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G. Jaurena
M. Wawrzkiewicz
PROMEFA
Tabla de contenidos
PROMEFA
PROMEFA
Protocolos Analticos
Fibra Detergente Neutro (aFDN) v1
Por equipo ANKOM (Ankom, 2005)
Alimentos de aplicacin
Todo tipo de forrajes y alimentos.
Principios
El residuo fibroso (aFDN, fundamentalmente celulosa, hemicelulosa y lignina) se
obtiene luego de disolver con detergente neutro los compuestos presentes en el contenido
celular junto con sustancias de la pared celular de fcil digestin (e.g. pectinas).
Precauciones
El Lauril sulfato de sodio puede irritar las mucosas. Usar mscara y guantes cuando est
manipulando este reactivo y trabajar bajo campana.
Equipamiento
Balanza analtica.
Desecador.
Reactivos
a) Solucin de detergente neutro (SDN): por cada litro de solucin
10 ml de trietilengilcol,
PROMEFA
4. Calentar hasta 90-100C la SDN dentro del vaso digestor antes de colocar las
muestras.
5. Poner las bolsas con las muestras en la gradilla y una vez que la solucin est
caliente, colocar en el vaso digestor. Cerrar y sellar el vaso de digestin. Digestar
durante 60 minutos.
6. Interrumpir la agitacin y el calentamiento, abrir la vlvula y dejar salir la solucin
(precaucin: la solucin dentro del vaso est bajo presin). La vlvula se abre primero
PROMEFA
MH1 (g):
peso de la muestra.
MS105 (g/g):
T+aFDN (g):
T1 (g):
Tbco1 (g):
Tbco2 (g):
Referencias
Ankom. 2005. Subject: Neutral Degerteng Fiber in Feeds. Filter bags technique (ANKOM200).
Accessed 9/5/2007, 2007.
Goering, H. K. and Van Soest, P. J. 1970. Forage fiber analisys. Agric. Handbook No 379.
ARS, USDA.
Van Soest P. J. 1975. Physio-chemical aspects of fiber digestion in I. W. McDonald and A. C.
I. Warner (Eds.), Digestion and Metabolism in the Ruminant. The Univ. New England
Publ. Unit., Armidale, Australia.
Van Soest, P. J. 1982. Nutritional Ecology of the Ruminant. O and B Brooks, Inc., Corvallis,
OR.
PROMEFA
Cenizas 600C 2 h v1
Alimentos de aplicacin
Todo tipo de forrajes y alimentos (segn la referencia para alimentos y plantas).
Principios
La materia orgnica de la muestra es combustionada, eliminndose como CO2, por lo
que el residuo recuperado rene las sustancias minerales (independientemente de su origen
funcional en el material de origen).
Precauciones
Bsicas relacionadas con el manejo de equipos elctricos y con actividades de
laboratorio.
Equipamiento
Balanza de precisin.
Cpsulas de porcelana
Desecador
Mufla
Reactivos
No hay.
Procedimiento
10. El sustrato con que se trabaja es la muestra molida y secada a 65C.
11. El procedimiento se debe realizar por duplicado para cada una de las muestras.
12. Las
cpsulas
de
porcelana
utilizadas
en
este
procedimiento
deben
estar
completamente secas. Para ello deben permanecer en la estufa a 105C por lo menos
desde la tarde anterior.
13. Se retiran las cpsulas de la estufa en desecador y se dejan enfriar (aprox. 15-30 min.)
14. Registrar el peso de la cpsula (T) en una balanza analtica. Para ello se debe retirar
con pinza la cpsula del desecador y colocarla sobre el plato de la balanza con
cuidado.
15. Colocar en la cpsula una alcuota de la muestra de peso conocido (aproximadamente
2 g) (MH)
16. Regular la mufla a 600C y encenderla una vez que las cpsulas estn en su interior.
17. Una vez alcanzada la temperatura final se debe mantener durante 2 horas.
18. Apagar la mufla y dejar enfriar hasta 150-200C.
19. Retirar las cpsulas en desecador, dejar enfriar y pesar (T+Cen).
20. Si se dejan las cenizas dentro de la mufla de un da para otro, regular la temperatura
PROMEFA
% en base seca
Cenizas
Materia hmeda o tal cual
% MS secada a 105C
Tara
Referencias
AOAC International (formerly the Association of Official Analytical Chemists). Official Methods
of Analysis. Arlington, VA: AOAC International, 1990. Nro. 942.05.
