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Revista AquaTIC, n 21 - 2004

Revista AquaTIC, n 21, pp. 78-91. Ao 2004
http://www.revistaaquatic.com/aquatic/art.asp?t=p&c=160

El camarn de cultivo frente al WSSV, su principal patgeno

Martha Maldonado1, Jenny Rodrguez2, Ignacio de Blas3
1

Escuela Superior Politcnica del Litoral. Guayaquil (Ecuador)

Centro Nacional de Acuicultura e Investigaciones Marinas. Guayaquil (Ecuador)

e-mail: jrodrigu@cenaim.espol.edu.ec

Facultad de Veterinaria, Universidad de Zaragoza (Espaa)

Resumen
La mancha blanca provocada por el WSSV (White Spot Syndrome Virus, por sus siglas en ingls)
constituye hasta el momento la enfermedad ms desvastadora para el camarn de cultivo. En este
artculo se ha realizado una revisin bibliogrfica sobre el virus, la enfermedad que provoca, las
armas con las que cuenta el hospedero para enfrentar su agresin y finalmente algunas
alternativas exploradas por investigadores y productores para manejar la produccin de camarn
en condiciones de mancha blanca.

Palabras clave: mancha blanca, WSSV, camarn, Litopenaeus vannamei

Summary
The white spot disease, produced by the white spot syndrome virus (WSSV), constitutes until now
the most lethal disease of shrimp. This article constitutes a review about the virus, the disease, the
shrimp mechanisms to fight the viral attack, as well as some approaches used to manage shrimp
production under research or culture conditions.

Key words: white spot, WSSV, shrimp, Litopenaeus vannamei

Introduccin
La principal amenaza para el desarrollo de la industria camaronera son las
enfermedades infecciosas especialmente las causadas por virus (Lightner, 1999).
Aunque existen cerca de 20 virus reconocidos para camarones peneidos, nicamente
cuatro tienen importancia econmica para la industria acucola: YHV (Yellow Head
Virus), WSSV (White Spot Syndrome Virus), IHHNV (Infectious Hematopoyetic
Hypodermic Necrosis virus) y TSV (Taura Syndrome Virus). La Mancha Blanca causada
por el WSSV, es hasta el momento la ms devastadora enfermedad reportada para
camarones peneidos cultivados (Lightner, 1996; Flegel, 1997). Despus de los
primeros reportes de la presencia de WSSV en Amrica Central (Jory y Dixon 1999), la
enfermedad se detect en Ecuador en mayo de 1999 y fue asociada a mortalidades
masivas en ciertas camaroneras (Caldern et al., 1999).

La Mancha Blanca: qu sabemos de la enfermedad?

1. La evolucin de la enfermedad
Las pruebas de desafo al WSSV han demostrado que este virus es altamente
virulento, llegando a provocar mortalidades de hasta el 100% en los animales
desafiados (Sahul et al., 2001). En los estanques de cultivo de Litopenaeus

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vannamei del Ecuador la enfermedad se presenta entre la tercera y sexta semanas

