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Facultad de Ciencias Biolgicas
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con una prdida de soporte seo. 19 sta se inicia en la porcin coronal del implante,
mientras que en la porcin ms apical del mismo se mantiene oseointegrado 20. Si los
cambios inflamatorios se observan en los tejidos blandos alrededor de un implante
sometidos a carga, hablamos de una mucositis perimplantaria.21 La sobre-carga
biomecnica y la acumulacin de placa alrededor del implante representan los
factores etiolgicos ms importante en la perimplantitis. 22-23 Un estudio realizado por
Mombelli, 22 establece que la sintomatologa asociada con la perimplantitis est
representada por:
1. Destruccin sea periimplantaria mantenindose, generalmente, una zona apical
sin alteraciones y sin movilidad del implante
2. Formacin de una bolsa periimplantaria.
3. Sangrado al sondaje e incluso supuracin de los tejidos periimplantarios.
4. Puede presentarse posible mucositis perimplantaria
5. Presencia o no de dolor
Numerosos investigadores han establecido diferencias significativas en la
composicin de la flora microbiana entre un implante en condiciones saludables y
uno en condiciones no saludables; demostrando que, la flora microbiana del surco
perimplantario de un implante clnicamente estable, es similar aquella encontrada en
el tejido peridentario sano (compatible con los criterios de salud periodontal) y esta
compuesta bsicamente por especies de Streptococcus y Actinomyces.
Capnocytophaga ochracea y Veillonella parvula.9-10-11-24-25-26-27-28-29-30-31-32 Por otra
parte, los microorganismos asociados a la instauracin y desarrollo de la enfermedad
periodontal: Fusobacterium, espiroquetas, Actinobacillus actinomycetemcomitans,
Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Bacteroides forsythus (Tannerella
forsythensis), Campylobacter rectus tambin han sido identificadas en los tejidos
perimplantarios afectados por perimplantitis. 9-10-11-15-26-29-31-33-34
Los pacientes con antecedentes de enfermedad periodontal, tienden a presentar una
elevada incidencia de patgenos periodontales seis meses despus de haber
expuesto los implantes al medio bucal. Estas afirmaciones establecen la posible
asociacin entre bacterias patgenas periodontales y la periimplantitis. 11-32-35-36
Lee y col., 32 determinaron que los pacientes con antecedentes de enfermedad
periodontal en la medida que los implantes eran sometidos a carga, en el tiempo,
aumentaba la proporcin de P. gingivalis y T. forsythensis.Listgarten y
Helldn,29 mediante tcnica de cultivo, compararon la flora microbiana presente en
pacientes con implantes fracasados (IF), peridontitis en adultos (PA) y periodontitis
refractaria (PR). Los resultados arrojaron en los pacientes (IF) T. forsythensis 59%,
espiroquetas 54%, Fusobacterium 41%, Peptostretococcus micros39%, y P.
gingivalis 27%. En pacientes (PA) T. forsythensis 83%, Fusobacterium
80%, espiroquetas 79%, P. gingivalis 59%, P. micros 51% y Eikenella
corrodens 37%. En pacientes (PR) T. forsythensis 85%,Fusobacterium 83%, P.
gingivalis 60%, espiroquetas 59%, C. rectus 56% y P. micros 56%.
Hultin y col., 35 estudiaron la microbiologa y respuesta inflamatoria del hospedero en
muestras tomadas de 17 pacientes parcialmente edntulos, con un total de 98
implantes con cuadro de periimplantitis. Entre las especies mayormente aisladas
citan: A. actinomycetemcomitans , P. gingivalis, P. intermedia, T. forsythensis y
Treponema denticola. En relacin a la respuesta inflamatoria del hospedero se
concluy que en los pacientes con periimplantitis se encuentra una mayor actividad
de la enzima elastasa y una elevada concentracin de lactorerrina.