PROMEFA
Cenizas 550C 4 h v1
Alimentos de aplicacin
Todo tipo de forrajes y alimentos.
Principios
La materia orgnica de la muestra es combustionada, eliminndose como CO2, por lo
que el residuo recuperado rene las sustancias minerales (independientemente de su origen
funcional en el material de origen).
Equipamiento
Balanza de precisin.
Cpsulas de porcelana
Desecador
Mufla
Reactivos
No hay.
Precauciones
Bsicas relacionadas con el manejo de equipos elctricos y con actividades de
laboratorio.
Procedimiento
22. El sustrato con que se trabaja es la muestra molida y secada a 65C.
23. El procedimiento se debe realizar por duplicado para cada una de las muestras.
24. Las
cpsulas
de
porcelana
utilizadas
en
este
procedimiento
deben
estar
completamente secas. Para ello deben permanecer en la estufa a 105C por lo menos
desde la tarde anterior.
25. Se retiran las cpsulas de la estufa en desecador y se dejan enfriar (aprox. 15-30 min.)
26. Registrar el peso de la cpsula (T) en una balanza analtica. Para ello se debe retirar
con pinza la cpsula del desecador y colocarla sobre el plato de la balanza con
cuidado.
27. Colocar en la cpsula una alcuota de la muestra de peso conocido (aproximadamente
2 g) (MH)
28. Regular la mufla a 550C y encenderla una vez que las cpsulas estn en su interior.
29. Una vez alcanzada la temperatura final se debe mantener durante 4 horas.
30. Apagar la mufla y dejar enfriar hasta 150-200C.
31. Retirar las cpsulas en desecador, dejar enfriar y pesar (T+Cen).
PROMEFA
% en base seca
Cenizas
Materia hmeda o tal cual
% MS secada a 105C
Tara
Referencias
AOAC International (formerly the Association of Official Analytical Chemists). Official Methods
of Analysis. Arlington, VA: AOAC International, 1990. Nro. 942.05.
PROMEFA
Cenizas 450C 12 h v1
Recopilacin: M. Wawrzkiewicz y G. Jaurena
Alimentos de aplicacin
Todo tipo de forrajes y alimentos.
Principios
La materia orgnica de la muestra es combustionada, eliminndose como CO2, por lo
que el residuo recuperado rene las sustancias minerales (independientemente de su origen
funcional en el material de origen).
Equipamiento
Balanza de precisin.
Cpsulas de porcelana
Desecador
Mufla
Reactivos
No hay.
Precauciones
Bsicas relacionadas con el manejo de equipos elctricos y con actividades de
laboratorio.
Procedimiento
34. El sustrato con que se trabaja es la muestra molida y secada a 65C.
35. El procedimiento se debe realizar por duplicado para cada una de las muestras.
36. Las
cpsulas
de
porcelana
utilizadas
en
este
procedimiento
deben
estar
completamente secas. Para ello deben permanecer en la estufa a 105C por lo menos
desde la tarde anterior.
37. Se retiran las cpsulas de la estufa en desecador y se dejan enfriar (aprox. 15-30 min.)
38. Registrar el peso de la cpsula (T) en una balanza analtica. Para ello se debe retirar
con pinza la cpsula del desecador y colocarla sobre el plato de la balanza con
cuidado.
39. Colocar en la cpsula una alcuota de la muestra de peso conocido (aproximadamente
2 g; MH)
40. Regular la mufla a 450C y encenderla una vez que las cpsulas estn en su interior.
41. Una vez alcanzada la temperatura final se debe mantener durante 12 horas.
PROMEFA
% en base seca
Cenizas
Materia hmeda o tal cual
% MS secada a 105C
Tara
PROMEFA
Usar guantes y la campana cuando manipule el cido sulfrico. Sea muy cuidadoso
cuando agregue el cido sulfrico al agua. Al sulfrico no le gusta que lo mojen.
