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UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS

PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM SANEAMENTO,


MEIO AMBIENTE E RECURSOS HDRICOS

IDENTIFICAO E ANLISE DE VIABILIDADE


DE OVOS DE HELMINTOS EM UM SISTEMA DE
TRATAMENTO DE ESGOTOS DOMSTICOS
CONSTITUDO DE REATORES ANAERBIOS E
RAMPAS DE ESCOAMENTO SUPERFICIAL

Adriana Molina Zerbini

Belo Horizonte
2000

IDENTIFICAO E ANLISE DE VIABILIDADE DE


OVOS DE HELMINTOS EM UM SISTEMA DE
TRATAMENTO DE ESGOTOS DOMSTICOS
CONSTITUDO DE REATORES ANAERBIOS E
RAMPAS DE ESCOAMENTO SUPERFICIAL

Adriana Molina Zerbini

Adriana Molina Zerbini

IDENTIFICAO E ANLISE DE VIABILIDADE DE


OVOS DE HELMINTOS EM UM SISTEMA DE
TRATAMENTO DE ESGOTOS DOMSTICOS
CONSTITUDO DE REATORES ANAERBIOS E
RAMPAS DE ESCOAMENTO SUPERFICIAL

Dissertao apresentada ao Programa de Ps-graduao


em Saneamento, Meio Ambiente e Recursos Hdricos da
Escola de Engenharia da Universidade Federal de Minas
Gerais, como requisito parcial obteno do ttulo de
Mestre em Saneamento, Meio Ambiente e Recursos
Hdricos.

rea de concentrao: Saneamento

Linha de pesquisa: Digesto anaerbia e tcnicas de


tratamento e ps-tratamento de esgotos.

Orientador: Prof. Carlos Augusto de Lemos Chernicharo

Belo Horizonte
Escola de Engenharia da UFMG
2000

Pgina com as assinaturas dos membros da banca examinadora, fornecida pelo Colegiado do
Programa

A Deus.
Aos meus pais e minha irm pelo amor e dedicao.
Ao meu querido Carlos, pelo carinho e estmulo.

Programa de Ps-graduao em Saneamento, Meio Ambiente e Recursos Hdricos da UFMG

AGRADECIMENTOS
Ao Prof. Carlos Augusto de Lemos Chernicharo, pela orientao deste trabalho, pelo apoio,
pela seriedade, pela dedicao e pacincia nos momentos que se fizeram necessrios.
Ao Centro de Pesquisa Ren Rachou, na pessoa do Dr Omar dos Santos Carvalho, que
possibilitou a utilizao da infra-estrutura do laboratrio de Helmintoses Intestinais, para
treinamento e anlises na Fase inicial desse trabalho.
Ao colega Cristiano Massara, pela colaborao durante a Fase inicial do trabalho, dividindo o
espao do laboratrio, pelo bom humor e convvio que muito me acrescentaram.
Ao Zezinho, pela colaborao no treinamento.
Ao CNPq, pela concesso da bolsa de estudo.
Ao SAAE de Itabira, pelo apoio no perodo experimental.
turma do PROSAB.
Aos amigos Eduardo e Reginaldo, pelo apoio na formatao das figuras.
Michele, pela elaborao dos grficos e amizade.
Wilma Maria Coelho, pela disponibilizao de algumas referncias, que foram de grande
valia para o incio do trabalho.
bolsista Roseli, pelo apoio nas anlises de laboratrio.
Ao bolsista Srgio, pela dedicao, seriedade, colaborao e amizade.
Evelin, pelo clima de amizade e sinceridade durante a realizao da primeira etapa desse
trabalho.
professora Annemarie Knig, pela amizade, pelas crticas e sugestes, que foram de grande
contribuio no desenvolvimento do trabalho.
s minhas amigas Juliana, Campos, Anice, Maristela, Xanda e Sandrinha, pela compreenso
durante o perodo de elaborao desse trabalho.
minha amiga Valria pela amizade e carinho.
Aos pesquisadores Matlde Galvn e Jorge de Victorica, pelo interesse, pelas informaes e
esclarecimento da metodologia, na etapa final do trabalho.
minha amiga Ftima, que rezou por mim.
Programa de Ps-graduao em Saneamento, Meio Ambiente e Recursos Hdricos da UFMG

ii

RESUMO
O presente trabalho aborda a identificao e anlise de viabilidade de ovos de helmintos em
um sistema de aplicao de esgotos domsticos no solo por escoamento superficial, aplicado
ao ps-tratamento de efluentes de reatores anaerbios. Buscou-se, ainda, avaliar a eficincia
do sistema em relao remoo de ovos de helmintos, coliformes totais (CT) e Escherichia
coli (E. coli) analisando o enquadramento do efluente final s diretrizes da OMS para reso de
guas residurias tratadas. O estudo, desenvolvido em duas fases, avaliou unidades
implantadas junto ETE Nova Vista, na cidade de Itabira/MG. Na Fase 1, o sistema foi
constitudo de um reator UASB (escala real), seguido de trs rampas de escoamento
superficial no solo (escala de demonstrao), operando com vazo constante ao longo do dia.
Nessa fase buscou-se avaliar a eficincia do sistema em relao remoo de ovos de
helmintos, e a identificao das espcies prevalentes, utilizando o mtodo de BAILENGER
(1979), modificado por AYRES & MARA (1996). Na Fase 2, o sistema foi constitudo de um
reator anaerbio compartimentado (escala de demonstrao), seguido das mesmas rampas de
aplicao superficial no solo, porm operando com vazo varivel ao longo do dia. Nessa
fase, buscou-se avaliar a eficincia do sistema de tratamento em relao remoo de ovos de
helmintos, CT e E. coli, bem como estimar a frao vivel dos ovos. Em geral, o sistema
funcionou de forma bastante promissora em relao remoo de ovos de helmintos, com
eficincias mdias no reator UASB de 71% e 82%, nas Fases 1 e 2, respectivamente. Em
relao s rampas de escoamento superficial, os resultados parasitolgicos obtidos na Fase 1
indicaram a ausncia de ovos de helmintos no efluente final. Na Fase 2 foi obtida uma mdia
de 0,2 ovo/L, indicando o atendimento s diretrizes da OMS ( 1 ovo de nematide/L). Nos
estudos de viabilidade dos ovos de helmintos, durante a Fase 2, pela tcnica da colorao
rpida, foram observados tanto ovos viveis, quanto no-viveis. Os percentuais mdios de
ovos viveis foram de 3,9% no esgoto bruto e 14,9% no efluente do reator anaerbio.
Ressalta-se que tais resultados devem ser vistos com ressalvas, devido s dificuldades de
observao inerentes ao mtodo utilizado. Em relao remoo de CT e E. coli, foram
observadas eficincias mdias da ordem de 2 unidades logartmicas no sistema
UASB/rampas.
Embora a qualidade do efluente final das rampas ( 1 ovo /L) indique a sua potencial
utilizao para a irrigao irrestrita, as concentraes de E. coli (106 a 108 NMP/100 mL)
indicam uma qualidade bacteriana insatisfatria, possibilitando sua utilizao apenas para a
irrigao restrita (cereais, culturas industriais, forrageiras, pastagens e rvores).
Programa de Ps-graduao em Saneamento, Meio Ambiente e Recursos Hdricos da UFMG

iii

ABSTRACT

Programa de Ps-graduao em Saneamento, Meio Ambiente e Recursos Hdricos da UFMG

iv

SUMRIO
LISTA DE TABELAS........................................................................................................................................VII
LISTA DE FIGURAS........................................................................................................................................VIII
LISTA DE GRFICOS........................................................................................................................................X
1

INTRODUO............................................................................................................................................ 1

OBJETIVOS................................................................................................................................................. 5
2.1
2.2

REVISO DA LITERATURA ................................................................................................................... 7


3.1
3.1.1
3.1.2
3.1.3
3.2
3.2.1
3.2.2
3.3
3.3.1
3.3.2
3.3.3
3.4
3.5
3.5.1
3.5.2
3.5.3
3.5.4

OBJETIVOS GERAIS ................................................................................................................................ 5


OBJETIVOS ESPECFICOS ........................................................................................................................ 5

RESO DE GUAS RESIDURIAS ............................................................................................................ 7


Breve contextualizao.................................................................................................................... 7
Principais usos e benefcios........................................................................................................... 10
Aspectos epidemiolgicos.............................................................................................................. 11
HELMINTOS ......................................................................................................................................... 19
Introduo ..................................................................................................................................... 19
Nematides .................................................................................................................................... 22
METODOLOGIAS PARA IDENTIFICAO E ENUMERAO DE OVOS DE HELMINTOS ............................... 44
Introduo ..................................................................................................................................... 44
Caracterizao das metodologias ................................................................................................. 45
Consideraes em relao ao mtodo de BAILENGER modificado ............................................. 50
METODOLOGIAS PARA AVALIAO DE VIABILIDADE DE OVOS DE HELMINTOS .................................... 51
REATORES UASB E SISTEMAS DE APLICAO SUPERFICIAL NO SOLO ................................................. 60
Reatores UASB .............................................................................................................................. 60
Disposio dos esgotos no solo ..................................................................................................... 63
Remoo de ovos de helmintos em sistemas convencionais de tratamento ................................... 68
Remoo de ovos de helmintos em sistemas de escoamento superficial no solo ........................... 71

MATERIAL E MTODOS ...................................................................................................................... 74


4.1
4.1.1
4.1.2
4.2
4.2.1
4.2.2
4.2.3
4.3
4.3.1
4.3.2
4.3.3
4.3.4
4.3.5
4.3.6
4.3.7
4.4
4.4.1
4.4.2
4.4.3
4.5
4.5.1
4.5.2
4.5.3
4.5.4
4.5.5

APARATO EXPERIMENTAL ................................................................................................................... 74


Fase 1 (julho/97 a abril/98)........................................................................................................... 75
Fase 2 (novembro/99 a agosto/2000) ............................................................................................ 76
PROGRAMA DE MONITORAMENTO ....................................................................................................... 79
Anlises parasitolgicas................................................................................................................ 79
Anlises bacteriolgicas................................................................................................................ 80
Anlises de viabilidade.................................................................................................................. 80
ENUMERAO DE OVOS DE HELMINTOS .............................................................................................. 81
Preliminares .................................................................................................................................. 81
Fundamento................................................................................................................................... 81
Equipamentos, materiais e reagentes ............................................................................................ 82
Preparao de solues................................................................................................................. 83
Procedimentos para enumerao dos ovos ................................................................................... 83
Expresso de resultados ................................................................................................................ 85
Ilustrao fotogrfica dos procedimentos ..................................................................................... 86
ANLISES PARASITOLGICAS IDENTIFICAO DE OVOS DE HELMINTOS ........................................... 87
Consideraes preliminares .......................................................................................................... 87
Critrios para diferenciao de ovos de helmintos ....................................................................... 87
Ilustrao fotogrfica de ovos de helmintos.................................................................................. 90
ANLISES DE VIABILIDADE EM GUAS RESIDURIAS BRUTAS ............................................................. 92
Tcnica da concentrao por centrifugao ................................................................................. 92
Fundamento................................................................................................................................... 92
Equipamentos, materiais e reagentes ............................................................................................ 92
Preparao de solues................................................................................................................. 93
Coleta de amostras ........................................................................................................................ 93

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4.5.6
Procedimento................................................................................................................................. 93
4.5.7
Expresso dos resultados .............................................................................................................. 95
4.5.8
Ilustrao fotogrfica dos procedimentos ..................................................................................... 96
4.6
ANLISE DE VIABILIDADE EM GUAS RESIDURIAS TRATADAS .......................................................... 97
4.6.1
Tcnica de concentrao por filtrao.......................................................................................... 97
4.6.2
Fundamento................................................................................................................................... 97
4.6.3
Equipamentos, materiais e reagentes ............................................................................................ 97
4.6.4
Preparao de solues................................................................................................................. 98
4.6.5
Coleta de amostras ........................................................................................................................ 98
4.6.6
Procedimento................................................................................................................................. 98
4.6.7
Expresso dos resultados ............................................................................................................ 100
4.6.8
Ilustrao fotogrfica dos procedimentos ................................................................................... 101
4.7
ILUSTRAO FOTOGRFICA DE OVOS DE HELMINTOS PELA TCNICA DA COLORAO....................... 102
5

RESULTADOS E DISCUSSO ............................................................................................................. 103


5.1
OVOS DE HELMINTOS ........................................................................................................................ 103
5.1.1
Remoo de ovos de helmintos no sistema de tratamento ........................................................... 103
5.1.2
Espcies de ovos de helmintos prevalentes.................................................................................. 107
5.1.3
Interferncia dos slidos sedimentveis ...................................................................................... 112
5.1.4
Interferncia dos slidos suspensos............................................................................................. 115
5.1.5
Viabilidade dos ovos de helmintos .............................................................................................. 116
5.2
ANLISES BACTERIOLGICAS ........................................................................................................... 120
5.2.1
Coliformes totais.......................................................................................................................... 120
5.2.2
Escherichia coli ........................................................................................................................... 121
5.3
QUALIDADE DO EFLUENTE FINAL E RESO ........................................................................................ 122

CONCLUSES........................................................................................................................................ 125
6.1
6.2
6.3
6.4

METODOLOGIA DE IDENTIFICAO E ENUMERAO ......................................................................... 125


METODOLOGIA DE VIABILIDADE ....................................................................................................... 125
SISTEMA DE TRATAMENTO DE ESGOTOS ............................................................................................ 126
QUALIDADE DO EFLUENTE FINAL E RESO ........................................................................................ 127

RECOMENDAES .............................................................................................................................. 129

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ................................................................................................... 130

ANEXOS................................................................................................................................................... 137
9.1
9.2
9.3

TABELA A1 Resultados de ovos de helmintos Fase 1 .............................................................. 138


TABELA A2 Resultados de ovos de helmintos Fase 2 .............................................................. 140
TABELA A3 Resultados de coliformes totais e Escherichia coli Fase 2 ................................... 143

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vi

LISTA DE TABELAS
Tabela 3.1 - reas irrigadas com guas residurias (panorama mundial) ............................................................... 9
Tabela 3.2 - Diretrizes da Organizao Mundial de Sade de qualidade microbiolgica recomendada para
esgotos tratados utilizados para a irrigao de culturas agrcolas(a) ............................................................. 17
Tabela 3.3 - Principais mtodos para enumerao de ovos de helmintos em esgotos ........................................... 49
Tabela 3.4 - Principais critrios morfolgicos para determinao de ovos viveis e no viveis de Ascaris
lumbricoides .................................................................................................................................................. 53
Tabela 3.5 - Corantes utilizados para distinguir larvas e ovos de helmintos vivos e mortos................................. 54
Tabela 3.6 - Incorporao e excluso de corantes em diferentes espcies de ovos de helmintos.......................... 56
Tabela 3.7 - Incorporao e excluso de corantes biolgicos em ovos de Ascaris suum ...................................... 57
Tabela 3.8 - Principais procedimentos para o processamento das amostras pelo mtodo quantitativo ................. 58
Tabela 3.9 - Eficincias de alguns processos de tratamento de esgotos sobre ovos de helmintos e cistos de
protozorios................................................................................................................................................... 70
Tabela 4.1 Caractersticas de alimentao do reator anaerbio em escala real (Fase 1)..................................... 75
Tabela 4.2 Caractersticas de alimentao das rampas na Fase 1 ....................................................................... 76
Tabela 4.3 Caractersticas de alimentao do reator UASB Compartimentado (Fase 2) ................................... 77
Tabela 4.4 - Horrio de alimentao das rampas na Fase 2................................................................................... 78
Tabela 4.5 Caractersticas de alimentao das rampas na Fase 2 ....................................................................... 78
Tabela 4.6 - Tamanho, densidade e velocidade de sedimentao de algumas espcies de ovos de helmintos...... 82
Tabela 4.7 Principais caractersticas de alguns ovos de helmintos..................................................................... 88

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vii

LISTA DE FIGURAS
Figura 3.1 - Representao esquemtica de um reator UASB............................................................................... 61
Figura 3.2 - Ilustrao esquemtica de uma rampa de escoamento superficial ..................................................... 66
Figura 4.1 Tratamento Preliminar (Gradeamento) ............................................................................................. 74
Figura 4.2 Tratamento Preliminar ...................................................................................................................... 74
Figura 4.3 Vista do reator anaerbio em escala real da ETE Nova Vista (Fase 1)............................................. 75
Figura 4.4 Vista das rampas de escoamento superficial no solo (Fase 1)........................................................... 76
Figura 4.5 Vista do reator UASB compartimentado em escala piloto (Fase 2).................................................. 77
Figura 4.6 Vista das rampas de escoamento superficial no solo (Fase 2)........................................................... 78
Figura 4.7 Remoo do sobrenadante aps o perodo de sedimentao............................................................. 86
Figura 4.8 Etapas de centrifugao..................................................................................................................... 86
Figura 4.9 Separao de Fases da amostra ......................................................................................................... 86
Figura 4.10 Homogeneizao da amostra c/ Vortex........................................................................................... 86
Figura 4.11 Transferncia do sedimento homogeneizado para a cmara de McMaster ..................................... 86
Figura 4.12 Observao dos ovos no microscpio, em objetivas de 10x e 40x.................................................. 86
Figura 4.13 - Tamanhos relativos dos ovos de helmintos...................................................................................... 89
Figura 4.14 Ovo frtil de Ascaris lumbricoides.................................................................................................. 90
Figura 4.15 Ovo infrtil de Ascaris lumbricoides............................................................................................... 90
Figura 4.16 Ovo de Trichuris trichiura .............................................................................................................. 90
Figura 4.17 Ovo de Ancilostomdeo................................................................................................................... 90
Figura 4.18 Ovo de Hymenolepis nana .............................................................................................................. 91
Figura 4.19 Ovo de Hymenolepis diminuta ........................................................................................................ 91
Figura 4.20 Ovo de Taenia sp ............................................................................................................................ 91
Figura 4.21 Ovo de Enterobius vermicularis ..................................................................................................... 91
Figura 4.22 Concentrao da amostra por centrifugao.................................................................................... 96
Figura 4.23 Homogeneizao da amostra com Vortex....................................................................................... 96
Figura 4.24 Nova centrifugao. ........................................................................................................................ 96
Figura 4.25 Filtrao do sobrenadante em membrana de 25 mm e 8 m. .......................................................... 96
Figura 4.26 Adio de 5 mL do corante Safranina. ............................................................................................ 96
Figura 4.27 Lmina contendo a membrana para visualizao no microscpio. ................................................. 96
Figura 4.28 Filtrao de 1 L da amostra em membrana de 47 mm e 8 m. ..................................................... 101
Figura 4.29 Membrana contendo material filtrado (ovos). ............................................................................... 101
Figura 4.30 Transferncia do material (ovos) para o tubo da centrfuga.......................................................... 101
Figura 4.31 Filtrao do sobrenadante em membrana de 25 mm e 8 m. ........................................................ 101
Figura 4.32 Adio de 5 mL do corante Safranina, seguida de filtrao. ......................................................... 101
Figura 4.33 Lmina contendo a membrana para visualizao ao microscpio................................................. 101
Figura 4.34 Ovo vivel de Trichuris trichiura corado com Azul de Tripan..................................................... 102
Figura 4.35 Ovo no vivel de Trichuris trichiura corado com Azul de Tripan ............................................. 102
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viii

Figura 4.36 Ovo vivel de Ascaris lumbricoides corado com Azul de Tripan ................................................. 102
Figura 4.37 Ovo no-vivel de Ascaris lumbricoides corado com Eosina Y ................................................... 102
Figura 5.1 Ovo de Ascaris lumbricoides .......................................................................................................... 111
Figura 5.2 Ovo de Ancilostomdeo.................................................................................................................. 111
Figura 5.3 Ovo de Hymenolepis nana .............................................................................................................. 111
Figura 5.4 Ovo de Hymenolepis diminuta ........................................................................................................ 111
Figura 5.5 Ovo de Trichuris trichiura .............................................................................................................. 111
Figura 5.6 Ovo de Enterobius vermicularis ...................................................................................................... 111
Figura 5.7 Ovo de Ascaris lumbricoides no corado (corante Safranina 3 mL)............................................ 119
Figura 5.8 Ovo de Ascaris lumbricoides corado (corante Safranina 3 mL).................................................. 119
Figura 5.9 Ovo de Trichuris trichiura corado (corante Safranina 3 mL) ...................................................... 119
Figura 5.10 Ovo de Ascaris lumbricoides corado (corante Azul de Tripan 2 mL)........................................ 119
Figura 5.11 Ovo de Ascaris lumbricoides corado (corante Azul de Tripan 2 mL)........................................ 119
Figura 5.12 Ovo de Ascaris lumbricoides no corado (corante Azul de Tripan 1 mL) ................................. 119

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ix

LISTA DE GRFICOS
GRFICO 1.1 - Helmintoses mais freqentes no mundo ....................................................................................... 2
GRFICO 3.1 Infees parasitrias no mundo.................................................................................................. 30
GRFICO 5.1 Contagem de ovos de helmintos no esgoto bruto e no efluente do reator anaerbio (Fase 1).. 103
GRFICO 5.2 Contagens de ovos de helmintos no esgoto bruto .................................................................... 104
GRFICO 5.3 Freqncia de distribuio de ovos de helmintos no esgoto bruto (AUASB) Fase 1 ............... 107
GRFICO 5.4 Freqncia de distribuio de ovos de helmintos no efluente UASB (EUASB) Fase 1........ 108
GRFICO 5.5 Freqncia de distribuio de ovos de helmintos no esgoto bruto (AUASB) Fase 2 ............... 109
GRFICO 5.6 Freqncia de distribuio de ovos de helmintos no efluente UASB (EUASB) Fase 2........ 109
GRFICO 5.7 Relao entre contagens de ...................................................................................................... 113
GRFICO 5.8 - Correlao entre contagens de ovos de helmintos e concentrao de slidos sedimentveis
AUASB (Fase 1) ............................................................................................................................................ 113
GRFICO 5.9 Relao entre contagens de ..................................................................................................... 113
GRFICO 5.10 - Correlao entre contagens de ovos de helmintos e concentrao de slidos sedimentveis
EUASB (Fase 1)............................................................................................................................................. 113
GRFICO 5.11 Relao entre contagens de ................................................................................................... 114
GRFICO 5.12 - Correlao entre contagens de ovos de helmintos e concentrao de slidos sedimentveis
AUASB (Fase 2) ............................................................................................................................................ 114
GRFICO 5.13 Relao entre contagens de ................................................................................................... 114
GRFICO 5.14 - Correlao entre contagens de ovos de helmintos e concentrao de slidos sedimentveis
EUASB (Fase 2)............................................................................................................................................. 114
GRFICO 5.15 - Contagem de ovos de.............................................................................................................. 115
GRFICO 5.16 - Correlao entre contagens de ovos de helmintos e concentrao de slidos suspensos AUASB
(Fase 2) ........................................................................................................................................................ 115
GRFICO 5.17 - Contagem de ovos de.............................................................................................................. 115
GRFICO 5.18 - Correlao entre contagens de ovos de helmintos e concentrao de slidos suspensos EUASB
(Fase 2) ........................................................................................................................................................ 115
GRFICO 5.19 Freqncia de ocorrncia de ovos viveis e no viveis ......................................................... 116
GRFICO 5.20 Percentagem de ocorrncia de ovos viveis e no viveis ..................................................... 116
GRFICO 5.21 Concentraes de coliformes totais no esgoto bruto e nos efluentes do reator anaerbio e das
rampas (Fase 2) ........................................................................................................................................... 120
GRFICO 5.22 Concentraes de Escherichia coli no esgoto bruto e nos efluentes do reator anaerbio e das
rampas (Fase 2) ........................................................................................................................................... 121

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INTRODUO

1 INTRODUO
de conhecimento amplo a crise que atravessa o saneamento no Brasil, conforme
identificado por pesquisas realizadas pela ABES e pelo IBGE no final dos anos 80 e 90. Os
dados referentes ao esgotamento sanitrio so alarmantes, indicando ndices muito baixos de
cobertura por redes coletoras (com atendimento de apenas 30% da populao) e um
percentual de municpios que possuem estaes de tratamento inferior a 10% (BARROS et
al., 1995).
Hoje em dia o que se observa uma grande disparidade no acesso que diferentes populaes
tm aos sistemas de saneamento e s condies dignas de sobrevivncia em geral. Nos pases
em desenvolvimento, muitas vezes as condies de sade pblica esto aqum do que seria
aceitvel e sabe-se perfeitamente que a inexistncia de servios bsicos de saneamento tem
repercusses negativas sobre a sade pblica (SOCCOL, 1999).
Historicamente, os sistemas de tratamento de esgotos sanitrios foram concebidos para
remover constituintes fsicos e impurezas qumicas dos efluentes. A preocupao quanto
destruio de organismos patognicos ocorreu posteriormente, quando se descobriu a
correlao entre estes organismos e a transmisso de doenas. Segundo Feachem et al. (1983),
o desenvolvimento dos sistemas de saneamento ocorreu antes que houvesse conhecimento
suficiente acerca do papel dos esgotos na transmisso de doenas.
Doenas infecciosas causadas por patgenos so a principal causa de morbidade humana pelo
mundo inteiro, particularmente em pases em desenvolvimento, onde crianas abaixo de cinco
anos so as que mais sofrem com os riscos de infeco. As doenas so usualmente
transmitidas via alimentos contaminados, gua no tratada e esgotos dispostos
inadequadamente.
As helmintoses mais freqentes no mundo so a ascariose, a ancilostomose, a tricurase e a
enterobiose (OMS, 1990; citado por SOCCOL et al., 1999), com incidncias variando de 103
a 900 milhes de casos por ano (vide GRFICO 1.1). Essas helmintoses afetam o homem,
tanto em pases desenvolvidos quanto em pases em desenvolvimento, contudo, a maior
prevalncia da doena e maior intensidade da infeco so usualmente encontradas em pases
em desenvolvimento.
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INTRODUO

Do ponto de vista mdico e social, essas helmintoses representam importantes problemas de


sade pblica que, alm de ameaarem constantemente a vida e bem-estar de grande parte da
populao, se caracterizam pelo prolongado estado mrbido, causando considerveis perdas
econmicas com assistncia mdica, reduo da produtividade, ou incapacitao para o
trabalho (REY, 1991).

5%
18%
41%

36%

Ascaridase (900 milhes/ano)

Ancilostomase (800 milhes/ano)

Tricurase (400 milhes/ano)

Enterobase (103 milhes/ano)

GRFICO 1.1 - Helmintoses mais freqentes no mundo


Fonte: OMS (1990)

Diante do enorme dficit sanitrio existente no Brasil, aliado ao pssimo quadro


epidemiolgico e ao perfil scio-econmico das comunidades brasileiras, constata-se a
necessidade de sistemas simplificados de tratamento dos esgotos. Esses sistemas devem
conjugar baixos custos de implantao e operao, simplicidade operacional, ndices mnimos
de mecanizao e sustentabilidade do sistema como um todo, alm de serem socialmente
aceitveis e garantirem uma proteo adequada sade pblica.
Nesse sentido, o tratamento dos esgotos e a produo de efluentes adequados do ponto de
vista sanitrio e ambiental podem contribuir para o controle de helmintoses e doenas
entricas alm de possibilitar a reduo da contaminao do meio ambiente (STOTT et al.,
1996).
Uma das principais alternativas hoje utilizadas para o tratamento de esgotos domsticos no
Brasil tem sido o tratamento anaerbio, principalmente atravs de reatores de manta de lodo.
So vrias as caractersticas favorveis desses sistemas, entre elas o baixo custo, simplicidade
operacional e baixa produo de slidos. Aliado a tais caractersticas esto o clima e as
condies ambientais propcias do Brasil, que oferecem durante todo o ano temperaturas
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INTRODUO

relativamente elevadas, acelerando o mecanismo de tratamento. Entretanto, mesmo com


tantas caractersticas favorveis e propcias, o tratamento anaerbio demonstra grande
dificuldade em produzir um efluente dentro dos padres estabelecidos pela legislao
ambiental do pas. Da se observa a grande necessidade do uso de sistemas de ps-tratamento
de efluentes de reatores anaerbios, adequando tal efluente aos requisitos da legislao
ambiental. A funo do ps-tratamento, portanto, complementar a remoo de matria
orgnica (DBO e DQO) que se iniciou no reator anaerbio e remover os nutrientes e
patgenos que no foram removidos durante a fase inicial do tratamento.
A disposio de esgotos no solo, reconhecida como uma prtica bastante antiga de tratamento
de guas residurias, tem se afigurado, atualmente, como uma das principais alternativas para
o ps-tratamento de efluentes gerados por reatores anaerbios, pois constitui um mtodo
natural de tratamento bastante eficiente, que envolve mecanismos fsicos, qumicos e
biolgicos de remoo da carga poluidora (PAGANINI, 1997).
O tratamento adequado, o destino final e o possvel reso dos efluentes das estaes de
tratamento de guas residurias, na agricultura e aquacultura, principalmente em locais onde
ocorrem baixos ndices de pluviosidade e especialmente onde os recursos hdricos so
escassos, tm sido uma das maiores preocupaes no saneamento bsico.
Em substituio irrigao de reas pblicas com guas de abastecimento, os esgotos,
tratados ou no, tm um importante papel como recurso a ser gerenciado, pois, alm de
preservar os mananciais como fonte de gua para abastecimento e outros usos prioritrios, o
reso dos esgotos apresenta tambm vantagens econmicas.
A gua residuria, alm de conter gua, matria orgnica e nutrientes, inevitavelmente contm
patgenos oriundos das fezes humanas, e uma grande variedade desses patgenos esto
relacionados com doenas que afetam o homem e os animais. Desses patgenos
potencialmente encontrados em guas residurias domsticas esto: vrus, bactrias,
protozorios e helmintos. O conhecimento dos agentes patognicos, da sua viabilidade e de
sua sobrevivncia em diferentes ambientes (efluentes lquidos, lodo, solo, vegetais, etc.)
permite avaliar o potencial de risco de infeco a que o homem e outros animais esto
expostos.

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INTRODUO

Nesse sentido, o conhecimento das vias de infeco e do ciclo biolgico dos agentes
patognicos tambm contribuim para o entendimento da transmisso das doenas relacionadas
com a ausncia de servios de saneamento, passando a constituir um instrumento de
planejamento das intervenes, com vista otimizao de seu impacto sobre a sade.
Dos patgenos encontrados nos esgotos, ser dada nfase aos helmintos, devido ampla
ocorrncia de enteroparasitoses na populao humana e resistncia apresentada pelos seus
ovos no ambiente. A pesquisa de ovos de helmintos em amostras de guas residurias, alm
de importante tambm recomendada em estudos e programas de avaliao de
monitoramento da qualidade de efluentes utilizados na irrigao.
Para efeito deste trabalho, ser estudada a ocorrncia e a viabilidade de ovos de helmintos em
um sistema de disposio de esgotos no solo por escoamento superficial, como pstratamento de efluentes de reatores anaerbios.

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OBJETIVOS

2 OBJETIVOS
2.1

Objetivos gerais

O presente trabalho foi desenvolvido em 2 fases, objetivando avaliar a eficincia de um


sistema de tratamento de esgotos domsticos em relao remoo de ovos de helmintos.
Na Fase 1, buscou-se avaliar a eficincia de um sistema constitudo de um reator anaerbio
(em escala real) e de rampas de aplicao superficial no solo (em escala de demonstrao),
em relao remoo de ovos de helmintos. Nesta fase, o sistema de tratamento foi operado
em regime hidrulico permanente (vazo constante ao longo do dia), porm com diferentes
taxas de aplicao em cada rampa.
Na Fase 2, buscou-se tambm avaliar a eficincia do sistema de tratamento em relao
remoo de ovos de helmintos, no entanto o sistema passou a ser constitudo de um reator
anaerbio em escala de demonstrao, mantendo-se as rampas de aplicao superficial no
solo como unidades de ps-tratamento. Nesta fase, o sistema de tratamento foi operado em
regime hidrulico transiente (vazo varivel ao longo do dia), tendo sido ainda introduzidas
algumas modificaes nas unidades de tratamento, conforme descrito no Captulo 4.

2.2

Objetivos especficos

Implementao e utilizao da metodologia de BAILENGER (1979) modificada por


AYRES & MARA, 1996 para a identificao e enumerao de ovos de helmintos;
Implementao e utilizao da tcnica de corantes biolgicos para a avaliao da
viabilidade de ovos de helmintos;
Avaliao da eficincia do sistema de tratamento de esgotos domsticos, composto de um
reator anaerbio tipo UASB (em escala real) e de rampas de aplicao superficial no solo
(em escala de demonstrao), em relao remoo de ovos de helmintos;
Avaliao da eficincia do sistema de tratamento de esgotos domsticos, composto de um
reator UASB compartimentado (em escala de demonstrao) e rampas de aplicao
superficial no solo (em escala de demonstrao), em relao remoo de ovos de
helmintos;

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OBJETIVOS

Identificao das espcies de parasitos presentes nas amostras de esgotos brutos e de


esgotos tratados;
Estimativa da frao vivel de ovos de helmintos, com a finalidade de verificar o
percentual de ovos que eventualmente completariam seu ciclo biolgico.
Complementarmente a esses objetivos especficos, buscou-se ainda avaliar a eficincia do
sistema de tratamento de esgotos domsticos, durante a Fase 2, em relao remoo de
coliformes totais e Escherichia coli. Tal avaliao objetivou fornecer subsdios adicionais
visando anlise dos resultados em relao s diretrizes da OMS para reso de guas
residurias tratadas.

