Guia de Bioquimica y Nutricion 2015-II

1
Gua de Prcticas
Bioqumica y Nutricin
Lima - Per
2015-II
FACULTAD DE MEDICINA
GUIA DE BIOQUIMICA Y NUTRICION
UNIVERSIDAD RICARDO PALMA

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
Dr. Elio Ivn Rodrguez Chvez

Rector
Dr. Manuel Huamn Guerrero

Decano de la Facultad de Medicina Humana
Autores:
Dra. Nancy Jo Vargas
(Coordinadora de Curso)
Q.F. Cecilia Rojas Guerrero
(Coordinadora de Laboratorio)
2015-II
Universidad Ricardo Palma
Pgina 2
A.- CONTENIDOS DE BIOQUIMICA:

Actividad
Pgina
Interconversin de unidades y manejo de concentraciones de
08
disoluciones.
Buffer:
Capacidad buffer en trminos de pKa.
10
Espectrofotometra Uso de la luz visible y UV en Medicina.
13
Actividad enzimtica: Efecto de factores en la transformacin del
19
sustrato.
Accin de la amilasa en la digestin del almidn.
22
Sobrecarga oral de glucosa y DM (TTG).
25
Determinacin e interpretacin del HCO3- en la cidosis
27
diabtica.
Aislamiento e identificacin de lipoprotenas plasmticas y su
31
asociacin con el riesgo coronario.

Ictericia: Metabolismo de la bilirrubina y pigmentos biliares.
Transaminacin. Uso de la cromatografa.
35
38
B.- CONTENIDOS DE NUTRICIN HUMANA

Actividad
Pgina
Valoracin Nutricional: Balance Nitrogenado
44
Evaluacin de la Masa Proteica Visceral y Esqueltica: MarasmoKwashiorkor.
48
Medidas Antropomtricas y signos clnicos que evidencian
52
desnutricin. Manejo de la Tabla de composicin de alimentos.
Pgina 3
Reglamento Interno del Laboratorio

1. La asistencia a las prcticas de laboratorio son de caracter obligatorio e
injustificada
2. Las justificaciones por enfermedad se realizarn dentro de las 48 horas y con la
presentacin del certificado mdico del servicio mdico de la URP
3. Se aplicar una tolerancia mxima de 5 minutos para el ingreso del alumno y lo
realizar portando un mandil como vestimenta de proteccin y la guia de prcticas
respectiva.
4. Los alumnos rendirn una prueba cognoscitiva de entrada conforme a la tabla de
evaluacin diseada, debiendo para ello haber ledo la prctica correspondiente
5. En cada practica, los alumnos presentarn, un informe grupal, absolviendo el
cuestionario de la practica realizada durante la prctica.
6. A cada alumno se le asignar una mesa de trabajo, los cambios de grupos o
subgrupos no estn permitidos.
7. El alumno tomar conocimiento del profesor en cuanto al buen manejo del material
y equipo de laboratrio y ser responsable de su integridad y funcionamiento.
8. Si algn alumno rompe material de vidrio, deber reponerlo, de lo contrario no
podr rendir el prximo examen.
9. En caso de deterioro de algn equipo de laboratorio toda la mesa ser responsable
del dao causado.
10. Si porta celulares y equipos de sonido (MP3, Ipod, Ipad, etc.) sern apagados,
permaneciendo as durante el transcurso de la prctica.
11. No se permite ingresar con alimentos y/o bebidas al laboratorio y an menos
ingerirlas
12. La duracin de desarrollo de la prctica es de 2 horas y todo permiso para salir del
laboratorio deber ser solicitado a su profesor de prcticas, otorgndosele permiso
slo si fuera absolutamente urgente.
Pgina 4
El trabajo en el Laboratorio requiere la observacin de

una serie de normas de seguridad que eviten posibles
accidentes debido a desconocimiento de lo que se
est haciendo o a una posible negligencia de los
alumnos.
1. Cada grupo de prcticas se responsabilizar de su zona de trabajo y de su material.

2. Es conveniente la utilizacin de mandil, ya que evita posibles proyecciones de sustancias qumicas
o biolgicas lleguen a la piel. Por supuesto adems, evitars posibles deterioros en tus prendas de
vestir.
3. Si tienes el pelo largo, es conveniente que lo lleves recogido.
4. Y no hara falta decir esto; pero por supuesto en el laboratorio est terminantemente prohibido
fumar, ingerir bebidas y/o alimentos
1. Antes de utilizar un compuesto, verifique el nombre con el que figura en el rotulo del compuesto
2. No devolver a los envases de origen, los remanentes de los reactivos (no utilizados)
3. El descarte de los reactivos o productos qumicos utilizados se viertan en la pila del desage para
ser arrastrados con abundante agua.
4. No utilizar la boca para el aspirado de volmenes de reactivos. Utilice pipeteadores automticos o
bombillas de aspiracin
5. Cuando se haga diluciones de cidos, tener la precaucin de agregar cido al agua y no agua al
cido
6. Para evitar contaminacin de reactivos, utilice una pipeta seca y limpia para cada sustancia qumica
7. Utilizar guantes descartables, para manipular material biolgico
8. Los productos inflamables (gases, alcohol, ter, etc) no deben estar cerca de fuentes de calor. Si
hay que calentar tubos con estos productos, se har al bao Mara, nunca directamente a la llama.
Pgina 5
9. Si se vierte sobre ti cualquier cido o producto corrosivo, lvate inmediatamente con mucha agua y
avisa al profesor.
10. Al preparar cualquier disolucin se colocar en un frasco limpio y rotulado convenientemente.
1. Cuidado con los bordes y puntas cortantes de los tubos u objetos de vidrio.
2. El vidrio caliente no se diferencia a simple vista del vidrio fro. Para evitar quemaduras,
dejarlo enfriar antes de tocarlo.
3. Las manos se protegern con guantes o trapos cuando se introduzca un tapn en un tubo
de vidrio.
4. Si tienes que calentar a la llama el contenido de un tubo de ensayo, observa
cuidadosamente estas dos normas:
Ten sumo cuidado y ten en cuenta que la boca del tubo de ensayo no apunte a
ningn compaero. Puede hervir el lquido y salir disparado, por lo que podras
ocasionar un accidente.
Calienta por el lateral del tubo de ensayo, nunca por el fondo; agita suavemente.
5. Utilizar material limpio y seco
Pgina 6
Pgina 7
Por muchos aos los cientficos expresaron las mediciones en unidades mtricas, relacionadas entre s
decimalmente, es decir, mediante potencias de 10. Sin embargo, en 1960, la Conferencia General de Pesas
y Medidas, la autoridad internacional en unidades, propuso un sistema mtrico revisado y actualizado al cual
se denomin Sistema Internacional de Unidades (Abreviado SI, del francs Systme Internationale d
Unites). En la tabla N 1 se muestran las siete unidades SI fundamentales; las dems unidades de medicin
se pueden derivar a partir de estas unidades. Como las unidades mtricas, las unidades SI cambian en
forma decimal por medio de una serie de prefijos, como se muestra en la tabla N 2.
En Bioqumica se suele usar ste sistema el cual significa un amplio dominio en su manejo toda vez que las
concentraciones de los fluidos intra y extracelulares son generalmente en el orden de los submltiplos.
Tabla 1 .- Unidades SI bsicas

CANTIDAD
NOMBRE
FUNDAMENTAL
DE LA UNIDAD
Longitud
SMBOLO
Metro
Masa
Kilogramo
kg
Tiempo
Segundo
Corriente elctrica
Ampere
Kelvin
Mol
mol
Candela
cd
Temperatura
Cantidad de sustancia
Intensidad luminosa
Tabla 2.- Prefijos utilizados con unidades SI

Prefijo
MULTIPLOS
SUBMULTIPLOS
Smbolo
Factor
Equivalente
tera
1012
1 000 000 000 000
giga
10 9
1 000 000 000
mega
106
1 000 000
Kilo
103
1 000
hecto
102
100
deca
Da
10
10
deci
10-1
0,1
centi
10-2
0,01
mili
10-3
0,001
micro
10-6
0,000 001
nano
10-9
0,000 000 001
pico
10-12
0,000 000 000 001
femto
10-15
0,000 000 000 000 001
atto
10-18
0,000 000 000 000 000 001
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INFORME DE LA PRACTICA N 1
Nombre del Alumno:-----------------------------------------------------------------------------------------------------------Grupo: ----------------------------------
Fecha: ---------------------------
1.- Realice los siguientes conversiones:

