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UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL

FACULDADE DE VETERINRIA
HOSPITAL DE CLNICAS VETERINRIAS
LABORATRIO DE ANLISES CLNICAS VETERINRIAS

HEPATOZOONOSE CANINA

Autor: Camila Serina Lasta


Orientador: Flix H. D. Gonzlez
Co-orientador: Andrea Pires dos Santos

PORTO ALEGRE
2008

UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL


FACULDADE DE VETERINRIA
HOSPITAL DE CLNICAS VETERINRIAS
LABORATRIO DE ANLISES CLNICAS VETERINRIAS

HEPATOZOONOSE CANINA
Camila Serina Lasta

Monografia para obteno do certificado de


Residncia Mdica em Patologia Clnica
Veterinria
Orientador: Prof. Flix H. Daz Gonzlez
Co-orientador: Andrea Pires dos Santos

PORTO ALEGRE
2008
2

TTULO: HEPATOZOONOSE CANINA

AUTOR: CAMILA SERINA LASTA

ORIENTADOR: FLIX HILRIO DAZ GONZLEZ

BANCA EXAMINADORA:

Prof. Flix Hilrio Daz Gonzlez


Orientador

___________________________________________________________________________
Doutoranda Andrea Pires dos Santos
Co-orientador

Prof. Flvio Antnio Pacheco de Arajo


Membro da Banca Examinadora

Prof. Slvia Gonzalez Monteiro


Membro da Banca Examinadora

Porto Alegre
2008
3

AGRADECIMENTOS:

Ao Hospital de Clnicas Veterinrias (HCV) e ao Laboratrio de Anlises Clnicas


Veterinrias (LACVet) pela oportunidade uma realizar uma Residncia de qualidade, que
proporcionou um aperfeioamento de meus conhecimentos.
Universidade Federal do Rio Grande do Sul, que apesar da falta de investimentos no
ensino superior e do constante sucateamento das Universidades Pblicas, oferece ensino de
qualidade e desempenha seu papel no incentivo pesquisa cientfica.
Agradeo s minhas colegas e amigas Vanessa, Lu e Simon, por tudo! Pelo apoio nos
momentos difceis, por tudo que me ensinaram, pelo companheirismo e esprito de equipe.
Com cada uma aprendi coisas importantes, na veterinria, e para a vida. Amo vocs.
Aos estagirios do LACVet, uma equipe maravilhosa que veste a camisa! um
prazer trabalhar com estudantes dedicados e comprometidos.
Meu orientador, professor Flix, obrigada por acreditar em mim e pela sua pela
confiana.
Minha co-orientadora e amiga Dea, obrigada pelas dicas e pela correria molecular.
Voc foi muito importante para este trabalho.
Ao Ricardo, pelo computador e pelo companheirismo.
Pretinha e Fino, que com suas bagunas, agitos e amor incondicional tornaram a
preparao deste trabalho mais divertida.
Meus colegas residentes do HCV, pelas conversas e discusses de casos; acredito que
nos ajudamos mutuamente, cada um contribuindo com sua rea de maior conhecimento.
A todos os animais que tm suas vidas mais breves em nome da cincia.

Animais no fazem guerras


Animais no destroem selvas
Animais no constroem bombas
Animais no poluem o ar
Animais no matam por prazer
Seria bom, se todos animais
Pudessem contar com todos vocs
Pra apoiar, pra defender
A liberdade de ser...
Animais!!
(Banda Clera)

RESUMO:

Este trabalho visa discutir a etiologia, taxonomia, epidemiologia, patognese, diagnstico e o


tratamento da hepatozoonose canina, uma doena transmitida pela ingesto de artrpodes
vetores. Duas espcies diferentes de Hepatozoon so capazes de infectar ces - Hepatozoon
canis, descrito na Europa, sia, frica e Amrica do Sul; e Hepatozoon americanum no sul
dos Estados Unidos. De acordo com pesquisas recentes, no Brasil a espcie de importncia
o H. canis. A infeco por H. canis varia de assintomtica com baixa parasitemia, a doena
grave, que cursa com anemia, letargia e caquexia em ces com grande nmero de parasitas
circulantes. A infeco por H americanum manifesta-se principalmente por anormalidades
musculoesquelticas como miosite e leses periosteais. O diagnstico feito principalmente
atravs da deteco de gamontes em esfregaos sanguneos no caso de H canis, e por bipsia
muscular em H. americanum. A terapia de ambas as formas da doena envolve tratamento por
longo prazo com combinaes de frmacos.

Palavras-chave: Protozorios, Hepatozoon spp., caninos

ABSTRACT

This studys purpose is to discuss the etiology, taxonomy, epidemiology, pathogenesis,


diagnosis and treatment of canine hepatozoonosis, a disease transmitted by ingestion of
arthropod vectors. Two distinct Hepatozoon species are capable of infecting dogs
Hepatozoon canis, described in Europe, Asia, Africa and South America; and Hepatozoon
americanum, found in the south of the United States. According to recent researches, the most
important species in Brazil is H. Canis. Its infection varies from asymptomatic with low
parasitemia, and severe disease, cursing with anemia, lethargy and cachexy with large
number of circulating parasites. The infection by H. americanum manifests itself mainly by
musculoskeletal abnormalities such as myositis and periosteal lesions. The diagnosis is
established mainly through the detection of gamontes in blood smears for H. canis, and
through muscular biopsy for H. americanum. The treatment of both forms of the disease
involves long time therapy with combining drugs.

Keywords: Protozoa, Hepatozoon spp., dogs.

SUMRIO
LISTA DE FIGURAS ............................................................................................................ 9
LISTA DE TABELAS ......................................................................................................... 10
LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS ........................................................................... 11
1. INTRODUO: .............................................................................................................. 12
2. ETIOLOGIA .................................................................................................................... 12
2.1. Ces .......................................................................................................................... 12
2.2. Hepatozoonose em outras espcies ............................................................................ 13
3. HISTRICO E TAXOMOMIA: ...................................................................................... 14
4. EPIDEMIOLOGIA: ......................................................................................................... 15
4.1. Distribuio Geogrfica e Prevalncia ....................................................................... 15
4.1.2. Hepatozoon canis ............................................................................................... 15
4.1.3. Hepatozoon americanum .................................................................................... 17
4.2. Transmisso .............................................................................................................. 17
4.2.1. Vetores ............................................................................................................... 18
4.2.1.1. Hepatozoon canis ............................................................................................ 18
4.2.1.2. Hepatozoon americanum ................................................................................. 19
4.3. Caractersticas Epidemiolgicas ................................................................................ 20
5. PATOGNESE ................................................................................................................ 21
5.1. Hepatozoon canis: ..................................................................................................... 21
5.2. Hepatozoon americanum ........................................................................................... 23
6. MANIFESTAES CLNICAS ...................................................................................... 25
6.1. Hepatozoon canis ...................................................................................................... 25
6.1.2. Parasitemia ......................................................................................................... 26
6.1.3. Infeces Concomitantes .................................................................................... 27
6.2. Hepatozzon. americanum .......................................................................................... 28
7. ACHADOS LABORATORIAIS ...................................................................................... 29
7.1 Hepatozoon canis ....................................................................................................... 29
7.2. Hepatozoon americanum ........................................................................................... 31
8. DIAGNSTICO .............................................................................................................. 32
8.1. Hepatozoon canis ...................................................................................................... 32
8.2. Hepatozoon americanum ........................................................................................... 35
9. TERAPIA ........................................................................................................................ 35
9.1. Hepatozoon canis ...................................................................................................... 35
9.2. Hepatozoon americanum ........................................................................................... 36
10. PREVENO ............................................................................................................... 36
CONSIDERAES FINAIS ............................................................................................... 37

LISTA DE FIGURAS

Figura 1. Carrapatos adultos da espcie Amblyomma ovale. (a) fmea e (b) macho (Forlano et
al., 2005)
Figura 2. Fases de desenvolvimento do Hepatozoon canis no carrapato e no co: a. oocisto de
H. canis no hemocele de Rhipicephalus sanguineus. b. Meronte de H. canis em aspirado de
medula ssea. c. Gamonte de H. canis na circulao perifrica de co infectado
experimentalmente (Baneth et al., 2001)
Figura 3. Gamontes de H. canis em esfregao sanguneo de sangue perifrico de co (Kiral
et al., 2005).

LISTA DE TABELAS

Tabela 1. Classificao dos protozorios parasitas (Fischer, 2002).