El CTAB puede
irritar las
mucosas. Usar
mscara y guantes
cuando
est
Equipamiento
Reactivos
a. Solucin de Detergente cido (SDA): por cada litro de solucin
b. Acetona. Use un grado que est libre de colores y que no tenga niveles elevados de
evaporacin.
PROMEFA
Procedimiento
1. Preparacin de la muestra
a. En caso de utilizar el procedimiento secuencial para la determinacin seguir el
protocolo desde el punto siguiente "g")
b. Rotular debidamente la bolsitas filtrantes (2 por cada muestra a analizar y 2
para los blancos).
c. Pesar la bolsa de filtro (T1) y llevar a cero la balanza.
d. Pesar 0,5g (+/- 0,05 g) de la muestra molida y secada a 65C (MH1), Pesar
una bolsa de filtro y digerirla para determinar el blanco (Tbco1).
e. Sellar por calor las bolsas cercano al borde (c.a. 4 mm) cuidando que el lado
interno de las mismas estn bien limpios para garantizar el sellado.
f.
PROMEFA
Clculos
FDA (%bs) = 100 x {(T1+FDA) - [T1 x (Tbco2/Tbco1)] / (MH1 x MS105)}
Donde,
%bs:
MH1 (g):
peso de la muestra
MS105 (g/g) :
T1 (g):
T1+FDA (g):
Tbco1 (g):
Tbco2 (g):
Referencias
Ankon, 2005. Acid detergent fiber in feeds. Filter bag technique (ANKOM200). Ankon
Technoligy.
Van Soest, P. J. 1982. Nutritional Ecology of the Ruminant. O and B Brooks, Inc., Corvallis,
OR.
Goering, H. K. and Van Soest, P. J. 1970. Forage fiber analices. Agric. Handbook No 379.
ARS, USDA.
Van Soest P. J. 1975. Physio-chemical aspects of fiber digestion in I. W. McDonald and A. C.
I Warner (Eds.), Digestion and Metabolism in the Ruminant. The Univ. New England
Publ. Unit., Armidale, Australia.
AOAC International (formerly the Association of Official Analytical Chemists). Official Methods
of Analysis. Arlington, VA: AOAC International, 1990. Nro. 973.18. Pag. 82.
PROMEFA
Balanza analtica
Tubos de digestin
Erlenmeyers
Equipo digestor y destilador para Kjeldahl
Bureta
Reactivos
Usar NH4H2PO4 certificado (12.15% N) o Lisina clorhidrato de alta pureza (e.g. L-lisina
Sigma Nr. Catalogo L-5626: C6H14N2O2.HCl, PM = 182.6; 15.33% N; pureza mnima 98%).
Para chequear el mtodo completo estndar de referencia consultar NIST N194 (National
Institut of Standards and Technology).
El resto de los reactivos son los mismos de la determinacin de N por Kjedahl (Prtcl NT
01).
Caractersticas de los patrones provistos por el Promefa:
Sulfato de amonio (Art. 961506, Biopack, Argentina), H8N2O4S, PM: 132.14, 21.2%N;
pureza: 99.9%.
Procedimiento
Pesar una alcuota de la muestra y registrar el peso (MH1; c.a. 0.1 g de NH4H2PO4 o
lisina).
Proceder de acuerdo a las determinacines de N por Kjedahl (Prtcl NT 01) o por
mtodo de Dumas (Prtcl NT 02).
PROMEFA
PROMEFA
Balanza de precisin.
Estufa termorregulada a 105C.
Desecador.
Cpsulas de porcelana, aluminio o acero inoxidable.
Reactivos
No hay.
Procedimiento
9. Se debe realizar una determinacin en duplicado para cada uno de los patrones.
10. Las
cpsulas
de
porcelana
utilizadas
en
este
procedimiento
deben
estar
completamente secas. Para ello deben permanecer en la estufa a 105C por lo menos
desde la tarde anterior.