X cg
= X ug
Xug
= XHg
X pg
= X dg
Xpl
= Xml
X ul
= X pl
XnMol
= XuMol
X dm
= X mm
X Hg
= X dg
2.- Describa la estructura qumica y calcule el Peso molecular de los siguientes compuestos:
a)
Glucosa
b)
Cloruro de sodio
c)
Cloruro de potasio
d)
Cloruro de calcio
e)
Lactato de sodio
f)
Gluconato de calcio
g)
Urea
h)
Manitol
3.- Describa las siguientes expresiones:

a)
Molaridad
b)
Normalidad
c)
Equivalente
d)
m-Eq
e)
Osmolaridad
4.- Calcule la Molaridad de las siguientes soluciones :

a)
500 ml de Cloruro de sodio al 0.9%
b)
1 L de Suero glucosado al 5%
c)
Una ampolla de 20 ml de NaCl al 20%
d)
Una ampolla de 20ml de NaHCO3 al 8.4%
5.- Calcule los mEq de las siguientes soluciones:

a)
Cuantos mEq de Na y cuantos mEq de Cl hay en una ampolla de 20ml de NaCl al 20%
b)
Cuantos mEq de K y cuantos mEq de Cl hay en una ampolla de 20 ml de KCl al 10%
c)
Cuantos mEq de HCO3 y cuantos mEq de Na hay en una ampolla de 20ml de HCO3Na al 10%.
-------------------------------------------
-------------------------------------------------------
Firma del Alumno
Firma del Profesor
--------------
Nota
Pgina 9
La curva de titulacin de un cido dbil como actico representa las variaciones de pH con respecto a diferentes proporciones relativas
entre la sal y el cido de una solucin tampn. Antes de adicionar la base, el pH se debe solamente al cido. Tan pronto como se
agregue algo de base sta reacciona con una cantidad equivalente de sal y agua. Pero el cido dbil , mas su sal disuelta constituye
una solucin tampn, cuyo pH puede calcularse mediante el uso de la ecuacin de Henderson - Hasselbach.
pH = pKa + log
SAL
ACIDO
OBJETIVO
a)
Obtener la curva de valoracin de un cido dbil, HA, CH3COOH O.1N

y una base fuerte NaOH 0.1N
b)
Calcular el pH haciendo uso de un potencimetro y la ecuacin de Henderson Hasselbach
POTENCIOMETRIA
El mtodo ms confiable para medir el pH es mediante el uso de un medidor de pH comnmente denominado potencimetro, que mide
la fuerza electromotriz (f.e.m.) de una celda formada por un electrodo de referencia, la solucin problema y un electrodo de vidrio
sensible a hidrogeniones. El electrodo de referencia puede ser de calomel (mercurio, cloruro mercurioso) sumergido en una solucin
concentrada de cloruro de potasio. El electrodo de medida o de vidrio, esta constituido por un tubo de vidrio grueso con un extremo en
forma de bombilla, el cual es selectivo y sensible al paso de iones hidrgeno. Est conectado a un alambre de platino conectado al
electrodo de Ag, Cl2Ag, sumergido en HCl 0.1M. La fuerza electromotriz generada es leda en un galvanmetro es unidades de pH.
Pgina 10
EXPERIMENTO 1
Medir y mezclar los volmenes de CH3-COOH 0.1N, de NaOH 0.1N y agua indicados en el siguiente cuadro:
Tubo N
CH3-COOH 0.1N
NaOH 0.1N
H2O DEST.
10 ml
0.0 ml
10 ml
10
1.0
10
2.0
10
3.0
10
4.0
10
5.0
10
6.0
10
7.0
10
8.0
10
10
9.0
11
10
10.0
pH
a)
Medir los valores de pH de cada mezcla, utilizando el potencimetro
b)
Calcular los valores de pH de cada mezcla, aplicando la ecuacin de Henderson Hasselbach. pKa=4.76
EXPERIMENTO 2
Medir y mezclar los volmenes de HCl 0.1N, de NaOH 1N y agua indicados en el siguiente cuadro:
Tubo N
a)
HCl 0.1N
NaOH 0.1N
H2O DEST.
10 ml
0.0 ml
10 ml
10
1.0
10
2.0
10
3.0
10
4.0
10
5.0
10
6.0
10
7.0
10
8.0
10
10
9.0
11
10
10.0
pH
EXPERIMENTO 3
Titulacin de la Alanina
Tubo N
a)
Alanina 0.1N
NaOH 0.5M
H2O DEST.
10 ml
0.0 ml
10 ml
10
1.0
10
2.0
10
3.0
10
4.0
10
5.0
10
6.0
10
7.0
10
8.0
10
10
9.0
11
10
10.0
pH
Pgina 11
Nombre del Alumno(s):-----------------------------------------------------------------------------------------------------------Grupo: ----------------------------------
Fecha: ---------------------------
VALORACION DE UN ACIDO DEBIL MONOPROTICO

CH3COOH
VALORACION DE UN ACIDO FUERTE

HCl
pH
pH
ml de NaOH 1N
ml de NaOH
0.1N
CURVA DE TITULACION DE LA ALANINA
ALANINA
pH
ml de NaOH
0.1N
1.
Deduzca la ecuacin de Henderson Hasselbach y calcula los valores del pH de la neutralizacin del CH3COOH con NaOH
2.
En papel milimetrado:
3.
4.
a.
grafique los valores del pH vs ml de NaOH 0.1N utilizados en la titulacin del cido actico y HCl
b.
compare ambas curvas e interprete.
En papel milimetrado:
a.
Grafique la titulacin de la Ala
b.
Calcule el valor del pK1 y pK2
La concentracin del H2CO3 en el plasma sanguneo es aproximadamente 0.00125M

a.
Calcule la concentracin de HCO3 en el plasma, cuando el pH es 7.4
b.
Halle la razn HCO3 / H2CO3 del buffer
-------------------------------------------
Firma del Alumno
-------------------------------------------------------
Firma del Profesor
--------------
Nota
Pgina 12
OBJETIVO:
a)
Preparar soluciones de concentracin creciente de una solucin estndar de Azul de Metileno y leer %T y calcular sus A
D.O.
Ley de Lambert:
Cuando un rayo de luz monocromtica incide sobre un medio absorvente, su intensidad decrece en forma exponencial al espesor del
medio.
Ley de Beer:
Cuando un rayo
de luz monocromtica incide sobre un medio absorvente su intensidad decrece en forma exponencial a la
concentracin.
Ambas leyes se fusionan as:
Ley Lambert Beer
I = I0 . 10-abc
a = absortividad molecular
b = espesor medio
c = concentracin
I = luz emergente
I0= luz incidente
I/I0
= 10-abc
log(I/I0)
= -abc
log I0/I
= abc
log 100%/%T = 2-log%T

2-log%T
Abs
= a.b.c
= a.b.c
si b = k
a.k = K
Abs
= K.c
Pgina 13
La Abs es directamente proporcional a la concentracin . Luego establecemos la siguiente proporcionalidad :
Abs St
Abs x
CSt
Cx
Abs x
= Abs desconocido
Abs St
= Abs standard
Cx
= Concentr. Desconocido
CSt
= Concentr. Standard
Abs x
xCst
Abs St
Cx =
C St
xAbs _ desconocido
Abs St
Cx =
Concetracin st.
x Abs desconocido
Abs st
Concentracin =
Desconocido
FACTOR CALIBRACION:
Cuando previamente se ha determinado la linaridad de Absst=k.c:
Concetracin st.
Abs st
= Factor
Factor x Abs desconocido = Concentracin desconocido

Definiciones:
1.
Absorbancia:
A = log10T = -log 1 = 2-log10 % T
T
2.
Absortividad
Coef. Extin.:
a=
Absorbancia/Unidad de concentracin y
espesor absorbancia especfica
a=A/bc
Concentracin
espesor
3.
Energa Radiante:
I0 = Luz incidente
4.
Transmitancia:
T=
5.
I.(emergente)
I 0(incidente)
% Transmitancia:
%T = 100T
Pgina 14
UV
Regin espectral de 200-380 nm
IR
Regin espectral de 0.7 - 300um
Luz Visible
Regin espectral de 380 780nm
Absortividad molar cm
Coeficiente de extincin molar o molecular
Absortividad de una solucin 1 Mol/L, en 1 cm espesor
cm
La relacin matemtica entre A y concentracin:

A = a.b.c =
log 100
por 100 de T
A= 2 log % T
Los espectrofotmetros reportan sus resultados en absorbancia (luz absorbida por las partculas de la solucin) y transmitancia ( luz
absorbida)
A
1.0
0.5
0.25
0.125
0.06
%T
10
31
56
75
87
100
La absorbancia o Densidad aplicada se expresa en valores semilogartmicos y la trasmitancia en valores alfanumricos.

EXPERIMENTO N 2
La prctica consiste en preparar soluciones de concentracin creciente de una solucin standart y leer sus D.O. y %T.
St 1
St 2
St 3
St 4
St 5
ml. de sol standart
10
ml. Agua destilada
8.5
1.5
N tubo
ml. muestra problema
% Transmitancia
Calcular Absorbancia
Calcular mg %
Mezclar.
Leer el % de Transmitancia a 540, colocando a 0 con agua destilada.
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Nombre del Alumno(s):--------------------------------------------------------------------------------------------------------------Grupo: ----------------------------------
Fecha: ------------------------------
CURVA DE CALIBRACION
1.-Calcule las concentraciones en mg% de las diluciones de los colorantes utilizados.
2.- Grafique en papel milimetrado A(DO) vs Concentracin y en papel semilogartmico %T vs Concentracin e interprete.
%T
Concentracin
Concentracin
3.- Calcular el Factor de Calibracin: Concentracin

A (DO)
4.- Calcular la concentracin de una muestra problema, haciendo uso del F.C. y la curva de calibracin.
---------------------------------------------
--------------------------------------
-----------
Firma del Alumno
Firma del Profesor
Nota
Pgina 16
Las enzimas son protenas que intervienen en las reacciones bioqumicas, acelerando la velocidad de la reaccin hasta su punto de
equilibrio.
ACTIVIDAD ENZIMATICA
Es la capacidad de una enzima de acelerar una reaccin qumica.
Se puede expresar de diversas maneras:
(a) Desaparicin de un sustrato
(S)
(b) Formacin de producto
(P)
(c)
(C)
Modificacin de cofactores
K1
E+S
K3
ES
K2
E+P
K4
c'
e''
Diversos factores modifican la actividad enzimtica:

