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UNIVERSIDAD ICESI
FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUMICAS
PROGRAMA DE QUMICA FARMACUTICA
SANTIAGO DE CALI
2014
DIRECTORES
CAROLINA MORA GUERRERO M.Sc.
JULIE BENAVIDES ARVALO Ph.D.
Co- DIRECTOR
GIOVANNY ROJAS Ph.D.
UNIVERSIDAD ICESI
FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUMICAS
PROGRAMA DE QUMICA FARMACUTICA
SANTIAGO DE CALI
2014
Nota de aceptacin
__________________________
Directores del trabajo de grado
__________________________
Co-Director del trabajo de grado
__________________________
Firma del jurado
__________________________
Firma del jurado
DEDICATORIA
Dedico este trabajo a DIOS, quien me ense a enfrentar retos y a comprender que para
alcanzar una meta, requiere sacrificio.
No sabis que los que corren en el estadio, todos a la verdad corren, mas slo uno se lleva el premio?
Corred de tal manera que lo obtengis
1-corintios 9:24
AGRADECIMIENTOS
TABLA DE CONTENIDO
RESUMEN
ABSTRACT 3
1.
INTRODUCCIN .......................................................................................... 5
2.
2.1
3.
MARCO DE REFERENCIA........................................................................... 9
3.1
3.2
3.3
3.4
3.4.1
3.4.2
3.4.2.1
pH ............................................................................................................... 16
3.4.2.2
Temperatura .................................................................................................. 18
3.4.3
4.
OBJETIVOS................................................................................................ 20
4.1
4.2
5.
METODOLOGA ......................................................................................... 21
5.1
5.1.1
5.1.2
Equipos ....................................................................................................... 21
5.1.3
5.1.3.1
5.1.3.2
5.1.3.2.1
5.1.3.2.2
5.1.3.2.3
5.1.3.2.4
5.1.3.2.4.1
5.1.3.2.4.2
Equipos
23
5.1.3.2.4.3
Procedimiento
23
5.1.3.2.4.3.1
5.2
5.2.1
5.2.2
Equipos ....................................................................................................... 25
5.2.3
Metodologa ...................................................................................... 25
5.2.3.1
5.2.3.1.1
Especificidad ............................................................................................... 26
5.2.3.1.2
Linealidad .................................................................................................... 26
5.2.3.1.3
Precisin ..................................................................................................... 27
5.2.3.1.3.1
Repetibilidad
5.2.3.2
5.2.3.2.1
5.2.3.2.2
5.2.3.2.3
5.3
6.
RESULTADOS Y DISCUSIN.................................................................... 32
6.1
6.1.1
6.1.2
6.1.3
6.1.4
6.1.5
6.1.6
6.1.7
6.2
6.2.1
6.2.1.1
Especificidad ............................................................................................... 44
27
6.2.1.2
Linealidad .................................................................................................... 48
6.2.1.3
Precisin ..................................................................................................... 51
6.2.1.3.1
6.3
7.
CONCLUSIONES ....................................................................................... 62
8.
RECOMENDACIONES ............................................................................... 64
9.
BIBLIOGRAFA .......................................................................................... 66
10.
ANEXOS ..................................................................................................... 69
LISTADO DE TABLAS
Tabla 6.1 Anlisis Elemental de NAP y la Sal NAP-Cu.. 40
Tabla 6.2. Observaciones de la comparacin de los espectros de absorcin de las
soluciones de NAP-Cu en buffer pH 1.2 ( 0.15 mol-L1), expuestos a la luz y protegidos
de la luz, en recipiente de vidrio mbar. 48
Tabla 6.3. Parmetros estadsticos para la linealidad de NAP-Cu en buffer pH 1,2 y
0.15 mol-L-1 49
Tabla 6.4. Cuadro de ANOVA para NAP-Cu en buffer pH 1.2y 0.15 mol-L1.. 50
Tabla 6.5. Intervalos de confianza (1 = 0.95) para el intercepto y la pendiente de la
curva de calibracin de NAP-Cu en buffer pH 1.2 y 0.15 mol-L1. 51
LISTADO DE FIGURAS
LISTADO DE ANEXOS
RESUMEN
En el presente trabajo de investigacin se realiz el estudio de la solubilidad de la
sal Naproxeno-Cobre (NAP-Cu), compuesto que fue obtenido mediante sntesis
qumica a partir de Acetato de Cobre (Cu2+) y Naproxeno (NAP), que es un
frmaco antiinflamatorio no esferoidal. Adems se realiz la purificacin de esta
sal, empleando agua destilada y utilizando filtracin al vaco.
