas
kisspeptinas localizadas en el MBH y POA, mientras que en primates y roedores en el
AVPV y POA, siendo bastante especie-especfica comparada con el centro tnico. Las

neuronas kisspeptinas del centro cclico son funcionalmente diferentes de las del ARC,
responden positivamente a estradiol y son tambin sexualmente dimrfica, hay mas de
10 veces mas neuronas en hembras que en machos, por lo que en estos ltimos son
incapaces de montar una descarga cclica de GnRH. El patrn de secrecin tnica es
utilizado para mantener la funcin gonadal durante los periodos interovulatorios en
hembras y durante el periodo reproductivo en machos, y el patrn cclico es para inducir
la ovulacin de los folculos ovricos maduros y se observa exclusivamente en las
hembras, en la mayor parte de los mamferos (Fig.4).

Figura 4. Tipos de patrones de secrecin

de GnRH y su efecto en la secrecin de
LH. La GnRH es producida en el soma
neuronal, transportada a las terminales
axonmicas y liberada en respuesta a
seales excitatorias hacia la circulacin
portal.

Las neuronas kisspeptinas son fundamentales en la integracin de seales

regulatorias que se canalizan a las neuronas GnRH.
En los ltimos aos se ha presentado evidencia inequvoca de que las neuronas
kisspeptinas cumplen un rol integrador y canalizador de seales perifricas a las
neuronas GnRH. El pptido kisspeptina fue nominado as en homenaje al lugar de su
descubrimiento en 1996, Hershey, Pensilvania, casa del famoso Hershey Chocolate
Kiss. La kisspeptina es un pptido de 54 amino cidos (en realidad fragmentos entre 10
y 54 a), de la familia RFamida (Arg-Fen-NH2), que presenta alta afinidad por el
receptor (G-proteina), GPR54, ahora llamado Kiss1R, descrito en ratas en 1999. Se
volvi interesante para los fisilogos cuando se describi en 2003, que una mutacin
para el receptor de kisspeptina (no hay sensibilidad a la kisspeptina) generaba
hipogonadismo hipogonadotrpico (una falta de desarrollo gonadal por ausencia de
gonadotropinas) y alteraciones puberales en humanos y ratones KO para el gen que la
codifica.
Este hallazgo constituy la partida para la identificacin de las kisspeptinas, secretada
por neuronas aferentes a las neuronas GnRH, y que actuando sobre su receptor
(KISS1R; Kiss1r) han mostrado ser importantes reguladores de la secrecin de GnRH.
La evidencia es variada y coherente: (a) la mayora de las neuronas GnRH reciben
sinapsis aferentes con neuronas kisspeptinas y expresan el receptor Kiss1R (GPR54);
(b) la adicin de kisspeptinas en el tercer ventrculo, en forma perifrica o en explantes
generan alzas agudas en la actividad elctrica, en la presencia de marcadores de
activacin gnica (fos) y en la secrecin de las neuronas GnRH; (c) la adicin de
antagonistas especficos generan reduccin en la sntesis de GnRH; (d) adems,

virtualmente todas las neuronas secretoras de kisspeptinas asociadas al control de la

secrecin tnica y cclica de GnRH presentan receptores para estradiol (ER) y
progesterona (PR) en hembras y receptor a andrgenos (AR) en machos; (e) ratones
mutantes para genes que codifican para kisspeptina y su receptor bloquean la secrecin
de GnRH. En otras lneas de evidencia, la administracin de kisspeptina puede inducir
la ovulacin en casi todas las ovejas tratadas en anestro estacional, o en hembras con
ovarios inactivos (prepuberales o lactancia) y puede inducir la ovulacin sincronizada
en ovejas sincronizadas con progesterona (Figura 5). La administracin del antagonista
especfico para Kiss1r bloquea el pique preovulatorio de LH y el alza de LH post
castracin. As, la evidencia se ha acumulado rpidamente en soporte de un rol central
de este pptido en la transmisin de informacin perifrica hacia la neurona GnRH.

Figura 5. Efecto de la adicin de kisspeptina en (a) la secrecin de GnRH y LH en ovejas en anestro y

tratadas con estradiol; y (b) en la induccin de ovulacin en ovejas sincronizadas con progesterona
(kisspeptina (); vehculo (o)). En el primer experimento se muestra que la adicin de kisspeptina
genera una rpida secrecin de GnRH/LH en un ambiente muy inhibitorio. En el segundo, se observa que
la adicin de kisspeptina sincroniza las descargas preovulatorias de LH en comparacin con la adicin del
vehculo.

La nomenclatura estandarizada sugiere usar los trminos: KISS1 y Kiss1 para los genes
que codifican para kisspeptina en humanos y animales y KISS1R y Kiss1r para los
receptores, y kisspeptina para el producto.
Aunque en ovejas ovariectomizadas y machos castrados, las terapias de reemplazo
usando concentraciones fisiolgicas de estradiol y progesterona y testosterona son
capaces de replicar con precisin los patrones de secrecin tnico y cclico, por lo que
se consideran la base de la regulacin sobre las neuronas GnRH, tambin es claro que
estas neuronas carecen de receptores para esteroides (ER, receptor para estradiol; PR,
receptor para progesterona; y AR, receptor para testosterona) y que seales perifricas
metablicas y ambientales pueden modificar la sensibilidad de las neuronas GnRH a la
retroalimentacin proveniente de las gnadas.

Ha sido muy difcil establecer con precisin la regulacin de la actividad secretora de

GnRH. Por de pronto, aunque las neuronas GnRH parecen ser morfolgicamente
simples, ciertamente no lo son las neuronas aferentes (seales directas) ni las neuronas
que sinapsan con estas neuronas modificando su funcionalidad (seales indirectas). As,
si las neuronas GnRH reciben seales neuromoduladoras de miles de neuronas aferentes
y estas neuronas reciben seales aferentes de varios miles de neuronas adicionales, es
difcil establecer la importancia relativa que las seales neuromoduladoras pueden tener
en esta red neural, sin considerar siquiera la accin neuromoduladora de molculas de
origen no neural. Adicionalmente, se han descrito mas de 30 seales que pueden
modificar la actividad de neuronas GnRH y se siguen encontrando en forma continua y
finalmente, se ha observado que una misma neurona puede co-expresar mas de una
seal neuromoduladora, tal como las neuronas KNDy.
Adems, basado en evidencia experimental variada en ovejas y ratones, y considerando
que hay diferencias entre especies tanto en la organizacin del sistema GnRH como en
la sensibilidad a seales neuromoduladoras, en ovejas existe consenso en que en las
reas hipofisiotropa los opioides endgenos (EOPs), GABA, dopamina, somatostatina y
neuropptido Y (NPY) inhiben la secrecin de GnRH, y la secrecin de glutamato y
kisspeptina la aumentan (Cuadro 1). Esto debe adems considerar que el cuadro es
incompleto y que la manera como interactan con las neuronas kisspeptina y GnRH an
no est clara.
Cuadro 1. Neuronas con receptores a esteroides que pueden hacer sinapsis en neuronas
GnRH a nivel hipotalmico.
Neurotransmisor*
% neurona
Area
% de clulas
Efecto en
o neuropptido
GnRH
hipotalmica
GnRH
con ER
contactadas
Dopamina*
12-18%
POA/AHA, ARC
3-17%
Inhibe
GABA*
20%
POA
44%
Inhibe
Glutamato*
73%
POA/ARC
41-77%
Estimula
Dinorfina
35%
POA/AHA/ARC
90%
Inhibe
65%
ARC
90%
Inhibe
-endorfina
Neuropptido Y
25%
ARC
4-12%
Inhibe
Somatostatina
80%
VMN
30%
Inhibe
Kisspeptina1
> 90%
ARC/POA
>90% (ARC)
Estimula
Goodman e Inskeep, 2007. 1En ovejas, Caraty y Franceschini, 2008.