11. Retirar las cpsulas de la estufa en desecador y dejar enfriar (aprox. 15-30 min.).
12. Registrar el peso de la cpsula en una balanza analtica. Para ello se debe retirar la
cpsula del desecador con pinza y colocarla sobre el plato de la balanza con cuidado
(T1)
13. Colocar en la cpsula una alcuota del patrn de peso conocido (aproximadamente 500
miligramos; MH1)
14. Poner las cpsulas con muestra en una estufa regulada a 105C y dejar durante 4
PROMEFA
= MS105 (%)
MH1 (g):
MS105 (%):
MS1 (g):
MST (%)
T1 (g):
Referencias
AOAC International (formerly the Association of Official Analytical Chemists). Official Methods
of Analysis. Arlington, VA: AOAC International, 1995.
Bradstreet, R. B. The Kjeldahl Method for Organic Nitrogen. New York, NY: Academic Press
Incorporated, 1965.
Jones, J. Benton. Kjeldahl Method for Nitrogen Determination. Athens, GA: Micro-Macro
Publishing, 1991.
PROMEFA
Alimentos de aplicacin
Todo tipo de forrajes y alimentos.
Principios
El residuo de la fibra cido detergente consiste principalmente de lignocelulosa, la
solucin de cido sulfrico (72%) disuelve la celulosa, quedando la lignina y la ceniza
insoluble en cido en el residuo final recuperado. La cutina tambin es retenida y
consecuentemente se toma como si fuera parte de la lignina.
Precauciones
Usar guantes y la campana cuando manipule el cido sulfrico. Sea muy cuidadoso
cuando agregue el cido sulfrico al agua. Al sulfrico no le gusta que lo mojen.
Equipamiento
Balanza de precisin.
Desecador
Vasos de precipitado
Reactivos
16. cido sulfrico (72% peso en peso)
a. Mezclar manualmente para estandarizar el reactivo. El grado del cido sulfrico
es de 1,634 g/l (a 20C) o 24,00 N. Agregar 1200 g de cido sulfrico a 440 ml
de agua destilada.
17. Acetona
a. Use un grado que est libre de colores y que no tenga niveles elevados de
evaporacin
PROMEFA
Procedimiento
18. Preparacin de la muestra
a. En caso de utilizar el procedimiento secuencial seguir el protocolo desde el
punto "b)" del procedimiento para determinar FDA (Prtcl FDA 01).
b. Rotular debidamente la bolsitas filtrantes (2 por cada muestra a analizar y 2
para los blancos).
c. Pesar la bolsa de filtro (T1) y llevar a cero la balanza.
d. Pesar 0,5g (+/- 0,05 g) de la muestra molida y secada a temperatura ambiente
(MH1). Pesar una bolsa de filtro vaca para usar como blanco e incorporarla en
el procedimiento junto con las muestras.
e. Sellar por calor las bolsas cercano al borde (c.a. 4 mm) cuidando que el lado
interno de las mismas estn bien limpios para garantizar el sellado.
f.
En el protocolo sugerido por ANKOM Technology (2005) indica emplear agua de grifo sin indicacin de
temperatura. Considerando la variabilidad en calidad de agua disponible entre los laboratorios participantes
pareci mas conveniente utilizar el procedimiento anterior.
PROMEFA
Clculos
LDA (%bs) = 100 x {T1+LDAyCen [T1 x (Tbco2/Tbco1) A] / (MH1 x MS105)}
A = (T2+Cen T2) [T1 x (T3+Cen T3) / Tbco.1)]
Donde,
A (g):
MH1 (g):
peso de la muestra
MS105 (g/g):
T1 (g):
T1+LDAyCen (g):
T2 (g):
T2+Cen (g)
T3 (g):
T3+Cen (g)
Tbco1 (g):
Tbco2 (g):
Referencias
Ankom, 2005. Method for determining acid detergent lignin in beakers. ANKOM Technology.
Van Soest, P. J. 1982. Nutritional Ecology of the Ruminant. O and B Brooks, Inc., Corvallis,
OR.
Goering, H. K. and Van Soest, P. J. 1970. Forage fiber analices. Agric. Handbook No 379.
ARS, USDA.
Van Soest P. J. 1975. Physio-chemical aspects of fiber digestion in I. W. McDonald and A. C.
I Warner (Eds.), Digestion and Metabolism in the Ruminant. The Univ. New England
Publ. Unit., Armidale, Australia.