1.
pH
2.
Concentracin de la enzima
3.
Concentracin del sustrato
4.
Tiempo de incubacin
5.
Temperatura
6.
Inhibidores y activadores.
Para la prctica buscamos el efecto de la pepsina, enzima proteica, sobre la albmina. La mayor actividad enzimtica se demostrar
por desaparicin del sustrato (menor turbidez de la albmina por su transformacin en aminocidos).
EXPERIENCIA NRO. 1
EFECTO DEL pH
Cada enzima tiene un pH ptimo de trabajo. Para demostrar el pH ptimo de la pepsina, trabajaremos con 6 tubos de acuerdo al
siguiente esquema:
TUBO Nro.
PH
Albmina
HCl 1N
: ml
: ml
1.0
1.5
6.0
9.5
11.5
5.0
5.0
5.0
5.0
5.0
2.0
0.5
0.5
2.0
CO3Na2 10% : ml
Agua dest. : ml
Pepsina 1% : ml
1.5
2.0
B
5.0
1.5
5.0
20
Incubar los Tubos del 1 al 6 a 37C x 5
Pgina 17
Aadir rpidamente del tubo N6; 3ml de pepsina a los tubos N 1,2,3,4 y 5. Mezclar, incubar 37 x 5'
Leer D.O en el espectrofotmetro a 420nm de los tubos N1,2,3,4 y 5 y el tubo Blanco(B). Llevando a cero el instrumento con un
blanco de agua destilada.
Restar la lectura del tubo Blanco (B) menos la lectura de cada uno de los 5 tubos. La diferencia ser asumida como actividad
enzimtica.
EXPERIENCIA NRO. 2
EFECTO DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA
Demostrar que la velocidad de la reaccin es directamente proporcional a [E]cuando la concentracin del S es constante. Preparar el
experimento de acuerdo al siguiente esquema:
TUBO Nro.
Albmina
HCl 1N
: ml
: ml
Agua dest. : ml
5.0
5.0
5.0
5.0
5.0
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
4.5
4.0
3.5
2.5
1.5
Pepsina 1% : ml
10.0
Incubar los Tubos a 37C x 5'. Aadir la pepsina del tubo 5 a los tubos 1 al 4 segn el sgte. esquema:
TUBO Nro.1
Pepsina incubada
0.0
0.5
1.0
2.0
3.0
Mezclar, incubar a 37C x 5'.Detener la reaccin colocando los tubos en bao de hielo. Leer las D.O en el espectrofotmetro a 420nm.
Llevando a cero el instrumento con un blanco de agua destilada.
La diferencia de las absorbancias entre el tubo Blanco y la lecturas de los otros tubos nos indicar la actividad enzimticca para cada
tubo.|
EXPERIENCIA NRO. 3
EFECTO DE LA T
El incremento de la temperatura acelera la velocidad de las reacciones qumicas por un aumento en nmero de colisiones efectivas
entre los elementos reaccionantes, sin embargo todo incremento de temperatura por encima de la velocidad mxima de reaccin,
produce una desnaturalizacin progresiva de la enzima.
Para la experiencia, prepararemos 2 series de 5 tubos cada una.
Serie N1
TUBO Nro.(1 serie)
Albmina
HCl 1N
: ml
: ml
Agua dest. : ml
1a
2a
3a
4a
5a
Blanco
5.0
5.0
5.0
5.0
5.0
5.0
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
4.0
1b
2b
3b
4b
5b
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
Serie N2
TUBO Nro.(2 serie)
Pepsina 1% : ml
Incubar por 5los tubos de acuerdo al siguiente esquema de temperaturas:

TUBO Nro.
1a-1b
2a-2b
3a-3b
4a-4b
5a
5b
T.C
0C
Tamb
37
70
37
100
Agregar el contenido de los tubos 1b,2b,3b,4b y 5b a sus respectivos tubos 1a,2a,3a,4a y 5a .
Pgina 18
Luego incubar a las T correspondientes 0C, Tamb, 37C, 70C y 100C a cada tubo por 5 minutos.
Colocar los tubos en bao de agua helada para detener la reaccin. Leer D.O. en el espectrofotmetro a 420nm. Llevando a cero el
instrumento con un blanco de agua destilada.
La actividad enzimtica se encontrar restando la lectura del tubo blanco (B) menos la lectura de los otros 5 tubos.
EXPERIENCIA NRO. 4
EFECTOS DE LA CONCENTRACION DEL SUSTRATO
Si aumentamos progresivamente la concentracin del sustrato, aumentaremos la velocidad enzimtica (velocidad inicial) hasta un
punto en que la velocidad llega a una meseta y no se modificar aunque sigamos aumentando el sustrato (saturacin).
Preparar 8 tubos de acuerdo al siguiente esquema:
TUBO Nro.
Albmina
HCl 1N
: ml
: ml
Agua dest. : ml
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
8.0
7.0
6.0
5.0
4.0
3.0
2.0
Pepsina 1% : ml
5.0
Mezclar. Leer los tubos 1,2,3,4,5,6,7. Considerar las absorbancias como lectura inicial.
Luego incubar los 8 tubos a 37 x 5'.
Aadir 0.5ml de pepsina a cada tubo (del tubo 8 a los tubos 1,2,3,4,5,6 y7) Mezclar.
Incubar 5' a 37C.
Detener la reaccin en un bao de hielo.
Leer D.O en el espectrofotmetro a 420 nm. Considerar las absorbancias como lectura final.
Hacer la diferencia:
Actividad Enzimtica = Lectura Inicial Lectura Final
El resultado de sta diferencia se considerar como actividad Enzimtica.
Pgina 19
Nombre del Alumno(s):--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------Grupo: --------------------------------1.
Fecha: ------------------------------------
Usando los valores de la actividad enzimtica(D.O) obtenidos, Grafique:
EFECTO DEL pH
EFECTO DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA
Act. Enz.
Act. Enz.
pH
[E]
Interpretacin:___________________________________
Interpretacin:___________________________________
________________________________________________
________________________________________________
________________________________________________
________________________________________________
__
______________________________________
EFECTO DE LA T
EFECTO DE LA CONCENTRACION DEL SUSTRATO
Act. Enz.
Act. Enz.
[S]
Interpretacin:___________________________________
Interpretacin:___________________________________
________________________________________________
________________________________________________
________________________________________________
________________________________________________
__
Pgina 20
2.
GUIA DE BIOQUIMICA Y NUTRICIN
Determine los valores del Km y Vmax de una inhibicin competitiva y no competitiva de una enzima que mostr los siguientes datos
experimentales:
S
V1, sin inhibidor
V2, con inhibidor
(mM)
(mmol.min-1)
(mmol.min-1)
3,0
4,58
3,66
5,0
6,4
5,12
7,0
7,72
6,18
9,0
8,72
6,98
11,0
9,5
7,60
Grafique la curva de
---------------------------------------------
--------------------------------------
-----------
Firma del Alumno
Firma del Profesor
Nota
Pgina 21
INTRODUCCION
El almidn es un polmero de glucosa y se caracteriza por dar un color azul con una solucin de yodo. Est constituido por amilosa (1520%) y amilopeptina (80-85%) ambos constituyentes son hidrolizadas por la alfa-amilasa salival y pancretica produciendo maltotriosa, maltosa y
dextrinas. La presencia de azcares reductores se identifican por la formacin de Cu2O en presencia del reactivo de Benedict.
OBJETIVO
a)
Determinar la accin de la amilasa sobre el almidn.
b)
Determinar sustratos y productos producidos por accin de la amilasa salival.
c)
Efecto del pH sobre la amilasa salival.
HIDRLISIS DEL ALMIDON (DIGESTION)

Haciendo uso de cuatro tubos, seguir el siguiente esquema:
TUBO N
ALMIDON 1%; ml
2.0
2.0
2.0
2.0
BUFFER FOSFATO pH 6.8:ml
1.0
1.0
1.0
HCL O,3N : ml
3.4
CL Na 0,9%: ml
3.0
2.4
2.4
0.6
0.6
0.6
Agua dest.:ml
Bao Mara 37 x 5
Amilasa Salival: ml
Mezclar, Incubar en Bao Mara 37C x 20

A.
DETERMINACION EL SUSTRATO
TUBOS N
DIGERIDO DEL TUBO 1: ml
0.5
0.5
0.5
0.5
H CL 0.05N : ml
Sol. de Lugol: ml
0.5
0.5
0.5
0.5
Dejar en reposo por 15 minutos. Leer al fotocolormetro con filtro rojo (660nm)
B.
DETERMINACION DEL PRODUCTO

TUBOS
10
11
12
13
0.5
0.5
0.5
0.5
SOLUCION DE GLUCOSA 1%: ml
0.5
SOLUCION BENEDICT : ml
Mezclar, Incubar en Bao Mara a 100C x 5

Enfriar en agua helada e interpretar.
Pgina 22
REACCION DE BENEDICT:
TUBOS
ml Reactivo de Benedict
Gotas Glucosa 0.1 M
Gotas Fructosa 0.1 M
Gotas Maltosa 0.1 M
Gotas Sacarosa 0.1 M
Mezclar, Incubar en Bao Mara a 100C x 5

Enfriar en agua helada e interpretar.
Pgina 23
Nombre del Alumno(s):-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------Grupo: --------------------------
Fecha: ----------------------------
1.- Determinacin del sustrato:

Tubo N 1 Color...........................................................................Interprete el resultado...........
Tubo N 2 Color.......................................................................... Interprete el resultado...........
Tubo N 3 Color .......................................................................... Interprete el resultado...........
Tubo N 4 Color......................................................................... Interprete el resultado.............
Reste las DO de los tubos de aquel que tuvo la DO ms alta y grafique:
a) Actividad0.500
b) Interpretacin de la curva
Enzimtica
0.400
0. 300
0.200
0. 100
8 Tubo
2.- Determinacin del producto:

a) Tubo N 1 Color........................................................................ Interprete el resultado...........
Tubo N 2 Color......................................................................... Interprete el resultado...........
Tubo N 3 Color......................................................................... Interprete el resultado...........
Tubo N 4 Color.......................................................................... Interprete el resultado...........
b)
Identifique cul es la condicin para una mejor hidrlisis enzimtica del almidn soluble.
3.- Interprete la reaccin de los carbohidratos frente al reactivo de Benedcit