de cultivo (CENAIM, resultados no publicados).
Aspectos a considerar en una infeccin con WSSV son el amplio nmero de
hospederos, las mltiples vas de infeccin, la gran velocidad de replicacin del virus,
su poder de propagacin y el estado fisiolgico del husped, el mismo que estara
estrechamente asociado a la temperatura. El WSSV tiene una diversidad de
hospederos, ya que todos los crustceos ensayados son susceptibles de infectarse
con el virus (Wang et al., 1997; Corbel et al., 2001; Jiravanichpaisal et al., 2001),
pueden actuar como vectores y/o reservorios (Wang et al., 1997). Entre las 24 y
35 horas el virus se multiplica 140 veces en los tejidos (Tang y Lightner, 2000).
A nivel histolgico, se han detectado lesiones desde las 36 horas post-infeccin por
ingestin (Sonnenholzner et al., 2002). Se han observado grados severos de
lesiones por WSSV en muestras tomadas entre los das 3 y 7 despus de iniciarse
la infeccin (Lightner et al., 1998; Sonnenholzner et al., 2002). Adems la infeccin
por WSSV se caracteriza por afectar un rango amplio de tejidos blancos, entre los
que se encuentran el tejido epitelial, tejido conectivo, tejido hematopoytico y
hemocitos (Durand et al., 1996; Wang et al., 2002). Los primeros son de amplia
distribucin en el animal, en tanto que los hemocitos son los principales efectores de
la respuesta inmune en los crustceos (Johanson y Sderhll, 1989). Por otra parte
el estado fisiolgico del hospedero sera tambin un aspecto crucial.
En L. vannamei la susceptibilidad al virus sera mayor a temperaturas fras (inferiores
a 29C). En estanques comerciales se han observado mayores prdidas en la
estacin fra-seca que en la estacin clida-lluviosa (Rodrguez et al., 2003b), en
tanto que en ensayos de desafo a diferentes temperaturas se ha detectado
resistencia en condiciones de hipertermia (Vidal et al., 2001; Sonnenholzner et al.,
2002). As mismo resulta interesante el hecho de que los animales infectados con
WSSV mueren en postmuda (Echeverra et al., 2002), sugiriendo una mayor
susceptibilidad al virus durante la premuda tarda, tal como ha sido reportado para
TSV por Hasson et al. (1999a).
La literatura ha reportado diferencias en la susceptibilidad al virus en diferentes
especies de crustceos. Infectando por inyeccin intramuscular a Penaeus indicus,
Penaeus monodon, Macrobrachium lamerrae y Macrobrachium idella se ha obtenido
el 100% de mortalidad pero a diferentes tiempos 72 horas, 48 horas, 5 das y 8 das
post-inoculacin respectivamente (Sahul et al., 2000). Mortalidades entre el 3 y 6
da post infeccin han sido reportados en post-larvas de Penaeus aztecus, Penaeus
duorarum y L. vannamei. Se han descrito mortalidades acumuladas del 100% para
juveniles de Penaeus setiferus y L. vanamei al 8 da (Lightner et al., 1998). En
contraste P. aztecus demostr ser ms resistente observndose un 27% de
mortalidad acumulada en el mismo tiempo (Lightner et al., 1998). En los cangrejos
Liocarcinus puber y Liocarcinus depurator, el 100% de mortalidad se present al 8
y 9 da respectivamente (Corbel et al., 2001). Se seala que el rpido incremento
en la mortalidad entre el 4 y 5 da es una caracterstica de las infecciones virales
(Corbel et al., 2001; Soon et al., 2001).
Se han realizado infecciones experimentales con WSSV mediante inyeccin,
inmersin e ingestin (Takahashi et al., 1994). Las infecciones por inyeccin tienen
la ventaja de permitir la infeccin con concentraciones virales conocidas y
estandarizadas, sin embargo violan la primera barrera natural de defensa del
camarn que es la cutcula y los mecanismos de defensa a ella asociados. El sitio de
inyeccin caracterstico es en la unin basal del 5 pereipodo para cangrejos y
entre el 2 y 3 segmento abdominal para crayfish, camarones y langostas (Corbel

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et al., 2001). Al contrario de la inyeccin, las infecciones realizadas por ingestin

