UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR

ORREGO
FACULTAD DE MEDIDINA HUMANA
BIOQUIMICA
ENZIMOLOGA
Pedro Lezama

Enzimologia

ENZIMAS
Definicin
Catalizadores biolgicos
Funcin:
Viabilizar la actividad de las clulas, separando o
uniendo molculas para formar nuevos
conpuestos.
Naturaleza qumica: en su mayor parte protenas,
excepto un pequeo grupo de molculas de RNA con
propiedades catalticas: RIBOZIMAS

PROTENAS
Clasificacin de protenas
globulares

fibrosas

ESTRUCTURA DE LAS PROTEINAS

Primaria

secundaria

terciaria

ENZIMAS

PROTEINAS GLOBULARES
ESTRUCTURA TERCIARIA

cuaternaria

ESTRUCTURA ENZIMATICA
Estructura
Enzimtica

Holoenzima
Protena

Ribozimas

Cofactor

Apoenzima o
Apoprotena

RNA

Puede ser:
on inorgnico
molcula orgnica

Coenzima
covalente
Grupo Prosttico

COMPONENTES DE LA REACCION
ENZIMATICA

E+S

[ES]

[EP]

Sustrato se une al
SITIO ACTIVO
de la enzima

P+E

Glucosa

Sitio
cataltico

Fructosa

Enzima
(sacarasa)
4

Productos son
liberados

Sustrato
(sacarosa)

Enzima disponible con

sitio cataltico vaco

3
Sustrato es
convertido a
productos

Sustrato se une
a la enzima por
encaje inducido

Sustrato
Estado deTransicion

Producto

Si la E solo se une al S, entonces

la reaccin no continua

La E, no solo reconoce al S, sino induce la

formacin del estado de transicin (ET)

Naturaleza de la Catlisis enzimtica

La E proporciona una superficie cataltica

Esta superficie estabiliza ET
ET se transforma a producto (P)

B
A
A

Superficie Catalitica

La Enzima estabiliza el estado de transicin

Cambio de energa

EST

S
ES

EP

Direccin de la Reaccin
T = estado de Transicion

La Energa disminuye (con catalisis)

Energia requerida (no catalisis)

ST

Cul es la diferencia?

Estado de transicion
(o complejo activado)

e
n
e
r
g
i
a

Ruptura
de
enlaces

reactantes

Energa de
activacion
Ea

Formacin
de enlaces

reaccin
exergnica

products

Energia

Energia de activacin sin enzima

Diferencia entre
la energia libre
de S y P

Energia de activacin con

enzima

S
P

Camino de la Reaccin

MODELOS DE ACCION
ENZIMATICA

Modelo de llave-cerradura

Modelo del encaje (acoplamiento)

inducido

CLASIFICACION DE ENZIMAS
1. Oxidoreductasas transferencia de electrones
2. Transferasas reacciones de transferencia de grupo
(no agua)
3. Hidrolasas reacciones de hidrlisis
(transferencia al agua)
4. Liasas Adicin de grupos a dobles enlaces o
formacin de dobles enlaces por eliminacin de
grupos
5. Isomerasas transferencia de grupos dentro de la
misma molcula para dar ismeros
6. Ligasas Formacin de enlaces C-C, C-S, C-O y CN por reacciones
de condensacin acopladas a
hidrlisis de ATP

Factores que afectan la actividad

enzimtica

80

60

20

(en un periodo de tiempo

40

Producto

S
+
E

P
Incremento en concentracin de S

Sustrato (mol)

8
6
4
2
0

8
7
6
5
4
3
2
1
0

Concentracin constante ES en estado de transicin

Concentracin

ES
Tiempo de Reaccin

EFECTO DE LA TEMPERATURA

Temperatura ptima para una

tpica enzima humana

Temperatura ptima para

enzima de termfila

Actividad

(Bacteria termotolerante)

20

40

Temperatura (C)

Temperatura ptima para dos enzimas

80

100

Efecto del pH
ENZIMA
Fosfatasa alcalina
Lipasa pancretica
Quimotripsina
Tripsina
Catalasa
Carboxipeptidasa
Amilasa salival
Fosfatasa cida
Pepsina

pH
9.5
8.0
8.0
7.9
7.6
7.5
6.8
5.0
1.5

CINETICA ENZIMATICA

vo

Vmax

Efecto de S

[S]

v = Vmax [S]
Km
1

v = Vmax
2

Vmax
2

Km

[S]

Lineaweber - Burk

Como funciona una Holoenzima?

Ejemplos de Holoenzima

INHIBICION
ENZIMATICA

Tipos

INHIBICION

Inhibicin enzimtica (Resumen)

Ploteo directo

Competitiva

No-competitiva

Vmax

vo

vo

Km Km

[S], mM

Vmax no se altera
Km se incrementa

Doble Reciproco

1/vo

Km = Km

1/vo

1/ Vmax
1/Km

1/[S]

Acompetitiva

Vmax

Vmax

Vmax

Vmax

[S], mM

Vmax disminuye
Km no se altera

Km Km

Vmax & Km deisminuye

1/vo

1/ Vmax
1/Km

1/[S]

[S], mM

1/ Vmax
1/Km

1/[S]

Angiotensingeno
Hipotensin,
hipovolemia,
ortostatismo

Renina
Angiotensina I
DRVYIHPFHL

Enzima convertidora
de Angiotensina, ECA

Captopril
HL

Anlogo del
estado de
transicion

Angiotensina II
DRVYIHPF
Aumento de la presin arterial

CONTROL Y REGULACION
ENZIMATICA

Proenzimas (cimogenos)