Carbohidrato
Glucosa
Fructosa
Maltosa
Sacarosa
Reaccin ( + - )
-----------------------------------
-------------------------------------
---------------
Firma del Alumno
Firma del Profesor
Nota
Pgina 24
La prueba de tolerancia a la glucosa (TTG) es empleada para evaluar pacientes en quienes se sospechan anormalidades del metabolismo de los
carbohidratos. Esto es particularmente til para la diabetes mellitus. La prueba de tolerancia a la glucosa por va oral es ms funcional , ms
confiable y ms fcil de llevar a cabo que la prueba de tolerancia a la glucosa por va intravenosa. La secrecin de insulina como respuesta a la
administracin de glucosa es mayor debido a la estimulacin de la secrecin de hormonas entricas, las cuales a su vez estimulan la secrecin
de insulina.
OBJETIVO:
1
Determinar la concentracin de glucosa srica basal ( 0' ) y a los 30', 60', 90' y 120' despus de una sobrecarga oral de glucosa ( 75 g ).
Determinar el umbral renal de reabsorcin de glucosa
Presencia de Cuerpos Cetnicos
DETERMINACION DE GLUCOSA SERICA:

La glucosa oxidasa cataliza la oxidacin de la glucosa de acuerdo con la siguiente ecuacin:
El perxido de hidrgeno formado reacciona con 4 amino-antipirina y fenol en presencia de peroxidasa, formando una quinonaimina coloreada, la
cual es directamente proporcional a la concentracin de glucosa en sangre.
EXPERIMENTO 1
Determinar la concentracin de glucosa srica siguiendo el siguiente esquema:
N Tubo
ST. Glucosa: 200 mg | dl: (ul)
10
Suero : 0' (ul)
10
30' (ul)
10
60' (ul)
10
90' (ul)
10
120' (ul)
10
Reactivo de glucosa: ml
1.
Mezclar. Incubar 37 C x 10' o 20 minutos a T ambiente
2.
Leer D.O. en el espectrofotmetro a 505 nm, frente al Bl
Pgina 25
CALCULO.-
Haciendo uso del factor de calibracin expresar la glucosa en mg/dl
VN
70 - 110 mg/dl
EXPERIMENTO 2
Para determinar la presencia de glucosa en orina, seguir el siguiente esquema:
Tubo N
Orina ml
0.5
React. Benedict. ml
2.0
1.
Mezclar. Colocar a 100 C x 5'.
2.
Enfriar ( hielo). Observar la formacin de precipitado.
Pgina 26
INFORME PRACTICA N 6
Nombre del Alumno(s):-----------------------------------------------------------------------------------------------------------Grupo: ------------------------------------------------------------------
Fecha: ---------------
1.- Calcule y grafique la concentracin de glucosa (mg/100ml) en condiciones basales y 30`, 60`, 90`, 120`del TTG del sujeto normal y con DM.
2.- Compare las curvas obtenidas e interprtelas.
CURVA DEL T.T.G.
Glucosa
mg | dl
Tiempo : minutos
3.-Explique la formacin de Cu2O en la orina del sujeto con DM.
---------------------------------------------------------
-------------------------------------
--------
Firma del Alumno
Firma del Profesor
Nota
Pgina 27
El sujeto diabtico se caracteriza por presentar alteracin del metabolismo de los carbohidratos, protenas y de los lpidos. La liplisis produce
una elevacin de los cidos grasos libres y consecuentemente el incremento de cuerpos cetnicos. La cetonemia ocasiona una disminucin
del pH sanguneo lo cual ocasiona una disminucin de la concentracin del HCO3- sanguneo. ( Acidosis diabtica)
DETERMINACIN DEL BICARBONATO
FUNDAMENTO:
El CO3H srico o plasmtico es neutralizado con HCl desprende CO2. El cido que no reacciona se determina a travs de una titulacin con
NaOH, obtenindose por diferencia la concentracin de HCO3PROCEDIMIENTO
Se usa suero o plasma obtenido en anaerobiosis , empleando aceite mineral en el momento de su obtencin.
I.
NEUTRALIZACION DEL BICARBONATO

Colocar en un beacker o matraz los siguientes componentes:
II.
a)
5 ml de HCl 0.01N
b)
1 ml de suero plasma
c)
1 gota de alcohol caprlico.
d)
Agitar suavemente por rotacin por 2
e)
Incubar 15 a 37C
f)
Aadir 20 ml agua destilada hervida y fra.
g)
Aadir 3 gotas del colorante fenosulfonthaleina (PSP).
TITULACION
Usando una bureta, agregar solucin de NaOH 0.01 N hasta que el color del colorante cambie de color amarillo (ph 6.8) al rosado (ph
8.2)
III.
EXPRESION
Calcular los m Eq/L del sujeto normal y compararla con un sujeto diabtico descompensado
VN= 26-32 m Eq/L
IV.
CETONURIA
FUNDAMENTO
La presencia de cuerpos cetnicos se determina por el test de Rothera, frente al reactivo de nitroprusiato de Na forma un anillo
prpura rojizo.
PROCEDIMIENTO
En un tubo de prueba colocar
a)
1 ml orina
b)
1 gr de SO4(NH4)2
c)
3 gotas de nitroprusiato de Na al 10%
d)
Mezclar
e)
1 ml de NH4 (OH) en zona

Observar:
Aparicin de un anillo prpura o morado = (+)
Pgina 28
Pgina 29
INFORME DE PRACTICA N. 7
Nombre del alumno(s) ......................................................................................

Grupo ..............................................
DETERMINACIN DE BICARBONATO
1.
Calcule los mEq/L de HCO-3 del sujeto normal
2.
Calcule los mEq/L de HCO-3 del sujeto D.M.
3.
Compare e interprete los resultados.
DETERMINACION DE CETONURIA
COMENTARIO
1.
Explique la disminucin del bicarbonato en el sujeto diabtico
2.
Interprete, la formacin del anillo rojo-violceo (test de rothera) en la orina del sujeto diabtico.
---------------------------------------------------------
Firma del Alumno
-------------------------------------
-----------
Firma del Profesor
Nota
Pgina 30
La enfermedad cardiaca coronaria ( E.C.C.) sigue siendo la principal causa de morbilidad prematura. Un factor de riesgo importante es el
incremento del colesterol plasmtico. Sin embrago el colesterol por si mismo no es un elemento de prediccin en el paciente individual. Otros
parmetros lipdicos como el HDL y triglicrido tambin son necesarios para cuantificar el riesgo de ECC con mayor precisin.
Aplicando la formula de Friedewald podemos calcular las otras lipoprotenas sricas VLDL y LDL que completan la informacin de prediccin de
alteracin vascular.
OBJETIVO
a)
Determinar la concentracin de colesterol total, triglicrido, HDL, LDL y VLDL.
b)
Determinar el RC a travs del perfil lipdico ( segn Castelli )
DETERMINACION DE COLESTEROL TOTAL

Fundamento
El colesterol se determina por accin de la enzima colesterol ster hidrolasa y colesterol oxidasa. La primera libera el colesterol de los esteres de
colesterol, y la segunda oxida el colesterol libre producindose perxido de hidrogeno, el cual en presencia de la enzima peroxidasa reacciona
con el sistema cromognico dando origen a un compuesto coloreado que absorbe 505nm.
Colesterol ester
CEH
Colesterol
Colesterol
CHOD
Colest-4-en-3-ona + H2O2
PAP
Comp. Coloreado + 4H2O
2H2O2
+ O2
+ 4-AAP + p-HBA
+ cidos grasos
Tubo N
Blanco
Standard
Muestra 1
Muestra 2
St-Colesterol: 200 mg/dl
30 ul
Suero Pb
30 ul
30 ul
Reactivo Color
3.0 ml
3.0 ml
3.0 ml
3.0 ml
Mezclar. Incubar 10 minutos a 37C o 20 minutos a Tambiente

Leer en espectrofotmetro el St y Pb frente al BL a 505 nm.
Expresin
Haciendo uso del factor de Calibracin, expresar el colesterol en mg/dl :
VN = 160 - 200 mg / dl
Pgina 31
DETERMINACION DE TRIGLICERIDOS
Fundamento
Los triglicridos presentes en la muestra, segn las reacciones acopladas descritas a continuacin, son un complejo coloreado que se cuantifica
por espectrofotometra.
Triglicridos + H20
Glicerol + ATP
lipasa
Glicerol + cidos grasos
Glicerol-Kinasa
Glicerol-3-P + ADP
Glicerol 3 fosfato + O2
GPO
Dihidroxiacetona fosfato + H2O2
2H2O2 + 4-aminoantipirina + 4-clorofenol
Peroxidasa
Quinonaimina
Esquema
Tubo N
Blanco
Standard
Muestra 1
Muestra 2
St-Triglicrido: 200 mg| dl
30 ul
Suero -Pb
30 ul
30 ul
Reactivo Color
3.0 ml
3.0 ml
3.0 ml
3.0 ml
Agitar. Incubar 10 minutos a 37C o 20 minutos a T ambiente

Leer en espectrofotmetro el St y Pb frente al BL a 520 nm.
Expresin
Haciendo uso del factor de Calibracin, expresar los triglicridos en mg/dl :
VN = 60 - 200 mg / dl
DETERMINACION DE COLESTEROL - HDL
Fundamento del Mtodo
El HDL - Colesterol es obtenido precipitando selectivamente las lipopotrenas LDL y VLDL, quedando el primero en solucin.
El HDL - Colesterol en solucin se determina por accin de las enzimas Colesterol ester hidrolasa y Colesterol oxidasa. La primera libera el
colesterol de los steres de colesterol, y la segunda oxida el colesterol libre, producindose perxido de hidrgeno, el cual en presencia de la
enzima peroxidasa reacciona con el sistema cromognico dando origen a un compuesto coloreado que absorbe a 505 nm.
Colesterol ester
CEH
Colesterol +O2
CHOD
2H2O2 + 4-AAP + p-HBA
PAP
Colesterol + cidos grasos