10

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS

ALT
AST
CPK
DNA
ELISA
FA
GGT
GSH
IFA
IgG
IgM
LDH
MDA
NO
PCR
RNA
SP

11

Alanina amino transferase


Aspartato amino transferase
Creatina fosfoquinase
cido desoxirribonucleico
Enzime-linked-immunosorbent serologic assay
Fosfatase alcalina
Gama glutamil transferase
Glutation
Imunofluorescncia indireta
Imunoglobulina G
Imunoglobulina M
Lactato desidrogenase
Malondialdedo
xido ntrico
Reao em Cadeia da Polimerase
cido ribonuclico
So Paulo

1. INTRODUO:
Hepatozoonose uma doena causada pelo protozorio Hepatozoon spp., que pertence
ao filo Protozoa, subfilo Apicomplexa, famlia Hepatozoidae, subordem Adeleorina. Mais de
300 espcies de Hepatozoon tm sido descritas em anfbios, rpteis, pssaros, marsupiais e
mamferos. Destas, aproximadamente 50 espcies foram reportadas em mamferos (Mathew
et al., 2000). As espcies. que infectam anfbios, rpteis e aves parasitam principalmente os
eritrcitos, enquanto os gamontes de Hepatozoon spp. que infectam mamferos so vistos nos
leuccitos (Baneth, 2006).
Hepatozoon spp. tem um ciclo de vida que inclui desenvolvimento assexuado com
merogonia seguida de gametogonia em um hospedeiro intermedirio vertebrado, como o co,
e desenvolvimento sexual at esporogonia em um hospedeiro definitivo invertebrado e
hematfago. Uma variedade de artrpodes, como carrapatos, caros, mosquitos, piolhos, entre
outros, podem atuar como hospedeiro definitivo para as diferentes espcies de Hepatozoon
spp. (Baneth et al., 2003).
At o momento, duas espcies de Hepatozoon foram identificada em ces: H. canis e
H. americanum. Esta classificao foi baseada principalmente nos sinais clnicos, tropismo
tecidual, achados patolgicos e morfolgicos, bem como em caractersticas genticas. O H.
americanum foi descrito no sul dos Estados Unidos, enquanto H. canis encontrado na
Europa, frica, sia e na Amrica do Sul (Vincent-Johnson et al., 1997; Baneth et al., 2003).
A presente monografia tem como objetivo discutir a patognese, o diagnstico, o
tratamento e as pesquisas recentes publicadas sobre a hepatozoonose canina, com nfase
doena causada pelo agente Hepatozoon canis, a espcie presente no Brasil.
2. ETIOLOGIA:
2.1. Ces:
At 1997 todos os casos de hepatozoonose canina foram atribudos ao H. canis devido
a morfologia muito semelhante dos gamontes das duas espcies. H. americanum foi
identificado como uma nova espcie com base em diferenas na localizao da merogonia do
agente no hospedeiro vertebrado, vetor, sinais clnicos e severidade da infeco, distribuio
geogrfica, caractersticas genticas e antignicas (Vincent-Johnson et al., 1997; Baneth et al.,
2000). Com base na morfologia, os gamontes de H.canis e H. americaum so muito
semelhantes e, de acordo com seqncias da subunidade 18S do gene para RNA ribossmico
h 96% de similaridade gentica entre as duas espcies (Mathew et al., 2000).
12

Hepatozoon canis e H. americanum so protozorios transmitidos por carrapatos que


parasitam leuccitos e o parnquima de tecidos. Carrapatos de diferentes espcies tm sido
descritos como hospedeiro definitivo do hemoparasita (Voyvoda et al., 2004). A
hepatozoonose canina j foi descrita na sia, frica, Sul da Europa, Amrica do Sul e
Estados Unidos (Baneth, 2006).
2.2. Hepatozoonose em outras espcies:
H. canis ou Hepatozoon spp. morfologicamente semelhantes ao H. canis tm sido
reportados em diversas espcies de caninos selvagens como a raposa (Vulpes vulpes silacea)
(Conceio et al., 1988; Majlthov et al., 2007), o chacal-dourado (Canis aureus) (Shamir et
al., 2001), o cachorro-selvagem-africano (Lycaon pictus) (Van Heerden et al., 1995), a hiena
malhada (Crocuta crocuta) (McCully et al., 1975) e o graxaim (Cerdocyon thous) (Alencar et
al.,1997).
Existem relatos de infeco por H. americanum em coiotes (Canis latrans)
naturalmente e experimentalmente infectados. H. americanum tem sido diagnosticado em
carnvoros silvestres atravs da identificao de cistos e merontes nos msculos ou gamontes
na circulao (Kocan et al.,1999; Kocan et al., 2000). Kocan e colaboradores (2000) afirmam
que no foram encontradas leses sseas em coiotes naturalmente infectados, entretanto,
coiotes filhotes infectados experimentalmente desenvolveram a doena. Coiotes podem ser
reservatrios naturais da infeco, contribuindo para a ocorrncia de H. americanum em ces
(Garret et al., 2005). Segundo Macintire et al. (2006) H. americanum um parasita natural de
outras espcies de animais silvestres, e o co um hospedeiro acidental.
Estes candeos selvagens adaptam-se a uma grande variedade de habitats, e so
frequentemente encontrados tanto em zonas rurais como em urbanas, padro de
comportamento que resulta em um maior contato com o co domstico (Canis lupus
familiaris). Como a relao filogentica entre estas espcies muito prxima, o risco de
transmisso de doenas infecciosas entre elas significativo (Conceio et al., 1988; Shamir
et al., 2001). Apesar disto, a trasmisso experimental do Hepatozoon spp. de um chacal
infectado para ces atravs de carrapatos infectados apresentou resultados inconclusivos
(McCully et al., 1975). Conceio e colaboraboradores (1988) encontraram diferena
significativa na prevalncia de infeces por H. canis em ces e raposas de uma mesma rea.
Os autores acreditam que as raposas possam ser um importante reservatrio natural do agente.

13

Hepatozoonose tambm j foi descrita em felinos selvagens como o leopardo


(Panthera pardus) (McCully et al., 1975), o lince-vermelho (Lynx rufus) (Mercer et al.,
1988), o gato-de-pallas (Felis manul) (Barr et al., 1993), a jaguatirica (Felis pardalis) (Mercer
et al., 1988; Metzger et al., 2007), o leo (Panthera leo), a chita (Acinonyx jubatus), o gatodo-mato (Leopardus tigrinus), o gato-maracaj (Leopardus wiedii) e o jaguarundi (Puma
yagouaroundi) (Metzger et al., 2007), alm de felinos domsticos (Baneth et al., 1995; Perez
et al., 2004). No se sabe ao certo se os felinos so infectados por H. canis ou outra espcie
desconhecida de Hepatozoon (Baneth, 2003).
Embora seja grande a possibilidade de H. canis infectar outras espcies animais,
particularmente aquelas estreitamente relacionadas com o co domstico, isto no tem sido
demonstrado por transmisso experimental. Relatos publicados antes de 1997 na Amrica do
Norte, sobre organismos similares ao H. canis, tratam provavelmente da espcie conhecida
hoje como Hepatozoon americanum, ou a uma outra espcie diferente (Baneth, 2006).

3. HISTRICO E TAXONOMIA:
A hepatozoonose canina foi descrita pela primeira vez em 1906 na ndia, causada pelo
microorganismo na ocasio chamado Leukocytozoon canis (James, 1905 apud Mathew et al.,
2000), hoje conhecido como Hepatozoon.
Em 1922, Hepatozoon spp. foi classificado como da famlia Haemogregarinidae por
Lgger, mas em 1926 foi removido desta e colocado na famlia Hepatozoidae. Para isso,
Wenyon baseou-se na observao de que gneros da famlia Haemogregarinidae produzem
esporozotos livres que so transmitidos ao hospedeiro vertebrado atravs da picada de um
artrpode vetor, enquanto esporozotos de Hepatozoon desenvolvem-se dentro de
esporocistos e so transmitidos atravs da ingesto do artrpode infectado, por parte do
hospedeiro vertebrado (Mathew et al., 2000).
Espcies de Hepatozoon pertencem ao subfilo Apicomplexa (Tabela 1) e tm muitas
caractersticas em comum com outros gneros deste grande grupo de protozorios parasitas,
como Plasmodium spp., Toxoplasma gondii e Babesia spp., entre outros (Ewing & Pancieira,
2003). Todos os representantes do subfilo Apicomplexa so parasitas obrigatrios,
desenvolvem-se intracelularmente e possuem uma estrutura chamada complexo apical, que
facilita a invaso e fixao do parasita nas clulas do hospedeiro (Baneth, 2003).

14

A sistemtica e taxonomia de muitas espcies de Hepatozoon spp. permanece incerta,


pois as caractersticas morfolgicas e de desenvolvimento disponveis na literatura so, de
certa forma, inconsistentes. O seqenciamento gentico tem se mostrado uma ferramenta
particularmente til na diferenciao de espcies estreitamente relacionadas como
Toxoplasma, Neospora, e Sarcocystis (Mathew et al., 2000).

Tabela 1. Classificao dos protozorios parasitas (Fisher, M. Endoparasites in the dog and cat Protozoa. In
Practice. March, 2002).