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REVISO DA LITERATURA

3 REVISO DA LITERATURA
3.1

Reso de guas residurias

3.1.1

Breve contextualizao

O reso de guas residurias na agricultura e na piscicultura uma prtica centenria e


corrente em vrias partes do mundo. Diversas publicaes referem-se s experincias
pioneiras das fazendas de esgoto, ainda no sculo XIX, em pases como Austrlia, ndia,
Inglaterra, Estados Unidos e Mxico; empregados mais no sentido de controle de poluio do
que propriamente com intuito de produo agrcola (SHUVAL et al., 1986; MARA &
CAIRNCROSS, 1993).
Em diversos pases, o reso uma prtica bastante disseminada, seja como parte integrante de
polticas oficiais de gesto de recursos hdricos e programas de saneamento, ou de forma
espontnea, sem o devido controle. Alguns exemplos bem ilustrativos so encontrados em
Israel, onde cerca de 80% dos esgotos sanitrios so utilizados na produo agrcola,
principalmente no cultivo de algodo; alguns projetos so altamente tecnificados, apoiando-se
em mtodos modernos de irrigao (BASTOS, 1996).
Outro exemplo encontrado na Austrlia, onde a Werribee Farm, em funcionamento desde
1897, opera um sistema de tratamento por escoamento superficial no solo, recebendo cerca de
250.000 m3/dia de efluentes em 10.000 ha e permitindo a pastagem de um rebanho de 13.000
bovinos e 3.000 ovinos. No menos notvel a experincia da cidade do Mxico, onde em
1995 um total de 102 m3/seg de guas residurias eram utilizados na irrigao de 257.000 ha
de terras em todo o pas (JIMNEZ et al., 2000). Desse total de guas residurias, est
includa, tambm, uma parcela de guas pluviais que so distribudas atravs de um complexo
sistema de canais e reservatrios. As principais culturas irrigadas so forrageiras e
cerealferas, no sendo permitido o cultivo de hortalias.
Outros exemplos de reso planejado e controlado por autoridades governamentais so os da
Arbia Saudita e Tunsia, que apresentam como meta o reso da totalidade de efluentes
domsticos produzidos. Enquanto o primeiro adota rgidos padres de tratamento e controle
rigoroso da distribuio e aplicao dos efluentes tratados (tratamento tercirio associado

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REVISO DA LITERATURA

restrio de culturas irrigadas), no segundo convivem o reso planejado, com efluentes


tratados, e o espontneo, com guas residurias brutas (BASTOS, 1996).
Na Amrica Latina, a situao atual do reso muito diversificada. No Peru, se encontra um
bom exemplo de transio entre o reso indiscriminado e o reso controlado. O Programa
Nacional de Reso de guas Residurias para Irrigao prev a implantao por etapas de
18.000 ha de rea irrigada. Entretanto, dos 4.300 ha hoje irrigados, cerca de 70% dessas guas
so utilizadas para o cultivo de hortalias, em sua maioria com guas residurias brutas.
Entende-se ser urgente a restrio desses cultivos, at que um sistema de tratamento de guas
residurias seja implantado. Nesse pas, vale a pena destacar a estao experimental (lagoas
de estabilizao) de San Juan de Miraflores, coordenada pelo CEPIS (Centro Panamericano
de Engenharia Sanitria e Cincias do Ambiente), objeto de pesquisa desde 1977 para
tratamento e reso, dos efluentes na agricultura, piscicultura e atividades agropecurias
(BASTOS, 1996).
No caso do Chile, todo o esgoto de Santiago utilizado para irrigao em reas vizinhas
cidade. Teoricamente, esse seria um caso de reso indireto, pois, em tese, a gua utilizada
para irrigao provm dos corpos receptores contaminados com guas residurias. Entretanto,
em pocas de estiagem, alguns dos corpos receptores so praticamente esgotos a cu aberto,
configurando, na prtica, o reso direto para irrigao de hortalias (BASTOS, 1996).
Em relao ao Brasil, pouco ou nada se tem registrado sobre o reso direto de efluentes sem
tratamento com fins agrcolas, no significando, no entanto, que essa prtica no ocorra. No
caso do reso indireto, que utiliza as guas superficiais contaminadas, com certeza prtica
disseminada, ocorrendo de forma indiscriminada, e impondo grandes riscos sade pblica,
em funo da quase inexistncia de tratamento de esgotos na maioria dos municpios
brasileiros.
No Brasil, as primeiras experincias com aplicao de esgotos com a inteno de fertilizao
do solo de canaviais foram feitas no estado do Pernambuco em 1918 (ARAJO, 1998). So
poucas as experincias de reso planejado no Brasil, podendo se destacar a irrigao de capim
e cana-de-acar com efluentes tratados do Sistema Integrado de Tratamento de Efluentes
Lquidos do Polo Petroqumico do Sul SITEL (KNIG, 1998). Outro exemplo refere-se

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REVISO DA LITERATURA

cidade de Populina/SP, que trata os esgotos em um sistema de aplicao superficial no solo,


com reso da biomassa vegetal para alimentao animal (PAGANINI, 1997).
Os poucos exemplos citados demonstram a diversidade de situaes de reso em algumas
partes do mundo e revelam que, mesmo com o advento do reso planejado e tecnificado,
ainda persistem situaes que no so ideais, ou de total descontrole, com a imposio de
srios riscos sade pblica. Tais situaes no podem ser creditadas unicamente a meros
descasos de autoridades, pois muitas das vezes so fruto de imposies econmicas, escassez
de gua e necessidade de subsistncia de pequenos agricultores (BASTOS, 1996).
Um panorama mundial de reso de guas residurias na irrigao apresentado na Tabela 3.1,
a seguir.
Tabela 3.1 - reas irrigadas com guas residurias (panorama mundial)
Pas
rea (ha)
Amrica Latina
400.000
Argentina (Mendoza)
3.700
Austrlia (Melbourne)
10.000
Arbia Saudita
2.800
Brasil
?
Chile (Santiago)
16.000
China
1.300.000
Estados Unidos
14.500
ndia
73.000
Israel
8.800
Kuwait
12.000
Mxico (DF)
90.000
Peru (Lima)
6.800
Tunsia
4.500
Fonte: BASTOS (1998)

Dessa forma, para que o reso seja vivel, aproveitando-se os melhores aspectos desta prtica,
esse deve ser praticado de forma controlada, objetivando-se eliminar o reso clandestino e o
indireto, proteger as guas superficiais e estabelecer um reso planejado, com medidas de
segurana para os trabalhadores e suas famlias, bem com para os consumidores em geral.

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REVISO DA LITERATURA

3.1.2

Principais usos e benefcios

Entre os diversos usos para as guas residurias tratadas destacam-se (SANTOS et al., 1993):
a manuteno das vazes mnimas de cursos dgua, possibilitando a diluio dos esgotos
lanados em guas superficiais;
a irrigao de reas verdes, parques, jardins pblicos, campos de esporte e lagos
ornamentais;
os usos industriais, como refrigerao, alimentao de caldeiras, lavagem de gases etc.;
a aquicultura, com o abastecimento de reservatrios para a criao de peixes;
a agricultura, com a irrigao de diferentes culturas e forrageiras;
a pecuria, com a dessedentao de animais;
a recarga de aqferos subterrneos;
o reflorestamento.
O reso de guas residurias na agricultura tem aumentado consideravelmente no mundo,
especialmente em reas ridas e semi-ridas. Isso se deve, principalmente, s limitaes das
fontes de gua, ao aumento da demanda urbana por gua potvel, necessidade crescente de
produo de alimentos e ao reconhecimento do valor nutricional dos efluentes de esgotos
(STRAUSS & BLUMENTHAL, 1989, citado por STOTT et al., 1996).
A prtica do reso de esgotos apresenta inegveis atrativos de ordem ambiental (reciclagem
de nutrientes, controle de poluio) e econmica (economia de fertilizantes, fonte alternativa
de gua, aumento da produo agrcola), porm est associada a alguns inconvenientes de
ordem sanitria e limitaes de manejo agronmico tais como:
a presena de microrganismos patognicos pode provocar riscos sade pblica;
a presena de alguns ons especficos (Sdio, Boro e Cloretos) pode provocar toxidez a
algumas culturas;
os teores elevados de sais dissolvidos podem provocar problemas de salinizao do solo;
o nitrognio pode apresentar-se em teores excessivos para culturas pouco tolerantes;

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10

REVISO DA LITERATURA

Essas condies conferem alguns riscos que podem resultar na reduo das taxas de
crescimento da planta, na reduo da produtividade, na diminuio da permeabilidade do solo
e, em casos mais severos, na perda total da plantao. Nesse sentido, no monitoramento de
efluentes com fins agrcolas outros parmetros devem ser includos, como: condutividade
eltrica, sdio, clcio, boro, razo de adsoro de sdio - RAS, diferentes formas de
nitrognio e fsforo, cloretos e metais pesados. Todavia, esses parmetros no devem ser
considerados isoladamente, necessrio considerar as condies intervenientes como um
todo, pois os fatores alteram-se acentuadamente de local para local, os quais podem vir a
amenizar ou acentuar os efeitos da disposio de esgotos no solo (PAGANINI, 1997).
A utilizao de guas residurias na agricultura pode propiciar um grande incremento na
produo, uma vez que fornece os nutrientes necessrios s plantas, principalmente o
nitrognio e o fsforo. Naturalmente, o nvel de incremento de produo depender de uma
srie de fatores, como tipo de cultura, disponibilidade de nutrientes nos esgotos e das
demandas nutricionais das plantas, alm das formas de manejo anteriormente praticadas, a
exemplo da utilizao ou no de adubao qumica.
Vrios estudos demonstram as enormes economias de fertilizantes, ou mesmo sua dispensa,
decorrentes da ferti-irrigao com guas residurias. Por exemplo, Marecos do Monte (1995),
citado por Bastos (1996), em estudos conduzidos em Portugal, registrou produes superiores
de sorgo e girassol irrigados com efluentes de lagoas de estabilizao, comparadas s obtidas
pela irrigao com gua e fertilizao qumica, para essas mesmas culturas.
No entanto, no Peru, em estudos realizados pelo CEPIS (LON e MOSCOSO, 1995, citados
por BASTOS, 1996), no existem referncias de que a produtividade tenha aumentado pelo
fato da utilizao de guas residurias. A produo obtida para diversas culturas (feijo,
brcoli, repolho, milho, dentre outras) foi a mesma, quando comparada irrigao com
efluentes de lagoas de estabilizao e com gua e diversas doses de fertilizantes.

3.1.3

Aspectos epidemiolgicos

Estudos epidemiolgicos tm indicado que graves doenas podem estar associadas


reutilizao de guas residurias parcialmente tratadas e, particularmente, com a utilizao
dessas sem qualquer tratamento.

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11

REVISO DA LITERATURA

Talvez seja o aspecto sanitrio o mais polmico em relao ao reso de guas residurias. O
entendimento que a utilizao de esgotos para irrigao envolve riscos sade parece ser
unnime; a controvrsia reside na definio dos riscos aceitveis, ou seja, na definio dos
padres de qualidade e graus de tratamento de esgotos que garantam a segurana sanitria
(BASTOS, 1996).
Os estudos epidemiolgicos associados ao uso das guas residurias na agricultura, em
algumas regies do mundo, e em particular no Mxico, tm evidenciado que existem riscos de
enfermidades diarricas e infeces intestinais ocasionadas por vrus, bactrias, protozorios e
helmintos. Os resultados desses estudos confirmaram que a exposio s guas residurias
brutas aumentou os riscos de infeco por helmintos em geral, e em especial pelo nematide
Ascaris lumbricoides, entre crianas e adultos nas comunidades estudadas; e alguns destes
riscos no diminuram pelo fato do esgoto ser parcialmente tratada.
Esses estudos avaliam o risco sade associado a essas prticas, assim como sugerem
orientaes para o estabelecimento de restries de culturas, padres para a quantidade de
microrganismos indicadores de contaminao fecal e ovos de helmintos em guas utilizadas
na irrigao. No entanto, as restries quanto aos tipos de cultivo que podem ser regados com
guas residurias tratadas foram insuficientes para proteger a sade das famlias dos
trabalhadores agrcolas expostos s guas residurias (BLUMENTHAL et al., 1989;
SHUVAL et al., 1986a e SCHWARTZBROD, 1989).
No Brasil, h pouco ou nenhum conhecimento acumulado sobre o assunto. Existem algumas
referncias bibliogrficas com estudos sobre a qualidade de guas utilizadas para irrigao e
de hortalias comercializadas em mercados pblicos, mas praticamente inexistem estudos
sobre a avaliao dos riscos sanitrios decorrentes do reso com fins agrcolas (CEAGESP,
1991; CEBALLOS et al., 1993; BASTOS & PERIN, 1995; COELHO, 1998).
Como mencionado anteriormente, a exposio dos trabalhadores agrcolas a guas residurias
brutas ou parcialmente tratadas aumenta os riscos de infeco pelos helmintos, mais
propriamente pelos da classe Nematoda (Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura e
ancilostomdeos). Isso decorre dos seguintes fatores principais:
os ovos possuem um perodo de embrionamento no solo antes de atingirem o hospedeiro,
com a capacidade de se tornarem viveis e garantindo um potencial infectivo;
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12

REVISO DA LITERATURA

os ovos persistem muito tempo no meio ambiente, com um perodo de latncia que varia
de acordo com a espcie;
no necessitam de hospedeiro intermedirio para completar o ciclo biolgico.
Dessa forma, a importncia de estud-los deve-se relao direta com o tipo de infeco que
causam, seja pela inalao e ingesto de ovos viveis ou pela penetrao de larvas filariides
pela pele. Porm, o risco para a sade humana depende do ciclo de vida e da rota de
transmisso dos parasitos, alm das condies ambientais que podem favorecer ou no a
sobrevivncia dos mesmos.
Na prtica do reso de guas residurias, torna-se importante determinar no somente a
quantidade de ovos de helmintos presentes, como tambm a frao desses ovos que possuem a
possibilidade de completar seu ciclo biolgico (frao potencialmente vivel). Isso porque a
gua passa pelo solo e pelos cultivos, acumulando-se conforme se aplicam as lminas de
gua, e possibilitando o desenvolvimento dos ovos de helmintos at a etapa infectiva. Como
conseqncia, so impostos riscos para a sade dos consumidores e dos trabalhadores
agrcolas, incluindo sua famlia, alm de outras pessoas que tenham contato primrio com
reas verdes.
muito importante controlar a disseminao destes parasitos, no somente do ponto de vista
da ingesto de produtos agrcolas, mas tambm em reas onde se tenha contato primrio com
solos cultivados com guas residurias brutas ou parcialmente tratadas. Nos campos
desportivos e parques pblicos, por exemplo, se somam os aportes de ovos de helmintos por
irrigao com os provenientes dos excrementos de ces e felinos domsticos, que constituem
a chamada infeco geohelmntica (GALVN & de VICTORICA, 1998a).
Estudos recentes tm demonstrado que, nos solos de parques recreativos, os ovos de
helmintos, especificamente de Toxocara sp e Toxocaris sp, se distribuem em um estrato que
vai da superfcie at os primeiros 12 cm de profundidade, particularmente nos primeiros 8 cm.
Entretanto, a maior parte dos ovos se localiza nos primeiros 3 cm de profundidade do solo,
com uma concentrao de 1,4 ovo/100 g de solo, com mais de 50% infectivos (OLORCAIN,
1994, citado por GALVN & de VICTORICA, 1998a).

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13

REVISO DA LITERATURA

Estes e outros estudos confirmam que necessrio estabelecer um sistema de vigilncia direta
dos ovos de helmintos, j que estes apresentam as seguintes caractersticas (BUITRN &
GALVN, 1995; ORTA et al., 1995; citados por GALVN & de VICTORICA, 1998):
suas doses infectivas so baixas (requerem poucos ovos para causar infeco nos
humanos);
apresentam pelo menos quatro formas de transmisso (direta, pelo solo, por alimentos e
por moluscos);
os sistemas de tratamento convencionais para guas residurias no so efetivos para
destru-los e no necessariamente previnem a transmisso;
at o momento no foram estabelecidas correlaes confiveis entre parmetros fsicos,
qumicos ou bacteriolgicos com a presena e concentrao de ovos de helmintos;
os hospedeiros finais (neste caso os humanos) apresentam baixa imunidade;
podem permanecer viveis no ambiente por perodos que vo de dias a anos.
Entretanto, a simples presena do agente infeccioso nas guas residurias no implica,
necessariamente, na imediata transmisso de doenas. A sua presena caracteriza apenas um
risco potencial. O risco real de um indivduo ser infectado depende da combinao de uma
srie de fatores, dentre os quais (MARA & CAIRNCROSS, 1990, citado por BASTOS,1998):
resistncia dos organismos patognicos ao tratamento de esgotos e s condies
ambientais;
suscetibilidade e grau de imunidade do hospedeiro;
grau de exposio humana aos focos de transmisso;
dose infectiva;
patogenicidade.
Na tentativa de identificar os riscos potenciais, diversos autores recorreram sistematizao
das principais caractersticas dos diversos grupos de agentes etiolgicos e ao tempo de
sobrevivncia desses, no meio ambiente (solo, fezes, gua, superfcie dos vegetais etc.), na
busca de evidncias de transmisso de doenas aos trabalhadores rurais e consumidores.

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14

REVISO DA LITERATURA

Com base neste levantamento, Shuval et al. (1986b) elaboraram a seguinte classificao para
microrganismos patognicos em ordem decrescente, segundo sua capacidade de impor riscos
sanitrios:
alto risco (helmintos: Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura, ancilostomdeos);
mdio risco (bactrias e protozorios);
baixo risco (vrus).
Nesse sentido, as infeces virticas foram identificadas como as de menor risco, tendo como
justificativa a facilidade com que so transmitidas por outras vias onde prevaleam baixas
condies sanitrias e de higiene pessoal, alm do que, conferem imunizao significativa.
Em relao s bactrias e protozorios, o tempo de sobrevivncia no meio ambiente bem
menor que dos ovos de helmintos, alm de necessitarem de doses infectivas bem maiores para
causar infeco. Inversamente, os helmintos foram enquadrados no outro extremo, j que
apresentam baixa dose infectiva, longa sobrevivncia no meio ambiente e imunidade
insignificante.
A transmisso de doenas atravs da reutilizao de guas residurias na irrigao pode se dar
pelo contato direto com efluentes ou pelo consumo de alimentos contaminados. Desta forma,
pode-se identificar quatro grupos possveis de serem classificados como de risco:
consumidores de vegetais contaminados;
consumidores de produtos de animais que pastam em reas irrigadas com efluentes;
trabalhadores rurais;
pblico residente nas proximidades de reas irrigadas com efluentes.
Como o modelo epidemiolgico anteriormente descrito eminentemente terico, Shuval et al.
(1986b) realizaram uma extensa reviso bibliogrfica em busca de evidncias concretas (risco
real) de transmisso de doenas entre os quatro grupos citados. Porm, deve-se ressaltar uma
importante concluso dos autores de que todos os casos comprovados de transmisso de
doenas estavam relacionados com a utilizao de esgotos brutos ou tratados parcialmente. As
principais evidncias encontradas podem ser resumidas como a seguir (BASTOS, 1998):

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15

REVISO DA LITERATURA

pblico consumidor de vegetais contaminados: existem evidncias concretas de


transmisso de ascariose, tricurase, clera e possivelmente de febre tifide;
pblico consumidor de produtos animais: evidncias concretas de contaminao do gado
(tenase e cisticercose), mas a contaminao indireta do pblico no pde ser comprovada;
trabalhadores

rurais:

transmisso

comprovada

de

ancilostomose,

ascaridasee

possivelmente infeces bacterianas e virticas;


pblico residente nas proximidades de reas irrigadas: em geral no h provas de
transmisso de doenas, nem mesmo pela via mais provvel que so os aerossis
provocados pela irrigao por asperso. Existem indcios duvidosos da transmisso de
vrus.
A avaliao criteriosa das evidncias disponveis parece ento confirmar o modelo
epidemiolgico desenvolvido, pois a previso do alto risco de transmisso de nematides
intestinais confirmada em diversos estudos. Em contrapartida, as evidncias de transmisso
de infeces bacterianas e, principalmente virticas, so escassas e em sua maioria nem to
bem fundamentadas. De qualquer forma, a classificao sugerida para microrganismos
patognicos mostra-se apropriada para as condies normalmente encontradas em pases em
desenvolvimento, onde os parasitos intestinais so geralmente endmicos, nveis
significativos de imunidade s doenas virticas so desenvolvidos nos primeiros anos de
vida e as infeces bacterianas encontram os mais variados focos de transmisso.
Desse modo, necessrio incluir os ovos de helmintos em sistemas de vigilncia sanitria,
uma vez que a sua distribuio cosmopolita. Porm, devem ser includos em tal sistema os
helmintos representativos da regio geogrfica, j que a sua incidncia localizada por regio
e inclusive por grupos de populao.
De acordo com o modelo epidemiolgico proposto por Blumenthal et al. (1989), a preveno
pode ser feita aplicando-se aes que interrompam os stios chave de fluxo do ciclo de
transmisso dos helmintos. Estas aes se referem: i) ao tratamento das guas residurias; ii)
restrio de culturas que podem ser irrigadas; iii) s prticas de irrigao; e iv) ao controle da
exposio humana. Aes que aplicadas isoladamente no evitam a transmisso, mas que em
diferentes combinaes, e dependendo das condies particulares da regio onde sero
aplicadas, podem produzir resultados seguros.

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REVISO DA LITERATURA

Essa abordagem, considerando as evidncias epidemiolgicas disponveis e o conceito de


risco real, permitiu a formulao de critrios mais flexveis para o reso de gua residuria na
agricultura, exemplo das recomendaes da Organizao Mundial de Sade (WHO, 1989),
apresentadas na Tabela 3.2, a seguir.
Tabela 3.2 - Diretrizes da Organizao Mundial de Sade de qualidade microbiolgica
recomendada para esgotos tratados utilizados para a irrigao de culturas agrcolas(a)
Categoria

Condies de
Reso

Grupo de
exposio

Nematides Coliformes Nvel de tratamento esperado


intestinais
fecais
para se alcanar a qualidade
biolgica requerida
(ovos/L)(b) (No/100mL)(c)
Irrigao de vegetais Trabalhadores,
Srie de lagoas de estabilizao
consumidos crus,
projetadas para se alcanar a
A
Consumidores,
1
1000(d)
campos de esporte,
qualidade biolgica indicada, ou
Pblico
parques pblicos
tratamento equivalente
Reteno em lagoas de
Irrigao de culturas
estabilizao por 8-10 dias ou
de cereais, culturas
Sem
B
industriais, culturas Trabalhadores
recomendao remoo equivalente de
1
forrageiras, pastagens
de padro helmintos e coliformes fecais
e rvores (e)
Irrigao localizada
Pr-tratamento, de acordo com
de culturas na
No h
No se
No se
os requisitos da tecnologia de
C
categoria B sem
aplica
Aplica
irrigao empregada, mas no
exposio de
inferior sedimentao primria
trabalhadores e do
pblico em geral
Fonte: Adaptado de WHO (1989) e BASTOS (1998)
Notas:
a. Em situaes especficas, fatores epidemiolgicos, socioculturais e ambientais locais devem ser levados em
considerao e as diretrizes modificadas de acordo com as necessidades;
b. Espcies de Ascaris, Trichuris, Necator e Ancylostoma, mdia aritmtica do nmero de ovos por litro;
c. Mdia geomtrica do nmero de CF por 100mL, durante o perodo de irrigao;
d. Para a irrigao de parques e jardins onde o acesso de pblico permitido, deve-se utilizar um padro mais
restritivo ( 200 coliformes fecais por 100 mL);
e. No caso de rvores frutferas, a irrigao deve ser interrompida duas semanas antes da colheita e nenhum
fruto deve ser apanhado do cho. A irrigao por asperso no deve ser utilizada.

A WHO (1989) enfatiza ainda a utilizao de lagoas de estabilizao, como um processo de


tratamento de baixo custo e altamente eficiente na remoo de microrganismos patognicos.
Pretende assim, que suas recomendaes estejam orientadas primordialmente para pases em
desenvolvimento, dado o quadro epidemiolgico-sanitrio e as possibilidades econmicas
encontradas nos mesmos.
Os critrios da WHO (1989) foram desenvolvidos muito com base no conhecimento sobre a
eficincia das lagoas de estabilizao na remoo de patgenos, onde diversos estudos
confirmaram a plena capacidade das lagoas em produzir efluentes com 103 coliformes
fecais/mL e que com essa qualidade, a presena de ovos de helmintos e outros patgenos (no
caso vrus e bactrias) seria pouco provvel e garantida para cistos de protozorios.
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REVISO DA LITERATURA

Os ovos de helmintos so eficientemente removidos por sedimentao e o critrio 1 ovo de


helminto/L pode ser consistentemente atendido em lagoas em srie, se bem dimensionadas e
operadas. Nesse sentido, o padro ovo de helminto, que refere-se mais estreitamente aos ovos
de Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura e ancilostomdeos, um indicador da remoo de
outros microrganismos sedimentveis (ex.: outros ovos de helmintos, incluindo ovos de
Taenia sp, Schistosoma sp e cistos de protozorios). Entretanto, Grimason et al.(1993)
alertam para o risco da simplificao deste conceito, j que os cistos de protozorios possuem
velocidade de sedimentao um pouco inferior e os mtodos para deteco destes
microrganismos em guas residurias ainda so precrios. Desde ento, vrios estudos
questionam a suficincia de 8 a 10 dias de tempo de deteno para se obter um efluente com
1 ovo de helminto/L (CRISPIM & BARBOSA, 1995; GRIMASON et al., 1995, citado por
BASTOS, 1998).
Mais recentemente, Blumenthal et al. (1996) publicaram os resultados de estudos
epidemiolgicos realizados no Mxico e no Brasil, onde concluram que o tratamento das
guas residurias at um nvel de 1 ovo de nematide/L suficiente para proteger os
consumidores, mas no necessariamente os trabalhadores e suas famlias, principalmente as
crianas. O risco ainda maior quando esto presentes na gua residuria ovos viveis que
tm o potencial de embrionar no solo e nos cultivos, quando os sistemas de tratamento no
so estveis o suficiente na remoo e quando existe uma recontaminao da gua tratada por
aportes de gua sem tratamento.
Desta maneira, para garantir a proteo dos trabalhadores e dos consumidores deve existir um
monitoramento freqente dos sistemas de tratamento para avaliar a presena e a viabilidade de
ovos de helmintos, e de outros indicadores microbiolgicos, alm da adoo de medidas
integradas de manejo que passem pela escolha da tcnica adequada de irrigao e do tipo de
cultura a ser utilizada no solo.
No entanto, para a prtica do reso deve-se conhecer perfeitamente o nvel de contaminao
das guas que sero utilizadas, de forma a estabelecer medidas adequadas de proteo e
tecnologias de irrigao apropriadas para minimizar os impactos negativos. Segundo Mara &
Cairncross (1989), as medidas de proteo sade podem ser reunidas em 4 grupos:

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REVISO DA LITERATURA

tratamento de esgotos;
restrio das culturas;
escolha dos mtodos de irrigao;
controle da exposio humana infeco.
Conclui-se ento que as melhores medidas sanitrias para dispor de uma irrigao sem riscos,
qualquer que seja a fonte de gua, se referem reduo do nmero de patgenos no meio
ambiente, atravs de medidas integradas que incluem o tratamento dos esgotos, a proteo das
fontes de gua e a educao sanitria (LEON & CAVALLINI, 1996, citado por KNIG,
1998).

3.2

Helmintos

3.2.1

Introduo

Os helmintos ou vermes constituem um grupo muito numeroso, com espcies de vida livre e
espcies parasitas, sendo os representantes desse grupo distribudos em trs filos:
Platyhelminthes (vermes achatados dorsoventralmente);
Aschelminthes (vermes com o corpo em geral de forma cilndrica);
Acanthocephala (vermes com o corpo cilndrico ou ligeiramente comprimido
lateralmente).
Dentre esses filos, de interesse para o presente trabalho o filo Aschelminthes, notadamente a
classe Nematoda, sendo abordadas apenas as espcies Ascaris lumbricoides, Trichuris
trichiura e ancilostomdeos (Ancylostoma duodenale, Necator americanus e Ancylostoma
ceylanicum).
Os helmintos intestinais, durante a fase parasitria, vivem no trato gastrointestinal do
hospedeiro (homem e/ou animal), e seus ovos chegam ao ambiente juntamente com as fezes.
As ocorrncias no homem so muito comuns, causando infeces que resultam em danos para
o hospedeiro. O grau de infeco e a natureza do parasito tm papel importante na
patogenicidade causada no hospedeiro. A capacidade patognica varivel, podendo-se
distinguir: agentes patognicos estritos (so freqentemente responsveis por afeces) e
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REVISO DA LITERATURA

agentes patognicos oportunistas (induzem a doena em caso de diminuio de imunidade do


hospedeiro).
No caso do homem, particularmente, influem no parasitismo os seguintes aspectos principais
(REY, 1991):
hbitos higinicos, comportamento, educao e grau de informao;
estado nutricional e imunolgico;
condies que o cercam;
poltica sanitria adotada por seus dirigentes.
Nem todos os helmintos apresentam interesse mdico e apenas alguns grupos apresentam uma
relao epidemiolgica de importncia capital no saneamento. Os nematides Ascaris
lumbricoides e Trichuris trichiura, e em especial os geo-helmintos que so os parasitos
transmitidos por solos contaminados por larvas de Necator americanus, Ancylostoma
duodenale e Strongyloides stercoralis, conferem maior interesse no contexto desse estudo,
pelo fato dos ovos e larvas desses parasitos, possurem um perodo de embrionamento e de
latncia no solo, antes de atingirem o hospedeiro.
Dependendo do ciclo biolgico ou da rota de transmisso de cada parasito, a contaminao
ocorre atravs da ingesto de ovos contendo a larva infectiva ou pela penetrao de larvas
infectivas atravs da pele do hospedeiro. A transmisso ocorre na maioria das vezes, atravs
de vrios veculos, especialmente pela ingesto de alimentos, gua, mos sujas, poeiras e
solos contaminados.
Os principais nematides de interesse sanitrio esto classificados na categoria III
(FEACHEM et al. 1983) que compreende os parasitos que no necessitam de hospedeiro
intermedirio, tendo como representantes dessa categoria as espcies Ascaris lumbricoides,
Trichuris trichiura e ancilostomdeos (Necator americanus e Ancylostoma duodenale). Alm
dos helmintos da categoria III, so tambm considerados helmintos de interesse sanitrio os
enquadrados na categoria IV e V. A categoria IV compreende os parasitos que necessitam de
hospedeiro intermedirio (sunos e bovinos), sendo os representantes desta categoria as
espcies Taenia solium e Taenia saginata. Os parasitos que se enquadram na categoria V

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REVISO DA LITERATURA

necessitam de um hospedeiro intermedirio aqutico (moluscos), tendo como representante o


gnero Schistosoma.
Os parasitos geralmente apresentam especificidade do hospedeiro e podem ser representados
esquematicamente como a seguir (SOCCOL, 1999):
especficos para um hospedeiro no caso de parasitos monoxnicos (necessitam de apenas
um hospedeiro para completar o ciclo biolgico), como Ascaris lumbricoides, Trichuris
trichiura, que so infectantes apenas para o homem;
especficos para os hospedeiros intermedirios no caso de parasitos heteroxnicos
(precisam de mais de um hospedeiro para completar o ciclo biolgico). Neste caso, o risco
direto para o hospedeiro intermedirio, mas, na seqncia, representam risco para o
hospedeiro definitivo. Exemplo disso o ovo de Taenia sp, que infectante para bovinos e
sunos (hospedeiros intermedirios) num primeiro instante, porm, se o homem
(hospedeiro definitivo), ingerir carne infectada destes animais vai desenvolver o parasito
adulto no intestino. No caso de Taenia solium, o homem pode ser tanto hospedeiro
intermedirio como hospedeiro definitivo. Para ser hospedeiro intermedirio ele deve
ingerir ovos de Taenia solium (atravs de verduras, frutas, mos contaminadas com ovos),
enquanto que para ser hospedeiro definitivo ele deve ingerir carne de suno contendo
Cysticercos cellulosae;
hospedeiros acidentais quando certos parasitos de animais, como por exemplo (Toxocara
canis), que parasitam habitualmente os ces. No entanto, o homem, ao ingerir ovos
larvados destes parasitos, ser hospedeiro acidental, uma vez que a evoluo do ciclo
abortiva. Porm o incio do ciclo, no homem, pode ter repercusso patolgica grave,
conhecida como larva migrans visceral.
Para cada helmintose, os riscos de infeco humana dependem das relaes ecolgicas que se
estabelecem em cada caso, podendo variar de lugar para lugar, ou periodicamente no mesmo
lugar. Evidentemente, h uma variabilidade na taxa de infeco nas respectivas populaes.
Entre os fatores de maior importncia para a distribuio e a prevalncia das helmintoses
encontram-se (REY, 1991; NEVES et al., 2000):
caractersticas genticas e fenotpicas, particularmente quanto suscetibilidade e
resistncia s infeces;
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REVISO DA LITERATURA

condies ambientais (temperatura, umidade e altitude favorveis);


os hospedeiros intermedirios e os definitivos desses parasitos;
presena de hospedeiros suscetveis apropriados;
sua distribuio geogrfica;
potencial bitico elevado;
migraes humanas;
densidade.
Alm disso, hbitos religiosos, falta de conhecimento e baixas condies de vida favorecem a
disseminao e podem elevar a prevalncia das parasitoses em determinadas regies. A
maioria das parasitoses ao mesmo tempo causa e conseqncia do subdesenvolvimento, no
sendo possvel dissociar a doena da subalimentao, da pobreza, e vice-versa. Portanto, a
importncia de um agente biolgico como causador de doena est intimamente ligado ao
status social do ambiente em que vive; e, para que permanea estvel numa populao, h
necessidade de que a mesma seja subdesenvolvida (NEVES et al. 2000).

3.2.2

Nematides

3.2.2.1 Caracterizao geral


Os nematides so vermes geralmente cilndricos e filiformes (do grego nema, nematos,
filamento), que apresentam um dos mais bem-sucedidos planos de organizao funcional
desenvolvidos pela natureza. O nmero de espcies existentes (estimado em cerca de 500
mil), a variedade de meios em que vivem e o tamanho geralmente considervel de suas
populaes so prova disso (REY, 1991).
Na maioria dos casos os sexos so separados, sendo que os espermatozides fecundam os
ovcitos em sua passagem pelo tero, onde se completa a formao do ovo. Na generalidade
dos casos, possuem dimorfismo sexual em maior ou menor grau, sendo as fmeas maiores que
os machos, sendo que a reproduo e o processo de atingir o hospedeiro so bastante
diversificados.
As localizaes mais freqentes de nematides humanos ocorrem no aparelho digestivo,
principalmente em sua luz ou nas vias excretoras das glndulas anexas. Os nematides podem
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22

REVISO DA LITERATURA

atravessar inclumes o tubo digestivo do homem e outros animais, podendo viver a


temporariamente e, inclusive, produzir manifestaes clnicas. No aparelho digestivo, do
duodeno ao reto, alojam-se muitas espcies de nematides, por ser um meio muito rico em
materiais nutritivos facilmente assimilveis. importante, tambm, como sede dos processos
que levam ecloso de ovos desses helmintos, com a presena de CO2 e de outros gases,
como nitrognio, hidrognio e metano.
No desenvolvimento ps-embrionrio os nematides passam por cinco estdios, sendo que na
passagem de um estdio para outro ocorre uma troca de cutcula. O embrio que se forma
dentro do ovo a larva de primeiro estdio L1, que se transforma em L2. Quando alcana o
estdio de larva infectante (geralmente L3), h necessidade de infectar o hospedeiro definitivo
para que ocorra a continuidade do desenvolvimento. A infeco pode ser passiva, quando
ocorre a ingesto do ovo contendo a larva infectante (Ascaris, Trichuris, Enterobius), ou
ativa, quando a larva infectante penetra na pele ou mucosa (Strongyloides e Ancylostoma).
Em alguns nematides, como Strongyloides e Enterobius, o embrio se desenvolve dentro do
ovo, ainda no tero da fmea que o elimina larvado. No caso de Ascaris, Trichuris e
Ancylostoma, o embrio se desenvolve dentro do ovo, mas no meio exterior ao tero da
fmea. Entretanto, para que ocorram estas transformaes do embrio no meio exterior, so
necessrias cinco condies bsicas (NEVES et al., 2000):
radiao solar;
temperatura;
oxignio;
umidade;
pH.
A ausncia de uma destas condies, ou a sua alterao, pode comprometer a continuidade do
desenvolvimento biolgico do parasito, ou ento ele permanece em latncia at encontrar
condies favorveis para retornar seu ciclo biolgico.
Nas espcies de vida livre e nos parasitos cujas larvas nascem no meio exterior, a ecloso
regulada, de um lado, pelo desenvolvimento larvrio, e de outro, pelas condies ambientais,
especialmente, pela temperatura e pela umidade. O processo de ecloso ocorre apenas quando
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REVISO DA LITERATURA

a temperatura e a quantidade de umidade do meio forem adequadas, assegurando, dessa


maneira, certa proteo s formas juvenis e maior probabilidade de sobrevivncia dos
helmintos.
Em alguns casos, quando no interior dos ovos formam-se larvas de segundo e terceiro
estdios, a ecloso fica na dependncia de um estmulo especfico, fornecido pelo hospedeiro,
como a presena de agentes redutores, pH, temperatura, sais e presena de gases. O valor
adaptativo desse processo evidente, pois estdios larvrios podem resistir melhor s
condies desfavorveis do meio, permanecendo dentro do ovo at que este seja ingerido por
seus hospedeiros (REY, 1991).
Aps a ingesto, os ovos contendo as larvas infectivas atravessam todo o trato digestivo e as
larvas eclodem no intestino delgado. Entretanto, aps a ecloso, a larva ter que efetuar um
longo percurso migratrio, atravs dos tecidos do hospedeiro, antes de ficar adaptada para
viver em seu hbitat definitivo. Isso porque as larvas do estdio L3 so aerbias e no
conseguem desenvolver-se na cavidade intestinal, onde o oxignio muito escasso ou
totalmente ausente (REY, 1991).
Qualquer que seja a via de penetrao do parasito, ingesto de ovos ou penetrao pela pele,
as migraes pelos tecidos do organismo do hospedeiro diferem segundo a espcie de
parasito. No decorrer das migraes, as larvas crescem, passam por uma ou mais mudas,
preparando-se para atingir o estado adulto de maturidade sexual no hbitat definitivo.
Os nematides dependem, na fase de propagao sob a forma de ovos ou de larvas, de
encontrar no meio externo condies que assegurem a sobrevivncia e a maturao dos
elementos infectantes, em quantidade suficiente para manter vivel a populao parasitria.
Esta , em geral, a fase mais crtica da sobrevivncia da espcie, devido sua exposio a
inmeros fatores de risco, alta mortalidade e expectativa de vida quase sempre muito curta
do estgio larvrio infectante.
Nesse sentido, a sobrevivncia dos nematides e a sua abundncia em determinado meio ou
populao de hospedeiros depende de condies ambientais que variam freqentemente.
Essas condies podem ser resumidas esquematicamente em quatro componentes (REY,
1991):

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24

REVISO DA LITERATURA

os lugares onde vivem os parasitos;


as relaes com outros seres vivos;
a disponibilidade de alimentos;
os fatores climticos.
Os fatores climticos interferem decisivamente na transmisso de parasitoses, condicionando
a existncia de perodos mais favorveis ou menos favorveis para isso, ou interrompendo
periodicamente a possibilidade de transmisso. Nesse sentido, so fatores importantes a
temperatura, o grau de umidade, as precipitaes e estiagens, as variaes da cobertura
vegetal e a insolao.
Diante de fatores desfavorveis do meio, os nematides, como outros parasitos, apresentam,
por vezes, mecanismos de sobrevivncia especiais. Algumas adaptaes morfolgicas,
fisiolgicas e biolgicas, permitem aos nematides sobreviverem em condies ambientais
adversas. Essas adaptaes so de tal forma to acentuadas que constituem a marca do
parasitismo (NEVES et al., 2000). As principais modificaes ou adaptaes so as
seguintes:
o nmero elevado de ovos produzidos diariamente pelas fmeas, para suplantar as
dificuldades de atingir o novo hospedeiro e escaparem da predao externa;
os diversos tipos de reproduo, que podem ser diicos (sexos separados), hermafroditas
(a mesma gnada produz, primeiro, o espermatozide e, depois, os vulos) e a
partenognese, assegurando a reproduo da espcie;
os ovos e as fases larvrias contam com reservas nutritivas acumuladas durante a oognese,
que so utilizadas no processo de embrionamento;
o entrosamento com os hbitos e comportamento dos hospedeiros, como a disseminao
fecal e a penetrao cutnea dos ancilostomdeos, em locais midos e sombreados;
mecanismos de sobrevivncia especiais, como dormncia e latncia;
a espessa casca dos ovos de Ascaris e de Trichuris.
Dentre os mecanismos especiais de adaptao podem ser observados (REY, 1991):
dormncia ou hipometabolismo, que implica na reduo da atividade metablica;
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REVISO DA LITERATURA

latncia ou ametabolismo, que implica na paralisao da atividade metablica .