representaran una va natural de infeccin (Lightner, 1998) y proveen una
herramienta para evaluar y comparar resistencia al virus entre familias de
L. vannamei (Moss et al., 2001). Las infecciones por inmersin con WSSV realizadas
en L. vannamei (Wu et al., 2001) han demostrado que el agua constituye un
vehculo de transmisin indicando el potencial peligro de altas cargas virales en los
estanques de cultivo.
En cuanto a tolerancia a factores fsico qumicos, se ha determinado que el WSSV se
mantiene viable en agua de mar estril durante 5 das a una temperatura de 28C y
por ms tiempo a temperaturas ms bajas. Tambin se puede mantener viable hasta
por 4 das entre 25 y 28C en el agua de estanques en donde han ocurrido brotes
de la enfermedad (OIE, 2003).
Estudios sobre inactivacin viral han determinado que el virus puede ser inactivado
por modificaciones en temperatura, pH, productos qumicos y luz ultravioleta. As la
inactivacin ocurre a una temperatura de 50C durante 20 minutos y a 70C durante
5 minutos, en tanto que la inactivacin por desecacin se produce a 30C. En cuanto
al pH, el virus puede ser inactivado a pH 1 durante 10 minutos, pH 3 durante 1 hora
y a pH 12 durante 10 minutos (a una temperatura de 25C). Los productos qumicos
capaces de inactivar el virus son NaCl al 15% a una temperatura de 28C durante
24 horas, 0.5 g/ml de ozono residual durante 10 minutos a temperatura ambiente.
La inactivacin tambin se obtiene por reactivos oxidantes y ter etlico. Los
desinfectantes capaces de inactivar al virus son hipoclorito de sodio y yodo
(povidone) (100 ppm) durante 10 minutos y con 10 ppm durante 30 minutos;
tambin con 75 ppm de cloruro de benzalconio durante 10 minutos. La radiacin
ultravioleta inactiva al virus mediante una exposicin a 9 x 105 w s/cm durante
60 minutos (OIE, 2003).
El diagnstico de infecciones con WSSV involucra PCR, PCR anidado, sondas
moleculares (hibridacin in situ, inmunohistoqumica) y observaciones histolgicas
usando microscopio ptico y microscopio electrnico de transmisin (Lo et al.,
1997).
2. Signos clnicos de infeccin por WSSV
Los signos tpicos del WSSV descritos en camarones peneidos son puntos blancos de
1 a 2 mm de dimetro dentro de la superficie del caparazn, observndose en el
microscopio ptico una rea obscura en el centro de este punto (Takahashi et al.,
1994; Soon et al., 2001). El color del cuerpo de los animales enfermos es de plido a
rojizo, el rgano linfoide se presenta turgente, contrado (Takahashi et al., 1994) o
hipertrofiado (Vidal et al., 2001).
En animales experimentalmente infectados, las caractersticas observadas han sido:
coloracin rojiza en urpodos, telson, pereipodos, y plepodos. Los animales
presentan actividad reducida, desorientacin, nado errtico y falta de apetito. Estos
mismos signos clnicos han sido observados despus de 3 das de infeccin en
cangrejos como L. puber y L. depurator, presentndose una rpida reduccin en la
ingestin del alimento y letargia.
Han sido detectadas alteraciones en el color de la hemolinfa tanto en camarones
como en el cangrejo de agua dulce (Rodrguez et al., 2003a; Jiravanishpaisal et al.,
2001), la cual puede presentarse de tono rosado en lugar del clsico azul-verdoso.

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3. Caractersticas histopatolgicas
Los estudios histolgicos de animales moribundos revelan clulas degeneradas,
caracterizadas por cuerpos de inclusin intranuclear eosinfilos a basfilos en
ncleos hipertrofiados de clulas ectodermales y mesodermales de los apndices,
branquias, estmago, intestino anterior y posterior, tejido conectivo, glndula
antenal, rgano linfoide, tejido hematopoytico, hemolinfa, corazn y una variedad
de otros tipos de clulas. Sin embargo, no se han reportado inclusiones en el epitelio
del hepatopncreas, intestino medio o ciego del intestino medio (Lightner et al.,
1998; Sahul et al., 2000).
Otro signo histopatolgico recientemente reportado para infecciones con WSSV es
una necrosis general en diferentes tejidos caracterizada por la presencia de clulas
con picnosis y kariorrexis nuclear, principalmente en rgano linfoide (Pantoja y
Lightner, 2003; Rodrguez et al., 2003b). Esta necrosis han conducido a crear
confusiones en el diagnstico entre WSSV y Yellow Head (Pantoja y Lightner, 2003).
4. Caractersticas ultraestructurales
La replicacin del WSSV tiene lugar en el ncleo de las clulas infectadas. La
morfognesis viral comienza por la formacin de membranas de novo en el
nucleoplasma (Durand et al., 1997). El agente causante de la enfermedad tiene
forma de bacilo no ocluido. Las dimensiones de los viriones son de 275 nm de
longitud y 83 nm de dimetro y las dimensiones de la nucleocpside son de 216 nm
en longitud y 54 nm de dimetro (Takahashi et al., 1994). En los ncleos infectados
los viriones tienen una distribucin paracristalina o desordenada. En todas las
especies de cangrejos infectados, se han reportado envolturas de viriones,
nucleocpsides libres y fragmentos de envolturas virales libres en la hemolinfa de
animales moribundos (Corbel et al., 2001).