Teniendo en cuenta como referencia los estudios de solubilidad del NAP que se
reportan en la literatura cientfica, se evalu como la solubilidad de este principio
activo puede cambiar mediante la formacin del compuesto NAP-Cu. La
determinacin de esta propiedad fisicoqumica se llev a cabo en medio acuoso a
condiciones especficas de pH (1.2, pH fisiolgico del estmago), temperatura
(25.0, 30.0, 35.0 y 40.0 0.1 C) y fuerza inica constante ( 0.15 mol-L-1). El
rango de temperatura fue seleccionado teniendo en cuenta que el valor normal de
la temperatura corporal en los seres humanos es aproximadamente 37 C.
El tomo de Cobre tiene la capacidad de formar sales complejas y se conoce
como tomo central en la formacin de las mismas, por las caractersticas que
este metal tiene, dentro de las que se resaltan, la disponibilidad de orbitales, su
valencia variable y su capacidad para actuar como cido de Lewis. De otro lado, el
NAP debido a que tiene en su estructura un grupo carboxilato, acta como
ligando, ya que los electrones libres de este grupo funcional le permiten establecer
enlaces inicos, con el metal, formando as un tipo de sal compleja.
Una vez se obtuvo el compuesto NAP-Cu se llev a cabo la caracterizacin del
mismo mediante espectroscopia infrarrojo (IR), Resonancia Magntica Nuclear
Protnica (RMN 1H), Anlisis Elemental y la cuantificacin de Cobre (Cu2+) por
Absorcin Atmica.
Con el desarrollo de este trabajo se busc aportar informacin a cerca de la
solubilidad de la sal NAP-Cu, compuesto de inters investigativo debido a su
potencial antiinflamatorio, dando respuesta a la siguiente pregunta de
investigacin:La solubilidad acuosa de la sal NAP-Cu determinada a diferentes
temperaturas, a pH 1.2, y fuerza inica () 0.15 mol-L-1, presenta un
comportamiento diferente respecto a los valores de solubilidad reportados en la
literatura para el frmaco sin modificar (NAP), bajo las mismas condiciones de
temperatura, pH y fuerza inica?
La dependencia de la solubilidad con la temperatura permiti calcular los
parmetros termodinmicos aparentes (expresados en molaridad) del proceso de
disolucin del compuesto, como son: energa libre, entalpa y entropa. Los
resultados obtenidos para estas propiedades termodinmicas fueron interpretados
considerando las interacciones soluto-solvente (NAP-Cu / medio acuoso a pH 1.2,
0.15 mol-L-1), especialmente las producidas por enlace de hidrgeno.
1
ABSTRACT
).
1. INTRODUCCIN
Como se puede observar, durante este estudio se tuvo en cuenta los factores que
influyen en la solubilidad de los ingredientes farmacuticos activos, principalmente
aquellos que son dependientes del medio y tienen la capacidad de incrementar o
disminuir esta propiedad fisicoqumica, como son el pH y la temperatura.
Finalmente, se calcularon las propiedades termodinmicas aparentes (expresadas
en molaridad) del proceso de disolucin de la sal NAP-Cu (
,
y
), en medio acuoso, en el cual se da la transferencia de las molculas de
este soluto desde la fase slida hasta la fase lquida.
Los compuestos formados por frmacos tipo AINEs y un metal como el Cobre
(Cu2+), son de gran inters en la investigacin y el desarrollo de nuevos
medicamentos, de esta manera algunos de los estudios reportados son: sntesis y
caracterizacin de naproxenato de cobre monohidrato o con cafena o con
nicotinamida, entre otros (Melnk et al., 1999); sntesis de compuestos con NAP y
algunos metales de transicin (zinc, cobre, hierro, entre otros) (Zhang et al., 2000).
En la literatura se ha reportado el potencial antiinflamatorio del NAP-Cu,
( ongrdyov y Jomov , 2012), sin embargo no existen estudios de solubilidad
de este tipo de complejos, ni de sales de NAP-Cu en medios acuosos y a
diferentes temperaturas, lo cual identifica una oportunidad para llevar a cabo
estudios de investigacin relacionados con la determinacin de propiedades
fisicoqumicas de los frmacos unidos a Cobre, en especial la solubilidad por la
importancia que tiene en el diseo y formulacin de productos farmacuticos.
La solubilidad de los componentes de una formulacin farmacutica,
principalmente la del frmaco, es uno de los factores ms importantes que se
debe considerar, debido a que esta propiedad fisicoqumica influye en los
procesos de disolucin y absorcin de los principios activos, y por tanto en la
accin de los medicamentos, ya que solo las molculas disueltas son capaces de
atravesar las membranas biolgicas (Vila, 2001).