Colest-4-en-3-ona + H202
Comp. Coloreado + 4H2O
Pgina 32
Tcnica
Precipitacin: Agregar en un tubo de centrfuga 0.5 ml de reactivo precipitante y 0.2 ml de muestra, mezclar y esperar 15 minutos a temperatura
ambiente. Centrifugar 15 minutos a 3000 r.p.m. o 3 minutos a 10.000 r.p.m
Colorimetra.LLevar el reactivo colesterol CHOD- PAP a la temperatura que se realizara el ensayo.
Blanco
Standard
Muestra 1
Muestra 2
Sobrenadante (ml)
Tubo N
0.30
0.30
Standard (ml)
0.03
Reactivo (ml)
3.00
3.00
3.00
3.00
Mezclar e incubar 10 minutos a 37 o 20 minutos a temperatura ambiente (20 a 25 C). Leer las absorbancias a 505 nm. llevando a cero el
espectrofotmetro con el blanco del reactivo. El color resultante es estable por lo menos 30 minutos.
Clculos.HDL-Colesterol : (mg%)=F.D. x D.O. Pb
FD =76.5/D.O standard
Ecuacin de Friedewald:
LDL-C (mg/dl)=C.Tot.(mg/dl)-HDL(mg/dl)-VLDL. (mg/dl)

VLDL (mg/dl) = TG
5
Esta frmula es vlida cuando los Tg son menores de 400 mg/dl.
Observaciones
-
Despus de centrifugar, el sobrenadante debe ser claro.
Sueros con concentraciones de triglicridos superior a 1000 (mg/dl) deben diluirse con suero fisiolgico antes de precipitar. El
resultado obtenido se multiplica por el factor de dilucin.
Interpretacin del Perfil Lipdico Mnimo

LIPIDO
DESEABLE
RIESGO POTENCIAL
ALTO RIESGO
CT
< 200
200-239
>= 240
LDL
< 130
130-159
>= 160
HDL : Hom :
> 35
25-35
< 25
Muj :
> 45
40-45
< 40
< 200
> 200
> 200 (*)
(mg/dl)
TG
(*) Si se acompaa de HDL < 35 mg/dl o relacin CT/HDL >5
Pgina 33
Nombre del Alumno(s)-------------------------------------------------------------------------------------------------------------Grupo: -----------------------------------------------------------------------
1.
Calcular , en el sujeto normal y patolgico , la concentracin en mg/ dl del :
CT
TG
HDL
LDL
VLDL
2.
3.
Fecha: ---------------
Calcular el R. C.:
CT/HDL
LDL/HDL
Describa el perfil electrofortico de las lipoprotenas plasmticas:
Origen
( - )
---------------------------------------
Firma del Alumno
( + )
----------------------------------------------------------
Firma del Profesor
--------------
Nota
Pgina 34
Las alteraciones del Metabolismo de la bilirrubina pueden evaluarse haciendo su dosaje en suero o plasma sanguneo en forma fraccionada.
Dichas alteraciones se deben a:
1. - Aumento de la produccin del pigmento (hemlisis: incremento de la destruccin de los hemates circulantes)
2. - Disminucin de la captacin heptica de la bilirrubina (medicamentosa, sndrome de Gilbert, dficit de glucoronil transferasa).
3. -Alteracin de la conjugacin heptica, disminucin de la actividad de la glucoronil transferasa ictericia neonatal (ictericia fisiolgica del recin
nacido).
4. - Excrecin deficiente (obstruccin intraheptica o extraheptica clculos).
Por ltimo permite el estudio de las enfermedades hepatocelulares: hepatitis o cirrosis, enfermedades en las cuales suelen estar interferidas
todos los pasos del metabolismo de la bilirrubina (captacin conjugada y excrecin).
OBJETIVO:
a)
Determinar la concentracin de Bilirrubina Total, Directa e Indirecta
b)
Determinar Urobilingeno y Urobilinas
Mtodo de Malloy y Evelyn

Fundamento:
La bilirrubina reacciona especficamente con el cido sulfanlico diazotado produciendo un pigmento color rojo violceo (azobilirrubina) que se
mide fotocolorimtricamente a 530 nm.
Si bien la bilirrubina conjugada (directa) reacciona directamente con el diazorreactivo, la bilirrubina no conjugada (indirecta) requiere la presencia
de un desarrollador acuoso que posibilite su reaccin. De forma tal que, para que reaccione la bilirrubina total (conjugada y no conjugada)
presente en la muestra, debe agregarse benzoato de cafena al medio de reaccin.
VALORES NORMALES:
BT = 0.3 1.1 mg/dl
BD (Conjugada) = 0.1 0.4 mg/dl
BI = 0.2 0.7 mg/dl
PROCEDIMIENTO:
Preparar St. 2mg% .D.O. st =0.09
Blanco
Directa
Total
Muestra
200 ul
200 ul
200 ul
Agua Destilada
2.4 ml
2.4 ml
Desarrollador
2.4 ml
Reactivo sulfanlico
200 ul
Diazorreactivo
200 ul
200 ul
Mezclar por inversin suave e Incubar por 5 minutos a T ambiente. Leer las absorbancias a 530nm, llevando a cero el instrumento con un
blanco de agua destilada. La bilirrubina directa debe leerse exactamente a los 2 minutos.
CALCULOS:
FC =
Conc. St
Abs St.
BT = FC x (Abs Total Abs Blanco) = mg/dl

BD = FC x (Abs Directa Abs Blanco) = mg/dl
BI = BT BD = mg/dl
Pgina 35
Determinacin de Urobilingeno y Urobilinas:
REACCION DE EHRLICH
En un
Si hay
tubo de prueba
urobilingeno en
se colocan 5 ml
cantidad anormales,
de orina.
a los 3
Se aade 0.5 ml de reactivo de Ehrlich.

minutos se presenta un color rojo cereza.
REACCION DE GMELIN
En
un
tubo
de
llegar
al
fondo
dos capas.
prueba
se
coloca
2
2
ml
de
acido
ml
de
ntrico
orina
nitroso,
con
una
procurando
pipeta
se
que
se
hace
forme
En
la
lneas
de
unin
aparecen
una
serie
de
colores,
comenzando
con
verde
que luego puede cambiar a azul, violeta, anaranjado, si existe bilirrubina en la orina. En la orina normal solo aparecen bandas
de color anaranjado o bruno, debido a la oxidacin del urocromo.
Pgina 36
Nombre del Alumno(s): -------------------------------------------------------------------------------------------------------------Grupo: -----------------------------------------------------------------------
Fecha: ---------------
1.
Calcule los mg/dl de Bilirrubina Total, Bilirrubina Directa y Bilirrubina Indirecta en cada sujeto estudiado
2.
Explique bioqumicamente, la reaccin de conjugacin de la bilirrubina directa
3.
Indique cuales son los pigmentos biliares
---------------------------------------
Firma del Alumno
----------------------------------------------------------
Firma del Profesor
--------------
Nota
Pgina 37
La reaccin de transaminacin consiste en la transferencia de un grupo amino de un aminocido a un cetocido con la consiguiente formacin de
nuevos aminocidos y cetocidos. El objetivo es entender como el organismo a travs de este proceso los carbohidratos se transforman en
aminocidos o como los aminocidos se interconvierten.
Las enzimas que catalizan estas reacciones se llaman transaminasas, que tienen como coenzima al fosfato de piridoxal (B 6). La glutmico
pirvico y oxalactico son de importancia en el diagnstico de enfermedades hepticas y cardiacas toda vez que se produce aumento en el
torrente circulatorio tras la muerte celular del rgano.
COOH
COOH
CH2
CH2
CH2
CH2
HC-NH2
Ac. Glutmico
C=O
COOH
COOH Ac. Cetoglutarato
PO4B6
COOH
|
GLUTAMICO
OXALACETICA
TRANSAMINASA
1)
CH2
CH2
C=O
Ac. Oxalactico
COOH
HC-NH2
COOH
COOH
Ac. Asprtico
REACCION DE TRANSAMINACION
Para demostrar la reaccin de la transaminacin, se extraer la enzima de homogenizado de hgado de pollo y se aplicar a el siguiente
esquema :
Tubo N 1
0.2 M (ml)
0.3
0.3
GLUTAMATO
0.2 M (ml)
0.3
0.3
ARSENITO
0.2 M
0.4
0.4
ENZIMA ACTIVA
0.2 M (ml)
ENZIMA INACTIVA
0.2 M
PIRUVATO
(ml)
(ml)
Incubar a 37 x 45min . Agregar 6 ml. alcohol etlico en cada tubo centrifugar y usar los sobrenadantes para la cromatografa.
Demostrar si hubo transaminacin, utilizando el proceso de cromatografa ascendente.
Pgina 38
2)
EVIDENCIA DE LA TRANSAMINACION POR CROMATOGRAFIA:
Cromatografa ascendente en placas con Silicagel:

Por cromatografa en capa fina se entiende la tcnica capaz de separar los componentes de una muestra entre dos fases, una mvil, que suele
ser lquida y otra estacionaria, que puede ser lquida o slida, y que est dispuesta como una capa de material poroso de un espesor
determinado, colocada sobre un soporte plano inerte, de vidrio o de aluminio. Dos principios fisico-qumicos participan en esta separacin:
particin por solvente y adsorcin.
Los aminocidos Alanina, Ac. Asprtico, y Ac. Glutmico, se van a separar en funcin de sus diferentes solubilidades entre la fase mvil lquida,
constituida por propanol:agua (80/20), y la fase estacionaria, tambin lquida al estar constituida por el agua adsorbida por el material slido de la
capa fina, en este caso celulosa.
Por tanto, el fundamento de la separacin implica que los aminocidos cuya cadena lateral (R) tenga un carcter ms apolar, tendrn tendencia
a desplazarse con la fase mvil, mientras que los aminocidos que sean polares, ya sean con carga o sin carga, sern retenidos por la fase
estacionaria. Ello es as, porque la fase mvil est formada por solventes que son ms apolares que el agua, que es el solvente de la fase
estacionaria.
2. Cmo realizar una cromatografa en capa fina?