Subfilo
Apicomplexa

Sarcomastigophora

Gnero
Isospora
Neospora
Toxoplasma
Sarcocystis
Cryptosporidium
Babesia
Hepatozoon

Caractersticas Gerais

Giardia
Leishmania

Possuem flagelo

Reproduo sexual e assexuada, ciclo de


vida largamente intracelular

4. EPIDEMIOLOGIA:
4.1. Distribuio Geogrfica e Prevalncia:
4.1.2. Hepatozoon canis:
Semelhantemente a todas as doenas que tm artrpodes como vetores, a distribuio
da hepatozoonose est estreitamente vinculada aos seus hospedeiros definitivos. O principal
vetor do H. canis o carrapato marrom do co, Rhipicephalus sanguineus, encontrado em
regies tropicais, subtropicais e temperadas do mundo todo, tornando potencial a distribuio
mundial deste protozorio (Baneth et al., 2003).
A infeco em ces j foi descrita em pases no sul da Europa como Grcia (Kontos &
Koutinas,1991), Itlia (Gavazza et al., 2003), Frana (Rioux et al., 1964) e Espanha (Jauregui
& Lopez, 1995 apud Baneth, 2006); no Oriente Mdio em Israel (Voyvoda et al., 2004), Egito
(Fahmy et al., 1977 apud Baneth, 2006) e Turquia (Karagenc et al., 2006); na frica foi
descrito na frica do Sul (McCully et al. 1975), Nigria (Ezekoli et al., 1983) e Sudo
(Oyamada et al., 2005); na sia na ndia (James, 1905 apud Baneth, 2006), Sri Lanka,
15

Singapura (Laird, 1959 apud Baneth, 2006), Malsia (Rajamanickam et al., 1985), Tailndia
(Jittapalapong et al., 2006) e Japo (Murata et al., 1991); e na Amrica do Sul no Brasil
(Massard et al., 1979; Gondin et al., 1998) e na Argentina (Eiras et al., 2007).
No Brasil a infeco j foi descrita nos estados do Rio de Janeiro (Massard et al.,
1979; ODwyer et al., 2001), So Paulo (ODwyer et al., 2004; Gondim et al., 1998), Minas
Gerais (Mundim et al., 1992; Mundim et al., 1994), Distrito Federal (Paludo et al., 2003) e
Rio Grande do Sul (Souza et al., 2001; Mello et al., 2006).
A

prevalncia

de

infeces

por

H.

canis

em

diferentes

regies

varia

consideravelmente. Assim, na Nigria houve prevalncia de 22% dos ces examinados


(Ezekoli et al., 1983), na Malsia de 1% (Rajamanickam et al., 1985), no Sudo de 42,3%
(Oyamada et al., 2005), na Tailndia (Bangkok) de 11,4% (Jittapalapong et al., 2006), e na
Turquia a prevalncia de infeces por Hepatozoon spp. foi de 25,8% atravs de tcnicas de
PCR (Karagenc et al., 2006). No Brasil, gamontes de H. canis foram detectados em 39% dos
ces em zona rural do Rio de Janeiro (ODwyer et al., 2001), enquanto em So Paulo a
prevalncia mostrou apenas 8,3% de ces infectados (Garcia de S, 2007).
Estudos sorolgicos demonstraram que 33% dos ces de Israel (Baneth et al., 1996),
36,8% da Turquia (Karagenc et al., 2006) e 4,2% de Yamaguchi (Japo) (Inokuma et al.,
1999) foram expostos ao parasita, fato demonstrado pela presena de anticorpos anti-H. canis
detectados por imunofluorescncia indireta.
Aps a identificao e caracterizao molecular, com base na seqncia do gene 18S
RNA ribossmico (18S rDNA), concluiu-se que no Brasil, assim como no Japo (Inokuna et
al., 2002) e Sudo (Oyamada et al., 2005) a espcie presente o H. canis (Rubini et al., 2005,
Rubini et al., 2006). Estudos moleculares recentes apontam H. canis como o agente
responsvel pela hepatozoonose canina tambm na Turquia (Karagenc et al., 2006)

Argentina (Eiras et al., 2007). Caracterizao gentica tambm permitiu confirmar que a
espcie de Hepatozoon que infecta raposas vermelhas na Eslovquia similar do Brasil
(Majlthov et al., 2007).
Em 2005, Rubini e colaboradores identificaram e caracterizaram espcies de
Hepatozoon spp. em ces do estado de So Paulo como sendo H. canis atravs de tcnicas
moleculares. Ainda em 2005, Paludo e colaboradores identificaram H. canis em ces em
Braslia, e em 2007, Garcia de S e colaboradores tambm identificaram H. Canis em ces do
Rio de Janeiro.
16

Existe a possibilidade de que doenas emergentes causadas por agentes parasitrios


possam ser introduzidas em regies at ento livres do agente. O alcance geogrfico de alguns
artrpodes vetores est se expandindo devido a variveis condies climticas e ecolgicas,
facilitando a transmisso de organismos patognicos para outras regies (Gavazza et al.,
2003). Deve-se dar ateno particular a infeces como a hepatozoonose, que por se tratar
geralmente de infeco inespecfica, pode no ser diagnosticada e tratada adequadamente
devido ausncia de suspeita clnica por parte do mdico veterinrio (Vilar et al., 2005). Vilar
et al. (2005) registraram a entrada em territrio brasileiro de um co proveniente de Aruba
(Antilhas holandesas) infectado por Hepatozoon spp. e Ehrlichia spp. e alertam sobre a
ausncia de um programa sanitrio especfico para controle destes bioagentes. Ehrlichia spp.
e Hepatozoon spp. so, sem dvida, de importncia para a vigilncia sanitria brasileira para
que outras espcies, consideradas mais patognicas do gnero Hepatozoon, por exemplo, no
se tornem enzoticas em nosso pas.
4.1.3. Hepatozoon americanum:
De acordo com Kocan e colaboradores (2000) Hepatozoon americanum j foi descrito
no Alabama, Georgia, Louisiana, Mississippi, Texas e Oklahoma, infectando tanto ces
quanto candeos silvestres.
4.2. Transmisso:
Diferente de muitos protozorios e bactrias transmitidos por carrapatos via glndulas
salivares (Baneth, 2003), a transmisso do H. canis para o co ocorre aps a ingesto de um
carrapato contendo oocistos esporulados (Gondim et al., 1998; Paludo et al., 2003;
Assarasakorn et al., 2006). Da mesma maneira, o carrapato torna-se infectado ao ingerir
sangue de um co parasitmico (Baneth, 2003).
No carrapato, que serve de hospedeiro definitivo do agente, H. canis transmitido de
forma transestadial, da ninfa para o estgio adulto. Transmisso trans-ovariana no pde ser
demonstrada em condies experimentais. Um modelo experimental de infectar R. sanguineus
por injeo percutnea de sangue canino com gamontes foi estabelecido, ocorrendo assim a
transmisso de H. canis aos carrapatos sem estes se alimentarem de ces infectados;
permitindo desta forma o estudo da infeco nos carrapatos (Baneth et al., 2001).
No co, H. canis pode ser transmitido via transplacentria. Cadelas prenhes
naturalmente infectadas, mantidas em ambiente livre de carrapatos transmitiram H. canis aos
filhotes de forma vertical. Gamontes ou merontes foram encontrados nos filhotes 16 a 60 dias
17

aps o nascimento. Merontes foram encontrados no bao de um dos filhotes, que morreu 16
dias aps o nascimento, e gamontes foram detectados no sangue de outros desses filhotes
(Murata et al., 1993b).
Transmisso vertical de H. americanum no tem sido documentada, embora se
acredite que assim como o H. canis, H. americanum possa ser transmitido da me para os
filhotes durante a gestao. Sugere-se tambm que o co possa tornar-se infectado aps
alimentar-se de tecidos contaminados, pois apesar deste modo de transmisso no estar
comprovado experimentalmente, isto ocorre com outras espcies de Hepatozoon (Macintire et
al., 2006).
4.2.1. Vetores:
4.2.1.1. Hepatozoon canis:
Segundo ODwyer e colaboradores (2001), o carrapato Rhipicephalus sanguineus foi
descrito como vetor de H. canis por Christophers em 1906; entretanto, em alguns pases onde
existem relatos de hepatozoonose canina por H. Canis, R. sanguineus no o carrapato mais
encontrado em ces.
No Brasil, conforme a regio estudada encontram-se ces parasitados por diferentes
espcies de carrapatos. Apesar disto, Rhipicephalus sanguineus considerado o principal
vetor e transmissor do H. canis, pois, de maneira geral, esta a espcie mais associada aos
ces. R. sanguineus encontrado freqentemente sobre ces com infestaes mistas,
juntamente com carrapatos do gnero Amblyomma (ODwyer et al., 2001, Forlano et al.,
2005).
Freire (1972 apud ODwyer et al., 2001) observou uma grande variedade de
carrapatos em ces no Rio Grande do Sul, incluindo Amblyomma ovale, A. tigrinum, A.
cajennense, A. humerale, A. incisum, Boophilus microplus, alm de R. sanguineus. Szab e
colaboradores (2001) identificaram 179 carrapatos adultos em 140 ces na regio de Franca
(SP) das espcies R. sanguineus, A. ovale, Boophilus microplus e A. cajennense. Todos os
carrapatos coletados de ces urbanos eram R. sanguineus. Kiral e colaboradores (2005),
afirmam que todos os 14 ces infectados naturalmente com H. canis eram parasitados
exclusivamente por R. sanguineus. De acordo com Massard e colaboradores (1981), ces de
reas urbanas so parasitados principalmente por R. sanguineus, enquanto animais que vivem
em zonas rurais so visto mais frequentemente infestados com Amblyomma ovale, A.
tigrinum, A. cajennense e A. aureolatum.
18

Segundo Forlano et al. (2005), o Amblyomma ovale (Figura 1) tambm pode estar
envolvido na transmisso da hepatozoonose canina em reas rurais do Brasil. Quatro espcies
de carrapatos foram encontradas parasitando ces na zona rural do estado do Rio de Janeiro:
A. cajennense (23%), R. sanguineus (12,4%), A. aureolatum (2,8%) e A. ovale (2,0%); os
autores encontraram uma correlao positiva entre a presena de A. cajennense e H. canis,
pois 31,6% dos ces com H. canis estudados eram parasitados por A. cajennense, o que
sugere que este carrapato tambm atue como vetor de H. canis (ODwyer et al., 2001).
A maior freqncia de H. canis em reas rurais e a possibilidade de que carrapatos
Amblyomma ssp. posam ser o principal vetor deste protozorio demonstra a necessidade de
mais estudos sobre a epidemiologia, transmisso e patologia da hepatozoonose canina no
Brasil (ODwyer et al., 2001; Forlano et al., 2005; Garcia de S et al., 2007).
No Japo, oocistos de H. canis foram encontrados no hemocele de carrapatos do
gnero Haemaphysalis flavas e Haemaphysalis logicornus, que desde ento tm sido
reportados como possveis vetores (Murata et al., 1995).