En resumen, se pueden caracterizar los centros tnico (generador de pulsos) y cclico de

liberacin de GnRH/LH (descarga preovulatoria) como grupos de neuronas que se
ubican en el hipotlamo y que son secretoras de kisspeptina y probablemente otras
molculas neuromoduladoras, las que bajo la influencia de numerosas seales aferentes
derivadas del monitoreo neuronal del estatus ambiental, endocrino y metablico,
determinan el patrn de liberacin de GnRH por neuronas GnRH (que tambin forman
parte de los centros) y con ello la funcin hipofisiaria y gonadal de los individuos.
Efecto del estradiol y progesterona en la secrecin de GnRH
Hace un tiempo se sabe que el patrn de secrecin de GnRH es regulado por los
esteroides gonadales, estradiol y progesterona en hembras y testosterona en machos
(Fig.6). Con relacin a la liberacin tnica de GnRH, en animales con ciclos ovulatorios

recurrentes, el estradiol tiene efectos irrelevantes sobre la frecuencia de pulsos de GnRH

e inhibitorios sobre la amplitud siendo la progesterona el principal inhibidor de la
frecuencia de pulsos actuando a nivel hipotalmico. El estradiol potencia el efecto
inhibitorio en la secrecin de GnRH en presencia de la progesterona en neuronas que
conforman el centro tnico (neuronas KNDy del ARC). Sin embargo, en estados
prepuberales, en el amamantamiento, en el stress y fuera de la estacin reproductiva en
especies con reproduccin estacional (es decir, en animales no ciclantes), el estradiol
presenta una actividad inhibitoria muy potente sobre el centro tnico. En el caso de los
machos la testosterona es el principal regulador inhibitorio hipotalmico. Los machos
tienen una respuesta significativamente menor a progesterona porque el nmero de
neuronas con receptores a progesterona es muy inferior a las hembras.

Figura 6. Esquema del control de la secrecin de GnRH por los esteroides gonadales en ratn. Todos lo
esteroides generan un feedback negativo en las neuronas que controlan la secrecin tnica a nivel del
ncleo ARC (el estradiol es poco significativo en hembras ciclando), mientras que el estradiol ejerce un
feedback positivo y la progesterona un feedback negativo en el centro cclico.

Sobre el centro cclico (POA y seccin rostral del ARC), el estradiol lo activa al
alcanzar una concentracin perifrica mnima de 3-4 pg/ml, sin embargo, la amplitud de
la descarga y su sincronizacin con el inicio del estro demanda una concentracin del
orden de los 7-10 pg/ml. La progesterona inhibe la activacin del centro cclico
suprimiendo la respuesta a estradiol directamente en las neuronas reactivas, por lo que
en ovinos y bovinos es necesario que la progesterona se encuentre en niveles basales
(bajo los 0,5 ng/ml de plasma).
Los mecanismos asociados al control de los esteroides gonadales sobre la secrecin de
GnRH no est completamente definido. La influencia inhibitoria sobre el centro tnico
por parte de los esteroides gonadales se ejerce directamente sobre el hipotlamo medio
basal (MBH), especficamente en el ncleo arqueado (ARC) en ovejas, ratones y
primates, el lugar donde se concentran las neuronas KNDy que actan como sensores de
los esteroides sexuales. Las neuronas responsables de la secrecin de kisspeptinas
como ya se vio tienen receptores para ambos esteroides (ER y PR) y pueden coexpresar EOPs (dinorfina).

La progesterona y el estradiol en baja concentracin afectan la frecuencia y amplitud de

los pulsos de GnRH y esta accin est asociada con una reduccin en la secrecin de
kisspeptinas y un aumento en la de EOPs. El estradiol actuando sobre sureceptor ER
reduce el nmero de neuronas que expresan y el nivel de expresin de mRNA para
Kiss1, pero solo en ese grupo de neuronas en ovinos y ratones. La progesterona no tiene
efecto sobre la produccin de kisspeptina, pero estimulando la produccin de EOPs
(dinorfina) suprime la produccin de GnRH por neuronas GnRH que s expresan el
receptor kappa. De hecho, la adicin de opioides y agonistas opioides en el tercer
ventrculo y en el MBH genera una inhibicin y la adicin de antagonistas un aumento
de GnRH/LH durante la fase luteal o en ovejas ovariectomizadas tratadas con
progesterona y se han demostrado terminales de neuronas opioidrgicas en contacto con
el soma de neuronas GnRH. En machos, existe evidencia convincente de que el sistema
Kiss1/Kiss1r estn involucrado en el feedback negativo de andrgenos en la secrecin
de kisspeptina del ncleo ARC y subsecuentemente de GnRH/LH en mamferos.
a. Despus de la castracin los niveles de Kiss1mRNA aumentan dramticamente en
el MBH (ncleo ARC). El efecto puede ser revertido por una terapia de reemplazo con
esteroides (estradiol, testosterona y progesterona).
b. El aumento en Kiss1 mRNA post castracin coincide con el aumento de secrecin
de GnRH/LH.
c. El aumento post castracin de LH puede ser revertido con antagonistas a
kisspeptina.
d. Las neuronas Kiss1 expresan receptores para testosterona y estradiol (AR y ERa) y
las mutaciones dirigidas contra ambos receptores, los implican en la regulacin de
ambos en la expresin gnica para Kiss1 en el ARC.
En resumen, se estima que los esteroides ovricos actan sobre las neuronas KNDy en
el ncleo ARC del MBH, que junto con las neuronas GnRH forman el centro de
regulacin tnica de GnRH/LH en rumiantes. El estradiol y la testosterona suprimiendo
directamente el nmero de neuronas expresando mRNA para kisspeptina y su nivel de
expresin, y la progesterona, a travs del aumento en la secrecin de dinorfina, el
opioide endgeno mas relevante. Se ha propuesto que el balance de seales
estimulatorias (niveles de kisspeptina) e inhibitorias (niveles de dinorfina y otros) que
acceden a las neuronas GnRH definen finalmente su nivel de actividad (Fig. 7).
B

Figura 7. A. Nivel de expresin en hembras (barras negras) y machos (barras blancas) de pptidos
neuromoduladores de la actividad de neuronas GnRH en el centro tnico en ovinos. B. Modelo de
accin de pptidos estimulatorio e inhibitorios sobre la actividad de neuronas GnRH. Se postula
que la actividad final va a ser resultado del balance de la concentracin de pptidos y otras seales
eventuales que acceden a la neurona GnRH (Cheng et al., 2010).

