Você está na página 1de 3

1

Mtodos Diretos

Filtrao

Aplicado para contar amostras em que o numero de bactrias muito pequeno, como lagos e
fontes de gua. Esse mtodo permite que a bactrias seja concentrada sobre a superfcie de
uma membrana de filtro de poros muito pequenos (bactria no passa pelos poros) aps
passagem de um volume de 100 mL de gua. Essa membrana transferida para uma placa de
Petri com um suporte embebido em nutriente lquido, que permite que as bactrias se
desenvolvam sobre a membrana. Esse mtodo usado para deteco e registro de coliformes
(indicadores de poluio fecal) em amostras de alimentos e guas. Coliformes podem ser
identificador por meios de cultivo diferenciais.

Mtodo do Nmero Mais Provvel (MNP)

uma tcnica estatstica com base no seguinte princpio: quanto maior o numero de bactrias
em um a amostra, maior ser o numero de diluies necessrias para eliminar totalmente o
crescimento em tubos com meio de cultura. Esse mtodo o mais usado quando as bactrias a
serem contadas no cresceriam em meio slido (como bactrias quimioautotrficas
nitrificantes), ou quando o crescimento de bactrias em um meio liquido diferencial usado
para identificar os microrganismos (como coliformes em gua, que seletivamente fermentam
lactose produzindo cido). O mtodo fornece somente uma estimativa de 95% de
probabilidade de a populao bacteriana conter um numero de bactrias e que o NMP da
tabela estatisticamente o numero mais provvel.

Contagem Direta ao Microscpio

Nesse mtodo um volume conhecido de soluo bacteriana colocado em uma rea


definida de uma lamina especial de microscpio denominada clula de contagem PetroffHausser.

Metodos Indiretos

Turbidimetria

Para alguns tipos de experimentos, estimar a turbidimetria uma maneira de monitorar o


crescimento bacteriano. A medida que as bactrias se multiplicam em um meio liquido,o meio
se torna turvo ou opaco com as clulas.
O instrumento utilizado para medir a turbidez um espectrofotometro. No espectrofotmetro,
um feixe de luz passa atravs de uma suspenso de bactrias ate um detector fotossensvel.
Com o aumento de numero de bactrias, menos luz atingira o detector. Essa alterao da luz
ser registrada na escala do instrumento como porcentagem de transmisso. Tambm ser
registrada a expresso logartmica chamada de absorbncia. A absorbncia utilizada para
representar graficamente o crescimento bacteriano. Quando as bactrias esto em crescimento
logartmico ou em declnio, o grfico de absorbncia em funo do tempo ser uma linha
quase reta. Se as leituras de absorbncia forem combinadas com contagem em placas da
mesma cultura, essa correlao poder ser utilizada para estimativas futuras do numero de
bactrias obtidas pela medida de turbidimetria.
Mais de um milho de clulas por mililitro devem estar presentes para que os primeiros sinais
de turbidez sejam visveis. Em torno de 10 milhes a 100 milhes de clulas por mililitro so
necessrios para que uma suspenso seja turva o suficiente para possibilitar uma leitura no
espectrofotmetro. Portanto, a turbidimetria no uma medida til de contaminao de
lquido por um numero relativamente pequeno de bactrias.

Atividade Metablica

Outra maneira indireta de estimar o numero de bactrias medir a atividade metablica de


uma populao. Esse mtodo assume que a quantidade de um produto metablico
determinado, como um acido ou CO2 diretamente proporcional ao numero de bactrias
presentes. Um exemplo de aplicao pratica de um teste metablico o ensaio microbiolgico
no qual a produo de acido utilizada para determinar quantidades de vitaminas.

Peso Seco

Para bactrias e fungos filamentosos, os mtodos comuns de medidas so menos satisfatrios.


Uma contagem em placas no poderia medir esse aumento e massa micelial. Nas contagens
em placas de actinomicetes e fungos, o numero de esporos assexuados e mais frequentemente
contado como alternativa, mais essa no e uma boa medida do crescimento. Uma das
melhores maneiras de medir o crescimento de organismos filamentos pelo peso seco. Nesse
procedimento, o fungo removido do meio de crescimento, filtrado para remover outros
matrias e seco em dissecador, sendo ento pesado. Para bactrias, o mesmo procedimento
bsico e seguido.

Referncias
Microbiologia
Por Gerard J. Tortora | Berdell R. Funke | Christine
http://vida-microscopica.blogspot.com.br/2012/05/metodos-para-quantificar-ocrescimento.html