FIGURA 1: Carrapatos adultos da espcie Amblyoma ovale. (a) fmea e (b) macho. Fonte: Forlano et
al.2005. Diagnosis of Hepatozoon spp. in Amblyomma ovale and its experimental transmission in
domestic dogs in Brazil.

4.2.1.2. Hepatozoon americanum:


Mathew e colaboradores (1998) demonstraram que o carrapato Amblyomma
maculatum, um excelente vetor do H. americanum. Ninfas alimentadas de ces
naturalmente infectados apresentaram oocistos em seu hemocele quando adultas; ces
experimentalmente infectados pela ingesto destes oocistos desenvolveram doena, com
manifestaes que incluram elevao da temperatura corporal, miastenia e dor ssea a partir
19

de 4 a 5 semanas ps exposio, alm de leucocitose; gamontes foram encontradas em


leuccitos 5 semanas depois dos ces ingerirem oocistos. Coiotes tambm tornaram-se
infectados aps ingesto de A. maculatum infectados; em 3 semanas o parasita foi detectado
em clulas do msculo esqueltico e em 5 semanas observou-se a presena de gamontes
dentro de leuccitos (Kocan et al., 2000).
Outros trs comuns Ixoddeos (R. sanguineus, Dermacentor variabilis, e A.
americanum), expostos ao agente por alimentao experimental, mostraram-se refratrios
infeco (Ewing et al., 2002). Entre outras, uma grande diferena entre H. canis e H.
Americanum que justificaram a definio de uma nova espcie incluiu a incapacidade de se
infectar R. sanguineus com H. americanum (Ewing & Panciera, 2003).
4.3. Caractersticas Epidemiolgicas:
No foi observada predileo por raa ou sexo (Baneth et al., 1997; Baneth & Weigler,
1997; Inokuma et al., 1999; ODwyer et al., 2001), embora Gavazza e colaboradores (2003)
tenham observado 81,25 % de machos e 18,75 % de fmeas infectadas, aps analisarem 11
casos de hepatozoonose canina. Kontos & Koutinas (1991) afirmam que a taxa
fmeas:machos infectados foi de 1,2:1, o que demonstra a grande variabilidade da doena nos
diferentes pases.
Hepatozoonose canina descrita em grupos de todas as idades (Baneth et al., 1996;
Baneth et al., 1997; Baneth & Weigler, 1997; ODwyer et al., 2001, Gavazza et al., 2003),
porm parece haver maior prevalncia em animais jovens (Baneth & Weigler, 1997; Gavazza
et al., 2003).
Aps estudo epidemiolgico utilizando avaliao microscpica do esfregao
sanguneo como mtodo diagnstico, Massard (1979) concluiu que a infeco por H. canis
ocorre mais frequentemente em ces de reas rurais (31,6%, 36/114) que em ces urbanos
(4,5%, 3/67), devido a maior exposio aos carrapatos.
A sazonalidade da infeco controversa entre os pesquisadores, alguns afirmam que
a maioria dos casos de hepatozoonose canina detectada nos meses quentes do ano, quando
os vetores so mais abundantes no ambiente (Gavazza et al., 2003; Eiras et al., 2007).
Entretanto, um estudo com 100 ces infectados mostrou falta de sazonalidade da doena, o
que, segundo os autores pode ser devido a cronicidade da infeco (Baneth & Weigler, 1997).

20

5. PATOGNESE:
5.1. Hepatozoon canis:
Acredita-se que a patognese do H. canis seja fraca, pois infeces subclnicas so
comuns,

geralmente

causando

doena

leve

que

pode

afetar

bao,

linfonodos

e medula ssea, resultando em anemia e letargia (Baneth & Weigler, 1997; Baneth, 2003a).
Protozorios do gnero Hepatozoon tm um ciclo de vida onde esquizogonia e
gametogonia ocorrem no hospedeiro vertebrado, enquanto a fase sexual e esporulao
ocorrem em hospedeiros invertebrados (Gavazza et al., 2003).
Evidncias experimentais mostram que tanto machos quanto fmeas adultas da espcie
R. sanguineus podem abrigar oocistos de Hepatozoon canis, e desta forma so potencialmente
infectantes para os ces (Baneth et al., 2001). A fase assexuada inicia-se aps a ingesto do
carrapato infectado com esporozotos; estas formas atravessam o epitlio do tubo digestivo do
hospedeiro vertebrado e alcanam o sistema porta, chegando ao fgado , pulmes, bao,
medula ssea, rins e linfonodos, onde se multiplicam por esquizogonia ou merogonia. Quando
h invaso do fgado, pulmes ou rins pode ocorrer o desenvolvimento de hepatite,
pneumonia e glomerulonefrite, respectivamente. Os merozotas formados nos tecidos so
fagocitados por moncitos ou neutrfilos evoluindo at gamontes (Figura 2c), formas que so
encontradas no sangue dos ces e que so ingeridas pelos carrapatos, onde ocorre a fase
sexuada do ciclo (esporogonia) (Baneth & Shkap, 2003). Os gamontes de H. canis so
liberados no tubo digestivo do carrapato, e aps a fertilizao ocorre esporogonia com a
formao de oocistos no hemocele. Os oocistos (Figura 2a) so grandes formas esfricas que
consistem em uma membrana que envolve inmeros esporocistos com esporozotos
(Baneth,2003).
Alternativamente, merozotas podem produzir merontes secundrios nos tecidos alvo
do co. Merontes de H. canis so detectveis por citologia ou histopatologia de rgos
infectados (Gonen et al., 2004). Pequenos cistos de H. canis contendo um nico parasita tm
sido observados em tecidos de ces experimentalmente e naturalmente infectados (Baneth &
Shkap, 2003).
ODwyer e colaboradores (2004) necropsiaram cinco ces infectados com H. canis
afim de observar os estgios de desenvolvimento do protozorio nos tecidos. Leses
macroscpicas no foram observadas; trs ces apresentaram apenas gamontes em clulas
polimorfonucleadas
21

os

outros

dois

ces

apresentaram

gamontes

em

clulas

polimorfonucleadas e merontes em vrios estgios de desenvolvimento no bao e medula


ssea (Figura 3b). Bao, fgado, pulmes, corao, rins, gnglios linfticos e medula ssea
estavam infectados. Apenas no foi observada a presena do parasita na musculatura
esqueltica.
Exame histopatolgico do msculo esqueltico de ces infectados com H. canis
revelou degenerao e atrofia muscular, semelhante quela causada por H. americanum; no
entanto, a estrutura cstica tpica do H. americanum no foi observada (Paludo et al., 2005),
demonstrando a grande variabilidade das manifestaes caninas da hepatozoonose por H.
canis.

FIGURA 2. Fases de desenvolvimento do Hepatozon canis no carrapato e no co: a. oocisto de H. canis


no hemocele de Rhipicephalus sanguineus. b. Meronte de H. canis em aspirado de medula ssea. c.
gamonte de H. canis na circulao perifrica de co infectado experimentalmente. Fonte: Baneth G,
Samish M, Alekseev E, Aroch I.; Shkap, V. 2001.Transmission of Hepatozoon canis to dogs by
naturally fed or percutaneously injected Rhipicephalus sanguineus ticks.

McCully e colaboradores (1975) observaram merontes de Hepatozoon spp. no fgado,


pulmes, bao, linfonodos, msculo esqueltico e miocrdio, alm de gamontes no sangue
perifrico de carnvoros silvestres na frica do Sul.
Atravs de teste de imunofluorescncia indireta (IFAT), IgM foi detectado em ces
experimentalmente infectados aps 16 dias e IgG aps 22 dias, enquanto a presena de
gamontes foi observada apenas 28 dias depois. Apesar das variaes individuais, pde-se
observar que, de modo geral, baixos ttulos de IgM, e altos de IgG esto presentes em
infeces por H. canis. Acredita-se que a formao de anticorpos ocorra antes do
desenvolvimento do protozorio no parnquima tecidual (Baneth et al., 1998b).
A patognese da hepatozoonose canina influenciada por condies de
imunodeficincia, imaturidade do sistema imune e infeces concorrentes. Co-infeces com
Toxoplasma gondii, Babesia spp. ou Erlichia spp. predispem o aparecimento de
22

manifestaes clnicas (Harmelin et al., 1992). Paludo et al (2005) sugerem que H.


canis atua como um agente oportunista e sua presena no altera o sistema imune.