Teniendo en cuenta el fundamento expuesto, se plantea la siguiente pregunta de
investigacin para el desarrollo del presente trabajo: La solubilidad acuosa de la
sal NAP-Cu determinada a diferentes temperaturas, a pH 1.2, y fuerza inica ()
0.15 mol-L-1, presenta un comportamiento diferente respecto a los valores de
solubilidad reportados en la literatura para el frmaco sin modificar (NAP), bajo las
mismas condiciones de temperatura, pH y fuerza inica?
Con el desarrollo de este trabajo de investigacin se obtuvo resultados del estudio
de la solubilidad de la sal NAP-Cu en un medio acuoso a pH 1.2 (pH fisiolgico del
estmago) y fuerza inica constante ( 0.15 mol-L-1), y a diferentes temperaturas
(25.0, 30.0, 35.0 y 40.0 0.1C), proporcionando as informacin til respecto a
una de las propiedades fisicoqumicas de gran importancia en el diseo,
formulacin y desarrollo de medicamentos, como es la solubilidad.
Adems, se determinaron las funciones termodinmicas aparentes del proceso de
disolucin de este compuesto (
,
y
). Por lo tanto, el
presente trabajo de grado se constituye en un referente de consulta para
posteriores investigaciones en el rea de fisicoqumica farmacutica,
especialmente en la realizacin de estudios de solubilidad de ingredientes
3.
3.1
MARCO DE REFERENCIA
3.2
PROPIEDADES
NAPROXENO
FSICAS,
QUMICAS
FISICOQUMICAS
DEL
10
3.3
Los tomos de los elementos metlicos tienen una clara tendencia a perder
electrones y convertirse por tanto en iones con carga positiva, esto es debido a
que poseen un radio atmico elevado en relacin a la carga de sus ncleos lo que
posibilita que sus electrones de valencia se desprendan con facilidad. Por otro
11
13
3.4.1
(Ec. 3.1)
En esta segunda etapa se involucran los siguientes aspectos (Vila, 2001):
a) Las molculas de soluto vencen las fuerzas cohesivas (atractivas) que las
mantiene unidas en estado lquido. Por su parte las molculas de disolvente deben
separarse suficientemente para crear cavidades donde se acomoden las
molculas de soluto. Esta etapa es endotrmica ya que necesita un aporte de
energa y su contribucin a la solubilidad es desfavorable.
b) Las molculas de soluto se insertan en las cavidades creadas en el disolvente. Se
produce la solvatacin del soluto, es decir la interaccin entre el soluto y el
disolvente mediante interacciones moleculares atractivas. Debido a que este
proceso es exotrmico contribuye favorablemente a la solubilidad.
cual el soluto en estado slido vence las fuerzas atractivas del cristal, seguida de
la mezcla con el disolvente, de acuerdo con las etapas a) y b) descritas
anteriormente. Adems esta figura resume el proceso de disolucin de slidos en
un solvente lquido, incluyendo las magnitudes termodinmicas de fusin y mezcla
(Vila, 2001).
Las ecuaciones 3.2 y 3.3 indican la entalpia (Hsln) y la entropa (Ssln) estndar
de solucin del slido, respectivamente (Vila, 2001):
15
Finalmente,
HM depende de la naturaleza del disolvente y puede ser
endotrmica y exotrmica. De esta manera la creacin de una cavidad en el
disolvente requiere suministro de calor (proceso endotrmico), mientras que la
solvatacin es un proceso exotrmico, favorable (Vila, 2001).
De acuerdo a lo anterior, el proceso de disolucin en medio acuoso para la
mayora de los solutos slidos implica un consumo de energa, es decir es un
proceso endotrmico. VantHoff propuso la siguiente ecuacin, que define la
relacin entre una constante de equilibrio, en este caso la solubilidad, y la
temperatura:
(Ec. 3.6)
Donde, K1 es la solubilidad a la temperatura absoluta T1 y K2 es la solubilidad a la
temperatura T2, H es una constante que corresponde al calor o a la entalpa de
disolucin y R es la constante de los gases cuyo valor es 8.3143J/(K-mol)
(Hanson, 2003). Entonces si en el proceso de disolucin se absorbe calor, H es
por convencin positiva y la solubilidad del soluto aumentar con el incremento de
la temperatura. Caber resaltar que en la ecuacin de Vantt Hoff se considera la
H como constante en el intervalo de temperatura entre 80-100C, debido a que
en este rango de temperatura no se genera variacin en la capacidad calorfica
(Cp), parmetro termodinmico que mide la energa que puede almacenar una
molcula en las rotaciones o vibraciones internas, generadas por la energa
suministrada en forma de calor (Hanson, 2003).