Primera etapa: Aplicacin de las muestras a analizar.
La primera precaucin que hay que tener en el manejo de la placa
Se coloca la placa encima de la mesa, y con un lpiz se traza una
es la de procurar no tocar con los dedos la capa de celulosa. La
lnea muy dbil a unos 1,5 cm del borde inferior de la placa,
placa fina se coge siempre por los bordes de la misma.
procurando daar lo mnimo posible la capa de celulosa.
Pgina 39
En la lnea se sealan dbilmente cuatro puntos, distribuidos equitativamente a lo ancho de la placa.

En cada punto de ellos se aplica cada uno de los muestras: patrn o standares y las muestras problemas con probable transaminacin. La
aplicacin se realiza mediante capilares.
La segunda precaucin a considerar es la de no contaminar las disoluciones de los aminocidos patrn y la muestra problema. Para ello, se
utiliza un capilar para cada uno de las soluciones a aplicar. El capilar se introduce en el tubo de muestra y por capilaridad va a ascender la
muestra a aplicar.
Se aplica en la placa una gota de la muestra, procurando que se extienda lo menos posible y no dae la capa. Se seca a continuacin con el
secador de aire. Se aplica una segunda gota y se vuelve a secar. Esta operacin se repite para cada unas de las tres muestras restantes.
Segunda etapa: Elucin de las muestras.

La cromatografa se realiza en la cubeta o cmara de desarrollo. La cubeta contiene un volumen de fase mvil, cuya altura de lquido debe de
estar siempre por debajo de la lnea de aplicacin de las muestras.
La tcnica de elucin que se va a utilizar para la realizacin de la cromatografa es la ascendente, puesto que la fase mvil asciende por
capilaridad por los poros e intersticios de la celulosa.
La placa que contiene las muestras se introduce en la cubeta. Se coloca la tapa de la cubeta y se espera que la fase mvil ascienda por la capa
hasta que alcance una altura de hasta unos 2-3 cm del extremo opuesto a la parte sumergida. Una vez realizada la elucin, se abre la tapa de la
cubeta y se saca la placa.
Pgina 40
Tercera etapa: Secado y visualizacin de los aminocidos.
Inmediatamente que se ha sacado la placa, con el lpiz se marca en un borde el nivel alcanzado por el solvente y que constituye el frente
de solvente (FS). Se introduce en la estufa durante unos 5 min para que se seque. A continuacin, con ayuda de un pulverizador y una
solucin de ninhidrina al 0.1% en butanol visualizar los aminocidos estandart y de la muestra problema.
Calculo de los valores del Rf.
Rf = distancia (cm) recorridos por la sustancia

distancia (cm) recorridos por el solvente (FS)
Pgina 41
Nombre del Alumno(s): -------------------------------------------------------------------------------------------------------------Grupo: -----------------------------------------------------------------------
Fecha: ---------------
PROCESO DE TRANSAMINACIN:
1.- Indique, la reaccin de transaminacin producida en la prctica realizada

2.- Medidas de los Rf, identificacin de aminocidos en las cromatolminas obtenidas e interpretacin de los resultados
3.- Qu relacin existe entre las transaminasas y las enfermedades hepticas?
4.- Como se encuentran las transaminasas en el infarto agudo de miocardio?
Discusin y/o comentarios
---------------------------------------
Firma del Alumno
----------------------------------------------------------
Firma del Profesor
--------------
Nota
Pgina 42
Pgina 43
El objeto de la presente prctica es evaluar el metabolismo proteico empleando el Balance Nitrogenado. Explicaremos los
parmetros mas representativos de la excreta nitrogenada en general.
Se evala los egresos de N mediante el nitrgeno ureico urinario en 24 horas y la excrecin de nitrgeno protenico urinario en
24 horas empleando la formula de nitrgeno total estimado (NTE).
FORMULA:
BN
N INGERIDO ( NTE + 2 )
NTE = g. N. UREICO +
Urinario 24 hs.
2
=
N. Ingerido =
Nota
g. N.CREATININICO
Urinario 24 hs.
Excrecin fecal (g / 24 hrs.)

g. de protenas
6.25
Si el paciente presenta Albuminuria,

aadir a la excreta : Protena urinaria
6.25
PROCEDIMIENTO:
DETERMINACIN DE CREATININA URINARIA.FUNDAMENTO:
La creatinina en presencia del cido pcrico en medio alcalino forma un complejo de color amarillo anaranjado cuya intensidad
de color es proporcional a la concentracin de creatinina.
(R. JAFFE).
N TUBO
BL
ST
ORINA 1/10 ml
AGUA
ml
0.8
St. 1.5 mg/dl ml

R. Pcrico
ml
Buffer Alcalino ml
0.2
Muestra 1
Muestra 2
0.04
0.04
0.8
0.8
0.2
1.6
0.8
1.6
1.6
0.4
0.2
0.4
0.4
Incubar a T ambiente por 20 min.y leer las Absorbancias a 505 nm.
Pgina 44
Calculo:
Cr.Orina (mg/dl)=Abs. Muestra
Abs. standard
x 150
Cr.Urinaria 24 hs = Cr.Orina (mg/dl) x Vol 24h(L) x 10
N Creatinnico en 24 hs.= Cr.Urinaria 24hs x 0.37

VN = 0.8 a 1.5 g. en 24hs
DETERMINACION DE UREA URINARIA.FUNDAMENTO:
La urea presente en la muestra, es desdoblada a amonio por accin de la enzima ureasa, segn la proposicin de Faucett y
Scott.
(NH2)2CO +
2H2O
UREASA
2NH3 + CO2 + H2O
El amonio producido reacciona con salicilato e hipoclorito en medio alcalino, formndose un complejo de color verde; la
intensidad del color producido es directamente proporcional a la cantidad de urea presente en la muestra y su absorvancia se
lee a 600nm (580 - 620).
TCNICA:
Preparacin Reactivo de trabajo.Mezclar 1 ml. de Reactivo Salicilato + 1 gota (50uL) de Suspensin Ureasa. Preparar el volumen de reactivo necesario
manteniendo la proporcin (p.e. 30 ml. Reactivo Salicitato + 30 gotas (1.5 ml.) de Suspencin Ureasa). Mantener protegido de
la luz.
El Reactivo de trabajo es estable por 30 das entre 2 y 8 C y protegido de la luz. Mantener en frasco color ambar.
Tcnica: Nitrgeno Ureico en orina.

N TUBO
Orina:1/100
St:66mg/dl
Blanco
Standard
(ml)
(ml)
Reactivo de trabajo
(ml)
Muestra 2
0.02
0.02
2.0
2.0
0.02
2.0
2.0
3' a 37C o 5 a T ambiente
Mezclar incubar
Reactivo de Hipoclorito
Muestra 1
(ml)
Mezclar incubar
2.0
2.0
2.0
2.0
5' a 37C o 10 a T ambiente
Leer las Absorvancia a 600 n.m.

Expresin: mg urea/24 hs.
Pgina 45
Clculo:
a) Factor
66
D.O. St
b) Urea Ur/24h= Factor x D.O. Pb x 100x Vol.24 hs(ml)

100
c) Nitrgeno Urico 24hs.= Urea Ur/24hs x 0.455

RANGO DE REFERENCIA
UREA
N. URICO
: 15 a 30g /24hs.
: 7 a 14g /24hs.
BN = Ingesta Nitrogenada -
[N urico + N creatinnico + 2]
BN = g N / 24hs
VARIACIONES EN ALGUNOS CONSTITUYENTES

NITROGENADOS URINARIOS CON DIFERENTE INGESTA
PROTICA
N. Urinario Total
N. Proteico
Urea (N)
Amoniaco (N)
Creatininico (N)
Urico (N)
N indeterminado
Dieta Proteica normal

(mixta)
g.
%N
13.2
100
82.5
11.36
86.1
0.4
3.0
0.61
4.6
0.21
1.6
0.62
4.7
Dieta rica en Protenas

g
23.28
145.5
20.45
0.82
0.64
0.3
1.07
%N
100
87.9
3.5
2.7
1.3
4.6
Dieta pobre en
Protenas
g
%N
4.2
100
26.25
2.9
69.1
0.17
4.0
0.6
14.3
0.11
2.6
0.42
10.0
Pgina 46
Nombre del Alumno(s):-----------------------------------------------------------------------------------------------------------Grupo: ----------------------------------------------------------------------
Fecha: ---------------
Determine el Balance Nitrogenado del sujeto Normal y del paciente empleando la siguiente frmula:
BN = Ingesta Nitrogenada - [gN urico + gN creatinnico + 2]
INTERPRETACIN Y DIAGNOSTICO NUTRICIONAL:
------------------------------------
--------------------------------------
-----------
Firma del Alumno
Firma del Profesor
Nota
Pgina 47
INTRODUCCION.-
Utilizamos el metabolismo proteico (sntesis y degradacin) para evaluar el estado nutricional de una
persona.
Sealamos didcticamente dos compartimientos de distribucin de las protenas en el organismo:
a) Compartimiento Proteico Visceral.
b) Compartimiento Proteico Somtico o esqueltico.
Las protenas del compartimiento visceral se evalan mediante los niveles de Transferrina, Pre - Albmina, Protena
Total y Albmina en suero, que por su relativamente corto tiempo de vida (Albmina 20 das) rinde una estimacin
razonable del compartimiento proteico visceral. En esta prctica utilizaremos la Protena total y Albmina srica.
Las protenas del compartimiento somtico esqueltico la evaluaremos mediante la excrecin de la creatinina urinaria
24 hrs./Talla, relacin que es fiel ndice de masa muscular esqueltica.
Asi mismo mediremos el Peso y la Talla para evaluar la masa corporal total.
1) DETERMINACION DE LA PROTEINA TOTAL.Fundamento:
Las protenas en presencia del reactivo de Biuret forman un complejo Biuret cuprosdico color azul violeta, que indica
la presencia de enlaces peptdicos, cuya intensidad de color es proporcional a la concentracin de protena en la
muestra.
BL
Agua destil.
Muestra 1
Muestra 2
20 ul
20 ul
20 ul
Suero
St. Prot. Tot 5.7 g/dl
R. Color
St
20 ul
2.0 ml
2.0 ml
2.0 ml
2.0 ml
Mezclar. Incubar 10 min a 37 C o 20 min a T ambiente. Leer 540 n.m.