Em ces experimentalmente infectados, a parasitemia tornou-se evidente somente aps


administrao de terapia imunossupressora com prednisolona (Baneth et al., 2001; Gonen et
al., 2004). Este fato sugere que os ces, ao serem infectados, podem tornar-se portadores e
abrigar nos tecidos formas de H. canis at imunossupresso ou eventual doena que facilite a
concluso do ciclo de vida do protozorio, com subseqente lanamento de gamontes
maduros na circulao sangunea (Gonen et al., 2004).
Imunossupresso pode desempenhar um papel importante na progresso da
parasitemia em ces. Sob efeito de uma doena imunossupressora concomitante, o grau de
parasitemia pode ser marcadamente aumentado. Este aumento do nmero de gamontes
circulantes provavelmente reflete uma maior produo e liberao de merozoitas dos
merontes teciduais seguido da entrada dos parasitas nos leuccitos, ou uma diminuio na
eliminao dos parasitas por parte dos neutrfilos (Baneth et al., 1997). Alm disto,
neutrfilos parasitados so mieloperoxidase deficientes, o que pode ser responsvel por uma
resposta insatisfatria por parte do hospedeiro. Esta disfuno dos leuccitos leva os animais
a tornarem-se mais suscetveis a infeces sistmicas e recorrentes, que podem ser
responsveis pela febre associada hepatozoonose (Ibrahim et al., 1989). Leuccitos
infectados perdem algumas de suas caractersticas tpicas; contm diversas pequenas
vesculas, poucos grnulos citoplasmticos, poucos retculos endoplasmticos rugosos e
mitocndrias, alm da perda de algumas enzimas (Murata et al., 1993a). Alencar e
colaboradores (1997) afirmam que os neutrfilos infectados em uma raposa vermelha
apresentavam degenerao nuclear e apresentavam-se maiores que os neutrfilos no
parasitados.
5.2. Hepatozoon americanum:
O desenvolvimento sexual do H. americanum ocorre no hospedeiro definitivo, A.
maculatum, com subseqente produo de esporozotos infectantes localizados em oocistos.
O co torna-se infectado atravs da ingesto do carrapato com oocistos (Mathew et al., 1998).
Aps a ingesto os oocistos se rompem, libertando esporocistos que, sob influncia da bile
liberam numerosos esporozoitos; estes penetram na mucosa e so disseminados para vrios
rgos e tecidos. Os tecidos alvo para o desenvolvimento dos merontes so a musculatura
esqueltica e cardaca (Panciera et al., 1998).
23

O processo de merogonia do H. americanum ocorre primariamente entre fibras


musculares, enquanto H. canis se reproduz especialmente em tecidos hemolinfticos e rgos
viscerais (Droleskey et al., 1993; Panciera et al., 1998). Leses associadas aos estgios de
desenvolvimento asexual do parasita foram observados na musculatura esqueltica e cardaca,
e tambm no tecido adiposo subcutneo de coiotes infectados (Kocan et al., 2000). Os
merontes de H. americanum so geralmente encontrados dentro de cistos em pele de cebola
(onion skin cyst), que so formados por ricas camadas de mucopolissacardeos,
aparentemente elaboradas pela clula hospedeira (Droleskey et al., 1993, Panciera et al.,
1998). Segundo Cunnings e colaboradores (2005) o agente induz a clula hospedeira a
produzir e secretar o cisto de material mucopolissacardeo que protege o parasita contra os
mecanismos de defesa do hospedeiro. Essa caracterstica no est associada com merontes de
H. canis, que so raramente encontrados no msculo e tm sua caracterstica morfolgica
prpria, um arranjo de merozotas dentro do meronte (Baneth et al., 2003).
A leso histolgica mais frequentemente reconhecida em casos de hepatozoonose por
H. americanum a presena dos cistos. No h resposta inflamatria enquanto o protozorio
permanece nesta forma (Panciera et al., 1998; Macintire et al., 2006), mas depois de concluda
a multiplicao assexuada, a clula hospedeira degenera, a camada de mucoplissacardeos que
envolve o parasita se dispersa e merozoitas so liberados, iniciando uma reao inflamatria
aguda e localizada que progride para a formao de um piogranuloma no local onde existia o
meronte (Panciera et al., 1999; Macintire et al., 2006). Alguns merozotos desenvolvem-se em
gamontes nos leuccitos, que so ingeridos pelo carrapato, completando desta forma o ciclo
(Panciera et al., 1998; Panciera et al., 1999). Os sinais clnicos ocorrem quando o cisto se
rompe e induz severa miosite piogranulomatosa; esta miosite, adjacente aos ossos pode
estimular uma marcante reao periosteal, principalmente em animais jovens (Macintire et al.,
2006).
Casos de hepatozoonose canina causada por H. americanum comumente cursam com
proliferao periosteal em ossos longos, plvis, vrtebras e crnio. A patognese da
proliferao periosteal desconhecida, mas pode ser semelhante osteopatia hipertrfica
(Drost et al., 2003). Alm de miosite cardaca e esqueltica houve proliferao periosteal
disseminada na maioria dos animais que apresentaram manifestaes clnicas da doena. As
leses ocorreram principalmente na difise proximal dos ossos longos dos membros. As
primeiras leses apareceram 32 aps a exposio aos oocistos esporulados de H. americanum
(Panciera et al., 2000).
24

Leses musculares foram observadas em filhotes de coiote experimentalmente


infectados 4 semanas ps infeco. Aos 123 dias aps infeco experimental, observou-se
grau varivel de depsito periosteal em muitos ossos (longos, planos e curtos), com grande
proliferao periosteal envolvendo particularmente o mero e fmur (Kocan et al., 2000).
Infeces experimentais mostram que o aparecimento de gamontes circulantes ocorre em
poucos at 35 dias desde a ingesto do carrapato infectado (Panciera et al., 1999). No
carrapato, 42 dias so necessrios para que ocorra o desenvolvimento de oocistos maduros
(Mathew et al., 1999).
Evidncias sugerem que um nico episdio de infeco por H. americanum possa
causar infeco prolongada, perpetuada por repetidos ciclos de reproduo assexuada
(Panciera et al., 1998). Teorias quanto ao mecanismo de persistncia da infeco incluem
redistribuio hematognica, recirculao de merozoitos, esporozotos quiescentes e
polimorfismo dos esporozotas (Bogdan & Rollinghoff, 1999; Ewing & Panciera, 2003).

6. MANIFESTAES CLNICAS:
6.1. Hepatozoon canis:
Os sinais clnicos e achados laboratoriais da hepatozoonose canina no so claramente
definidos (Assarasakorn et al., 2006), pois so inespecficos e similares queles vistos em
outras doenas que afetam comumente os ces (Gavazza et al., 2003).
Descries de infeces por H. canis em ces variam de inaparentes a severas
(Assarasakorn et al., 2006). O protozorio freqentemente encontrado em ces saudveis
(Paludo et al., 2003), mas a doena geralmente intercorrente a outras enfermidades
imunossupressoras (Baneth &. Presentey, 1996; Gondim et al., 1998; ODwyer et al., 2001;
Baneth et al., 2003; Gavazza et al., 2003) ou outros hemoparasitas (Aguiar et al., 2004;
Gavazza et al., 2003), o que dificulta a individualizao dos seus sinais clnicos (Aguiar et al.,
2004; Gondin et al., 1998; Villar et al., 2005). Conforme o nvel de parasitemia, a
hepatozoonose por H. canis pode causar doena sria e morte (Baneth &Weigler, 1997;
Gavazza et al., 2003; Paludo et al., 2003).
Segundo Paludo e colaboradores (2003), poucos dados na literatura indicam que a
infeco por H. canis resulte em sinais clnicos detectveis de doena, entretanto, Baneth e
colaboradores (2003) afirmam que a infeco com H. canis provoca uma sndrome clnica

25

caracterizada por febre, anorexia, perda de peso, anemia, descarga ocular e fraqueza dos
membros posteriores.
Sinais inespecficos como anorexia, membranas mucosas plidas, perda de peso, febre,
poliria e polidipsia, dor, vmitos e diarria foram observados em 8 ces naturalmente
infectados, a maioria com parasitemia leve, porm todos os casos cursavam com outra doena
(Gondim et al., 1998). Febre, anorexia, baixo peso, claudicao, descarga ocular e
conjuntivite foram os sinais clnicos descritos por Ibrahim e colaboradores (1989) em 18 ces
infectados na Nigria, com parasitemia variando entre 1 a 9%.
Depresso, anorexia e perda de peso foram relatados por Gavazza e colaboradores
(2003) em 16 ces com hepatozoonose. Os 14 ces infectados descritos por Kiral e
colaboradores (2005) apresentaram sinais de doena como febre, letargia, perda de peso,
rigidez, sinais de dor, paralisia e descarga ocular. Anorexia, depresso, linfadenopatia,
alteraes da pelagem e mucosas plidas foram alteraes observadas em alguns dos animais.
Voyvoda e colaboradores (2004) descreveram um caso de infeco natural por H.
canis sem doena concomitante em que o paciente apresentou fraqueza, depresso,
incoordenao dos membros posteriores, emaciao, alteraes da pelagem, linfadenopatia
perifrica, mucosas plidas e febre. Inokuma e colaboradores (2002) descrevem co com
rigidez muscular, membros posteriores inchados, sinais de dor, desidratao leve, paralisia,
depresso e anorexia infectado com H. canis, cuja me tambm estava infectada, porm sem
sinais clnicos. Gamontes foram detectados em 11% dos neutrfilos circulantes. Achados
radiogrficos incluram proliferao ssea periosteal bilateral no fmur e mero. O outro co
descrito no trabalho apresentou parasitemia de 3%, sem alteraes clnicas e hematolgicas.
Linfadenomegalia severa foi observada em 37,5% dos ces naturalmente infectados
descritos por Gavazza e colaboradores (2003), enquanto linfadenomegalia leve ocorreu em
25% dos animais.
6.1.2. Parasitemia:
Alguns pesquisadores sugerem que existe relao entre a severidade dos sinais clnicos
e o nvel de parasitemia de H. canis (Baneth & Weigler, 1997; Karagenc et al., 2006). Desta
forma, baixos nveis de parasitemia (1-5% de leuccitos infectados) tm sido associados
infeco assintomtica ou doena leve (Baneth &Weigler, 1997), enquanto ces com alta
parasitemia apresentam-se com sinais de doena debilitante crnica (Gondim et al., 1998;
Baneth, 2003). Segundo Karagenc e colaboradores (2006), ces com parasitemia at 3%
26

