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Universidad Quetzalcatl _Campus Irapuato_

Comit de Titulacin
Anteproyecto de Tesis

Segn las Normas reguladoras vertidas en la Directriz que Contiene los Criterios Metodolgicos de Titulacin por medio de Tesis y Operativos del Comit de Titulacin de agosto de 2002.

Programa o carrera

Jorge Orozco Medina

Licenciatura en Medico Cirujano

Tema tentativo de Tesis

Analisis del compromiso del sistema inmune en pacientes con Diabetes Mellitus tipo 2

Nombre del Alumno (a) (os)

Fecha de recepcin:

Descriptores o palabras clave Describir las alteraciones en la proliferacin de los linfocitos de pacientes con DM2

Asesor (es)

Telfono de contacto

464 122 7531

ESCUELA, FACULTAD O POSTGRADO Universas Quetzalcatl de Irapuato

Localidad

Irapuato, Gto.

Fecha de elaboracin: 02/06/2013

Firma del interesado

Nota:
Vase en pginas siguientes el DESARROLLO DEL ANTEPROYECTO DE TESIS

RESOLUCIN DE ADMISIN DEL ANTEPROYECTO DE TESIS (PARA SER RELLENADO SLO POR EL COMIT DE TITULACIN)
No. de Expediente Asignado
rgano que resuelve:
Comit de Titulacin

Sesin
ordinaria

Sesin extraordinaria

Fecha de la
sesin:

Fecha de archivo del Anteproyecto y de remisin de aviso a la Direccin de Servicios Escolares

Irapuato, Gto., a
Visto Bueno
Director de Escuela o
Facultad

Visto Bueno
Director de Servicios
Escolares

Lic. Juan Cerda Ortiz

UQI12-F

Desarrollo del Anteproyecto de Tesis

Visto Bueno
Secretaria Tcnica del
Comit de Titulacin

Dra. Daniela Beatriz Muoz Lpez

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Segn las Normas reguladoras vertidas en la Directriz que Contiene los Criterios Metodolgicos de Titulacin por medio de Tesis y Operativos del Comit de Titulacin de agosto de 2002.

Nombre del Alumno (a) (os)

Tema tentativo de Tesis
Asesor (es)

Jorge Orozco Medina

Analisis del compromiso del sistema inmune en pacientes con Diabetes Mellitus tipo 2

1. Tabla de contenido tentativa (incluyendo epgrafes)

2. Delimitacin del tema (rea especfica o elementos de estudio, mbito espacial de estudio, problema o estado actual del tema, etc.)
Pacientes con DM2 procedentes de diversos centros de salud de Irapuato,Guanajuato, mayores de 18 aos de edad de cualquier sexo (Femenino o Masculino)

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3. Marco Terico (puede ser referencial, histrico o conceptual;descripcin de las variables de estudio)

La diabetes mellitus es una enfermedad compleja cuya incidencia est aumentando en todo el mundo, siendo una de las primeras causas de morbilidad y
mortalidad en un futuro prximo. El paciente diabtico posee un mayor riesgo a las infecciones bacteriana, virales y fngicas, as como de experimentar de
manera frecuente infecciones ms severas y prolongadas. Varios estudios han demostrado alteraciones en la respuesta inmune de fagocitos y neutrfilos
asociadas al descontrol en los niveles de glucosa. Adems, se ha demostrado que los linfocitos de pacientes diabticos presentan mayor susceptibilidad de
sufrir apoptosis, resultando en un nmero reducido circulante, ello puede explicar la alteracin en la funcin inmunolgica de estos pacientes.
El sistema inmunolgico es un conjunto de clulas, tejidos y molculas que median la resistencia a las infecciones, sustancias exgenas (extraas) y tumores.
Se distinguen dos tipos de respuesta inmunolgica, la innata y la adaptativa, la primera, provee la defensa inicial del organismo humano contra las infecciones
y el control de la respuesta inmune adaptativa asegura que la respuesta sea solo para antgenos dainos.

4. Justificacin (atendiendo a cuestiones acadmicas o metodolgicas, qu aportar la investigacin)

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5. Hiptesis (comprueba o explica el problema)

Existe alteracin en la proliferacin de los linfocitos de pacientes con DM2 que pueda relacionarse con las infecciones oportunistas relaacionada
con estos paacientes?

6. Objetivos (general y particulares)

Analizar, comparar y describir las alteraciones en la proliferacin linfocitaria de pacientes con DM2.