Con relacin a la activacin del centro cclico, tambin est bien establecido que el
aumento de estradiol durante la fase folicular con niveles basales de progesterona es la
seal endocrina que la desencadena y que culmina con el pick preovulatorio. En
rumiantes los niveles de progesterona se mantienen basales previo a la ovulacin y la
administracin de antagonistas para el PR no afecta la ovulacin. La informacin que se
acumula es consistente en asignar tambin un rol central a la kisspeptina sobre la
activacin del centro cclico. Como se mencion, el MBH y POA presenta neuronas
secretoras de kisspeptina; las neuronas GnRH adyacentes expresan Kiss1r, su receptor;
virtualmente todas las neuronas presentan el receptor ER y responden a la
estimulacin estrognica con una aguda secrecin de kisspeptina; las neuronas GnRH
responden con una poderosa depolarizacin a la estimulacin con kisspeptina; ratones
mutantes carentes de ER (knockout para su gen) no presentan descarga de GnRH/LH
en respuesta a la estimulacin con estradiol y el efecto puede ser revertido con la
administracin de kisspeptina. Adicionalmente, se ha observado que el estradiol genera
un aumento de marcadores de expresin gnica en neuronas GnRH (fos), que puede
alcanzar el 40-50% de las clulas del MBH y POA. Sobre esa base, se plantea que el
alza de estradiol genera una activacin en la liberacin de kisspeptinas a nivel del MBH
que permite un reclutamiento de neuronas GnRH de sta y otras reas hipotalmicas
(POA y ARC), que es gradual y dependiente de los niveles plasmticos de estradiol
(Fig.8). Otras seales neuromoduladoras, pueden modificar la sensibilidad de las
neuronas kisspeptinas al estradiol (leptina, insulina, dopamina, etc.) y establecer la
forma de la descarga de GnRH (EOPs, dopamina, somatostatina, etc.).

Figura 8. Esquema que muestra el circuito neuroendocrino que media la actividad del estradiol en las
neuronas GnRH. A, las relaciones funcionales entre las neuronas kisspeptinas y GnRH con la hipfisis y
los ovarios (en la oveja el centro cclico est ubicado en el MBH). B, Hipotlamo mostrando la ubicacin
de neuronas kisspeptinas. La tincin es muy significativa en el ncleo arqueado comparada con el rea
preptica. C, patrn de secrecin de GnRH (puntos oscuros y coleccin cada minuto) y LH (colectada
cada 10 min) que precede a la descarga cclica.

La magnitud de la descarga de LH y FSH derivada de la activacin del centro cclico

(100-200 ng/ml de LH; 50-100 veces de los niveles basales) se debe a una mayor
secrecin de GnRH (20-40 veces de la secrecin basal), por el mayor reclutamiento de
neuronas GnRH resultante del alza de estradiol por un lado, y por una respuesta
amplificada de la hipfisis a la estimulacin por GnRH debido a (1) un aumento en el
nmero de receptores para GnRH y de la sensibilidad de los gonadotrofos a la
estimulacin por este pptido inducido por GnRH y estradiol, (2) a un aumento en la
sntesis y almacenamiento de LH en los gonadotrofos inducido por estradiol, y (3) a un
aumento en la concentracin de LH liberable por un aumento en los granos y ubicacin
de los granos bajo la membrana de los gonadotrofos para su exocitosis, tambin
inducido por estradiol.
Acciones hipofisiarias de la GnRH
La GnRH acta a nivel hipofisiario unindose a su receptor que se ubica exclusivamente
en la membrana de las clulas gonadotrficas, los gonadotrofos. La intensidad de su
accin depende de la concentracin de GnRH que accede por los vasos portales y la
densidad de los receptores hipofisiarios. Estos ltimos adquieren una mxima
concentracin al momento de la activacin de la descarga cclica (preovulatoria) de LH
(Fig. 9).

Figura 9. Esquema muestra la

asoiacin entre la descarga cclica
de GnRH/LH (A) y la
concentracin de receptores a nivel
de gonadotrofo (B) en ovejas
tratadas con prostaglandina F2.

GnRH y estradiol por mecanismos separados son capaces de inducir un aumento en la

sntesis de receptores para GnRH, mientras que la progesterona inhibiendo el aumento
inducido por estradiol puede reducir la sensibilidad hipofisiaria a GnRH. Por otro lado,
la secrecin pulstil de GnRH permite que se mantenga una poblacin de receptores a
nivel del gonadotrofo que responda a la accin de la hormona. La secrecin continua de
GnRH produce una internalizacin de receptores y su degradacin (Fig. 10), pero su

reciclamiento se produce a una velocidad inferior a la degradacin subsiguiente a la

activacin del receptor, por lo que el efecto final es una reduccin en el nmero de
receptores y una prdida de sensibilidad del gonadotrofo a la estimulacin por GnRH
(down-regulation).

Figura 10. Modelo de activacin

de receptor hormonal y su
reciclaje. La sntesis de nuevos
receptores para GnRH es
suficientemente rpida cuando la
secrecin de GnRH es pulstil,
para mantener la sensibilidad
hipofisiaria a esta hormona.
Cuando la secrecin es continua,
el reciclaje es insuficiente y se
produce una reduccin en el
nmero de receptores y de la
sensibilidad hipofisiaria a la
GnRH.

Secrecin de LH y FSH
El gonadotrofo produce en respuesta a la activacin por GnRH la subunidad comn
para ambas gonodatrofinas y las subunidades -LH y -FSH. La LH es producida
estrictamente en respuesta a la activacin por GnRH, y es almacenada ensamblada en
grnulos asociada a secretogranina II. La LH liberada en pulsos corresponde a una
fraccin suficientemente cercana a la membrana del gonadotrofo para ser liberada por
exocitosis al momento de la unin de GnRH a su receptor (Fig.11). De la perspectiva
de la retroalimentacin por esteroides, al reducir la frecuencia y amplitud de pulsos de
GnRH, la progesterona, y en menor proporcin el estradiol, son capaz de reducir la
liberacin de LH.
La produccin de FSH es menos sensible a la actividad de GnRH, de hecho una
fraccin de la secrecin de FSH es coincidente con pulsos de GnRH (adems tiene una
vida media de 150 min comparada con los 20 min de la LH, por lo que tampoco se
notan los pulsos). An cuando la desconexin hipotlamo-hipfisis por la
administracin crnica de GnRH, la administracin de antagonistas de GnRH o de sus
anticuerpos efectivamente suprimen la produccin de LH y FSH, se necesita mucho
menos GnRH para permitir una produccin adecuada de esta gonodatrofina. De hecho,
el patrn de liberacin de GnRH que durante la fase luteal es capaz de inhibir la
secrecin de LH, es incapaz de ejercer una influencia sobre la FSH y se estima que la
baja frecuencia de liberacin de GnRH promueve la sntesis de FSH, mientras que una
frecuencia mayor lo hace con la LH. La FSH es secretada por el gonadotrofo en forma
constitutiva, es decir no es almacenada, por lo que su tasa de secrecin es dependiente
de su tasa de sntesis. La produccin de FSH es inhibida a nivel del gonadotrofo por
inhibina y en menor proporcin por estradiol, porque son capaces de bloquear la
expresin y sntesis de FSH (subunidad -FSH).