Clculos
: Factor de Calibracin y Concentracin del Problema.
Valores Normales :
6-8 g/dl
2) DETERMINACION DE ALBUMINA SERICA.BL

Agua destil.
Problema
Problema
20 ul
20 ul
20 ul
Suero
St. Albmina 3.3 g/dl
R. Color
St
20 ul
2.0 ml
2.0 ml
2.0 ml
2.0 ml
Pgina 48
Mezclar. Incubar 3 min a Temperatura ambiente. Leer 620 nm.

Clculos
: Factor de Calibracin y Concentracin del Problema.
Valores Normales :
3.5 a4.7 g/dl
3) DOSAJE DE CREATININA URINARIA..Empleremos el mismo mtodo usado para la creatinina urinaria de la prctica anterior. Dividir la excrecin urinaria
24 hs. entre la Talla.
N TUBO
BL
ST
Muestra 1
Muestra 2
0.04
0.04
0.8
0.8
ORINA 1/10 ml
AGUA
ml
0.8
St. 1.5 mg/dl ml

R. Picrico
ml
Buffer Alcalino ml
0.2
0.2
1.6
0.8
1.6
1.6
0.4
0.2
0.4
0.4
Incubar a T ambiente por 20 min.y leer las Absorvancias a 505 nm.

Calculo:
Cr.Orina (mg/dl)=Abs. Muestra x 150
Abs. standard
Cr.Urinaria 24 hs = Cr.Orina (mg/dl) x Vol 24h(L) x 10
Muestra 1:
Muestra 2:
Peso
Peso
Talla
Talla
Relacin
Relacin
Vol. Orina/24 h =
Vol. Orina/24 h =
Pgina 49
Nomograma de Valoracin del Estado Nutricional

Imprimir archivo adjunto
Pgina 50
Nombre del Alumno(s):-----------------------------------------------------------------------------------------------------------Grupo: ----------------------------------------------------------------------
Fecha: ---------------
En el nomograma de valoracin del estado nutricional, marque :

El Indice Cr. Ur. / 24hs / Talla encontrado o interprete el diagnstico del paciente.
El Indice Peso / Talla encontrado e interprete el resultado.
El Indice Prot. Tot. Srica y albmina Srica encontrado e interprete.
DIAGNOSTICO FINAL.
------------------------------------
--------------------------------------
-----------
Firma del Alumno
Firma del Profesor
Nota
Pgina 51
Debido a que el estado nutricional del paciente juega un papel importante para determinar su
capacidad de tolerancia a la ciruga y a otros procedimientos teraputicos, la adecuada evaluacin
del estado nutricional es de gran importancia. Las siguientes mediciones son valiosas en la
determinacin del estado del paciente:
A. DIAGNOSTICO CLINICO.
Los mejores elementos para un correcto diagnostico nutricional son una buena historia
clnica nutricional y un buen examen fsico. Ayuda de manera especial, el consignar en la
anamnesis el estado socio-econmico del enfermo y de los antecedentes patolgicos,
especialmente la presencia de enfermedades debilitantes crnicas como la tuberculosis
pulmonar, diabetes mellitus, infecciones o parsitos intestinales.
Es importante consignar la historia diettica con una apreciacin semicuantitativa de la
ingesta calrico y proteica; el peso habitual en el estado de salud y el peso actual en estado de
enfermedad, la fecha de inicio de la enfermedad, as como la fecha de inicio de sntomas que se
asocian a la desnutricin, a saber; anorexia, nauseas, vmitos o diarreas. Se debe anotar
tambin la presencia de depresin como factor anorexigeno y la actitud familiar frente a la
enfermedad, desde que la rehabilitacin debe ser psicolgica y orgnica.
Completa el diagnostico de desnutricin el examen fsico. La flacidez es caractersticas, con
perdida de grasa y de la masa muscular de la cara, ojos hundidos que aparecen de mayor
tamao El trax adelgazado, con atrofia mamaria y desaparicin del tejido graso y muscular,
se observan las costillas y dificultad en los movimientos respiratorios. El abdomen mostrara
hepatomegalia, edema, ascitis.
B. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO.
B.1 Mtodos Antropomtricos.
B.1.1 Peso Corporal.- Los individuos cuyos estados nutricionales sean cuestionables deben
ser pesados (peso actual), debiendo adems buscarse en las tablas pertinentes el peso ideal
que corresponde a su talla. El peso ideal varia para una misma tala de acuerdo al sexo.
Mediante la confrontacin del peso actual del paciente con su peso ideal se puede
obtener el porcentaje del peso corporal ideal, utilizando la siguiente frmula:
Peso actual
% Peso Ideal =
X 100
Peso ideal
Pgina 52
Se comparara este valor con la tabla 1. Esto nos dar el estado nutricional del
paciente. Debe recordarse, sin embargo, que el edema es uno de los efectos de la
malnutricin proteica y puede falsear una apreciacin cuantitativa.
La integridad orgnica y funcional del organismo no se compromete durante
perdidas medianas de peso y el equilibrio del organismo se restituye espontneamente. Las
perdidas extremas de peso, que suceden en enfermedades graves medicas o quirrgicas se
acompaan de una mortalidad elevada, as por ejemplo: la mortalidad de un paciente que
sufre una prdida de peso de 20% o ms es el 37%, es contraste con el 3.5% en pacientes
con prdidas de peso al 20%.
Evaluacin de Peso
Corporal
Valor Standard
> 120 %
110-120 %
90-110 %
80-90 %
70-80 %
< 69 %
Estado Nutricional
Obesidad
Sobrepeso
Normal
Desnutricin leve
Desnutricin moderada
Desnutricin grave
PESO IDEAL SEGN TALLA HOMBRES

Talla
(cm)
1.45
1.46
1.47
1.48
1.49
1.50
1.51
1.52
1.53
1.54
1.55
1.56
1.57
1.58
Peso
(Kg)
51.9
52.4
52.9
53.5
54.0
54.5
55.0
56.6
56.7
56.8
57.2
57.9
58.6
59.3
Talla
(cm)
1.59
1.60
1.61
1.62
1.63
1.64
1.65
1.66
1.67
1.68
1.69
1.70
1.71
1.72
Peso
(Kg)
59.9
60.5
61.1
61.7
62.3
62.5
62.9
64.0
64.6
65.2
65.9
66.5
67.3
68.0
Talla
(cm)
1.73
1.74
1.75
1.76
1.77
1.78
1.79
1.80
1.81
1.82
1.83
1.84
1.85
1.86
Peso
(Kg)
68.7
69.4
70.1
70.8
71.6
72.4
73.3
74.2
75.0
75.8
76.5
77.3
78.1
78.5
Pgina 53
PESO IDEAL SEGN TALLA MUJERES

Talla
(cm)
1.40
1.41
1.42
1.43
1.44
1.45
1.46
1.47
1.48
1.49
Peso
(Kg)
44.9
45.4
45.9
46.4
47.0
47.5
48.0
48.6
49.2
49.8
Talla
(cm)
1.50
1.51
1.52
1.53
1.54
1.55
1.56
1.57
1.58
1.59
Peso
(Kg)
50.4
51.0
51.5
52.0
52.5
53.1
53.7
54.3
54.9
55.5
Talla
(cm)
1.60
1.61
1.62
1.63
1.64
1.65
1.66
1.67
1.68
1.69
Peso
(Kg)
56.2
56.9
57.6
58.3
58.9
59.5
60.1
60.7
61.4
62.1
B.1.2.Indice de Masa Corporal (IMC).- Esta medida es la que predice mejor el porcentaje
de grasa corporal. Anteriormente para el diagnstico de obesidad se consideraban la edad,
estatura, sexo y peso corporal; ahora se acepta el IMC que se obtiene dividiendo el peso
(Kg) entre la altura al cuadrado (m2):
IMC= P/A2
Un IMC entre 25 y 30 se considera como sobrepeso, y por arriba de 30 como
obesidad. El sobrepeso indica simple aumento de la masa corporal; en cambio de la
obesidad representa un exceso de grasa corporal por depsito de triglicridos en los
adipocitos.
IMC Kg/m2
> 40
35 39.9
30 34.9
>25 30
> 19 25
17 19
16 _ 16,9
< 16
Estado Nutricional
Obesidad mrbida
Obesidad severa
Obesidad moderada
Sobrepeso
Normal
Desnutricin leve
Desnutricin moderada
Desnutricin grave
Pgina 54
B.1.3. Almacenamiento de Lpidos.- La medicin del pliegue cutneo del trceps arroja un
estimado del almacenamiento corporal de lpidos. La medicin se realiza con calibraciones.
Deben tomarse tres medidas y promediarse los resultados.
Acromion
PLIEGUE SUBCUTANEO DEL TRICEPS

Olecranon
Pgina 55
Adulto (mm)
Espesor del pliegue del Triceps (EPT)
Hombre
Mujer
Standard
12.5
16.5
90%
Standard
11.3
14.9
80%
Standard
10.0
13.2
70%
Standard
8.8
11.6
60%
Standard
7.5
9.9
B.1.4. Masa Magra Corporal.- Representa a la masa corporal total exenta de grasa. En
otras palabras la masa msculo-esqueltica, la que puede ser determinada mediante dos
mtodos:
- circunferencia muscular del brazo (CMB)
- ndice de creatinina urinaria (mtodo bioqumico).
Circunferencia Muscular del Brazo.- Se mide toda la circunferencia de la parte superior
del brazo no dominante, tomando el punto medio del mismo. Por la presencia de la capa de
tejido adiposo subyacente se modifica esta medida de acuerdo a la siguiente formula:
CMB = CB (3.14 x PCT)
CMB: circunferencia muscular del brazo, en cm.