A dormncia um estado em que a reduo da atividade metablica pode ser decorrente de
fatores desfavorveis do meio ambiente ou, em certos casos, pode ser uma etapa obrigatria
do ciclo evolutivo do parasito. No primeiro caso, segundo o fator ambiental que a provoque, a
dormncia pode ocorrer por anidrobiose (falta de gua), anoxibiose (escassez de oxignio),
cribiose (frio) etc. O encerramento do perodo de dormncia e o retorno atividade normal
so sinalizados pelo surgimento de fatores externos favorveis, que disparam a fase evolutiva
seguinte do helminto. Isto ocorre com ovos de muitas espcies e tambm com as larvas de
terceiro estdio infectante de algumas delas.
O estado de latncia corresponde a uma parada do desenvolvimento do helminto, em
determinada Fase de seu ciclo evolutivo (geralmente uma muda), induzida por condies
ambientais, mas agindo os fatores externos como sinais que desencadeiam o processo de
bloqueio metablico. Tal mecanismo desenvolvido ou selecionado como adaptao s
mudanas estacionais, manifestando-se como caracterstica gentica de populaes, ou de
indivduos dentro de uma populao. O Ancylostoma duodenale, que um parasito humano
prprio de regies com invernos muito frios, apresenta latncia em parte das larvas que fazem
o ciclo histotrpico.

3.2.2.2 Cascas de ovos de nematides


A transmisso de parasitoses envolve, freqentemente, uma elevada mortalidade dos estgios
de vida livre no meio ambiente externo ao hospedeiro. Esse decaimento natural pode ser
compensado pelo elevado potencial bitico e adaptaes dos ovos e larvas de nematides, que
assim garantem sua sobrevivncia ou aumentam suas chances de infectar um novo
hospedeiro.
Nesse contexto, a estrutura e funes das cascas dos ovos de nematides devem ser levadas
em considerao. Sua complexidade, resistncia e variabilidade podem ser consideradas
adaptaes que possibilitam o aumento da sobrevivncia do embrio e da larva no meio
ambiente. A casca do ovo tambm responsvel pela resistncia a anti-helmnticos e
helminticidas.

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REVISO DA LITERATURA

Os ovos variam consideravelmente quanto a forma, tamanho e estrutura. A casca do ovo de


nematide pode conter de 1 a 5 camadas, porm, em seu aspecto mais tpico e pelo padro
mais freqentemente observado consistem de (WHARTON, 1980):
uma camada interna lipdica;
uma intermediria de quitina;
uma externa vitelina.
Essas camadas so formadas interiormente pelo processo de oognese, sendo elaboradas pelo
prprio ovo. Em adio, a casca do ovo pode possuir de uma a duas camadas externas, que
so secretadas pelas clulas uterinas ainda na parede do tero da fmea. A camada uterina
pode conter mucopolissacardeos e protenas, sendo em geral grossa e irregular, responsvel
pelo aspecto tpico de uma membrana mamilonada, como no caso dos ovos de Ascaris
lumbricoides.
Existem, no entanto, variaes considerveis nas estruturas das cascas dos ovos, entre
diferentes ordens de nematides e at mesmo entre diferentes espcies, a exemplo dos ovos de
Trichuris sp e Strongyloides sp, que no possuem a camada uterina externa. Dessa forma, a
casca do ovo pode ser considerada uma das caractersticas mais variveis na anatomia dos
ovos de nematides.
A camada interna lipdica responsvel pela extrema impermeabilidade de algumas cascas
de ovos de nematides. No caso de ovos de Ascaris lumbricoides, essa camada apresenta uma
natureza qumica mpar, sendo constituda de 25% de protena e 75% de lipdeo
(WHARTON, 1980).
A camada intermediria de quitina freqentemente a mais espessa da casca do ovo e sua
composio proporciona a resistncia estrutural ao ovo. Embora na maioria dos ovos a
camada de quitina esteja usualmente associada protena, nos ovos de Enterobius
vermicularis a protena aparentemente ausente nessa camada.
A camada vitelina constituda de material lipoproteco, derivado da prpria membrana
vitelina do ovo, espessa, e quando a camada vitelina molda a camada externa da casca do
ovo, um material particulado tem sido observado aderido a superfcie externa.

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27

REVISO DA LITERATURA

Funo da casca do ovo


A casca do ovo de nematide uma das estruturas biolgicas mais resistentes, sendo
impermevel maioria das substncias, com exceo a gases e solventes de lipdeos
(ARTHUR & SANBORN, 1969, citado por WHARTON, 1980).
A principal funo da camada de quitina , provavelmente, a de fornecer resistncia estrutural
ao ovo. Se esta for removida, a camada lipdica estar sujeita a danos mecnicos,
possibilitando, dessa forma, a penetrao de produtos qumicos prejudiciais (ARTHUR &
SANBORN, 1969, citado por WHARTON, 1980).
A extrema resistncia qumica da casca do ovo pode ser observada durante os testes de
embrionamento, quando esses so incubados em meios contendo cido sulfrico 0,1 N e
nenhuma alterao substancial observada.
Permeabilidade da casca do ovo
O embrionamento de ovos em uma variedade de solues prejudiciais confirma a
impermeabilidade da casca do ovo a compostos solveis em gua. Os ovos tambm
desenvolvem-se normalmente em solues hipo-osmtica e hiper-osmtica, sugerindo que a
casca do ovo seja impermevel gua lquida (ARTHUR & SANBORN, 1969, citado por
WHARTON, 1980). Entretanto, trabalhos recentes sobre o contedo de gua em larvas de
Ascaris, dentro do ovo, em solues hiper-osmticas, indicam que a casca do ovo permite a
passagem de gua lquida (CLARKE & PERRY, 1980, citado por WHARTON, 1980). Ovos
de Ascaris lumbricoides expostos dessecao perdem gua a uma taxa que depende da
umidade relativa e da temperatura, indicando que a casca do ovo possui uma baixa
permeabilidade a vapores de gua.
O desenvolvimento do embrio e da larva, dentro do ovo, aerbio, requerendo um
suprimento externo de oxignio e a permeabilidade da casca do ovo ao oxignio (PASSEY &
FAIRBAIN, 1955, citado por WHARTON, 1980).
A molcula de oxignio maior que a molcula da gua, no sendo possvel, dessa forma, se
ter uma membrana biolgica que seja permevel ao oxignio, mas impermevel ao vapor de
gua (HINTON, 1969, citado por WHARTON, 1980). Consequentemente, a casca do ovo

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28

REVISO DA LITERATURA

deve ter uma baixa permeabilidade a vapores de gua, embora isso possa expor o embrio, ou
larva, no interior do ovo, aos perigos da dessecao.
O ovo de nematide pequeno, mas com uma grande relao rea/volume. Assim, existe
uma grande rea superficial por unidade de volume disponvel para a difuso de oxignio para
o interior do ovo, e tambm uma grande rea superficial por unidade de volume para perda de
gua, pelo ovo. A difuso dependente da rea disponvel e da permeabilidade da membrana
atravs da qual a difuso ocorre. Dessa forma a casca do ovo pode apresentar uma
permeabilidade muito baixa a trocas gasosas, restringindo perdas de gua, ao mesmo tempo
em que permite um adequado suprimento de oxignio para o desenvolvimento do embrio.
Efeito da temperatura na permeabilidade da casca do ovo
A taxa de perda de gua dos ovos de nematides afetada pelas mudanas de temperatura
verificadas no ambiente natural em que se encontram. O efeito da temperatura sobre a
permeabilidade da casca do ovo , desse modo, um importante fator de influncia na
capacidade desses ovos de sobreviverem s condies adversas do meio ambiente.
A taxa de perda de gua dos ovos de Ascaris lumbricoides maior temperatura de 30C que
a 6,5C. A taxa de perda de gua aumenta exponencialmente em funo da temperatura. A
taxa de aumento maior que a que poderia ser explicada pelo efeito da temperatura sobre a
presso de vapor da gua, indicando um efeito da temperatura sobre a permeabilidade da
casca do ovo.
A temperatura acima da qual a barreira de permeabilidade a corantes e fixadores parece se
manifestar depende do tempo de exposio e se os ovos so resfriados antes da exposio ao
corante. A temperatura, similarmente, afeta a capacidade da casca do ovo em diminuir a taxa
de perda de gua. Com base nessas observaes, Wharton (1980) sugere que no se trata de
um simples fenmeno crtico de temperatura, mas sim do derretimento gradual ou da
transio das complexas misturas dos componentes que fazem parte da camada lipdica da
casca do ovo.

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REVISO DA LITERATURA

3.2.2.3 Nematides de interesse para o presente estudo


Em consonncia com as diretrizes microbiolgicas estabelecidas pela WHO (1989), a reviso
bibliogrfica apresentada no presente trabalho atm-se apenas a algumas espcies da classe
Nematoda (Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura e ancilostomdeos).
a) Ascaris lumbricoides
Os Ascaris lumbricoides so citados, com freqncia, pela ampla distribuio geogrfica e
pelos danos causados aos hospedeiros. Este o mais cosmopolita e o mais freqente dos
helmintos humanos. So popularmente conhecidos por lombriga, ou bicha, e causam a doena
denominada ascariose. Dados recentes da OMS avaliam que na populao mundial mais de 1
bilho de pessoas apresentam-se infectadas por Ascaris lumbricoides (NEVES, 2000). O
GRFICO 3.1 ilustra a distribuio de infeces parasitrias no mundo.

6%

0%
2% 2% 1%1%

9%

14%
65%

Ascaridiase (1,4 bilho)


Esquistossomose (200 milhes)
Amebiase (40 milhes)
Chagas (16 milhes)
Tripanosomiase africana (300 mil)

Malria (300 milhes)


Filariose linftica (120 milhes)
Trematoda em alimentos (40 milhes)
Leishmaniose (12 milhes)
Dracunculiasis (100 mil)

GRFICO 3.1 Infees parasitrias no mundo


(Fonte: Adaptado de http://www/martin.parasitology.mcgill.ca/incidenc.htm)

Na maioria dos casos, a infeco leve e clinicamente benigna, se bem que um nico verme
possa responder por acidentes graves, de natureza obstrutiva, exigindo tratamento cirrgico de
urgncia. Estima-se em seis a mdia de scaris por pessoa, mas h tambm registros na
literatura de casos com 500 a 700 parasitos. As crianas so as mais pesadamente atingidas,
razo pela qual a ascaridaseconstitui importante problema peditrico e social (REY, 1991).
De acordo com Neves et al. (2000), a intensidade das alteraes provocadas est diretamente
relacionada com o nmero de formas presentes no hospedeiro, sendo as infeces
classificadas em trs categorias:

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30

REVISO DA LITERATURA

infeces de baixa intensidade (3 a 4 vermes), o hospedeiro no apresenta alterao


alguma;
infeces mdias (30 a 40 vermes), ou macias (100 ou mais vermes), o hospedeiro
apresenta vrias alteraes de natureza mecnica, txica e alrgica, ou at leses hepticas
e pulmonares.
Muitas vezes o parasitismo totalmente assintomtico. Calcula-se que apenas um em cada
seis indivduos infectados acusa manifestaes clnicas, tendo em vista que, na maioria dos
casos, o nmero de vermes albergados pequeno (REY, 1991). Mesmo no caso das formas
sintomticas, o diagnstico clnico difcil de ser feito, devido semelhana do quadro
clnico com outras parasitoses (NEVES et al., 2000).
Usualmente so vermes longos, robustos e cilndricos, apresentando as extremidades afiladas,
sobretudo na regio anterior. Os vermes adultos vivem no interior do aparelho digestivo do
hospedeiro, principalmente jejuno e leo, mas, em infeces intensas, podem ser encontrados
em toda a extenso do intestino delgado. Se nutrem de microrganismos e materiais
semidigeridos existentes na luz desse rgo, e dispem das enzimas necessrias para a
digesto de protenas, carboidratos e lipdeos.
O tamanho dos exemplares de Ascaris lumbricoides depende do nmero de formas albergadas
pelo hospedeiro e do estado nutricional deste. As fmeas medem cerca de 30 ou 40 cm de
comprimento e os machos cerca de 15 ou 30 cm de comprimento. Essas dimenses se referem
a helmintos oriundos de crianas com baixas cargas parasitrias e bem nutridas. No entanto,
quando muitos vermes ocupam o mesmo hbitat, as dimenses dos machos e das fmeas so
mais reduzidas, chegando as fmeas a medir apenas cerca de 10 a 15 cm de comprimento.
Nesse sentido, a sobrecarga parasitria pode vir a constituir um fator desfavorvel para o
helminto, levando a uma reduo do seu tamanho, como tambm diminuio de sua
fecundidade. Um aspecto interessante observado quando o prprio hospedeiro (homem)
apresenta forte deficincia de vitamina A, ou estando muito debilitado, ocorrendo nesses
casos a inviabilizao ou retardamento do ciclo evolutivo do helminto.
Machos e fmeas apresentam diferenas morfolgicas e de tamanho. Os machos so
facilmente reconhecidos pelo enrolamento ventral e espiralado de sua extremidade caudal. As
fmeas so maiores e mais grossas, tendo a parte posterior retilnea ou ligeiramente

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REVISO DA LITERATURA

encurvada, sendo capazes de ovipor, a cada dia, cerca de 200.000 ovos no embrionados, que
chegam ao meio ambiente juntamente com as fezes.
Os ovos so muito tpicos, em razo da membrana mamilonada que possuem externamente,
embora, por vezes, os ovos possam apresentar-se sem est membrana mamilonada. Sua cor
castanho-amarelada atribuda, por muitos autores, impregnao pelos pigmentos fecais. Os
ovos que so eliminados nas fezes podem ser frteis ou infrteis. Os ovos frteis medem, em
mdia, 60 x 45 m, com variaes entre 45 e 70 m no maior dimetro, sendo que os ovos
infrteis medem 80 a 90m de comprimento.
As fmeas que foram fecundadas pelo macho eliminam ovos frteis, que so envolvidos por
uma casca grossa, possuindo forma oval ou quase esfrica, contendo uma massa de clulas
germinativas (clula ovo), capazes de evolurem. Por outro lado, as fmeas no fecundadas
eliminam ovos infrteis, de forma mais alongada e com a casca mais delgada. Esses ovos
possuem uma camada albuminosa muito reduzida, irregular ou ausente, sendo incapazes de
evoluo posterior; aparecem nas fezes quando fmeas jovens e ainda no fecundadas
comeam a ovipor, ou quando a proporo de fmeas por macho muito grande. Mas
ocorrem sobretudo nas infeces unissexuais, s por fmeas, fato que ocorre geralmente
quando o nmero de helmintos muito reduzido.
O embrionamento dos ovos ocorre no meio exterior e requer a presena de oxignio, pois
nessa fase o parasito queima suas reservas lipdicas e apresenta metabolismo aerbio, assim
como respirao por meio do sistema citrocomo-oxidase. Outros fatores que influem no
desenvolvimento larvrio so a temperatura e a umidade ambiente, mas, devido proteo
conferida pela casca espessa e impermevel, os ovos de Ascaris podem resistir muito tempo
insolao e dessecao, promovendo a propagao da ascaridaseem regies bastante ridas.
A transmisso da ascaridasepode ocorrer atravs da ingesto de alimentos ou gua
contaminada com ovos contendo a larva infectante, poeiras e insetos (moscas e baratas so
capazes de veicular mecanicamente ovos infectantes). Alm desses mecanismos, em trabalhos
recentes foi verificada a contaminao do depsito subungueal (material presente debaixo das
unhas) com ovos deste parasito, em escolares de alguns estados brasileiros, verificando-se
nveis de contaminao que variaram de 20% at 52%. Estes achados esto relacionados com
a faixa etria e o nvel social do indivduo, como demonstrado em trabalhos realizados em
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32

REVISO DA LITERATURA

escolares do Rio de Janeiro e manipuladores de alimentos no Rio Grande do Sul (NEVES et


al., (2000).
Ainda sobre a dinmica de transmisso, cabe ressaltar a importncia das migraes humanas,
aspecto relevante de ordem social e econmica, responsveis pela introduo e disseminao
do agente etiolgico em reas no endmicas.
Em temperaturas timas, que esto entre 20o e 30 oC, umidade mnima de 70% e oxignio, o
embrionamento dos ovos ocorre em 15 dias. A primeira larva, L1, rabditide e se forma
dentro do ovo. Uma semana depois, a L1 sofre uma muda e se transforma em L2; aps nova
muda transforma-se em uma larva filariide L3, infectante (dentro do ovo). Durante vrios
anos, o ovo contendo a larva L2 era considerado a forma infectante. Entretanto, trabalhos mais
recentes demonstraram que, em Ascaris lumbricoides e em outros ascariddeos, a forma
infectante a larva L3, dentro do ovo (ARAJO, 1972; ARTIGAS & UETA, 1989; AUSTIN
et al., 1990, citados por NEVES et al., 2000). A larva L3 pode manter seu poder infectante por
vrios meses, ou anos, se as condies do meio ambiente forem adequadas, esperando
somente a oportunidade de serem ingeridas pelo hospedeiro.
Aps a ingesto dos ovos contendo a L3, esses atravessam todo o trato digestivo e as larvas
vo eclodir no intestino delgado, devido a presena de estmulos especficos fornecidos pelo
hospedeiro. O estmulo mais importante para provocar a ecloso das larvas de ovos de Ascaris
o gs carbnico. Fatores coadjuvantes so a presena de agentes redutores, o valor do pH, a
temperatura e a presena de sais. No entanto, sem a presena de CO2 dissolvido, ou cido
carbnico no dissociado (H2CO3), no h ecloso (REY, 1991).
Aps a ecloso, as larvas liberadas efetuam um longo percurso migratrio atravs dos tecidos
do hospedeiro, antes de se tornarem adaptadas para viver em seu hbitat definitivo. Isso
porque essas larvas so aerbias e no conseguem desenvolver-se na cavidade intestinal.
Nesse percurso migratrio, as larvas sofrem algumas mudas que so acompanhadas de
transformaes morfolgicas e fisiolgicas importantes, como o crescimento das larvas jovens
at se tornarem adultos jovens (aps 20 a 30 dias da infeco) e o desenvolvimento sexual at
alcanarem a maturidade sexual, sendo capazes de ovipor (aps 60 dias da infeco). Nos
ltimos estdios larvrios, os vermes j so aerbios facultativos e suportam demorados
perodos em anaerobiose. Ainda que sejam aerbios facultativos, desenvolvem na cavidade

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REVISO DA LITERATURA

intestinal um metabolismo que deve ser inteiramente anaerbio, ou quase, pois o oxignio
muito escasso nesse meio.
O perodo pr-patente, isto , o perodo que decorre entre a infeco e o aparecimento das
primeiras formas detectveis do agente infeccioso, no caso, os ovos, em geral de 60 dias. O
verme adulto possui uma longevidade de 1 a 2 anos.
A ao patognica desenvolve-se, habitualmente, em duas etapas: i) durante a migrao das
larvas; e ii) quando os vermes adultos j se encontram em seu hbitat definitivo. Em ambas as
situaes, a intensidade das alteraes provocadas est diretamente relacionada com o nmero
de formas presentes e com a sensibilidade do hospedeiro.
As evidncias de uma imunidade protetora contra os Ascaris, no homem, so escassas, ainda
que algumas observaes indiquem a possibilidade de sua existncia. A reduo da
prevalncia e da carga parasitria na populao adulta de reas endmicas, quando
comparadas com as dos grupos etrios mais jovens, poderiam ser atribudas imunidade
adquirida. No entanto, estudos recentes no confirmam essa hiptese, indicando que a reduo
da prevalncia e da carga parasitria em populaes adultas estariam mais relacionadas a
mudanas comportamentais, que reduziriam a exposio aos riscos de infeco (REY, 1991).
No entanto, Neves et al. (2000), correlacionam o fato de pessoas adultas raramente
apresentarem a doena, exposio e infeco, quando crianas, e o conseqente
desenvolvimento de forte e duradoura imunidade.
No ciclo biolgico de Ascaris lumbricoides, como na maioria de outros helmintos, o solo
desempenha um papel extremamente importante. ele que recebe, atravs das fezes, os ovos
com as larvas em estdios no infectivos, oferecendo-lhes condies para o seu
desenvolvimento (embrionamento) at a Fase infectiva, alm de proteg-los durante um
determinado perodo (BEAVER, 1964 & CAMILLOCOURA, 1970; citados por MASSARA,
1988).
Durante o embrionamento dos ovos, a larva de primeiro estdio mais sensvel falta de
umidade e de oxignio. Depois de formada a larva infectante, esta resiste a condies
adversas mais facilmente e pode permanecer infectante por vrios meses, ou anos, se as
condies do meio ambiente forem favorveis, reduzindo seu metabolismo ao mnimo,
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REVISO DA LITERATURA

aguardando a oportunidade de serem ingeridas. Experimentalmente, comprovou-se a


infectividade aps sete anos de permanncia no solo, mas em condies naturais esse tempo
pode ser menor (REY, 1991).
Os ovos, apesar de serem muito resistentes, no se tornam infectantes em meio seco e em
anaerobiose. A sua vitalidade est relacionada com as condies climticas e a textura do
solo. O solo mido e sombreado muito favorvel para a sobrevivncia e embrionamento dos
ovos, sendo melhor o solo argiloso que o arenoso, devido s condies higroscpicas da
argila.
b) Trichuris trichiura
Os Trichuris trichiura so vermes que apresentam uma distribuio cosmopolita e alta
prevalncia na populao humana, apresentando uma forma tpica semelhante a um chicote.
Da a denominao em ingls whipworms, que significa verme em forma de chicote. Esses
vermes causam a doena denominada tricurase.
A mais recente reviso publicada sobre a prevalncia de Trichuris trichiura estima que 902
milhes de pessoas encontram-se infectadas, o que corresponde a uma prevalncia mundial da
ordem de 17% (NEVES et al., 2000).
Durante o perodo pr-histrico, vrios relatos da presena de ovos no solo, em coprlitos ou
no intestino de mmias, sugerem que a tricurase era endmica por toda a Eursia, mesmo em
regies de clima temperado. Na Amrica, ovos de Trichuris foram identificados no intestino
de um menino Inca da regio do Chile, que viveu no ano 500, indicando que a infeco por
Trichuris trichiura na populao da Amrica do Sul se estabeleceu antes da chegada dos
colonizadores europeus.
Na maioria dos casos o parasitismo decorre silenciosamente, mas no caso de pacientes
debilitados contrarem um elevado nmero de vermes, estes passam a sofrer de perturbaes
intestinais cuja gravidade chega inclusive a provocar a morte (REY, 1991).
A intensidade das alteraes provocadas est diretamente relacionada com a carga parasitria
presente no hospedeiro, sendo na maioria dos casos assintomticos. Evidentemente, as
condies em que se encontra o paciente constituem uma varivel importante para o
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REVISO DA LITERATURA

aparecimento e gravidade do quadro clnico. As infeces podem ser classificadas em trs


categorias (NEVES et al., 2000):
infeces com menos de 100 vermes adultos, que compreende a maioria dos casos: a
inflamao se apresenta localizada, no produzindo sintomatologia;
infeces moderadas e intensas: a extenso e intensidade da inflamao aumenta, sendo
relatadas ulceraes na mucosa intestinal e sangramento constante;
infeces intensas (especialmente em crianas): ocorrem com freqncia alteraes
sistmicas, como anemia, m nutrio e retardamento do crescimento.
Os vermes adultos medem de 3 a 5 cm de comprimento, sendo os machos pouco menores que
as fmeas. A parte delgada anterior mais longa que a posterior, fazendo com que se
assemelhem a pequenos chicotes. Os vermes adultos vivem no intestino grosso do homem e,
em infeces moderadas, estes vermes esto localizados principalmente no ceco e clon
ascendente. Nas infeces intensas ocupam tambm o clon distal, reto e poro distal do
leo.
A sobrevivncia dos vermes adultos no homem estimada em cerca de 3 a 4 anos, com base
no perodo de eliminao da infeco de populaes que migram de uma rea endmica para
outra rea sem transmisso. No entanto, estimativas indiretas, com base na intensidade da
infeco em diferentes faixas etrias da populao de reas endmicas, indicam uma
sobrevida de 1 a 2 anos para os vermes adultos (NEVES et al., 2000).
A fecundidade da espcie muito grande, podendo cada fmea eliminar 3.000 a 20.000 ovos
por dia. O tamanho dos ovos varia entre 50 e 55m de comprimento por 22 ou 23 m de
largura. Apresentam formato elptico caracterstico, pois tem a forma de um barril alongado,
com poros salientes e transparentes em ambas as extremidades, preenchido por material
protico.
Os ovos recm-eliminados, no embrionados, chegam ao ambiente juntamente com as fezes,
necessitando de um perodo de embrionamento (desenvolvimento) no meio ambiente, at que
se tornem infectivos. O perodo de desenvolvimento do ovo depende das condies
ambientais; temperatura de 25 0 C, o processo de embriognese ocorre em cerca de 28 dias,
enquanto a uma temperatura 34 0 C a embriognese ocorre em 13 dias. No entanto, condies
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REVISO DA LITERATURA

adversas como altas e baixas temperaturas podem retardar o processo de evoluo, ou at


mesmo no permitir o desenvolvimento dos ovos.
Os ovos, ao alcanarem o meio externo, comeam a segmentao da clula-ovo, que leva
formao de uma larva. Essa etapa de desenvolvimento se estende por um perodo que pode
variar de aproximadamente 3 semanas a vrios meses, dependendo da temperatura e de
outros fatores do meio. A larva no abandona o ovo, embora j esteja pronta para causar
infeco no hospedeiro quando esse for ingerido com a poeira, a gua ou alimentos
contaminados. Em condies ambientais favorveis, os ovos persistem viveis no meio
ambiente durante vrios meses. Alguns estudos relatam que os ovos podem persistir viveis
por mais de 1 ano no solo (NEVES et al., 2000).
Aps a ingesto do ovo, esse segue para o esfago e atinge o estmago, onde semidigerido.
Aps aproximadamente 1 hora de ingesto dos ovos, a larva eclode no duodeno devido a
estmulos especficos do hospedeiro, saindo por um dos poros presentes nas extremidades do
ovo. A larva migra para o ceco, sofrendo 3 mudas durante o perodo de migrao. Cerca de 1
ms aps a infeco, as fmeas iniciam a postura. Estima-se que o perodo pr-patente da
tricurase, tempo entre a infeco at a eliminao dos ovos nas fezes do hospedeiro, varia
entre 60 e 90 dias, aproximadamente (NEVES et al., 2000).
A distribuio geogrfica do Trichuris trichiura segue, quase sempre, paralelamente
prevalncia do Ascaris lumbricoides, devido semelhana no modo de transmisso e grande
fertilidade desses helmintos. Embora a resistncia dos ovos s condies do meio exterior
sejam semelhantes, os ovos de Trichuris trichiura so mais sensveis dessecao e aos
efeitos da insolao direta quando comparado com os ovos de Ascaris. De um modo geral,
sabe-se que a prevalncia maior nos lugares de clima quente e mido, onde as condies de
saneamento bsico so precrias (REY, 1991).
O homem a nica fonte de infeco para a tricurase. Entretanto, cabe s crianas em idade
pr-escolar papel destacado na transmisso, tanto por constiturem o grupo populacional mais
suscetvel ao parasitismo, como por serem grandes disseminadoras de ovos nas fezes, em vista
de seus precrios hbitos higinicos e da falta de instalaes sanitrias e de servios de
saneamento bsico para grande parte da populao urbana e/ou rural. Para as crianas, as mais
importantes fontes de infeco so a prtica da geofagia (comer terra) e alimentar-se com as

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REVISO DA LITERATURA

mos sujas. O peridomiclio a rea de mais intensa transmisso. Em especial, se o terreno


for mido e sombreado, assegurando maior sobrevida e longevidade aos ovos embrionados.
A intensidade da infeco por Trichuris trichiura varia com a idade do hospedeiro. As
crianas se infectam dos 18 aos 24 meses de idade, atingindo nveis mximos em crianas
com 4 a 10 anos, diminuindo em jovens e permanecendo baixa em adultos. A prevalncia da
tricurase tambm diminui em adultos de populaes que no apresentam uma intensidade de
infeco muito elevada, entretanto, em populaes onde a carga parasitria muito elevada, a
prevalncia da infeco permanece alta entre jovens e adultos. Tambm existem alguns dados
que sugerem que alguns indivduos da populao apresentam uma predisposio gentica para
adquirir infeces intensas (NEVES et al., 2000).
Pouco se conhece da resposta imunolgica humana infeco por Trichuris trichiura.
Estudos que avaliam a taxa de reinfeco de adultos aps o tratamento sugerem que o
desenvolvimento de uma imunidade protetora esteja envolvido na diminuio da intensidade
da infeco observada em adultos. Como os vermes adultos sobrevivem cerca de 1 a 2 anos
no hospedeiro, a diminuio na intensidade da infeco observada em adultos residentes em
reas endmicas sugere que estas pessoas estejam menos expostas infeco e/ou sejam mais
resistentes reinfeco pelo parasito. No entanto, a melhor caracterizao da resposta imune
destes indivduos poder ser de grande valia para o entendimento dos mecanismos protetores
desenvolvidos pelo hospedeiro contra a tricurase.
c) Ancilostomdeos
Os ancilostomdeos possuem uma ampla distribuio geogrfica. Duas espcies de
ancilostomdeos, mais especificamente Ancylostoma duodenale e Necator americanus,
parasitam com freqncia o homem e so responsveis por uma doena tipicamente
anemiante, a ancilostomose. O nome Ancylostoma significa boca com ganchos (do grego
agkkylos, curvo, e stoma, boca); Necator vem do latim e quer dizer matador, assassino. Em
ingls, os ancilstomas e nectores so chamados coletivamente de hookworms.
Dentre mais de 100 espcies de ancilostomdeos, apenas trs espcies so agentes etiolgicos
das ancilostomoses humanas: o Ancylostoma duodenale, o Necator americanus e
Ancylostoma ceylanicum. As duas primeiras espcies so os principais ancilostomdeos
humanos, enquanto que o Ancylostoma ceylanicum, embora ocorra em humanos, tem os
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REVISO DA LITERATURA

candeos e feldeos domsticos e silvestres como hospedeiros definitivos (NEVES et al.,


2000).
As ancilostomoses humanas, embora nigligenciadas, tm grande importncia no contexto
universal, pois foi estimado que cerca de 900 milhes de pessoas so parasitadas por A.
duodenale e N. americanus, e que dessa populao 60 mil morrem anualmente (NEVES et
al., 2000). No Brasil, a ancilostomase mais freqente por Necator americanus, onde os mais
recentes inquritos coprolgicos, feitos na dcada de 80, permitiram avaliar como ainda
permanece alarmante em algumas regies, a presena de ancilostomdeos.
O parasitismo costuma ser, muitas vezes, assintomtico. Entretanto, o desenvolvimento
freqente de anemia, em pacientes sujeitos a infeces intensas, especialmente quando h
tambm certo grau de deficincia alimentar, faz dessa verminose um dos mais srios
problemas mdicos e sanitrios, na maioria das regies endmicas (REY, 1991).
A ancilostomase ocorre freqentemente em crianas com mais de 6 anos, adolescentes e
indivduos mais velhos, independente do sexo. As leses causadas no organismo humano,
pelos ancilostomdeos, diferem segundo a carga infectante, que penetra em curto lapso de
tempo, a Fase da infeco, a localizao e o estgio em que se encontram os parasitos.
Dependem da carga parasitria total e, em certa medida, tambm da espcie responsvel pela
infeco e da sensibilidade do hospedeiro, sendo observada quase todas as manifestaes da
doena, no perodo de parasitismo intestinal.
O Ancylostoma duodenale, considerado como ancilostoma do Velho Mundo, predominante
de regies temperadas, embora ocorra tambm em regies tropicais, onde o clima mais
temperado. Essa espcie foi introduzida no Novo Mundo atravs de imigrantes, todavia h
indcios de sua presena na Amrica, no pr-colombiano. Os vermes adultos, machos e
fmeas, so cilindriformes, com a extremidade anterior curvada dorsoventralmente e possuem
dois pares de dentes quitinosos bem desenvolvidos na cpsula bucal, se destacam por exercer
maior hematofagismo, podendo cada verme adulto sugar 0,05 a 0,3 mL/sangue/dia. Os
machos medem de 8 a 11 mm de comprimento por 400 m de largura, com bolsa copuladora
bem desenvolvida na extremidade posterior. As fmeas medem de 10 a 18 mm de
comprimento por 600 m de largura, com abertura genital (vulva) no tero posterior do corpo
(NEVES et al., 2000).
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REVISO DA LITERATURA