Por lo tanto mediante la ecuacin 3.6 se puede determinar la solubilidad a
cualquier temperatura, si se conoce el valor de H y la solubilidad a una
determinada temperatura (Hanson, 2003). Esta relacin entre la solubilidad y la
temperatura es importante para el desarrollo de este trabajo de investigacin,
puesto que se determin la solubilidad de la sal NAP-Cu a diferentes temperaturas
3.4.2 Factores que Influyen en la Solubilidad de solutos
3.4.2.1
pH
La mayor parte de los frmacos son cidos o bases dbiles. En el caso de los
cidos dbiles, stos se encuentran parcialmente disociados en disolucin acuosa,
lo cual se expresa mediante su respectiva constante de disociacin. Si HA
16
(Ec. 3.8)
La magnitud de Ka indica la tendencia del cido a ionizarse en agua, cuanto ms
grande es el valor de Ka, ms fuerte es el cido. Mediante la reaccin de
disociacin se puede deducir que en un medio cido los hidrogeniones [H 3O+]
presentes en el mismo reaccionarn con la base conjugada del cido dbil [A -], en
consecuencia el equilibrio estar favorecido hacia la formacin del cido dbil en
su forma molecular. En este caso, la solubilidad del cido dbil en medio acuoso
se ver disminuida debido a que las interacciones de tipo ion-dipolo entre el cido
y el agua estarn limitadas (Bursten, 2004).
Para determinar la solubilidad de un cido dbil como el NAP se debe tener en
cuenta el pKa del compuesto, que es 4.15 (Hanson, 2003) y el pH del medio en el
que se disolver. De esta forma, a un pH cido como el que se tiene en el fluido
gstrico (pH 1.0 a 2.0), el frmaco se encontrar predominantemente en su forma
molecular, por lo cual su solubilidad estar desfavorecida en medio cido; en
cambio a un pH alcalino (pH 5.0 a 7.0), la solubilidad del frmaco se incrementar
debido a que ste se encontrar principalmente en su forma disociada (Hanson,
2003).
De acuerdo a lo mencionado anteriormente, la solubilidad de un cido dbil en
funcin del pH del medio, se expresa mediante la ecuacin 3.9.
S(pH)= S0(1+ 10pH-pKa)) (Ec. 3.9)
Donde, S0 es la solubilidad intrnseca correspondiente a la forma no disociada del
compuesto (Hanson, 2003).
17
3.4.2.2 Temperatura
3.4.3
18
19
4. OBJETIVOS
4.1
OBJETIVO GENERAL
4.2
OBJETIVOS ESPECFICOS
20
5. METODOLOGA
5.1.2 Equipos
Espectrofotmetro IR, ThermoScientificNicolet; espectrofotmetro UV-VIS, UV1800 SHIMADZU; balanza analtica RADWAG AS 220/c/2, precisin 0.1 mg;
Nevera Mabe; planchas de agitacin y calentamiento VWR, bomba de filtracin al
vaco, GAST; micropipetas graduables Transferpette; conductmetro SCHOTT,
horno de secado Binder.
5.1.3.2
22
5.1.3.2.4
5.1.3.2.4.1
Materiales y Reactivos
5.1.3.2.4.2 Equipos
5.1.3.2.4.3 Procedimiento
24
5.2
ETAPA 2. DETERMINACIN DE LA SOLUBILIDAD DE LA SAL NAPCu A pH 1.2, FUERZA INICA () 0.15 mol-L-1 Y A DIFERENTES
TEMPERATURAS DE ESTUDIO
5.2.1
Materiales y Reactivos
Sal NAP-Cu; agua destilada conductividad <2S; cloruro de potasio R.A. Merck;
cido clorhdrico fumante P.A. Merck; filtros Millipore25 mm, 0.45 m dimetro de
poro; tubos de vidrio con tapa rosca; jeringas plsticas; material de vidrio graduado
y/o aforado.
5.2.2
Equipos
Metodologa
5.2.3.1
5.2.3.1.1 Especificidad
5.2.3.1.2 Linealidad
En la evaluacin de este parmetro se emple cinco concentraciones crecientes
de NAP-Cu en el sistema buffer: 0.8, 1.1, 1.4, 1.7 y 2.0g/mL en buffer pH 1.2 y
0.15 mol-L-1. La solucin de cada concentracin fue preparada por triplicado a
partir de la dilucin de tres soluciones madre de 5 mg/L de NAP-Cu en buffer pH
1.2.Es importante mencionar que debido a que el compuesto es muy hidrfobo, y
por lo tanto insoluble en sistemas acuosos, la cantidad de 5 mg de NAP-Cu fue
disuelta previamente en 80mL de metanol. Durante el ensayo de especificidad
tambin se evalu que no existiera interferencia de este solvente en la obtencin
del espectro de absorcin del compuesto en estudio.