Callan y col.,37 mediante pruebas de ADN, realizaron un estudio microbiolgico en
pacientes parcialmente edntulos para la deteccin de 8 cepas periodontopatognicas distintas, a partir de muestras tomadas de 43 implantes seo-integrados
en condiciones estables, en la interfase implante-abutment, 25 das despus de la
segunda fase quirrgica. Los resultados revelaron una moderada a elevada
proporcin de las cepas estudiadas:A. actinomycetemcomitans 41,9%, T.
forsythensis 60,5%, C. rectus 44,2%, E. corrodens 60,5%,Fusobacterium
nucleatum 48,8%, P.gingivalis 46,5%, P. intermedia 55,8% y T. denticola 51,2%.
Estos resultados, demuestran la translocacin de bacterias hacia los implantes,
provenientes de la flora dentaria residual.
Con la prdida de los dientes desaparecen las especies adheridas a estas superficies,
as como los anaerobios del surco gingival que pueden reaparecer sobre las
prtesis. 38 Un estudio realizado mediante Reaccin Polimerasa en Cadena (RPC) se
descart la presencia de P. gingivalis en muestras tomadas de maxilar inferior de 15
pacientes completamente edntulos (8 mujeres y 7 hombres con edades
comprendidas entre 40 y 70 aos). A. actinomycetemcomitans fue detectado en un
13,3% y P. intermedia en 46,7% de los sujetos. Cuatro y seis meses despus de
colocar los implantes, estos fueron cargados mediante prtesis fijas, tomando
muestras en la regin del surco perimplantario, aislndose P. gingivalis en un 46,7%
y 53,3, A. actinomycetemcomitansen un 60 y 73,3% y P. intermedia en 46,75 y
53,3% respectivamente, pese de haber un control adecuado de higiene bucal. 39
Danser y col., 40 mediante tcnicas de cultivo evaluaron la microbiota bucal de 26
pacientes completamente edntulos, portadores de prtesis totales sin implantes,
detectando P. gingivalis en solo 2 individuos (7,6%) yP. intermedia en 7 individuos
(27%). En un estudio posterior Danser y col.,41 no detectaron estos microorganismos
de muestras tomadas de mucosa bucal en pacientes con extracciones recientes de
todos sus dientes. Rosenberg y col., 42 establecieron diferencias en cuanto a la flora
microbiana de las peri-implantitis de acuerdo al origen. En las periimplantitis de
origen infeccioso, se encontraron predominantemente bacterias pertenecientes al
Gnero Peptostreptococcus, Fusobacterium y espiroquetas. Por el contrario, en las
peri-implantitis por sobrecarga biomecnica, encontraron una microflora compuesta
por bacterias pertenecientes al Gnero Streptococcus y en menor cantidad bacilos
Gram-negativos.
Las bolsas perimplantarias mostraron un comportamiento anlogo al de la
enfermedad periodontal en lo que a los datos clnicos y microbiolgicos se refiere
(prdida sea, profundidad de sondaje mayor de 5 mm y recuentos microbianos
mayores de 1.000.000 de unidades formadoras de colonias, incluyendo un
porcentaje mayor del 20% de especies anerobias). Tras el tratamiento con
clorhexidina irrigada y diez das de antibioterapia sistmica, se produjo una
inmediata y mantenida mejora en el sangrado, profundidad de sondaje, composicin
microbiana (cambios evolutivos a una microbiota menos patgena) y regeneracin
radiolgica de la lesin sea, lo que demuestra la veracidad del principio de que el
tratamiento con terapia antimicrobiana de las lesiones perimplantarias que se
asemejan a la enfermedad periodontal, puede proporcionar efectos teraputicos
beneficiosos mantenidos en el tiempo.43
Por otra parte, en un estudio realizado en perros y monos, utilizando modelos
experimentales de perimplantitis, inducida por ligaduras retentivas impregnadas de
placa dental, las lesiones fueron tratadas con terapia antimicrobiana sistmica,
amoxicilina y metronidazol, adems de un tratamiento mecnico local consistente en
Vegetal (papa)
Microbiano (levaduras)
Animal (carne)
2. Su estado fsico
Lquidos (leche)
Semislidos (mantequilla)
Slidos (queso)
almacenamiento
para
mantener
la
microbiota
a
un
bajo
nivel.