AOAC International (formerly the Association of Official Analytical Chemists). Official Methods
of Analysis. Arlington, VA: AOAC International, 1990. Nro. 973.18. Pag. 82.
PROMEFA
Alimentos de aplicacin
Forrajes y alimentos con ms de un 20% de humedad.
En alimentos con alto contenido de sustancias voltiles (e.g. silajes), el secado en
estufa eliminar los compuestos voltiles junto con el agua y consecuentemente la
determinacin de humedad por esta va estar sobrestimada.
Principios
Este procedimiento se utiliza para preparar las muestras con alto contenidos de
humedad (>20%) y dado que en general tiene un mnimo efecto sobre la composicin qumica
permite almacenar las muestras y efectuar posteriormente los anlisis necesarios.
Dado que el agua se evapora a 100C, sta tcnica no elimina toda el agua contenida
en la muestra y consecuentemente se trata de una MS parcial que elimina aproximadamente
el 95% de la humedad (Harris, 1970).
El contenido de materia seca parcial (MSp) de la muestra se obtiene luego de haber
eliminado por evaporacin parcialmente el agua y equilibrado dicha muestra con la humedad
ambiente.
Precauciones
Bsicas relacionadas con el manejo de equipos elctricos y con actividades de
laboratorio.
Equipamiento
Balanza de precisin.
Estufa con termorregulacin a 65C.
Bandejas de aluminio.
Reactivos
No hay.
Procedimiento
24. Registrar el peso del recipiente en el cual se colocar la muestra a secar (T1)
25. Colocar una alcuota de la muestra en el recipiente previamente pesado y registrar el
peso de la misma habiendo llevado a cero la balanza con el recipiente (MH1). La
muestra debe quedar uniformemente esparcida sobre el recipiente para permitir una
rpida evaporacin del agua.
26. Llevar a estufa a una temperatura de 65C durante 48 h o hasta peso constante.
27. Retirar las muestras de la estufa, dejarlas enfriar sobre una mesada hasta que se
equilibren con el ambiente y pesarlas (T1+MS1).
28. La muestra as secada debe ser molida y preservada en un envase de vidrio o plstico
PROMEFA
Referencias
Harris, L. E. 1970. Compilacin de datos analticos y biolgicos en la preparacin de cuadros
de composicin de alimentos para uso en los trpicos de America Latina. University of
Florida, Gainesville, Fl (USA).
PROMEFA
Alimentos de aplicacin
Todo tipo de forrajes y alimentos con bajo contenido de humedad (<20%) y aquellos
previamente acondicionados por secado parcial (Prtcl MS Parcial 01).
El material una vez sometido al secado en estufa a 105C no es apropiado para
efectuar determinaciones analticas adicionales, a excepcin de cenizas.
Principios
El agua contenida en los alimentos se evapora por encima de los 100C,
consecuentemente el residuo remanente permite estimar gravimtricamente el contenido de
materia seca (MS105) del material puesto a secar inicialmente.
sta determinacin permite estimar el contenido de agua del alimento, siendo
complementaria a la de 65C efectuada sobre las muestras hmedas.
Para el caso de muestras secas (humedad <20%) es la nica determinacin que se
requiere para estimar el contenido de materia seca total (MST). En forma similar se procesan
las muestras de forraje fresco o conservado hmedo que se muelan con hielo seco y que
ingresen a la secuencia de anlisis como material fresco (e.g. almidn, N soluble).
Precauciones
Bsicas relacionadas con el manejo de equipos elctricos y con actividades de
laboratorio.
Prestar atencin al manejo de las estufas para evitar el ingreso de muestras hmedas
nuevas en momentos cercanos a la finalizacin del secado, dado que pueden afectar la
determinacin.
Equipamiento
Balanza de precisin.
Estufa termorregulada a 105C.
Desecador.
Cpsulas de porcelana, aluminio o acero inoxidable.
Reactivos
No hay.
Procedimiento
29. Se debe realizar por duplicado para cada una de las muestras.
30. Las
cpsulas
de
porcelana
utilizadas
en
este
procedimiento
deben
estar
completamente secas. Para ello deben permanecer en la estufa a 105C por lo menos
desde la tarde anterior.