desenvolveram doena leve, at 18% de leuccitos parasitados apresentaram doena


moderada e aqueles com parasitemia at 39% desenvolveram doena severa. Parasitemia de
aproximadamente 100% est associada doena grave; neutrofilia marcante (> 150.000
leuccitos/mL de sangue) comumente acompanha estes casos, mas o mecanismo que induz
resposta to severa no est elucidado (Baneth, 2003).
Febre, linfadenomegalia e dor muscular foram sinas descritos por Gavazza e
colaboradores (2003) em um co com alta parasitemia. Segundo os autores, a elevada
percentagem de neutrfilos parasitados foi uma manifestao da disperso generalizada de
merontes de H. canis nos tecidos do co. Baneth e colaboradores (1995) relatam alto nvel de
parasitemia em 2 ces com 60 a 90% dos neutrfilos parasitados em que os animais
apresentaram letargia, anorexia, emagrecimento, alm de alteraes hematolgicas e
bioqumicas marcantes. Necropsia revelou disperso generalizada de esquizontes em tecidos
parenquimatosos, porm sem envolvimento de tecidos msculo-esquelticos.
Gavazza e colaboradores (2003) descrevem nveis de 1 a 70% de neutrfilos e
moncitos parasitados por H. canis, enquanto que ODwyer e colaboradores (2001) afirmam
que o nmero de leuccitos infectados no ultrapassou 3% nos ces analisados, e Baneth &
Weigler (1997) encontraram 1-10% dos neutrfilos circulantes infectados.
Achados histopatolgicos nos casos de elevados nveis de parasitemia incluem
hepatite, pneumonia e glomerulonefrite associadas com intensiva merogonia nos tecidos
hemolinfticos, incluindo bao, medula ssea e linfonodos. Parasitemia elevada torna maior a
demanda de nutrientes por parte do hospedeiro e exerce injria tecidual direta, o que explica
perda de peso que leva a caquexia, e a grave letargia observada nestes ces (Baneth, 2003).
De acordo com ODwyer e colaboradores (2001), a patogenicidade e manifestaes
clnicas da infeco por H. canis varia de acordo com a idade do hospedeiro, grau de infeco
e associao com outras doenas. Enquanto a infeco por H. canis geralmente subclnica,
aquela causada por H. americanum usualmente fatal (Rubini et al., 2005).
6.1.3. Infeces Concomitantes:
A imunossupresso causada por outras doenas pode predispor a infeco por H. canis
ou permitir expresso de uma infeco at ento subclnica. De acordo com Gavazza e
colaboradores (2003), a hepatozoonose pode ser considerada como uma infeco oportunista
indicativa de um status de imunodeficincia.

27

Infeces concomitantes com outros patgenos caninos como parvovrus, Erlichia


canis, Toxoplasma gondii, e Leishmania infantum so frequentemente encontradas em
associao com H. canis onde estas doenas so endmicas (Harmelin et al., 1992; Mundim et
al., 1992; Baneth, 2003; Oyamada et al., 2005; Villar et al., 2005; Karagenc et al., 2006).
R. sanguineus o vetor tanto da hepatozoonose quanto da erliquiose canina e pode
permitir a exposio simultnea dos organismos. Alm disso, H. canis pode aumentar a
susceptibilidade ou promover a manifestao clnica da erliquiose. J foi descrita, inclusive, a
infeco de um nico moncito com um gamonte de H. canis e uma mrula de E. canis
(ODwyer et al., 2001). Infeco concomitante tambm j foi descrita em um chacal dourado
infectado com H. canis e E. canis (Shamir et al., 2001).
6.2. Hepatozoon. americanum:
Ao contrrio da infeco por H. canis, a maioria dos ces com H. americanum exibem
sndrome clinica severa mesmo na ausncia de doena concomitante ou imunossupresso
(Paludo et al., 2003; Rubini et al., 2005; Macintire et al., 2006). Garret e colaboradores (2005)
sugerem que a severidade da infeco pode estar relacionada com a idade do hospedeiro
vertebrado, bem como com a quantidade de oocistos ingeridos. Segundo Kocan e
colaboradores (2000), coiotes so muito sensveis infeco por H. americanum e podem
desenvolver doena clnica grave, alm de servirem como fonte de infeco para A.
maculatum.
Sinais clnicos comuns em infeces por H. americanum incluem febre, caquexia,
descarga ocular, dor, rigidez e paresia (Macintire et al., 1997). Ces doentes podem tornar-se
relutantes para se movimentar, devido intensa dor causada pela proliferao periosteal e
inflamao muscular, deixando inclusive de procurar alimento e gua. Esforos devem ser
feitos para garantir que os animais afetados permaneam hidratados e com alimento
disponvel prximo, pois ao contrrio da infeco por H. canis, estes pacientes normalmente
no apresentam anorexia (Macintire et al., 1997; Panciera et al., 1997).
Ces que sofrem de hepatozoonose americana so periodicamente ou persistentemente
febris; provavelmente uma reao associada ruptura dos merontes e liberao dos
merozotos. Secreo ocular mucopurulernta bilateral comum principalmente durante os
episdios de febre. Os animais doentes frequentemente apresentam-se febris, musculatura
rgida, letrgicos e deprimidos; claudicao e atrofia muscular so especialmente notveis
(Macintire et al., 1997; Panciera et al., 1997). Ces naturalmente infectados em Oklahoma
28

apresentaram febre, proliferao periosteal, mialgia e fraqueza muscular generalizada. Os


animais possuam sinais de doena inflamatria crnica, sem resposta terapia
antimicrobiana (Panciera et al., 1997).

7. ACHADOS LABORATORIAIS:
7.1 Hepatozoon canis:
Anormalidades laboratoriais classicamente observadas na hepatozoonose incluem
anemia normoctica normocrmica (Inokuma et al., 2002; Paludo et al., 2003) e leucocitose
neutroflica (Gondim et al., 1998; Gavazza et al., 2003; Aguiar et al., 2004; Voyvoda et al.,
2004). Segundo Gaunt (2000), infeco por H. canis pode induzir leucocitose severa, com at
200.000 leuccitos/L, com desvio a esquerda e ausncia de neutrfilos txicos.
Segundo alguns pesquisadores (ODwyer et al., 2006; Eiras et al., 2007), a infeco
por H. canis no causa importantes mudanas hematolgicas ou bioqumicas nos ces
infectados. De 13 ces naturalmente infectados, apenas 3 destes apresentaram anemia e
apenas 1 apresentou leucocitose, achados descritos como comuns em casos de hepatozoonose
por H. canis (ODwyer et al., 2006). Anemia discreta ou valores prximos ao limite inferior
foram observados em ces naturalmente infectados em Braslia, enquanto valores de
leuccitos totais apresentaram-se dentro dos limites de referncia (Paludo et al., 2005).
Inokuma e colaboradores (2002) relatam leucocitose leve e trombocitopenia como
achados hematolgicos em co infectado com H. canis, enquanto Gonen e colaboradores
(2004) descrevem caso de co naturalmente infectado com 96.000 leuccitos totais/L de
sangue. Anemia regenerativa, anisocitose e policromasia leves, leucocitose devido neutrofilia,
monocitose e eosinofilia, alm, de elevao do fibrinognio foram observados em uma raposa
vermelha infectada por Hepatozoon spp.. (Alencar et al., 1997).
Assarasakorn e colaboradores (2006) analisaram amostras de 342 caninos infectados
com Hepatozoon spp. e, diferentemente de outros relatos, afirmam que anemia microctica
hipocrmica foi encontrada na maioria dos pacientes, enquanto a contagem de leuccitos
totais foi muito varivel (desde leucopenia leucocitose). Achados hematolgicos de 18 ces
infectados na Nigria incluem leucocitose por neutrofilia e eosinofilia (Ibrahim et al., 1989).
Eosinofilia tambm foi observada em ces naturalmente infectados na Argentina, sendo
inclusive a nica alterao na contagem dos leuccitos (Eiras et al., 2007).