Como interviene el conocimiento de los cambios linfocitarios para el cuidado del paciente con DM2.

7. Material y Mtodo (constituye la descripcin del trabajo, puede incluir: diseo, tipo de estudio, universo de trabajo, muestra y muestreo, criterios de
seleccin, definicin operacional de variables, instrumentos de recoleccin de datos, procedimientos, consideraciones ticas y anlisis estadstico).

Tipo de estudio: transversal comparativo

Universo de pacientes: Procedentes de diversos Centros de Salud Urbanos de Irapuato, Guanajuato.
Soluciones empleadas
FACS Buffer (Fluorescenceactivated cell sorting buffer): Azida de sodio, FBS (Fetal bovine serum), PBS 1X (Phosphate-buffered saline).
Ficoll-Paque PLUS
Indicadores: Azul de Tripano, CFSE (Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester).
Paraformaldehdo
PBS 1X: Cloruro de Sodio (NaCl), Cloruro de Potasio (KCl), Fosfato de Sodio (NaHPO4), Fosfato monopotsico (KH2PO4).
RPMI 1640 Medio completo: RPMI 1640, FBS, L-Glutamina, MEM Piruvato (minimun escential mdium), MEM Aminocidos no esenciales, MEM
Aminocidos esenciales, Mercaptoetanol, PS (Penicillium streptomycin) Carbonato de Sodio (NaCO3).
RPMI Medio completo enriquecido con concanavalina (conA).
Aislamiento de linfocitos in vitro por el mtodo de ficoll-paque plus
Todo el mtodo es efectuado dentro de una campana de flujo laminar para garantizar esterilidad. A partir de la muestra de sangre total obtenida de
cada paciente y depositada en un tubo de 50 ml, se agrega el mismo volumen de solucin salina balanceada (PBS) y se homogeniza. Esta nueva
solucin es depositada posteriormente a otro tubo de 50 ml que contiene 10 ml de Ficoll Paque PLUS cuidando de no mezclar ambos compuestos
vertiendo la muestra de sangre por las paredes del tubo. Este ltimo se centrifuga a 1500 revoluciones por minuto (rpm) a 25C durante media
hora sin freno (ver figura 1).
A continuacin se remueve la mayor cantidad posible del plasma para facilitar la extraccin del anillo blanco de clulas mononucleares o linfocitos
con pipeta Pasteur estril, el cual es depositado en un tubo de 15 ml y se afora a 15 ml con PBS, se homogeniza por inversin y se centrifuga a
1500 rpm a 25C durante 10 minutos (las centrifugaciones de aqu en delante son con freno). Se decanta el sobrenadante y se resuspende la
pastilla celular o pellet para aforar nuevamente con PBS a 15 ml y repetir centrifugacin. El sobrenadante resultante se decanta y la pastilla
celular se resuspende en 3 ml de PBS, del cual se toma una alcuota de 10 L que es teida con 90 L de azul de Tripano para conteo de clulas
en hematocitmetro por capilaridad en5/5
cmara de Neubauer. Posteriormente se toma el resto de la muestra para tincin con CFSE.
8. Recursos humanos, materiales y financieros

9. Cronograma de actividades (Muestra el tiempo programado para terminar una tarea)

10. Bibliografa relevante (cuando menos cinco fuentes)

Dworacka, M., H. Winiarska, M. Borowska, M. Abramczyk, T. BobkiewiczKozlowska, and G. Dworacki. 2007. Pro-atherogenic alterations in Tlymphocyte
subpopulations related to acute hyperglycaemia in type 2 diabetic patients. Circ J., 71:962967.
King, G. L. 2008. The role of inflammatory cytokines in diabetes and its complications. J. Periodontol, 79:1527-1534.
McDevitt, H. O. 2005. Characteristics of autoimmunity in type 1 diabetes and type 1.5 overlap with type 2 diabetes. Diabetes, 54 Suppl 2:S410. Mosmann,
T.R.,H. Cherwinski, M. W. Bond, M. A. Giedlin, and R. L. Coffman. 1986. Two types of murine helper T cell clone. I. Definition according to profiles of lymphokine
activities and secreted proteins. J. Immunol, 136:2348-2357.
Ryan, A., M. Murphy, C. Godson, and F. B. Hickey. 2009. Diabetes mellitus and apoptosis: inflammatory cells. Apoptosis.

8. Firmas
Nombre y firma
Asesor de Tesis

Nombre y firma
Egresado