31. Retirar las cpsulas de la estufa en desecador y dejar enfriar (aprox. 15-30 min.).
32. Registrar el peso de la cpsula en una balanza analtica. Para ello se debe retirar la
PROMEFA
Donde,
MS65 (%) = {(T1+MS1) T1] / MH1} 100
MH1 (g):
MH2 (g):
MS1 (g):
MS105 (%):
MS2 (g):
MS65 (%):
MST (%)
T1 (g):
T2 (g):
Referencias
AOAC International (formerly the Association of Official Analytical Chemists). Official Methods
of Analysis. Arlington, VA: AOAC International, 1990. Nro. 130.15.
AOAC International (formerly the Association of Official Analytical Chemists). Official Methods
of Analysis. Arlington, VA: AOAC International, 1990. Nro. 167.03. 15th Edition.
Correcciones
2007 Mayo.
Shirley Furtado y Gabriela Arias
Bollati, G.
PROMEFA
Alimentos de aplicacin
Todo tipo de forrajes y alimentos.
Principios
En este paso se oxida la materia orgnica a CO2 y H2O, mientras se reduce el N a
amonio. Una vez finalizada la digestin, se tiene en solucin:
MO
CO2 + H2O
N
(NH4)2SO4
El xito de la tcnica de determinacin de nitrgeno puede controlarse mediante el uso
de sustancias patrn de concentracin conocida de nitrgeno. Una sal de amonio puede ser
usada para testar el proceso de destilacin de la tcnica, mientras que la lisina y el cido
nicotnico son usados para chequear el proceso de digestin. La recuperacin porcentual del
nitrgeno agregado en el patrn indica la eficiencia de la tcnica (se esperan valores de
recuperacin mayores al 98%). Este procedimiento debe ser incorporado como rutina a modo
de control del funcionamiento de la tcnica.
Se debern realizar blancos para determinar posibles aportes de nitrgeno por los
reactivos y materiales empleados. El procedimiento para la determinacin de los blancos es
igual a la de las muestras pero sin la colocacin de la misma y debe ser reconfirmada
frecuentemente.
Precauciones
Bsicas relacionadas con el manejo de equipos elctricos y con actividades de
laboratorio.
Hay que ser especialmente cuidadoso en la manipulacin de los digestores y el cido
sulfrico concentrado, utilizar lentes protectores y guantes resistentes al calor.
Equipamiento
Balanza analtica
Tubos de digestin
Erlenmeyers
Equipo digestor y destilador para Kjeldahl
Bureta
Reactivos
cido Brico al 2%:
a) Hervir 20 g de cido brico en 500 ml de agua destilada para solubilizarlo
b) Agregar 250 ml de agua fra
c) Cuando llega a temperatura ambiente agregar:
i) 10 ml de Verde de Bromocresol (100 mg / 100 ml etanol)
ii) 7 ml de Rojo de Metilo (100 mg / 100 ml etanol)
d) Llevar a 1 litro en matraz con agua destilada
PROMEFA
PROMEFA
Procedimiento
Digestin
1) Pesar un alcuota de la muestra y registrar el peso (MH1) (0.5 g MS 65C forrajes y
0.1 g MS 65C carne)2
2) Colocar la muestra en tubos de digestin
3) Agregar 15 g de Sulfato de potasio (SO4K2)
4) Agregar 1 ml de Sulfato de cobre 10% (SO4Cu 10%)
5) Agregar 25 ml de cido Sulfrico concentrado (SO4H2 concentrado)
6) Encender el digestor a 400C
7) Activar el mecanismo necesario para evitar el escape de vapores al ambiente.
8) La digestin de las muestras se llevar a cabo hasta que la solucin dentro de los
tubos quede de color verde translcido (dependiendo de las muestras y equipo,
puede tomar entre 30 min a 4 h).
9) Retirar los tubos con la gradilla del block digestor y dejar enfriar sin retirar la tapa
recolectora de vapores. Al enfriarse la solucin se torna incolora y translcida
10) Agregar 20 ml de agua destilada en cada tubo y dejar enfriar agitar 2 3 veces
cada 5 minutos para evitar que se formen cristales grandes de Sulfato de potasio.