29

Em Israel a hepatozoonose considerada como uma infeco oportunista, com


contagens de eritrcitos e leuccitos normais (Baneth & Weigler, 1997). De acordo com
Gavazza et al. (2003), leucocitose leve a severa foi observada em 43,75% (7/16) dos casos
analisados. Eosinofilia foi a anormalidade hematolgica mais observada, em 87,5% (14/16),
neutrofilia esteve presente em 31,25% (5/16) dos ces, monocitose em 25% (4/16) e
linfocitose em 18,75% (3/16). Aproximadamente metade dos ces apresentava-se anmica, e
apenas um deles com anemia no regenerativa.
Quanto aos parmetros bioqumicos, existem relatos da diminuio na concentrao de
albumina (Aguiar et al., 2004; Voyvoda et al., 2004; Eiras et al., 2007), aumento da atividade
da fosfatase alcalina (Gondim et al., 1998; Inokuma et al., 2002; Aguiar et al., 2004; Voyvoda
et al., 2004), elevao srica de creatina fosfoquinase (CPK) (Gondim et al., 1998; Inokuma
et al., 2002; Aguiar et al., 2004), gama-glutamil transferase (GGT) (Aguiar et al., 2004),
globulinas (Gondim et al., 1998; Gavazza et al., 2003; Aguiar et al., 2004; Voyvoda et al.,
2004) e protena C reativa (Inokuma et al., 2002).
As protenas totais apresentam concentrao acima dos valores de referncia devido
hiperglobulinemia, comumente relatada em ces infectados com H. canis (Gondim et al.,
1998; Gavazza et al., 2003; Aguiar et al., 2004; Voyvoda et al., 2004; ODwyer et al, 2006;
Eiras et al., 2007), que pode ser atribuda ao estmulo da resposta humoral induzida pela
infeco por H. canis (Aguiar et al., 2004). Hiperglobulinemia foi a nica alterao
bioqumica encontrada em todos os ces naturalmente infectados analisados por ODwyer et
al. (2006), enquanto elevao srica da enzima fosfatase alcalina - tida como uma alterao
comumente observada - foi vista em apenas um co.
Hipoalbuminemia ocorre devido a anorexia, que leva diminuio da sntese protica
(Aguiar et al., 2004; Eiras et al., 2007), condio inflamatria crnica ou perda renal
causada por glomerulonefrite (Gavazza et al., 2003; Eiras et al., 2007). Foi observado
proteinria (indicando possibilidade de glomerulonefrite) de leve a severa em 8 de 11 ces
infectados na Grcia (Kontos & Koutinas, 1990), e tambm 9 dentre 16 ces positivos
apresentou proteinria na Itlia (Gavazza et al.).
A elevao dos nveis de GGT e de FA pode ser justificada pelo desenvolvimento de
hepatite secundria agresso tissular provocada pelo agente (Aguiar et al., 2004). Alm
disto, elevao da FA pode ocorrer devido proliferao ssea periosteal (Inokuma et al.,
2002).

30

Elevao na concentrao de CPK decorrente de inflamao gerada pela invaso do


H. canis na musculatura (Aguiar et al., 2004).
Assarasakorn e colaboradores (2006), ao analisarem amostras de 342 caninos
infectados com Hepatozoon spp. concluram que os parmetros bioqumicos so muito
variveis, porm, a mdia dos resultados permaneceu dentro dos limites de referncia, o que
indica a grande variabilidade dos achados clnicos laboratoriais na hepatozoonose canina.
Kiral e colaboradores (2005) determinaram as concentraes sricas de glutation
(GSH), malondialdeido (MDA), xido ntrico (NO) e ceruloplasmina em ces com H. canis a
fim de estabelecer sua relevncia no tratamento e mecanismo patolgico da doena, j que o
aumento nos nveis de produtos da peroxidao lipdica tem sido associado a uma variedade
de doenas crnicas, incluindo infeces parasitrias. Os resultados sugerem que ces
infectados com H. canis apresentam nveis significantemente maiores em comparao com
ces saudveis - de GSH, MDA e NO, o que pode estar relacionado com as defesas do
hospedeiro contra infeces parasitrias. Este aumento da peroxidao lipdica em ces
infectados pode ser considerado como uma indicao de injria celular causada pelo
microorganismo. possvel que o aumento da produo de GSH, MDA e NO em animais
infectados aumente a defesa do hospedeiro contra o parasita evitando danos induzidos pelas
espcies reativas de oxignio produzidas como resultado da infeco por H. canis, e ajude a
elimin-la.
7.2. Hepatozoon americanum:
Neutrofilia persistente um achado comum em casos de hepatozoonose americana,
assim como contagens acima de 200.000 leuccitos/L. Neutrfilos so os principais
participantes nos estgios iniciais da formao do granuloma, mas so em grande parte
substitudo por clulas mononucleares nos estgios seguintes do processo inflamatrio
(Panciera et al., 1997; Panciera et al., 1998). Filhotes de coiote que desenvolveram
hepatozoonose aps ingesto de oocistos de H. americanum apresentaram leucocitose
neutroflica cerca de 4 semanas aps a exposio ao agente que persistiu durante todo o
decurso da infeco (Kocan et al., 2000 ).
O perfil bioqumico semelhante ao de ces infectados com H. canis, com elevao
da enzima fosfatase alcalina e diminuio de protenas totais e albumina, alm de
hiperfosfatemia (Macintire et al., 1997). As leses renais observadas por Macintire e

31

colaboradores (1997) incluram amiloidose, nefrite intersticial e glomeruloefrite em alguns


ces.
Achados radiogrficos incluem extensa proliferao ssea periosteal, frequentemente e
mais grave na poro proximal dos ossos dos membros. Apesar de ossos planos serem menos
comumente afetados, ocasionalmente apresentam-se marcadamente afetados (Panciera et al.,
2000; Drost et al., 2003). Cintilografia ssea revelou leses 35 a 47 dias aps exposio
experimental, com variao individual entre os ces. As leses sseas foram difusas,
bilateralmente simtricas e homogneas (Drost et al., 2003).

8. DIAGNSTICO:
8.1. Hepatozoon canis:
O diagnstico baseia-se principalmente na identificao dos gamontes dentro de
neutrfilos (Figura 3), mas tambm de moncitos em esfregaos sangneos (Gondim et al.,
1998; ODwyer et al., 2001; Aguiar et al., 2004; Voyvoda et al., 2004), sendo que muitas
vezes o parasita encontrado casualmente em ces sem sinais clnicos (ODwyer et al., 2001;
Forlano et al., 2005; Kiral et al., 2005; Oyamada et al., 2005).
Os gamontes podem no ser detectveis no sangue perifrico, uma vez que a doena
pode cursar com parasitemia intermitente (ODwyer et al., 2001, Eiras et al., 2007). Como a
hepatozoonose uma doena crnica, que pode permanecer longos perodos em remisso,
possvel que o protozorio seja observado mais frequentemente durante a fase aguda da
infeco, quando os gamontes so mais facilmente detectados no sangue perifrico (Gavazza
et al., 2003). Eiras e colaboradores (2007) acompanharam ces infectados com H. canis
durante um ano e apesar de no observarem sinais de doena, os nveis de parasitemia
flutuaram durante o perodo.
A ausncia de parasitemia no indica ausncia de infeco (Eiras et al., 2007), por isso
a observao do esfregao sangneo no pode ser usada na excluso e confirmao do
diagnstico de hepatozoonse canina, devido sua baixa sensibilidade. Exame da capa
leucocitria (capa flogstica) pode ser utilizado na tentativa de aumentar a sensibilidade do
teste (Karagenc et al., 2006).
Os gamontes esto frequentemente situados no centro dos neutrfilos comprimindo os
lbulos do leuccito contra a membrana celular (Baneth, 2003). Aparecem como incluses
32

elpticas, alongadas e de colorao plida, ncleo central ou excntrico de cor azul escuro ou
violeta. Possuem cerca de 6-11 mcrons de comprimento por 3-5 mcrons de largura.
(Gavazza et al., 2003). Incluses intra-citoplasmticas compatveis com Hepatozoon canis,
observadas em neutrfilos de uma raposa apresentavam uma cpsula azul plida, forma
elptica e cerca de 9,1 m x 5,3 m (Alencar et al., 1997).

Figura 3: Gamontes de H. canis (setas) em esfregao


sanguneo de sangue perifrico de co. Fonte: Dogs with
Hepatozoon canis respond to the oxidative stress by increased
production of glutathione and nitric oxide. Kiral et al., 2005