CB: circunferencia del brazo, en cm.
PCT: pliegue cutneo del trceps, en cm.
Luego se usa la tabla para calcular el grado de deplecin.
Pgina 56
CIRCUNFERENCIA DEL BRAZO (cm)

90%
Standard
26.3
25.7
80%
Standard
23.4
22.8
70%
Standard
20.5
20.0
Hombre
Mujer
Standard
29.3
28.5
Hombre
Mujer
CIRCUNFERENCIA MUSCULAR DEL BRAZO (cm)

Adulto (cm)
90%
80%
70%
Standard
Standard
Standard
Standard
25.3
22.3
20.2
17.7
23.2
20.9
19.0
16.2
60%
Standard
17.6
17.0
60%
Standard
15.2
13.9
MANEJO DE TABLA DE COMPOSICION DE ALIMENTOS

1) Sujeto de anlisis
Edad:
2) Gasto calrico diaria:
Actividad
Durmiendo
Muy Ligera
Ligera
Moderada
Pesada
Peso:
Talla:
Horas
Kcaloras
Total:
3) Ingesta Calrica y Proteica:
Encuesta Diettica de 24 Hrs:
Desayuno
Alimento
Porcin(g) Protena
Lpido
Carbohidrato
Pgina 57
Almuerzo
Alimento
Porcin(g) Protena
Lpido
Carbohidrato
Cena
Alimento
Porcin(g) Protena
Lpido
Carbohidrato
Otros
Alimento
Porcin(g) Protena
Lpido
Carbohidrato
Total Protenas X 4 Kcal/g = Kcal obtenidas de protenas

Total Carbohidratos X 4 Kcal/g = Kcal obtenidas de carbohidratos
Total Lpidos X 9 Kcal/g = Kcal obtenidas de lpidos
Kcal obtenidas de protenas + Kcal obtenidas de carbohidratos + Kcal obtenidas de lpidos
Pgina 58
Descripcin de algunas preparaciones culinarias autctonas

Aceitunas preparadas: Las aceitunas se lavan y se cuecen en poco agua con sal, se
aderezan con cebolla, aj, vinagre y aceite.
Aj panca: El aj fresco se pone a secar al sol varios das.
Cancha: Es el maz uniformemente tostado en una olla de barro con la abertura al costado.
Ccaya (oca helada): La oca fresca es expuesta a la intemperie, a bajas temperaturas,
(heladas) por espacio de varios das.
Carne seca de venado: La carne de venado se corta en porciones pequeas y delgadas
agregndole sal, y luego se pone a secar colgndola de cordeles.
Chancaca: Es el jugo de caa de azcar, hervido, y concentrado hasta que tome la
consistencia requerida y luego vaciado en moldes
Chaquepa: Es la cebada tostada y molida, pero no siempre cernida.
Chicharrn: Carne de chancho cortada en trozos, con sal y sancochada hasta que se
consume el agua, luego empiezan a freirse los trozos en su propia grasa hasta que se doren
por todos lados.
Chochoca: Es el maz en grano, semi-cocido en pequea cantidad de agua y por poco
tiempo, y luego secado al aire.
Chuo: Es una forma indgena de preparacin y preservacin de la papa, para lo cual se la
coloca en depresiones del terreno por las que corre agua lentamente, all permanece dos o
tres semanas y luego es secada al aire. Esta operacin se efecta en la poca de fro, con lo
cual se consigue una deshidratacin por congelamiento.
Chuo negro: Humedecidas las papas, se extiende en campo abierto uno o dos das. Una
vez que se han congelado, se pisan para extraerle toda el agua y parte de la cscara. Luego
se secan al sol.
Jamn del pas: La carne de cerdo se enrolla, se le agrega condimentos y sal, y se amarra;
luego es hervida por espacio de dos horas.
Jora: El maz colorado se hace germinar hasta conseguir el rote de los granos; a los diez
das hasta quemar los brotes debido al calor intenso que se desarrolla. Luego es
enfriado, al aire primero, y secado al sol despus. Es la materia prima para elaborar la
Chicha de Jora.
Llunka: Con este nombre se conoce el producto lavado, remojado durante dos horas y
luego sobado suavemente en el batn hasta eliminar la cscara; enseguida se deja secar al
aire. Se prepara de cebada o trigo.
Machka: Es el producto tostado, slido y cernido, que se prepara de cebada o trigo.
Pgina 59
Man sancochado: Es el man en su vaina cocido en agua con sal.

Mote: Es el producto al que se le ha eliminado la cscara de un modo ms completo que en
el caso de la Llunka; para esto se le cuece en una solucin de cenizas (generalmente usan
madera de Molle, Schinus molle), y luego es sobado fuertemente con la palma de las
manos, enjuagado y secado al aire. El mote de maz es preparado con una solucin de
cenizas ms dbil y con menor tiempo de coccin que el trigo. Para el mote de cebada la
solucin de cenizas es ms fuerte y el tiempo de coccin ms largo. Con frecuencia se
adiciona cal.
Pltano seco (orejn): Es el pltano maduro, pelado, y cortado en rebanadas,
deshidratado parcialmente.
Papa helada: La papa fresca es expuesta a la intemperie a bajas temperaturas (heladas)
por espacio de varios das.
Papa seca: Es la papa sancochada, pelada y secada al aire. Posteriormente puede ser
molida o partida en trozos pequeos.
Tocash: Es una forma de preservar el maz fresco, usada por los indgenas. Consiste en
enterrrar el maz fresco en el lecho de un arroyuelo a unos 30 o 40 cm. De profundidad,
durante varias semanas. La muestra analizada se extrajo de uno de estos sitios.
Yuca fermentada (masato): Las yucas se pelan y se ponen a cocer, luego se muelen, o se
mastican hasta formar una pasta, diluyndola en el agua de coccin; si no es masticada se
le agrega azcar. Esta preparacin se deposita en tinajas, varios das, para que fermente.
Pgina 60
TABLA DE GASTO ENERGTICO POR ACTIVIDAD FISICA
TABLA DE COMPOSICIN DE LOS ALIMENTOS PERUANOS

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD 2009
http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/Tabla%20de%20Alimentos
.pdf
Pgina 61
Pgina 62

Guia de Bioquimica y Nutricion 2015-II

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1

GUIA DE BIOQUIMICA Y NUTRICION

UNIVERSIDAD RICARDO PALMA

Dr. Elio Ivn Rodrguez Chvez

Dr. Manuel Huamn Guerrero

Universidad Ricardo Palma

GUIA DE BIOQUIMICA Y NUTRICION

A.- CONTENIDOS DE BIOQUIMICA:

Interconversin de unidades y manejo de concentraciones de

Espectrofotometra Uso de la luz visible y UV en Medicina.

Actividad enzimtica: Efecto de factores en la transformacin del

Sobrecarga oral de glucosa y DM (TTG).

Determinacin e interpretacin del HCO3- en la cidosis

asociacin con el riesgo coronario.

B.- CONTENIDOS DE NUTRICIN HUMANA

Valoracin Nutricional: Balance Nitrogenado

Evaluacin de la Masa Proteica Visceral y Esqueltica: MarasmoKwashiorkor.

Medidas Antropomtricas y signos clnicos que evidencian

desnutricin. Manejo de la Tabla de composicin de alimentos.

Universidad Ricardo Palma

GUIA DE BIOQUIMICA Y NUTRICION

Reglamento Interno del Laboratorio

Universidad Ricardo Palma

GUIA DE BIOQUIMICA Y NUTRICION

El trabajo en el Laboratorio requiere la observacin de

1. Cada grupo de prcticas se responsabilizar de su zona de trabajo y de su material.

Universidad Ricardo Palma

GUIA DE BIOQUIMICA Y NUTRICION

5. Utilizar material limpio y seco

Universidad Ricardo Palma

Universidad Ricardo Palma

GUIA DE BIOQUIMICA Y NUTRICION

GUIA DE BIOQUIMICA Y NUTRICION

Tabla 1 .- Unidades SI bsicas

Tabla 2.- Prefijos utilizados con unidades SI

Universidad Ricardo Palma

1 000 000 000 000

1 000 000 000

0,000 000 001

0,000 000 000 001

0,000 000 000 000 001

0,000 000 000 000 000 001

GUIA DE BIOQUIMICA Y NUTRICION

1.- Realice los siguientes conversiones:

3.- Describa las siguientes expresiones:

4.- Calcule la Molaridad de las siguientes soluciones :

500 ml de Cloruro de sodio al 0.9%

Una ampolla de 20 ml de NaCl al 20%

Una ampolla de 20ml de NaHCO3 al 8.4%

5.- Calcule los mEq de las siguientes soluciones:

Cuantos mEq de K y cuantos mEq de Cl hay en una ampolla de 20 ml de KCl al 10%

Firma del Alumno

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Universidad Ricardo Palma

GUIA DE BIOQUIMICA Y NUTRICION

Obtener la curva de valoracin de un cido dbil, HA, CH3COOH O.1N

Calcular el pH haciendo uso de un potencimetro y la ecuacin de Henderson Hasselbach

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GUIA DE BIOQUIMICA Y NUTRICION

Medir los valores de pH de cada mezcla, utilizando el potencimetro

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