11) Dejar enfriar para comenzar la destilacin
Destilacin
1) Preparar tantos erlenmeyer como tubos para destilar haya preparados con 25 ml de
cido Brico 2%
2) Colocar un erlenmeyer con cido brico 2% en la salida del refrigerante del equipo
con el final del tubo de vidrio sumergido en la solucin (as quedar hasta
inmediatamente antes de apagar la bomba generadora de vapor para concluir el
destilado)
3) Colocar el tubo con la muestra digestada en el destilador asegurndose que el
cierre superior con la goma sea completo (se recomienda presionar en sentido
ascendente desde el tubo)
4) Dosificar el Hidrxido de Sodio 40% hasta neutralizar la solucin del tubo (el color
del la solucin del tubo pasa de incoloro-blanco a marrn o celeste en caso de
exceso de NaOH)
2
En caso de ser muestras lquidas o de elevado contenido de agua (>30% de humedad, se debe elevar la
temperatura del digestor a razn de 100C cada 30 minutos hasta los 400C y a partir de entonces contar las 2
horas de digestin.
PROMEFA
Con cido Sulfrico 0,1 N hasta cambio de color verde a rosa intenso (mantener
siempre el mismo criterio de color final en la titulacin de todas las muestras). (T1)
Clculos
(T1 Tbco.) x 1.4 x N SO4H2
Nt (%bs) = -----------------------------------------------MH1 x MS105
6.25
Referencias
AOAC International (formerly the Association of Official Analytical Chemists). Official Methods
of Analysis. Arlington, VA: AOAC International, 1995.
Bradstreet, R. B. The Kjeldahl Method for Organic Nitrogen. New York, NY: Academic Press
Incorporated, 1965.
Jones, J. Benton. Kjeldahl Method for Nitrogen Determination. Athens, GA: Micro-Macro
Publishing, 1991.
PROMEFA
PROMEFA
Protocolos miscelneos
Correccin de los resultados analticos por Materia Seca Total v2
Alimentos de aplicacin
Todas las muestras de las pruebas interlaboratorios del Promefa (previamente secadas
a 65C).
Principios
Las muestras de alimento, establecen un equilibrio con la humedad ambiente, por lo
que el contenido de agua puede variar entre laboratorios y an para un mismo laboratorio a lo
largo del tiempo.
Los resultados analticos se deben reportar sobre base seca total para evitar las
variaciones debidas a la humedad residual contenidas en las muestras.
Procedimiento
A partir de los procedimientos explicados en el Prtcl MS Total 01 se puede estimar la
materia seca obtenida por secado a 105C (MS105) de cada muestra con la cual se
proceder a corregir los valores analticos obtenidos sobre las muestras parcialmente secas
(MS 65 y equilibradas con la humedad ambiente del laboratorio).
Los anlisis (e.g. aFDN, PB) se llevan a cabo sobre las muestras parcialmente secas
(base parcialmente seca [bps]; i.e. 65C o en el caso de las muestras del Promefa tal como
llegan al laboratorio).
Una alcuota de la muestra recibida se usar para estimar la MS105 (secando a 105C)
Una vez obtenidos los resultados analticos y la MS105 se proceder a efectuar la
correccin, aplicando la siguiente frmula (ejemplificado para aFDN):
aFDN (g/kg MS bs) = aFDN (g/kg MS bps) / MS105 (g/kg MH2) / 1000
donde:
aFDN (g/kg MS bs): contenido de aFDN expresado en base seca (bs)
aFDN (g/kg MS bps): contenido de aFDN expresado sobre base parcialmente
seca (bps)
MS105 (%): materia seca obtenida luego de secar la muestra a 105C de
acuerdo al Prtcl MS Total 01
Ejemplo
PROMEFA
T2 (g)
8.002
7.988
MH2 (g)
2.014
2.034
MS2 + T2 (g)
9.918
9.941
MS2 (g)
1.916
1.953
MS105 (g/g)
0.9513
0.9602
T2: tara
MH2: peso de la muestra parcialmente seca
MS2: peso de la muestra luego de haber sido secada a 105C.