Los resultados obtenidos fueron evaluados utilizando un anlisis de regresin
lineal y un ANOVA, adems se aplic la prueba t de Student para el intercepto, la
pendiente y el coeficiente de correlacin.
26
5.2.3.1.3 Precisin
5.2.3.1.3.1 Repetibilidad
Para determinar la repetibilidad relacionada con el instrumento de medida
(espectrofotmetro), se prepar una solucin de NAP-Cu de 1.1 g/mL en buffer
pH 1.2 y 0.15 mol-L1 y la cual fue leda diez veces.
En la evaluacin de la repetibilidad del mtodo, se elaboraron seis soluciones de
1,1 g/mL de NAP-Cu en buffer pH 1.2 y 0.15 mol-L1, a partir de una solucin
madre de 5 mg/L de NAP-Cu. Para esto se realizaron las diluciones
correspondientes hasta obtener lecturas de absorbancia en la zona media de la
grfica de linealidad. Es importante mencionar que las soluciones fueron
preparadas en un mismo da, por el mismo analista y ledas en el mismo equipo.
Para el caso de la repetibilidad del instrumento y del mtodo, el anlisis estadstico
se llev a cabo mediante la determinacin del coeficiente de variacin entre las
lecturas obtenidas.
5.2.3.2
5.2.3.2.1
27
5.2.3.2.2
28
29
5.3
Actividad
Indicador
Artculos y documentos
propios
de
metales,
complejos
y
ensayos
anteriores.
Adquisicin exitosa.
NAP-Cu
compuesto
el
caracterizarlo
Sintetizar
y
estructuralmente, utilizando tcnicas analticas como IR, RMN
1
2+)
H anlisis elemental y cuantificacin de Cobre (Cu por
absorcin atmica.
Objetivos
especficos
Estudiar la solubilidad de la sal NAP-Cu en medio acuoso, como parte de la etapa de pre-formulacin para el diseo de
potenciales formas farmacuticas.
Objetivo General
Adquirir
materiales y
reactivos.
Sntesis de la sal NAPCu.
Caracterizar la sal NAP1
Cu. Realizar IR, RMN H,
Anlisis
Elemental
y
Cuantificacin de cobre
2+
(Cu ), por Absorcin
Atmica.
Porcentaje de rendimiento
de la sal NAP-Cu.
Obtencin de espectros.
Vibraciones y enlaces
caractersticos de grupos
qumicos de la sal NAP-Cu
Seales de protones, con
un desplazamiento (ppm)
especifico de acuerdo a su
ambiente qumico.
Porcentaje de carbono,
hidrogeno
y
oxgeno
presentes en la molcula
de la sal NAP-Cu.
2+
30
31
Realizar
ensayos
preliminares
de
la
solubilidad de la sal
NAP-Cu a pH 1.2 y
-1
0.15 mol-L , a las
diferentes temperaturas
de estudio.
Determinacin
de
la
solubilidad de la sal NAPCu a pH 1.2 y 0.15
-1
mol- L , a 25.0, 30.0,
35.0 y 40.0 0.1 C.
Valores de la solubilidad
de la sal NAP-Cu a las
diferentes temperaturas de
estudio, en el sistema
solvente definido.
6. RESULTADOS Y DISCUSIN
6.1 SNTESIS Y CARACTERIZACIN DEL NAP-Cu
La sntesis realizada para la obtencin de la sal NAP-Cu 3, se realiz a partir del
NAP 1, y acetato de cobre 2, como se muestra en la ecuacin 6.1
(EC. 6.1)
Esquema 1
32
menor intensidad que las anteriormente descritas debido a que el momento dipolar
del enlace es pequeo y por lo tanto la vibracin de estiramiento y de deformacin
del enlace va a ser baja, en consecuencia se observa en ambos espectros bajas
intensidades de absorcin para este tipo de enlace (Morrison, 1998).
34
6.1.3
Esquema 2
35
(Vollhardt, 2000)
Es posible que la disminucin del nmero de onda con respecto a las bandas se
deba a que el par de electrones al conjugar con el grupo carbonilo por efecto
electrodonante, aumenta el carcter simple del grupo C=O y de esta manera baja
la frecuencia de estiramiento.
