UNIVERSIDAD MARIA AUXILIADORA

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

BIOQUIMICA II
DETERMINACION DE PROTEINAS TOTALES EN SUERO

ALUMNOS:

AROTINCO ROJAS, TANIA

CANTARO, JENS
CASTRO MARTINEZ, JUAN CARLOS
DE LA CRUZ ROJAS, INGRID
SAUCEDO ESTELA, PAMELA
TINEO TICONA, SOLEDAD

LIMA PERU
2016

DETERMINACION DE PROTEINAS TOTALES EN SUERO

RESUMEN:
La cuantificacin de protenas presentes en los medios biolgicos (sangre, orina,
lquido cefalorraqudeo) es utilizada como prueba complementaria para ayuda en
el diagnstico. Esta cuantificacin puede englobar al conjunto de protenas, como
es el caso de la proteinemia, proteinuria y proteinorraquia, o referirse a protenas
especficas, como albmina, Bence Jones, -antitripsina, ceruloplasmina, etc. El
presente trabajo tiene como objetivo conocer el procedimiento de la realizacin de
la prueba , as como tambin conocer su fundamento.
SUMMARY:
The quantification of proteins present in biological media (blood, urine,
cerebrospinal fluid) is used as supplementary test to aid in the diagnosis. This
quantification can encompass the whole of proteins, as in the case of the
proteinemia, proteinuria and protein levels, or refer to specific proteins such as
albumin, Bence Jones, -antitrypsin, ceruloplasmin, etc. This research aims to
know the procedure of the test, as well as also its foundation.

MARCO TEORICO:
PROTEINAS TOTALES
Las protenas totales de nuestro organismo son un conjunto de compuestos
orgnicos macromoleculares, de un peso molecular elevado, que estn formadas
por molculas llamadas aminocidos que se unen entre s por enlaces peptdicos.
La secuencia con la que estos aminocidos se encadenan y el nmero de
cadenas de aminocidos, determinan cul es la estructura primaria de las
protenas.

Las protenas son introducidas en el organismo a travs de los alimentos, donde

se dividen en aminocidos para formar posteriormente las nuevas protenas a
travs del proceso conocido como sntesis de protenas. Las protenas realizan
multitud defunciones en nuestro organismo para su correcto funcionamiento.
Las protenas totales son el resultado de sumar los distintos componentes
proteicos presentes en el organismo tales como: Alfa1, alfa2, beta gamma
globulina y albmina. Las protenas fraccionadas, al contrario que las protenas
totales, miden la cantidad especfica de cada protena. Ambas pruebas, protenas
totales y fraccionadas, son tiles a la hora de determinar estados anormales y
enfermedades que pueden afectar a nuestro organismo.

PROTEINAS TOTALES EN SUERO

Cuando se hace referencia a las protenas totales en suero, se trata una
medicin aproximada de todas las protenas presentes en la parte lquida de la
sangre. La prueba que determina las protenas totales en sangre, examina
especficamente la cantidad total de dos tipos de protenas: globulinas y
albmina.
Este examen a menudo se hace para diagnosticar problemas nutricionales,
enfermedad renal o enfermedad heptica. Si los niveles de protenas totales son
anormales, por ejemplo en caso de que el paciente presente protenas totales
bajas, es necesario realizar exmenes adicionales con el fin de identificar el
problema especfico.
ENFERMEDADES RELACIONADAS CON LAS PROTEINAS TOTALES
Las protenas totales son tiles a la hora de realizar el seguimiento de los
cambios en los niveles de protenas que causan diversos estados de
enfermedad. Generalmente la comprobacin de las protenas totales se realiza

junto con otras pruebas como la electroforesis de protenas, la seroalbmina o

las pruebas de la funcin heptica.
La determinacin de los niveles de protenas totales es til en la deteccin de:

Hiperproteinemia causada por deshidratacin, hemoconcentracin o

aumento en la concentracin de protenas especficas.