O Necator americanus, conhecido como ancilostoma do Novo Mundo, ocorre em regies


tropicais, onde predominam temperaturas altas, sendo introduzido no Brasil, atravs do trfico
de escravos, embora descrita originalmente na Amrica. A coexistncia de ambas as espcies
pode ocorrer em uma mesma localidade, mas, geralmente, uma delas sobrepuja a outra. Os
vermes adultos apresentam forma cilndrica, possuem lminas cortantes circundando a
margem da boca e so capazes de sugar 0,01 a 0,04 mL/sangue/dia. As fmeas so maiores
que os machos, sendo que estes medem de 5 a 9 mm por 300 m de largura, (NEVES et al.,
2000).
A distribuio geogrfica de Ancylostoma ceylanicum, parasitando indivduos humanos, no
est totalmente esclarecida porque vrios registros de identificao de adultos de Ancylostoma
braziliense (parasito habitual de feldeos e candeos), no intestino de humano, deveriam ter
sido por Ancylostoma ceylanicum. No entanto, casos humanos de parasitismo por
Ancylostoma ceylanicum foram registrados em vrios pases: ndia, Japo, Malsia, Suriname,
Indonsia, Taiwan, Tailndia, Filipinas e Brasil (NEVES et al., 2000).
Nos vermes adultos de Ancylostoma ceylanicum, a morfologia geral semelhante de
Ancylostoma duodenale, mas com detalhes que facilmente permitem distingu-lo. Apresenta
cpsula bucal com dois pares de dentes ventrais, sendo um de dentes grandes e outro de
dentes minsculos. O volume de sangue ingerido no est ainda definido, mas se sabe que
bem menor do que o praticado por Necator americanus, onde a anemia aguda hemorrgica
extremamente rara. Os machos medem 8 mm de comprimento por 360 m de largura e a
fmea mede 10 mm de comprimento por 440 m de largura.
Os ancilostomdeos, como muito outros nematides parasitos, apresentam um ciclo biolgico
direto, no necessitando de hospedeiros intermedirios. Durante o desenvolvimento, duas
Fases so bem definidas: a primeira, que se desenvolve no meio exterior, de vida livre, e a
segunda, que se desenvolve no hospedeiro definitivo, sendo obrigatoriamente de vida
parasitria.
Os estgios de vida livre das trs espcies de ancilostomdeos tm caracteres morfolgicos
distintos, e, tambm diferentes comportamentos biolgicos, em funo das condies
climticas envolvidas. Os ovos so eliminados juntamente com as fezes, chegando ao meio
ambiente. O nmero de ovos que uma fmea pe diariamente varia com a espcie, e com a
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40

REVISO DA LITERATURA

densidade parasitria. Segundo algumas estimativas, a oviposio de Ancylostoma duodenale


da ordem de 20.000 a 30.000 ovos, enquanto que a de Necator americanus est em torno de
9.000 ovos por dia (NEVES et al., 2000).
Os ovos das vrias espcies so muito parecidos, ovides, com casca fina e transparente.
Entre a casca e a clula ovo h sempre um espao claro que diminui medida que avana a
segmentao. No meio exterior, os ovos necessitam de um ambiente propcio, para o seu
embrionamento, principalmente boa oxigenao, alta umidade (> 90%) e temperaturas de 21 a
27 0 C para Ancylostoma duodenale e de 27 a 32 0 C para Necator americanus.
Essas condies so indispensveis para que se processe a embrionia, formao da larva de
primeiro estdio L1, que em condies favorveis pode estar completamente formada depois
de 18 horas. Em tais condies, a ecloso ocorre em 12 a 24 horas. No ambiente, a larva do
estdio L1, recm-eclodida, apresenta movimentos serpentiformes e se alimenta de matria
orgnica e microrganismos por via oral. Crescem de modo a alcanarem 300 m de
comprimento, devendo em seguida, perder a cutcula externa e ganhar uma nova, quando
ocorrer a primeira muda, transformando-se em larva de segundo estdio L2, em trs a quatro
dias. A larva L2, tambm do tipo rabditide, possui movimentos serpentiformes, se alimenta
de matria orgnica, chegando at um tamanho de 400 m de comprimento.
Subseqentemente, a larva de segundo estdio L2, comea a produzir uma nova cutcula
internamente, que passa a ser coberta pela velha cutcula, passando ento a se transformar em
larva de terceiro estdio L3, aps cinco dias. A cutcula do estdio anterior permanece como
se fosse uma bainha, isolando-a mais ainda do meio exterior, chegando a um tamanho original
de 600 m de comprimento. Nessas condies, ela uma larva infectante embainhada ou
larva filariide encistada. Nessa fase, vivem no solo, sem alimentar-se, consumindo suas
reservas energticas e correndo o risco de serem destrudas ou de exaurirem-se se o acaso no
lhes oferecer a chance de um contato com o hospedeiro adequado.
A sobrevivncia e o embrionamento dos ovos so favorecidos quando o solo mido e
sombreado, sendo melhor o solo argiloso que o arenoso, devido s condies higroscpicas da
argila. No entanto, para as larvas infectivas de ancilostomdeos L3, que so muito ativas no
solo, deslocando-se para cima (geotropismo negativo), podendo subir cerca de 1 metro em
busca da superfcie e de posies sempre mais altas, a agilidade e movimentao, dependem
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41

REVISO DA LITERATURA

da textura do solo. No caso de solo argiloso, essa movimentao quase nula, onde o
tamanho extremamente pequeno dos gros de argila torna o meio demasiado compacto. A
presena de areia melhora as possibilidades de deslocamento, sendo tanto maior quando mais
elevada for a proporo do componente arenoso (REY, 1991).
Neste sentido, os fatores decisivos para essa agilidade e movimentao so a porosidade do
terreno e a quantidade de umidade. As larvas s se movimentam onde as partculas do solo
encontram-se envoltas por uma pelcula de gua (hidrotopismo), sendo assim, quando sobem
nunca ultrapassam os limites da pelcula que molha o solo. A dessecao da superfcie faz
com que elas voltem a enterrar-se, sempre em busca de umidade, ou venham morrer
desidratadas. Esse comportamento, tem grande importncia para sua sobrevivncia e para a
epidemiologia das ancilostomases.
As larvas infectantes do estdio L3 podem permanecer viveis por vrias semanas em um
microambiente favorvel (NEVES et al., 2000). Em ambientes naturais de zonas endmicas,
que ofeream um microclima muito uniforme, como culturas sombreadas de caf, cacau etc.,
pode ser que permaneam viveis por seis meses (REY, 1991). Porm, em regies de clima
semi-rido, onde h exposio ao sol, estios prolongados ou temperaturas muito altas, as
larvas de ancilostomdeos e outros geo-helmintos no chegam a viver poucas semanas, sendo
possvel, que no ocorra o desenvolvimento no solo.
A infeco no homem s ocorre quando as larvas filariides penetram ativamente, atravs da
pele, conjuntiva e mucosas, ou passivamente por via oral. Quando a infeco ativa, a
penetrao no demora mais do que 5 ou 10 minutos (REY, 1991) ou dura cerca de 30
minutos (NEVES et al., 2000). Essa a nica via utilizada pelas larvas de Necator
americanus para instalar-se no organismo de seu hospedeiro, visto no ser possvel a infeco
por via oral, entretanto pode utilizar-se das duas vias.
Os pontos de penetrao mais freqentes esto na pele dos ps, especialmente em espaos
interdigitais, no tornozelo, bordas e dorso, sendo a invaso facilitada pelo barro mido que
adere pele. Mas qualquer rea cutnea entrando em contato com o solo infectado propicia a
invaso: mos, pernas e ndegas de crianas que se arrastam ou sentam no cho; mos de
trabalhadores agrcolas, etc.

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42

REVISO DA LITERATURA

Logo aps a penetrao pela pele, as larvas alcanam a circulao sangnea e/ou linftica, e
chegam ao corao, indo pelas artrias pulmonares at os pulmes. Nesse circuito de
migraes, as larvas adquirem mudanas morfolgicas, e ao chegarem no intestino delgado,
aps oito dias da infeco, a larva L4,comea a exercer o parasitismo hematfago, fixando a
cpsula bucal na mucosa do duodeno. A transformao da larva L4 , em larva de quinto
estdio L5, ocorre aproximadamente 15 dias aps a infeco.
As formas adultas exercem o hematofagismo, e iniciam a cpula seguida de postura, aps 30
dias da infeco. O perodo de pr-patncia, varia entre 35 a 60 dias para Ancylostoma
duodenale, de 42 a 60 dias para Necator americanus e de 21 a 35 dias para Ancylostoma
ceylanicum. Quando a infeco oral, os perodos de pr-patncia para Ancylostoma
duodenale e Necator americanus, so similares aos da infeco transcutnea e para
Ancylostoma ceylanicum menor, em torno de 14 a 17 dias.
Os vermes adultos de Ancylostoma duodenale e Necator americanus tm uma longevidade
mdia de 5 anos, mas at 18 anos de sobrevivncia foram observados em voluntrios
infectados pelo Necator americanus. Em relao aos processos imunolgicos, os anticorpos
so incapazes de conferir uma slida imunidade s reinfeces, pois, o que ocorre um
registro imunolgico na fase aguda, no perodo de migrao das larvas. Porm os vermes
adultos so menos antignicos e estimulam apenas a produo de anticorpos no funcionais,
isto , anticorpos que no protegem o organismo do hospedeiro contra reinfeces. Porm,
estudos experimentais como o de isolamento de antgeno espcie-especfico de N. americanus
daro novos rumos imunologia da ancilostomase, especialmente com vistas ao dignstico e
controle por vacina (NEVES et al., 2000).

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43

REVISO DA LITERATURA

3.3

Metodologias para identificao e enumerao de ovos de


helmintos

3.3.1

Introduo

Com o desenvolvimento da parasitologia mdica, diversas tcnicas foram propostas para a


identificao de ovos de helmintos intestinais e larvas em fezes (FAUST et al., 1939;
BAILENGER, 1979), com os princpios bsicos destas tcnicas tendo sido adaptados para a
identificao e enumerao de ovos de helmintos em guas residurias (AYRES et al., 1989;
STIEN & SCHWARTZBROD, 1989; WHO, 1989; AYRES & MARA, 1996) e em lodo
(MEYER et al., 1978).
Diversos mtodos para a identificao e enumerao de ovos de helmintos em guas
residurias so descritos na bibliografia especializada, cada um com suas vantagens e
desvantagens geralmente citadas pelo prprio autor. Alguns apresentam uma elevada
percentagem de recuperao, mas demandam grande tempo de anlise; muitos no foram
publicados em detalhes para permitir sua aplicao, ou suas taxas de recuperao no so
conhecidas; alguns demandam reagentes qumicos de custo muito elevado ou no so
adequados para o uso em laboratrios com limitaes de equipamentos; enquanto outros so
capazes de recuperar apenas um nmero limitado de espcies de ovos de helmintos (ver
Tabela 3.3). Fica claro, com isso, que no existe um mtodo que seja universalmente til, que
recupere todos os ovos de helmintos de importncia mdica, e que tenha uma taxa de
recuperao conhecida (AYRES & MARA, 1996).
Nesse sentido, os mtodos empregados para anlise parasitolgica em guas residurias
variam de laboratrio para laboratrio, sendo que alguns so mais especficos para esgotos
brutos e outros para efluentes tratados, que podem apresentar um nmero menor de ovos de
helmintos. Alguns mtodos possuem, ainda, aplicabilidade tanto para enumerao quanto para
viabilidade de ovos de helmintos. A escolha do mtodo a ser utilizado deve ser feita
unicamente quando as facilidades e exigncias particulares da situao so conhecidas. Devese levar em considerao o objetivo da pesquisa e o tipo de sistema que est sendo utilizado
para o tratamento das guas residurias, alm da percentagem de recuperao e aplicabilidade
do mtodo utilizado.

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REVISO DA LITERATURA

Todos os mtodos disponveis baseiam-se em um dos dois princpios fundamentais: i) os ovos


dos parasitos so separados, por flutuao, dos resduos presentes na amostra, em uma
soluo de maior densidade relativa; ou ii) a gordura e outros materiais so separados em uma
soluo de interface (usualmente ter ou acetato de etila), enquanto os ovos sedimentam em
uma soluo no miscvel, abaixo.
Ambos os procedimentos so baseados na fora centrfuga. Os fatores que determinam se a
concentrao de determinadas espcies de ovos de helmintos ser satisfatria dependero do
balano hidroflico-lipoflico dos ovos de helmintos e da densidade relativa destes em relao
ao reagente de separao. Isso significa, na prtica, que o pH, ou a presena de metais pesados
ou lcoois nos reagentes utilizados, poder alterar as propriedades das superfcies dos ovos de
helmintos, e cada espcie responder diferentemente a essas alteraes: assim, nenhum
mtodo concentrar todas as espcies com a mesma eficincia (AYRES & MARA, 1996).

3.3.2

Caracterizao das metodologias

Diversos estudos foram efetuados comparando as metodologias para anlises de ovos de


helmintos em fezes, visando a sua adaptao para amostras de guas residurias, mas a
maioria apresentou desvantagens que inviabilizaram sua utilizao. Bouhoum &
Schwartzbrod (1989) compararam vrios mtodos para anlises de ovos de helmintos em
fezes, objetivando a adaptao destes para amostras de guas residurias. Dos cinco mtodos
testados, trs utilizavam o princpio da flutuao: i) Janeckso & Urbanyi; ii) Faust ; e iii)
Arther. Os outros dois mtodos utilizavam o princpio da sedimentao: iv) Bailenger; e v)
Ritchie (ter e 10% de formol).
Com base nos estudos comparativos realizados, Bouhoum & Schwartzbrod (1989) testaram
uma ampla faixa de solues de flutuao para a concentrao de ovos de helmintos e
chegaram s seguintes concluses principais:
em relao ao mtodo Janeckso & Urbanyi, foi observado que o reagente de flutuao
iodomercurato de potssio concentrava uma grande

faixa de espcies de ovos de

helmintos. No entanto, concluram que o reagente era muito txico, corrosivo e caro para
ser utilizado em testes de rotina;

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45

REVISO DA LITERATURA

o mtodo de Faust, que utilizou para flutuao a soluo de sulfato de zinco a 33%,
mostrou-se completamente inadequado para a concentrao de algumas espcies de
nematides, a exemplo de Trichuris spp. e Capillaria spp.;
o mtodo de Arther, que utiliza a sacarose saturada como soluo de flutuao, era mais
barato, porm deformava os ovos rapidamente.
Bouhoum & Schwartzbrod (1989) concluram que o mtodo de Bailenger, que utiliza ter e
soluo tampo aceto-actica com pH 5 (BAILENGER, 1979), concebido originalmente para
enumerao de ovos de helmintos em fezes, adaptado para amostras de esgotos, se mostrou o
mais adequado, tendo em vista que o mesmo requeria reagentes baratos e era capaz de
concentrar com sucesso uma ampla faixa de espcies de ovos de helmintos rotineiramente
encontradas em esgotos sanitrios.
Ayres (1989) encontrou uma boa correlao entre ovos inoculados e percentagem de
recuperao, e sugeriu que a percentagem de recuperao pode ser mais afetada pela
quantidade e qualidade da matria orgnica do que pelo nmero absoluto de ovos presentes na
amostra.
Ayres et al. (1991) testaram os seguintes mtodos para a enumerao de ovos de helmintos
em efluentes tratados:
mtodo correntemente recomendado pela WHO, mais comumente conhecido como mtodo
de Bailenger, processando 1 L e 10 L, separadamente;
mtodo correntemente utilizado pela Estao Experimental de Tratamentos Biolgicos de
Esgotos Sanitrios (EXTRABES-UFPB), processando 500 mL da amostra;
mtodo desenvolvido especialmente para efluentes de lagoas, conhecido como mtodo de
Leeds II, onde 4 L da amostra foram processados em cada ocasio;
mtodo modificado de Janeckso & Urbanyi, processando 25 L da amostra, utilizando o
tiosulfato de sdio (densidade especfica 1,30) como soluo de flutuao.
Com base nos estudos comparativos realizados, Ayres et al. (1991) chegaram s seguintes
concluses principais:

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REVISO DA LITERATURA

quando foi utilizado o mtodo de Bailenger processando 1L da amostra de esgoto tratado,


este no foi eficiente, resultando em baixas contagens de ovos de helmintos. Porm,
quando 10 L da amostra foram processados, observou-se taxas de deteco muito maiores,
se comparadas com as taxas do mtodo Leeds II. No mtodo de Bailenger, a preparao da
amostra direta, e em termos de identificao no microscpio o tempo requerido
pequeno, em torno de 1 a 2 minutos, dependendo da qualidade do efluente. Podem ser
feitas duplicatas e triplicatas, diminuindo assim a margem de erro. Poucos reagentes
especiais so requeridos, sendo usualmente disponveis e baratos. Utiliza-se a cmara de
McMaster para a contagem dos ovos de helmintos, sendo que a

cmara pode ser

facilmente adquirida;
o mtodo da EXTRABES o mais barato e o mais fcil de ser utilizado, sendo no entanto
mais especfico para amostras de esgoto bruto, onde a concentrao de ovos geralmente
muito grande. Segundo Ayres et al. (1991), o mtodo inadequado para detectar ovos de
helmintos presentes em baixas concentraes, devido ao fato de que o mesmo utiliza
amostras de pequeno volume e etapa de subamostragem;
o mtodo Leeds II tambm barato e de fcil utilizao quando a concentrao de slidos
suspensos totais baixa, possibilitando que a contagem com a cmara de Doncaster seja
efetuada em torno de 5 a 10 minutos. No entanto, a qualidade do efluente pode variar
muito e, em algumas situaes, algas e resduos mais pesados no flutuaro em soluo
salina, deixando uma amostra final muito suja, dificultando sobremaneira a identificao e
contagem dos ovos, uma vez que a anlise torna-se muito cansativa e consome muito
tempo. A principal vantagem dessa tcnica a sua elevada taxa de recuperao, devido ao
fato de que no h nenhuma etapa de subamostragem e todos os ovos de cada amostra
individual so contados diretamente;
no mtodo modificado de Janeckso & Urbanyi, foram identificados ovos com a mesma
freqncia dos mtodos de Bailenger (processando 10 L) e Leeds II. O mtodo foi
considerado ligeiramente mais difcil que os outros, pelo fato de manusear amostras de
maiores volumes (25 L). Alm disso, em sua ltima etapa, a eventual presena de resduos
flutuantes pode dificultar a amostragem do menisco superior que concentra os ovos;
em trabalhos de rotina em laboratrios, o mtodo de Bailenger, utilizando um volume de
amostra de 10 L, parece ser o mais apropriado para a enumerao de ovos de helmintos em
guas residurias tratadas.
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47

REVISO DA LITERATURA

Crispim & Barbosa (1995) testaram e avaliaram o desempenho dos mtodos EXTRABES e
LEEDS I (citados por AYRES et al., 1989 e WHO, 1989). Observou-se que o mtodo WHO,
1989 apresentou uma eficincia 1,5 vezes maior que o mtodo EXTRABES e 7,8 vezes maior
que o mtodo de LEEDS I e concluram que o percentual de recuperao de ovos diminui
medida em que se aumenta o valor de slidos sedimentveis.
As principais caractersticas dos mtodos mais comumente utilizados para enumerao e
identificao de ovos de helmintos em guas residurias brutas e tratadas so apresentadas na
Tabela 3.3.

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48

REVISO DA LITERATURA

Tabela 3.3 - Principais mtodos para enumerao de ovos de helmintos em esgotos


Mtodo

Princpio

Volume
(L)
1

Perodo de
Sedimentao
De um dia
para outro

Centrifugao
1000 g por
15 minutos

Tampo ou
Detergente
cido actico
(pH 4,5)

WHO
(1989)

Sedimentao

WHO
(1989)

Centrifugao e
flutuao

De um dia
Para outro

700 g por
10 minutos

Leeds I

Sedimentao

Leeds II

Sedimentao

Stien &
Sedimentao e
Schwartzbrod
flutuao

25

BAILENGER Sedimentao e 1 (esgoto


Modificado
flutuao
bruto)
10 (esgoto
tratado)
* 100 g iodeto de mercrio
80 g iodeto de potssio
250 mL gua destilada

(No h perodo 2500 rpm por 10


de
minutos
sedimentao)
1 hora
2500 rpm por 10
minutos

0,01% Triton
X100
0,01% Triton
X100

2 horas

1000 g por
15 minutos

Eter/butanol/
cido actico
(pH 4,5)

1 a 2 horas

1000 g por
15 minutos

Aceto-actico
(pH 4,5)
0,1 Triton
X100

N = nmero de ovos/L
X = nmero de ovos contados
V = volume do produto final (mL)
P = volume do produto na cmara de contagem (mL)
S = volume da amostra de esgotos (L)

Flutuao
Sulfato de zinco
(densidade
relativa 1,18)
Nitrato de sdio
(densidade
relativa 1,30)
MgSO4 ou NaCl
(densidade
relativa 1,30)
NaCl
(densidade
relativa 1,04)
*reagente
JanecksoUrbanyi
(densidade
relativa 1,42)
Sulfato de zinco
(densidade
relativa 1,18)

Clculo
N =

X .V
P.S

Taxa de
recuperao
-

No. total
70% / 100 ovos
recuperado de 50% / 10 ovos
1L
33% / 1 ovo
24 4%
Cmara de
contagem de
Doncaster
N =

M .A
P.V

N =

A. X
P.V

N = nmero de ovos/L
A = nmero de ovos contados
M = volume do menisco (mL)
P = volume da cmara de McMaster (mL)

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80%

50%

Observaes

Referncia

Esgotos
brutos e
tratados
Esgotos
brutos e
tratados
Esgotos
brutos

WHO (1989)

WHO (1989)

AYRES et al. (1989)

Efluentes de AYRES et al. (1989)


lagoas de
estabilizao
Esgotos
STIEN &
brutos e
SCHWARTZBROD
tratados
(1990)

Esgotos
brutos e
tratados

AYRES & MARA


(1996)

N = nmero de ovos/L
A = nmero de ovos contados (mdia)
X = volume final do amostra (mL)
P = volume da cmara de McMaster (mL)
V = volume original da amostra (L)

49

REVISO DA LITERATURA

3.3.3

Consideraes em relao ao mtodo de BAILENGER modificado

Em guas residurias domsticas o mtodo mais utilizado aquele descrito em WHO (1989),
conhecido como mtodo da sedimentao, selecionado a partir de vrias tcnicas
minuciosamente testadas em vrios pases. Das tcnicas disponveis citam-se o mtodo da
sedimentao, descrito em WHO, 1989 e o mtodo modificado de BAILENGER (AYRES &
MARA, 1996). Ambos utilizam o processo fsico da sedimentao da matria orgnica
contendo os ovos de helmintos.
Embora a percentagem de recuperao do mtodo de BAILENGER (1979) modificado no
seja conhecida (AYRES & MARA, 1996) e este no seja adequado para a identificao de
vrios ovos de trematides operculados e de alguns ovos de cestides, estudos desenvolvidos
por Ayres et al. (1991), Bouhoum & Schwartzbrod (1989), demonstraram que o mtodo se
compara favoravelmente em relao a outras tcnicas, sendo capaz de recuperar uma
quantidade maior de ovos de helmintos, incluindo Ascaris spp., Trichuris spp., Capillaria
spp., Enterobius vermicularis, Toxocara spp., Taenia spp., Hymenolepis spp e
Ancilostomdeos.
Nesse sentido, o mtodo de BAILENGER (1979), modificado por Ayres & Mara (1996), foi
escolhido na presente pesquisa, em funo de sua simplicidade e baixo custo dos reagentes
utilizados, alm do que propicia a recuperao de uma ampla faixa de ovos de helmintos,
particularmente ovos dos nematides (Ascaris sp., Trichuris sp. e ancilostomdeos), que so
especificados no guia da Organizao Mundial de Sade (WHO, 1996) para o reso na
agricultura, conforme estudo especfico desenvolvido por Ayres et al. (1991).
Adicionalmente, uma metodologia reconhecida e recomendada pela Organizao Mundial
de Sade para a enumerao de ovos de helmintos em guas residurias brutas e tratadas. O
mtodo de BAILENGER (1979), modificado por Ayres & Mara (1996), detalhado no
Captulo 4 (Material e Mtodos).

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50

REVISO DA LITERATURA

3.4

Metodologias para avaliao de viabilidade de ovos de helmintos

Na maioria dos sistemas de tratamento de guas residurias, alguns ovos so removidos,


enquanto outros, mais resistentes, como os ovos de Ascaris, Toxocara, Toxocaris e Trichuris,
persistem nesses sistemas. As condies do meio ambiente em torno dos ovos de helmintos
contribuem para o seu desenvolvimento ou morte, observando-se que, em condies
adequadas, os ovos de Ascaris lumbricoides podem sobreviver por mais de 6 anos, pois estes
so altamente resistentes aos agentes fsicos e qumicos (PAWLOWSKI, 1984, citado por
CCERES et al., 1987). Esses ovos so muito resistentes, sendo vulnerveis quase que
exclusivamente ao calor e dessecao (OGATA, 1925, citado por CACERES et al., 1987, e
FEACHEM et al., 1983). Por essa razo, a determinao da viabilidade dos ovos de helmintos
em sistemas de tratamento de guas residurias de grande relevncia.
Em termos de sade pblica, os ovos de helmintos no-viveis so irrelevantes; porm,
quando esses organismos so infectivos ou viveis, os riscos para a sade pblica so muito
elevados. Dessa forma, a informao sobre a taxa de ovos viveis considerada de grande
importncia quando esses ovos so isolados do meio ambiente, seja no solo, no lodo ou em
efluentes lquidos.
Existem diversas tcnicas propostas para a avaliao da viabilidade de ovos de helmintos,
podendo-se destacar as seguintes como as mais utilizadas:
a tcnica da incubao (MEYER et al., 1978)
a tcnica de flutuao, com a utilizao de n-butanol para separar os ovos frteis dos
infrteis (STIEN & SCHWARTZBROD, 1988)
a tcnica de critrios morfolgicos para a diferenciao entre ovos viveis e no-viveis
(KAGEI 1982, CEMAT 1987 citados por CACERES et al., 1987; REIMERS et al. 1989,
citado por HINDIYEH, 1995)
a tcnica de incluso ou excluso de corantes biolgicos (SHEPHERD, 1962; KAGEI,
1982; KANESHIRO & STERN, 1985; ZHOU et al., 1985; GALVN et al., 1998)
A tcnica descrita por Meyer et al. (1978) e modificada por Carrington & Harman (1981),
citados por Hindiyeh (1995), foi utilizada para enumerar e determinar a viabilidade de ovos de
helmintos em amostras de lodo de esgoto, utilizando-se o procedimento de incubao. A
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51

REVISO DA LITERATURA

tcnica relativamente simples, onde 75 g de lodo so colocados em contato com 100 mL de


soluo de hipoclorito de sdio a 2,62%. Aps o contato com a soluo de hipoclorito, o lodo
centrifugado e lavado vrias vezes com detergente aninico e, em seguida, o sedimento
tratado com soluo de sulfato de zinco (33,2%) e centrifugado para a recuperao dos ovos
do sobrenadante. Em seqncia, os ovos so concentrados por filtrao em membrana 0,45
m e 45 mm de dimetro. Para recuperar os ovos da membrana realizada uma raspagem
com uma esptula. Os ovos so colocados em uma placa de Petri com uma soluo de 0,1N de
cido sulfrico e incubados durante um perodo 21 a 30 dias, a uma temperatura de 25 a 30
C. Nesse perodo, as amostras devem ser mantidas em ambiente favorvel ao
desenvolvimento do embrio (compartimento escuro e com aerao intermitente). A principal
desvantagem do mtodo da incubao o tempo de resposta, que demanda 3 semanas para o
embrionamento dos ovos, sendo impraticvel para o uso de rotina.
O mtodo desenvolvido por Stien & Schwartzbrod (1988) utiliza o n-butanol como parte do
procedimento para separar os ovos frteis dos infrteis. Os ovos frteis possuem alteraes
das estruturas da casca que permitem a esterificao de lipdeos pelo lcool. Dessa forma,
verifica-se o aumento da densidade especfica dos ovos frteis, possibilitando a sua
sedimentao, enquanto os ovos infrteis permanecem em suspenso. Os trabalhos
desenvolvidos em laboratrio demonstraram uma elevada correlao entre ovos viveis e
frteis, demonstrando a aplicabilidade dessa tcnica para a enumerao de ovos viveis de
Ascaris. No entanto, no se sabe se o mesmo procedimento se aplica a outras espcies de ovos
de helmintos e o reagente utilizado para flutuao dos ovos (JANECKSO-URBANYI
densidade especfica 1,42) apresentou-se muito corrosivo e caro para ser utilizado com rotina.
O n-butanol no pode ser utilizado em amostras de lodo ou de composto porque esse
absorvido pelo material slido e torna impossvel a verificao final do material, mesmo se a
amostra for completamente lavada.
A tcnica de avaliao de viabilidade pelos critrios morfolgicos, para se distinguir entre
ovos viveis e no-viveis de Ascaris, baseada nas mudanas morfolgicas que aparecem
nos ovos mortos ou no-viveis, conforme a seguir (KAGEI, 1982):
descontinuidade e ruptura da membrana ou do revestimento da casca do ovo;
citoplasma vacuolizado possivelmente devido degenerao da gordura;

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52

REVISO DA LITERATURA

encolhimento por inteiro do ovo ou do ncleo;


citlise.
De acordo com o Centro para Estudos Mesoamericano em Tecnologia Apropriada CEMAT
(1987), citado por Cceres et al., (1987), os critrios bsicos para a determinao da
viabilidade de ovos de Ascaris, com base nas alteraes morfolgicas, so os apresentados na
Tabela 3.4.
Tabela 3.4 - Principais critrios morfolgicos para determinao de ovos viveis e no
viveis de Ascaris lumbricoides
Ovos viveis
Estruturas intactas com coberturas contnuas
e simtricas
Continuao do desenvolvimento do ovo a
estgios mais evoludos, como clulas
duplas, mrula, gstrula e larva
Diferenciao entre cada estgio indicando
uma seqncia de maturao

Ovos no-viveis
Estruturas mal definidas
Vacuolizao do citoplasma e condensao
celular
Ovo no estgio unicelular com citoplasma
granulado e vacuolizado
Contrao, ruptura e perda de continuidade da
membrana

Fonte: CEMAT (1987), citado Cceres et al. (1987)

Reimers et al. (1989) encontraram uma boa correlao entre a avaliao de ovos de Ascaris
usando critrios morfolgicos e o mtodo de incubao, enquanto Ayres et al., (1992a)
observou que o mtodo de diferenciao dos ovos viveis e no-viveis pelos critrios
morfolgicos no foi to preciso quanto o mtodo da incubao (HINDIYEH, 1995). O
mtodo para identificao dos critrios morfolgicos no microscpio simples, mas falta um
padro objetivo e requer habilidade e experincia, alm de ser difcil para principiantes. No
entanto, de acordo com a experincia do CEMAT, essa tcnica tem sido utilizada h vrios
anos para a identificao de ovos de Ascaris provenientes de fossas secas (CCERES et al.,
1986, citado por CCERES et al., 1987).
Vrios autores relatam o uso de mtodos com corantes biolgicos para a determinao da
viabilidade, embora no passado esses no tenham sido considerados suficientemente
confiveis para serem utilizados (WHO, 1967, citado por AYRES, 1989; HINDIYEH, 1995 e
CACERES et al., 1987). A determinao da viabilidade com o uso de corantes foi realizada
inicialmente por Ogata (1923) e ainda utilizada em pequenos laboratrios, apesar de suas
limitaes (CACERES et al., 1987).

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53

REVISO DA LITERATURA

Desde o incio da utilizao desses testes, at os dias de hoje, diversos corantes vm sendo
utilizados, podendo-se destacar os seguintes:
soluo de Sudam III em 75% de lcool (OGATA, 1928, citado por CACERES et al.,
1987; e KAGEI, 1982, citado por AYRES, 1989);
soluo sulfato de azul nilo (MEYER et al., 1978);
azul de metileno eosina borax (ZHOU et al., 1985, citado por AYRES, 1989 e GALVN
et al., 1998a);
0,06 % da soluo de azul de metileno ou azul de Evans (CEMAT, 1984, citado por
CACERES et al., 1987);
Safranina O, azul de Tripan e Eosina Y (GALVN et al.,a 1998).
Um resumo de alguns corantes utilizados para distinguir entre ovos mortos e vivos e larvas de
helmintos utilizando corantes biolgicos apresentado na Tabela 3.5.
Tabela 3.5 - Corantes utilizados para distinguir larvas e ovos de helmintos vivos e mortos
Corante biolgico

Concentrao

Helminto

Referncia

Sudam III

Em 75% de lcool

Ovos de Ascaris sp

OGATA (1925)
KAGEI (1982)

0,025 g - 1%

Larva Heterodera spp.

BOYD (1941)

50 mg/L

Larva Heterodera spp.

DOLIWO (1956)

Pholoxine B

5%

Ovos de Meloidogyne

FENNER (1962)

New blue R

0,05%

Ovos de Heterodera

SHEPHERD (1962)

Eosina Y

0,67%

CHAUDHURI (1966)

Azul de metileno

0,05%

Sais de tetrazolium
Azul de metileno
eosina-borax

0,25%

Nematides de vida livre


Larva infectiva de Ascaris
suum
Ovos de Taenia

Ovos de Ascaris sp

ZHOU et al. (1985)

Azul de metileno

0,05%

Azul de Mendola
Safranina O, Azul de
Tripan e Eosina Y

0.1%

Larva infectiva de Ascaris


suum
Ovos de Taenia

0,1%

Ovos de Ascaris e Trichuris

Iodo e Iodeto de
potssio
Chrysoidin

ARENE (1986)
OWEN (1984)

ARENE (1986)
STOREY (1987)
GALVN et al. a
(1998)

Fonte: Adaptado de HINDIYEH (1995)

Ogata (1925) utilizou o corante Sudam III com o propsito de distinguir entre ovos vivos e
ovos mortos de Ascaris. Em seu trabalho, foi observado que os grnulos dos ovos infrteis
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54

REVISO DA LITERATURA

apresentaram manchas de cor vermelha, enquanto os ovos frteis no ficaram corados de


forma alguma. Os ovos frteis mortos com gua fervente permaneceram com uma perfeita
colorao vermelha.
Hudson & Hay 1980, citado por Hindiyeh (1995) utilizaram o corante Azul de Tripan para
avaliar a viabilidade dos ovos, mas esse corante pode ser inadequado para a identificao de
clulas mortas; os ovos devem ser contados entre 3 e 5 minutos, porque o nmero de clulas
que se cora de azul aumenta com o tempo.
Kaneshiro & Stern (1985), citado por Hindiyeh (1995), aps testar diferentes corantes (Tabela
3.6), concluram que esses no se mostraram satisfatrios, pois nenhum corante,
isoladamente, foi capaz de diferenciar entre ovos viveis e no-viveis de Ascaris, Toxocara,
Trichuris e Hymenolepis sp. Contudo, foi observado que vrios corantes eram excludos de
clulas vivas de algumas espcies de ovos, sendo dessa forma capazes de discriminar entre
ovos viveis e no-viveis de determinadas espcie de parasito (Tabela 3.6). Com a utilizao
do corante Safranina O foi possvel discriminar entre ovos viveis e no-viveis de Trichuris
sp e Hymenolepis sp, enquanto para ovos de Ascaris sp e Toxocara sp no foi possvel
diferenciar os ovos viveis dos no-viveis, pois os ovos vivos tambm incorporaram o
corante. J com a utilizao do corante Azul de Tripan, no foi possvel discriminar entre
ovos viveis e no-viveis de Ascaris sp, Toxocara sp, Trichuris sp e Hymenolepis sp, pois
tanto os ovos vivos quanto os mortos de todas essas espcies incorporaram o corante. De
acordo com esses resultados, conclui-se que nenhum corante , isoladamente, adequado para
todas as espcies de ovos, simultaneamente.
Hindiyeh (1995) avaliou a incorporao e a excluso de quatro corantes biolgicos em ovos
de Ascaris suum, com e sem a membrana (ovos corticados e descorticados). Os ovos foram
removidos de uma pequena parte do tero maduro de um fmea de Ascaris suum, e foram
centrifugados e lavados trs vezes com gua destilada antes de serem armazenados a 4o C.
Para retirar a membrana dos ovos, esses foram misturados com hipoclorito de sdio (2%) e
deixados em contato durante 30 minutos, com agitao freqente; os ovos foram ento
lavados com gua destilada pelo menos 5 vezes at se atingir o pH neutro. O mtodo do nbutanol foi utilizado para a separao de ovos frteis e ovos mortos da suspenso contendo os
ovos (STIEN & SCHWARTZBROD, 1988).