Entre 1213.29 y 1230.0 cm-1 se observa las bandas intensas correspondientes a la
vibracin de tensin del enlace C-O-C, tambin la absorcin de alta frecuencia por
alargamiento C-H del carbono Sp3, se observa en el espectro de NAP-Cu en
2362.02 cm-1 y en 2963.44 cm-1 se encuentran las bandas intensas
correspondientes a la vibracin de tensin del enlace C-H del carbono Sp2. La
seal correspondiente a la vibracin de tensin del enlace C=C de los anillos
aromticos de NAP-Cu aparece alrededor de 1505.97 cm-1. Entre
817.30 y 856.5 cm-1 se con conserva la seal con respecto a la del NAP y
corresponde a la flexin, fuera del plano del enlace, C-H de los anillos aromticos.
Finalmente con este anlisis se puede concluir que el espectro IR del NAP-Cu
tiene algunos cambios con respecto al espectro IR del NAP. Se resalta la ausencia
de la banda del enlace O-H correspondiente al grupo carboxlico del NAP,
confirmando la formacin del enlace inico entre Cu2+ y el NAP en su forma inica.
6.1.4 Caracterizacin del la Sal NAP-Cu por RMN 1H
En la figura 6.4 se presenta el espectro RMN 1H del NAP. Entre 7.0 y 8.0 ppm se
observa tres seales que corresponden a los protones de los anillos aromticos; a
7.74 y 7.69 ppm se encuentran los protones mas desplazados, posteriormente se
observa las seales 7.44 y 7.41 ppm y finalmente a 7.20 y 7.10 ppm se
encuentran las seales correspondiente a los protones que presentan menor
desplazamiento. Entre 3.90 y 3.83 ppm se encuentra un singulete que integra para
3 protones y que corresponde a los protones unidos al grupo metoxilo (O-CH3) y
en este desplazamiento tambin se encuentra un cuarteto que integra para 1
protn, y la seal entre 1.56 y 1.54 ppm es un singulete e integra para tres
protones y corresponde a los protones del CH3.
36
37
38
39
NAP
NAP-Cu
NAP
NAP-Cu
Carbono:72,10 %
Carbono: 65,15%
Carbono:73,026%
Carbono: 64,42%
Oxgeno: 20,845%
Oxgeno:18,39%
Hidrgeno: 6,129%
Hidrgeno:5,02 %
Oxgeno:21,81 %
Hidrgeno: 6,09 %
Hidrgeno: 5,12%
*Cobre (Cu
2+
): 11,26%
2+
40
0,3
Absorvancia
(Abs)
0,25
0,2
0,15
0,1
0,05
0
0
10
20
30
40
50
60
2+
= 22,571mg/L
= 1128.55 mg/L
41
42
43
6.2
6.2.1.1
Especificidad
44
45
Figura 6.8 Espectro UV del NAP-Cu en buffer pH 1.2 y 0.15 mol-L (Concentracin 1.5 g/mL).
-1
46
Figura 6.9 Espectro UV de la muestra resultante de la exposicin a luz solar, envasada en frasco
-1
de vidrio transparente, en buffer pH 1.2 y 0.15 mol-L (Concentracin 1.1g/mL de NAP-Cu).
Figura 6.10 Espectro UV de la muestra resultante de la exposicin a luz solar, envasada en frasco
-1
de vidrio mbar, en buffer pH 1.2 y 0.15 mol-L (Concentracin 1.1 g/mL de NAP-Cu).
47
Condicin de estrs
Duracin
(das)
Exposicin a
luz solar
Observacin
Envasada en baln de
vidrio transparente
La seal de mxima
absorcin presenta una
disminucin considerable
en
el
valor
de
absorbancia
y
se
encuentra deformado con
respecto
al
espectro
patrn.
6.2.1.2
Linealidad
48
0,800
0,700
Absorbancia
0,600
0,500
0,400
0,300
y = 0,3816x - 0,0117
R = 0,9973
0,200
0,100
0,000
0,0
0,4
0,8
1,2
1,6
2,0
2,4
Figura 6.11 Grfica de linealidad para NAP-Cu en buffer pH 1.2 y 0.15 mol-L
a 229,2 nm.
Hiptesis nula (Ho): no existe una correlacin significativa entre las dos
variables: concentracin (x) y absorbancia (y).
Hiptesis alterna (H1): Existe una correlacin significativa entre las dos
variables: concentracin (x) y absorbancia (y).
-1
Tabla 6.3. Parmetros estadsticos para la linealidad de NAP-Cu en buffer pH 1,2 y 0.15 mol-L .