2. Clculo de la materia seca a 105C promedio, i.e. 0.9558 g/g MH2 (parcialmente seca).
3. Simultneamente con lo hecho en el punto 1, se inicia una corrida analtica para
determinar el contenido de aFDN. Consecuentemente se pesan aproximadamente 500 mg
de la muestra parcialmente seca (base parcialmente seca, bps) y el resultado es 450 g de
aFDN por kg de muestra parcialmente seca (bps).
4. Se corrige el resultado analtico (bps) por el contenido de MS105 para obtener el valor en
base seca total (bst), del siguiente modo:
450 (g aFDN/kg MS bps) / 0.9558 (g/g bps) = 470.8 (g aFDN /kg MS bst)
5. Resultados:
MST = MS65 MS105
Si MS65 fuese 870 g/kg MH
MST = 870 0.9558 = 831 g/kg MH
Entonces:
aFDN (g/kg MS bst) = 470.8
aFDN (g/kg MS bps) = 450.0
aFDN (g/kg MH)
= 391.2
PROMEFA
Introduccin
Un objetivo primordial de los sistemas de evaluacin de alimentos para animales es
predecir con razonable exactitud la produccin animal a partir del suministro de los alimentos
analizados. Es aceptado que la productividad animal lograda como consecuencia del
suministro de un dado alimento constituye el criterio ltimo para valorar un alimento, pero esta
situacin de valoracin ideal est estrictamente circunscripta al trabajo de investigacin
desarrollado en instituciones especializadas.
La valoracin comercial de los alimentos para animales requiere de mtodos objetivos,
repetibles y econmicos que permitan efectuar predicciones sobre la capacidad de los
alimentos para suministrar los nutrientes y la energa necesarios para cubrir los distintos
procesos vitales de los animales y preservar su estado de salud y la calidad de los productos
obtenidos a partir de ellos.
El valor nutritivo (VN, entendido como la combinacin de consumo, digestibilidad y
eficiencia en el uso de los nutrientes) se relaciona estrechamente con la produccin animal y
es sobre este principio (y sobre las asociaciones empricas descritas entre los componentes
del VN y las determinaciones efectuadas en el laboratorio) que se basa el funcionamiento de
los sistemas de alimentacin animal (congruencia entre la valoracin de alimentos y la
prediccin de los requerimientos animales).
Por las razones antes expuestas, es que la prediccin de la concentracin energtica
de los alimentos es un paso crtico del sistema de valoracin de alimentos.
Existen dos alternativas para predecir el aporte energtico de los alimentos a partir de
muestras en el laboratorio: sistemas de valoracin in vitro y anlisis qumicos. Los primeros
en sus distintas variantes presentan buenas asociaciones con los valores obtenidos a partir
de ensayos in vivo. Las determinaciones qumicas del laboratorio son empleadas para
predecir la digestibilidad de los alimentos en base a relaciones empricas descritas por
ecuaciones que suelen basarse en las asociaciones negativas de la digestibilidad con el
contenido de la fibra de los alimentos. Las ecuaciones son especficas para cada tipo de
alimento y su exactitud es funcin de la de los anlisis de los laboratorios y de los
experimentos in vivo sobre los cuales fueron ajustadas.
La aplicacin de estas ecuaciones presenta varias limitaciones que deben ser tenidas
en cuenta:
An cuando se trate de alimentos similares, su aplicacin no deja de ser una
extrapolacin respecto a los datos originales sobre los cuales se ajustaron.
En las mayora de los casos no hay evidencia de valoraciones independientes
de las mismas.
PROMEFA
Donde
%FDA:
%FDN:
%LDA:
%TND:
DMS:
ED:
EM:
MS:
MSD:
PROMEFA
PROMEFA
PROMEFA
PROMEFA
Ejemplo
6. Resultados analticos
Repeticiones analticas
r1
r2
r3
r4
Valor mnimo
Valor mximo
7. Clculo de q
El resultado sospechoso es r4, por lo tanto
D = 610
N = 580
R = 610 560 = 50
q = (610 580)/ 50 = 30/50 = 0.60
q < Qn=4; 1% no se rechaza el valor bajo sospecha (D)
Tngase en cuenta que para fallar ste test el valor D debera ser superior a 626.3.
Referencias
Dixon, W. J. 1951. Ratios involving extreme values. J. Ann. Math. Stat. 22(1):68-78.