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55

REVISO DA LITERATURA

Tabela 3.6 - Incorporao e excluso de corantes em diferentes espcies de ovos de


helmintos
Ascaris
Corante

Toxocara

Trichuris

Hymenolepis

Morto

Vivo

Morto

Vivo

Morto

Vivo

Morto

Vivo

Azul de Tripan

Sulfato nilo azul

Azul de metileno

Metil violeta

Cristal violeta

Verde Janus

Vermelho brilhante

Benzoporpurina

Safranina O

Carmim alum Lake

Br.Cresyl azul

Vermelho neutro

Legenda: + (incorporao do corante pelo ovo), (excluso do corante pelo ovo)


Fonte: KANESHIRO & STERN (1985)

Com base nos resultados encontrados (Tabela 3.7), Hindiyeh (1995) concluiu que os corantes
Violeta cristal, Azul de metileno-eosina borax e Sulfato de azul Nilo foram ineficientes para a
determinao da viabilidade de ovos corticados de Ascaris suum, em diferentes estgios de
desenvolvimento, uma vez que tanto os ovos vivos quanto os mortos mostraram a
incorporao da cor azul. Isso aconteceu porque a casca do ovo absorveu o corante, no
permitindo a entrada do corante Somente o corante Azul de Meldola foi excludo dos ovos
vivos e absorvido pelos ovos corticados mortos de Ascaris. J os resultados para os ovos
descorticados mostraram que todos os 4 corantes foram eficazes, uma vez que foram capazes
de diferenciar entre ovos viveis e no-viveis de Ascaris suum. A estrutura interna dos ovos
mortos, foram coradas em azul, enquanto os ovos viveis permaneceram no corados.
Os resultados desse estudo demonstraram que no foi possvel diferenciar entre ovos de
Ascaris suum mortos e vivos que continham a casca. Aps a remoo da casca dos ovos
(descorticao), a diferenciao entre as clulas corada e no corada, dentro do ovo, pde ser
facilmente visualizada usando os corantes cristal violeta, Azul Meldola, Azul de metilenoeosina-borax e Azul Nilo.

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REVISO DA LITERATURA

Tabela 3.7 - Incorporao e excluso de corantes biolgicos em ovos de Ascaris suum


Estgio de
desenvolvimento

Ovos descorticados
Corante

Violeta cristal
Azul de Meldola
Azul de metileno-eosina borax
Sulfato azul Nilo
Violeta cristal
Estgio com vrias Azul de Meldola
clulas
Azul de metileno-eosina borax
Sulfato azul Nilo
Violeta cristal
Estgio com a larva Azul de Meldola
Azul de metileno-eosina borax
Sulfato azul Nilo
Estgio unicelular

Ovos corticados

Vivo

Morto

Vivo

Morto

+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+

+
+
+
+
+
+
+
+
+

+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+

Fonte: HINDIYEH (1995)

Galvn et al. (1998) realizaram vrios estudos objetivando o desenvolvimento de


metodologias simples, rpidas e confiveis para a determinao da viabilidade de ovos de
helmintos em guas residurias. Nesse sentido, desenvolveram um mtodo rpido para
determinar a viabilidade de ovos de helmintos, utilizando os corantes Azul Tripan, Eosina Y e
Safranina O, em uma concentrao de 0,1% em soluo aquosa.
Este mtodo baseado no uso de corantes biolgicos para detectar as trocas de
permeabilidade da membrana vitelina dos ovos, que est relacionada com o metabolismo
embrionrio e a viabilidade, sendo que um ovo vivel impermevel a certos corantes e
portanto no se cora, enquanto, um ovo que tenha perdido sua viabilidade permevel e se
cora.
Para a realizao do mtodo da colorao, este foi acoplado a dois procedimentos rpidos,
eficientes e baratos, desenvolvido pelo Instituto de Engenharia Sanitria e Ambiental da
Universidade Nacional Autnoma do Mxico (UNAM), para a quantificao de ovos de
helmintos em guas residurias. Os procedimentos envolvem a concentrao da amostra por
centrifugao (esgoto bruto) e filtrao em membrana (esgoto tratado). Para

clarear a

amostra, foi utilizado soluo salina (NaCl 0,85%) ou soluo de detergente (0,01%). Para a
flutuao dos ovos de helmintos foi utilizado sulfato de zinco (densidade 1,20) ou sulfato de
magnsio (densidade 1,30). Os principais procedimentos para a enumerao de ovos de
helmintos presentes em guas residurias brutas e tratadas, de acordo o mtodo quantitativo
so mostrados na Tabela 3.8 (GALVN et al., 1996):
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57

REVISO DA LITERATURA

Tabela 3.8 - Principais procedimentos para o processamento das amostras pelo mtodo
quantitativo
Amostras de esgoto bruto
Concentrao da amostra por centrifugao

Amostras de esgoto tratado


Concentrao da amostra por filtrao em
membrana de 47 mm de dimetro e 8 m de

Posterior filtrao em membrana de 25 mm de

porosidade

dimetro e 8 m de porosidade
Adio de 10 a 20 mL de soluo de lugol

Centrifugao da amostra com soluo de


flutuao

Leitura em lmina e lamnula

Posterior filtrao em membrana de 25 mm de


dimetro e 8 m de porosidade
Adio de 10 a 20 mL de soluo de lugol
leitura em lmina e lamnula

Para validar a tcnica da colorao, esta foi aplicada a amostras de guas residurias brutas e
tratadas provenientes de um sistema de tratamento da Universidade Nacional Autnoma do
Mxico (UNAM). O procedimento da colorao foi incorporado antes do ltimo passo do
mtodo quantitativo, com a adio de 5 mL de corante.
Foram testadas oito amostras, sendo utilizado oito corantes diferentes. Para cada amostra,
foram realizadas trs rplicas. De todos os corantes utilizados, o Azul Tripan, a Eosina Y e a
Safranina O tiveram os melhores resultados qualitativos e quantitativos, sendo os mais
indicados para determinao de ovos viveis e no-viveis, j que foi perfeitamente possvel
diferenciar entre ovos corados e no corados, sem apresentar interferncias com a matria em
suspenso ou particulada (GALVN et al., 1998).
O mtodo quantitativo, combinado com o procedimento da colorao, pode ser utilizado para
determinar o nmero total de ovos de helmintos e, simultaneamente, a percentagem de
viabilidade (GALVN et al., 1998; ROJAS et al., 1998). Ou seja, caso se deseje identificar
e/ou quantificar os ovos de helmintos, deve-se filtrar de 10 a 20 ml de soluo de lugol antes
da observao ao microscpio. Caso se deseje, tambm, determinar a viabilidade, deve-se
somente filtrar 5 mL de corante antes da leitura no microscpio.

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58

REVISO DA LITERATURA

O mtodo da colorao fundamenta-se nas trocas de permeabilidade da camada externa dos


ovos, provocadas pelas modificaes das estruturas qumicas dos componentes que envolvem
o ovo, quando este perde sua viabilidade. Os ovos que so viveis no permitem a entrada do
corante, permanecendo, portanto, com a sua cor natural (castanho-amarelada), j os ovos noviveis, permitem a entrada do corante e portanto se coram. Meyer et al. (1978) e Zhou et al.
(1985) citado por Galvn et al. (1998) tambm demonstraram que, de acordo com sua
fisiologia e morfologia, os ovos viveis conservam sua impermeabilidade e portanto no
incorporam os corantes.
O mtodo relativamente simples, mas recomenda-se que seja desenvolvido por tcnicos com
conhecimentos prticos e experincia na identificao dos ovos de helmintos. O mesmo
demanda um tempo de 2 a 6 horas para se obter os resultados, alm de apresentar baixo custo
se comparado com outros mtodos. Isto significa que o procedimento da colorao apresenta
vantagens bastante relevantes. Nesse sentido, o mtodo da colorao foi escolhido como
objeto desse estudo e ser detalhado especificamente no tem 4.5.
No entanto, algumas limitaes do mtodo so apresentadas a seguir (ROJAS et al., 1998):
a deteco da viabilidade ocorre apenas no momento do teste. Ou seja, no possibilita o
monitoramento do embrio, sendo por isso considerado um mtodo que avalia a
viabilidade potencial;
o mtodo eficiente para determinar a viabilidade potencial de ovos de Ascaris e
Trichuris. Havendo, porm, a necessidade de estudos mais aprofundados para possibilitar a
avaliao da eficincia da tcnica da colorao em outras espcies de helmintos.

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59

REVISO DA LITERATURA

3.5

Reatores UASB e sistemas de aplicao superficial no solo

3.5.1

Reatores UASB

Embora com vrias denominaes no Brasil (RAFA, DAFA, RAFAALL, RALF etc.), este se
consagrou no mundo todo como reator UASB (Upflow Anaerobic Sludge Blanket Reactor),
nomenclatura original em ingls atribuda por um de seus pioneiros na Holanda, o Prof. Gatze
Lettinga da Universidade de Wageningen. Essa nomenclatura passou a ser adotada tambm no
Brasil (CHERNICHARO, 1997; CAMPOS, 1999).
Os reatores UASB no possuem qualquer material de enchimento para servir de suporte para
o crescimento da biomassa. A imobilizao dos microrganismos ocorre por meio de autoadeso, formando flocos ou grnulos densos suspensos, que se dispem em camadas de lodo.
No fundo do reator localiza-se o lodo mais denso com partculas granulares de elevada
capacidade de sedimentao (leito de lodo) e nas regies prximas ao topo do compartimento
de digesto localiza-se o lodo menos denso e mais leve (manta de lodo). O processo consiste
na passagem de um fluxo ascendente de esgotos atravs do leito e da manta de lodo, que
apresentam elevada atividade (CASSEB, 1996; CHERNICHARO, 1997; MACHADO, 1997,
citados por ARAJO, 1998).
A estabilizao da matria orgnica ocorre em todas as camadas de lodo ao longo da altura do
reator, sendo a mistura, responsvel pela garantia do maior contato entre a biomassa e o
substrato, conseguida pelo fluxo ascensional do esgoto e pelas bolhas de biogs formadas pela
decomposio anaerbia da matria orgnica. No se utiliza qualquer dispositivo mecnico de
mistura, uma vez que esses dificultam a formao dos grnulos (CHERNICHARO, 1997).
A sada do esgoto se d por um compartimento de decantao interno, localizado na parte
mais alta do reator. O compartimento de decantao permite que os slidos desgarrados da
manta de lodo retornem ao compartimento de digesto. O lquido decantado sai do reator
como efluente final (CHERNICHARO, 1997).
O reator UASB desempenha simultaneamente vrias funes que, em outras estaes de
tratamento aerbio convencional, so usualmente efetuadas em tanques separados. No reator
UASB ocorre a reteno de uma parcela significativa dos slidos suspensos presentes no
esgoto bruto (inclusive ovos de helmintos), que, pela sua densidade e devido ao fluxo
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60

REVISO DA LITERATURA

hidrulico ascendente, ficam retidos no leito de lodo biolgico espesso. Alm dessa reteno
de slidos na parte inferior do reator, ocorre tambm a sedimentao do lodo biolgico que
eventualmente escapa do compartimento de digesto, mas para isso essencial a instalao de
um separador de slidos na parte superior do tanque (ver Figura 3.1).

Coleta do efluente

Sada de biogs

Compartimento
de decantao
Separador trifsico
Abertura para
o decantador
Defletor de gases

Bolhas de gs

Manta
de Lodo

Partculas de lodo

Compartimento
de digesto
Leito de
Lodo

Afluente

Figura 3.1 - Representao esquemtica de um reator UASB

O reator UASB desempenha, portanto, o papel de digestor dos slidos retidos, como tambm
de parte da prpria biomassa presente, da resultando um lodo bastante estabilizado. Quando
do descarte do lodo de excesso, torna-se necessrio somente a sua desidratao e,
eventualmente, a sua higienizao (no caso de reso agrcola do lodo). Alm da digesto dos
slidos, ocorrem ainda reaes de converso da matria orgnica presente nos esgotos.
Portanto, o reator UASB desempenha, ao mesmo tempo, as funes de um decantador
primrio, de um reator biolgico propriamente dito, de um decantador secundrio e de um
digestor de lodo.
Alm do separador de slidos, que funciona tambm como separador de gases que ascendem
juntamente com o lquido, essencial que o reator UASB tenha uma distribuio bem
uniforme e adequada do esgoto afluente junto ao fundo. Isso para evitar os problemas de mau
contato entre biomassa e esgoto, devido ao possvel surgimento de zonas mortas, curtoscircuitos hidrulicos e caminhos preferenciais no interior do reator. Isso pode ocorrer porque
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61

REVISO DA LITERATURA

o lodo se mantm no interior do reator em camadas de espessura e densidade distintas. Apesar


da configurao se aproximar mais daquelas com lodo em suspenso, com mobilidade
vertical, as camadas mais prximas do fundo podem permanecer quase estacionrias, por se
constiturem de lodo mais denso e com alta concentrao de slidos, ao passo que as
superiores se constituem de lodo menos denso e com menor concentrao de slidos, devido
sua maior expanso.
Fundamentos da digesto anaerbia
O processo metablico pelo qual as bactrias anaerbias e facultativas produzem metano e gs
carbnico a partir da degradao de compostos orgnicos complexos denominado digesto
anaerbia. A digesto anaerbia da matria orgnica segue uma seqncia mais complexa do
que o processo aerbio. A ocorrncia desse processo muito comum em vrios tipos de
ecossistemas naturais, como reas pantanosas, rgos digestivos dos ruminantes e sedimentos
de rios, lagos e mares (VAN HAANDEL & LETTINGA, 1994).
A digesto anaerbia, de uma maneira mais simplificada, pode ser dividida em quatro estgios
(CHERNICHARO, 1997):
1. O primeiro estgio conhecido como hidrlise. Tal processo considerado muito lento e
realizado por um grupo de bactrias facultativas e anaerbias (aproximadamente 99%
so anaerbias e 1% facultativas) denominadas bactrias hidrolticas, cuja funo
quebrar as ligaes dos compostos orgnicos complexos como carboidratos, protenas e
lipdeos.
2. O segundo estgio conhecido como acidognese. Com a presena das substncias
dissolvidas no interior da clula bacteriana, inicia-se a produo de cidos. O principal
cido produzido nessa Fase o cido actico, pois a reao de formao desse cido gera
uma maior quantidade de energia para a clula.
3. O terceiro estgio conhecido como acetognese. caracterizado pela formao de
acetato, carbonato e hidrognio a partir dos cidos graxos volteis e dos demais produtos
da acidognese. Tais compostos formados serviro como substrato para a formao de
metano.

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62

REVISO DA LITERATURA

4. no quarto estgio da digesto anaerbia que ocorre a verdadeira estabilizao da matria


orgnica. Os cidos orgnicos e o hidrognio so convertidos em produtos finais gasosos
como metano e gs carbnico, que so removidos da Fase lquida. Esta etapa realizada
por bactrias estritamente anaerbias formadoras de metano.
importante notar que no ocorre qualquer estabilizao do resduo durante os trs primeiros
estgios da digesto anaerbia. Entretanto esses trs estgios tm um carter fundamental,
pois convertem a matria orgnica em uma forma mais apropriada para a utilizao na quarta
Fase da digesto anaerbia.

3.5.2

Disposio dos esgotos no solo

A prtica de aplicar guas residurias urbanas no solo possui origens bastante remotas. Os
primeiros registros de tal prtica datam de pocas da era crist, na Grcia antiga, quando o
esgoto era utilizado para a irrigao na agricultura. Com o passar do tempo e evoluo das
tcnicas, a aplicao de esgoto no solo passou a ser utilizada em fazendas na Alemanha
(sculo XVI) e Inglaterra (sculo XVII) tambm com o objetivo de beneficiar a agricultura
(NUCCI et al., 1978).
Entretanto, foi somente no sculo passado que a disposio dos esgotos no solo passou a ser
utilizada com fins sanitrios. Em 1857, a Royal Comission on Sewage Disposal de Londres
concluiu que a melhor forma de se dispor dos esgotos gerados nas cidades era aplic-los
continuamente terra, evitando-se a poluio dos rios. At fins do sculo passado e incio
deste, a aplicao de esgotos no solo foi a soluo mais utilizada e bem sucedida de
tratamento e disposio dos esgotos resultantes da atividade urbana. Nessa poca, surgiram
vrios sistemas de tratamento por aplicao no solo nas metrpoles de Berlim (1860), Paris
(1870), Londres e Birminghan (1880), Melbourne (1896) e cidade do Mxico (1900). Muitos
desses sistemas atravessaram os anos e continuam a prestar excelentes servios at hoje
(NUCCI et al., 1987, citado por ARAJO, 1998).
At ento, a aplicao de esgotos no solo havia sido usada exclusivamente como forma de
tratamento direto dos esgotos. Foi na Alemanha, em 1910, mais especificamente no Vale do
Ruhr, que se utilizou pela primeira vez a aplicao no solo como sistema de ps-tratamento
do efluente de sistemas de tratamento convencionais. O objetivo dessa nova prtica era
reutilizar o esgoto para abastecimento pblico.
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63

REVISO DA LITERATURA

Com o crescimento das cidades e valorizao das reas periurbanas e a seduo exercida pelo
desenvolvimento de alternativas tecnolgicas mais sofisticadas, a opo pela disposio no
solo, como mtodo de tratamento, foi praticamente abandonada por volta do final da primeira
metade deste sculo (PAGANINI. 1997). Outro fator tambm contribuiu para que essa
alternativa se tornasse tambm praticamente desaconselhada em meados deste sculo, a
exemplo das preocupaes com a sade pblica em relao a transmisso de doenas.
Por outro lado, vrios fatores vieram contribuir para que mais recentemente o interesse pela
disposio no solo fosse renovado: a crescente escassez de recursos hdricos, a crescente
deteriorao dos mananciais de gua, as limitaes tcnico-financeiras de implantar solues
mais complexas de tratamento, o avano do conhecimento cientfico sobre o potencial e as
limitaes desta alternativa como mtodo de tratamento e ou reso de guas residurias
(BASTOS, 1999).
Atualmente o tratamento dos esgotos domsticos e industriais por disposio no solo tem se
apresentado como uma importante alternativa de tratamento, seja com a funo de
polimento de efluentes (ps-tratamento), seja pela necessidade de reciclagem de recursos
hdricos cada vez mais escassos, seja pela possibilidade de obteno de subprodutos com
alimentao animal ou carvo, seja pela importncia da recarga do lenol fretico e
subterrneo, ou pela adequao da qualidade da massa lquida antes que esta venha atingir os
corpos receptores (PAGANINI, 1997).
A disposio de esgotos no solo disseminou-se por todo o mundo, juntamente com novas
pesquisas que estudam a sua aplicabilidade em conjunto com outros sistemas de tratamento.
Isso se deve ao fato de que os sistemas de tratamento de esgotos por disposio no solo
apresentam elevada eficincia de remoo de matria orgnica e nutrientes, respectivamente,
compatveis e bem superiores s dos demais processos convencionais de tratamento
(PAGANINI, 1997).
Analisando-se economicamente, os sistemas de disposio de esgotos no solo possuem a
vantagem de no necessitarem de edificaes e equipamentos sofisticados para a sua
operao. A realidade brasileira tambm contribui para a disposio de esgotos no solo, pois
h grande disponibilidade de rea no pas, as condies climticas so bastante favorveis e
esse um mtodo muito mais barato que os mtodos convencionais, e que se encaixa

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64

REVISO DA LITERATURA

perfeitamente em um pas que investe muito pouco em solues alternativas para se tratar os
esgotos.
Porm, apesar do seu grande potencial e elenco de vantagens, a aplicao de esgotos no solo
tem sido pouco utilizado em nosso pas. Talvez a principal razo para tal seja a pouca difuso
da tecnologia em nosso meio. de grande importncia, portanto, que se aumente e dissemine
o nvel de conhecimento sobre esses sistemas, como forma de viabilizao de sua maior
utilizao (CHERNICHARO,1997).
A aplicao de esgotos no solo como forma de tratamento ocorre de maneira controlada,
fazendo-se uso ou no de vegetao, utilizando-se terrenos com solos de caractersticas
diversas. O grau de tratamento depende de diversos fatores, ocorrendo fenmenos fsicos,
qumicos e biolgicos que naturalmente se desenvolvem ao longo do tempo e que dependem
do tempo de contato que o esgoto permanece no solo.
O solo propicia a depurao natural dos esgotos atravs de mecanismos fsicos e processos
qumicos e biolgicos, resultando, desta estabilizao da matria orgnica, os macro e
microelementos (PAGANINI,1997). Empregado para a disposio de esgotos, o biossistema
solo depura a parcela no evaporada, funcionando como um filtro vivo que retm, absorve e
transforma, em alimento e nutriente, a matria orgnica e a gua nele presentes.
A disposio de esgotos no solo, como na autodepurao dos corpos dgua e nos demais
tipos de tratamento natural, compreende processos fsicos, qumicos e biolgicos de remoo
da carga poluidora (PAGANINI,1997). Tais processos devem ser controlados com o objetivo
de se obter um determinado grau de tratamento. Basicamente, os esgotos podem ser dispostos
no solo, de modo a depur-los, de trs formas diferentes:
Infiltrao rpida;
Infiltrao-percolao;
Escoamento superficial.
A escolha do mtodo de disposio no solo encontra-se relacionada com os objetivos
pretendidos em primeira instncia: disposio final dos esgotos, seu tratamento, ou produo
agrcola (irrigao), os quais devem ser compatveis com as caractersticas do solo, como
topografia e composio fsico-qumica.
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65

REVISO DA LITERATURA

Assim, a infiltrao rpida essencialmente um mtodo de disposio final de esgotos,


somente considervel em solos de elevada capacidade de infiltrao e drenagem. Quando o
objetivo o tratamento de esgotos, pressupondo-se a existncia de um efluente tratado em
condies de ser lanado em um corpo receptor como disposio final, iro predominar a
infiltrao-percolao e escoamento superficial.
Das trs modalidades de disposio de esgoto no solo apresentadas anteriormente, ser dado
nfase somente ao mtodo de escoamento superficial, objeto de estudo do presente trabalho.
Escoamento superficial
No processo de escoamento superficial no solo, o afluente lanado na parte superior de um
plano inclinado por meio de aspersores, canaletas ou tubos perfurados, sendo que a parte
lquida recolhida na parte inferior atravs de canais de drenagem que transportam o lquido
tratado ao corpo receptor (ver Figura 3.2).

Figura 3.2 - Ilustrao esquemtica de uma rampa de escoamento superficial


Fonte: BASTOS (1999)

O plano inclinado constitudo de um sistema solo-planta deve apresentar declividade variando


de 2% a 8%, de forma a evitar-se, de um lado, a estagnao dos esgotos (empoamento) que
promove a digesto anaerbia com liberao de gases, somada proliferao de insetos e, de
outro, as velocidades excessivas que provocam a eroso e os caminhos preferencias (curtocircuito) que diminuem a eficincia do tratamento (PAGANINI, 1997).
Uma densa cobertura vegetal de essencial importncia para o bom desempenho do
tratamento de esgotos por escoamento superficial. Algumas funes da cobertura vegetal so
citadas a seguir (PAGANINI,1997):
proteo contra eroso a vegetao proporciona uma superfcie com obstculos, o que
reduz a velocidade do fluxo, alm de redistribu-los, evitando os caminhos preferenciais;
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66

REVISO DA LITERATURA

remoo de nutrientes a vegetao utiliza os macro e microelementos para seu


desenvolvimento e reproduo;
suporte de microrganismos o colo da planta suporta a formao de um filme biolgico
que funciona como filtro biolgico.
O tratamento dos esgotos obtido medida que estes avanam pelo plano inclinado, atravs
de processos fsicos, qumicos e biolgicos. O processo de disposio de esgotos no solo por
escoamento superficial o mais completo, ou seja, o que utiliza de todos os fatores naturais
que podem intervir numa disposio de esgotos no solo e apresenta o melhor desempenho ao
interagir com a natureza, vindo a apresentar condies renovveis de tratamento, evitando
assim a exausto do sistema solo-planta como depurador.
Alm da grande capacidade depuradora dos sistemas de disposio no solo, deve-se ressaltar
que essa alternativa pode possibilitar benefcios financeiros advindos da utilizao natural do
nitrognio e do fsforo, pela vegetao, cuja remoo usualmente requer sistemas de
tratamento muito caros. Dessa forma, a aplicao no solo pode ser considerada uma atividade
de reciclagem, pois se aproveita todo o potencial recondicionante dos esgotos (gua, matria
orgnica e nutrientes) para o crescimento das plantas (ANDRADE NETO, 1997, citado por
ARAJO, 1998).
Os objetivos do tratamento de esgotos por escoamento superficial no solo so (USEPA, 1981,
citado por ARAJO, 1998):
atingir um grau de tratamento secundrio quando for aplicado esgoto bruto, efluente
primrio ou efluente de lagoas de estabilizao;
alcanar altos nveis de remoo de nitrognio, DBO e slidos.
Os mecanismos da remoo dos constituintes dos esgotos so essencialmente similares aos
dos reatores biolgicos em tanques artificiais, embora em meio completamente distinto.
Predominam a sedimentao e a filtrao e, naturalmente, as reaes para oxidao da matria
orgnica, com formao da biomassa fixa no solo e plantas, com remoo de slidos
suspensos e DBO. H ainda casos de remoo com boa eficincia de nitrognio e fsforo.

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67

REVISO DA LITERATURA

Diversas culturas vegetais podem ser utilizadas intencionalmente para o aproveitamento da


gua e nutrientes, sendo muitas vezes a disposio de esgoto no solo associada ao
aproveitamento agrcola ou ao reso de efluentes.
No Brasil, h ainda uma difuso limitada dessa tecnologia, muito embora j se tenha alguma
experincia prtica e esteja em Fase de maior disseminao, tanto para tratamento, como para
ps-tratamento ou disposio final.
Particularmente interessante pode ser a combinao de reatores anaerbios com os sistemas
de aplicao de esgotos no solo. Pelas caractersticas dos efluentes de reatores anaerbios, o
ps-tratamento atravs de sistemas de escoamento superficial no solo pode se mostrar
bastante vantajoso e atrativo, para as mais variadas condies de clima, solo, vegetao etc.,
abrindo espao para viabilizar a sua utilizao em maior escala, o que vem demonstrando
algumas pesquisas prticas no Brasil (CHERNICHARO, 1997; CAMPOS, 1999).
Os reatores anaerbios, utilizados como primeira etapa de tratamento, preservam os
nutrientes, que podem ser utilizados na revitalizao do solo com fins produtivos (gramneas,
forrageiras, madeira e vrias culturas vegetais), enquanto a disposio no solo remove
microrganismos patognicos, antes de alcanarem os corpos dgua. O reator anaerbio seria
suficiente para evitar que cargas excessivas de slidos e matria orgnica fossem aplicadas no
solo; enquanto a disposio controlada no solo compensaria as principais deficincias do
reator anaerbio, j que os nutrientes eutrofizantes seriam benficos e os patognicos teriam
decaimento natural significativo.
3.5.3

Remoo de ovos de helmintos em sistemas convencionais de tratamento

Os sistemas de tratamento de esgotos sanitrios foram originalmente concebidos para remover


matria orgnica e slidos. Posteriormente, surgiu a preocupao em reduzir outros
constituintes, como nutrientes e organismos patognicos (FEACHEM et al., 1983). Vrios
processos biolgicos tm sido estudados para determinar a efetividade na inativao dos
parasitos provenientes de gua residuria domstica. A eficincia de sistemas de tratamento
convencionais na remoo de ovos de helmintos varia consideravelmente, dependendo da
unidade de processo includa no sistema de tratamento e das espcies de ovos de helmintos
presentes no esgoto.

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68

REVISO DA LITERATURA

O conhecimento dos fatores que interferem na mortalidade de ovos de helmintos em


processos de tratamento de esgotos importante, no sentido de se poder propor medidas que
tornem tais processos mais eficientes, com repercusses positivas sobre a sade da populao.
As causas mais citadas como responsveis pela remoo de parasitos em processos anaerbios
so (GASI et al., 1993a):
temperatura;
tempo de deteno;
efeito da sedimentao;
morte natural em ambiente anaerbio.
Os ovos de helmintos so amplamente removidos pela sedimentao, onde o efeito de um
sistema de tratamento convencional simplesmente a transferncia dos ovos de helmintos do
efluente para a parte slida lodo (FEACHEM et al., 1983). Por essa razo, a percentagem de
remoo citada nos processos de tratamento de guas residurias no um indicador real da
destruio dos parasitos, uma vez que uma grande parcela desses ovos de helmintos
continuam ainda presentes no lodo.
Quando se estuda a remoo de parasitos em unidades de tratamentos de esgotos, deve-se
preferencialmente referir sobrevivncia dos mesmos ao sistema empregado. Dependendo do
sistema de tratamento, podem ser esperados diferentes tempos de sobrevivncia para os
diversos grupos de patgenos. Por exemplo, cistos de protozorios podem ser encontrados em
pequenas concentraes no lodo bruto e no sobrevivem ao processo de digesto; por outro
lado, os ovos de Ascaris podem ser encontrados em elevadas quantidades nos lodos e
sobrevivem maioria dos processos de tratamento de lodos (FEACHEM et al., 1983).
Processos de tratamento convencionais de guas residurias domsticas podem no ser
totalmente efetivos na ativao ou inativao dos parasitos (REIMERS et al., 1981, citado por
HINDIYEH, 1995). Estudos tm mostrado que os filtros biolgicos, filtros de areia e lodos
ativados promovem o embrionamento dos ovos, a exemplo de Ascaris, Necator e
Ancylostoma (CRAM, 1943; NEWTON et al., 1949; SILVERMAN & GRIFFITHS, 1955,
citados por HINDIYEH, 1995). Os efeitos dos processos de tratamento de guas residurias
sobre os ovos de helmintos e alguns cistos de protozorios so mostrados na Tabela 3.9.

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69

REVISO DA LITERATURA

Tabela 3.9 - Eficincias de alguns processos de tratamento de esgotos sobre ovos de


helmintos e cistos de protozorios
Unidade

Eficincia
Processos de remoo (no destroem o parasito)

Decantadores primrios e
secundrios

Remoo de 80% de ovos de Ascaris e 54% dos cistos de Entamoeba


(incorporao ao lodo; a remoo depende das condies de operao)

Flotao

Remoo > 95% (incorporao ao lodo; a remoo depende das


condies de operao e estgio de desenvolvimento dos ovos)

Tanque sptico

Remoo de 97% (incorporao ao lodo)

Filtro biolgico

Remoo de 38% (promove o desenvolvimento dos ovos)

Filtrao

Retm 99% dos ovos

Reator UASB

Remoo de 70 a 99% (incorporao ao lodo; a remoo depende das


condies de operao).
Processos de estabilizao (afetam o estgio dos ovos)

Lodos ativados convencional

Promovem o desenvolvimento dos ovos

Aerao prolongada

Promovem o desenvolvimento dos ovos


Processos de desinfeco

Clorao

No tem efeito

Fonte: Adaptado de REIMERS et al. (1981), citado por HINDIYEH (1995)

Os ovos de helmintos so muito resistentes ao estresse ambiental e podem sobreviver aos


procedimentos usuais de desinfeco, entretanto, estes so prontamente removidos por
processos utilizados na prtica do tratamento de esgotos, como a sedimentao, a filtrao e
os sistemas de lagoas de estabilizao (PAGANINI, 1997).
Goulart et al. (1984) avaliaram a eficincia dos processos de tratamento de esgotos
empregados nos municpios do Rio de Janeiro, onde foram investigadas oito das dezesseis
estaes em operao, que lanavam direta ou indiretamente seus efluentes nas guas da Baa
de Guanabara. O objetivo do estudo foi verificar a percentagem de formas infectantes dos
parasitos presentes no efluente final e no lodo residual. Uma das estaes avaliada foi a
Estao da Ilha do Governador (ETIG), que utilizava o processo de lodos ativados,
considerada pela CEDAE como uma das mais modernas e eficientes das estaes de
tratamento.
Os ovos de helmintos das espcies Ascaris lumbricoides e Trichuris trichiura passaram por
todos os estgios do tratamento, inclusive pela digesto do lodo, e foram liberados, em grande
parte, como ovos viveis para o meio ambiente. Os ancilostomdeos e Strongyloides
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70

REVISO DA LITERATURA

stercoralis no chegaram etapa de decantao secundria, tendo sido removidos nas etapas
anteriores. Ainda que as vrias fases do tratamento promovam uma considervel reduo do
nmero de ovos de helmintos, tal fato no impediu que formas infectantes de vrias espcies
fossem lanadas na Baa de Guanabara, onde sobrevivem por um tempo varivel. Os ovos de
Ascaris lumbricoides resistiram por oito meses na gua do mar, em condies de laboratrio
(JOURDAN, 1981, citado por GOULART et al., 1984).
Em estudos desenvolvidos por Gasi et al (1993b), no foi encontrada uma correlao entre a
sobrevivncia de ovos de helmintos e o tempo de reteno hidrulica em um reator UASB.
Segundo Feachem et al. (1980), citado por Gasi et al. (1993), a nica forma de destruir
patgenos em sistemas de tratamento com pequenos tempos de detenco (algumas horas)
atravs da elevao da temperatura na faixa de 55o a 65o C. Gasi et al.b (1993) concluram que
o processo de reteno fsica o mecanismo principal de remoo de ovos de helmintos em
reatores UASB, com o acmulo dos mesmos no lodo. Obteve-se uma correlao entre ovos de
helmintos e concentrao de slidos no efluente, no sentido que, a perda de slidos em
suspenso com o efluente do reator contribui para o aumento das contagens de ovos de
helmintos no efluente.
3.5.4

Remoo de ovos de helmintos em sistemas de escoamento superficial no solo

Dentre os mecanismos atuantes na remoo de microrganismos em sistemas de tratamento por


escoamento superficial no solo destacam-se (USEPA, 1981; PAGANINI, 1997):
exposio dos microrganismos a condies ambientais adversas, como teor de umidade do
solo, temperatura, pH e insolao;
filtrao fsica atravs do biofilme formado sobre o solo e o caule das plantas;
dessecamento durante os perodos secos;
adsoro s partculas do solo;
sedimentao;
predao.
No escoamento superficial, o tratamento ocorre principalmente na interface do colo das
plantas e na superfcie do solo, onde se forma uma pelcula biologicamente ativa. A
percolao dos esgotos atravs do colo da planta propicia a formao de um filme biolgico
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71

REVISO DA LITERATURA

de aspecto gelatinoso, mantendo os organismos em equilbrio suficiente para transformar as


substncias coloidais e dissolvidas.
A substncia gelatinosa povoada por um grande nmero de espcies de bactrias, fungos,
algas, protozorios, ovos e larvas de helmintos, e outros microrganismos em menor
quantidade. A composio microbiana varia com a espessura da lmina de esgotos, com a
caracterstica do esgoto e com as estaes do ano. Fungos, por exemplo, podem ser
observados na superfcie da lmina, enquanto microrganismos nitrificadores so encontrados
nas zonas mais profundas da mesma.
Em relao predao biolgica, as relaes entre os parasitos e outros organismos vivos, tais
como os fungos que atacam ovos e larvas de nematides, os predadores das fases de vida
livre, assim como os transportadores e disseminadores de ovos (minhocas, moscas e insetos
coprfagos, moluscos, aves etc.), interferem de uma forma ou de outra sobre a biologia e a
ecologia de muitos dos nematides de importncia mdica ou veterinria.
Um fator determinante na eficincia da remoo de microrganismos dos esgotos o tempo
durante o qual ocorre a ao biolgica no solo. Quanto maior for o tempo que o esgoto
permanecer sob ao biolgica do solo, maior ser a eficincia de remoo dos
microrganismos, ou seja, uma menor velocidade de percolao ou escoamento pelo solo
benfica do ponto de vista de remoo de microrganismos.
Devido s suas dimenses relativamente maiores, os protozorios e os ovos de helmintos so
removidos primeiramente por filtrao fsica e pela atividade microbiolgica na primeira
camada orgnica, de aproximadamente de 1 cm de espessura. As bactrias tambm podem ser
removidas por filtrao, entretanto a sua adsoro s partculas de solo e a ao biolgica de
predao e competio so os mecanismos mais importantes (USEPA, 1981, citado por
PAGANINI, 1997).
A ao biolgica particularmente efetiva nas camadas orgnicas superficiais do solo, onde a
presena de oxignio propicia o desenvolvimento dos processos aerbios, mais intensivos que
os anaerbios, e onde a disponibilidade de alimentos possibilita a existncia de uma
populao maior e mais diversificada de microrganismos. Estima-se que esse mecanismo
represente cerca de 92 a 97% da remoo total dos microrganismos nos sistemas de
disposio no solo, j que nesta primeira camada superficial, de cerca de 1 a 1,5 cm de
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72

REVISO DA LITERATURA

espessura, que a dessecao, a radiao e a temperatura atuam de maneira mais efetiva


(PAGANINI, 1997).
Essa remoo, para ser efetiva, depende de diversos fatores e, mesmo que se obtenha bons
resultados, no significa a eliminao dos riscos sade pblica de uma forma geral, pois os
microrganismos estaro retidos no solo, ou percorrendo os lenis subterrneos e os corpos de
gua superficiais. Embora os cistos de protozorios e ovos de helmintos representem um
grande risco sanitrio, alm de poderem sobreviver por meses e at anos no meio ambiente,
no existem evidncias conclusivas registradas que venham correlacion-los a problemas com
sistemas de disposio no solo, desde que resguardados cuidados operacionais (PAGANINI,
1997).