Figura 11. Esquema que muestra la

produccin y liberacin de
gonodatrofinas. La produccin es
estimulada por GnRH que se une a
receptores de membranas. La
unin al receptor activa varias vas
metablicas que permiten la
produccin de las distintas
subunidades que estructuran las
gonadotropinas. La LH es
almacenada en grnulos que son
liberados por exocitosis en
respuesta a la accin de GnRH,
mientras que la FSH es secretada a
medida que es producida (por eso
el alza cclica de FSH es de una
magnitud mucho menor que la de
LH). Factores que regulan la
secrecin de GnRH modulan la
liberacin de LH, mientras que la
inhibina y estradiol son capaces de
afectar la liberacin de FSH, pero
actuando a nivel de la hipfisis.

Agonistas y antagonistas de GnRH

Mediante sustituciones de aminocidos de la estructura de GnRH es posible modificar
la capacidad funcional de la hormona. As, modificando las capacidades de unirse a su
receptor, de activar la cadena metablica subsiguiente y del intervalo a la
internalizacin y degradacin del receptor, es posible modificar la funcin, potencia
y/o vida media del anlogo. Se han sintetizado varios cientos de pptidos anlogos de
GnRH (Cuadro 2), algunos simulando la funcin GnRH pero con mas potencia y/o vida
media, los agonistas, y otros manteniendo la capacidad de unin al receptor pero
inactivando la capacidad de estimular la proteina G asociada a la actividad metablica
subsiguiente, los antagonistas. Cuando generan una liberacin continua de GnRH (de
depsito), se busca neutralizar la liberacin de gonodatrofinas (anticoncepcin)
Cuadro 2. Propiedades y funciones de anlogos de GnRH existentes en el mercado.
Nombre
Estructura
Nombre comercial
GnRH
pGlu-His-Trp-Ser-Tir-Gli-Leu-ArgPro-Gli-NH2
Acetat buserelina pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(tBu)(Conceptal)
Leu-Arg-Pro-NHC2H5 (nonapptido)
pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-tertLeu-LeuAcetal lecirelina
Arg-Pro-NHEt (nonapptido)
(Dalmarelin)
Leuprolide
Pir-His-Trp-Ser-Tir-D-Leu-Leu-Arg(Lupron)
Pro-NHEt (nonapptido)
Aceta deslorelina pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu(Ovuplant)
Arg-Pro-NHC2H (nonapptido)

Funcin buscada
No usada clnicamente (se usan
los anlogos)
Induccin de ovulacin,
tratamiento de quistes ovricos
Induccin de ovulacin,
tratamiento de quistes ovricos
Induccin de ovulacin.
Contracepcin (de depsito)
Induccin de ovulacin.
Contracepcin (de depsito)

Influencia Metablica en el Eje hipotlamo-Hipfisis

La reproduccin es una actividad biolgica que consume una significativa cantidad de
energa, tanto para sostener la gestacin y lactancia en las hembras, como para sostener
en los machos la actividad fsica asociada a la bsqueda y cpula de hembras en estro.
Por ser una actividad no esencial para la supervivencia de los individuos, la
reproduccin solo se lleva adelante cuando los niveles de energa disponibles estn
aseguradas. En este sentido, a nivel del SNC, tpicamente en el hipotlamo medio basal
(especficamente en el ARC) existen mecanismos sensores del nivel de seales
metablicas que influyen en la actividad neuronal y determinan respuestas asociadas a
la homeostasis energtica, consumo de alimentos y la funcin del eje reproductivo. Las
mas significativas son las hormonas leptina como seal de abundancia y ghrelina como
seal de deficiencia, que actan como antagonistas funcionales a nivel central, y
probablemente los nutrientes glucosa, cidos grasos y aminocidos especficos.
En un modelo simplificado (Fig. 12) los grupos de neuronas que median las acciones en
consumo de alimentos y homeostasis energtica son aquellas que ante seales de
abundancia reducen el consumo de alimento (seales anorexignicas) y promueven la
utilizacin de energa, tpicamente la leptina actuando en neuronas KNDy y/o
adyacentes, neuronas que producen pro-opiomelanocortina (PMOC) y las que ante
seales de deficiencias energticas, aumentan el apetito (seales orexignicas) e inhiben
su utilizacin que a su vez expresan Neuropptido Y (NPY). Ambos grupos de neuronas
ejercen efectos opuestos usando las mismas vas de sealizacin, por lo que el efecto
final va a depender del predominio de uno u otro. Sobre el eje reproductivo las acciones
van a ser mediadas por neuronas kisspeptina que acta como efector final con las
neuronas PMOC promoviendo y NPY inhibiendo su actividad; de hecho existe una
interconexin mutua entre los 3
grupos neuronales, lo que refleja
el nivel de interaccin entre el eje
reproductivo
con
el
eje
metablico.
Figura 12. Esquema que muestra
la vinculacin de las seales
metablicas con el control del
consumo y homeostasis
energtica. Neuropptidos
secretados por neuronas
homnimas ubicadas en el ARC
controlan la estimulacin o
inhibicin del consumo y gasto
energtico. Cuando los efectos
son crnicos, tienen el potencial
de afectar la secrecin de GnRH
del centro tnico actuando sobre
las neuronas KNDy (ver mas
abajo para una descripcin;
Snchez-Lashera et al., 2010).

Leptina
Con el descubrimiento de la leptina en 1994 (Zhang et al.), se obtuvo un verdadero
punto de inflexin en el sentido de aclarar el rol del metabolismo en la modulacin del
eje hipotlamo-hipfisis. Desde entonces se ha hecho un progreso considerable en
direccin de aclarar las vas neuroendocrinas responsables del control metablico de la
funcin gonadotrpica, al reconocer a la leptina como un integrador neuroendocrino
esencial para acoplar el estado de las reservas corporales y las diferentes funciones
endocrinas, incluida la reproduccin.
La leptina, del griego leptos que significa delgado, es una protena de 167 amino
cidos secretada por las clulas del tejido adiposo blanco en respuesta a la activacin
del gen ob. La leptina circula libre o unida a protenas transportadoras, refleja
proporcionalmente el nivel de reserva grasa corporal y tiene una vida media de 30 min y
es degradada y eliminada a travs de la orina. Acta en los tejidos blancos a travs de la
unin a su receptor (LR) activando vas de activacin de trascripcin intracelulares
(Janus kinasa 2/STAT3).
La observacin que condujo a la identificacin de leptina fue la existencia de ratones
obesos que carecan del gen de la leptina (ob/ob gen del ratn normal; Ob/Ob del
deficiente) y que fenotpicamente presentaban obesidad hiperfgica e infertilidad por
hipogonadismo hipogonadotrpico (Fig. 13). El cuadro es revertido con la adicin de
leptina y los ratones tratados recuperan su peso y se tornan nuevamente frtiles. La
leptina es vista como una seal de saciedad actuando sobre las neuronas kisspeptina,
NPY y POMC en el Ncleo ARC del hipotlamo Medio Basal y transmitiendo
informacin asociada al estatus nutricional de los individuos. La deficiencia de leptina
en humanos y roedores tambin est asociada a una obesidad hiperfgica e
hipogonadismo hipogonadotrfico que conduce a infertilidad, que como se mencion
puede ser revertida con la administracin de leptina.
Figura 13. Ratones con y
deficientes de gen de leptina. Los
ratones que poseen el gen para
expresar leptina experimentan
saciedad y son delgados, mientras
que los carentes del gen presentan
obesidad
hiperfgica.
El
tratamiento con leptina, o en este
caso la unin quirrgica de las
circulaciones de ambos ratones,
revierte el cuadro de obesidad.