En las carnes frescas y curadas, aves y mariscos, los ms frecuentes son:
Bacterias
Achromobacter
Bacterium
Clostridium
Corynebacterium
Escherichia
Lactobacillus
Micrococcus
Salmonella
Streptococcus,
etc
Hongos
Penicillum
Mucor
Cladosporium
A la hora de producir alimentos comerciales de buena calidad, es importante
mantener los microorganismos a un bajo nivel por razones estticas, de salud pblica
y de vida til.
Examen microbiolgico de los alimentos
Proporciona informacin en cuanto a la calidad del producto bruto y a las condiciones
sanitarias en que ha sido elaborado, as como a la eficacia del medio de
preservacin. En el caso de los productos es posible identificar el agente causal de la
alteracin y una vez conocido investigar: Foco de contaminacin Condiciones que la
han hecho posible Tomar medidas para evitar repeticin. Las tcnicas microbiolgicas
no estn especializadas, generalmente se hace un examen directo al microscopio y
los consecutivos mtodos de cultivo. Siempre es importante detectar las bacterias
coliformes.
Aquellos que afectan la salud del consumidor y estn en estrecha relacin con
la microbiologa mdica.
microorganismos alteradores
microorganismos indicadores
de los alimentos.
Determinacin de microorganismos a 30 C
Determinacin de coliformes
Determinacin de coliformes fecales (actualmente mas conocido como
termotolerantes)
Prueba de esterilidad
Microorganismos indicadores
* Microorganismos a 30C Comnmente este indicador es conocido como
microorganismos aerobios mesfilos, este trmino an es empleado por algunos
autores, pero tomando en cuenta los criterios de las Normas ISO (Internacional
Standard Operation), por las cuales se rigen los microbilogos de alimentos de
nuestro pas, esta nueva denominacin de microorganismos a 30 C es la que se
emplea en el texto. Los microorganismos que forman parte de este grupo son muy
heterogneos. Esta cualidad se deriva de la propia definicin del grupo. Se incluyen
en l a todas las bacterias, mohos y levaduras que en aerobiosis muestran capacidad
para formar colonias visibles, bajo las condiciones en las cuales se ejecuta el ensayo
con crecimiento a temperatura optima para los mesfilos. Es evidente que en una
situacin particular podran quedar incluidos microorganismos patgenos. La mayora
de los alimentos industrializados y/o listos para el consumo (excepto por ejemplo los
productos fermentados) deben ser considerados como indeseables para el consumo,
cuando tienen un gran nmero de microorganismos, an cuando estos
microorganismos no sean conocidos como patgenos y no hayan alterado de forma
apreciable los caracteres organolpticos del alimento. Pueden darse varias razones
que justifiquen esta conducta.
Interpretacin de los recuentos altos segn el tipo de alimento:
En productos estables:indica materia prima contaminada. Tratamientos no
satisfactorios desde el punto de vista sanitario. En productos perecederos:indica
adems condiciones inadecuadas de tiempo y temperatura durante el
almacenamiento. Significa que puede haberse dado condiciones favorables para la
multiplicacin de microorganismos patgenos de origen humano o animal. Algunas
cepas de bacterias mesfilas comunes, no generalmente consideradas como agentes
de
enfermedades
transmitidas
por
los
alimentos
(Proteus
sp., enterococos y Pseudomonas mesfilasC por 72 horas. ) han sido sealadas
como causa de enfermedad cuando existan en nmero elevado de clulas viables.