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73

MATERIAL E MTODOS

4 MATERIAL E MTODOS
4.1 Aparato experimental
As unidades objeto da presente pesquisa foram implantadas junto ETE Nova Vista, na
cidade de Itabira/MG, fruto de um convnio firmado entre o DESA/UFMG e o Servio
Autnomo de gua e Esgoto (SAAE) de Itabira, dentro do Programa de Pesquisa em
Saneamento Bsico (PROSAB).
Os esgotos afluentes ETE Nova Vista, antes de serem encaminhados s unidades
experimentais, passavam inicialmente pela etapa de tratamento preliminar, que por sua vez
era constituda das seguintes unidades (ver Figuras 4.1 e 4.2):
gradeamento;
caixa de areia;
calha Parshall.
Aps a remoo do material grosseiro e da areia, pelas unidades do tratamento preliminar, o
esgoto era conduzido para o poo de suco de uma casa de bombas que abriga trs conjuntos
elevatrios de esgoto. Um dos conjuntos elevatrios destinado para o rodzio e reserva, os
outros dois so acionados de acordo com o nvel do esgoto no poo de suco. As bombas
recalcam o esgoto para todas as linhas de tratamento da ETE Nova Vista.

Figura 4.1 Tratamento Preliminar


(Gradeamento)

Figura 4.2 Tratamento Preliminar


(Caixas de Areia)

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74

MATERIAL E MTODOS

4.1.1

Fase 1 (julho/97 a abril/98)

Na Fase 1, o sistema de tratamento de esgotos domsticos foi constitudo de um reator


anaerbio de fluxo ascendente (tipo UASB) em escala plena, responsvel pela primeira etapa
do tratamento, e de um conjunto de rampas de aplicao superficial no solo, em escala de
demonstrao, com a finalidade de polimento do efluente do reator anaerbio.
O reator anaerbio localizado na ETE Nova Vista foi projetado para atender a uma populao
de cerca de 5.000 habitantes em incio de plano (7000 habitantes em final de plano) e
apresenta um volume til de 477 m3. O reator possui forma tronco-cnica invertida e
encontra-se em operao desde o incio de 1996 (ver Figura 4.3). As principais caractersticas
operacionais do reator so apresentadas na Tabela 4.1.
Tabela 4.1 Caractersticas de alimentao do reator anaerbio em escala real (Fase 1)
Caracterstica operacional

Incio de plano

Final de plano

Vazo de projeto (L/s)

9,8

15,5

Tempo de deteno hidrulica mdio (h)

13,5

9,8

Velocidade ascensional mdia meia


profundidade do reator (m/h)

0,33

0,52

Taxa de aplicao superficial mdia no


decantador (m3/ m2.d)

11,2

17,7

Figura 4.3 Vista do reator anaerbio em escala real da ETE Nova Vista (Fase 1)

Uma pequena parcela do efluente do reator anaerbio (3,6 m3/h) era encaminhada a um
conjunto de trs rampas de aplicao superficial no solo, com cobertura vegetal de capim da
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75

MATERIAL E MTODOS

espcie Brachiaria humidicola. Cada rampa apresentava dimenses de 3,0 m x 25,0 m,


construdas com declividade igual a 4% (ver Figura 4.4). O ciclo de operao das rampas
previa a alimentao com esgotos no perodo de 7 s 15 horas (descanso de 15 s 7 horas), de
acordo com as vazes e taxas de aplicao mostradas na Tabela 4.2.
Tabela 4.2 Caractersticas de alimentao das rampas na Fase 1
Caracterstica operacional

Rampa 1

Rampa 2

Rampa 3

1,8

1,2

0,6

Taxa de aplicao (m /mxh)

0,60

0,40

0,20

Taxa de aplicao hidrulica (cm/d)

19,2

12,8

6,4

Vazo aplicada (m /h)


3

Nota: As rampas foram operadas em regime hidrulico permanente (vazo constante


ao longo do dia), porm com diferentes taxas de aplicao em cada rampa.

Figura 4.4 Vista das rampas de escoamento superficial no solo (Fase 1)

4.1.2

Fase 2 (novembro/99 a agosto/2000)

Na Fase 2, foram realizadas algumas modificaes no sistema de tratamento de esgotos. O


reator em escala real foi substitudo por um reator em escala de demonstrao (reator UASB
compartimentado), com um volume de 9m3. O reator anaerbio foi operado em regime
hidrulico transiente, ou seja, com vazes variveis ao longo do dia. Para tal, foi feita a
automao do sistema de alimentao e introduzido um hidrograma tpico de vazes, de
acordo com uma curva tpica de vazes proposta por VON SPERLING (1995). Para as
condies de vazes variveis ao longo do dia foram obtidas as caractersticas operacionais do
reator UASB compartimentado, conforme apresentado na Tabela 4.3. Este reator passou a
constituir a primeira unidade do sistema de tratamento (ver Figura 4.5).

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76

MATERIAL E MTODOS

Tabela 4.3 Caractersticas de alimentao do reator UASB Compartimentado (Fase 2)


Caracterstica operacional

Mnima

Mdia

Mxima

Vazo aplicada (m3/h)

0,9

1,8

3,24

Velocidades ascensionais (m/h)

0,9

0,45

0,3

Taxas de aplicao superficial no decantador (m3/ m2.d)

0,3

0,6

1,08

Nota: O reator UASB compartimentado foi operado em regime hidrulico transiente


(vazo varivel ao longo do dia)

Figura 4.5 Vista do reator UASB compartimentado em escala piloto (Fase 2)

As trs rampas de aplicao superficial no solo foram as mesmas da Fase 1, porm a cobertura
vegetal foi substituda pela gramnea Tifton 85. Alm da modificao da cobertura vegetal,
foram introduzidas duas outras alteraes no protocolo de operao das rampas:
as rampas deixaram de ser irrigadas simultaneamente (em um nico perodo: 7:00 s 15:00
horas), passando a receber os esgotos em seqncia (uma aps outra), conforme definido
na Tabela 4.4
as rampas passaram a ser operadas em regime hidrulico transiente, ou seja, com vazes
variveis ao longo do dia, conforme descrito anteriormente. Para as condies de vazes
variveis ao longo do dia foram obtidas as caractersticas operacionais das rampas,
conforme apresentado na Tabela 4.5.
Uma vista das rampas de escoamento superficial no solo, com as modificaes introduzidas
na Fase 2, apresentada na Figura 4.6.

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77

MATERIAL E MTODOS

Tabela 4.4 - Horrio de alimentao das rampas na Fase 2


Rampa

Horrio de alimentao

1
2

4 s 12 h
12 s 20 h

20 s 4 h

Tabela 4.5 Caractersticas de alimentao das rampas na Fase 2


Caracterstica operacional

Mnima

Mdia

Mxima

Vazo aplicada (m /h)

0,73

1,44

2,59

Taxa de aplicao (m /mxh)

0,24

0,48

0,86

Taxa de aplicao hidrulica (cm/dia)

7,8

15,4

27,5

Nota: As rampas foram operadas em regime hidrulico transiente (vazo varivel ao


longo do dia)

Figura 4.6 Vista das rampas de escoamento superficial no solo (Fase 2)

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78

MATERIAL E MTODOS

4.2

Programa de monitoramento

4.2.1

Anlises parasitolgicas

4.2.1.1 Fase 1
O programa de monitoramento envolveu a realizao de anlises de ovos de helmintos no
esgoto bruto e nos efluentes do reator anaerbio e das rampas de escoamento superficial no
solo. Para tal, foram coletadas amostras compostas no perodo que se estendeu de julho/97 a
abril/98. Do volume total amostrado (cerca de 15 litros), foram tomadas alquotas nas
seguintes propores (AYRES & MARA, 1996):
esgoto bruto: 1 litro;
esgoto tratado (efluente do reator UASB e das rampas): 10 litros.
As amostras eram ento armazenadas em bombonas de plstico e transportadas imediatamente
para o Laboratrio de Microbiologia do DESA/UFMG. No laboratrio as amostras eram
homogeneizadas e transferidas para o bquer (1 L) e baldes (10 L) onde permaneciam por um
tempo de 24 horas para o processo de sedimentao.

4.2.1.2 Fase 2
O programa de monitoramento da Fase 2 continuou a envolver a realizao de anlises de
ovos de helmintos no esgoto bruto e nos efluentes do reator UASB compartimentado e das
rampas de escoamento superficial no solo. Para tal, foram coletadas amostras compostas no
perodo que se estendeu de novembro/99 a agosto/2000. Do volume total amostrado (cerca de
15 litros), foram tomadas alquotas nas seguintes propores (AYRES & MARA, 1996):
esgoto bruto: 1 litro;
esgoto tratado (efluente do reator UASB e das rampas): 10 litros.
As amostras eram ento armazenadas em bombonas de plstico e transportadas imediatamente
para o laboratrio de Microbiologia do DESA/UFMG. No laboratrio as amostras eram
homogeneizadas e transferidas para o bquer (1 L) e baldes (10 L) onde permaneciam por um
tempo de 24 horas para o processo de sedimentao.

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79

MATERIAL E MTODOS

4.2.2

Anlises bacteriolgicas

4.2.2.1 Fase 2
O programa de monitoramento da qualidade bacteriolgica dos esgotos brutos e tratados foi
implementado somente a partir da Fase 2 da pesquisa, tendo sido realizadas anlises de
coliformes totais e Escherichia coli no esgoto bruto e nos efluentes do reator UASB
compartimentado e das rampas. Foram coletadas amostras pontuais durante o perodo que se
estendeu de novembro/99 a agosto/2000, sendo o horrio de coleta estipulado entre 8:00 e
10:00 horas.
Para o processamento das amostras foi utilizado o mtodo de substrato definido QUANTIYTRAY COLILERT, de acordo com os procedimentos descritos no Standard Methods for the
Examination of Water and Wastewater (AWWA/APHA/WEF, 1998).
4.2.3

Anlises de viabilidade

4.2.3.1 Fase 2
Assim como para as anlises bacteriolgicas, o programa de monitoramento para as anlises
de viabilidade de ovos de helmintos foi implementado somente a partir da Fase 2 da pesquisa.
Para essas anlises, foram coletadas amostras compostas do esgoto bruto e dos efluentes do
reator UASB compartimentado e das rampas de escoamento superficial no solo.
As amostras eram armazenadas em bombonas de plstico e transportadas para o laboratrio de
Microbiologia do DESA-UFMG. Do volume total amostrado (cerca de 15 litros) foram
tomadas alquotas nas seguintes propores (GALVN et al., 1998):
esgoto bruto: 5 litros;
esgoto tratado: 5 litros.

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80

MATERIAL E MTODOS

4.3

Enumerao de ovos de helmintos

4.3.1

Preliminares

Para o processamento e preparao das amostras, bem como para a enumerao de ovos de
helmintos, foi utilizado o mtodo de BAILENGER (1979), modificado por Ayres & Mara
(1996). Este mtodo foi escolhido em funo de sua simplicidade e baixo custo dos reagentes
utilizados, alm do que propicia a recuperao de uma ampla faixa de helmintos usualmente
encontrados em guas residurias (AYRES et al., 1991).
4.3.2

Fundamento

As amostras de esgotos a serem processadas passam pelas seguintes etapas: sedimentao,


centrifugao e flutuao. Aps sucessivas centrifugaes da amostra, com descarte do
sobrenadante, o sedimento tratado com soluo tampo aceto-actica (pH 4,5) e ter (ou
acetato de etila) para a separao do material gorduroso. Posteriormente, com a adio de uma
soluo de sulfato de zinco de alta densidade (ZnSO4 densidade 1,18), os ovos flutuam. Os
ovos que possuem densidade relativa menor que este valor so separados do sedimento e
portanto flutuam. A contagem realizada utilizando-se uma cmara de McMaster com
observao no microscpio em objetivas de 10x e 40x.
O tamanho, a densidade relativa e a velocidade de sedimentao de alguns ovos so
mostrados na Tabela 4.6. Pode-se observar que, com exceo dos ovos de S. mansoni, os
demais so ligeiramente menores que os ovos de Ascaris suum e suas densidades relativas so
similares, exceto para os ovos de Taenia saginata que apresentam densidade bem mais
elevada (1,30).

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81

MATERIAL E MTODOS

Tabela 4.6 - Tamanho, densidade e velocidade de sedimentao de algumas espcies de


ovos de helmintos
Espcies
Ascaris suum
Ascaris lumbricoides
Schistosoma mansoni
Trichuris trichiura
Taenia saginata
Ancilostomdeos

Tamanho (m)

Densidade

65 x 45
55 x 40
50 x 150
22 x 50
40 x 35
60 x 40

1,13
1,11
1,18
1,15
1,30
1,055

Velocidade de
Sedimentao (m/h)
0,95
0,43
5,23
0,48
0,83
0,26

Fonte: DUNN, 1991, citado por HINDIYEH (1995)

4.3.3

Equipamentos, materiais e reagentes

Para a preparao das amostras e enumerao de ovos de helmintos, de acordo com o mtodo
de BAILENGER modificado, so necessrios os seguintes equipamentos, materiais e
reagentes (AYRES & MARA, 1996):
Microscpio ptico comum com objetivas de 10x e 40x.
Centrfuga para operar a 1000 g.
Tubos de centrfuga.
Agitador Vortex.
Bomba de suco ou sifo.
Cmara de McMaster.
Pipetas de Pasteur.
Pipetas volumtricas.
Densmetro.
Bquer de 1 litro.
Balde de 10 litros.
Garrafes de plstico com tampa de rosca e capacidade para 1 e 10 litros.
Soluo tampo aceto-actica (pH 4,5).
Soluo de sulfato de zinco (densidade 1,18).
Soluo Triton X-100 ou Tween 80.
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82

MATERIAL E MTODOS

ter ou acetato de etila.


4.3.4

Preparao de solues

So os seguintes os principais procedimentos para preparao das solues necessrias


enumerao de ovos de helmintos:
soluo de sulfato de zinco: pesar 33 g de ZnSO4 e diluir em 100 mL de gua destilada
(conferir a densidade utilizando um densmetro);
soluo tampo aceto-actica (pH 4,5): pesar 5 g de acetato de sdio cristalino, misturar
em 3,6 mL de cido actico glacial e completar o volume com gua destilada at 1000 mL.
Corrigir o pH da soluo para 4,5 com os prprios reagentes;
soluo detergente Triton X-100 ou Tween 80: pipetar 1 mL da soluo e adicionar em 1
litro de gua de torneira.
4.3.5

Procedimentos para enumerao dos ovos

De acordo com o mtodo de BAILENGER modificado, so adotados os seguintes


procedimentos para preparao das amostras e enumerao de ovos de helmintos (AYRES &
MARA, 1996):
a) Coletar uma amostra de esgoto de volume conhecido (V litros) - usualmente 1 litro para
esgoto bruto ou parcialmente tratado e 10 litros para esgoto tratado (ver nota 1).
b) Deixar a amostra sedimentar em um bquer (esgoto bruto) ou em um balde (esgoto
tratado). Usualmente, tem sido adotados tempos de sedimentao de cerca de 1 hora para
o esgoto bruto e de 2 horas para o esgoto tratado (ver nota 2).
c) Remover aproximadamente 90% do sobrenadante usando uma bomba de suco ou um
sifo, garantindo que fique no recipiente um volume de aproximadamente 100 mL para o
esgoto bruto e de 1 L para o esgoto tratado. Inclinar o recipiente, caso necessrio, tendo o
cuidado para no ressuspender o sedimento.
d) Transferir cuidadosamente o sedimento para os tubos da centrfuga, enxaguando o bquer
e/ou balde com soluo Triton (ou Tween). Para qualquer transferncia do sedimento de
um recipiente para o outro, ou de um tubo para outro tubo, enxaguar com soluo Triton
(ou Tween).

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83

MATERIAL E MTODOS

e) Pesar todos os tubos ajustando-os simetricamente na centrfuga e proceder a centrifugao


a 1000 g (ver nota 3) por 15 minutos.
f) Aps a primeira centrifugao, descartar o sobrenadante; transferir todos os sedimentos
para um nico tubo e centrifugar novamente a 1000 g (ver nota 3) por 15 minutos.
g) Descartar o sobrenadante e ressuspender o sedimento contido no tubo utilizando um
volume equivalente de soluo tampo aceto-actica (pH 4,5), ou seja, para um volume do
sedimento igual a 2 mL, adicionar 2 mL da soluo tampo. Caso o volume do sedimento
seja inferior a 2 mL, adicionar soluo tampo at completar um volume de 4 mL. Este
volume mnimo de 4 mL visa facilitar o descarte do sobrenadante obtido durante a etapa
(i), sem provocar a ressuspenso do sedimento contendo os ovos.
h) Complementar o preenchimento do tubo com a adio de um volume de ter (ou acetato
de etila) correspondente a duas vezes o volume do sedimento e homogeneizar a amostra
com equipamento tipo Vortex. Ex.: se o volume do sedimento for 2 ml, adicionar 4 mL de
ter ou acetato de etila.
i) Centrifugar a 1000 g (ver nota 3) por 15 minutos. Aps a centrifugao a amostra
apresentar trs fases distintas: i) no fundo do tubo se concentrar todo o material no
gorduroso e fragmentos pesados, incluindo os ovos de helmintos, larvas e protozorios; ii)
uma fase intermediria contendo a soluo tampo, que dever ser clara (transparente); e
iii) uma fase superior contendo a gordura e outros materiais, que juntamente com o ter
(ou acetato de etila) formam uma camada tampo espessa e de cor escura.
j) Descartar todo o sobrenadante com um nico movimento firme e rpido, deixando no tubo
apenas o sedimento (anotar o volume do sedimento). Caso seja necessrio, desprender a
camada tampo de cor escura com uma agulha fina, visando facilitar o descarte do
sobrenadante.
k) Adicionar um volume de soluo de sulfato de zinco igual a 5 vezes o volume do
sedimento (ex.: se o volume do sedimento for igual a 1 mL, adicionar 5 mL da soluo de
sulfato de zinco). Anotar o volume do produto final, incluindo o sedimento e o sulfato de
zinco (X mL) e homogeneizar a amostra com equipamento tipo Vortex.
l) Remover, rapidamente, uma alquota da amostra final com o auxlio de uma pipeta de
Pasteur e transferir para a cmara de McMaster. Deixar a cmara de contagem em repouso
por 5 minutos para permitir que os ovos flutuem e atinjam a superfcie do retculo de
contagem.

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84

MATERIAL E MTODOS

m) Examinar no microscpio em objetivas de 10x ou 40x e contar todos os ovos que esto
dentro do retculo (ver nota 4). Para uma melhor preciso na enumerao dos ovos de
helmintos, deve-se fazer a leitura de mais de uma cmara, preferencialmente trs, e
calcular a mdia aritmtica das contagens obtidas (ver expresso de clculo item 4.3.6).
Notas:
(1) O mtodo muito eficiente quando utilizado para esgotos brutos, os quais usualmente apresentam
uma elevada concentrao de ovos de helmintos. Para esgotos tratados, no entanto, o nmero de
ovos tende a ser muito baixo; nestes casos, o volume da amostra deve ser aumentado pelo menos
para 10 litros, objetivando uma melhor recuperao dos ovos. Caso o nmero de ovos de
helmintos no esgoto bruto tambm seja baixo, deve-se aumentar o volume da amostra de 1 para 5
litros
(2) Dependendo da altura do recipiente utilizado, o perodo de sedimentao dos ovos deve ser
aumentado. A lei de Stokes pode ser utilizada para se estimar as taxas de sedimentao dos ovos
de nematoda em guas residurias, conforme a seguir: (taxas usualmente adotadas, para uma
temperatura de 200 C):

Ascaris lumbricoides: 20 mm/min

Trichuris trichiura: 16 mm/min

Ancilostomdeos: 6 mm/min

Para garantir uma maior recuperao dos ovos, recomendado que o tempo de sedimentao adotado
seja pelo menos o dobro do tempo de sedimentao terico (calculado de acordo com a lei de
Stokes'). A experincia dessa pesquisa indicou que tempos de sedimentao ainda maiores
favorecem uma maior recuperao dos ovos.
(3) a expresso que relaciona g com rpm como a seguir:

rpm =

k .g
, onde: k = 89.456 e r o raio da centrfuga (distncia entre o eixo da centrfuga e o
r

centro do recipiente), em cm
(4) se a quantidade de ovos de helmintos contidos dentro do retculo for zero, deve-se contar os
eventuais ovos de helmintos que podero estar fora do retculo.

4.3.6

Expresso de resultados

O nmero final de ovos da amostra de esgotos deve ser calculado por meio da seguinte
equao:
N=

A X
P V

onde:
N = nmero de ovos (ovos/litro)
A = nmero mdio de ovos contados nas cmaras de McMaster (no. de ovos)
X = volume do produto final (mL)
P = volume da cmara de McMaster (para cmara de dois retculos P = 0,30 mL; para cmara
de um retculo P = 0,15 mL)
V = volume original da amostra (ver item 4.3.5 - procedimento "a" )
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85

MATERIAL E MTODOS

4.3.7

Ilustrao fotogrfica dos procedimentos

Alguns dos procedimentos para preparao das amostras e enumerao dos ovos de helmintos
so ilustrados a seguir:

Figura 4.7 Remoo do sobrenadante


aps o perodo de sedimentao
(procedimentos "b" e "c" do item 4.3.5)

Figura 4.9 Separao de Fases da


amostra
(procedimento "i" do item 4.3.5)

Figura 4.8 Etapas de centrifugao


(procedimentos "e", "f" e "i" do item 4.3.5)

Figura 4.10 Homogeneizao da amostra c/


Vortex
(procedimentos "h" e "k" do item 4.3.5)

Figura 4.11 Transferncia do sedimento


homogeneizado para a cmara de McMaster
(procedimento "l" do item 4.3.5)

Figura 4.12 Observao dos ovos no


microscpio, em objetivas de 10x e 40x
(procedimento "m" do item 4.3.5)

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86

MATERIAL E MTODOS

4.4

Anlises parasitolgicas identificao de ovos de helmintos

4.4.1

Consideraes preliminares

As guas residurias podem conter uma variedade de ovos de helmintos provenientes das
fezes humanas. No entanto, as guas residurias tambm podem apresentar, com freqncia,
ovos de parasitos de animais como de porcos, ratos, cachorros e pssaros, juntamente com os
ovos de parasitos intestinais humanos. Nesse sentido, a correta identificao dos ovos de
helmintos deve ser realizada baseando-se principalmente nas suas caractersticas morfolgicas
e de tamanho. Para tal, torna-se indispensvel proceder medio exata dos ovos utilizandose um microscpio calibrado, de forma a se conseguir a correta identificao e diferenciao
dos ovos de helmintos presentes na amostra. Isso porque o tamanho dos ovos um dos
principais critrios que diferencia a classificao das espcies de parasitos.
4.4.2

Critrios para diferenciao de ovos de helmintos

A identificao dos ovos de helmintos baseada principalmente no tamanho e na


identificao de caractersticas morfolgicas especficas dos ovos, tais como: forma; contedo
do ovo; espessura da membrana externa (casca) etc. So os seguintes os principais critrios
para identificao dos ovos (STOTT, 1998):
tamanho: os ovos de helmintos variam em comprimento de pequenos (18 m) a grandes
(150 m ou maiores) e possuem dimetros to pequenos como 12 a 14 m (como o caso
de alguns ovos de trematdeos) a 90 m ou mais (caso dos maiores ovos de trematdeos);
forma: os ovos de helmintos podem ser de forma esfrica ou oval, embora alguns poucos
possam ser assimtricos;
membrana externa: os ovos de helmintos usualmente apresentam parede externa lisa,
variando na espessura, dependendo da espcie;
contedo

interno:

os

ovos

recentemente

excretados

apresentam

estgios

de

desenvolvimento que so caractersticos para cada espcie. Em sua maioria, os ovos de


nematides no se apresentam embrionados quando liberados com as fezes;
vrias modificaes da estrutura dos ovos tambm se constituem ferramentas importantes
de identificao, a exemplo de: protuberncias, espinhos, rolhas polares e oprculos.

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87

MATERIAL E MTODOS

Um resumo das principais caractersticas que auxiliam na diferenciao dos ovos de


helmintos apresentado na Tabela 4.7. Na Figura 4.13 so apresentados os tamanhos relativos
dos ovos de helmintos.
Tabela 4.7 Principais caractersticas de alguns ovos de helmintos
Ovo

Tamanho

Principais caractersticas

Ascaris lumbricoides (frtil)

55 a 75 m x 35 a 50 m

Ascaris lumbricoides (infrtil)

85 a 95 m x 43 a 47 m

Trichuris trichiura

50 a 55 m x 22 a 24 m

Ancylostoma duodenale:
em torno de 60 m
Ancilostomdeo

Necator americanus: em
torno de 70 m

Enterobius vermicularis

50 a 60 m x 20 a 32 m

Hymenolepis diminuta

70 a 80 m de dimetro

Hymenolepis nana

Taenia sp

30 a 47 m de dimetro

30 m de dimetro

forma: esfrica ou oval


cor: castanho-amarelada
possui membrana mamilonada (alguns
ovos podem apresentar-se sem essa
membrana ovo descorticado)
casca espessa
forma: alongada
membrana mamilonada delgada
forma: aspecto tpico de um pequeno
barril
cor: castanho
possui duas rolhas polares
possui duas membranas
forma: ovide ou elptica
sem segmentao ou clivagem
entre a casca e a clula-ovo h sempre
um espao claro que diminui medida
que avana a segmentao
membrana fina e transparente
envolvida por uma linha preta
membrana dupla, lisa e transparente
ligeiramente achatados de um lado
possui no seu interior uma larva j
formada
forma: aproximadamente esfrica
apresentam dupla casca
no possuem filamentos dispostos no
espao que separa a casca interna da
externa
oncosfera tpica, com seus trs pares de
acleos, estando envolvida por duas
membranas
forma: ovide ou arredondada
cor: transparente
oncosfera tpica, com seus trs pares de
acleos, estando envolvida por duas
membranas
possuem filamentos polares
forma: esfrica
possui uma casca protetora
denominada embriforo
dentro do embriforo se encontra a
oncosfera ou embrio hexacanto com
dupla membrana e trs pares de acleos

Fonte: REY (1991)


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88

MATERIAL E MTODOS

Figura 4.13 - Tamanhos relativos dos ovos de helmintos


Fonte: WHO (1994)

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89

MATERIAL E MTODOS

4.4.3

Ilustrao fotogrfica de ovos de helmintos

Alguns dos ovos de helmintos, usualmente encontrados em guas residurias brutas e tratadas,
so ilustrados nas Figuras 4.14 a 4.21 (Fonte: AYRES & MARA ,1996).

Figura 4.14 Ovo frtil de Ascaris lumbricoides

Figura 4.16 Ovo de Trichuris trichiura

Figura 4.15 Ovo infrtil de Ascaris


lumbricoides

Figura 4.17 Ovo de Ancilostomdeo

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90

MATERIAL E MTODOS

Figura 4.18 Ovo de Hymenolepis nana

Figura 4.19 Ovo de Hymenolepis diminuta

Figura 4.20 Ovo de Taenia sp

Figura 4.21 Ovo de Enterobius vermicularis

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91

MATERIAL E MTODOS

4.5

Anlises de viabilidade em guas residurias brutas

4.5.1

Tcnica da concentrao por centrifugao

Esta tcnica aplicada a guas residurias brutas que contenham slidos suspensos ou
turbidez, com possveis ocorrncias de grandes quantidades de ovos de helmintos. A tcnica
tambm aplicada a anlises de sedimentos.
4.5.2

Fundamento

A tcnica consiste em centrifugaes sucessivas da amostra com soluo salina isotnica,


permitindo assim o clareamento do sobrenadante. Aps o descarte do sobrenadante, os ovos
que se encontram no sedimento so recuperados por flutuao com soluo de sulfato de
zinco a 33,1% e o sobrenadante filtrado em membrana de 25 mm e 8 m de porosidade.
A contagem realizada por observao microscpica da lmina contendo a membrana corada
com o corante biolgico.
4.5.3

Equipamentos, materiais e reagentes

Centrfuga para operar a 1000 g


Equipamento de filtrao para membrana de 25 mm de dimetro (Millipore ou equivalente)
Microscpio com objetivas de 10x, 40x e 100x, com bom poder de resoluo
Equipamento tipo Vortex
Membranas de ster de celulose de 25 mm de dimetro e porosidade de 8 m (Millipore ou
equivalente)
Frascos para centrfuga de 250 mL de capacidade
Tubos para centrfuga de 50 mL de capacidade
Garrafes de plstico com tampa de rosca e capacidade de 5 litros
Lminas e lamnulas
Soluo salina isotnica (NaCl a 0,85% em gua destilada)

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MATERIAL E MTODOS

Soluo aquosa de 0,1% (p/v) de um dos seguintes corantes biolgicos: Azul de Tripan,
Safranina O, Eosina Y
Soluo aquosa de sulfato de zinco (ZnSO4. 7H2O) a 33,1% (p/v)
Glicerol
4.5.4

Preparao de solues

So os seguintes os principais procedimentos para a preparao das solues necessrias ao


desenvolvimento das anlises de viabilidade em esgotos brutos:
Soluo salina isotnica (NaCl a 0,85%): pesar 0,85 g de NaCl e diluir em gua destilada
at completar o volume de 100 mL de soluo
Soluo aquosa de 0,1% (p/v) de Safranina O: pesar 0,1 g do corante Safranina e dissolver
em gua destilada at completar o volume de 100 mL de soluo
Soluo aquosa de sulfato de zinco (ZnSO4. 7H2O) a 33,1% (p/v): pesar 33,1 g de ZnSO4.
7H2O e dissolver em gua destilada at completar o volume de 100 mL de soluo
4.5.5

Coleta de amostras

Coletar 5 litros da amostra no ponto em que se encontra mais homognea (representativa).


Caso o lquido amostrado esteja parado ou com pouco movimento, coletar tambm o
sedimento e process-lo pelo mesmo mtodo.
Tampar os recipientes e transport-los ao laboratrio, se possvel preservados com gelo. As
amostras devero ser analisadas preferencialmente logo aps a coleta ou, eventualmente, em
um prazo mximo de 48 horas. Caso no seja possvel a anlise neste perodo (48 horas), as
amostras devero ficar armazenadas sob refrigerao por um perodo mximo de 15 dias.
4.5.6

Procedimento

Para amostras contendo grandes quantidades de detritos/slidos grosseiros, homogeneizar a


mesma com um basto de vidro e filtrar atravs de uma gaze. Lavar perfeitamente os slidos
que ficarem aderidos gaze e processar 1 litro da amostra de acordo com os seguintes passos:

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93

MATERIAL E MTODOS

a) Distribuir a amostra em frascos de centrfuga e proceder a centrifugao a 1000 g durante


5 minutos; descartar o sobrenadante, ressuspender os sedimentos em soluo salina
isotnica e agitar com o equipamento tipo Vortex. Transferir o sedimento para um ou dois
tubos de centrfuga. Centrifugar novamente a 1000 g durante 5 minutos e descartar o
sobrenadante; repetir o procedimento at obter um sobrenadante claro (geralmente so
necessrias de duas a trs centrifugaes).
b) Aps descartar o sobrenadante da ltima etapa de centrifugao, transferir todo o
sedimento restante para um tubo de centrfuga de 50 mL de capacidade. Utilizar soluo
de sulfato de zinco para auxiliar na lavagem do tubo e transferncia do sedimento.
c) Adicionar mais soluo de sulfato de zinco at completar o volume de 25 mL e agitar com
Vortex. Completar novamente com sulfato de zinco at obter o volume final de 50 mL e
agitar novamente com Vortex. Centrifugar a 1000 g durante trs minutos.
d) Transferir o sobrenadante para o recipiente de filtrao a vcuo e proceder a filtrao em
membrana de 25 mm e porosidade de 8 m.
Nota: Tendo em vista a eventual dificuldade de filtrao, devido porosidade, ao tamanho da membrana e
ao teor de slidos presentes na amostra, pode-se tornar necessria a filtrao de alquotas menores,
utilizando-se vrias membranas.

e) Ao trmino da filtrao, adicionar 5 mL do corante selecionado e filtrar lentamente.


Retirar a membrana coloc-la sobre um papel filtro para perder o excesso de umidade (no
mximo por dois minutos).
f) Colocar uma gota de glicerol na lmina e espalhar sobre uma rea correspondente ao
tamanho da membrana (aprox. 25 mm de dimetro). Colocar a membrana com cuidado,
sobre o glicerol, para que no apaream bolhas de ar; adicionar outra gota de glicerol,
sobre a membrana, e espalhar com cuidado; colocar a lamnula e esperar at que a
membrana fique transparente, para permitir uma boa visualizao dos ovos. Caso se
deseje acelerar este processo, deve-se colocar a lmina na incubadora a 370C.
g) Observar ao microscpio usando objetivas de 10x e 40x de aumento. Se desejar um maior
aumento, observar com objetiva de 100x, aplicando uma gota de leo de imerso.

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94

MATERIAL E MTODOS

4.5.7

Expresso dos resultados

Para cada lmina, contar o nmero de ovos corados (ovos no-viveis) e no corados (ovos
viveis) e expressar o percentual de ovos viveis, por litro de amostra.
Lmina(a)
Corados (1)
1
2
3
4
5

Nmero de ovos
(No/L)
No corados (2)

Total (3)

Percentual de ovos
no corados (viveis)
(2)/(3)
-

Total
Mdia
Notas:

a) O nmero de lminas pode ser bastante varivel, dependendo das caractersticas de filtrabilidade
do esgoto.
b) Os resultados obtidos por meio da tcnica de colorao devem ser usados apenas para expressar
a frao de ovos viveis e no-viveis.
c) Para a enumerao/quantificao de ovos de helmintos, deve-se utilizar o mtodo de
BAILENGER ,modificado por AYRES& MARA (1996), conforme descrito no item 4.3.
d) Para se saber o nmero de ovos viveis na amostra processada, deve-se aplicar o percentual de
ovos viveis (obtido pela tcnica da colorao) sobre o nmero total de ovos da amostra (obtido
pelo mtodo de BAILENGER, modificado por AYRES & MARA (1996).