Se ha reconocido desde hace un tiempo que la leptina tiene acciones

permisivas/estimulatorias en el eje reproductivo principalmente modulando el sistema
neuronal GnRH en el hipotlamo (la administracin hipotalmica de leptina genera
secrecin de GnRH y la leptina sola es suficiente para normalizar la frecuencia de
pulsos de GnRH/LH en ratas en ayuno). Sin embargo recientemente (Quennell et al.,
2009) se ha demostrado que las acciones de la leptina en la secrecin de GnRH son
indirectas porque las neuronas GnRH carecen de su receptor (LR; Ob-Rb).

La naturaleza de las vas aferentes para conducir los efectos de la leptina a neuronas
GnRH an deben aclararse pero se ha presentado evidencia que las neuronas
kisspeptinas del ARC y neuronas NPY son vas probables. Ambas expresan LR y
contactan neuronas GnRH. La evidencia que conecta las acciones estimulatorias de la
leptina con el sistema kisspeptina es coherente; la leptina promueve la actividad del gen
Kiss1 en neuronas kisspeptina. El Kiss1 mRNA a nivel del ARC est disminuida en
ratones Ob/Ob, pero aumentan con un tratamiento de leptina; la leptina puede aumentar
la expresin de Kiss1 mRNA en lneas celulares hipotalmica; hay una correlacin
estrecha entre los niveles circulantes de leptina (bajos) y la expresin de mRNA para
Kiss1 y el nmero de neuronas kisspeptina en ratas delgadas (subnutridas). Se piensa
actualmente que se necesita un tono de leptina adecuado para que la expresin de Kiss1
mRNA tambin lo sea y con ello, la operacin del eje reproductivo.
El NPY es un pptido de 36 amino cidos secretado por neuronas NPY y ha mostrado
ser un importante integrador hipotalmico de la seal inhibitoria de leptina para la
regulacin alimentacin/metabolismo como para la modulacin neuroendocrina de la
reproduccin. El NPY es uno de las mas potentes seales orexignicas (estimuladoras
del apetito) conocidas hasta hoy. Cuando es infundido crnicamente, induce
consistentemente una profunda inhibicin del eje gonadotropo, sugiriendo que la
expresin aumentada de NPY observada en el ayuno o en condiciones metablicas
desfavorables puede causar una inhibicin de la liberacin de la secrecin de GnRH. La
restriccin calrica en ratones juveniles ejerce una depresin en los niveles de leptina y
elevada expresin hipotalmica de NPY, por lo que el retardo en la presentacin de la
pubertad es aceptado que se produce por la imposicin de un tono inhibitorio en las
neuronas GnRH por los elevados niveles de NPY. Los ratones Y-/- (carentes del
receptor para NPY, Y1) presentan pubertad normalmente en estas condiciones
experimentales (restriccin calrica), mientras que los controles presentan retardo
indefinido en la pubertad. Las neuronas GnRH expresan receptor Y1 in vivo, y se
demuestra as que mediante este receptor las neuronas NPY pueden canalizar
informacin a las neuronas GnRH con relacin a los niveles de leptina circulantes.
Ghrelina
La ghrelina (gre, de crecimiento y relina, de sustancia liberadora) es un pptido de 28
amino cidos que se puede considerar como un antagonista funcional de la leptina por
sus acciones inhibitorias sobre el eje neuroendocrino. Es una hormona secretada
principalmente, pero no nicamente (intestino delgado, pncreas, rin, placenta,
hipfisis, gnadas, etc.), por las clulas endocrinas X/A de las glndulas oxnticas de la
mucosa del estmago y es considerado un factor orexignico (estimulador del apetito)
que seala la insuficiencia energtica. Adems de mediar la secrecin de GH a travs de
su receptor secretogogo (GHS-R), la ghrelina est asociada a varias otras funciones que
incluye la regulacin del consumo de alimentos y control de la energa, el sueo, el
peso, la motilidad gastrointestinal, funciones cardiovasculares, proliferacin celular y
reproduccin. Es conservada entre especies porque se presenta en mamferos y no
mamferos. La expresin de ghrelina se ha reportado en un nmero de rganos entre los
que se incluye el eje reproductivo. Acta activando su receptor (protena G acoplado;
GHS-R1a) que presenta gran niveles de homologa (96-99%) con los de humanos,
perros, cerdos, y ratones. La expresin de mRNA para el receptor GHS-1a se observa
en hipfisis, cerebro y en un nmero de estructuras que incluyen los ovarios y testculos.
En el hipotlamo se expresa abundantemente en neuronas que expresan los pptidos

orexignicos NY y AgRP en el ncleo ARC. Los niveles de ghrelina aumentan con el

ayuno y retornan a niveles basales a la realimentacin.
La ghrelina ejerce un efecto inhibitorio sobre la secrecin pulstil de LH en un nmero
de especies incluidos ratones y ovejas, por lo que niveles altos de ghrelina producen un
retardo de la pubertad e inhibicin de la reproduccin. Una variedad de modelos
experimentales sustentas esta visin:
a. La administracin central de ghrelina suprime la frecuencia de pulsos de LH en
ratas ovariectomizadas.
b. La icv de ghrelina tambin lo hace en ratas ciclantes y ovariectomizadas.
c. La secrecin de GnRH en fragmentos hipotalmicos de ratas ovariectomizadas es
inhibida por ghrelina.
d. La administracin diaria de ghrelina en sus dos isoformas deprime la secrecin de
LH en ratas machos y retarda la pubertad. Tambin lo hace con la FSH y LH de ratas
adultas (Fig. 14).
As, la evidencia encontrada refuerza la hiptesis que la ghrelina, como una seal
putativa de insuficiencia energtica puede operar como un modulador negativo de la
secrecin de LH y de la presentacin de la pubertad en machos y hembras. Estos datos
son comparables con los obtenidos en primates, ovejas y humanos. La ghrelina reduce
la frecuencia de pulsos de GnRH, aparentemente mediada por neuronas NPY debido a
que antagonistas especficos para el receptor NPY-5 de NPY suprimen los efectos de la
ghrelina en la secrecin de GnRH. De hecho, la activacin del GHS-R mediada por
ghrelina en el ARC modula la actividad elctrica de neuronas NPY y POMC
(propionilmelanocortina) e inyecciones intraventriculares cerebrales (icv) y en el ARC
activan las neuronas NPY de acuerdo a los niveles de c-Fos. Las neuronas NPY
expresan GHS-R y la administracin de ghrelina aumenta su actividad elctrica. La
delecin de NPY en ratones transgnicos bloquea los efectos de ghrelina.
Combinado con los efectos de la ghrelina en las gnadas, donde al unirse a su receptor
(GHSR-1a) muestra inhibir la actividad esterodognica en ovarios y testculo actuando
sobre la expresin de un nmero de factores requeridos en las vas de sntesis, el efecto
global de niveles elevados de ghrelina es una inhibicin del eje reproductivo y de la
fertilidad de los individuos en momentos de deficiencia energtica.
Insulina
Finalmente, la insulina est entre los factores metablicos que sealan el estatus
nutricional de un individuo al hipotlamo y su rol en la modulacin de la actividad
GnRH es crecientemente reconocida. La insulina circula en la periferia en niveles
proporcionales al contenido graso corporal, al igual que la leptina, y los niveles en el
lquido cfalo-raqudeo son similares a los perifricos. Es considerada que participa
como una seal de saciedad a nivel central. La observacin de que la administracin en
el 3V de insulina inhibe el consumo de alimentos en ratas normales y revierte el
sndrome hiperfgico de animales insulina-deficientes est en lnea como una seal de
saciedad. Ratones knockout para el receptor de insulina en clulas neuronales, ratones
NIRKO, presentan un fenotipo similar que las carentes de receptores para leptina
(Ob/Ob), exhiben obesidad hiperfgica e hipogonadismo hipogonadotrpico.
Los cambios en los niveles circulantes de insulina pueden modular la actividad del eje
neuroendocrino in vivo. Los efectos pueden ser directos en las neuronas GnRH porque