Imunofluorescncia indireta (IFAT), western blot e bipsia tecidual tm sido usadas


como tcnicas alternativas no diagnstico (Aguiar et al., 2004), entretanto, tais mtodos so
trabalhosos e demorados, alm de possuir baixa especificidade (Sellon, 2003). ELISA
utilizando antgenos de gamontes purificados tambm foi descrito recentemente (Gonem et
al., 2004).
O teste de imunofluorescncia indireta (IFAT) desenvolvido por Shkap e
colaboradores (1994) apresenta maior sensibilidade comparado observao microscpica.
Baneth e colaboradores (1998b) demonstraram que anticorpos anti-gamontes podem ser
detectados por IFAT em ces infectados experimentalmente mesmo antes dos gamontes
aparecerem na circulao perifrica. Visualizao microscpica apontou 1% dos ces como
positivos, enquanto IFAT detectou 33,1% de ces expostos ao agente (Baneth et al., 1996).
Mtodos baseados na pesquisa de anticorpos tm sido usados principalmente em
estudos epidemiolgicos (Baneth et al., 1996; Inokuma et al., 1999). Embora IFAT e ELISA
33

no apresentem diferenas significativas quanto sensibilidade e especificidade, ELISA


falhou na deteco de anticorpos em alguns ces parasitmicos (Gonem et al., 2004).
Recentemente, tcnicas moleculares pela reao em cadeia da polimerase (PCR) e
anlise de seqncias tm sido usadas no diagnstico e em estudos epidemiolgicos de
infeces por Hepatozoon canis (Oyamada et al., 2005; Jittapalapong et al., 2006; Karangec
et al., 2006).
As vantagens dos mtodos moleculares sobre as outras tcnicas so a alta
especificidade e sensibilidade na deteco dos patgenos no sangue perifrico (Oyamada et
al., 2005; Sellon, 2003), pois os iniciadores moleculares projetados so especficos para a
seqncia gentica do alvo, o que faz da PCR uma ferramenta de diagnstico especfica e
sensvel devido sua habilidade de detectar um nmero muito pequeno do DNA alvo,
facilitando a deteco de alguns microorganismos abaixo do ponto inicial de deteco de
culturas microbiolgicas rotineiras, de citologia, histologia, ou imunohistoqumica (Sellon,
2003).
Jittapalapong e colaboradores (2006) relatam em estudo sobre a prevalncia de
Hepatozoon spp. em Bangkok, onde gamontes foram observados microscopicamente no
esfregao sanguneo de 2,6% dos ces e 0,7% dos gatos, enquanto a tcnica de PCR detectou
o parasita em 11,4% dos ces e 32,3% dos gatos testados, comprovando a maior
especificidade e sensibilidade da PCR no diagnstico de hepatozoonose. Rubini e
colaboradores (2005) examinaram 31 ces de reas rurais: 7 (22,6%) foram identificados
como positivos atravs de observao microscpica do esfregao sanguneo e 21 (67,7%)
positivos por PCR, demonstrando a elevada ocorrncia de H. canis em ces de reas rurais.
Na Turquia, a prevalncia de infeces por Hepatozoon spp. foi de 10,6% atravs da
observao microscpica do esfregao sanguneo e 25,8% por PCR (Karagenc et al., 2006).
Alm de servirem como ferramenta de diagnstico e de estudos epidemiolgicos, as
tcnicas moleculares tm facilitado anlises importantes para a caracterizao e distino das
espcies de Hepatozoon spp. (Rubini et al., 2005; Rubini et al., 2006; Eiras et al., 2007;
Oyamada et al. 2005). Baneth e colaboradores (2000) utilizaram as tcnicas de western
immunoblotting e sequenciamento, que revelaram uma diferena de 13,59% de homologia
entre o H. americanum e H. canis na regio 18S do gene para RNA ribossmico, assim como
diferenas antignicas, comprovando definitivamente que as espcies so diferenciadas e
causam doenas tambm distintas.

34

8.2. Hepatozoon americanum:


O diagnstico atravs do exame de esfregaos sanguneos problemtico, pois
leuccitos com gamontes de H. americanum normalmente representam menos de 0,1% dos
leuccitos circulantes (Baneth, 2003). Gamontes circulantes foram observados em apenas 12
de 53 ces que possuam formas de desenvolvimento na musculatura esqueltica (Macintire et
al., 2001). Macintire e colaboradores (1997) diagnosticaram H. americanum atravs da
identificao microscpica de esquizontes e merozoitos no msculo esqueltico, mas no
encontraram gamontes em esfregaos, capa flogstica ou avaliao de medula ssea. Os
gamontes observados na circulao perifrica podem apresentar ncleo visvel ou no
(Panciera et al., 1998).
A confirmao do diagnstico deve ser feita atravs de bipsia do msculo esqueltico
(Panciera et al., 1999), e frequentemente existem numerosas fases da merogonia em uma
vasta gama de msculos. Procedimentos de imunohistoqumica utilizando anticorpos de
coelho tambm tm se mostrado eficazes (Panciera et al., 2001); teste descrito por Mathew et
al. (2001) mostrou 93% de sensibilidade e 96% de especificidade, comparado biopsia
muscular. Segundo os autores, ELISA pode ser til no apenas no diagnstico da
hepatozoonose canina por H. americanum, mas tambm em investigaes epidemiolgicas.

9. TERAPIA:
9.1. Hepatozoon canis:
No existem estudos controlados a respeito da terapia contra infeces por H. canis
(Baneth, 2003), entretanto, vrios frmacos como imidocarb, toltrazuril, clindamicina,
diminazene, primaquina, tetraciclinas, trimetoprim-sulfonamida, entre outros, tm sido usados
tratamento da hepatozoonose canina, apesar da reposta ser varivel (Baneth et al. 1995;
Baneth & Weigler, 1997; Gondim et al., 1998).
Em 1983, Ezeokoli e colaboradores afirmavam que no havia terapia efetiva contra a
doena, porm Voyvoda e colaboradores (2004) afirmam que o uso do toltrazuril combinado
com trimetoprim- sulfametoxazole pode ser considerado efetivo tratamento da hepatozoonose
canina.
Baneth (2003) recomenda uso de dipropionato de imidocarb 5 a 6 mg/kg (SC ou IM) a
cada 14 dias e doxiciclina VO 10 mg/kg por no mnimo 21 dias, enquanto Gavazza et al.
35

(2003)

afirmam

que

combinao

de

tetraciclina

(22

mg/kg,

trs

vezes

dia) e dipropionato de imidocarb (6 mg/kg, SC, repetidos aps 14 dias) eficaz no tratamento
de ces com hepatozoonose.
Antiinflamatrios no esterides (AINES) como aspirina, fenilbutazona e flunixin
meglumine so recomendadas como terapia de suporte no controle da dor, febre e inflamao
(Inokuma et al., 2002; Voyvoda et al., 2004), alm de complexos vitamnicos (Voyvoda et al.,
2004).
O tratamento deve ser empregado at que os gamontes no sejam observados na
circulao perifrica, o que pode exigir um longo perodo de terapia (Baneth, 2003). Indica-se
a realizao de hemograma com minuciosa anlise do esfregao sanguneo a cada 2 semanas.
Todos os ces parasitmicos, com ou sem manifestao clnica da doena devem ser tratados
(Gavazza et al., 2003).
9.2. Hepatozoon americanum:
A

combinao

de

trimetoprim-sulfadiazina,

clindamicina

pirimetamina

administrados diariamente durante 14 dias mostrou-se eficaz para atenuar as manifestaes


clinicas da doena; e embora nenhum tratamento tenha se mostrado eficaz na eliminao
completa do parasita nos tecidos, o tratamento com trimetoprim-sulfadiazina, clindamicina e
pirimetamina seguido pela administrao por longo prazo de decoquinato resultou em maior
tempo de sobrevivncia e excelente qualidade de vida aos animais infectados com H.
americanum (Macintire et al., 2001). Controle da dor conseguido com antinflamatrios no
esteroidais (Ewing & Panciera, 2003). Infelizmente, se o protocolo no rigorosamente
seguido, provvel que dentro de semanas a meses haja retorno dos sinais (Macintire et al.,
2001). Tratamento com toltrazuril, apresentou resposta favorvel inicialmente, mas no evitou
retorno das manifestaes clnicas aps cerca de 6 meses (Macintire et al., 1997)

10. PREVENO:
A preveno da hepatozoonose canina pode ser feita atravs do controle de
ectoparasitas, visando anular o contato do co com o vetor responsvel pela transmisso
(Baneth, 2003).

36

CONSIDERAES FINAIS:
Hepatozoon um protozorio que parasita ces em leuccitos e tecidos. O co tornase infectado quando ingere um vetor com oocistos maduros. Diversas espcies de carrapatos
tm sido incriminadas como vetor da hepatozoonose.
Enquanto a infeco por H. canis geralmente subclnica, aquela causada por H.
americanum usualmente fatal. Em ces infectados com H. canis a infeco varia de
assintomtica em ces aparentemente saudveis doena sria que cursa com anemia, letargia
e perda de peso. Pesquisas recentes mostram que a patogenicidade e manifestaes clnicas da
infeco por H. canis varia de acordo com a idade do hospedeiro, grau de infeco e
associao com outras doenas, j que imunossupresso pode predispor o aparecimento das
manifestaes clnicas. A infeco por H. americanum est associada a uma sndrome clnica
que envolve miosite crnica, dores sseas, debilitao e comumente cursa com bito.
O diagnstico ainda feito principalmente atravs da identificao de gamontes em
esfregaos sanguneos, porm, tcnicas moleculares tm se mostrado uma ferramenta til,
tanto no diagnstico como em pesquisas, pois trata-se de um mtodo sensvel e especfico.
De uma perspectiva clnica, o mdico veterinrio deve estar ciente que a
hepatozoonose por H. canis est presente no territrio brasileiro, infectando no s os ces,
como tambm felinos domsticos, e deve fazer parte do diagnstico diferencial quando se
trata de animais com sinais clnicos inespecficos, principalmente na presena de infestaes
de carrapatos. Uma combinao de frmacos torna a terapia eficaz, embora muitas vezes seja
necessrio um longo perodo de tratamento, at que no se observe gamontes na circulao.
No Brasil a hepatozoonose canina pode estar sendo subdiagnosticada por parte dos
mdicos veterinrios devido principalmente a falta de estudos a respeito de sua patognese e
epidemiologia. Existem relatos da infeco no Rio Grande do Sul, mas o estado carece de
investigaes quanto caracterizao gentica e epidemiologia do agente.

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