Todas las bacterias patgenas conocidas en los alimentos son mesfilas y en algunos
casos contribuyen con su presencia a los recuentos en placas encontrados. El mtodo
de deteccin comnmente empleado para la determinacin de este indicador es el de
recuento estndar en placa vertida. En general se utiliza un medio de cultivo rico en
nutrientes sin sustancias inhibidoras ni indicadores; el medio ms utilizado
mundialmente es el agar para recuento en placa o agar triptona-glucosa-extracto de
levadura. Las colonias obtenidas en el medio slido se cuentan despus de la
incubacin en aerobiosis a 30
* Organismos coliformes C, algunas fermentan la lactosa lentamente. Los
organismos coliformes son el grupo indicador con mayor tradicin en la microbiologa
C, mientras que los no fecales no lo hacen. En 1904 Eijkman descubri que los
coliformes presuntivos de contaminacin fecalproducen gas en un medio de glucosa
incubado a 46
El trmino surgi como un intento de encontrar mtodos rpidos y fiables para
demostrar la presencia de E. coli y variantes estrechamente relacionadas sin
necesidad de purificar los cultivos obtenidos en las pruebas para coliformes o de
aplicar las relativamente costosas pruebas confirmatorias2. Este grupo se refiere a
aquellos coliformes que tienen capacidad para fermentar la lactosa con produccin de
gas a temperaturas de 44 - 45 C. Excepto este sealamiento, los coliformes fecales
se identifican con el resto de los coliformes en lo que se refiere a su resistencia al
medio ambiente, agentes qumicos y factores que favorecen o impiden su desarrollo.
En los ltimos aos se considera que el trmino de coliformes fecales debe
sustituirse por el de coliformes termotolerantes, ya que el calificativo fecal subraya
un origen y por tanto implicaciones que estn lejos de sustentarse en la realidad.
Para el recuento de este grupo se requiere un control muy riguroso de la
temperatura de incubacin, generalmente un bao Mara de precisin con lmites de
variacin no mayores de 0.2 C. La tcnica para su recuento generalmente es el NMP
a una temperatura de incubacin de 44.5 0.2 C. El NMP se computa en las tablas
correspondientes en la forma indicada para los coliformes totales. Los mtodos de
filtracin por membrana tambin pueden emplearse en este caso.
* Escherichia coli Es el representante genuino de origen fecal por lo que es el
indicador ms confiable de contaminacin fecal en alimentos.
E. coli es un germen cuyo hbitat natural es al tracto entrico del hombre y de los
animales de sangre caliente. Por ello la presencia de este microorganismo en un
alimento indica generalmente una contaminacin directa o indirecta de origen fecal.
Es el indicador clsico de la posible presencia de patgenos entricos en el agua, en
los moluscos, en los productos lcteos y en otros alimentos. Cifras altas de E. coli en
un alimento sugieren una falta de limpieza en el manejo del mismo y un
almacenamiento inadecuado.
Los mtodos de deteccin son muy parecidos a los que se utilizan en la
determinacin de coliformes fecales y en ocasiones los mismos (NMP, placa vertida,
filtracin por membrana), en estos momentos se estn utilizando mucho en pases
desarrollados los mtodos cromognicos y fluorognicos. Los recobrados de E. coli de
los mtodos convencionales requieren de una confirmacin bioqumica de las cepas
aisladas.
* Enterobacterias totales.
Muchos pases han introducido el anlisis de los alimentos que han recibido un
tratamiento para asegurar su inocuidad por una prueba que determina la familia
entera de las Enterobacteriacea (es decir, los tipos lactosa positiva y lactosa
negativa). Es capaz de identificar microorganismos que no estn incluidos dentro del
grupo de coliformes. Este indicador es utilizado principalmente en Europa, no es muy
utilizado en Amrica Latina y El Caribe, las razones por las cuales algunos
laboratorios prefieren este indicador son las siguientes:
Las bacterias "coliformes" o del grupo coli-aergenes constituyen un grupo mal
definido taxonmicamente.
Una prueba slo para las bacterias lactosa positivas puede llevar a resultados
falsamente seguros en el caso en los que predominan los lactosa negativas
(Salmonella, Shigella, E. coli enterinvasiva, etc.).