Qu sabemos del hospedero?: el sistema inmune

La primera lnea de defensa en los crustceos es la cutcula, la cual constituye una
barrera fsica y biolgicamente activa (Sugumaran, 1996), a ella estaran asociados
actividad microbicida (Destoumieux et al., 2000) y actividad fenoloxidasa (Sugumaran,
1996). Parte esencial de la inmunidad es el estado de alerta por el cual un organismo
puede detectar molculas extraas o no propias. Un buen sistema de reconocimiento
de lo no propio estimula las respuestas de defensa. Los mecanismos de defensa
innata estn basados en componentes celulares y humorales del sistema circulatorio,
lo que est interrelacionado con la deteccin y eliminacin de patgenos extraos,
microorganismos y parsitos que evidencien un peligro potencial para el husped
(Sderhll y Cerenius, 1992; Vargas-Albores y Yepiz-Plascencia, 2000).
En vertebrados, el sistema inmune incluye memoria adaptativa, inmunoglobulinas
especficas y clulas especializadas, tanto como la respuesta no especfica a travs de
clulas fagocticas y clulas NK (Vargas-Albores y Yepiz-Plascencia, 2000). Aunque
recientemente se ha reportado evidencia de memoria adaptativa en crustceos
(Shelby et al., 2003), stos y todos los artrpodos no poseen un sistema inmunitario
adaptativo basado en inmunoglobulinas que reconozcan epitopos especficos. Sin
embargo, son capaces de reconocer y destruir microorganismos invasores y parsitos

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por medio de mecanismos inmunitarios celulares y humorales que operan para

mantener la integridad del organismo.
El hemocele de los crustceos es de circulacin abierta y las clulas sanguneas que se
encuentran en este sistema (hemocitos) son anlogas a los glbulos blancos de los
vertebrados (Sderhll y Cerenius, 1992; Sderhll y Smith, 1983; Roch, 1999).
1. Compartimento celular
Los hemocitos de los crustceos han sido clasificados en base a criterios
estructurales, citoqumicos, antignicos y funcionales. Tambin son reconocidos
morfolgicamente como hialinos, semi-granulosos y granulosos (Smith y Sderhll,
1983; Tsing, 1987; Hose y Martin, 1989; Sderhll y Cerenius, 1992; Rodrguez et
al., 1995). Estas clulas pueden remover partculas extraas del hemocele de
crustceos por medio de funciones de defensa como la fagocitosis o actividades de
encapsulacin (Johansson y Sderhll, 1989; Sderhll y Cerenius 1992; Martin et
al., 1998).
Los mecanismos moleculares de la inmunidad celular en artrpodos han sido
conocidos con el desarrollo de tcnicas que sirven para aislar y mantener los
diferentes tipos de clulas sanguneas de crustceos y con la purificacin de varias
protenas asociadas con el sistema profenoloxidasa (pro-PO) de cangrejos de agua
dulce (Johansson y Sderhll, 1989), y otras molculas inmunitarias como
peneidinas en peneidos (Destoumieux et al., 1997; Muoz et al., 2002).
2. Caractersticas de los hemocitos
Los hemocitos hialinos son clulas de forma ovoide de 12,4 x 7,8 m de
dimetro, libres de grnulos o con pocos grnulos, que bajo el microscopio de
contraste de fase no son refrctiles (Martin y Graves, 1985). El ncleo es ovoide, el
citoplasma forma una fina capa alrededor de ste y se expande ligeramente hacia
los polos, adems presentan ribosomas libres, retculo endoplsmico liso y rugoso y
no presenta aparato de Golgi (Martin y Graves, 1985). En ellos no se han observado
los grnulos presentes en los hemocitos semi-granulosos y granulosos, pero s se
han reportado grnulos estriados (Bachre et al., 1995). En base a sus
caractersticas ultraestructurales estos hemocitos han sido considerados como
clulas jvenes e inmaduras (Tsing, 1987; Van de Braak et al., 2002a), precursoras
de los otros tipos de hemocitos (Van de Braak et al., 2002b).
Los hemocitos semigranulosos son clulas de forma ovoide (Martin y Graves,
1985). Tienen un dimetro ligeramente ms ancho y largo que los hialinos (14,8 x
8,3 m) y son fciles de identificar bajo el microscopio ptico por la presencia de un
nmero variable de pequeos grnulos oscuros en el citoplasma (Martin y Graves,
1985). El citoplasma tambin contiene ribosomas libres, retculo endoplsmico liso y
rugoso y aparato de Golgi (Martin y Graves, 1985).
Los hemocitos granulosos son clulas de forma ovoides a esfricas, tienen un
tamao de 13,6 x 9,5 m al igual que los hemocitos semigranulosos (Martin y
Graves, 1985). Al observarlos en el microscopio de contraste de fases se distinguen
grnulos grandes altamente refrctiles que frecuentemente obscurecen el ncleo y
provocan que la clula entera aparezca brillante. El citoplasma parece reducido
debido a la presencia de los grnulos que llenan toda el rea. Existen ribosomas
libres y retculo endoplsmico rugoso pero no tan abundante como en los hemocitos
semigranulosos (Martin y Graves, 1985).