Parmetro
Valor
Desviacin
estndar
Hiptesis
nula
Hiptesis
alterna
Intercepto
(a)
-0.01166
0.00657 (Sa)
H0: =0
H1: 0
Pendiente
(b)
0.38159
4.922 x 10
(Sb)
H0: =0
H1: 0
Correlacin
(r)
0.99867
-3
H0: r =0
49
H1: r 0
texp
ttab(16;0.05)
1.774
2.120
77.533
2.120
77.533
2.120
Tanto para la pendiente (b) como para el coeficiente de correlacin (r), el valor de t
experimental fue mayor que el t de la tabla (77.533 > 2.120), en consecuencia se
rechaza la hiptesis nula (Ho: r = 0 y Ho: = 0) y se acepta que existe una
correlacin significativa entre las dos variables, concentracin (x) y absorbancia (y)
con una confiabilidad del 95 %. De esta forma se evidencia que tanto r como b son
diferentes de cero, indicando con ello que existe regresin lineal entre la
concentracin y la absorbancia.
Este resultado obtenido
regresin (Tabla 6.4):
Prueba de Fisher:
Tabla 6.4. Cuadro de ANOVA para NAP-Cu en buffer pH 1.2y 0.15 mol-L .
Fuente de
Variacin
(F.V.)
Grados de
Libertad
(G.L.)
Sumatoria de
Cuadrados (S.C.)
Cuadrado Medio
(C.M.)
Fexp
Ftab
Regresin
1.10663
1.10663
6011.41
4.49
Error
16
0.000184088
2.94541 x 10
-3
50
Lmite de confianza
superior
Intercepto (a t * Sa)
0.002276
-0.025591
Pendiente (b t * Sb)
0.392022
0.371154
Precisin
6.3
Rplica 1
Rplica 2
Rplica 3
2.88
3.15
3.51
4.15
2.85
3.41
3.56
4.19
2.75
3.01
3.84
4.26
52
Promedio
Desviacin
estndar
Coeficiente
de
variacin
2.83
3.19
3.64
4.20
0.066
0.202
0.180
0.058
2.3%
6.3%
5.0%
1.4%
4,50
4,00
3,50
3,00
y = 0,091x + 0,495
R = 0,990
2,50
2,00
1,50
20,0
25,0
30,0
35,0
40,0
45,0
Temperatura ( C)
Figura 6.12 Solubilidad de NAP en medios acuosos: buffer pH 1.2, 0.15 mol-L-1 y buffer pH 7.4,
0.15 mol-L-1, en fraccin molar, en funcin de la temperatura.
Tabla 6.7. Solubilidad experimental de NAP-Cu en funcin de la temperatura ( 0.1 C), en buffer
-1
pH1.2, fuerza inica 0,15 mol-L , expresada en molaridad (C).
-1
25.0
30.0
35.0
40.0
-6
5.51 x 10
-6
6.04 x 10
-6
6.73 x 10
-6
7.95 x 10
Rplica 2
-6
5.46 x 10
-6
6.53 x 10
-6
6.82 x 10
-6
8.03 x 10
Rplica 3
-6
5.27 x 10
-6
5.76 x 10
-6
7.37 x 10
-6
8.17 x 10
Promedio
-6
5.42 x 10
-6
6.11 x 10
-6
6.97 x 10
-6
8.05 x 10
Desviacin
estndar
-7
1.264 x 10
-7
3.877 x 10
-7
3.450 x 10
-7
1.107 x 10
Coeficiente
de
variacin
2.3%
6.3%
5.0%
1.4%
de 152 C 154 C (ONeil et al., 2013). Como se conoce, entre mayor sea el
punto de fusin de un compuesto poco polar menor ser su solubilidad en medio
acuoso.
Tabla 6.8. Solubilidad experimental de NAP y NAP-Cu en funcin de la temperatura ( 0.1 C), en
-1
medio acuoso a pH 1.2 y fuerza inica 0,15 mol-L , expresada en molaridad (C)
-1
Compuesto
25.0 C
-5
NAP (a)
8.28 x 10
-6
NAP-Cu
5.42 x 10
(a) Tomado de Mora, 2006.
30.0 C
-5
9.69 x 10
-6
6.11 x 10
35.0 C
-4
1.169 x 10
-6
6.97 x 10
40.0 C
-4
1.493 x 10
-6
8.05 x 10
1,60E-04
Solubilidad (C)
1,40E-04
1,20E-04
1,00E-04
8,00E-05
6,00E-05
NAP-Cu
4,00E-05
NAP
2,00E-05
0,00E+00
25,0
30,0
35,0
40,0
Temperatura ( C)
Figura 6.13 Solubilidad experimental de NAP y NAP-Cu en funcin de la temperatura ( 0.1 C), en
-1
medio acuoso a pH1.2 y fuerza inica 0,15 mol-L , expresada en molaridad (C).
Temperatura (K)
-1,18E+01
Ln Concentracin (C)
-1,18E+01
-1,19E+01
-1,19E+01
y = -2461,x - 3,878
R = 0,997
-1,20E+01
-1,20E+01
-1,21E+01
-1,21E+01
-1,22E+01
1/T (K-1)
-1,22E+01
Figura 6.14 Ln Solubilidad de NAP-Cu en buffer pH 1.2, en funcin del recproco de la temperatura
-1
(K ), molaridad.
