Practica numero 3

Mtodo de concentracin fenolado de azcar(sheater)

INTRODUCCION

La prctica se realizara con la muestra fecal con la solucin fenlico de azcar tambin es
conocido tcnica de Sheater utilizaremos dos sustancias muy importantes fenol y azcar
que ayudaran a flotar los parsitos.
Para separar e sedimento del sobrenadante. Una de las maneras de diagnosticar las
parasitosis de localizacin gastrointestinal y glndulas
anexas, es mediante la aplicacin de tcnicas tcnica de concentracin fecal (sheater), que
permiten concentrar coccidios ,isoporas en el menor volumen de materia fecal, determinar
su presencia e identificarlos correctamente. La recuperacin de estas formas parasitarias
plantea un problema de difcil solucin a todo microscopista.
Esta tcnica se basa en la propiedad que tienen las soluciones de densidad mayor, para
hacer flotar objetos menos densos, como los coccidios isosporas de parsitos, los cuales
son colectados en la superficie del lquido y observados al microscopio.

OBJETIVO
separar o concentrar coccidios, isosporas con el uso de la solucin
fenolado de azcar.
eliminar la mayor cantidad de restos vegetales que estn presentes en
la muestra que pueden interferir en la visualizacin microscpica y poder
con facilidad observar coccidios,isosporas de la muestra.

MATERIALES

Tubos de ensaye cnicos de 15 ml

Gasa
Laminilla
Baja lengua
Lamina porta objeto
Laminilla
Embudo
Microscopio
Centrifuga

SUSTANCIAS:
Solucin de fenol
azcar
Muestra biolgica: heces fecales frescas
agua destilada

PROCEDIMIENTO
1.Disolver 1 gr de materia fecal en 1 ml de agua destilada
2. Se filtra la muestra disuelta a travs de la gasa doble colocada en el
embudo, recogiendo el filtrado en el tubo cnico.
3. Centrifugar el filtrado a 1500 rpm por 2 minutos
4.separar en dos tubos la muestra sobrenadante y la muestra sedimento
5.botar el sobrenadante, te quedaras con el sedimento en el tubo donde de
encuentra el sedimento agregar 6ml de solucin fenol de azcar. Agitar
6.en el segundo tubo que te quedaste con el sobrenadante agregar 5ml de
solucin fenol de azcar. Agitar
7. Centrifugar el los dos tubos 1500 rpm por 1minuto
8.agregar solucin fenol de azcar hasta 8ml al sedimento
9. agregar solucin fenol de azcar hasta 7ml al concentrado
10.dejar en reposar a las dos muestras durante un tiempo
11.esterelizar asa de siembre en el fuego
12.con la asa de siembra coger la muestra pero solo de la parte encima de
ambos tubos
13. colocar muestra en porta objetos de ambos tubos para ser

lecturados.

OBOBSERVACIONES
Con objetivo 40x

En la muestra de sobrenadante.-SE observa restos de alimentos, almidn ,vegetales

En poca cantidad.

En la muestra de Sedimento .- se observa tambin resto de

alimentos, almidn ,vegetal pero en mayor cantidad
Comparando estas dos muestras que se trabajo de diferentes
concentraciones sedi mento y sobrenadante lo recomendable seria
con sobrenadante ya que no hay interferencia como resto de algn
alimento.

Conclusiones
Mediante esta tcnica por concentracin de fenol de azcar se obtiene la
mayor concentracin de coccidios,isisporas de parsitos
Esta tcnica ayuda tambin a separar de los restos de alimentos que no
tiene importancia para nuestro estudio.
Con la utilizacin de este mtodo ayuda a subir los coccidios,isospora
con gran facilidad ya que el fenol y azcar son menos densos ayudan.

RECOMENDACIONES
Trabajar con bastante cuidado en el momentos de coger la muestra con
asa de siembra no introducir hasta dentro solo es la parte de encima .
En el momento de agregar la solucin fenol azcar agregar por la
paredes del tubo tiene que se la cantidad indicada
Para ser lecturado no se debe utilizar ninguna solucin que ayude a
observar es de frente la solucin con la muestra que se observa .
Se debe saber tambin con cual de los contenidos de los tubos se esta
observando si es el sedimento o el sobrenadante.
Se debe utilizar la gasa doble ya que ayuda a que no pasan tanto resto
de alimenticios

ANEXO

En esta imagen se observa

disolviendo la muestra en agua destilada

En esta imagen de observa cuando se filtra la

muestra en la gasa se ve cuanto de resto queda

En esta imagen se
observa puestas
las muestras en la
centrifuga listos para centrifugar

En esta imagen se observa los dos tubo uno con la muestra el otro
con sobrenadante

En esta imagen se ve agregando solucin fenol de azcar al

sedimento y al sobrenadante.

En esta imagen se ve agregando solucin fenol de azcar al

sobrenadante.

En esta imagen se observa esterelizando el asa de siembra

SE observa cogiendo la
muestra con el asa de siembra

En esta imagen se observa poniendo la

muestra sobre porta objetos

En esta imagen el estudiante observa

muestras como el sedimento y sobrenadante.