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3. Defensas celulares
La fagocitosis es un proceso de respuesta inmunitaria de tipo celular que contribuye
a la eliminacin directa de partculas extraas o clulas envejecidas del propio
organismo, y constituye la va ms clsica de defensa celular. En los crustceos se
han reportado fagocitos fijos en la glndula antenal, rgano linfoide, superficie de
las arteriolas del sinus hemal del hepatopncreas, stos a diferencia de los
encontrados en las branquias pueden eliminar protenas y micropartculas mayores a
30 nm (para revisin ver Johnson, 1987). Las clulas circulantes pueden fagocitar y
ocasionar respuestas inflamatorias las cuales amplifican las reacciones inmunes.
Recientemente Muoz et al. (2002) han demostrado en L. vannamei que la
fagocitosis es realizada principalmente por los hemocitos hialinos. Por otra parte
diferentes autores han comprobado la generacin de radicales de oxgeno (ROIs) en
ensayos de fagocitosis in vitro realizados con hemocitos de camarn (Song and
Hsieh, 1994; Muoz et al., 2000).
La encapsulacin es un proceso en el cual varios hemocitos cubren la partcula
extraa formando capas alrededor de ella, provocando de esta manera su muerte
(Sderhll y Cerenius, 1992). La razn no es bien conocida an, pero se puede
atribuir a una accin txica por medio de los quinonas o por asfixia celular (Salt,
1963; Nappi, 1977; Poinar et al., 1979). En efecto el proceso de encapsulacin est
normalmente acompaado de melanizacin. Por otra parte Holmblad y Sderhll
(1999) sugieren la generacin de radicales de oxgeno en los procesos de
encapsulacin. Las subpoblaciones hemocitarias involucradas en la encapsulacin
son los hemocitos granulosos y semigranulosos (Tsing, 1987; Martin et al., 1998).
4. Compartimento humoral
En el compartimento humoral de la hemolinfa (plasma) se encuentran en circulacin
innumerables molculas de diferente rol fisiolgico. Para mencionar slo algunas
podemos citar a la hemocianina, inhibidores de proteasas, protenas de
reconocimiento, varias lipoprotenas, entre ellas el factor de coagulacin y la
protena fijadora de -glucanos.
La hemocianina es considerada la protena respiratoria, ya que interviene en el
transporte de oxgeno. Est protena constituye el 60 al 95% de la protena total del
plasma (Djangmah, 1970). Est presente durante toda la vida del crustceo como
un oligomero de uno y dos hexmeros. En algunos crustceos decpodos esta sujeta
a cambios en su composicin por factores ambientales y/o fisiolgicos (Terwilloger y
Dumler, 2001). La hemocianina tendra tambin actividad fenoloxidasa (Zlateva et
al., 1996). Por otra parte recientemente se ha reportado que pptidos
antimicrobianos son generados a partir de la regin C-terminal de esta protena
(Destoumieux et al., 2001).
Un importante proceso en los crustceos acuticos es la rpida coagulacin en las
heridas para prevenir prdidas sustanciales de hemolinfa y evitar el ingreso de
microorganismos. El factor de coagulacin de los crustceos es un dmero de
aproximadamente 400 kDa, el mismo que se reticula bajo la accin de una protena
de tipo transglutaminasa liberada por los hemocitos. Ha sido reportada actividad
transglutaminasa en hemocitos granulosos y semi-granulosos (Wang et al., 2001).
Adems han sido caracterizados dos tipos de protenas de de reconocimiento,
protena de fijacin de lipopolisacridos (LPS) y protena de fijacin de -glucanos.
Estos factores contenidos en el plasma de los crustceos son capaces de reconocer
bacterias y hongos (Duvic y Sderhll, 1990; Vargas-Albores, 1995).