la adicin de insulina estimula la expresin de mRNA para GnRH y la del decapptido

mismo por lneas celulares de neuronas GnRH. Estas lneas celulares expresan adems
el mRNA y el producto receptor para insulina y expresan rpida y activamente c-Fos, el
marcador de actividad gnica al adicionarse insulina. Los datos in vitro en roedores son
coherentes y sostienen completamente la hiptesis de que la modulacin del eje
neuroendocrino por insulina, depende al menos parcialmente, de acciones directa de la
insulina en las neuronas GnRH, lo que ha sido corroborado tambin en humanos.

Figura 14. Efecto de las isoformas de la

ghrelina en la funcin del eje HPG en ratas
machos prepberes (1) y en ratas machos
adultos. La ghrelina tiene efectos inhibitorios
sobre la funcin del eje reproductivo en esta y
en otras especies.

Glucosa
La importancia de la glucosa como seal regulatoria del consumo de alimentos y control
del peso se reconoce hace dcadas. Los niveles de glucosa circulantes a nivel del
cerebro estn equilibradas con los niveles perifrico y se han descrito dos tipos de
neuronas hipotalmicas que reaccionan en funcin de estos niveles: las estimuladas por
glucosa (GE) que aumentan su nivel de actividad con alzas de glucosa y se agrupan en
el hipotlamo lateral; y las inhibidas por glucosa (GI) que aumentan su nivel de
actividad con niveles bajos de glucosa y se localizan en el VMH. En el ARC las
neuronas productoras de POMC actan como neuronas GE y facilitan la actividad del
eje, mientras que las neuronas NPY como neuronas GI que reducen la actividad del eje
reproductivo.

La Pubertad como Fenmeno Neuroendocrino

La pubertad puede ser definida en machos y hembras como la adquisicin de la
completa serie de cambios fisiolgicos, morfolgicos y conductuales que capacitan a un
individuo para completar un proceso reproductivo en forma exitosa. Hay un nmero de
criterios para definir la pubertad, que incluye elementos endocrinos y clnicos. En
Medicina Veterinaria existe consenso en lo que se considera adquisicin del potencial
reproductivo: en machos es emisin de eyaculados con una concentracin umbral de
espermatozoides con capacidad funcional para generar una fecundacin normal en
monta natural; en toros, carneros y chivos es al menos 50 millones de espermatozoides
con al menos 10% de movimiento progresivo; mientras que en la hembra el criterio es la
primera ovulacin asociada a manifestaciones de conducta de estro, porque es la nica
manera de concebir en monta natural, pero seguida de ciclos estrales recurrentes.
La edad a la pubertad es bastante variable y en mamferos depende de la obtencin de
una masa y de una proporcin de grasa corporal que asegure que existe una reserva
energtica mnima para sustentar una gestacin que tiene un gasto energtico
considerable en las hembras, y aunque en machos la gametognesis no constituye un
problema en este sentido, la conducta sexual y el desarrollo corporal requerido para
competir por las hembras es demandante de un nivel metablico tambin considerable.
La hiptesis que sostiene que es necesaria una cantidad mnima de grasa corporal para
la presentacin de la pubertad, hiptesis de gordura crtica fue planteada por Frish y
McArthur (1974) y parte de la base que la grasa corporal es un marcador de la cantidad
total de energa almacenada que est disponible. En el Cuadro 3 se muestra la edad a la
pubertad en varias especies domsticas.
Cuadro 3. Pubertad en especies domsticas.
Especie
Bovino
Ovino
Porcino
Equino
Alpaca
Llama
Canino
Felino
PL Senger (2005).

Macho
11 meses (7-18)
7 meses (6-9)
7 meses (5-8)
14 meses (10-24)
2-3 aos
2-3 aos
9 meses (5-12)
9 meses (8-10)

Hembra
11 meses (9-24)
7 meses (4-14)
6 meses (5-7)
18 meses (12-19)
1 ao
6-12 meses
12 meses (6-24)
8 meses (4-12)

Existe consenso en que el mayor determinante de la presentacin de la pubertad en

condiciones saludables tiene origen gentico. Sin embargo, se han reconocido
modificadores adicionales del momento de la presentacin de la pubertad que incluyen
a factores ambientales (ej. nutricin, estmulos sociales, stress y fotoperiodo). De hecho,
la presentacin de la pubertad se ha planteado como un sensor del juego dinmico entre
determinantes genticas y seales ambientales a travs del desarrollo. Ese balance fino
entre reguladores endgenos y exgenos es ltimamente responsable de la definicin
del momento de la presentacin de la pubertad. En el Cuadro 4 se muestra la influencia
de la raza en la presentacin de la pubertad. Como regla prctica, se estima en rumiantes
que la pubertad debe haberse presentado con un 65% del peso maduro y con un mnimo
de adiposidad decretada por concentraciones umbrales de leptina, secretada por los

adipositos. De esta manera, la composicin gentica desde la perspectiva racial va a

tener un gran efecto en lo que se considere por 65% del PV. Dentro de cada raza existen
lneas genticas mas precoces y otras mas tardas. La nutricin antes y despus del
destete puede acelerar o retrasar la pubertad.
Cuadro 4. Efectos raciales en la presentacin de la pubertad.
Especies y Razas
Bovinos
Holstein
Aberdeen Angus
Hereford
Brahman
Porcinos
Meishan
Large White
Yorkshire
Caninos
Border Collie
Bloodhound
Whippet
PL Senger (2005)