El valor absoluto de
expresa la magnitud de la variacin de la solubilidad
con la temperatura, y el signo positivo indica que durante el proceso de disolucin
del NAP-Cu en medio acuoso a pH 1.2 hubo absorcin de calor, es decir que el
proceso fue endotrmico.
Este comportamiento se debe al mecanismo por el cual el soluto en estado slido
se disuelve para pasar al estado de solucin. Una primera etapa a considerar es la
fusin del NAP-Cu en estado slido a soluto en estado lquido, lo cual requiere
suministro de energa. En este caso, la entalpa de fusin del compuesto tendr un
signo siempre positivo (desfavorable), ya que la fusin requiere del aporte de calor
(Vila, 1997). La entalpa de fusin para el NAP-Cu no fue determinada porque no
se dispona de un calormetro para ello y no estaba considerada dentro del
alcance del presente estudio.
La segunda etapa a tener en cuenta, es en la cual el soluto en estado llquido se
disuelve en la solucin. Esta etapa incluye la ruptura de las uniones entre las
molculas del soluto (NAP-Cu) y la separacin de las molculas del solvente
58
(a)
Temperatura (K)
Temperatura (C)
313.15
308.15
303.15
298.15
40.0
35.0
30.0
25.0
-1
(kJ-mol ) (a)
30.54
30.42
30.26
30.06
Calculado empleando los valores promedio de solubilidad del NAP-Cu obtenidos de la Tabla 6.7
59
Temperatura (K)
Temperatura (C)
313.15
308.15
303.15
298.15
40.0
35.0
30.0
25.0
(kJ-mol-1) (a)
22.94 (0.04)
23.20 (0.04)
23.294 (0.029)
23.298 (0.016)
Temperatura
(K)
313.15
308.15
303.15
298.15
Temperatura (C)
40.0
35.0
30.0
25.0
(J-mol-1K-1)
-32.18
-32.31
-32.31
-32.18
61
7. CONCLUSIONES
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
9.
10. La entropa de disolucin aparente del NAP-Cu fue negativa para el medio
acuoso a pH 1.2 y0.15 mol-L-1, lo cual se explica por la posible generacin
de un ordenamiento molecular por la solvatacin del NAP-Cu con el agua
(enlaces de hidrgeno) y se produzca la estructuracin de la misma
alrededor de los grupos no polares de las molculas de este compuesto
(efecto hidrofbico), conduciendo a que no exista un favorecimiento entrpico
en el proceso de disolucin.
11. En general, se evidenci que se presenta un desfavorecimiento tanto
entlpico como entrpico para el proceso de disolucin de la sal NAP-Cu en
agua a pH 1.2 y fuerza inica 0.15 mol-L-1.
63
8. RECOMENDACIONES
diferentes temperaturas (25.0, 30.0, 35.0 y 40.0 0,1 C). Esto con el fin de
comparar su comportamiento a esta condicin de pH con los valores de
solubilidad reportados en el presente trabajo a pH 1.2 y con los datos de
solubilidad del NAP que se encuentran registrados en la literatura en buffer
a pH 7.4 y fuerza inica 0.15 mol-L-1.
De igual forma, se propone determinar la solubilidad del compuesto
NAP-Cu en diferentes medios solventes orgnicos (octanol, cloroformo,
miristato de isopropilo y ciclohexano) a diferentes temperaturas (25.0, 30.0,
35.0 y 40.0 0,1 C), con el fin de comparar los resultados que se obtengan
con la solubilidad del NAP-Cu en medios acuosos y los datos de solubilidad
del NAP que se reportan en la literatura para estos solventes orgnicos.
Finalmente, se recomienda continuar profundizando en la evaluacin de los
parmetros termodinmicos relacionados con el proceso de disolucin del
NAP-Cu en pH 7.4 y 7.6; y fuerza inica 0.15 mol-L-1, y en los solventes
orgnicos, as como tambin, determinar la entalpa de fusin de este
compuesto. Estos valores de pH son propuestos debido a que
corresponden al pH de la sangre y pH del intestino (ligar donde se absorbe
NAP) respectivamente.
65
9. BIBLIOGRAFA
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JONES, L,(2006), Principios de Quimica: Los caminos del descubrimiento, 3th
edicion, Editorial Mdica Panamericana, Buenos Aires.
66
194.
67
68
10. ANEXOS
ANEXO 1. CERTIFICADO DE CALIDAD
69
1
Ci Z i2
70