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Asimismo el hemocele es el sitio de descarga y actividad de importantes molculas

tales como -2-macroglobulina (Rodrguez et al., 1995), aglutininas, componentes
del sistema proPO, responsable de la melanizacin, la cual acompaa todas las
reacciones inflamatorias de los crustceos (Sderhll y Cerenius, 1992) y pptidos
antibacterianos, como las peneidinas (Destoumieux et al., 1997). Las peneidinas han
sido completamente caracterizadas en L. vannamei, ellas son activas contra
bacterias Gram + y hongos (Destoumieux et al. 1997), en tanto que funcionaran
como opsoninas de bacterias Gram (Muoz et al., 2002).
5. El sistema inmune de los crustceos frente a infecciones virales.
Los mecanismos de resistencia al WSSV y a otros agentes virales no se conocen
bien. Las imgenes histopatolgicas de animales afectados por infecciones virales
carecen de los focos inflamados, altamente melanizados muy comunes de las
infecciones bacterianas (Flegel y Pasharawipas, 1998). Algunos autores sugieren que
en los crustceos no existe una respuesta inmune contra los patgenos virales,
soportando la teora de la acomodacin viral. Sin embargo en varios estudios
realizados en camarn infectados por virus se reportan procesos inmunitarios tales
como: infiltracin, fagocitosis y encapsulacin en lugares afectados (Durand et al.,
1997; Momoyama et al., 1994). Las cpsulas observadas no presentan signos de
melanizacin y la literatura sugiere que el material encapsulado son clulas
apoptticas (Rodrguez et al., 2003).
Adicionalmente, Hasson et al. (1999b) destacan el rol importante que cumple el
rgano linfoide en los mecanismos de defensa antiviral del L. vannamei contra el
virus del sndrome de Taura. El rgano linfoide forma parte integral del sistema
circulatorio (Bell y Lightner, 1988) y actuara como filtro de partculas virales
(Hasson et al., 1999b). Durante las infecciones virales en el rgano linfoide se
forman estructuras esfricas multicelulares sin un vaso central, llamadas esferoides
(Bonami et al., 1992). La formacin de esferoides en el rgano linfoide se ha visto
asociada por lo menos con seis diferentes infecciones virales en camarones peneidos
(Hasson et al., 1999b, Anggraeni y Owens, 2000), incluido el WSSV (Vidal et al.,
2001). Existen tres tipos de esferoides segn el grado de vacuolizacin: Tipo A, una
masa de clulas homogneas que contienen pocas o ninguna clula necrtica,
ligeramente basfilo; Tipo B que es una evolucin del tipo A pero difiere por el
incremento de las clulas necrticas y poco a moderado nmero de vacuolas
citoplasmticas; y Tipo C que presenta un incremento en la basofilia, conteniendo un
alto porcentaje de ncleos basfilos ( 33 a 50%) ms pequeos que los
observados en el tipo A y B, y vacuolas citoplsmicas en menor nmero. Segn la
literatura, hemocitos infiltrantes en el rgano linfoide conduciran a la formacin de
esferoides (Anggraeni y Owens, 2000). Al respecto habra que sealar que Van de
Braak et al. (2002b) han determinado por medio de anticuerpos la migracin de
hemocitos desde los tbulos del rgano linfoide a la periferia de los mismos, en
animales infectados con WSSV.
Por otra parte modificaciones de la frmula hemocitaria han sido reportados en
animales infectados con WSSV. Destacndose el incremento en el porcentaje de
hemocitos hialinos (Kim et al., 1999), al respecto cabe sealar que Wang et al.
(2002) han encontrado que los hemocitos hialinos son resistentes a la infeccin con
WSSV, lo que conducira a suponer que durante las infecciones sobreviven animales
con alto contenido de hemocitos hialinos. Por otra parte Sonnenlhozner et al. (2002)
han observado proliferacin y migracin de hemocitos a tejidos expuestos y blancos
del virus, en animales resistentes al WSSV por haber sido desafiados en condiciones
de hipertermia.

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Un aspecto que sin duda merece mencionarse es la aparicin de clulas apoptticas

en animales afectados por virus (Flegel y Pashirawipas, 1998; Khanobdee et al.,
2002). La apoptosis parece manifestarse en diferentes tejidos incluidos los
hemocitos de animales infectados por WSSV (Rojtinnakorn et al., 2002). Segn
Granja et al. (2003), la expresin de los mecanismos de apoptosis sera ms
importante en camarones resistentes al WSSV.
Finalmente cabe destacar que Pan et al. (2000) han reportado una amplia actividad
antiviral en los tejidos de los crustceos y la primera molcula antiviral ha sido
identificada en P. monodon (Luo et al., 2003).