C por 24 horas, las colonias presuntivas se confirmarn mediante la prueba de la
oxidasa y la oxi-fermentacin de la glucosa (utilizacin de la glucosa en condiciones
de aerobiosis y anaerobiosis). Para su deteccin se utiliza generalmente el mtodo
de placa vertida utilizando medio de agar rojo violeta bilis ms glucosa ya que el
fundamento de aislamiento de las Enterobacterias est dado por la fermentacin de
la glucosa en el medio de cultivo a 37
En nuestro pas est probado por investigaciones realizadas que el indicador
coliformes totales cumple con las expectativas para evaluar la calidad sanitaria de los
alimentos de mayor consumo por lo que es el indicador utilizado en la actualidad en
los programas de vigilancia nacionales en lugar del indicador Enterobacterias.
* Enterococos Designaciones como estreptococos fecales y estreptococos del grupo D
de Lancenfield se emplearon como sinnimos de enterococos. Las bacterias de este
grupo consisten en clulas esfricas u ovoides notablemente ms robustas que los
micrococos y estafilococos, dispuestos en pares o cadenas cortas. La determinacin
cuantitativa de enterococos es bastante discutida, pues actualmente ha perdido
vigencia como indicador de contaminacin fecal, ya que adems de encontrarse en
las heces de mamferos, tambin se encuentran ampliamente distribuido en la
naturaleza; son muy resistentes al calor, a la desecacin a las bajas temperaturas, y
a los detergentes y desinfectantes. Su uso como indicador deber limitarse a
situaciones en las que se sepa que son manifestaciones de polucin fecal por ejemplo
en las aguas de piscinas. A pesar de las limitaciones y de las incertidumbres
apuntadas, la presencia de gran nmero de enterococos en los alimentos, excepto en
los fermentados por cepas especficas de estos microorganismos, implica prcticas
inadecuadas de higiene o exposicin del alimento a condiciones que pudieran haber
permitido la multiplicacin de estas bacterias.
Los medios de cultivo para la deteccin de los enterococos se basan en la tolerancia
relativa a condiciones adversas utilizando compuestos qumicos como la azida de
sodio para inhibir otros gneros de bacterias, generalmente se utiliza mtodos de
recuentos probables o NMP; tambin se puede aplicar el mtodo de placa vertida
utilizando medios diseados especficamente para este grupo.
* Mohos y Levaduras
Las levaduras y los mohos crecen ms lentamente que las bacterias en los alimentos
no cidos que conservan humedad y por ello pocas veces determinan problemas en
tales alimentos. Sin embargo, en los alimentos cidos y en los de baja actividad
acuosa, crecen con mayor rapidez que las bacterias. En general este indicador es
utilizado en productos no perecederos, que se someten a almacenamiento largo, en
productos deshidratados cuyo almacenamiento se realiza en condiciones
inadecuadas. Adems existe el peligro potencial de produccin de micotoxina por
parte de los mohos.
Algunos mohos muestran una especial resistencia al calor, debido a las esporas que
producen. La expresin del desarrollo de las levaduras en los alimentos se distingue
del observado por los mohos. Mientras las primeras pueden proliferar en la masa
interna del alimento (slido como los quesos, o lquidos como los jugos de frutas),
los mohos se limitan de ordinario a las superficies, visiblemente distintivos sin
necesidad de aumento alguno. Para su determinacin generalmente se utiliza el
mtodo de placa vertida, se pueden utilizar medios acidificados para inhibir el
crecimiento microbiano o la adicin de un antibitico al medio de cultivo, la
temperatura de incubacin es de 25 C durante 5 das.
* Prueba de Esterilidad
Esta prueba se realiza a aquellos alimentos que se consideran comercialmente
estriles, como son las conservas. Se entiende por Esterilidad Comercial de un
alimento tratado trmicamente, la condicin alcanzada por la aplicacin de calor que
deje al alimento exento de microorganismos capaces de reproducirse en condiciones
normales de distribucin y almacenamiento no refrigeradas y de microorganismos
viables de importancia para la salud pblica, incluidas las esporas.