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95

MATERIAL E MTODOS

4.5.8

Ilustrao fotogrfica dos procedimentos

Alguns dos procedimentos para preparao das amostras, visando a anlise/quantificao de


ovos de helmintos viveis, em esgoto bruto, so ilustrados a seguir:

Figura 4.22 Concentrao da amostra por


centrifugao.
(procedimento a do item 4.5.6)

Figura 4.23 Homogeneizao da


amostra com Vortex.
(procedimentos a e c do item 4.5.6)

Figura 4.24 Nova centrifugao.


(procedimentos a e c do item 4.5.6)

Figura 4.25 Filtrao do sobrenadante em


membrana de 25 mm e 8 m.
(procedimento d do item 4.5.6)

Figura 4.26 Adio de 5 mL do corante


Safranina.
(procedimento e do item 4.5.6)

Figura 4.27 Lmina contendo a membrana


para visualizao no microscpio.
(procedimento f do item 4.5.6)

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96

MATERIAL E MTODOS

4.6 Anlise de viabilidade em guas residurias tratadas


4.6.1

Tcnica de concentrao por filtrao

Esta tcnica foi desenvolvida e validada originalmente para ser aplicada em guas naturais e
de abastecimento, entretanto foi comprovado que pode ser aplicada tambm para guas
residurias tratadas, que contenham pouca turbidez e slidos suspensos, e baixas
concentraes de ovos de helmintos.
4.6.2

Fundamento

A tcnica baseada na concentrao da amostra por filtrao a vcuo, atravs de uma


membrana de ster de celulose de 47 mm, com porosidade de 8 m. Os ovos aderidos
membrana so recuperados por flutuao com soluo de sulfato de zinco a 33,1%; a
contagem realizada por observao microscpica direta da membrana tingida com o corante
biolgico.
4.6.3

Equipamentos, materiais e reagentes

Equipamento de filtrao para membrana de 47 mm de dimetro


Equipamento de filtrao para membrana de 25 mm de dimetro
Sistema de vcuo (para operar at 40 cm Hg)
Centrfuga para operar a 1000 g
Microscpio com objetivas de 10x, 40x e 100x, com um bom poder de resoluo
Membranas de ster de celulose de 47 mm de dimetro e 8 m de porosidade (Millipore ou
equivalente)
Membranas de ster de celulose de 25 mm de dimetro e 8 m de porosidade (Millipore ou
equivalente)
Tubos para centrfuga de 50 mL de capacidade
Garrafes de plstico com tampa de rosca e capacidade de 5 e 10 litros
Lminas e lamnulas
Soluo salina isotnica (NaCl a 0,85% em gua destilada)
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MATERIAL E MTODOS

Soluo aquosa a 0,1% (p/v) de um dos seguintes corantes biolgicos: Azul de Tripan,
Safranina O, Eosina Y
Soluo aquosa de sulfato de zinco (ZnSO4. 7H2O) a 33,1% (p/v)
Glicerol
4.6.4

Preparao de solues

So os seguintes os principais procedimentos para a preparao das solues necessrias ao


desenvolvimento das anlises de viabilidade em efluentes tratados:
Soluo salina isotnica (NaCl a 0,85%): pesar 0,85 g de NaCl e diluir em gua destilada
at completar o volume de 100 mL de soluo.
Soluo aquosa de 0,1% (p/v) de Safranina O: pesar 0,1 g do corante Safranina e dissolver
em gua destilada at completar o volume de 100 mL de soluo.
Soluo aquosa de sulfato de zinco (ZnSO4. 7H2O) a 33,1% (p/v): pesar 33,1 g de ZnSO4.
7H2O e dissolver em gua destilada at completar o volume de 100 mL de soluo.
4.6.5

Coleta de amostras

Para fontes de abastecimento pblico, poos, mananciais e guas com baixos teores de
turbidez e slidos suspensos, coletar uma amostra com volume de 10 litros. Para guas
residurias tratadas, coletar uma amostra com volume de 5 litros.
Tampar os recipientes e transport-los ao laboratrio, se possvel preservados com gelo. As
amostras devero ser analisadas preferencialmente logo aps a coleta ou, eventualmente, em
um prazo mximo de 48 horas. Caso no seja possvel a anlise neste perodo (48 horas), as
amostras devero ficar armazenadas sob refrigerao por um perodo mximo de 15 dias.
4.6.6

Procedimento

Para amostras contendo grandes quantidades de detritos/slidos grosseiros, misturar a mesma


com um basto de vidro e filtrar atravs de uma gaze. Lavar perfeitamente os slidos que
ficarem aderidos gaze e processar 1 litro da amostra de acordo com os seguintes passos:

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98

MATERIAL E MTODOS
Nota: Para os casos de amostras que contenham muitos slidos, pode se tornar necessrio centrifugar as
mesmas algumas vezes, com soluo salina e com descartes sucessivos do sobrenadante. Nesses casos, deve-se
eliminar os procedimentos (a) e (b) e iniciar pelo (c).

a) Homogeneizar a amostra e filtrar 1 litro em membrana de 47 mm de dimetro e


porosidade de 8 m, aplicando um vcuo mximo de 40 cm de Hg. Ao trmino da
filtrao, lavar as paredes dos recipientes de filtrao com soluo salina isotnica e filtrar
essa gua de lavagem na mesma membrana.
b) Aps a filtrao, retirar a membrana e coloc-la sobre a parede interna de um tubo de
centrfuga e raspar com uma esptula; lavar a membrana e a esptula com soluo de
sulfato de zinco.
c) Adicionar sulfato de zinco gradativamente (agitando perfeitamente em cada adio) at
completar o volume de 50 mL. Centrifugar a 1000 g durante trs minutos.
d) Transferir o sobrenadante para o recipiente de filtrao com uma membrana de 25 mm de
dimetro e 8 m de porosidade. Filtrar aplicando pouca presso.
e) Ao trmino da filtrao, adicionar 5 mL do corante selecionado e filtrar lentamente.
Retirar a membrana coloc-la sobre um papel filtro para perder o excesso de umidade (no
mximo por dois minutos).
f) Espalhar uma gota de glicerol na lmina; colocar a membrana e adicionar outra gota de
glicerol e cobrir com uma lamnula e esperar at que a membrana fique transparente,
permitindo assim uma melhor visualizao dos ovos (se desejar acelerar o processo devese colocar a lmina na incubadora a 37 0C).
g) Observar no microscpio com objetiva de 10x e 40x.

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99

MATERIAL E MTODOS

4.6.7

Expresso dos resultados

Para cada lmina, contar o nmero de ovos corados (ovos no-viveis) e no corados (ovos
viveis) e expressar o percentual de ovos viveis, por litro de amostra.

Lmina(a)
Corados (1)
1
2
3
4
5

Nmero de ovos
(No/L)
No corados (2)

Total (3)

Percentual de ovos
no corados (viveis)
(2)/(3)
-

Total
Mdia
Notas:

a) O nmero de lminas pode ser bastante varivel, dependendo das caractersticas de filtrabilidade
do esgoto.
b) Os resultados obtidos por meio da tcnica de colorao devem ser usados apenas para expressar
a frao de ovos viveis e no-viveis.
c) Para a enumerao/quantificao de ovos de helmintos, deve-se utilizar o mtodo de
BAILENGER ,modificado por AYRES & MARA (1996), conforme descrito no item 4.3.
d) Para se saber o nmero de ovos viveis na amostra processada, deve-se aplicar o percentual de
ovos viveis (obtido pela tcnica da colorao) sobre o nmero total de ovos da amostra (obtido
pelo mtodo de BAILENGER, modificado por AYRES & MARA (1996).

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100

MATERIAL E MTODOS

4.6.8

Ilustrao fotogrfica dos procedimentos

Alguns dos procedimentos para preparao das amostras, visando a anlise/quantificao de


ovos de helmintos viveis, em esgoto tratado, so ilustrados a seguir:

Figura 4.28 Filtrao de 1 L da amostra


em membrana de 47 mm e 8 m.
(procedimento a do item 4.6.6)

Figura 4.29 Membrana contendo material


filtrado (ovos).

Figura 4.30 Transferncia do material


(ovos) para o tubo da centrfuga.
(procedimento b do item 4.6.6)

Figura 4.31 Filtrao do sobrenadante


em membrana de 25 mm e 8 m.
(procedimento d do item 4.6.6).

Figura 4.32 Adio de 5 mL do corante


Safranina, seguida de filtrao.
(procedimento e do item 4.6.6)

Figura 4.33 Lmina contendo a


membrana para visualizao ao
microscpio.
(procedimento f do item 4.6.6).

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101

MATERIAL E MTODOS

4.7 Ilustrao fotogrfica de ovos de helmintos pela tcnica da


colorao
Ilustraes de ovos viveis e no-viveis, identificados de acordo com a tcnica da colorao
so apresentados nas Figuras 4.34 a 4.37 (Fonte: ROJAS et al., 1998)

Figura 4.34 Ovo vivel de Trichuris trichiura


corado com Azul de Tripan

Figura 4.35 Ovo no vivel de Trichuris


trichiura corado com Azul de Tripan

Figura 4.36 Ovo vivel de Ascaris


lumbricoides corado com Azul de Tripan

Figura 4.37 Ovo no-vivel de Ascaris


lumbricoides corado com Eosina Y

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102

RESULTADOS E DISCUSSO

5 RESULTADOS E DISCUSSO
5.1 Ovos de helmintos
5.1.1

Remoo de ovos de helmintos no sistema de tratamento

5.1.1.1 Fase 1
Os resultados globais de contagem e identificao de ovos de helmintos da Fase 1 encontramse na Tabela A.1 (Anexo). No GRFICO 5.1 mostrada a distribuio temporal das
contagens de ovos de helmintos obtidas durante todo o perodo experimental da Fase 1, que se
estendeu por mais de 250 dias.
350
AUASB

Contagem (ovos/L)

300

EUASB

250
200
150
100
50
0
0

50

100

150

200

250

300

Perodo operacional (d)

GRFICO 5.1 Contagem de ovos de helmintos no esgoto bruto e no efluente do reator


anaerbio (Fase 1)

Pode-se observar que nas amostras de esgoto bruto (AUASB) foram encontrados valores de
ovos de helmintos que usualmente estiveram abaixo de 50 ovos/L, porm com muitas
oscilaes ao longo da pesquisa. Os valores mximo e mnimo obtidos foram de 240 e 5
ovos/L, respectivamente, com uma mdia aritmtica de 47,3 ovos/L.
No efluente do reator UASB (EUASB) foram obtidas contagens bem mais reduzidas,
freqentemente abaixo de 15 ovos/L, com valores mximo e mnimo de 39 e 2 ovos/L,
respectivamente. A mdia geral foi de 13,9 ovos/L, representando uma eficincia de remoo,
no reator UASB, da ordem de 71%.
No efluente final das rampas de escoamento superficial no solo no foram observados ovos de
nematides ou de cestides. H que se destacar, no entanto, que a contagem zero no
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103

RESULTADOS E DISCUSSO

garante que o efluente final das rampas esteja completamente livre de ovos de helmintos,
tendo em vista que nenhuma das metodologias de enumerao garante um percentual de
recuperao de 100% dos ovos eventualmente presentes na amostra processada. Ver discusso
sobre a qualidade do efluente final e possibilidade de reso no item 5.3.
5.1.1.2 Fase 2
Os resultados globais de contagem e identificao de ovos de helmintos da Fase 2 encontramse na Tabela A.2 (Anexo). No GRFICO 5.2 mostrada a variao temporal das contagens
de ovos de helmintos obtidas durante todo o perodo experimental da Fase 2, que se estendeu

Contagem (ovos/L)

por 321 dias.


350

AUASB

300

EUASB

250
200
150
100
50
0
0

50

100

150

200

250

300

350

Perodo operacional (d)

GRFICO 5.2 Contagens de ovos de helmintos no esgoto bruto


e no efluente do reator anaerbio (Fase 2)

Pela anlise do GRFICO 5.2 pode-se observar que durante os primeiros 200 dias da Fase 2
foram obtidas concentraes bem mais elevadas de ovos de helmintos no esgoto bruto
(AUASB), em comparao com a Fase 1, com concentraes quase sempre acima de 120
ovos/L. J no perodo subsequente, as concentraes variaram muito menos em amplitude,
permanecendo usualmente entre 50 e 100 ovos/L. Os valores mximo e mnimo obtidos para a
Fase 2 foram de 720 e 25 ovos/L, respectivamente, com uma mdia aritmtica de 119,6
ovos/L, enquanto que durante a Fase 1, foi observada uma mdia aritmtica de 47,3 ovos/L.
Aparentemente, no h explicaes diretas para as maiores contagens de ovos de helmintos
durante a Fase 2, no entanto, alguns fatores podem ter contribudo para isso:

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104

RESULTADOS E DISCUSSO

alterao do ponto de amostragem do esgoto bruto, da Fase 1 para a Fase 2. Na Fase 1, o


esgoto bruto era coletado junto ao tratamento preliminar, prximo da calha Parshall,
portanto antes do esgoto ter acesso ao poo de suco da estao elevatria. J na Fase 2, a
amostragem do esgoto bruto foi feita junto caixa de distribuio do reator UASB
compartimentado, aps a estao elevatria.
acumulao de ovos juntamente com os slidos que ficam retidos no poo de suco da
estao elevatria, abaixo do nvel, ou fora da rea, de bombeamento. Isso pode ocorrer
devido existncia de zonas mortas no interior do poo, fazendo com que, durante um
certo perodo (correspondente ao intervalo entre limpezas do poo de suco), os ovos de
helmintos fiquem retidos e no apaream nas amostragens coletadas junto linha de
recalque. No entanto, caso essas limpezas no sejam feitas, pode ocorrer a acumulao
excessiva de lodo e de ovos de helmintos no interior do poo e, eventualmente, o seu
bombeamento at o ponto de amostragem do esgoto bruto.
No efluente do reator UASB (EUASB) foram obtidas contagens mais reduzidas, usualmente
abaixo de 30 ovos/L, embora durante os primeiros 200 dias de operao do sistema tenham
sido obtidas concentraes mais elevadas (prximas a 50 ovos/L). O valor mximo observado
foi de 68 ovos/L e as contagens mnimas estiveram na faixa entre 0 e 2 ovos/L. A mdia
aritmtica foi de 20,5 ovos/L, enquanto que durante a Fase 1, foi observada uma mdia
aritmtica de 13,9 ovos/L. A eficincia de remoo no reator UASB foi da ordem de 82%.
Resultados muito semelhantes foram obtidos por Van Haandel & Lettinga (1994), que
observaram uma eficincia de remoo de ovos de helmintos em um reator UASB da ordem
de 82%, durante um perodo de monitoramento de 30 semanas.
As possveis causas que podem explicar as maiores concentraes de ovos de helmintos no
efluente do reator UASB, em relao Fase 1 so:
elevado teor de ovos de helmintos no esgoto bruto, com o conseqente aumento da
acumulao de ovos no reator;
baixo tempo de deteno hidrulica (TDH) no reator UASB, impondo elevadas
velocidades ascensionais e maior perda de slidos e ovos de helmintos, juntamente com o
efluente final. Nos horrios de pico de vazo, o TDH no reator foi inferior a 3 horas e a

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105

RESULTADOS E DISCUSSO

velocidade ascensional superior a 1,0 m/h. No reator anaerbio da Fase 1, o TDH mdio
foi de 13,5 h e a velocidade ascensional da ordem de 0,33 m/h (ver Tabela 4.1);
elevados intervalos de descartes de lodo, implicando em elevado acmulo de lodo e ovos
no reator. Dada a pequena profundidade do reator (3 metros), o lodo e os ovos acumulados
atingiam o compartimento de sedimentao e, devido s vazes de pico, ocorria a perda de
slidos e ovos com o efluente.
Na Fase 2, foi observada a presena de ovos de helmintos no efluente final das rampas de
escoamento superficial no solo. apenas em 5 amostras, de um total de 27 amostragens
efetuadas durante os 321 dias de operao do sistema. Nessas 5 amostras foi encontrada uma
concentrao mdia de 1,0 ovo/L, tendo sido as concentraes mxima e mnima iguais a 2 e
0,5 ovos/L, respectivamente. Considerando todo o perodo operacional da Fase 2, a
concentrao mdia foi de 0,2 ovo/L. Ver discusso sobre a qualidade do efluente final e
possibilidade de reso no item 5.3.
As primeiras amostras onde foram observados ovos de helmintos corresponderam ao perodo
de mudana da cobertura vegetal das rampas, ou seja, no existia ainda uma cobertura vegetal
densa, que de essencial importncia para o suporte de microrganismos. Nesse sentido, sem a
cobertura vegetal totalmente estabelecida, a velocidade do fluxo foi possivelmente maior,
favorecendo assim, o estabelecimento de caminhos preferenciais e o eventual carreamento de
ovos de helmintos para o efluente final.
No entanto, mesmo depois da cobertura vegetal apresentar-se estabelecida e homognea, foi
ainda observada a presena de ovos de helmintos em algumas amostras do efluente final das
rampas. Isso um indicativo de que tambm o regime hidrulico transiente imposto s rampas
durante a Fase 2 da pesquisa pode ter influenciado a ocorrncia de ovos no efluente. Com a
implantao do regime hidrulico transiente, a taxa de aplicao mxima foi da ordem de 0,86
m3/mxh, o que ocasionou o aumento da velocidade de percolao dos esgotos atravs do colo
das gramneas, dificultando a formao do filme biolgico, o qual desempenha as funes de
filtro biolgico.
Outro aspecto que pode ter contribudo para a ocorrncia de ovos de helmintos no efluente das
rampas, durante a Fase 2, refere-se aos maiores valores mdios encontrados no efluente do
reator UASB durante a Fase 2 (20,5 ovos/L), em relao aos valores encontrados na Fase 1
(13,9 ovos/L). Essa maior concentrao de ovos no efluente anaerbio, juntamente com as
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106

RESULTADOS E DISCUSSO

maiores taxas de vazo aplicadas s rampas, representa uma elevao substancial nas cargas
de ovos que efetivamente chegaram at as rampas de escoamento superficial no solo.
No entanto, o mtodo de escoamento superficial no solo considerado o mais completo e o
que apresenta melhor desempenho ao interagir com a natureza, vindo a apresentar condies
renovveis de tratamento. O sentido de renovvel est justamente relacionado percolao
dos esgotos entre o colo das plantas, que pode lavar o filme biolgico, ou parte dele,
arrastando os excessos, de modo a haver sempre a substituio por novas camadas biolgicas.
Talvez essa lavagem do filme biolgico, ou arraste, seja natural nesse mtodo de
tratamento de esgotos, mas no presente caso, deve ter se tornado mais acentuada uma vez que
as velocidades de percolao foram bem maiores que as usualmente praticadas. Com isso,
pode ter havido o arraste de alguns ovos de helmintos, que apareceram no efluente final.

5.1.2

Espcies de ovos de helmintos prevalentes

5.1.2.1 Fase 1

Os resultados globais de identificao de ovos de helmintos no sistema de tratamento de


esgotos, bem como de suas freqncias relativas de ocorrncia encontram-se na Tabela A.1
(Anexo). A visualizao dos resultados de freqncias relativas e de espcies prevalentes para
o esgoto bruto (AUASB ) e para o efluente do reator UASB (EUASB) pode ser observada nos
GRFICOS 5.3 e 5.4.

Freqncia de Distribuio (%)

100%
80%
60%
40%
20%
0%
1

7
8
Amostra

A. lum bricoides

Ancilostomdeos

Hymenolepis sp

T. trichiura

10

11

12

13

14

E. vermicularis

GRFICO 5.3 Freqncia de distribuio de ovos de helmintos no esgoto bruto (AUASB)


Fase 1

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107

RESULTADOS E DISCUSSO

Freqncia de Distribuio (%)

100%
80%
60%
40%
20%
0%
1

10

11

12

13

14

Amostra
A. lubricoides
Hymenolepis sp

Ancilostomdeos
T. trichiura

E. vermicularis
Taenia sp.

GRFICO 5.4 Freqncia de distribuio de ovos de helmintos no efluente UASB


(EUASB) Fase 1

Para o esgoto bruto foram encontrados ovos de nematides (ancilostomdeos, Ascaris


lumbricoides, Trichuris trichiura) e de cestides (Hymenolepis sp), com uma maior
prevalncia de ovos de Ascaris lumbricoides e de ancilostomdeos.
No efluente do reator anaerbio, foram identificados de ovos de nematides (ancilostomdeos,
Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura e Enterobius vermicularis) e de cestides
(Hymenolepis sp e Taenia sp). Os ovos de Ascaris lumbricoides e de ancilostomdeos
apresentaram freqncias de ocorrncia superiores s dos demais ovos de helmintos.
No efluente final das rampas de escoamento superficial no solo no foram observados ovos de
helmintos.

5.1.2.2 Fase 2
Os resultados globais de identificao de ovos de helmintos no sistema de tratamento de
esgotos, bem como de suas freqncias relativas de ocorrncia encontram-se na Tabela A.2
(Anexo). A visualizao dos resultados de freqncias relativas e de espcies prevalentes para
o esgoto bruto (AUASB ) e para o efluente do reator UASB (EUASB) pode ser observada nos
GRFICOS 5.5 e 5.6.

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108

RESULTADOS E DISCUSSO

Frequncia de distribuio (%)

100%
80%
60%
40%
20%
0%
1

A. lumbricoides

11

13 15
Amostra

Ancilostomdeos

17

19

21

Hymenolepis sp

23

25

T. trichiura

GRFICO 5.5 Freqncia de distribuio de ovos de helmintos no esgoto bruto (AUASB)


Fase 2

Frequncia de Distribuio (%)

100%
80%
60%
40%
20%
0%
1

11

13

15

17

19

21

23

25

Amostra
A. lumbricoides

Ancilostomdeos

Hymenolepis sp

T. trichiura

GRFICO 5.6 Freqncia de distribuio de ovos de helmintos no efluente UASB


(EUASB) Fase 2

No esgoto bruto foi observado ovos de nematides (ancilostomdeos, Ascaris lumbricoides,


Trichuris trichiura) e de cestides (Hymenolepis sp), com uma maior prevalncia de ovos de
Ascaris lumbricoides e de ancilostomdeos, conforme pode ser verificado pelo GRFICO 5.5.
No efluente do reator anaerbio as anlises de identificao mostraram a presena de ovos de
nematides (ancilostomdeos, Ascaris lumbricoides e Trichuris trichiura) e de cestides
(Hymenolepis sp). Os ovos de Ascaris lumbricoides e de ancilostomdeos apresentaram
freqncias de ocorrncia superiores s dos demais ovos de helmintos, conforme pode-se
verificar pelo GRFICO 5.6.
No efluente final das rampas de escoamento superficial no solo foram encontrados ovos dos
nematides (ancilostomdeos e Ascaris lumbricoides ) mas, diferentemente do que ocorreu
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109

RESULTADOS E DISCUSSO

com o esgoto bruto e com o efluente do reator UASB, com uma maior prevalncia dos ovos
de ancilostomdeos em relao aos ovos de Ascaris lumbricoides. Embora no se possa
explicar com certeza o porque dessa maior prevalncia de ovos de ancilostomdeos no
efluente das rampas, possvel que isso tenha ocorrido em funo desses ovos apresentarem
uma velocidade de sedimentao inferior a dos ovos de Ascaris (ver Tabela 4.6). Com isso, os
ovos de ancilostomdeos poderiam estar localizados na superfcie da lmina de esgoto, sendo
arrastados mais facilmente para o efluente da rampa.
Pode-se observar que tanto para as amostras de esgoto bruto quanto para as amostras de
efluente tratado, em ambas as Fases operacionais, as espcies prevalentes foram Ascaris
lumbricoides e ancilostomdeos, todavia, com uma maior prevalncia dos ovos de Ascaris
lumbricoides em relao aos ovos de ancilostomdeos. Isso se deve ao fato da ascaridase ser a
mais cosmopolita e a mais freqente das helmintases humanas, com nveis elevados de
ocorrncia especialmente em crianas na faixa etria de 1 a 12 anos. Essas elevadas
prevalncias so observadas em vrias regies brasileiras, tanto nas cidades como nas zonas
rurais, e tambm em nvel mundial (ver GRFICO 1.1 - Captulo 1). Os fatores mais
importantes que interferem nessa alta prevalncia so (NEVES et al., 2000):
grande nmero de ovos no peridomiclio, em decorrncia do hbito que as crianas
possuem de a defecarem;
grande concentrao de indivduos vivendo em condies precrias de saneamento bsico;
disperso dos ovos atravs de moscas, chuvas e ventos (poeiras);
viabilidade do ovo infectante que pode se estender por vrios meses ou anos;
grande produo de ovos pela fmea;
elevada umidade do ambiente.
5.1.2.3

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110

RESULTADOS E DISCUSSO

Ilustrao fotogrfica das espcies prevalentes


As espcies prevalentes de ovos de helmintos identificados nos esgotos brutos e tratados so
apresentadas nas Figuras 5.1 a 5.6.

Figura 5.1 Ovo de Ascaris lumbricoides

Figura 5.2 Ovo de Ancilostomdeo

Figura 5.3 Ovo de Hymenolepis nana

Figura 5.4 Ovo de Hymenolepis diminuta

Figura 5.5 Ovo de Trichuris trichiura

Figura 5.6 Ovo de Enterobius vermicularis

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111

RESULTADOS E DISCUSSO

5.1.3

Interferncia dos slidos sedimentveis

A presena de slidos sedimentveis em excesso pode interferir nas anlises de identificao e


enumerao de ovos de helmintos, uma vez que esses slidos conferem uma colorao escura
amostra e dificultam a visualizao microscpica. Alguns estudos, como o desenvolvido por
CRISPIM et al. (1994), indicam que os procedimentos do mtodo recomendado pela OMS
(BAILENGER modificado por AYRES & MARA, 1996) favorecem a separao dos ovos, da
camada de detritos e gorduras, possibilitando assim a sua anlise. De acordo com esse estudo,
foi possvel examinar amostras de esgoto bruto com valores de slidos sedimentveis de at
11 mL/L.
No presente trabalho, buscou-se avaliar a existncia de alguma correlao entre os teores de
slidos sedimentveis e as quantidades de ovos de helmintos nas amostras correspondentes.
Dessa forma, para as amostras com elevados teores de slidos sedimentveis, seriam
supostamente esperadas baixas contagens de ovos de helmintos, devido s possveis
interferncias dos slidos, no separados durante o preparo da amostra, que dificultariam a
visualizao dos ovos.
5.1.3.1 Fase1
No esgoto bruto (AUASB) o valor mximo de slidos sedimentveis foi de 14,0 mL/L e o valor
mnimo correspondeu a 0,8 mL/L. Aparentemente, de acordo com o GRFICO 5.7, apenas
em duas amostras (5 e 13) os elevados teores de slidos sedimentveis parecem ter
influenciado a identificao, quando as contagens de ovos de helmintos foram baixas.
Todavia, tambm foram obtidas baixas contagens de ovos de helmintos quando os teores de
slidos sedimentveis foram baixos (ex. amostras 11 e 14). Dessa forma, os poucos resultados
de slidos sedimentveis e de ovos de helmintos, bem como as faixas de valores encontrados,
no permitem estabelecer uma correlao clara entre esses dois parmetros (vide tambm
GRFICO 5.8).
No efluente do reator UASB (EUASB) foram encontrados valores de slidos sedimentveis que
variaram entre 0,1 e 2,5 mL/L, portanto, valores muito baixos e que, de acordo com outros
estudos efetuados, no interferem com as anlises de ovos de helmintos (CRISPIM et al.
1994). O presente trabalho tambm demonstra essa ausncia de interferncia dos slidos

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112

RESULTADOS E DISCUSSO

sedimentveis, sendo que no foi possvel estabelecer uma correlao entre esses dois
parmetros conforme mostrado nos GRFICOS 5.9 e 5.10.
Contagem (ovos/L)
S. Sedimentveis (ml/L)

16

16

14

60

12

50

10

40

30

20

10

S. Sedimentveis (mL/L)

70

S. Sedimentveis (mL/L)

Ovos de helmintos (ovos/L

80

0
1

12

20

GRFICO 5.7 Relao entre contagens de


ovos de helmintos e presena de slidos
sedimentveis AUASB (Fase 1)

Contagem (ovos/L)
S. Sedimentveis (ml/L)

40

30
20

10
0

0
2

80

Amostra

GRFICO 5.9 Relao entre contagens de


ovos de helmintos e presena de slidos
sedimentveis EUASB (Fase 1)

S. Sedimentveis (mL/L)

50

60

GRFICO 5.8 - Correlao entre contagens


de ovos de helmintos e concentrao de
slidos sedimentveis AUASB (Fase 1)

3
S. Sedimentveis (mL/L)

Ovos de helmintos (ovos/L

60

40
Ovos de helmintos (ovos/L)

Amostra

0
0

10

15

20

25

30

35

40

45

Ovos de helmintos (ovos/L)

GRFICO 5.10 - Correlao entre contagens


de ovos de helmintos e concentrao de
slidos sedimentveis EUASB (Fase 1)

5.1.3.2 Fase 2
No esgoto bruto (AUASB) o valor mximo de slidos sedimentveis foi de 9,5 mL/L e o valor
mnimo correspondeu a 2,0 mL/L. De acordo com o GRFICO 5.11, apenas em duas
amostras (2 e 4) os elevados teores de slidos sedimentveis parecem ter influenciado a
identificao, quando as contagens de ovos de helmintos foram zero. Dessa forma, os poucos
resultados de slidos sedimentveis e de ovos de helmintos, bem como as faixas de valores
encontrados, no permitem estabelecer uma correlao clara entre esses dois parmetros (vide
tambm GRFICO 5.12).
No efluente do UASB (EUASB) foram encontrados valores de slidos sedimentveis que
variaram de 0,5 a 3,5 mL/L. De acordo com o GRFICO 5.13, as amostras 2, 10 e 11, com
Programa de Ps-graduao em Saneamento, Meio Ambiente e Recursos Hdricos da UFMG

113

RESULTADOS E DISCUSSO

valores de slidos sedimentveis de 0,5, 3,5 e 1,3 mL/L, respectivamente, apresentaram


contagens de ovos de helmintos constantemente baixas, em torno de 2, 6 e 3 ovos/L,
respectivamente. No entanto, quando o valor de slidos sedimentveis foi de 3,5 mL/L, a
contagem de ovos de helmintos foi a maior se comparada com os outros valores das
respectivas amostras. Dessa forma, no foi possvel observar uma correlao entre a
quantidade de slidos sedimentveis e a contagem de ovos de helmintos (vide GRFICOS
5.13 e 5.14).
Co ntagem (o vo s/L)

16

10

140

14

120

12

100

10

80

60

40

20

160

6
7
Amostra

10

6
5
4
3
2
0

11 12

Contagem (ovos/L)
S. Sedimentveis (ml/L)

25

50
75
100
Ovos de helmintos (ovos/L)

125

150

GRFICO 5.12 - Correlao entre contagens


de ovos de helmintos e concentrao de
slidos sedimentveis AUASB (Fase 2)

30

25
20

15
10

5
0

0
1

10

11

12

Amostra

GRFICO 5.13 Relao entre contagens de


ovos de helmintos e presena de slidos
sedimentveis EUASB (Fase 2)

S. Sedimentveis (mL/L)

35
S. Sedimentveis (mL/L)

Ovos de helmintos (ovos/L

GRFICO 5.11 Relao entre contagens de


ovos de helmintos e presena de slidos
sedimentveis AUASB (Fase 2)

40

S. Sedimentveis (ml/L)

S. Sedimentveis (mL/L)

Ovos de helmintos (ovos/L

S. Sedimentveis (ml/L)

0
0

10

15

20

25

30

Ovos de helmintos (ovos/L)

GRFICO 5.14 - Correlao entre contagens


de ovos de helmintos e concentrao de
slidos sedimentveis EUASB (Fase 2)

Programa de Ps-graduao em Saneamento, Meio Ambiente e Recursos Hdricos da UFMG

114

RESULTADOS E DISCUSSO

5.1.4

Interferncia dos slidos suspensos

A fim de se avaliar a eventual interferncia dos slidos suspensos nas contagens de ovos de
helmintos, procedeu-se, da mesma forma que para os slidos sedimentveis (item 5.1.3), a
representao grfica desses dois parmetros. Essa anlise foi feita apenas para a Fase II da
pesquisa, tanto para o esgoto bruto como para o efluente do reator UASB, conforme mostrado
nos GRFICOS 5.15 a 5.18.
900

125

750

100

600

75

450

50

300

25

150

1000
Slidos Suspensos (mg/L)

Contagem (ovos/L)
Slidos Suspensos

Slidos Suspensos (mL/L)

Ovos de helmintos (ovos/L)

150

800
600
400
200
0

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18

20

Amostras

24

240

21

210

18
15

180
150

12

120

90

60

30

0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18
Amostras

GRFICO 5.17 - Contagem de ovos de


helmintos e concentrao de slidos
suspensos EUASB (Fase 2)

Slidos Suspensos (mg/L)

270

140

250

300
Slidos Suspensos (mL/L)

Ovos de helmintos (ovos/L)

Contagem (ovos/L)
Slidos Suspensos

27

120

GRFICO 5.16 - Correlao entre contagens


de ovos de helmintos e concentrao de
slidos suspensos AUASB (Fase 2)

GRFICO 5.15 - Contagem de ovos de


helmintos e concentrao de slidos
suspensos AUASB (Fase 2)

30

40
60
80
100
Ovos de helmintos (ovos/L)

200
150
100
50
0
0

10
15
20
Ovos de helmintos (ovos/L)

25

30

GRFICO 5.18 - Correlao entre contagens


de ovos de helmintos e concentrao de
slidos suspensos EUASB (Fase 2)

Novamente, os resultados mostraram uma ausncia de correlao entre slidos suspensos e


contagens de ovos de helmintos.

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115

RESULTADOS E DISCUSSO

5.1.5

Viabilidade dos ovos de helmintos

Os resultados dos testes de viabilidade de ovos de helmintos encontram-se na Tabela A.3


(Anexo) e so representados nos GRFICOS 5.19 e 5.20. Conforme pode-se depreender da
anlise desses grficos, as amostras de esgoto bruto e de efluente do reator UASB
apresentaram a ocorrncia tanto de ovos viveis (no corados) quanto de no viveis
(corados).