Estrategias para controlar el problema de la Mancha Blanca

1. Seleccin gentica
Diversos ensayos de desafos con WSSV realizados en familias de L. vannamei han
mostrado diferencias significativas en supervivencia, encontrndose familias con
supervivencias del 15% y otras del 4% (Prez et al., 2001). La susceptibilidad al
WSSV observada en las familias indica la diferencia en la respuesta al virus. Argue et
al. (1999) reportan una heredabilidad baja, siendo sta menor a 0,01 para
resistencia de L. vannamei a TSV. En este caso la seleccin familiar es importante ya
que cuando se presenta una baja heredabilidad, el carcter bajo mejoramiento no
puede ser medido directamente en el individuo a seleccionar (Prez et al., 2001).
2. Manejo
Con el objetivo de frenar el virus de la mancha blanca, la industria camaronera ha
ensayado varias opciones para atenuar su impacto, adaptando medidas de
bioseguridad en laboratorio y piscinas de cultivo de camarn. Alday (1999) public
reglas de bioseguridad para laboratorios de maduracin y larvas y para piscinas
camaroneras recomendando desinfeccin de los huevos con agua estril y yodo. En
camaroneras, se recomend sembrar animales PCR negativos para WSSV, utilizar
mallas para filtrar agua en compuertas de entrada y salida y el uso de redes anticangrejos para evitar el ingreso del virus por medio de estos vectores (Alday, 1999).
Otras medidas de seguridad implicaron restricciones al ingreso de animales vivos
contaminados como: reproductores, nauplios y postlarvas de camarn, as como al
consumo de balanceado producido de la cabeza de camarn.
La dinmica de ocurrencia de patgenos en sistemas acuticos est probablemente
modulada por parmetros ambientales tales como salinidad y temperatura (Jimnez
et al., 2000). As se encontr una correlacin negativa entre la prevalencia del virus
TSV y la temperatura en granjas de cultivo de camarn en Ecuador, sugiriendo que
el clima fro podra ser un factor de riesgo que precipite la ocurrencia del virus
(Jimnez et al., 2000), resultados similares para WSSV han sido reportados por
Rodrguez et al. (2003b). Por otra parte se han reportado supervivencias del 100%
en camarones desafiados al WSSV en condiciones de hipertermia (Vidal et al., 2001;
Sonnenholzner et al., 2002). El efecto dramtico de la hipertermia sobre la
susceptibilidad del camarn blanco al WSSV ha promovido con xito el
establecimiento en el Ecuador de cultivos intensivos de camarn en piscinas
cubiertas (invernaderos) a fin de mantener la temperatura en niveles superiores a
los 31C (Caldern y Sonnenholzner, 2003).

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Se ha observado que el aumento de la temperatura incentiva la proliferacin de los