Hembras

Machos

8
12
13
19

9
10 (6-24)
11
17

3
6
7

3
6
7

9
12
18

La productividad final de los animales de produccin es usualmente dependiente de la

capacidad de los animales de adquirir una madurez sexual temprana y tener su primer
parto tan temprano como sea posible sin afectar el bienestar de las hembras, y en los
machos ser incorporados al rebao como reproductor primario sin comprometer la
eficiencia reproductiva de ese rebao. En ambos sexos, por lo general el acelerar el
periodo productivo de los animales en crianza mejora la eficiencia econmica de la
operacin y acelera el progreso gentico de produccin en los rebaos. Como la
nutricin es el principal factor ambiental a manejar para influir en la edad a la pubertad,
la estrategia de crianza debiera considerar el ajuste de los planes nutricionales para
minimizar el intervalo a la concepcin segura en las hembras y la madurez sexual en los
machos (eyaculados con al menos 70% de los espermatozoides normales y 30% con
movimiento progresivo).
Presentacin de la pubertad en animales domsticos
En los machos y usando los toros como modelo, porque existe mas informacin en el
tema, aunque la pubertad se presenta en trminos generales entre los 9-13 meses (con
rangos entre 6-24 meses), existen razas y lneas genticas mas precoces y otras mas
tardas. Desde la pubertad, la eficiencia de la espermatognesis y por ende la produccin
y calidad seminal, deben mejorar considerablemente para utilizar los toros con fines
reproductivos. La proporcin de toros capaces de pasar un examen seminal dentro del
examen androlgico aumenta hasta los 12-16 meses (al menos 70% de clulas normales
y 30% de movimiento progresivo) y es claro que los toros mas precoces tienen mejor
posibilidad de ser seleccionados como reproductor que los de pubertad tarda.
El desarrollo testicular va acompaado por un progresivo aumento en la proporcin de
parnquima testicular ocupado por los tbulos seminferos hasta aproximadamente la

semana 32 de vida debido a su aumento de dimetro y de longitud. Los tbulos

seminferos aumentan 5 veces desde el nacimiento hasta la madurez sexual, con el
dimetro aumentando gradualmente entre las 8 y 20 semanas y mas aceleradamente
entre las 24 y 40 semanas; en ese periodo se produce la aparicin del lumen tubular y el
establecimiento de la barrera hemato-testicular. El largo de los tbulos seminferos
aumenta de 830 mts a las 12 semanas a mas de 2.000 mts a las 32 semanas. El
crecimiento testicular es rpido entre los 6 y 16 meses de edad y la circunferencia
escrotal aumenta aproximadamente 1,8 cms por mes. El crecimiento testicular va
asociado a un aumento gradual en su funcionalidad por lo que las respuestas en
secrecin de testosterona y eficiencia espermatognica tambin aumentan. En la Figura
15 se muestran los perfiles post natal de hormonas del eje reproductivo que sustentan el
desarrollo testicular y finalmente la eficiencia de la espermatognesis.

Figura 15. Perfiles sanguneos

de LH, FSH y testosterona en
toros durante el intervalo
nacimiento-pubertad. El alza
inicial de LH y FSH genera
una baja respuesta de
testosterona, producto de la
falta de diferenciacin
testicular. Con el desarrollo, se
produce un aumento de
testosterona e inhibicin de la
secrecin de FSH y LH, hasta
la madurez sexual, en que los
perfiles endocrinos se
equilibran en un nivel superior.
Con ello, la espermatognesis
y esteroidognesis se torna
mas eficiente.

En las hembras tambin se produce una transicin en la capacidad de respuesta gonadal

a la estimulacin gonadotrpica y en el desarrollo genital. A medida que la produccin
de estradiol aumenta en el periodo peripuberal contribuye al desarrollo del tracto
genital y glndula mamaria. Si se usa de modelo a las vaquillas, en animales prepberes
el tracto genital es subdesarrollado y el tero se presenta con un tono muscular flccido,
pero a medida que se acerca la pubertad el genital crece y el tero se palpa con mas
tonicidad. La tendencia contina hasta despus de la pubertad y la fertilidad mejora
hasta el tercer estro ovulatorio en trminos de tasas de concepcin a la inseminacin y a
la transferencia de embriones. De hecho se ha desarrollado una pauta para evaluar el
desarrollo genital puberal (Cuadro 5).

Cuadro 5. Calificacin del desarrollo del tracto genital (RTS).

Ovarios
Score
Cuernos uterinos
Largo
Altura
Ancho
(mm)
(mm)
(mm)
1
Inmaduro, < 20 mm
15
10
8
dimetro, sin tono
2
20-25 mm de dimetro,
18
12
10
sin tono
3
20-25 mm de dimetro,
22
15
10
tono leve
4
30 mm de dimetro,
30
16
12
buen tono muscular
5
> 30 mm de dimetro,
> 32
20
15
con curvatura y tono
Anderson et al (1991).

Estructuras
Sin folculos
palpables
Con folculos
hasta 8 mm
Con folculos
hasta 8-10 mm
Con folc 10 o +
CL posible
CL presente

Mecanismos que regulan la presentacin de la pubertad

La presentacin de la pubertad se produce por una activacin del eje reproductivo
(HPG) como consecuencia de un aumento en la frecuencia de pulsos de GnRH
hipotalmico. Este cambio permite la liberacin de gonadotropinas hipofisiarias y la
gametognesis y esteroidognesis gonadal que permite exhibir la funcin sexual de
machos y hembras. Es evidente que los 3 componentes jerrquicos del eje HPG
(neuronas GnRH, gonadotropos hipofisiarios y folculos ovricos y clulas de Leydig)
estn operativos bastante antes de la presentacin de la pubertad, sin embargo el sistema
permanece inactivo hasta que el individuo alcanza un estado maduracional,
representado por el peso y composicin corporal, que promueve esta activacin. Desde
hace un tiempo se sabe que la inactivacin del eje es producto del efecto inhibitorio del
estradiol folicular y testosterona testicular sobre las neuronas kisspeptinas que controlan
la liberacin tnica de GnRH hipotalmico (hiptesis del gonadostato; Ojeda et al.,
1963). De esta manera no se produce desarrollo gametognico efectivo y la ovulacin o
desarrollo espermtico permanecen bloqueados. La pubertad se presenta porque se
reduce la sensibilidad hipotalmica al efecto inhibitorio de estradiol o testosterona y
como consecuencia aumenta la frecuencia de pulsos de LH con los efectos
activacionales mencionados a nivel gonadal.
La evidencia en rumiantes fue expuesta hace algunas dcadas ovariectomizando ovejas
prepberes y administrando dosis fisiolgicas bajas de estradiol. La ovariectoma
suprime el efecto inhibitorio de estradiol y por lo mismo la frecuencia de pulsos de
Kiss1/GnRH/LH aumenta, mientras que la terapia de reemplazo con estradiol suprime
la expresin de Kiss1 mRNA y la liberacin de GnRH/LH (Fig. 16).
No est claro cuales son los cambios maduracionales que modifican la sensibilidad
hipotalmica a los esteroides gonadales o como se vincula el metabolismo con el eje
reproductivo aunque la investigacin en el rea permanece muy activa y los mtodos
implementados en el esclarecimiento son crecientemente precisos. La activacin de las
neuronas kisspeptinas son un componente crtico para la presentacin de la pubertad
debido a que la supresin de su actividad (bloqueo de la expresin del gen Kiss1, de la
kisspeptina o de su receptor Kiss1r va ratones knockout; uso de antagonistas
especficos para su receptor) genera la postergacin indefinida de la presentacin de la

pubertad y los tratamientos con kisspeptina en esos modelos experimentales o en

animales prepberes inducen la ovulacin, aunque en estas ltimas, si no existe una
madurez suficiente, las hembras vuelven a su estado prepuberal. Es interesante destacar
que los tratamientos con GnRH generan una activacin similar, por lo que el problema
es una secrecin reducida de este pptido por ausencia de estimulacin.

progesterona

Figura 16. Efecto de la administracin de implantes de estradiol en la secrecin de LH en ovejas

prepberes ovariectomizadas. El estradiol suprime la secrecin de LH inicialmente pero a medida que las
ovejas maduran, el efecto inhibitorio se reduce y el estradiol finalmente es incapaz de bloquear el
desarrollo folicular y la ovulacin. En el panel de arriba, se muestran los niveles de progesterona
exhibidas por ovejas intactas y que ovularon en un momento similar al del aumento de LH de las
ovariectomizadas (Foster y Jackson, 2006).