Sitio de
sntesis

Zimgeno

Enzima activa

Estmago

Pepsingeno

Pepsina

Pncreas

Quimotripsingeno

Quimotripsina

Pncreas

Tripsingeno

Tripsina

Pncreas

Procarboxipeptidasa

Carboxipeptidasa

Pncreas

Proelastasa

Elastasa

ENZIMAS ESPECIALES

TELOMERASA
Esta enzima repara
los telmeros de los
cromosomas
mediante la adicin
de secuencias
TTAGGG

TELOMERASA

Ciclo celular normal y el de las

clulas tumorales

Ribozimas

Ribozimas

Abzimas

Granzima B
Granzima B
Granzima B y perforina,
sonprotenas liberadas por
clulas efectoras (LT
citotoxicos), pueden inducir
apoptosis en clulas blanco
formando poros transmembrana
y el clivaje deefectores de
caspasas, tal como caspasa-3,
aunque la apoptosis puede
lograrse independiente de
granzima B. DNAasa
dependiente de caspasa (CAD),
es activada por clivaje del
inhibidor asociado (ICAD) por
caspasa 3. CAD interacta con
diversos componentes como
topoisomerase II (Topo II),
condensa la cromatina, conduce
a fragmentacin y finalmente
apoptosis

Granzima A

APLICACIONES DE LAS ENZIMAS

EN LA MEDICINA

Generalidades

Por su alta especificidad y eficacia cataltica son

muy apreciadas para su aplicacin como
agentes teraputicos. As mismo tienen valor
diagnstico y/o pronstico, y como
reactivos de laboratorio
Pare ello requieren:
un alto grado de pureza, alta estabilidad a las
condiciones de temperatura y pH fisiolgicos
Baja antigenicidad y accesibilidad al sitio
corporal de destino

APLICACIONES TERAPEUTICAS
CONVENCIONALES

ENZIMA
Pancreatina
Pepsina
Amilasa
Papaina
Celulasa
Lipasa
Bromelina
Peptidasa
Dextranasa
Estreptoquinasa
Uroquinasa
Colagenasa

ORIGEN
pncreas bovino
mucosa estomacal porcina
Aspergillus sp
Carica papaya
Aspergillus sp
pncreas porcino
Ananas comosus (pia)
Serratia sp.
Penicillium funicolosum
Streptococcus sp.
orina
Clostridium hystolyticum

Lisozima

clara de huevo

FUNCION
ayuda-digestivo
ayuda-digestivo
ayuda-digestivo
ayuda-digestivo
ayuda-digestivo
ayuda-digestivo
antiinflamatorio
antiinflamatorio
tratamiento de caries
agente tromboltico
agente tromboltico
tratamiento
quemaduras cutneas
oftalmologa:
potenciador de
antibiticos

Actuales

Tratamiento de deficiencias metablicas congnitas: catalasa,

para el tratamiento de acatalasemia; fenilalanina hidroxilasa y
fenilalanina amoniaco liasa (Fenilcetonuria), Galactosa, 1- P uridil
transferasa (Galactosemia)
Eliminacin de metabolitos txicos por malfuncionamiento de
rganos: ureasa y uricasa en caso de mal funcionamiento renal (para
eliminar urea y cido rico); UDP glucoronil transferasa y bilirrubina
oxidasa (eliminacin de bilirrubina) en casos de ictericia; anhidrasa
carbnica y catalasa en intercambio gaseoso de O2 y CO2 en
respiradores artificiales
Eliminacin selectiva de nutrientes especficos de clulas
malignas: asparaginasa y glutaminasa en la eliminacin de Lasparagina y L-glutamina en el tratamiento de leucemia;
carboxipeptidasa; fenilalanina y tirosina en el control del crecimiento
de tumores.

ALGUNAS ENZIMAS CON VALOR

DIAGNOSTICO COMPROBADO
NOMBRE

Lactato deshidrogenasa (LDH)

Glutamato deshidrogenasa (GLDH)

hepticos

-Glutamiltransferasa ( GT)

Aspartato aminotransferasa (AST)

Glutamato oxalacetato transaminasa (GOT)

Alanina aminotransferasa (ALT)

Glutamato piruvato transaminasa (GPT)

Creatin quinasa (CPK)

Lipasa
Colinesterasa (CHE)
Fosfatasa alcalina (AP)
Fosfatasa cida (ACP)
-Amilasa
Fructosa, 1,6 bifosfato aldolasa (ALD)
Glutamato descarboxilasa (GAD)

ALTERADO EN
Isquemia miocrdica, anemia perniciosa
Ictericia obstructiva, Tumores
Cirrosis alcohlica, tumores hepticos
Enfermedades hepticas, isquemia miocardica
Enfermedades hepticas, isquemia miocardica
Isquemia miocrdica, lesiones del Msculo
esqueltico
Pancreatitis aguda
Hgado graso, intoxicacin alcohlica aguda
Ictericia obstructiva, tumores
Carcinoma de prstata
Pancreatitis aguda
Trastornos musculares
Trastornos de pancreas endocrino

INFARTO AL MIOCARDIO

HEPATITISS

LDH

ALT(GPT)

AST(GOT)

AST (GOT)

CK

GT