hemocitos favoreciendo tambin la infiltracin de stos a los tejidos. Sonnenholzner
et al. (2002) sugieren que el virus puede infectar a los camarones a cualquier
temperatura y que el aumento en la supervivencia estara relacionado por el
incremento de la respuesta del camarn al virus. Otros autores tambin sugieren
que la respuesta del sistema inmune podra ser la responsable de las diferencias en
la susceptibilidad a las enfermedades de acuerdo a las estaciones o la temperatura
(Jimnez et al., 2000).
Segn Le Moullac et al. (1998) en el camarn, las reacciones de resistencia a
patgenos estn basadas en el nmero de hemocitos circulantes en la hemolinfa.
Los camarones con un alto nmero de hemocitos resisten mejor a la infeccin que
camarones con un bajo nmero de hemocitos (Le Moullac et al., 1998). En este
sentido la inmunoestimulacin se vislumbra como una alternativa para manipular la
respuesta inmune del camarn antes de que estos se enfrenten a desafos
microbianos en los estanques. Los objetivos preventivos de su utilizacin seran,
inducir un estado de alerta inmunitaria y promover la proliferacin de hemocitos.
Los inmunoestimulantes son molculas que se derivan de paredes celulares de
microorganismos y que activan el sistema inmune. Estos componentes activos son
fragmentos de peptidomuramil (peptidoglicanos), lipopolisacaridos (LPS), presentes
en bacterias Gram + y Gram - . En la pared celular de la levaduras y hongos existen
principalmente -glucanos que son molculas de poliglucosas ligadas a travs de
cadenas de 1,3 y con ramificaciones de 1,6 de glucosa (Le Moullac et al., 1998;
Dalmo et al., 1998). Le Moullac et al. (1998) han reportado que la respuesta inmune
de los camarones es mejorada con inmunoestimulantes de origen bacteriano o
levadura cualquiera que sea el mtodo de administracin, sin embargo, la ganancia
no es constante ni reproducible. En L. stylirostris por ejemplo, estos autores
reportan que el inmunoestimulante G (nombre comercial de -glucanos) probado en
Tahit increment entre el 22 y 50% el nmero de hemocitos en algunas series de
experimentos. Sin embargo esta misma sustancia en Nueva Caledonia increment el
nmero de hemocitos en un 16% en la estacin caliente pero nicamente en un 8%
en la estacin fra. Adems esta estimulacin no fue eficaz ya que no se increment
la supervivencia en desafos microbianos (Le Moullac et al., 1998).
La inmunoestimulacin por va oral, incorporando las sustancias inmunoestimulantes
en el alimento, sera el mtodo ms prctico para los sistemas de cultivo de
camarn. La concentracin de los inmunoestimulantes es muy importante para
observar el efecto protector. Sung et al. (1994) encontraron efectos positivos en
infecciones experimentales con bacterias en P. monodon a concentraciones de 0,5 y
1 mg/ml de glucano, pero no fue efectivo a 0,25 y 2 mg/ml de glucano, con un
efecto protector que dur hasta 18 das despus de la inmersin. Otero (2001)
seala 50 mg de -1,3 glucano/kg de alimento para juveniles como la concentracin
adecuada para observar un efecto positivo.
Los -glucanos estn involucrados en el incremento de la actividad fagoctica de los
hemocitos (Chang et al., 2000; Sung et al., 1994), adhesin celular y produccin de
anin superxido en reproductores (Chang et al., 2000). Los peptidoglucanos
derivados de Bifidobacterium thermophilum, tambin mejoran la actividad fagoctica
de los hemocitos granulosos en animales desafiados experimentalmente con WSSV,
incrementando la resistencia y supervivencia de los animales al virus (Itami et al.,
1998). Chang et al. (1999) realizaron una infeccin con WSSV en camarones que
fueron inmunoestimulados con -1,3-glucano por 20 das y obtuvieron
supervivencias del 20% y 12% en juveniles y postlarvas respectivamente, al 6 da

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de infeccin a diferencia del control que lleg con supervivencia de 0% al 4 da de

infeccin. En ensayos de campo se han obtenido resultados muy prometedores para
sistema de cultivo semiextensivo combinando -1,3-glucanos con precra en
hipertermia (Rodrguez et al., 2003b).
El sistema inmune se puede tambin modular mediante aditivos nutricionales como
vitaminas C y E, las que promueven un buen funcionamiento de las clulas
inmunitarias (Molina et al., 2001).
Una forma de evaluar la eficacia de inmunoestimulantes y otras molculas
inmunomoduladoras, adems de la supervivencia, sera mediante la cuantificacin
de parmetros inmunitarios. Estudios sobre parmetros celulares y humorales, tales
como generacin de radicales de oxgeno, actividad fenoloxidasa, hemoaglutinacin,
etc. (Rodrguez y Le Moullac, 2000), se estn realizando como indicadores de salud.
El diagnstico hemocitario podra constituir un marcador del estado fisiolgico e
inmunitario de los camarones (Tsing, 1987), estableciendo de esta forma un sistema
de control inmune que permita la deteccin de inmunodeficiencias y el control de la
calidad ambiental (Tsing, 1987; Bachre, 2000). El hemograma consiste en el
nmero y la proporcin de diferentes tipos de hemocitos presentes en una muestra
de hemolinfa provenientes de un individuo (Hose y Martin, 1989). Los cuales son
realizados mediante tinciones y microscopa de contraste de fases lo que permite
distinguir hemocitos granulosos, hialinos y semigranulosos, siendo el ltimo el
mtodo ms prctico e informativo (Muoz, 1996).
Otra forma de estudiar los hemocitos y los mecanismos de defensa desplegados
bajo desafo microbiano es mediante observaciones histolgicas con la ayuda de
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