Siendo la kisspeptina el foco de atencin, en roedores de laboratorio se ha estudiado la

evolucin post natal de la actividad de neuronas kisspeptinas. De acuerdo a los
resultados se estiman que al menos existen 3 puntos crticos para generar la activacin
de los circuitos neuronales: (1) la expresin de niveles de adultos en la expresin de
Kiss1 mRNA en las neuronas GnRH bastante antes de la pubertad. Se ha observado que
el 40% de las neuronas GnRH expresan para el receptor de kisspeptina post natalmente
(PN), un 70% en el periodo prepuberal y > 80% en neuronas GnRH adultas; (2) un
aumento modesto de la respuesta elctrica de las neuronas GnRH a la estimulacin por
kisspeptina; y (3) la aparicin abrupta de fibras kisspeptinas rodeando los somas de las
neuronas GnRH justo antes de la pubertad. Las neuronas kisspeptinas aparecen en las
reas de control de liberacin de GnRH a los 15 das PN y aumentan de manera
exponencial (7 veces) para alcanzar niveles adultos en torno a la presentacin de la
pubertad. La sntesis misma de kisspeptina es iniciada en neuronas aferentes a neuronas
GnRH pocos das antes de la presentacin de la pubertad en roedores y primates
(especies estudiadas). En las figuras 17 se muestra la evolucin del eje neuroendocrino
PN y en la 18 se muestra la evolucin del eje HPG al tratamiento de kisspeptina PN.

Figura 17. Evolucin PN de la proporcin de neuronas GnRH expresando Kiss1r, de las que
muestran contactos aferentes con neuronas kisspeptinas y el nmero de neuronas kisspeptinas
en el MBH. La pubertad se produce entre los 30 y 35 DPN en ratones (Clarkson et al., 2010).
Los activacin de la multiplicacin y actividad secretora de neuronas kisspeptinas parecen ser
relevantes para la presentacin de la pubertad en mamferos.

Figura 18. Evolucin funcional del eje HPG a la estimulacin PN por kisspeptina en ratas. La
presentacin de la pubertad se presenta en torno a los 50 das PN (PND = das post natal). La
administracin de kisspeptina genera desde muy temprano la activacin gnica en neuronas
GnRH, con secrecin de LH y aumentos significativos, pero con eficiencia creciente de la
secrecin testicular de testosterona, reflejando una maduracin gradual del eje post natalmente
(Bentsen et al., 2010).

Modelo de presentacin de pubertad

En el modelo, la leptina e insulina son seales perifricas relevantes de abundancia
energtica y actan como factores permisivos/facilitatorios de la presentacin de la
pubertad por medio de subpoblaciones neuronales diferentes en el ARC. La ghrelina es
una seal perifrica de insuficiencia energtica y acta como un factor inhibitorio de la
presentacin de la pubertad. Las neuronas kisspeptina actan como nodo central de
integracin de seales centrales y perifricas de transmisin de informacin metablica
a las neuronas GnRH conducentes a la pubertad; mientras que las neuronas NPY lo
hacen conduciendo seales metablicas inhibitorias a las neuronas GnRH y
eventualmente a las neuronas kisspeptina para retardar la presentacin de la pubertad.
Recientemente se demostr una interconexin entre neuronas kisspeptina y NPY en
ratones y ovejas y adems se demostr que las primeras inhiban la actividad de las
segundas. Sobre la base de esta interaccin, la influencia metablica en la reproduccin
va depender del balance de neuropptidos excitatorios e inhibitorios que acceden a las
neuronas GnRH que controlan la liberacin tnica de LH y definen de esa manera el
momento de la presentacin de la pubertad (Fig. 19).
En resumen, la informacin disponible sostiene que la presentacin de la pubertad se
produce por un cambio maduracional en la red neural que controla la actividad de
neuronas GnRH en el ncleo ARC y que se expresa por una reduccin en la sensibilidad
de las neuronas KNDy a los efectos inhibitorios de estradiol y testosterona, aumento en
la secrecin de kisspeptina y activacin del eje reproductivo. La informacin del estatus
energtico del individuo definir el control fino del momento de la pubertad. Sobre este
modelo, interviene adicionalmente informacin de tipo social, estrs y fotoperodo que
tienen el potencial de modular el momento en la presentacin de la pubertad.
Figura 19. Esquema que muestra el modelo
de pubertad vigente.
La reduccin en la sensibilidad del centro
tnico de liberacin de GnRH a la inhibicin
ejercida por estradiol y testosterona en
hembras
y
machos
respectivamente
(hiptesis del gonadostato), genera un
aumento en la liberacin de kisspeptina en el
ncleo ARC del hipotlamo que aumenta la
frecuencia de pulsos de GnRH en el centro
tnico lo que activa el eje reproductivo,
permitiendo la ovulacin de folculos
ovricos e inicio de los ciclos estrales en las
hembras
y
la
activacin
de
la
espermatognesis y de la actividad sexual de
los machos. El estatus energtico del animal
y otras seales ambientales definirn el
control fino del momento en que se presenta
la pubertad (Foster, 2006).

Factores ambientales que influyen en la presentacin de la pubertad

Un nmero de factores ambientales pueden actuar sobre los rebaos para modificar la
presentacin de la pubertad. Adems del fotoperiodo en animales con reproduccin
estacional, el estrs, la bioestimulacin y los planos nutricionales son factores
influyentes y algunos de ellos han sido usados especficamente con ese objetivo.
Lectura Complementaria
KJ Macmillan y J-G Gong (Editores). GnRH in Domestic Animal Reproduction.
Animal Reproduction Science 88 (1-2), 2005 (Simposio).
M Tena-Sempere y H Vaudry (Editores). Kisspeptins. Peptides 30:1-180, 2009
(Simposio).
AE Oakley et al. Kisspeptin signaling in the brain. Endocrine Rev, 30:713-743, 2009
(Revisin).
J Roa, VM Navarro, M Tena-Sempere. Kisspeptins in Reproductive Biology:
Consensus knowledge and recent developments. Biol Reprod, 2011 (en prensa;
Revisin).
L Pinilla, E Aguilar, C Dieguez, RP Millar, M Tena-Sempere. Kisspeptins and
Reproduction: Physiological Roles and Regulatory Mechanisms. Physiol Rev, 92
(3):1235-1316, 2012 (Revisin).