Hipoproteinemia por hemodilucin producida por un defecto en la

realizacin de la sntesis proteica, catabolismo proteico excesivo o perdidas
excesivas (hemorragias).

La deshidratacin, las enfermedades hepticas crnicas y el mieloma mltiple

son estados que pueden producir niveles altos de protenas totales.
El descenso de los niveles de protenas totales es propio del fallo heptico
terminal y de la enfermedad renal.
Con frecuencia se calcula una proporcin de albmina/globulina a fin de obtener
informacin adicional. El diagnstico clnico debe realizarse teniendo en cuenta
todos los datos clnicos y de laboratorio.

VALORES NORMALES DE PROTEINAS

El rango normal de protenas totales es de 6.0 a 8.3 g/dl (gramos por decilitro).
La cantidad considerada como valor normal de protenas totales puede variar
ligeramente entre pruebas realizadas por distintos laboratorios.

COMPETENCIAS:
1. Conoce el fundamento en la determinacin de protenas totales.
2. Determina y cuantifica los valores de protenas en suero sanguneo.

FUNDAMENTO:

El mtodo utilizado, se basa en la reaccin de Biuret, en el cual los enlaces

peptdicos de las protenas reaccionan con el ion cprico, en medio alcalino, para
dar un complejo color azul violeta con mximo de absorcin a 540 nm. El color
formado se mide colorimtricamente, cuya intensidad es proporcional a la
concentracin de protenas totales en la muestra.

MATERIALES Y REACTIVOS:
Materiales
Gradilla
Tubos de ensayo
Micropipetas
Espectrofotmetro
Reactivos
Reactivo de Biuret
Agua destilada
Suero diluido
Estndar de protenas
PROCEDIMIENTO:
1. Se debe preparar la muestra mediante la dilucin del suero (1/10),
tomndose 0,1 ml de suero y completar con agua destilada (volumen final
1 ml).

2. En tres tubos de prueba marcado B (blanco), S(estndar) y MP (muestra

problema) colocar:
TUBOS
ml. st protenas 0,54%
ml. suero diluido (1/10)
ml. reactivo de Biuret
ml. agua destilada

BLANCO
----1.0
0.5

STANDAR
0.1
--1.0
0.4

MP
--0.1
1.0
0.4

3. Mezclar e incubar durante 10 minutos a 37C

4. Leer las absorbancias a 540nm en el espectrofotmetro, llevando a cero

con el blanco de reactivo. El color resultante es estable por lo menos treinta
minutos.

RESULTADO:

TUBOS
ml. st protenas 0,54%
ml. suero diluido (1/10)
ml. reactivo de Biuret
ml. agua destilada
Absorbancia
Correccin

BLANCO
----1.0
0.5
0,060

STANDAR
0.1
--1.0
0.4
0,370
0,31

MP1

0,333
0,273

MP2
--0.1
1.0
0.4
0,351
0,291

MP3

0,338
0,278

CUESTIONARIO:
1. Mencione los valores de referencia de protena en el lquido
cefalorraqudeo
Las protenas en LCR son de 15 a 45 mg/dL
2. Mencione las causas de hipoproteinemia e hiperproteinemia
Hipoproteinemia

hiperproteinemia
3. Determine la concentracin de protenas de su muestra cuyo suero se
diluyo al 1/20 y se procedi tal como sigue: suero 0,2 ml + 2 ml
reactivo de Biuret + 0,8 ml de agua destilada. Lectura la mitad de la
obtenida de su mesa. Determine la concentracin de protenas de la
muestra
4. Determine la concentracin de albumina y globulina de su muestra de
suero. Si la concentracin de albumina es el 58% de las protenas
totales.
BIBLIOGRAFIA:
1. Protenas,[sede web][acceso 22 de marzo del 2016]disponible en:
http://proteinas.org.es/proteinas-totales
2.