Percentagem de ocorrncia (%)

100%
80%
60%
40%
20%
0%
1

10

11

12

13

14

15

Amostra
Ovos no viveis

Ovos viveis

GRFICO 5.19 Freqncia de ocorrncia de ovos viveis e no viveis


no esgoto bruto - AUASB (Fase 2)
Percentagem de ocorrncia (%)

100%
80%
60%
40%
20%
0%
1

10 11 12 13 14 15

Amostra

Ovos no viveis

Ovos viveis

GRFICO 5.20 Percentagem de ocorrncia de ovos viveis e no viveis


no efluente do reator UASB - EUASB (Fase 2)

No perodo de anlises de viabilidade, que se estendeu por 5 meses, com um total de 15


amostras processadas, pde-se observar que a porcentagem de ovos viveis nas amostras de
esgoto bruto foi pequena, variando de 0 a 33 %, enquanto nas amostras de efluente do reator
UASB a porcentagem foi bem maior, variando de 0 a 84 %. Foram encontrados valores

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116

RESULTADOS E DISCUSSO

mdios de 3,9% de ovos viveis nas amostras de esgoto bruto e de 17,9 % de ovos viveis nas
amostras do efluente do reator UASB.
No entanto, esses resultados devem ser vistos com ressalvas, tendo em vista as incertezas
inerentes ao mtodo, conforme analisado a seguir:
as amostras do efluente do reator UASB apresentaram interferncias, sendo que alguns
ovos se mostraram em uma cor rosa fluorescente, quando seria esperada uma cor marrom
(para os ovos viveis) ou vermelha (para os ovos no viveis);
foram observadas diferenas de colorao e tonalidade tanto nos ovos viveis quanto nos
no viveis, a exemplo de ovos castanho-claro, castanho-escuro, castanho-avermelhado,
rosa, rosa-claro, vermelho e alguns literalmente pretos;
em algumas amostras, a colorao da membrana era muito vermelha, impossibilitando, s
vezes, a identificao e a contagem dos ovos;
em algumas amostras que continham uma quantidade de slidos visivelmente maior, a
membrana ficava mais escura, ocorrendo assim interferncia com a matria orgnica.
Nesse sentido, todos esses fatores dificultaram a identificao dos ovos viveis (no corados)
e no viveis (corados), uma vez que em vrias amostras se tornava impossvel ter certeza da
cor realmente correta. No entanto, em outras amostras havia uma regularidade em relao
tonalidade, sendo possvel a correta identificao dos ovos corados e no corados. Pelo
exposto, percebe-se que o mtodo se apresenta, em alguns momentos, muito subjetivo, onde
realmente no h um padro de cor para os ovos no viveis e viveis.
Tendo em vista essas dificuldades, foram feitos contatos com a Dra. Matilde Galvn
(UNAM/Mxico), uma das pesquisadoras responsveis pelo desenvolvimento do mtodo da
colorao rpida, objetivando solucionar os problemas identificados. Nesse sentido, foram
introduzidas algumas modificaes, conforme a seguir:
as amostras do efluente do reator UASB passaram a ser centrifugadas pelo menos trs
vezes, com soluo salina (NaCl 0,85%), antes do procedimento da filtrao, visando
diminuir as interferncias que levavam colorao rosa fluorescente dos ovos. Esse
procedimento reduziu efetivamente os problemas de interferncias, sendo que a cor rosa
fluorescente no foi mais observada;
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117

RESULTADOS E DISCUSSO

as amostras que continham uma quantidade aprecivel de slidos suspensos tambm


passaram a ser centrifugadas vrias vezes, com soluo salina, antes do procedimento da
filtrao. A incluso dessa etapa de centrifugao tambm proporcionou bons resultados
em relao reduo do tempo de filtrao. No entanto, dependendo da quantidade de
slidos presentes na amostra, a membrana se tornava mais ou menos vermelha, s vezes
com uma colorao muito intensa;
o volume do corante Safranina foi reduzido de 5 para 3 mL, o que possibilitou uma
melhora significativa em relao visualizao dos ovos, mas, mesmo assim, algumas
dvidas em relao cor dos ovos ainda persistiam;
o corante azul de Tripan foi testado, com adio de volumes que variaram de 1 a 5 mL,
mas os resultados s foram satisfatrios com a utilizao de volumes iguais a 1 e 2 mL. Os
volumes maiores no possibilitaram a visualizao dos ovos.
5.1.5.1 Dificuldades gerais do mtodo e adaptaes
O tempo requerido para a filtrao das amostras foi em torno de 5 horas, tanto para as
amostras de esgoto bruto quanto para as de efluente tratado. Era necessrio utilizar vrias
membranas de filtrao, uma vez que a elevada presena de slidos ocasionava a colmatao
muito rpida das mesmas. O nmero de lminas para a leitura final de cada amostra variou
entre 1 e 8, demandando um tempo de preparao para todas as lminas.
Nesse sentido, para uma maior rapidez do mtodo, as duas amostras (esgoto bruto e efluente
do reator UASB) passaram a ser centrifugadas com soluo salina e filtradas diretamente em
membranas de 47 mm e 8 m, com adio do corante e posterior leitura. Para permitir a
leitura dessa membrana maior, foi feita uma adaptao com a justaposio de duas lminas de
vidro, unidas com fita adesiva transparente, que possibilitou a colocao da membrana de 47
mm e de 4 lamnulas, sobre a membrana. Com isso, dois benefcios diretos foram alcanados:
uma sensvel reduo do tempo de filtrao da amostra, decorrente do aumento do
dimetro da membrana (que passou de 25 para 47 mm). Isso tambm possibilitou uma
economia no consumo de membranas;
a leitura de apenas uma lmina, maior, ao invs das 8 que eram eventualmente necessrias
anteriormente.
5.1.5.2
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118

RESULTADOS E DISCUSSO

Ilustrao fotogrfica dos ovos com utilizao da tcnica da colorao


A ilustrao fotogrfica dos ovos de helmintos aps a utilizao do corante Safranina
apresentada nas Figuras 5.7 a 5.9. Os ovos corados com azul de Tripan so apresentados nas
Figuras 5.10 a 5.12.

Figura 5.7 Ovo de Ascaris lumbricoides no


corado (corante Safranina 3 mL)

Figura 5.9 Ovo de Trichuris trichiura corado


(corante Safranina 3 mL)

Figura 5.11 Ovo de Ascaris lumbricoides


corado (corante Azul de Tripan 2 mL)

Figura 5.8 Ovo de Ascaris lumbricoides


corado (corante Safranina 3 mL)

Figura 5.10 Ovo de Ascaris lumbricoides


corado (corante Azul de Tripan 2 mL)

Figura 5.12 Ovo de Ascaris lumbricoides no


corado (corante Azul de Tripan 1 mL)

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119

RESULTADOS E DISCUSSO

5.2

Anlises bacteriolgicas

Em relao concentrao de coliformes totais e Escherichia coli, os resultados so


mostrados na Tabela A.4 (Anexo) e nos GRFICOS 5.21 e 5.22.
5.2.1

Coliformes totais

Para o esgoto bruto (AUASB) foram obtidas concentraes variando de 7,9 x 108 a 2,4 x 1011
NMP/100 mL, com uma mdia geomtrica de 9,8 x 109 NMP/100 mL. Para o efluente do
reator UASB (EUASB) as concentraes variaram de 4,6 x 107 a 2,4 x 109 NMP/100 mL, com
uma mdia geomtrica de 7,5 x 108 NMP/100 mL, representando uma eficincia mdia de
remoo de coliformes totais no reator UASB da ordem de 1 unidade logartmica.
As concentraes no efluente das rampas de escoamento superficial no solo, tambm,
apresentaram grandes variaes (1,0 x 105 a 1,8 x 109 NMP/100 mL), tendo sido obtido o
seguinte valor mdio 7,1 x 107 NMP/100 mL, representando uma eficincia mdia de
remoo de coliformes totais da ordem de 1 unidade logartmica.
Os dias operacionais e as concentraes de coliformes totais no esgoto bruto, efluente UASB
e rampas de escoamento superficial so mostrados no Grfico 5.21 .
1,0E+12
Colif. totais (NMP/100mL)

1,0E+11
1,0E+10
1,0E+09
1,0E+08
1,0E+07
1,0E+06
1,0E+05

AUASB

EUASB

ERAMPAS

1,0E+04
0

50

100

150

200

250

300

350

Perodo operacional (d)

GRFICO 5.21 Concentraes de coliformes totais no esgoto bruto e nos efluentes do


reator anaerbio e das rampas (Fase 2)

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120

RESULTADOS E DISCUSSO

5.2.2

Escherichia coli

Para o esgoto bruto (AUASB) foram obtidas concentraes variando de 2,3 x 1010 a 2,0 x 107
NMP/100 mL, com uma mdia geomtrica de 2,2 x 109 NMP/100 mL. Para o efluente do
reator UASB (EUASB) as concentraes variaram de 8,7 x 108 a 1,6 x 107 NMP/100 mL, com
uma mdia geomtrica de 2,2 x 108 NMP/100 mL, representando uma eficincia mdia de
remoo de Escherichia coli no reator UASB da ordem de 1 unidade logartmica. VAN
HAANDEL & LETINGA (1994) observaram uma eficincia de remoo um pouco menor,
menos que 1 unidade logartmica, representando uma eficincia de remoo no reator UASB
da ordem de 80%.
As concentraes no efluente das rampas de escoamento superficial no solo tambm
apresentaram grandes variaes (9,9 x 106 a 2,4 x 108 NMP/100 mL), tendo sido obtido o
seguinte valor mdio 3,0 x 107 NMP/100 mL representando uma eficincia mdia de remoo
de Escherichia coli da ordem de 1 unidade logartmica.
Os dias operacionais e as concentraes de Escherichia coli no esgoto bruto, efluente UASB e
efluente rampas so mostrados no Grfico 5.22.

Escherichia coli (NMP/100mL)

1,0E+11
1,0E+10
1,0E+09
1,0E+08
1,0E+07
1,0E+06
1,0E+05
AUASB

EUASB

ERAMPAS

1,0E+04
0

50

100

150

200

250

300

350

Perodo operacional (d)

GRFICO 5.22 Concentraes de Escherichia coli no esgoto bruto e nos efluentes do


reator anaerbio e das rampas (Fase 2)

A qualidade bacteriolgica do efluente final ainda insatisfatria para a sua utilizao na


irrigao irrestrita, uma vez que superior ao valor mximo recomendado pela OMS (WHO,
1989), que estabelece um padro de no mximo 1000 coliformes fecais/100 mL.

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121

RESULTADOS E DISCUSSO

A limitao dos sistemas de escoamento superficial de esgotos no solo em relao remoo


de coliformes j era esperada, conforme reportado na bibliografia especializada. Os sistemas
de escoamento superficial no solo no so eficientes relativamente remoo de
microrganismos indicadores, tais como os coliformes fecais (WPCF, 1990, citado por
CHERNICHARO, 1997). Peters & Lee (1978) observaram uma reduo de apenas uma
unidade logartmica (ou uma reduo de 90%) nos nveis de coliformes fecais aps a
aplicao de guas residurias brutas em um sistema de escoamento superficial. Lee & Peters
(1979) observaram um aumento das concentraes de coliformes fecais aps a aplicao de
efluente tratado em sistemas de lagoas durante meses mais quentes e relacionaram este
aumento com uma eventual recuperao da viabilidade por parte destas bactrias em
condies de temperaturas elevadas no sistema com escoamento superficial. Hall (1979)
observou que em algumas situaes, no caso de aplicao de efluentes secundrios, a
concentrao de coliformes pode at mesmo no sofrer qualquer alterao ao passar pela
rampa de escoamento superficial.
Nos sistemas de escoamento superfcie, as bactrias so retidas e removidas na superfcie do
solo por filtrao, predao biolgica, radiao ultravioleta, alcanando uma eficincia de at
95% no primeiro centmetro, e podendo chegar a 98% ou 99% de remoo no sistema como
um todo. Todavia, essa porcentagem de remoo depende das taxas de aplicao, do tempo de
deteno e do tamanho das rampas, que pode variar com diferentes distncias do ponto de
aplicao, em diferentes sistemas que utilizam o escoamento superficial no solo (PAGANINI,
1997).

5.3

Qualidade do efluente final e reso

Os resultados parasitolgicos obtidos durante as Fases 1 (mdia de 0 ovo de nematide/L) e 2


(mdia de 0,2 ovo/L), indicam o atendimento s diretrizes da OMS (WHO, 1989), que
estabelece, para irrigao restrita e irrestrita, o limite 1 ovo de nematide/L.
No entanto, em relao aos resultados das anlises bacteriolgicas da Fase 2, as concentraes
de E. coli obtidas foram bem superiores ao valor recomendado pela OMS (WHO, 1989), que
estabelece um padro de no mximo 1000 coliformes fecais/100 mL para a irrigao irrestrita.
Dessa forma, o efluente das rampas de escoamento superficial no solo s poderia ser utilizado
na irrigao restrita (cereais, culturas industriais, forrageiras, pastagens e rvores (ver Tabela
3.2 Captulo 3).
Programa de Ps-graduao em Saneamento, Meio Ambiente e Recursos Hdricos da UFMG

122

RESULTADOS E DISCUSSO

Outro aspecto a se ressaltar que, mesmo com os excelentes resultados obtidos de remoo
de ovos de helmintos no efluente das rampas, os riscos de sade pblica ainda persistem pois
os ovos ficam retidos no solo e na cobertura vegetal, em uma certa extenso das rampas.
Nesse sentido, procedeu-se uma investigao complementar, a fim de se avaliar em que
extenso das rampas ocorria remoo dos ovos de helmintos, tendo sido analisadas amostras
do efluente lquido coletadas a 5 metros do incio de cada rampa. Novamente, no foram
observados ovos de helmintos em nenhuma das amostras analisadas (total de 5 amostras),
fazendo crer que no estaria ocorrendo a incorporao destes ovos de helmintos nos 20 metros
finais de cada rampa. Com base nesses resultados, obtidos na Fase 1 de operao das rampas,
h uma indicao da existncia de menores riscos de manejo e de utilizao da biomassa
vegetal, a partir de uma certa distncia do ponto de aplicao dos esgotos nas rampas.
Entretanto, a remoo de microrganismos patognicos no processo limitada e no suficiente
a ponto de poder preconizar, sem reservas, a utilizao da cobertura vegetal como alimentao
animal (BASTOS, 1999).
Em relao incorporao de ovos de helmintos no solo, foram realizados alguns estudos
exploratrios que envolveram a anlise de amostras de solo coletadas na parte superficial nas
rampas de escoamento, tendo sido observados ovos de Ascaris lumbricoides e de
ancilostomdeos. Porm, esses resultados so ainda preliminares, necessitando de estudos
mais aprofundados para se ter uma melhor avaliao a esse respeito.
Durante a Fase 2, quando o sistema de tratamento foi operado em regime hidrulico
transiente, observou-se a presena de ovos de helmintos no efluente final das rampas, em
baixssimas concentraes e em poucas amostras, mas que de toda forma no confirmam os
resultados obtidos durante a Fase 1. Para essa situao de presena de ovos de helmintos no
efluente final, haveria o risco de contaminao da vegetao em toda a extenso das rampas.
Nesse sentido, necessrio garantir que o manejo e o destino final dessa vegetao seja
efetuado racionalmente.
Novamente, vale a pena ressaltar que, mesmo com os excelentes resultados obtidos de
remoo de ovos de helmintos no efluente das rampas nas Fases 1 e 2, os riscos de sade
pblica ainda persistem. Isso porque a etapa de desenvolvimento dos ovos de helmintos
(Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura e ancilostomdeos), at a fase infectiva, ocorre no
Programa de Ps-graduao em Saneamento, Meio Ambiente e Recursos Hdricos da UFMG

123

RESULTADOS E DISCUSSO

solo e na vegetao, e essa capacidade infectiva pode permanecer latente durante anos, se as
condies ambientais forem adequadas. Nesse sentido, alguns cuidados na irrigao de
culturas devem ser adotados quando esgotos tratados so utilizados para tal fim, uma vez que
agricultores e consumidores, em geral, so expostos a riscos diretos e indiretos de infeco
parasitria.

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124

CONCLUSES

6 CONCLUSES
6.1

Metodologia de identificao e enumerao

O mtodo de BAILENGER (1979), modificado por Ayres & Mara (1996), mostrou-se
adequado para a identificao e quantificao de ovos de helmintos em guas residurias
brutas e tratadas. O mtodo simples, com a utilizao de equipamentos e vidrarias de baixo
custo, sendo utilizados poucos reagentes qumicos. O tempo requerido para a leitura final
relativamente rpido, dependendo da qualidade do afluente e do efluente. No entanto, o
volume da amostra deve ser aumentado para 10 L quando esgotos tratados so processados.
Foi possvel a recuperao de ovos de vrias espcies de helmintos usualmente encontrados
em guas residurias, a exemplo de ovos de Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura,
ancilostomdeos, Hymenolepis nana, Hymenolepis diminuta, Enterobius vermicularis.
De acordo com a experincia na utilizao do mtodo e com o nmero muito grande de
anlises processadas no decorrer desse trabalho, foi adotado um tempo de 24 horas para a
etapa de sedimentao de amostras brutas e tratadas (ao invs do tempo de 1 a 2 h,
usualmente empregado), o que resultou em uma melhora sensvel da recuperao de ovos.
KNIG (2000) investigando o tempo de sedimentao como fator determinante da
concentrao final de ovos de helmintos (Ascaris) em esgoto bruto, observou-se claramente a
influncia do tempo de sedimentao sobre a concentrao final de ovos de helmintos. Esses
resultados preliminares sugerem a introduo de uma pequena modificao no protocolo de
rotina, visando melhores resultados.
Em algumas amostras de efluente anaerbio, o sobrenadante resultante do processamento da
amostra apresentou-se muito escuro, dificultando a leitura na cmara de McMaster. A cor
escura pareceu estar mais relacionada com a rotina operacional do reator anaerbio e com a
qualidade do efluente do mesmo, do que com o mtodo utilizado.

6.2

Metodologia de viabilidade

O mtodo da colorao possibilitou a observao tanto de ovos viveis (no corados), quanto
de ovos no viveis (corados). No entanto, algumas incertezas relativamente cor dos ovos
expostos ao corante indicam que o mtodo se apresenta, em alguns momentos, muito
subjetivo, onde realmente no h um padro de cor tanto para ovos viveis quanto para no
viveis.

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125

CONCLUSES

As tcnicas de concentrao por filtrao e por centrifugao podem ser aplicadas para vrios
tipos de amostras (esgotos brutos e tratados). A tcnica de concentrao por centrifugao
apresenta menores custos iniciais de equipamento e pode ser aplicada para efluentes tratados.
Porm, um volume maior de amostra deve ser processado para se obter um volume adequado
de sedimento para a recuperao dos ovos (por exemplo 5 L).
Para amostras com turbidez elevada, a tcnica de concentrao por filtrao no a mais
adequada, devido ao entupimento dos filtros e necessidade de constantes trocas dos
mesmos, atribuindo assim um aumento do tempo e dos custos para as anlises. Essa uma
forte desvantagem da tcnica, mas a eficincia de recuperao bem maior do que a tcnica
de concentrao por centrifugao.
As interferncias observadas com a utilizao da tcnica da colorao para o efluente do
reator UASB devem-se, possivelmente, presena de cidos orgnicos.
As amostras com elevados teores de matria orgnica geralmente apresentam uma cor mais
intensa, aps a filtrao com o corante, podendo interferir na observao. Nesse sentido, o uso
de um menor volume de corante (ex. 1 mL) diminui esse problema.

6.3

Sistema de tratamento de esgotos

De uma maneira geral, observou-se um pior desempenho do sistema de tratamento durante a


Fase 2, comparada Fase 1, em relao presena de ovos de helmintos nos efluentes do
reator anaerbio e das rampas de escoamento superficial. Os seguintes fatores podem ter
contribudo para isso:

a descaracterizao do esgoto bruto afluente ETE Nova Vista, que passou a apresentar
concentraes bem mais elevadas de slidos e de ovos de helmintos;

a mudana do regime hidrulico de alimentao do reator anaerbio e das rampas, que


passou do permanente para o transiente, resultando na aplicao de taxas muito
elevadas durante os perodos de vazo mxima.

a imposio de baixssimos tempos de deteno hidrulica no reator UASB


compartimentado, que repercutiu em velocidades ascensionais muito elevadas e em
maiores perdas de slidos e de ovos de helmintos juntamente com o efluente final.

A contagem de ovos de helmintos no esgoto bruto durante a Fase 2 (mdia de 119,6 ovos/L)
foi bem superior observada na Fase 1 (mdia de 47,3 ovos/L). No efluente do reator UASB
foram obtidas, tambm, contagens mais elevadas durante a Fase 2 (20,5 ovos/L) em relao
Fase 1 (mdia de 13,9 ovos/L). No entanto, apesar das maiores concentraes no esgoto bruto
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126

CONCLUSES

e no efluente do reator anaerbio compartimentado, durante a Fase 2, ainda assim foram


observadas, para o reator, eficincias de remoo de ovos de helmintos mais elevadas nessa
segunda fase, com mdia igual a 82%, contra 71% durante a Fase 1.
De uma maneira geral, o sistema de escoamento superficial no solo funcionou de forma
bastante promissora em relao remoo de ovos de helmintos, em funo das baixas
concentraes de ovos encontradas no efluente final das rampas. Foram obtidas concentraes
mdias de 0 e 0,2 ovo de nematide/L, nas Fases 1 e Fase 2, respectivamente.
Em relao concentrao de coliformes totais, foram obtidas concentraes mdias de 9,8 x
109 NMP/mL, 7,5 x 108 NMP/100 mL e 7,1 x 107 NMP/100 mL, para o esgoto bruto, efluente
do reator anaerbio e efluente das rampas, respectivamente. Esses valores representam
eficincias mdias de remoo de coliformes totais de 1 unidade logartmica, tanto para o
reator anaerbio como para as rampas. A eficincia global do sistema foi da ordem de 2
unidades logartmicas.
Em relao concentrao de Escherichia coli, foram obtidas concentraes mdias de 2,2 x
109 NMP/100 mL, 2,2 x 108 NMP/100 mL e 3,0 x 107 NMP/100 mL, para o esgoto bruto,
efluente do reator anaerbio e efluente das rampas, respectivamente. Esses valores
representam eficincias mdias de remoo de Escherichia coli de 1 unidade logartmica,
tanto para o reator anaerbio como para as rampas. A eficincia global do sistema foi da
ordem de 2 unidades logartmicas.

6.4

Qualidade do efluente final e reso

Embora a qualidade parasitolgica do efluente final das rampas ( 1 ovo de nematide/L)


indique a sua potencial utilizao para a irrigao irrestrita, as concentraes de Escherichia coli
(106 a 108 NMP/mL) indicam uma qualidade bacteriana insatisfatria. Como essas concentraes
so bem superiores ao valor mximo contido nas diretrizes da OMS (1000 coliformes fecais/100
mL), o efluente das rampas s poderia ser utilizado para a irrigao restrita (cereais, culturas
industriais, forrageiras, pastagens e rvores).
A adequao da qualidade bacteriolgica do efluente final das rampas, visando o atendimento
aos padres da legislao ambiental para lanamento em cursos de gua, depender
essencialmente das caractersticas do corpo receptor. Nesse sentido, para se atender o padro de
qualidade de um rio de classe 2 (mximo de 1000 coliformes fecais/100 mL), a diluio e a
concentrao de coliformes a montante do ponto de lanamento sero fatores preponderantes na
anlise. Exemplificando, para uma concentrao de coliformes fecais no rio da ordem 102
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127

CONCLUSES

NMP/100 mL, sero necessrios fatores de diluio de 1000 e de 100.000 vezes para que o
efluente das rampas com concentraes de 106 e 108 UFC/100 mL, respectivamente, se adeqem
legislao ambiental (Resoluo CONAMA 020/86). Notar que a legislao ambiental no
estabelece padres para ovos de helmintos.

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128

RECOMENDAES

7 RECOMENDAES
O mtodo da colorao rpida foi desenvolvido para guas naturais, guas residurias
domsticas brutas e efluentes primrios e secundrios para fins de reso. Nesse sentido, tornase importante a realizao de mais estudos para se determinar a convenincia, ou no, do uso
deste mtodo para efluentes anaerbios.
recomendvel que se avalie a metodologia de viabilidade por colorao rpida em maior
profundidade, quando empregada para a quantificao de ovos de helmintos, j que a mesma
parece no ser confivel para amostras que contenham baixas concentraes de ovos de
helmintos, tais como efluentes tratados.
So necessrios estudos mais aprofundados para avaliar a eficincia do mtodo da colorao
em outras espcies de ovos de helmintos.

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135

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

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Interamericano de ingenieria sanitaria y ambiental. Lima, Peru, 9 p.

Programa de Ps-graduao em Saneamento, Meio Ambiente e Recursos Hdricos da UFMG

136

ANEXOS

9 ANEXOS

Programa de Ps-graduao em Saneamento, Meio Ambiente e Recursos Hdricos da UFMG

137

138

9.1 TABELA A1 Resultados de ovos de helmintos Fase 1


Amostra

Data

14/07/97

30/07/97

13/08/97

27/08/97

24/09/97

15/10/97

29/10/97

10/12/97

07/01/98

10

28/01/98

Dia de
Ponto de
Slidos
Contagem
Freqncia Relativa (%)
operao Amostragem Sediment. (mL/L) (ovos/L) A. lumbricoides Ancilostomdeo E. vermicularis T. trichiura Hymenolepis sp
1
AUASB
240
81,2
12,5
0
0
6,3
EUASB
30
57,0
33,0
7,0
0
0
ERAMPAS
0
17
AUASB(1)
EUASB
31
64,5
19,3
12,9
0
3,2
ERAMPAS
0
31
AUASB
40
50,0
50,0
0
0
0
EUASB
10
75,0
25,0
0
0
0
ERAMPAS
0
45
AUASB
14
13
100,0
0
0
0
0
EUASB
0,1
8
70,0
20,0
0
0
10,0
ERAMPAS
3
0
73
AUASB
4,5
67
75,0
25,0
0
0
0
EUASB
0,1
13
62,5
25,0
12,5
0
0
ERAMPAS
0,2
0
94
AUASB
5
30
67,0
0
0
33,0
0
EUASB
0,1
3
100,0
0
0
0
0
ERAMPAS
0,3
0
108
AUASB
6
30
83,0
0
0
0
17,0
EUASB
13
80,0
20,0
0
0
0
ERAMPAS
0,1
0
150
AUASB
5,9
60
100,0
0
0
0
0
EUASB
0,1
7
100,0
0
0
0
0
ERAMPAS
0,1
0
178
AUASB
13
75,0
25,0
0
0
0
EUASB
2
100,0
0
0
0
0
ERAMPAS
0
199
AUASB
3
5
100,0
0
0
0
0
EUASB
0,5
39
84,7
11,9
0
3,4
0
ERAMPAS
0,2
0
-

Taenia sp
0
3,0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
-

138

139

TABELA A1 Resultados de ovos de helmintos Fase 1 (continuao)


Amostra

Data

11

18/02/98

12

04/03/98

13

18/03/98

14

01/04/98

Mdia AUASB
Mdia EUASB
Mdia ERAMPAS

Dia de
Ponto de
Slidos
Contagem
Freqncia Relativa (%)
operao Amostragem Sediment. (mL/L) (ovos/L) A. lumbricoides Ancilostomdeo E. vermicularis T. trichiura Hymenolepis sp
220
AUASB
0,8
47
0
93,0
7,0
0
0
EUASB
0,2
4
100,0
0
0
0
0
ERAMPAS
0,2
0
234
AUASB
10
10
100,0
0
0
0
0
EUASB
2,5
27
80,0
0
0
0
20,0
ERAMPAS
0,2
0
248
AUASB
5
20
100,0
0
0
0
0
EUASB
0,5
3
100,0
0
0
0
0
ERAMPAS
0,2
0
262
AUASB
40
66,7
33,3
0
0
0
EUASB
5
33,3
66,7
0
0
0
ERAMPAS
0
6,0
47,3
76,8
18,4
0,5
2,5
1,8
0,5
13,9
79,1
15,8
2,3
0,2
2,4
0,5
0,0
-

Taenia sp
0
0
0
0
0
0
0
0
0,0
0,2
-

Nota: (1) No foi possvel a identificao devido grande quantidade de slidos presentes na amostra

139

140

9.2 TABELA A2 Resultados de ovos de helmintos Fase 2


Amostra

Data

22/09/99

05/10/99

23/11/99

02/02/00

24/02/00

15/03/00

22/03/00

28/03/00

04/04/00

10

11/04/00

Dia de
Ponto de
Slidos
Contagem
Freqncia Relativa (%)
operao Amostragem Sediment. (mL/L) (ovos/L) A. lumbricoides Ancilostomdeo E. vermicularis T. trichiura Hymenolepis sp
1
AUASB
120
100,0
0
0
0
0
EUASB
16
92,0
8,0
0
0
0
ERAMPAS
14
AUASB
720
94,0
0
0
0
6,0
EUASB
68
84,0
12,0
0
2,0
2,0
ERAMPAS
63
AUASB
284
100,0
0
0
0
0
EUASB
21
94,0
0
0
0
6,0
ERAMPAS
0,5
100,0
0
0
0
0
134
AUASB
200
80,0
13,0
0
7,0
0
EUASB
48
77,7
16,7
0
2,8
2,8
ERAMPAS
156
AUASB
264
90,0
10,0
0
0
0
EUASB
40
100,0
0
0
0
0
ERAMPAS
0
175
AUASB
187
57,1
28,6
0
0
14,3
EUASB
44
91,0
9,0
0
0
0
ERAMPAS
0
182
AUASB
53
50,0
50,0
0
0
0
EUASB
13
100,0
0
0
0
0
ERAMPAS
0
188
AUASB
320
68,8
18,8
0
6,2
6,2
EUASB
45
74,0
22,3
0
0
3,7
ERAMPAS
0
195
AUASB
50
100,0
0
0
0
0
EUASB
9
100,0
0
0
0
0
ERAMPAS
0,7
0
100,0
0
0
0
202
AUASB
27
100,0
0
0
0
0
EUASB
32
50,0
37,5
0
0
12,5
ERAMPAS
1
0
100,0
0
0
0

Taenia sp
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

140

141

TABELA A2 Resultados de ovos de helmintos Fase 2 (continuao)


Amostra

Data

11

18/04/00

12

25/04/00

13

02/05/00

14

09/05/00

15

16/05/00

16

23/05/00

17

30/05/00

18

06/06/00

19

14/06/00

20

20/06/00

Dia de
Ponto de
Slidos
Contagem
Freqncia Relativa (%)
operao Amostragem Sediment. (mL/L) (ovos/L) A. lumbricoides Ancilostomdeo E. vermicularis T. trichiura Hymenolepis sp
209
AUASB
7,6
50
66,7
33,3
0
0
0
EUASB
1,3
16
33,3
33,3
0
0
33,4
ERAMPAS
0
216
AUASB
8,5
0
EUASB
0,5
2
0
100,0
0
0
0
ERAMPAS
0
223
AUASB
3,9
40
100,0
0
0
0
0
EUASB
0,8
15
81,8
9,1
0
0
9,1
ERAMPAS
0
230
AUASB
9,5
0
EUASB
1,5
19
71,4
28,6
0
0
0
ERAMPAS
0
237
AUASB
6,5
133
90,0
10,0
0
0
0
EUASB
1,5
10
100
0
0
0
0
ERAMPAS
0
244
AUASB
7,5
60
77,8
22,2
0
0
0
EUASB
0,9
27
96,3
3,7
0
0
0
ERAMPAS
0
251
AUASB
5
25
100,0
0
0
0
0
EUASB
1,2
15
100,0
0
0
0
0
ERAMPAS
0
258
AUASB
3,5
53
100,0
0
0
0
0
EUASB
0,9
12
83,3
16,7
0
0
0
ERAMPAS
0
266
AUASB
47
78,6
21,4
0
0
0
EUASB
8
80,0
20,0
0
0
0
ERAMPAS
0
272
AUASB
4,5
70
100,0
0
0
0
0
EUASB
0,6
12
100,0
0
0
0
0
ERAMPAS
0
-

Taenia sp
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
-

141

142

TABELA A2 Resultados de ovos de helmintos Fase 2 (continuao)


Amostra

Data

21

27/06/00

22

04/07/00

23

11/07/00

24

18/07/00

25

25/07/00

26

01/08/00

27

08/08/00

Mdia AUASB
Mdia EUASB
Mdia ERAMPAS

Dia de
Ponto de
Slidos
Contagem
Freqncia Relativa (%)
operao Amostragem Sediment. (mL/L) (ovos/L) A. lumbricoides Ancilostomdeo E. vermicularis T. trichiura Hymenolepis sp
279
AUASB
7,5
27
87,5
0
0
12,5
0
EUASB
3,5
6
100,0
0
0
0
0
ERAMPAS
0
286
AUASB
87
100,0
0
0
0
0
EUASB
12
100,0
0
0
0
0
ERAMPAS
0
293
AUASB
110
90,9
0
0
0
9,1
EUASB
24
77,8
16,7
0
0
5,5
ERAMPAS
0
300
AUASB
9
50
100,0
0
0
0
0
EUASB
1,3
3
100,0
0
0
0
0
ERAMPAS
0
307
AUASB
2
40
100,0
0
0
0
0
EUASB
1,5
16
87,5
0
0
0
12,5
ERAMPAS
2
0
100,0
0
0
0
314
AUASB
93
85,7
7,1
0
0
7,2
EUASB
21
90,9
9,1
0
0
0
ERAMPAS
0
321
AUASB
120
100,0
0
0
0
0
EUASB
0
ERAMPAS
1
100,0
0
0
0
0
6,3
119,6
88,2
8,9
0,0
1,1
1,8
1,3
20,5
83,3
13,2
0,0
0,2
3,4
0,2
4,3
13,0
0,0
0,0
0,0

Taenia sp
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0,0
0,0
0,0

142

143

9.3 TABELA A3 Resultados de coliformes totais e Escherichia coli Fase 2


Amostra
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25

Data

Dia de operao

23/11/99
25/11/99
16/02/00
23/02/00
01/03/00
16//03/00
21/03/00
28/03/00
04/04/00
11/04/00
18/04/00
25/04/00
02/05/00
09/05/00
16/05/00
23/05/00
06/06/00
13/06/00
20/06/00
04/07/00
11/07/00
18/07/00
25/07/00
01/08/00
08/08/00
Mdia Geomtrica

63
65
148
155
162
177
182
189
196
203
210
217
224
231
238
245
259
266
273
287
294
301
308
315
322

AUASB
1,0E+10
5,8E+10
2,4E+10
2,4E+11
4,2E+10
2,4E+10
7,7E+09
2,4E+10
1,2E+10
9,8E+09
2,0E+10
1,2E+10
7,9E+08
6,9E+09
2,0E+09
4,6E+09
5,2E+09
5,5E+09
1,6E+10
1,9E+09
7,3E+09
1,2E+10
2,5E+09
9,8E+09
4,1E+09
9,8E+09

coliformes totais
EUASB
3,0E+08
2,4E+09
1,2E+09
8,8E+08
7,8E+08
2,1E+09
5,2E+08
1,6E+09
1,3E+09
3,1E+08
1,0E+09
1,5E+08
1,1E+09
1,7E+08
1,0E+09
4,6E+07
6,5E+08
1,7E+09
9,8E+08
5,5E+08
1,6E+09
1,1E+09
9,2E+08
2,0E+09
8,7E+08
7,5E+08

ERAMPAS
1,1E+08
2,0E+08
1,8E+09
5,2E+07
1,3E+08
6,9E+07
1,0E+05
9,2E+07
1,9E+08
9,9E+06
7,7E+07
2,4E+08
8,2E+07
5,5E+07
1,7E+08
4,4E+07
3,3E+07
4,1E+07
2,4E+08
2,4E+08
1,7E+08
1,4E+08
4,9E+07
2,2E+07
4,4E+07
7,1E+07

AUASB
3,4E+09
9,3E+09
4,1E+09
2,3E+10
7,2E+09
4,6E+09
4,5E+09
2,9E+09
4,9E+09
6,1E+09
3,3E+09
2,0E+07
1,6E+09
1,4E+09
1,4E+09
1,7E+09
1,5E+09
3,6E+09
7,7E+08
1,7E+09
2,0E+09
4,2E+08
2,8E+09
8,2E+08
2,2E+09

Escherichia coli
EUASB
8,0E+07
5,8E+08
4,1E+08
1,4E+08
1,8E+08
7,1E+08
1,7E+08
6,1E+08
1,4E+08
4,4E+08
5,0E+07
3,9E+08
4,3E+07
1,6E+08
1,6E+07
1,9E+08
6,1E+08
2,4E+08
4,7E+07
8,7E+08
3,7E+08
3,3E+08
6,5E+08
3,4E+08
2,2E+08

ERAMPAS
2,6E+07
2,4E+07
1,7E+08
2,0E+07
1,0E+07
1,7E+07
1,4E+07
1,2E+08
2,3E+06
3,4E+07
2,4E+08
1,9E+07
2,8E+07
9,8E+07
1,1E+07
1,4E+07
9,9E+06
9,8E+07
6,6E+07
9,8E+07
9,2E+07
2,2E+07
1,6E+07
1,6E+07
3,0E+07

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